Absorbancia

Jimmy Pulecio; Carol Montao

Laboratorio de Ondas y ptica, Departamento de Fsica
Facultad Experimental de Ciencias y Tecnologa. Universidad de Carabobo, Valencia Venezuela
Se realiz una metodologa sencilla para el estudio de la absorcin de la luz por
sustancias diluidas, que permitieron la comprobacin de la ley de Lambert-Beer a
travs del procesamiento de imgenes. Se tomaron fotografas de disoluciones de
colorante comercial de cocina en agua a diferentes concentraciones, de tal manera de
observar una degradacin del color. Las fotografas se analizaron mediante un
programa en MATLAB, para as obtener las intensidades (rojo, verde y azul) de los
pxeles que la conforman, a partir de las cuales se determin la absorbancia
obteniendo como resultado para los colores rojo, verde y azul (AQU VA EL
RESULTADO) , respectivamente.
I.

INTRODUCCIN

En la actualidad, el desarrollo de
tcnicas de procesamiento y anlisis de
imgenes digitales en el estudio del
color
para
ser
utilizado
como
herramienta
de
caracterizacin
espectroscpica de un material, est
siendo motivo de estudio a nivel
cientfico, pues comprende una serie de
tcnicas que involucran a la ciencia
como fuente principal de soluciones.
Anteriormente, el estudio del color de
un material se limitaba a la apariencia
del mismo, y si se deseaba hacer un
estudio ms profundo se deba acudir a
equipos sofisticados para el estudio
espectral de dicha muestra. Es aqu
donde el procesamiento y anlisis de
imgenes digitales nos proporciona una
poderosa herramienta, relativamente
econmica, para el anlisis espectral de
una muestra a travs del cambio de las
intensidades y tonalidades de los
pxeles que conforman la imagen. Esto
ha sido posible gracias a la aparicin de
instrumentos cada vez ms sofisticados
para la captura y procesamiento de
imgenes, entre los que se incluyen
cmaras
fotogrficas
y
la
implementacin
de
programas
informticos especializados.
Una de las propiedades de las
sustancias que se puede estudiar con
estas tcnicas es el fenmeno de
absorcin de la luz por una muestra en
disolucin [4], proceso que depende de la

estructura molecular de la sustancia. Se

puede corroborar la ley de LambertBeer, que es una funcin exponencial
que rige la absorcin de la luz visible o
ultravioleta cuando esta atraviesa una
capa de lquido de un espesor
determinado.
La tcnica de absorbancia es
ampliamente usada para determinar la
concentracin
de
sustancias
en
disolucin.
En esta prctica se presenta una
metodologa experimental sencilla, la
cual permite demostrar la ley de
Lambert-Beer,
a
travs
de
la
degradacin de colores obtenidos
diluyendo un colorante comercial en
agua destilada, haciendo luego el
procesamiento y anlisis de imgenes
digitales con el desarrollo de un
algoritmo computacional.
II.

FUNDAMENTOS TERICOS

Ley
de
Lambert-Beer:
La
fotometra o medida de la luz es un
mtodo ptico de anlisis dentro del
cual se encuentran la colorimetra y la
espectrofotometra, que miden
la
cantidad
de
luz
absorbida
por
sustancias coloreadas o incoloras,
respectivamente. Las medidas de
absorcin de luz se basan en dos leyes,
la ley de Lambert y la ley de Beer [1].

La ley de Lambert se refiere al paso

de un rayo de luz a travs de un medio
absorbente. Establece que la intensidad
disminuye exponencialmente a medida
que la longitud del medio absorbente
aumenta (Figura 1).
(1)

I1 = I0exp (-kl)

donde I1 es la intensidad de luz

transmitida, I0 la intensidad de luz
incidente, k el coeficiente de absorcin
y l corresponde al espesor de la capa
del medio absorbente.
Por otro lado, la ley de Beer se refiere
a la disminucin exponencial de la
intensidad a medida que aumenta la
concentracin
de
la
sustancia
absorbente en el medio (Figura1).
I1 = I0exp (-kc)

(2)

donde c es la concentracin de la
sustancia absorbente.
La combinacin de ambas leyes es
conocida como ley de Lambert-Beer:
I1 = I0 exp (-cl)

(3)

donde = 4k/ es el coeficiente de

absorcin, k es el coeficiente de
extincin y la longitud de onda de la
luz absorbida. El cociente de las
intensidades
se
conoce
como
transmitancia (T) y se suele expresar
como un porcentaje:

(4)
La absorbancia A viene dada por la
expresin:
A = log (I0/I1) = cl

(5)

Tambin llamada densidad ptica (DO).

Limitaciones
de
la
Ley
de
Lambert-Beer: Se
encuentran pocas excepciones a la
generalizacin que la absorbancia est
relacionada linealmente a la longitud
del camino ptico. En cambio, las
desviaciones de la proporcionalidad
directa entre la absorbancia medida y la
concentracin, para l constante, son
ms frecuentes. Estas desviaciones son
fundamentales
y
representan
limitaciones reales de la ley.
Algunas
ocurren
como
una
consecuencia de la manera en que las
mediciones de absorbancia se hacen, o
como un resultado de cambios qumicos
asociados
con
cambios
en
la
concentracin. Otras ocurren a veces
como desviaciones instrumentales.
La ley de Beer describe muy bien el
comportamiento
de
absorcin
de
soluciones diluidas; a concentraciones
altas (generalmente mayores que 0,01
M), la distancia promedio entre las
especies responsables de la absorcin
est disminuida hasta el punto que
cada una afecta la distribucin de
cargas de sus vecinas. Esta interaccin,
a su vez, puede alterar la habilidad de
las otras especies para absorber en una
longitud de onda de radiacin. Debido a
que la extensin de la interaccin
depende de la concentracin, la
ocurrencia de este fenmeno provoca
desviaciones de la relacin lineal entre
absorbancia y concentracin.
Desviaciones de la ley de Beer
tambin
surgen
debido
a
la
dependencia del ndice de refraccin de
la solucin. Al cambiar la concentracin
se altera en el ndice de refraccin de la
solucin, y se observan desviaciones de
la ley.

primario de pigmento lo que vemos es

la combinacin de dos colores
primarios de luz. Colores secundarios
de pigmento: rojo, verde y azul.

Figura 1: Esquema para el estudio

de la absorcin de la luz.
Cromaticidad: La colorimetra [2] es
el rea de la ptica que estudia el color,
el cual puede ser representad por dos
caminos bsicos, dependiendo del
medio en que se produce.

Colores complementarios: Los

colores complementarios son aquellos
que en el diagrama cromtico estn
situados diametralmente opuestos, por
lo que el complementario de un
primario serla un secundario, y
viceversa, el de un secundario serla un
primario. Como se observa en el crculo
cromtico mostrado en la figura 2, el
color complementario del amarillo es el
violeta, y del anaranjado el azul.

Sistemas
aditivos:
Se
logra
aadiendo colores al negro para crear
nuevos colores. Cuantos ms colores
sean mezclados se obtendr un color
ms parecido al blanco. La presencia de
todos los colores primarios es suficiente
para crear un blanco puro, mientras que
la ausencia de los colores primarios
crea un negro puro.
Los colores primarios de luz o colores
primarios aditivos son el rojo, verde y
azul. La suma de los tres colores
primarios da lugar al blanco (la luz
blanca est compuesta por luz roja,
verde y azul a partes iguales). Los
colores
secundarios
de
luz
son
cualquier combinacin de dos colores
primarios: rojo ms azul nos da el
magenta; verde ms azul nos da el
cian; rojo ms verde nos da el amarillo.
Sistemas sustractivos: En stos,
los colores
primarios son sustrados del blanco
para formar nuevos colores. Cuantos
ms colores se mezclen se obtendr
algo
ms
parecido
al
negro.
Tericamente, la presencia de todos los
colores primarios sustractivos nos da
negro y, su total ausencia, blanco. Se
define un color primario de pigmento a
aquel que absorbe un color primario de
luz y refleja los otros dos, por tanto, son
el cian, el magenta y el amarillo.
Cuando la luz incide sobre un color

Figura 2: Crculo cromtico.

Modelos del color: La idea de la
utilizacin de modelos del color surge
para facilitar la especificacin de
objetos en colores de una forma
estndar. Buscamos un sistema de
coordenadas tridimensional (X, Y, Z) en
el cual se defina un subespacio donde
cada color quede definido por un punto
nico.
Modelo CIE XY Z (1931): La
necesidad de que al especificar un color
pudiramos evaluar su luminosidad sin
llevar a cabo clculos extra y el hecho
de que los valores R, G y B (intensidad
de rojo, verde y azul, por sus iniciales
en ingls: red, green, blue) muestren
valores negativos, llev a la CIE
(Comisin Internacional de Iluminacin)
[3]
a realizar una nueva recomendacin
donde se usan colores primarios

genricos supersaturados (irreales), lo

cual evitarla tener valores triestmulo
negativos.
La combinacin de X, Y y Z permite
representar todos los colores posibles.
As C = X + Y + Z, donde X, Y y Z son
las luminancias de las nuevas fuentes
consideradas como primarias. Donde Y
lleva toda la informacin de la
luminancia del color; por otro lado X, Z
codifican la informacin del color. Se
puede llevar a cabo la siguiente
normalizacin:
x = X/(X+Y+Z),
y = Y/(X+Y+Z),

22,22%V/V, 33,33%V/V, 44,44%V/V,

55,55%V/V,
72,72%V/V, 77,77%V/V y
88,88%V/V. Las soluciones fueron
colocadas en cubetas de plstico
tranparente e iluminadas con una
lmpara comercial (9W, 4000K, 480
Lmenes) en una cmara de luz, figura
3. El conjunto de soluciones fue
fotografiado con una cmara digital
Samsung
modelo
WB150F,
en
configuracin automtica. Las figuras 4,
muestran las fotografas de las series
de soluciones con el incremento de la
concentracin de izquierda a derecha,
dichas
imgenes
luego
fueron
analizadas mediante un programa
desarrollado en MATLAB.

(6)
z = Z/(X+Y+Z).
La expresin de la luminancia de un
color ser x+y+z=1. A x, y, z se le
conoce como coordenadas cromticas.
Normalmente, para describir un color
nos darn (x, y) e Y, donde (x; y) es la
cromaticidad.
III.

MATRIALES Y EQUIPOS

Colorantes de cocina color amarillo y

color rojo.
Cubetas de plstico transparentes
Cabina de luz
Cmara fotogrfica

IV.

PARTE EXPERIMENTAL

Para el estudio de la absorbancia

mediante el anlisis de imgenes
digitales, se prepararon soluciones
diluidas de colorante comercial de
cocina color amarillo y rojo en agua
desionizada. Se prepar una solucin de
una gota (0,05mL) de colorante en
40mL de agua, para tenerla como
solucin
patrn
al
100%V/V
de
concentracin. Por diluciones sucesivas
se obtuvieron soluciones al 11,11%V/V,

Figura 3: Arreglo experimental para

el estudio de la absorcin de la luz.

1
2
3
4
5
6
7

Figura 4: Fotografa del conjunto de

soluciones estudiadas.
V.

TABLAS DE DATOS

1
2
3
4
5
6
7
8

Volume
n de
coloran
te (mL)
0,4
0,8
1,2
1,6
2,0
2,4
2,8
3,2

Volume
n de
agua
(mL)
3,2
2,8
2,4
2,0
1,6
1,2
0,8
0,4

Verde

Azul

111,2
56
117,0
27
119,4
10
127,3
12
131,3
10
164,3
91
126,1
19
137,3
72

2,18
2
2,43
9
1,67
7
23,0
9
2,31
0
2,60
6
1,96
0
1,9

117,85
7
122,36
7
122.52
8
128,39
8
129,45
3
149,55
1
119,68
8
130,38
5

2,60
2
2,75
4
1,72
0
2,35
3
2,23
2
2,76
2
1,97
4
1,9

50,1
55
27,0
26
9,35
1
2,33
9
0,00
31
0,04
93
0

2,592
2,424
1,813
1,778
0,0705
0,244
0

M = Media.
D = Desviacin estndar.
Tabla
3:
Media
y desviacin
estndar del color rojo arrojados por el
programa MATLAB

Tabla 1: Concentracin de las

soluciones
N de
Cubetas

Rojo
M

Rojo

Verde

Azul

113,7
01
122,7
16
130,2
75
130,5
00
145,6
82
150,3
53
142,7
98
144,5
65

1,42
2
1,80
3
1,94
6
2,48
8
1,73
3
1,68
8
1,99
5
1,82
7

114,34
1
115,67
7
111,83
2
95,219

1,45
1
1,78
4
1,98
5
2,21
5
2,00
8
1,89
8
1,89
9
1,81
2

120,52
4
122,35
4
117,89
5
97,365

1,807

101,64
5
94,991

1,797

79,070

2,266

73,245

2,220

% V/V
1
2

11,11
22,22
33,33
44,44
55,55
72,72
77,77
88,88

3
4
5
6
7
8

98,474
94,886
81,83
80,164

M = Media.
D = Desviacin estndar.
VI.
Tabla
2:
Media y desviacin
estndar del color amarillo arrojados
por el programa MATLAB

TABLAS DE RESULTADOS

1,973
2,044
2,566

1,981