HEMAGLUTINACIN

Omar Corzo Mendo

Grupo: 2010
Equipo: 5
Dra. Mara Esther Morales Martnez
Universidad Autnoma de Veracruz
Villa Rica
01/10/2012

INTRODUCCIN
Las reacciones de aglutinacin y de precipitacin son la base de la
mayor parte de las tcnicas inmunolgicas. Su principio se basa en
la reaccin antgeno-anticuerpo. Antgeno es una sustancia de alto
peso molecular, con cierta rigidez estructural y que tiene la
particularidad de ser parcialmente metabolizado por clulas
especializadas llamadas macrfagos, por lo tanto es capaz de
generar una respuesta inmune en un organismo que la detecte
como un agente extrao. Mientras que un anticuerpo es una
glicoprotena, producida por linfocitos B activados, llamados
clulas plasmticas, como respuesta a la presencia de un antgeno
en el organismo, Dichos anticuerpos llamados tambin
inmunoglobulinas, se presentan en cinco clases principales, IgG,
IgM, IgA, IgD e IgE, que se diferencian entre s por sus
caractersticas fsicas, qumicas y biolgicas. La capacidad
inmunognica de distintas partculas, es en orden decreciente la
siguiente: protenas, glicoprotenas, polisacridos, lpidos y
azcares. 1
Es necesario conocer y entender bien los principios bsicos de la
inmunologa en lo que respecta a la reaccin antgeno anticuerpo
si se quiere entender la inmunologa de los grupos sanguneos. Por
una parte los grupos sanguneos son antgenos y pueden conducir
a la produccin de anticuerpos especficos si son inoculados en
forma de sangre en una persona distinta. Algunos anticuerpos
existen fisiolgicamente cuando la persona carece del antgeno
correspondiente (Anticuerpos naturales).2
El sistema de grupo sanguneo ABO, descubierto hace mas de 100
aos por Karl Landsteiner, es uno de los sistemas ms importantes
en medicina transfusional. Est compuesto por los antgenos A, los
antgenos B, y los correspondientes anticuerpos contra estos
antgenos. 3
El sistema ABO es de inters en una variedad de campos
cientficos. Adems de los cuatro grupos sanguneos (A, B, AB y O),
se saben que existen subgrupos adicionales que exhiben diferentes
patrones y grados de aglutinacin. Los antgenos A y B fueron
identificados inicialmente sobre la membrana de los eritrocitos y
posteriormente sobre la superficie de otros tipos de clulas, as
como tambin en algunas secreciones. Por lo tanto, el sistema ABO
tambin es llamado el sistema de grupo histo-sanguineo, ms que
un sistema de grupo sanguneo. Debido a que estos antgenos
existen en otras clulas diferentes a los eritrocitos, la
compatibilidad ABO es muy importante no solo en la transfusin de

sangre, sino tambin en el trasplante de clulas, tejidos y

rganos.3

Los antgenos del sistema ABO se detectan sobre los eritrocitos

entre la quinta y la sexta semana del embrin y no se desarrollan
completamente hasta despus del nacimiento. Durante el
crecimiento, se van adicionando los azucares terminales sobre la
cadena de oligosacridos en la membrana de los eritrocitos dando
origen a cada uno de los antgenos de forma especfica. Entre los 2
y 4 aos de edad, los antgenos A y B estn completamente
desarrollados y permanecen constantes durante toda la vida. 3
Hay genes que controlan la expresin de los antgenos ABO. El gen
H, ubicado en el cromosoma 19, codifica para la produccin de una
enzima transferasa (transferasa H), que une una molcula de Lfucosa a la galactosa terminal (Gal) de un precursor comn unido a
los lpidos o protenas de membrana de eritrocito, dando origen al
antgeno H, el cual es el paso anterior a la formacin de los
antgenos de los grupos sanguneos ABO. El gen ABO, ubicado en
el cromosoma 9, posee tres alelos que son el A, el B y el O, que
varan de acuerdo a las sustituciones de nucletidos, las cuales
determinan las especificidades de las enzimas para las cuales
codifican. El alelo A codifica para la enzima transferasa A que
cataliza la adhesin de un residuo de N-acetilgalactosamina
(GalNac) al antgeno H, generndose as el antgeno A. El alelo B
codifica para la enzima transferasa B que cataliza la adhesin de
un residuo de D-galactosa (Gal) al antgeno H, generndose el
antgeno B. El alelo O solo difiere del alelo A en la delecin de un

nucletido (guanina G en la posicin 261), lo que tiene como

consecuencia un cambio en el marco de lectura y la produccin de
una protena sin actividad de transferasa.3

El antgeno Rho (d) fue caracterizado en 1939 por Levine y

Stetson, quienes encontraron el anticuerpo en el suero de una
madre cuyo nio tubo Enfermedad hemoltica del recin nacido.
Recibi su nombre en 1940 cuando Landsteiner y Weiner
inmunizaron conejos con eritrocitos del mono Rhesus y dicho
antisuero aglutinaba los eritrocitos del 85o/o de la poblacin (Rho
positivo). Sin embargo hace algunos aos se observ que en
realidad Landsteiner y Weiner no haban descubierto el anticuerpo
Rh sino otro anticuerpo que fue denominado LW.2
Existen dos teoras sobre el origen gentico de los antgenos del
sistema Rh. La teora de Fisher y Race propone la existencia de 3
genes, aunque muy cerca el uno del otro y localizados en el mismo
cromosoma, son independientes entre s, se llamaron D, C, E. Los
alelos correspondientes se designan c y e. Todos los antgenos
fueron descubiertos a travs del anticuerpo. Anti-d no ha sido
descubierto an pues todava no se ha descubierto el alelo de D,
por cuanto d se usa para denominar ausencia de D. La teora de
Weiner propone que un solo gen (Rl) que da origen a un solo
antgeno (Rhl) y este da origen a 3 factores Rho (D), rh'(C) rh" (E). 2
Las pruebas cruzadas normalmente se llevan a cabo en cuatro
fases: Lectura rpida, lectura de 37, lectura 37/ Coombs,
validacin con eritrocitos sensibilizados. El medio que rodea la
prueba est muy relacionado con los potenciadores y con la fuerza
inica que favorece la reaccin antgeno-anticuerpo, por lo que
debe ser capaz de detectar anticuerpos activos a bajas

temperaturas y diferenciar entre reacciones positivas verdaderas y

falsas.4
Consta de tres partes: 1. Prueba mayor (D), 2. Prueba menor (R), 3.
Prueba autotestigo (AT):
1. Prueba mayor (D) o del DONADOR:
a) Sirve para confirmar si existe compatibilidad ABO entre el
receptor y el donador.
b) Detecta anticuerpos en el suero del paciente que no se hayan
demostrado en la prueba de tamizaje (porque el antgeno
correspondiente no estaba presente en las clulas detectoras o
eritrocitos de fenotipo conocido, PANEL).
Se utilizan 2 gotas de suero del receptor ms 1 gota de eritrocitos
lavados del donador.4
2. Prueba menor (R) o del RECEPTOR:
a) Detecta anticuerpos irregulares en el suero del donador y
ratifica algn error de clasificacin ABO/Rh.
Se realiza con 2 gotas de suero o plasma del donador ms 1 gota
de eritrocitos del receptor.4
3. Prueba autotestigo (AT):
a) Permite detectar una prueba de antiglobulina directa positiva,
as como la presencia de rouleaux y otras anormalidades
autoinmunes (AHAI).
Se realiza con 1 gota de eritrocitos del receptor ms 2 gotas de
suero del receptor.4
Se recomienda el uso racional de la transfusin de sangre porque
existe, por una parte, dficit en el abastecimiento del producto en
los bancos de sangre y, por otra, el riesgo de transmisin de
enfermedades infecciosas. La transfusin no es inocua, ya que
dentro de los efectos adversos de la transfusin sangunea
alognica
se
incluyen:
transmisin
de
enfermedades,
aloinmunizacin, reacciones alrgicas, febriles y hemolticas, as
como efectos de inmunomodulacin. La transfusin alognica y
autloga est asociada con riesgos definidos y potenciales. La
causa ms comn de morbimortalidad en pacientes que reciben
transfusin es la administracin de unidades de sangre
equivocadas. Las reacciones transfusionales no hemolticas
ocurren en aproximadamente entre 1 y 5% de todas las

transfusiones y, por lo general, se manifiestan con escalofros,

fiebre o incremento inexplicado de la temperatura corporal mayor
de 1C dentro de las dos primeras horas despus de la transfusin;
o urticaria, que constituye el efecto adverso ms comn de la
transfusin de paquete eritrocitario. Estos signos no son
detectados durante la anestesia. Las reacciones hemolticas
ocurren despus de la administracin de sangre incompatible que
puede poner en peligro la vida. Debe sospecharse una reaccin
aguda cuando ocurre algo de lo siguiente: fiebre o incremento en
ms de 1C con o sin escalofros, dolor en espalda o pecho,
hipotensin, nusea, rubor, disnea, hemoglobinuria, sangrado
difuso y oliguria o anuria. Este tipo de reaccin debe sospecharse
en todo paciente que experimente descenso en el nivel de
hemoglobina en ausencia de sangrado o condicin clnica conocida
que cause la hemlisis.5
Se ha demostrado que muchos virus, parsitos y bacterias
(intracelulares) son transmitidos mediante sangre o productos
sanguneos. En aos recientes, el riesgo de transmisin de
enfermedades va transfusin alognica de sangre ha declinado
con la implementacin de pruebas para diferentes
microorganismos patgenos, haciendo de la sangre un producto
seguro, especialmente en pases desarrollados. Sin embargo,
existe un riesgo residual para la transmisin de diversos grmenes,
como en el caso del virus de la inmunodeficiencia humana (VIH) y
los de la hepatitis B y C, debido al periodo de ventana
inmunolgica del donador.5

OBJETIVO
Demostrar la reaccin antgeno-anticuerpo de los antgenos de
superficie de los eritrocitos (hemaglutinacin) as como identificar
los antgenos de superficie de sistema ABO y Rh en los eritrocitos

humanos mediante el uso de antisueros para determinar el grupo

sanguneo.
MATERIAL

Portaobjetos.
1 Palillo de madera.
Torundas con alcohol.
1 Jeringa de 5 ml.
Ligadura.
Antisueros (A, B, D).
1 plumn permanente.

METODO
1) Con el plumn permanente dividir el portaobjetos en tres
partes, en las cuales se pondr una letra A en el extremo
izquierdo de la porta objetos, una letra B a la mitad del
portaobjetos, y en el extremo sobrante se pondr Rh.
2) Localizar y ligar aproximadamente a 10 cm por encima de
donde se tomara la muestra.
3) Desinfectar la zona a puncionar con las torundas con alcohol
e introducir la aguja de la jeringa en la vena y extraer de 1-2
ml. se sangre.
4) Rpidamente depositar una gota de sangre en cada una de
las divisiones que se realizo en el portaobjetos.
5) Tomar los antisueros y dejar caer sobre la gota de sangre una
gota de antisuero, dependiendo del lugar donde se encuentre
la gota de sangre en el portaobjetos ser el tipo de antisuero
que se depositara. En la zona donde se encuentra la letra A
dejar caer una gota de antisuero A, en la zona B dejar
caer una gota de antisuero B y en la zona de Rh dejar
caer una gota de antisuero D.
6) Con el palillo de madera revolver el antisuero con la sangre,
por cada mezcla de sangre-antisuero que se realice la parte
del palillo que tiene contacto con una mezcla no se debe
revolver con la siguiente mezcla, para ello cada vez que se
termine de revolver la mezcla de sangre-antisuero el palillo
deber ser quebrado a unos 5 cm.
7) Ya que se termino de revolver la mezcla de sangre-antisuero,
realizar una ltima mezcla pero ahora se realizara por
rotacin esto es mover el portaobjetos de arriba abajo, tener

mucho cuidado en que la mezcla no se vaya a salir del

portaobjeto.
8) Observar los diferentes conglomerados para poder as
determinar el grupo sanguneo y el factor Rh.
RESULTADOS
Se logro saber el tipo de grupo sangunea y el factor Rh al cual
perteneca nuestra compaera, su grupo sanguneo era B y su
factor Rh (-), se pudo saber que perteneca a ese grupo ya que la
gota de sangre mezclada con el antisuero realiz hemaglutinacin
en la zona marcada con la letra B y la zona marcada Rh no
realizo hemaglutinacin por lo cual supimos que era Rh (-) y que
para que exprese el Rh debe de ser inmunizada ya sea con una
transfusin sangunea o por embarazo.
DISCUSIN
Durante el experimento pudimos observar los diferentes tipos de
grupos a los que pertenecen nuestros dems compaeros. Las
diferencias entre la sangre de una persona y la de otra estn
determinadas genticamente en cuanto se refiere a su
individualidad de grupos sanguneos, por ejemplo un paciente
Rh negativo debe ser transfundido con sangre Rh negativo. Si se
usa sangre Rh positivo se inmunizar al paciente en un elevado
porcentaje de casos. nicamente que sea una condicin de suma
emergencia se debe tomar este riesgo asegurndose que el
paciente no ha sido previamente inmunizado (transfundido). Los
pacientes Rh positivo, pueden ser transfundidos indiferentemente
con sangre Rh positivo o Rh negativo. Esto nos muestra el amplio
panorama de antgenos y anticuerpos que puede tener un
individuo y nos hace hincapi que se debe tener cuidado al realizar
transfusiones sanguneas
CONCLUSION
El sistema ABO fue el primer grupo sanguneo descubierto.
Landsteiner en 1900 descubri que los glbulos rojos pueden
clasificarse en A, B y O, de acuerdo a la presencia o ausencia de
antgenos reactivos en la superficie de los glbulos rojos. Dichos
antgenos son de mucha importancia en transfusin sangunea,
trasplante de tejidos y enfermedad hemoltica del recin nacido. La

compatibilidad de grupo ABO es esencial en toda prueba serolgica

pretransfusional.

BIBLIOGRAFIA
1 Aguilar Garca V, Reacciones de Aglutinacin. Gac. Md. Mex.
2004; 140(3): 50-52.
2 Grispan S, Grupo sanguneo ABO y Rh Rev. Mdica Hondur 1983;
1983: 103-114.
3 Arbelez Garca CA, Sistema de Grupo Sanguneo ABO. Medicina
y Laboratorio 2009: 15(3): 329-347.
4 Bonilla Zavala R, Importancia de las Pruebas Cruzadas y de la
Bsqueda de Anticuerpos. Rev. Md Inst. Mex Seguro Soc. 2006;
44(2): 43-46.