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UNIVERSIDAD TECNOLOGICA METROPOLITANA

FACULTAD DE CIENCIAN NATURALES, MATEMATICAS Y MEDIO


AMBIENTE
DEPARTAMENTO DE QUIMICA

ANLISIS CROMATOGRFICOS
CROMATOGRAFIA GASEOSA (CG)

CARRERA: QUIMICOS LABORATORISTAS

PROFESORES: GUADALUPE PIZARRO


OSCAR MARAMBIO P.

2011

Cromatografa de gases (CG)


La cromatografa de gases es una tcnica cromatogrfica en la que la muestra se volatiliza
y se inyecta en la cabeza de una columna cromatogrfica. La elusin se produce por el flujo
de una fase mvil de gas inerte. A diferencia de los otros tipos de cromatografa, la fase
mvil no interacciona con las molculas del analito; su nica funcin es la de transportar el
analito a travs de la columna.
Existen dos tipos de cromatografa de gases (GC): la cromatografa gas-slido (GSC) y la
cromatografa gas-lquido (GLC), siendo esta ltima la que se utiliza ms ampliamente, y
que se puede llamar simplemente cromatografa de gases (GC). En la GSC la fase
estacionaria es slida y la retencin de los analitos en ella se produce mediante el proceso
de adsorcin. Precisamente este proceso de adsorcin, que no es lineal, es el que ha
provocado que este tipo de cromatografa tenga aplicacin limitada, ya que la retencin del
analito sobre la superficie es semipermanente y se obtienen picos de elusin con colas. Su
nica aplicacin es la separacin de especies gaseosas de bajo peso molecular. La GLC
utiliza como fase estacionaria molculas de lquido inmovilizadas sobre la superficie de un
slido inerte.

Instrumentacin

Gas Portador

Sistema de Inyeccin de muestras

Columnas y sistemas de control de temperaturas

Detectores

Columnas y Tipos de Fases estacionarias

Aplicaciones

Referencias

Gas aportador
El gas portador debe ser un gas inerte, para prevenir su reaccin con el analito o la
columna. Generalmente se emplean gases como el helio, argn, nitrgeno, hidrgeno o
dixido de carbono, y la eleccin de este gas en ocasiones depende del tipo de detector
empleado. El almacenaje del gas puede ser en balas normales o empleando un generador,
especialmente en el caso del nitrgeno y del hidrgeno. Luego tenemos un sistema de
manmetros y reguladores de flujo para garantizar un flujo estable y un sistema de
deshidratacin del gas, como puede ser un tamiz molecular.
Generalmente la regulacin de la presin se hace a dos niveles: un primer manmetro se
sita a la salida de la bala o generador del gas y el otro a la entrada del cromatgrafo, donde
se regula el flujo. Las presiones de entrada varan entre 10 y 25 psi, lo que da lugar a
caudales de 25 a 150 mL/min en columnas de relleno y de 1 a 25 mL/min en columnas
capilares. Para comprobar el caudal se puede utilizar un rotmetro o un simple medidor de
pompas de jabn, el cual da una medida muy exacta del caudal volumtrico que entra a la
columna.

Sistema de Inyeccin de muestras


La inyeccin de muestra es un apartado crtico, ya que se debe inyectar una cantidad
adecuada, y debe introducirse de tal forma (como un "tapn de vapor") que sea rpida para
evitar el ensanchamiento de las bandas de salida; este efecto se da con cantidades elevadas
de analito.
El mtodo ms utilizado emplea una microjeringa (de capacidades de varios microlitros)
para introducir el analito en una cmara de vaporizacin instantnea. Esta cmara est a
50C por encima del punto de ebullicin del componente menos voltil, y est sellada por
una junta de goma de silicona septa o septum.

Si es necesaria una reproducibilidad del tamao de muestra inyectado se puede usar una
vlvula de seis vas o vlvula de inyeccin, donde la cantidad a inyectar es constante y
determinada por el tamao del bucle de dicha vlvula.
Si la columna empleada es ordinaria, el volumen a inyectar ser de unos 20 L, y en el caso
de las columnas capilares dicha cantidad es menor, de 10-3 L. Para obtener estas
cantidades, se utiliza un divisor de flujo a la entrada de la columna que desecha parte del
analito introducido.
En caso de muestras slidas, simplemente se introducen en forma de disolucin, ya que en
la cmara de vaporizacin instantnea el disolvente se pierde en la corriente de purga y no
interfiere en la elucin.
Segn las curvas de Van Demter (HEPT vs. Velocidad Lineal), el mejor gas a usar en la
columna cromatogrfica como portador de los analitos es el hidrgeno, sin embargo dada
su peligrosidad, es ms usado como gas de encendido en el detector FID, junto con el aire.

Columnas y sistemas de control de temperatura

En GC se emplean dos tipos de columnas: las empaquetadas o de relleno y las tubulares


abiertas o capilares. Estas ltimas son ms comunes en la actualidad (2005) debido a su
mayor rapidez y eficiencia. La longitud de estas columnas es variable, de 2 a 50 metros, y
estn construidas en acero inoxidable, vidrio, slice fundida o tefln. Debido a su longitud y
a la necesidad de ser introducidas en un horno, las columnas suelen enrollarse en una forma
helicolidal con dimetros de 10 a 30 cm, dependiendo del tamao del horno.
La temperatura es una variable importante, ya que de ella va a depender el grado de
separacin de los diferentes analitos. Para ello, debe ajustarse con una precisin de dcimas
de grado. Dicha temperatura depende del punto de ebullicin del analito o analitos, y por lo
general se ajusta a un valor igual o ligeramente superior a l. Para estos valores, el tiempo
de elusin va a oscilar entre 2 y 30-40 minutos. Si tenemos varios componentes con
diferentes puntos de ebullicin, se ajusta la llamada rampa de temperatura con lo cual
sta va aumentando ya sea de forma continua o por etapas. En muchas ocasiones, el ajustar
correctamente la rampa puede significar separar bien o no los diferentes analitos. Es
recomendable utilizar temperaturas bajas para la elusin, pero conforme la temperatura es
mayor la elusin es ms rpida, pero corriendo el riesgo de descomponer el analito.

Detectores
El detector es la parte del cromatgrafo que se encarga de determinar cundo ha salido el
analito por el final de la columna. Las caractersticas de un detector ideal son:

Sensibilidad: Es necesario que pueda determinar con precisin cundo sale analito
y cuando sale slo el gas portador. Tienen sensibilidades entre 10-8 y 10-15 g/s de
analito.

Respuesta lineal al analito con un rango de varios rdenes de magnitud.

Tiempo de respuesta corto, independiente del caudal de salida.

Intervalo de temperatura de trabajo amplio, por ejemplo desde temperatura


ambiente hasta unos 350-400C, temperaturas tpicas trabajo.

No debe destruir la muestra.

Estabilidad y reproducibilidad, es decir, a cantidades iguales de analito debe dar


salidas de seal iguales.

Alta fiabilidad y manejo sencillo, o a prueba de operadores inexpertos.

Respuesta semejante para todos los analitos, o

Respuesta selectiva y altamente predecible para un reducido nmero de analitos.

Algunos tipos de detectores:

Detector de ionizacin de llama (FID, Flame Ionization Detector).

Detector de conductividad trmica (TCD, Thermical Conductivity Detector).

Detector termoinico (TID, ThermoIonic Detector).

Detector de captura de electrones (ECD, Electron-Capture Detector).

Detector de emisin atmica (AED, Atomic Emission Detector).

Otros detectores minoritarios son el detector fotomtrico de llama (PFD), empleado en


compuestos como pesticidas e hidrocarburos que contengan fsforo o azufre. En este
detector se hace pasar el gas eluido por una llama hidrgeno/oxgeno donde parte del
fsforo se convierte en una especie HPO, la cual emite a = 510 y 526 nm, y
simultneamente el azufre se convierte en S2, con emisin a = 394 nm. Dicha radiacin
emitida se detecta con un fotmetro adecuado. Se han podido detectar otros elementos,
como algunos halgenos, nitrgeno, estao, germanio y otros.
En el detector de fotoionizacin (PID), el gas eluido al final de la columna se somete a una
radiacin ultravioleta con energas entre 8,3 y 11,7 eV, correspondiente a una = 106-149
nm. Mediante la aplicacin de un potencial a la celda de ionizacin se genera una corriente
de iones, la cual es amplificada y registrada.

Detector de ionizacin de llama


El detector de ionizacin de llama es un detector utilizado en cromatografa de gases. Es
uno de los detectores ms usados y verstiles. Bsicamente es un quemador de
hidrgeno/oxgeno, donde se mezcla el efluente de la columna (gas portador y analito) con
hidrgeno. Inmediatamente, este gas mezclado se enciende mediante una chispa elctrica,
producindose una llama de alta temperatura. La mayora de compuestos orgnicos al
someterse a altas temperaturas pirolizan y se producen iones y electrones, que son
conductores elctricos. Este hecho se aprovecha estableciendo una diferencia de potencial
de unos centenares de voltios entre la parte inferior del quemador y un electrodo colector
situado por encima de la llama. La corriente generada es baja (del orden de los 10-12 A), por
lo tanto debe ser amplificada mediante un amplificador de alta impedancia.
El proceso de ionizacin que se da en la llama es complejo, pero se puede aproximar el
nmero de iones producidos al nmero de tomos de carbono transformados en la llama.
Esto produce que sea un detector sensible a la masa (al nmero de tomos de carbono que
salen de la columna) ms que a la concentracin, por lo tanto no le afectan demasiado los
cambios en el flujo de salida.
Existen algunos grupos funcionales que no dan respuesta en este detector, como el
carbonilo, alcohol, halgeno o amina, y tampoco responden gases no inflamables como el
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CO2, SO2, agua y xidos de nitrgeno. Este hecho, ms que limitar el mbito de aplicacin
de este detector, permite el anlisis de muestras contaminadas con alguno de los
compuestos mencionados.
Ventajas:

Alta sensibilidad, del orden de 10-13 g/s.

Amplio intervalo lineal de respuesta, 107 unidades.

Bajo ruido de fondo (elevada relacin seal/ruido).

Bajo mantenimiento, fcil de fabricar.

Desventajas:

Destruye la muestra (la piroliza).

Detector de Conductividad Trmica (TCD)


El detector de conductividad trmica se utiliza en cromatografa de gases y es uno de los
primeros utilizados. Tiene una amplia aplicacin y su uso se basa en la diferencia de
conductividad trmica del gas portador cuando circula tambin analito. Este tipo de
detector se denomina tambin catarmetro. El sensor de un catarmetro consiste en un
elemento calentado elctricamente (resistencia), Figura a). Esta resistencia, para una
potencia elctrica constante, tiene una temperatura que depende del gas circundante. La
resistencia puede ser un hilo fino de platino, oro o tungsteno, o un termistor semiconductor.
La diferencia bsica entre los detectores de metal y el termistor semiconductor es que el
segundo tiene un coeficiente de temperatura negativo, en otras palabras, que su resistencia
disminuye conforme la temperatura aumenta.

Funcionamiento
Se emplean dos pares de elementos o sensores, uno de ellos en el flujo de efluente de la
columna y el otro en la corriente de gas previa a la cmara de inyeccin de la muestra (gas
limpio). En el esquema elctrico Figura b) se muestran como muestra y referencia,
respectivamente. Mediante este montaje elctrico, se consigue compensar el efecto de los
cambios de presin, caudal y potencia elctrica, midindose nicamente los cambios en la
conductividad del gas.
En la actualidad se utilizan tambin los sensores de filamento nico, los cuales carecen de
deriva en la lnea base, se equilibran rpidamente y son muy sensibles. El funcionamiento
de este sensor consiste en una cmara de 5 l que contiene un pequeo filamento. Sobre l
se hacen pasar alternativamente el gas de referencia y el de salida de la columna, con una
frecuencia de 10 Hz, obtenindose una seal elctrica de 10 Hz cuya amplitud depende de
la diferencia entre la conductividad trmica del gas de referencia y del gas de salida. Otra
ventaja de usar una seal de 10 Hz es que de esta forma se elimina el ruido trmico del
sistema.
Los gases empleados como portadores permiten distinguir con facilidad cundo el gas lleva
analito, debido a que las conductividades del hidrgeno y helio son de 6 a 10 veces

mayores que la mayora de compuestos orgnicos. Este efecto no se da en otros gases


portadores como el nitrgeno, por lo cual el uso de este detector est limitado a la
utilizacin de hidrgeno o helio como gas portador.
Ventajas de este detector:

Simplicidad.

Amplio rango dinmico lineal, 105 unidades.

Respuesta universal a compuestos orgnicos e inorgnicos.

Detector no destructivo.

Desventajas:

Sensibilidad relativamente baja, 10-8 g de soluto/ml de gas portador.

Imposibilidad de utilizarlo en columnas capilares (caudal de salida pequeo).

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Figura: Esquema de a) celda de un detector de conductividad trmica y b) configuracin de


las dos celdas de muestra y referencia de un detector (Ref. Skoog )

Detector de captura de electrones


El detector de captura de electrones es un tipo de detector utilizado en cromatografa de
gases. Fue inventado por James Lovelock. Su funcionamiento bsico se basa en la emisin
de una partcula (electrn) por parte de tomos como el 63Ni o tritio adsorbido sobre una
placa de platino o titanio.
Tpicamente, un ECD (electron capture detector) contiene unos 5 milicurios de emisor .
Dicho electrn ioniza el gas portador y se produce una rfaga de electrones. Si se aplica un
campo elctrico constante, mediante un par de electrodos, por ejemplo, se tendr una
corriente constante entre ambos, del orden de un nanoamperio. Sin embargo, si se tienen
especies orgnicas en el gas, stas capturarn parte de los electrones, disminuyendo por
tanto la intensidad de la corriente. Normalmente es necesario aplicar el potencial en forma
de impulsos para lograr una respuesta lineal del detector.
Este detector es muy selectivo, y es sensible a la presencia de molculas con grupos
electronegativos como halgenos, perxidos, quinonas y grupos nitro, grupos que contienen
tomos de halgeno (cloro, bromo, yodo), oxgeno y nitrgeno. Otros grupos como el
alcohol, amina e hidrocarburos no dan seal.
Se aplica en la deteccin de molculas que contienen halgenos, principalmente cloro,
como algunos insecticidas o bifenilos policlorados.
Ventajas:
Simple y robusto.
Bajo mantenimiento.
No destructivo.
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Muy sensible, del orden de 10

g/ml de gas portador.


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Desventajas:
Bajo rango dinmico lineal, 10 unidades.
Precauciones de uso debido a la presencia de material

radiactivo (63Ni o tritio). Dicho material se encuentra


en un cilindro sellado de acero y debe ser revisado
peridicamente.

El curio (Unidad)
El curio (abreviacin Ci) es una antigua unidad de radiactividad, igual a 3,71010
becquereles (desintegraciones nucleares por segundo), que es ms o menos la actividad de
1g de

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Ra.

Fue nombrado en honor de Pierre y Marie Curie.


Ha sido reemplazado por una unidad derivada del SI, el becquerel (Bq): 1 Bq = 2,710-11
Ci)(Aunque el curio sigue emplendose, especialmente en EEUU)

Figura: Diagrama esquemtico de un detector de captura electrnica (ref. Skoog)

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Detector de emisin atmica


Un detector de emisin atmica (AED) se utiliza en cromatografa de gases. Es uno de los
tipos de detectores ms recientes, y como su nombre indica se basa en la emisin atmica.
El primer AED para la cromatografa de gases fue introducido en 1989 por HewlettPackard (luego Agilent Technologies) y en 2002 Agilent Technologies a travs de una
licencia exclusiva traspas esta tecnologa a la empresa Joint Analytical Systems GmbH en
Moers (Alemania) que de all en adelante produce y desarrolla el AED en Alemania.
En este dispositivo el gas de salida de la columna se introduce en un plasma de He
mantenido por induccin de microondas, el cual se acopla a un espectrmetro de emisin
de series de diodos. La alta temperatura alcanzada en el interior del plasma (varios miles de
grados) es suficiente para ionizar totalmente todos los tomos de la muestra, y obtener de
esta forma sus espectros de emisin. La radiacin emitida se colima y se refleja en una red
de difraccin, descomponindose en sus longitudes de onda individuales, y se recoge en
una fila de diodos, capaz de detectar en el rango de 170 a 837 nm. En los equipos actuales
(2005), dicho espectrofotmetro permite detectar ms que 26 elementos, indicados en el
diagrama.

Definiciones:
Plasma (estado de la materia)
En fsica y qumica, un plasma es un sistema que contiene un nmero significativo de
partculas cargadas (iones) libres y cuya dinmica presenta efectos colectivos dominados
por las interacciones electromagnticas de largo alcance entre las mismas. Con frecuencia
se habla del plasma como un estado de agregacin de la materia con caractersticas propias,
diferencindolo de este modo del estado gaseoso, en el que no existen efectos colectivos
importantes.
Microondas:
Con el trmino microondas se identifica a las ondas electromagnticas en el espectro de
frecuencias comprendido entre 300 MHz y 300 GHz.

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Colimador:
Un colimador es un sistema que a partir de un haz (de luz, de electrones,...) divergente
obtiene un "haz" paralelo. Sirve para homogeneizar las trayectorias o rayos que emitidos
por una fuente salen en todas direcciones y obtiene un chorro de partculas o conjunto de
rayos con las mismas propiedades. Los colimadores pticos suelen estar formados
fundamentalmente por un espejo parablico, unas lentes y algunos diafragmas. En el caso
de los colimadores para chorros de partculas elementales cargadas se emplean campos
elctricos y magnticos y diafragmas. Para el caso de partculas neutras se emplean
diafragmas para impedir el paso de partculas que se separan de la direccin elegida y
algunos filtros absorbentes para eliminar ciertos rangos de energa.

Figura : Detector de emisin atmica (ref. Skoog)

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Detector termoinico
El detector termoinico (TID, de thermoionic detector) es un detector usado en
cromatografa de gases. Es selectivo para compuestos orgnicos fosforados y nitrogenados,
aunque su respuesta no es igual para ambos elementos, siendo para el fsforo 10 veces
mayor que para el nitrgeno. Es unas 500 veces ms sensible que el detector de ionizacin
de llama para compuestos fosforados y unas 50 veces ms sensible para compuestos
nitrogenados (tpicamente aminas, nitratos y otras especies). Debido a esta sensibilidad
obtenida con compuestos fosforados, su uso es amplio en la determinacin de pesticidas
fosforados.
Este detector tiene un principio de funcionamiento parecido al detector de ionizacin de
llama: el gas de salida de la columna se mezcla con hidrgeno y se quema. Este gas pasa
alrededor de una esfera de rubidio calentada elctricamente hasta unos 600-800C, y
mantenida a un potencial de 180 V respecto al colector, alrededor de la cual se forma un
plasma. Mediante un mecanismo no muy bien establecido, se forma una gran cantidad de
iones a partir de las molculas fosforadas y nitrogenadas, y al tener un medio conductor
dicha diferencia de potencial permite la aparicin de una pequea corriente elctrica
amplificable y medible. Por lo general, la intensidad de la corriente ser proporcional al
nmero de iones formados, y por tanto a la cantidad de analito.

Columnas y tipos de fases estacionarias


Columnas de relleno
Las columnas de relleno o empacadas consisten en unos tubos de vidrio, metal (inerte de
ser posible como el acero inoxidable, Niquel, Cobre o Aluminio) o tefln, de longitud de 2
a 3 metros y un dimetro interno de unos pocos milmetros, tpicamente de 2 a 4. El interior
se rellena con un material slido, finamente dividido para tener una mxima superficie de
interaccin y recubierto con una capa de espesores entre 50 nm y 1 m. Para que puedan
introducirse en el horno, se enrollan convenientemente.

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El material de relleno ideal consiste en pequeas partculas, esfricas y uniformes, con una
buena resistencia mecnica, para tener una mxima superficie donde interaccionar la fase
estacionaria y el analito. La superficie especfica mnima ha de ser de 1 m/g. Como todos
los componentes de columnas para GC, debe ser inerte a altas temperaturas (~400C) y
humectarse uniformemente con la fase lquida estacionaria durante el proceso de
fabricacin. El material preferido actualmente (2005) es la tierra de diatomeas natural,
debido a su tamao de poro natural. Estas especies, ya extinguidas, utilizaban un sistema de
difusin molecular para tomar nutrientes del medio y expulsar sus residuos. Por tanto,
debido a que el sistema de adsorcin superficial del analito y la fase estacionaria es
parecido, son materiales especialmente tiles.
El tamao es crtico a la hora de darse el proceso de interaccin del analito, y a menores
tamaos la eficacia de la columna es mejor. Pero existe el problema de la presin necesaria
para hacer circular un caudal estable de gas portador por la columna, ya que dicha presin
es inversamente proporcional al cuadrado del dimetro de dichas partculas. As, el tamao
mnimo para usar presiones mximas de 50 psi es de 250 a 149 m.

Columnas capilares
Las columnas capilares son de dos tipos bsicos: las de pared recubierta (WCOT) y las de
soporte recubierto (SCOT). Las WCOT son simplemente tubos capilares donde la pared
interna se ha recubierto con una finsima capa de fase estacionaria. Las columnas SCOT
tienen en su parte interna una fina capa de material adsorbente como el empleado en las
columnas de relleno (tierra de diatomeas) donde se ha adherido la fase estacionaria. Las
ventajas de las SCOT frente a las WCOT es la mayor capacidad de carga de esta ltima, ya
que en su fabricacin se emplean mayores cantidades de fase estacionaria, al ser la
superficie de intercambio mayor. Por orden de eficacia, en primer lugar estn las WCOT,
luego las SCOT y por ltimo las columnas de relleno.
Las columnas WCOT se fabrican a partir de slice fundida, conocidas como columnas
tubulares abiertas de slice fundida o FSOT. Estas columnas se fabrican a partir de slice
especialmente pura, sin apenas contenido de xidos metlicos. Debido a la fragilidad
inherente a este material, en el mismo proceso de obtencin del tubo se recubre con una

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capa de poliimida, de esta forma la columna puede enrollarse con un dimetro de unos
pocos centmetros. Estas columnas, con propiedades como baja reactividad, resistencia
fsica y flexibilidad, han sustituido a las WCOT clsicas.
Las columnas FSOT tienen dimetros internos variables, entre 250 y 320 m (para
columnas normales) y 150-200 m para columnas de alta resolucin. Estas ltimas
requieren menor cantidad de analito y un detector ms sensible, al eluir menor cantidad de
gas. Existen asimismo columnas macrocapilares con dimetros de hasta 530 m, que
admiten cantidades de analito comparables a las de relleno pero con mejores prestaciones.
En estas columnas existe un problema debido a la adsorcin del analito sobre la superficie
de la slice fundida, adsorcin debida a la presencia de grupos silanol (Si-OH), los cuales
interaccionan fuertemente con molculas polares orgnicas. Este inconveniente se suele
solventar inactivando la superficie por sililacin con dimetilclorosilano (DMCS). La
adsorcin debida a los xidos metlicos se ve paliada en gran parte por la elevada pureza de
la slice empleada.

La fase estacionaria

Las propiedades necesarias para una fase estacionaria lquida inmovilizada son:
1. Caractersticas de reparto (factor de capacidad ' y factor de selectividad )
adecuados al analito.
2. Baja volatilidad, el punto de ebullicin de la fase estacionaria debe ser al menos
100C mayor que la mxima temperatura alcanzada en el horno.
3. Baja reactividad.
4. Estabilidad trmica, para evitar su descomposicin durante la elucin.
Existen como mucho una docena de disolventes con estas caractersticas. Para elegir uno,
debe tenerse en cuenta la polaridad del analito, ya que a mayor polaridad del analito, mayor
polaridad deber tener la fase estacionaria. Algunas fases estacionarias utilizadas
actualmente (2005) son:

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Polidimetilsiloxano, fase no polar de uso general para hidrocarburos, aromticos,


polinucleares, drogas, esteroides y PCBs.

Poli(fenilmetildifenil)siloxano (10% fenilo), para steres metlicos de cidos


grasos, alcaloides, drogas y compuestos halogenados.

Poli(fenilmetil)siloxano (50% fenilo), para drogas, esteroides, pesticidas y glicoles.

Poli(trifluoropropildimetil)siloxano, para aromticos clorados, nitroaromticos,


bencenos alquilsustituidos.

Polietilenglicol,sirve para compuestos polares, tambin para compuestos como


glicoles, alcoholes, teres, aceites esenciales.

Poli(dicianoalildimetil)siloxano, para cidos grasos poliinsaturados, cidos libres y


alcoholes.

Generalmente, en columnas comerciales, la fase estacionaria se presenta enlazada y


entrecruzada para impedir su prdida durante las operaciones de elucin o lavado. De esta
forma se obtiene una monocapa adherida qumicamente a la superficie de la columna. La
reaccin implicada suele ser la adicin de un perxido al lquido a fijar, inicindose una
reaccin por radicales libres que tiene como resultado la formacin de un enlace carbonocarbono que adems incrementa su estabilidad trmica. Otra forma es la irradiacin con
rayos gamma.
Otro tipo de fase estacionaria son las quirales, lo cual permite resolver mezclas
enantiomricas. Este tipo de fases suelen ser aminocidos quirales o algn derivado
adaptado al trabajo en columna.
El grosor de la pelcula vara entre 0,1 y 5 m; el grosor depende de la volatilidad del
analito. As, un analito muy voltil requerir una capa gruesa para aumentar el tiempo de
interaccin y separar ms efectivamente los diferentes componentes de la mezcla. Para
columnas tpicas (dimetros internos de 0,25 o 0,32 mm) se emplean grosores de 0,25 m,
y en las columnas macrocapilares el grosor sube hasta 1 m. El grosor mximo suele ser de
8 m

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Aplicaciones
La GC tiene dos importantes campos de aplicacin. Por una parte su capacidad para separar
mezclas orgnicas complejas, compuestos organometlicos y sistemas bioqumicos. Su otra
aplicacin es como mtodo para determinar cuantitativa y cualitativamente los
componentes de la muestra. Para el anlisis cualitativo se suele emplear el tiempo de
retencin, que es nico para cada compuesto dadas unas determinadas condiciones (mismo
gas portador, rampa de temperatura y flujo), o el volumen de retencin. En aplicaciones
cuantitativas, integrando las reas de cada compuesto o midiendo su altura, con los
calibrados adecuados, se obtiene la concentracin o cantidad presente de cada analito

Cromatografa de fluidos supercrticos


La cromatografa de fluidos supercrticos (SFC) es una tcnica hbrida entre la
cromatografa de gases (GC) y la HPLC, que combina lo mejor de ambas tcnicas. Esta
tcnica es importante porque permite la separacin de mezclas en las que no es adecuada la
aplicacin de la GC ni de la HPLC. En concreto, se aplica a compuestos no voltiles o
trmicamente inestables que no pueden ser separados mediante GC, o aquellos que
contienen grupos funcionales que imposibilitan su deteccin en HPLC.

Instrumentacin
Debido a las caractersticas de la fase mvil (alta presin y temperatura) se emplean
equipos parecidos a los de HPLC, con varias diferencias:

El empleo de un horno termosttico para poder controlar con precisin la


temperatura de la fase mvil.

El uso de un restrictor, empleado para poder mantener por una parte la presin en el
interior de la columna y por otra parte permitir la bajada de la presin a la salida
para que el fluido supercrtico (SF en adelante) pase al estado gaseoso y pueda ser
detectado adecuadamente el analito disuelto.

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Bsicamente, un restrictor es un tubo capilar de unos 2 a 10 cm de longitud y un dimetro


interno menor al de la columna (tpicamente 1/10 del dimetro), donde a la salida el SF
expande y pasa al estado gaseoso y se puede mantener simultneamente la presin en el
interior de la columna.
A diferencia de la cromatografa de gases, en la SFC no se aumenta la velocidad de elusin
modificando la temperatura, sino la presin del SF. El aumento de presin, al aumentar la
densidad, permite una mayor interaccin analito-fase mvil y disminuye los tiempos de
elusin. Se suele emplear en las elusiones una primera etapa isobrica para luego aumentar
la presin lineal o asintticamente hasta el final de la elusin.

Fases estacionarias
Se pueden emplear, al igual que en la GC, las columnas capilares o de relleno, prefirindose
las primeras. Las dimensiones son parecidas en longitud, de 10 a 20 m, y el dimetro
interno es bastante menor, de 0,05 a 0,10 mm. La pelcula interna es de siloxano
entrelazado y polimerizado. Si se emplean columnas de relleno, su dimetro interno vara
entre 0,5 y 4,6 mm, y el grosor de la partcula de relleno es de 3 a 10 m. En este caso, el
recubrimiento es parecido al empleando en HPLC de reparto.

Fases mviles
La fase mvil estrella en la SFC es el dixido de carbono, por sus excelentes propiedades:

Apolar, disuelve una gran variedad de molculas orgnicas.

Transparente a la radiacin ultravioleta

Inodoro

No txico

Fcil de obtener

Barato

No inflamable
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El CO2 tiene la ventaja de que se puede obtener fcilmente como fluido supercrtico. Su
temperatura crtica es de 31C y la presin crtica de 72,9 atm, condiciones realmente
asequibles y por debajo del rango de condiciones usuales en la HPLC.Otras fases mviles
tambin probadas y empleadas son el etano, pentano, dietilter, amonaco, tetrahidrofurano,
diclorofluorometano y xido nitroso.

Detectores
Se puede emplear el detector de ionizacin de llama (tambin usado en GC), por sus
caractersticas de universalidad (permite detectar casi cualquier compuesto orgnico), alta
sensibilidad y bajo mantenimiento. El espectrmetro de masas tambin tiene utilidad, al
tener una salida en fase gas, y detectores espectrofotomtricos como el de infrarrojos,
ultravioleta, el de emisin por fluorescencia, el termoinico y el fotomtrico de llama.

Aplicaciones
La SFC se aplica a una gran variedad de compuestos, entre los que podemos citar drogas,
alimentos, herbicidas, tensioactivos, polmeros y aditivos, explosivos o combustibles
fsiles.
Acoplamiento de la cromatografa de gases con mtodos espectroscpicos
La cromatografa de gases a menudo se combina con otras tcnicas selectivas como la
espectroscopia y la electroqumica. Los mtodos que resultan se llaman mtodos acoplados,
y proporcionan al qumico una potente herramienta para la identificacin de componentes
de una mezcla compleja.
En los primeros mtodos acoplados, los gases efluentes de una columna cromatogrfica,
despus de ser detectados por un detector no destructivo y no selectivo, se recogan como
fracciones separadas en una trampa fra. La composicin de cada una de las fracciones se
investigaba por resonancia magntica nuclear, infrarrojo, o espectroscopia de masas, o por
medidas electroanalticas. Una importante limitacin en esta metodologa era que las
cantidades de soluto que contenan las fracciones eran muy pequeas (normalmente

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micromoles); a pesar de ello, el procedimiento general resultaba til para el anlisis


cualitativo de muchas mezclas multicomponentes.
Un segundo mtodo general, que tiene actualmente un uso muy extendido, consiste en la
aplicacin de un detector selectivo para controlar continuamente el efluente de la columna.
Por lo general, estos procedimientos requieren un control de los instrumentos mediante u
ordenador, y el uso de la memoria de un ordenador para almacenar los datos espectrales y
su posterior presentacin como espectros y cromatogramas.
Cromatografa de Gases/espectrometra de masas (GC/MS)
Algunos frabicantes de instrumentos ofrecen equipos de cromatografa de gases que pueden
acoplarse directamente con distintos tipos de espectrmetros de masas de barrido rpido. El
caudal de las columnas capilares en general es suficientemente bajo como para que la salida
de la columna pueda introducirse directamente en la cmara de ionizacin de un
espectrmetro de masas. Sin embargo, en el caso de las columnas rellenas as como en las
columnas megacapilares ha de emplearse un separador de chorro, como el que se muestra
en la figura, para eliminar la mayor parte del gas portador que acompaa al analito. En este
dispositivo, la salida de gases fluye a travs de la boquilla de un separador de chorro (de
vidrio), el cual aumenta el momento lineal de las molculas ms pesadas del analito, de tal
forma que el 50 por 100 o ms de stas se desplazan aproximadamente en lnea recta hacia
el conducto colector de salida. Por el contrario los tomos del gas (helio) ligeros se desvan
por el vaco y son succionados hacia el exterior.

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Referencias

Skoog D.A, Holler F.J, Nieman TA. Principios de Anlisis Instrumental.5ta


Edicin, Editorial McGRAW-HILL interamericana de Espaa, 1992
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Editorial Prentice Hall, 2001.
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Yost R.W, Ettre L.S, Conlon, R.D. Introduccin a la Cromatografa Lquida
Prctica, Perkin Elmer 1980, ubicacin LECTUQUIM
Quattrocchi OA, Abelaira de Andrizzi S., Laba R.F. Introduccin a la HPLC;
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Skoog, Douglas A. y Leary, James J. (1994), Anlisis Instrumental, Madrid:
McGraw-Hill. 84-481-0191-X.

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