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METODO GRIESS PARA LA

DETECCION DE TB MDR

LUIS ASENCIOS S.

Lab. Nac. de Referencia de Micobacterias


CNSP/INS

RETOS PARA EL LABORATORIO

Desarrollar una prueba simple, precisa, rpida,


de bajo costo y que puede ser desarrollada en
el nivel de atencin primaria y que produzcan
resultados rpidos en el mismo da.
Simplificar el Dx de TB, incluyendo los BK(-) y
TB extrapulmonar con el diseo de una prueba
de mayor Sensibilidad y Especificiadad y tenga
major accesibilidad.

RETOS PARA EL LABORATORIO

Prueba para realizar monitoreo del tratamiento

Prueba para identificar rpidamente la


resistencia a drogas de 1ra y 2da lnea

Prueba para Dx. infeccin latente y determinar a


la progresin a la enfermedad activa.

OMS :Global Plan VI


Para fin de 2015, se espera que los paises

realicen PS al 20% de los casos nuevos


con riesgo de TB MDR y en 100% de los
casos con antecedentes de tratamiento.

Tuberculosis multidrogo-resistente
(TB MDR)

La OMS, define la TB MDR como resistencia simultnea


por lo menos, isoniacida y rifampicina (ncleo del
tratamiento de la TB primaria).

La TB MDR es una forma emergente de la enfermedad


que es ms difcil de tratar y curar

El tratamiento es ms largo (aproximadamente 18 a 24


meses)

El tratamiento es con medicamentos de 2da Linea.

Pruebas Rpidas

Son Pruebas que detectan la resistencia a


isoniacida y rifampicina de 1 a 4 semanas.

Son pruebas directas se realizan a partir de


muestras de esputo, sin necesidad del
aislamiento de la bacteria por cultivo.

De esta forma, las pruebas rpidas, facilitan


la eleccin de un esquema adecuado de
tratamiento al diagnosticar o descartar la TB
MDR en forma precoz

Metodo Griess-Fundamento

El mtodo Griess se basa en la determinacin


de la actividad enzimtica de la bacteria M.
tuberculosis, que en cultivos de crecimiento
activo reduce el nitrato a nitrito que es
detectada al incorporar el reactivo de Griess
dando como resultado una reaccin
colorimtrica.

Objetivo.Brindar un tcnica sencilla, confiable, rpida y


econmico que permita examinar un gran
nmero de muestras a fin de seleccionar a
aquellos pacientes que pudieran estar
potencialmente infectados con cepas M.
tuberculosis resistente o multirresistente
(MDR).

Fluxograma
Del P.S /C.S. al Lab. DISA que procesa Prueba Rpida.
Llenar Solicitud de
Investigacin
Bacteriolgica

Solicitud

BK(+)

Laboratorio implementado
con prueba Griess

Laboratorio

MDR
C.S.

NetLab
Captacin SR (PS, CS, Hospital)
1. Nunca Tratado
2. Antes Tratado (Recadas, abandonos
recuperados )

INS
PS 1ra y 2 da Linea

Gestin en Enfermera
Deteccin del Sintomtico Respiratorio
Examinar al sintomtico respiratorio identificado y
capacitar para la recoleccin de la muestra.

Gestin en Enfermera

Deteccin del Sintomtico Respiratorio


Es la actividad de salud
pblica orientada a
identificar precozmente
a las personas que
contagian la
tuberculosis.

LABORATORIO

DIGESTION- DESCONTAMINACION E
INOCULACION A MEDIOS

Siembra de la Muestra
-Para cada muestra, preparar un set de 5 tubos de

medio L-J
3 tubos control de crecimiento
1 tubo con RIF
1 tubo con INH
2 tubos L-J para otras pruebas
Incubar a 37 C (leer a los 14, 21 y 28 das,
segn sea necesario) (Ej. Si el control no es
positivo a los 14 das, leer a los 21 das, etc.)

INTERPRETACION DE
RESULTADOS

1. Se considera que un aislamiento es


sensible a la droga, si al comparar el tubo
control con los tubos que contienen
droga no se observa ningn cambio de color
o el cambio es muy leve.
2. Un aislamiento se considera resistente, si
hay cambio de color en el tubo que contiene
la droga igual o mayor al del tubo control.

Continuacin
3. La prueba no se considerar
vlida, si no hay ningn cambio de
color en el tubo control. Estas
muestras se debern cultivar por
mtodos de la rutina.

Cepa M. tuberculosis H37Rv,


sensible a las cuatro drogas
estudiadas.
C

INH

SM

C
RMP

EMB RMP

Cepa M. tuberculosis resistente


a INH y sensible al resto de las
drogas.
C

INH

RMP

INH

Cepa M. tuberculosis
resistente a INH - RMP .

Solicitud de Prueba de Sensibilidad en pacientes con


sospecha de TB MDR segn normas de la Estrategia
de Control de Tuberculosis

GRIESS
Pacientes ,Baciloscopas positivas (+, ++ o +++)

MDR
RIF= Resistente

RIF= Sensible

RIF= Resistente

RIF= Sensible

INH=Resistente

INH= Sensible

INH= Sensible

INH=Resistente

Enviar cepa al INS


para PS 1ra y 2da.
Lnea y resultado al
EE SS

Enviar cepa al INS


para PS 1ra a y 2da.
Lnea y resultado al
EE SS

Enviar cepa al INS


para PS 1ra y 2da.
Lnea. El
resultado al EE
SS

Enviar el
resultado al
EE SS

RIFAMPICINA: S= 100%

E=100%

ISONIACIDA: S=97%

E=96%

RIFAMPICINA: S= 100%
ISONIACIDA: S=93%

E=100%
E=100%

RIFAMPICINA: S= 94%

E=100%

ISONIACIDA: S=99.1% E=100%

VPP = 100% VPN= 92%


VPP= 100%

VPN=98%

Ventajas del Mtodo Griess sobre otras


pruebas rpidas
Simplicidad de la tcnica
Bajo costo (2 dlares)
Bioseguridad
Equipos convencionales
Tiempo de obtencin del resultado de 2 a

4 semanas

Desventajas de Griess
Se requieren muestras de esputo
positivos.
No se puede calcular con precisin la
concentracin de las UFC.
Como es una muestra directa puede estar
sujeta a contaminacin.

MUCHAS GRACIAS
e-mail: luisasencioss@yahoo.es