UNIVERSIDAD AUTNOMA DE YUCATN

FACULTAD DE QUMICA

LICENCIATURA EN
QUMICO FARMACUTICO BILOGO
ANLISIS DE DROGAS Y MEDICAMENTOS
REPORTE 2
EXTRACCIN E IDENTIFICACIN DE PARACETAMOL
DE UN JARABE COMERCIAL

INTEGRANTES
COBA SEL KIMBERLY CORAIMA
CHAC CHAN ANA CRISTINA
HERNNDEZ GAMBOA EMILY ALEJANDRA
PECH BAREA ROYEL DANIEL

MRIDA, YUCATN

25

DE MARZO DE

2015

NDICE

Pgina
I.-Introduccin......1

II.-Objetivo....3

III.-Procedimiento.....4

IV.-Resultados y discusiones......5

V.-Conclusiones...11

VI.-Referencias........12

I.

Introduccin

El acetaminofn, tambin conocido en otros pases como Paracetamol N-acetilp-aminofenol) es un analgsico de mayor uso, se emplea en pastillas para el dolor.
Es el metabolito activo de la fenacetina, un analgsico derivado de la anilina. Es
un frmaco eficaz que puede utilizarse en lugar de la aspirina como analgsicoantipirtico; sin embargo, es poca su actividad antiinflamatoria. El acetaminofn es
bien tolerado y no genera muchos efectos colaterales de la aspirina. 1
El uso de este compuesto como analgsico se descubri por accidente cuando se
coloc un compuesto orgnico comn llamado acetanilida (como el acetaminofn,
pero sin el grupo OH) en la prescripcin de un paciente. La acetinilida puede
actuar como analgsico, pero tambin puede ser toxica. El grupo OH en posicin
para al grupo amida hace que el compuesto no sea toxico, ejemplo interesante de
la relacin entre la estructura molecular y las funciones qumicas (Figura 1). 2

Figura 1. Estructura del Paracetamol (N-acetil-p-aminofenol) tambin conocido

como acetaminofn.
El paracetamol se puede encontrar en diferentes formas farmacuticas:
comprimidos, cpsulas, supositorios, jarabe, entre otros. La eleccin de un tipo u
otro depender del paciente a quien vaya destinado. El empleo de jarabe posee la
ventaja de que se puede administrar va oral a nios, adultos de la tercera edad
sin la capacidad de ingerir cpsulas, y adems enmascara el sabor desagradable
de los frmacos ya que el jarabe es una solucin acuosa de apariencia viscosa,
con alta concentracin de carbohidratos tales como: sacarosa, sorbitol, dextrosa,
1

entre otros; en las que se encuentra disuelto el principio activo o los principios
activos.3
La Cromatografa en Capa Delgada (CCD) es una forma de cromatografa de
adsorcin que consiste en un adsorbente slido de carcter polar (fase
estacionaria que puede ser gel de slice (SiO 2), almina (Al2O3) o celulosa
((C6H10O5)n), distribuido uniformemente sobre una superficie plana, generalmente
de hojas de aluminio o placas de vidrio. Este absorbente presenta cierta
capilaridad dada por las partculas finamente divididas y que permite que la fase
mvil pase entre las partculas del absorbente. En CCD, la separacin ocurre
cuando uno de los componentes de la mezcla es retenido en mayor grado por la
fase estacionaria que los otros componentes. El movimiento de cada sustancia en
un determinado sistema es caracterstico y puede ser dato valioso en la
identificacin de ella. Esta caracterstica se conoce con el nombre de Rf (relacin
de frentes) y representa la distancia recorrida por el compuesto, con relacin a la
distancia recorrida por la fase mvil.4
La Espectroscopa de Resonancia Magntica Nuclear (RMN) es la herramienta
ms poderosa que nos proporciona una gran cantidad de informacin sobre la
estructura de los compuestos orgnicos. Se puede usar una pequea cantidad de
muestra y, adems, la muestra no es destruida. Algunas estructuras se pueden
determinar a partir del espectro de RMN, sin embargo, lo ms frecuente es que
para determinar las estructuras de las molculas orgnicas, el espectroscopa de
RMN se utilice conjuntamente con otros tipos de espectroscopias y anlisis
qumicos. La RMN se utiliza para estudiar una amplia variedad de ncleos, como
1

H, 13C, 15N, 19F y 31P. Para los qumicos orgnicos la RMN ms til es la de protn

(1H) y la de carbono (13C), ya que el carbono y el hidrgeno son los componentes

mayoritarios de las molculas orgnicas.5

La tcnica combinada de Cromatografa de Gases y Espectrometra de Masas

(CG-EM). El cromatgrafo de gases utiliza una columna capilar incluida en un
2

horno termostatizado. Esta columna est revestida en su interior con gel de slice
(u otra fase estacionaria), cuya diferente interaccin con las sustancias de la
mezcla permite separar los componentes de la misma. Se inyecta una pequea
cantidad de muestra (10-6 g suele ser suficiente) en un inyector calentado que
permite la volatilizacin de la muestra. Los componentes voltiles son empujados,
entonces, a lo largo de la columna capilar por una corriente de helio. A medida que
la muestra pasa a travs de la columna, los componentes ms voltiles (o bien
que interaccionan menos con la fase estacionaria) se mueven ms rpidamente a
travs de la columna que los componentes voltiles. Los componentes separados,
abandonan la columna a tiempos diferentes, pasando mediante un conducto de
transferencia a las fuentes de iones del espectrmetro de masas, donde las
molculas se ionizan y se fragmentan.5

II.

Objetivo

Aplicar las tcnicas para la extraccin, separacin, purificacin e identificacin de

paracetamol a partir de jarabe comercial.

III.

Procedimiento

Se coloc 5 mL de muestra en embudo de separacin

Se lav con cloruro de metilo (CH2Cl2) tres veces seguidas

Se recolect las fases orgnicas

Se agreg sulfato de sodio (Na2SO4) anhidro

Se decant la fase orgnica en un vaso precipitado

Se agit vigorosamente
Se filtr
Se concentr hasta sequedad en rotavapor*

Anlisis por cromatografa de capa delgada

Se us como fase mvil acetato de etilo y como referencia al 4acetaminofenol

Se revel la placa con luz UV de onda corta (264nm) y onda larga

(365 nm)

Anlisis por RMN-1H

Se aadi 0.5 mL de cloroformo deuterado (CDCl3)

Se deposit la muestra en un vial

Se analiz la muestra en el equipo de RMN- 1H**

Anlisis por CG-EM

Se aadi 1 mL de muestra en vial cromatogrfico

Se analiz por CG-EM***

* Marca Bchi Rotavapor, modelo R-200

**Marca Agilent Technologies, modelo 6890
*** Equipo de EM es de la marca Agilent Technologies, modelo 5875.

IV.

Resultados y discusiones

Se realiz una extraccin lquido-lquido de la solucin muestra de Paracetamol de

3.2 g, forma farmacutica jarabe, marca del fabricante SONS, lote 121111834,
con fecha de caducidad en Noviembre del 2014. Se observ la formacin de dos
5

fases: una acuosa de color rosa en la parte superior del embudo de separacin, y
una orgnica incolora en la parte inferior (figura 2). En la fase orgnica se
encontraba el paracetamol y el diclorometano. El diclorometano es mucho ms
denso que el agua razn por la cual la fase orgnica se encontraba en la parte
inferior.

Figura 2. Extraccin lquido lquido del Paracetamol SONS

Se extrajo la fase acuosa debido a que el Paracetamol tiene mayor afinidad por la
fase orgnica. Esta fue tratada con Na2SO4.
Posteriormente se llevaron a cabo los siguientes anlisis: cromatografa en capa
fina, espectrometra de RMN-1H y cromatografa de Gases-Espectrometra de
Masas.
En cromatografa en capa fina,

se emple como fase mvil acetato de etilo

(AcOEt) y como referencia el 4-acetaminofen. El desplazamiento de la muestra

(M) y la referencia (R) en la placa de cromatografa fina se muestra en la figura 3.

3 cm

3.2

Figura 3. Cromatografa en capa fina del Paracetamol.

La distancia recorrida por la muestra 3 cm y el de la solucin de referencia fue de

3.5 cm. La similitud de las distancias recorridas indica que la solucin que fue
extrada y concentrada del jarabe podra ser Paracetamol.
7

Para reafirmar que los compuestos eluidos son parecidos se calcular el valor de
Rf (ecuacin 1)
Rf=

Distancia recorrida por la zona del soluto

(1)
Distancia recorrida de la fase mvil

Rf=

3 cm
3.2 cm
Rf= 0.93

El valor de Rf (0.93) indica que el Paracetamol migr a travs de la placa, por lo

que es soluble a la fase mvil.

Para la identificacin del Paracetamol se utiliz la espectroscopa de RMN- 1H. El

espectro obtenido del Paracetamol se muestra en la figura 3.

3
4

Figura 3. Espectro de RMN-1H del Paracetamol

En el espectro se puede observar la presencia de cuatro seales caractersticas
que a continuacin se discuten:
Seal 1 y 2: Estas seales pertenecen a los protones localizados en la posicin
orto y meta de la molcula de paracetamol. Son seales de reas idnticas y
aparecen como dos dobletes, esta multiplicidad se debe al efecto magntico que
ejercen los ncleos de los hidrgenos contiguos sobre el hidrgeno en resonancia,
ambas seales aparecen en doblete debido al desdoblamiento de espn. Este
efecto es conocido como desacoplamiento espn-espn que slo ocurre entre
carbonos vecinos, es una propiedad reciproca es decir, que si un protn desdobla
al otro, el segundo protn debe desdoblar al primero. De igual manera sigue la
regla n+ 1, donde n es el nmero de protones equivalentes que desdoblan una
seal.
9

Seal 3: Los jarabes comerciales contienen sacarosa, la cual es visible en el

espectro de la figura 3.
Normalmente los hidrgenos unidos a heteroatomos no son visibles en el espectro
sin embargo en ocasiones se pueden observar. El resultado visible en el espectro
es un ensanchamiento considerable de la seal correspondiente en la que muchas
ocasiones no se puede apreciar la multiplicidad, pero precisamente por esa forma
caracterstica se pueden identificar los hidrgenos unidos a heteroatomos, por lo
tanto esta seal corresponde a los mltiples hidrgenos unidos a heteroatomos de
la sacarosa. En este caso la seal de OH aparecen entre 3.5 y 4 , es ancha y
como debe integrar para muchos hidrgenos es de gran altura.
Seal 4: Esta seal pertenece al grupo metilo de la molcula de paracetamol,
normalmente los metilos aparecen de 0.7- 1.3 en el espectro, sin embargo el
metilo

del

paracetamol

tuvo

un

desplazamiento

debido

al

efecto

de

apantallamiento que ejerce el grupo carbonilo cercano a l, es por eso que se

observa de 2.1-2.6. El desplazamiento qumico de los protones depende de la
electronegatividad
sustituyente,

hay

del
ms

sustituyente.

Cuando

desapantallamiento,

ms
por

electronegativo
lo

que

sea

aumentan

el
los

desplazamientos qumicos. De esta manera, el protn que esta enlazado al tomo

de nitrgeno es el ms desapantallado, debido al tomo de nitrgeno y el
sustituyente del oxgeno.
Otra tcnica para la identificacin del paracetamol fue CG-EM. El cromatograma
de la solucin perteneciente al paracetamol se muestra en la figura x, en donde se
puede observar los diferentes tipos de compuestos presentes, con sus respectivos
tiempos de retencin. El tiempo de retencin correspondiente al paracetamol fue
de 12.11 minutos.

10

A bundance
T I C : A D M -S 1 -E 8 .D

1 e +0 7
9000000
8000000
7000000
6000000
5000000
4000000
3000000
2000000
1000000

6 .0 0

8 .0 0 1 0 .0 0 1 2 .0 0 1 4 .0 0 1 6 .0 0 1 8 .0 0 2 0 .0 0 2 2 .0 0 2 4 .0 0 2 6 .0 0 2 8 .0 0 3 0 .0 0

T im e - - >

Figura. Cromatograma de gases del Paracetamol.

A b u n d a n c e
S c a n

5 5 0

(1 2 . 1 1 6

m in ) : A D M - S 1 - E 8 . D

1 0 9
9 5 0 0 0 0
9 0 0 0 0 0
8 5 0 0 0 0

Pico base

8 0 0 0 0 0
7 5 0 0 0 0
7 0 0 0 0 0
6 5 0 0 0 0
6 0 0 0 0 0
5 5 0 0 0 0

4 5

In

5 0 0 0 0 0
4 5 0 0 0 0
4 0 0 0 0 0

1 5 1

3 5 0 0 0 0
3 0 0 0 0 0
2 5 0 0 0 0
2 0 0 0 0 0

8 0

1 5 0 0 0 0
1 0 0 0 0 0
5 0 0 0 0
0

1 7 92 0 7
5 0

1 0 0

1 5 0

2 0 0

2 5 1 2 8 1
2 5 0

3 0 0

3 2 73 5 53 8 3 4 1 5 4 4 6 4 7 4 5 0 7
3 5 0

4 0 0

4 5 0

5 0 0

m / z -->

Figura 8. Espectro de masas del Paracetamol.

11

5 4 9
5 5 0

6 0 9
6 0 0

6 7 2
6 5 0

En el espectro de masas, como se ve en la figura x se observa el pico base que

tiene una m/z=109. El pico base corresponde al pico ms intenso del espectro. El
valor de m/z del in molecular de 151 indica la masa molecular del compuesto, es
decir el peso molecular del Paracetamol (151 g/mol). El valor impar del in
molecular se debe a que la estructura molecular del Paracetamol tiene un tomo
de nitrgeno.
Tambin se puede observar dos fragmentos abundantes de la molcula despus
del pico base y del in molecular, con un valor de m/z= 45 y m/z=80. Esta
abundancia se debe a que los carbocationes ms estables son los ms
abundantes en el espectro de masas.
La molcula de Paracetamol se fragment formando un radical acetilo (CH 3CO-) y
un catin p-aminofenol. El pico base (m/Z=109) corresponde al p-aminofenol. El
fragmento con valor de m/z=45, corresponde al catin del grupo acetilo mientras
que el fragmento de m/z=80 se debe al catin aminociclopentadieno que pierde un
grupo acetilo y un grupo aldehdo.

V.

Conclusiones

Se realiz correctamente la extraccin de paracetamol comprobndolo por

medio de la cromatografa en capa delgada dando casi la misma distancia
recorrida en comparacin con la de referencia. Adems se logr realizar la
identificacin del paracetamol mediante el empleo de las tcnicas de CG-EM y
RMN-1H ya que al realizar las fragmentaciones (EM), los picos correspondan a
la masa del paracetamol tras la prdida de los determinados fragmentos y las
seales por RMN-1H correspondan a los diferentes protones del paracetamol.

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VI.

Referencias

1.

Kotz, John; Treichel, Paul; Veaver, Gabriela. Chemistry and Chemical

2.

Reactivity.6ta edicin. Editorial Thomson. p. 452

Freifelder, David. Tcnicas de bioqumica y biologa molecular. Editorial

3.

Revert S.A. Espaa 2003. p.531.

SSA, Comisin permanente de la Farmacopea de los Estados Unidos
Mexicanos; Suplemento para establecimientos dedicados a la venta y
suministros de medicamentos y dems insumos para la salud., FEUM,

4.

Mxico, 2010.
Cromatografa

en

Capa

Delgada

en

Columna

http://www.ub.edu/oblq/oblq%20castellano/cromatografia_tipus.html
5.

(consultado Marzo 2015).

Wade, G.L. Qumica Orgnica, 5a ed; Editorial Pearson Prentice Hall:
Madrid, 2004; pp 239, 521-522,527, 544 y 547.

6.

13