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UNIVERSIDADE DO VALE DO ITAJA UNIVALI

CENTRO DE CINCIAS TECNOLGICAS DA TERRA E DO MAR - CTTMAR

Joo Gabriel Haenisch Souza


Jonathan Renan Umeda Ado

Prtica 04: Cromatografia de coluna.

Itaja
2015

Joo Gabriel Haenisch Souza


Jonathan Renan Umeda Ado

Prtica 04: Cromatografia de coluna.

Relatrio apresentado para compor a m1 de qumica


orgnica 2 do quinto semestre de Engenharia
Qumica, na Universidade do Vale do Itaja, Centro
de Cincias Tecnolgicas da Terra e do Mar.
Professora: Albertina Xavier da Rosa Corra

Itaja
2015

INTRODUO
Cromatografia de origem no termo grego chroma+graphein ganhou
importncia como mtodo de separao por volta de 1903, com o botnico Mikhail
Semenovich Tswett, este investigador desenvolveu vrios experimentos no campo de
extratos de planta por adsoro em colunas utilizando carbonato de clcio como fase
estacionria e di-sulureto de carbono como eluente(fase mvel). Nestas experincias,
verificou-se a formao de bandas de cores diferentes nas colunas utilizadas devido
adsoro diferencial dos pigmentos corados, que percolavam com velocidades diferentes
e emergiam separadamente das colunas. Mais tarde M.S. Tswett foi considerado o pai da
cromatografia devido sua valiosa contribuio no desenvolvimento desta tcnina.
Nenhum mtodo de separao to preciso e de aplicao to generalizada como
a cromatografia. Um mtodo empregado de forma ampla que permite a separao,
identificao e determinao de componentes qumicos em sistemas complexos.
A Cromatografia de coluna citada como o mais antigo procedimento
cromatogrfico. Constitui-se na partio entre duas fases, slida(estacionria) e
lquida(mvel) e baseia-se na capacidade de adsoro dos componentes na fase slida e
da solubilidade na fase lquida.
uma tcnica de separao adequada para ilustrar conceitos de interaes
intermoleculares, polaridade e propriedades de funes orgnicas.

OBJETIVOS
Separar os componentes de uma mistura de azul de metileno e alaranjado de metila, atravs
do mtodo de cromatografia de coluna.
METODOLOGIA
A cromatografia de coluna feita em uma coluna de vidro preenchida por uma
fase estacionria. Esta coluna possui uma abertura ou uma torneira na parte inferior,
onde a amostra eluida.
A substncia a ser separada colocada na coluna pela parte superior e o
eluente vertido aps, em quantidade suficiente para promover a separao.
Quando a amostra a ser eluida possui cor, pode-se visualizar as diferentes
zonas coradas descendo pela coluna, que so recolhidas, separadamente, pela
extremidade inferior.
A separao ocorre devido a afinidade das substncias contidas na amostra
com a fase mvel e a fase estacionria. O composto que apresentar maior afinidade
com a fase mvel eluir primeiro e o que tiver menor afinidade ficar retido por mais
tempo na coluna cromatogrfica.

MATERIAIS E REAGENTES

Basto de vidro (1);


2 Bquers(2);
Pipeta de Pasteur(3);
Coluna cromatogrfica(4);
Suporte universa(5);
Algodo(6);
Balana Analtica(7);

Reagentes

Etanol

Ponto de
Fuso (C)
-114

Ponto de

Massa

Ebulio

Molar

(C)

(g/mol)

78,37

46,07

Formula
Molecular
C2H6O

gua destilada

100

18,02

300

327,33

Azul de metileno

110

319,85

C16H18N3SCl

Silica gel

1713

2200

60,07

SiO2

cido Actico

16

118

60,05

C2H4O2

Alaranjado de
metila

H2O
C14H14N3Na
O3S

PROCEDIMENTO
Pegou-se a coluna cromatogrfica e o suporte universal. Colocou-se at 1/3 da
coluna Etanol, pesou-se cinco gramas de slica (SiO2), dissolveu-se a slica gel em
etanol dentro de um bquer, misturou-se at formar uma pasta sem bolhas de ar.
Despejou-se o contedo do bquer dentro da coluna cromatogrfica. Completou-se
com etanol a coluna cromatogrfica at 0,5cm do topo. Esperou-se at que houvesse o
empacotamento completo da fase estacionria. Colocou-se 3 gotas da soluo de
Alaranjado de metila e azul de metileno cuidadosamente para no movimentar a fase
estacionria. Eluiu-se o Alaranjado de metila com Etanol, sempre completando a
coluna cromatogrfica com etanol (colocou-se com conta gotas o movendo de forma
circular e cautelosa para no mecher a fase estacionria). Eluiu-se posteriormente o
azul de metileno com cido Actico em meio aquoso.
RESULTADOS E DISCUSSO
O alaranjado de metila foi eluido primeiro, isso deve-se ao seu carter menos
polar em relao ao azul de metileno.
Por ser menos polar ele interaje menos com a fase estacionria(SiO2) e interaje
mais com a fase mvel (etanol).
O azul de metileno por ser mais polar no eluido com etanol, pois esta fase
mvel no suficientemente polar para fazer com que a ligao entre azul de metileno
e a fase estacionria seja rompida, nesse caso utilizou-se o cido actico como fase
mvel para eluir o azul de metileno.

CONCLUSO
Atravs do mtodo de cromatografia de coluna foi possvel visualizar a
completa separao dos componentes da mistura Alaranjado de metila e Azul de
metileno, devido diferente interao em que os dois tem com a fase estacionria e a
fase mvel.
QUESTES RELATRIO
1. Identifique qual a fase estacionria e a mvel no experimento acima.
R: Fase estacionria a silica em gel, e fase mvel so os solventes etanol e cido actico .

2. Descreva a funo da fase estacionria e da fase mvel no experimento acima.


R: A fase estacionria tem objetivo de reter os componentes da mistura na coluna por afinidade, j a fase
mvel solubiliza ou dissolve o mesmo para que eles fluam na coluna.

3. Cite os principais tipos de foras que fazem com que os componentes de uma mistura
sejam adsorvidos pelas partculas do slido.
R: Foras intermoleculares sendo inica, dipolar, apolar e efeitos de solubilidade, adsoro, ligaes de
hidrognio e foras de Van Der Waals.

4. Identifique a natureza da polaridade dos solventes e das amostras no experimento acima.


R: Etanol polar, cido actico polar, azul de metileno polar e alaranjado de metila pouco polar.

5. Cite possveis aplicaes prticas da prtica utilizada (cromatografia em coluna).


R: Separar e purificar reagentes e materiais obtdos em sntese, separao de compostos de uma mistura.

REFERNCIAS
1. COLLINS, C.H.; BRAGA, G.L., P.S. Introduo a mtodos cromatogrficos. 6. Ed.
Campinas: Editora UNICAMP, 1995.
2. http://www.pucrs.br/quimica/professores/arygony/cromatografiaFINAL/COLUNA.htm. acessado em 6 de abril de 2015 s 22h35min.
3. http://www.ebah.com.br/content/ABAAAfd-kAK/relatorio-cromatografia-coluna
acessado em 6 de abril de 2015 s 22h20min.

4. http://labvirtual.eq.uc.pt/siteJoomla/index.php?Itemid=451&id=103 acessado em 6 de
abril de 2015 s 22h10min.

ANEXOS
Figura: 1

Fonte: www.cgomes.uac.pt

Figura: 2

Fonte: http://portaldoprofessor.mec.gov.br

Figura: 3

Fonte: www.splabor.com.br

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