Recuperacin del cido perlico

Proyeccin de intercambiadores aninicos y determinacin de las

isotermas de adsorcin.
El acido perlico tiene un pK a de 4.94, tiene carga negativa a pH neutro,
lo que ayuda a su adsorcin a resinas de intercambio aninico.
Se pusieron a prueba siete tipos de resinas para determinar cual tiene
mayor capacidad de adsorcin, su impacto en el pH, la capacidad para
unirse a la fuente de carbono y la afinidad al precursor del limoneno.
El Amberlite IRA 410 Cl y Lewatit Monoplus M500 tienen mayor
capacidad para adsorber el acido perlico, con valores de recuperacin
de 94% y 95% respectivamente; los cambios de pH en el medio fueron
insignificantes.
Ninguna de las resinas de las que se analizaron se unieron al glicerol,
por lo tanto el glicerol fue una buena eleccin, sin embargo otras fuentes
de carbono como la lactasa, el acetato y el succinato han sido
adsorbidas en resinas bsicas, lo que podra generar una competencia
por los sitios de enlace.
La afinidad del limoneno fue fuerte para todas las adsorbancias, ya que
el anlisis GC-MS de extractos orgnicos revel un decrecimiento
importante de la concentracin del limoneno despus de la adicion de la
resina.
Para estudios posteriores de las dos resinas mas prometedoras, se llev
a cabo una descripcin emprica del equilibrio de adsorcin en
soluciones de acido perlico con buffer fosfato.
Para describir los isotermas de adsorcin, se utiliz el modelo de
Langmuir:
q=

qmax C
k+C

Donde k es una constante de equilibrio para los procesos de adsorcin,

qmax es la capacidad mxima del adsorbente y C es la concentracin de
equilibrio del cido perlico.
Los experimentos de equilibrio fueron llevados a cabo bajo las
condiciones operacionales necesarias para una optima transformacin:

La resina Amberlite IRA 410 Cl mostro la mas alta afinidad y

adsorcin para el acido perlico que el Lewatit Monoplus M500.

Los parmetros calculados de la ecuacin de Langmuir estn resumidos

en la tabla 1.

Se comparan distintos medios con dos adsorbentes distintos. La resina

IRA 410 Cl mostr un mejor rendimiento para la adsorcin del cido
perlico.
El efecto de la adsorcin de cido perlico de componentes presentes en
el caldo de biotransformacin fue investigado para la mejor resina
(Amberlite IRA 410 Cl), con la determinacin de las isotermas de
adsorcin con un medio E2 (con limoneno 300mM con y sin fosforo, y se
resuspendieron las clulas de P. Putida)
La capacidad de adsorcin mxima (q max) determinada en medio E2, que
contiene limoneno, sin clulas, fue similar a la obtenida en soluciones
buffers sin limoneno, este comportamiento se puede observar en la
tabla 1.
As, los compuestos del medio E2
y el limoneno no afectaron
negativamente a la capacidad de adsorcin mxima de la resina, debido
a que ambos medios contienen aproximadamente la misma
concentracin molar de aniones y limoneno.
Las especies aninicas presentes en medio E2 interactan de forma mas
intensa con la resina que los fosfatos del buffer, conduciendo a una
mayor competencia con cido perlico en los sitios de unin.

Las clulas en el caldo redujeron ligeramente la capacidad mxima del

Amberlite IRA 410 Cl aproximadamente un 10%, mientras que se
observ que se duplico la constante de equilibrio.

La grafica representa los isotermas de adsorcin con el modelo de

langmuir, se observa la concentracin de cido perlico adsorbido en la
resina (representado por q) respecto a la concentracin de cido perlico
en la fase lquida (C).
Para Amberlite IRA 410 Cl (Oscuro) y Lewatit Monoplus M500 (Claro) en
soluciones buffer de cido perlico. Las lneas punteadas representan el
ajuste de los datos experimentales para el modelo de langmuir.

Este efecto, fue probablemente un resultado de la adsorcin de clulas

negativamente cargadas y/o desechos celulares al intercambiador de
aniones con cara positiva restringiendo as la libre interaccin entre
molculas de cido perlico y sitios de unin. Una recuperacin completa
del cido perlico de la resina Amberlite IRA 410 Cl cargado se logr
mediante un lavado con 1M HCl/etanol (40:60, v/v) durante 3.5h. La
solubilidad mxima del cido perlico en este eluyente era de 34g/L
Los datos cuantitativos derivados de estos estudios sentaron las bases
para el diseo de la recuperacin del producto in situ a partir de la
biotransformacion del limoneno con P. Putida DSM 12264. Antes de la
creacin de un proceso basado en el reactor, sin embargo, quera tener
una primera prueba de concepto del efecto positivo de la tcnica ISPR
en el rendimiento de biotransformacion y de su biocompatibilidad en la
escala de matraz de agitacin.