Practica N 01

RECONOCIMIENTO DE EQUIPOS Y MATERIALES EN EL LABORATORIO

DE MICROBIOLOGA
I.

Objetivo
1. Identificar los equipos y materiales de laboratorio
2. Comprender su funcionamiento

II.

MATERIALES:
a) EQUIPOS
i. Autoclave
ii. Cmara de incubacin
iii. Estufa
iv. Microscopio
v. Bomba de vaco
vi. Purificador de agua
vii. Destilador de agua
viii. Espectrofotmetro de UV visible
b) INSTRUMENTOS
i. Asa de siembra
ii. Pipeta Pasteur
iii. Micropipeta
iv. Tubo Eppendorf
v. Balanza Analtica
vi. Placa Petri
vii. Tubos de ensayo

III.

FUNDAMENTO TEORICO
1. EQUIPOS
AUTOCLAVE

Las

autoclaves

generan

vapor de agua a partir de

una temperatura superior a
100C

en

una

cmara

cerrada. A esa temperatura,

el vapor supera la presin
atmosfrica

condiciones
para

la

son

las
ptimas

esterilizacin

equipos
dispositivos

de

de

laboratorio,
mdicos

medios utilizados para el cultivo microbiano. Las bacterias no

pueden sobrevivir en tal medio ambiente, pero no desaparecen
necesariamente los virus. La temperatura puede mantenerse de
30-40C menos que en las estufas de aire seco, de modo que
tambin pueden esterilizarse materiales termo sensibles. Las
autoclaves

requieren

una

manipulacin

cuidadosa

una

inspeccin regular, pueden ser peligrosas y producir lesiones

graves si el vapor escapa por accidente del equipo.
Existen dos tipos de autoclaves. La autoclave sin chaqueta existe
en las versiones vertical y horizontal, es ms sencilla y tiene
algunos inconvenientes prcticos.
ESTUFA DE AIRE CALIENTE
Las

estufas

caliente

de

se

utilizan

principalmente
secar

para

equipo

laboratorio
instrumental

aire

de
e

quirrgico

en aire caliente. Existen

dos tipos de estufas de
aire caliente, con o sin circulacin interna de aire seco. Solos las

estufas de aire caliente pequeas pueden funcionar sin

circulacin interna de aire seco.
La esterilizacin en aire seco es menos eficaz que la de vapor.
INCUBADORAS
Las incubadoras se
utilizan
principalmente para
el cultivo bacteriano,
pero tiene tambin
otros

usos.

incubadora
mantener

La
debe
una

temperatura
constante (35 2C para cultivos bacterianos). La temperatura de
las incubadoras debe registrarse diariamente, deben limpiarse
con regularidad (por lo menos cada 14 das) o inmediatamente
despus de que se derrame cualquier producto infeccioso.
En las incubadoras de dixido de carbono utilizadas para el
cultivo microbiano, la concentracin del dixido de carbono debe
mantenerse a 5-10% y la humedad al 50-100%.

ESPECTOFOTMETRO DE UV
Un espectrofotmetro es un instrumento usado en el anlisis
qumico que sirve para medir, en funcin de la longitud de onda,
la relacin entre valores de una misma magnitud fotomtrica
relativos a dos haces de radiaciones y la concentracin o
reacciones qumicas que se miden en una muestra. Tambin es
utilizado en los laboratorios de qumica para la cuantificacin de
sustancias y microorganismos.

Este

instrumento

tiene la capacidad
de

proyectar

un

haz

de

luz

monocromtica
travs

de

una

muestra y medir la
cantidad

de

luz

que es absorbida
por dicha muestra. Esto le permite al operador realizar dos
funciones:
Dar informacin sobre la naturaleza de la sustancia en la

muestra
Indicar indirectamente qu cantidad de la sustancia que
nos interesa est presente en la muestra.

PURIFICADOR DE AGUA
Combinacin de pre-tratamiento,
osmosis inversa,

desionizacin,

oxidacin por UV y filtracin en un

sistema simple de fcil uso y
mantenimiento. Exclusivo patrn
de flujo y nico almacenamiento
de

agua

con

sistema

de

recirculacin contino.
Monitorea todos los puntos del
agua que incluye el agua de
alimentacin, el agua de osmosis inversa, agua de producto final,
y las mediciones de resistividad y temperatura.

DESTILADOR DE AGUA
El destilador de agua es un instrumento de laboratorio que se usa
para purificar el agua corriente, mediante procesos controlados de
4

vaporizacin

enfriamiento.

Al

aplicar energa trmica al agua en

fase lquida, luego de un proceso
de calentamiento, se convierte en
vapor

de

agua.

Esto

permite

separar las molculas de agua, de

las molculas de otras sustancias o
elementos

que

se

encuentran

mezclados o diluidos. El vapor de

agua se recolecta y se lleva a
travs de un condensador, donde
el vapor se enfra y vuelve a la fase
lquida.

BALANZA ANALITICA
La balanza analtica es
uno de los instrumentos
de medida ms usados
en laboratorio y de la
cual

dependen

bsicamente todos los

resultados analticos.
Las balanzas analticas
modernas, que pueden ofrecer valores de precisin de lectura de
0,1 g a 0,1 mg, estn bastante desarrolladas de manera que no
es necesaria la utilizacin de cuartos especiales para la medida
del peso. Aun as, el simple empleo de circuitos electrnicos no
elimina las interacciones del sistema con el ambiente. De estos,
los efectos fsicos son los ms importantes porque no pueden ser
suprimidos.
MICROSCOPIO

Es un

instrumento que permite observar objetos que son

demasiado pequeos para ser vistos a simple vista.

El

tipo ms comn y el primero que se invent es el

microscopio ptico. Se trata de un instrumento
ptico que contiene dos o ms lentes que
permiten obtener una imagen aumentada del
objeto y que funciona por refraccin.
La ciencia que investiga los objetos pequeos
utilizando

este

instrumento

se

llama microscopa.

BOMBA DE VACIO
Es un equipo
de laboratorio
que

permite

producir

un

vaco en un
espacio
confinado
mediante una
corriente
agua,

por

ejemplo

una destilacin a

presin

de

reducida

o filtracin a travs de un embudo Buchner.

La bomba de vaco se compone de un cuerpo cilndrico hueco que
a su lado tiene una toma de aspiracin (perpendicular al eje del
tubo) y un sistema de fijacin para la conexin del tubo a un grifo
de agua. El cuerpo hueco tiene una seccin reducida a la entrada
de la toma de aspiracin, creando as un vaco por efecto
Venturi y produce el fenmeno de succin.1
La bomba de vaco es una solucin eficaz, pero utiliza una gran
cantidad de agua (del grifo debe estar abierto durante todo el
tiempo que dura la aspiracin). Las presiones alcanzadas son en
6

el rango de 10 a 15 mm Hg, que corresponde a 1,3-2% de

la presin atmosfrica normal (es decir, 760 mm Hg). Para
alcanzar valores ms bajos, se debe emplear una bomba de
vaco a presiones de alrededor de 0,1 mm Hg para la ms eficaz.

ASA DE SIEMBRA
Es un instrumento
de laboratorio tipo
pinza que consta
de una base que
puede

estar

hecha

de

platino, acero, alu

minio y

un filamento que

puede

ser

de nicromo, tungsteno o platino que termina o en un arito de 5 mm

o en punta.
Se

emplea

para

trasvasar inculos (pequeo

transportar
volumen

arrastrar
que

contiene

microorganismos en suspensin) desde la solucin de trabajo

tambin llamada solucin madre al medio de cultivo (slido o
lquido) o de un medio a otro (resiembra). Tambin sirve para la
realizacin de frotis.

PIPETA PASTEUR
Son unos tubos de vidrio que por uno de sus extremos son muy
estrechos (tubo capilar) y en el otro extremo se suele colocar un
chupete de un cuentagotas. No estn graduadas por lo tanto no
sirven para medir volmenes. Se utilizan fundamentalmente para
enrasar en los matraces aforados con mayor facilidad y exactitud
y para coger pequeas cantidades de cualquier disolucin.
7

MICROPIPETA
La
micropipeta

es un

instrumento

de

laboratorio

empleado para absorber y transferir

pequeos volmenes de lquidos y
permitir su manejo en las distintas
tcnicas cientficas.
Es de destacar que el uso de micropipetas permite emplear
distintos lquidos sin tener que lavar el aparato: para ello, se
emplean puntas desechables, de plstico, que habitualmente son
estriles. Existen varios tipos de puntas: por ejemplo, las
amarillas para pipetear volmenes pequeos (por ejemplo, 10 l),
y las azules para pipetear volmenes grandes (por ejemplo, 800
l).

TUBO EPPENDORF
Es un pequeo contenedor cilndrico de

plstico,

con

un

fondo cnico y tpicamente una tapa unida al cuerpo del tubo para
evitar

su

desprendimiento.

Son

empleados

profusamente

en biologa molecular y bioqumica no slo para la centrifugacin,

sino que, dado su bajo costo, se emplean a menudo como
simples viales contenedores de sustancias qumicas.

Los tubos estn fabricados

de polipropileno,
emplearse

pueden

temperaturas

muy bajas (-20 C) o con

disolventes orgnicos como
el cloroformo.

Su

tamao

oscila entre los 200 L y los

2 mL.

La

capacidad

ms

comnmente usada es de 1,5

mL, siendo por otra parte los
de 200 l los ms empleados
para PCR. La desinfeccin de
los tubos es posible (1 atm, 120 C, 20 minutos), pero dado su
bajo costo y la dificultad de limpieza de la superficie de plstico,
los tubos de microcentrfuga son usualmente desechados
despus de su uso
2. INSTRUMENTOS
MATERIALES DE VIDRIO
El material de vidrio a su vez puede ser: a) material calibrado o
volumtrico y b) material no calibrado.
a) Material calibrado o volumtrico: Es aquel que se utiliza en la
medicin de volmenes exactos y est diseado de manera que
un pequeo incremento del volumen del lquido que contiene, da
lugar a una gran variacin del nivel de dicho lquido. Todo material
volumtrico est calibrado a una temperatura especfica de 20C
de manera que en ningn caso podr calentarse. Algunos
ejemplos de este tipo de material son:
Pipeta: Se utilizan para medir o emitir con exactitud
volmenes de lquidos. Pueden ser de dos tipos:
graduadas y aforadas. Estas ltimas pueden ser de aforo
simple o doble, y reciben el nombre de Ball pipeta.
Ball pipeta: Posee una zona central ensanchada. Slo
sirve para medir un volumen fijo con alta precisin. Puede
ser graduada entre dos aforos (doble) o entre un aforo y la
9

punta (simple) o de libre escurrimiento. Para medir el

volumen deseado, se debe hacer coincidir el fondo del
menisco con la lnea de enrase (aforo).
Pipeta graduada: Sirve para medir volmenes variables
con precisin.
Matraz: Un matraz volumtrico o aforado es un recipiente
de fondo plano con forma de pera, que tiene un cuello
largo y delgado. El matraz est graduado para contener un
cierto volumen de lquido a una temperatura dada. Se
utilizan fundamentalmente para preparar soluciones.
Probeta: Se utiliza para medir volmenes de lquidos
generalmente mayores a 10 ml, y cuando no se requiere
demasiada exactitud en la medicin. Son cilndricas,
poseen base plstica y algunas pueden contener o no un
pico vertedor en extremo abierto.
Bureta: Son tubos largos de vidrio graduados que
contienen el lquido. Tienen una llave de paso robinete que
controla el flujo de la solucin en la parte inferior, y punta
capilar. El robinete puede ser de plstico, tefln o vidrio, el
mismo se debe lubricar de forma que no se altere la
solucin y con un lubricante adecuado como lo es la grasa
siliconada o vaselina. Pueden ser manuales o automticas.
Se utilizan en operaciones volumtricas en las que se
realizan descargas variables y exactas de lquidos
(titulaciones).Pueden

ser

de

color

caramelo

transparentes.

10

b) Material no calibrado: Es el resto del material de vidrio empleado.

Estos materiales carecen de una calibracin rigurosa, por lo cual
son utilizados para contener volmenes, agitar, trasvasar,
operaciones que no requieran de precisin de alguna medida.
Vaso de precipitado o beaker: Presentan forma cilndrica,
fondo plano y poseen pico vertedor. Hay de distintos
volmenes y de forma alta (Berzelius) o de forma baja
(Griffin). Se utiliza en operaciones de obtencin de
precipitados, de disolucin, para calentar lquidos o
soluciones, para evaporar soluciones. Vienen graduados
pero a pesar de ello no se los utiliza para mediciones
volumtricas. La capacidad vara de 25 ml. hasta varios
litros. Resisten cambios bruscos de temperatura, pero
deben calentarse sobre tela de amianto.
Tubo de ensayo: De forma cilndrica, de paredes
delgadas, cerrados por un extremo. Pueden ser graduados
o no. Pueden presentar boca esmerilada o no. Son
recipientes para mezclar pequeos volmenes, efectuar

11

reacciones y ensayos en general. Se pueden calentar

directamente flameando a la llama.
Vidrio de reloj: Se utilizan como condensadores sobre los
vasos de precipitacin, cuando se desea calentar un
lquido sin que el volumen vare apaciblemente. Tambin
como

elemento

de

gran

superficie

para

realizar

evaporaciones de pequeos volmenes. Suelen utilizarse

asimismo para pesar slidos y recibir pequeas cantidades
de reactivos. 9 Varilla de vidrio: puede ser maciza o hueca
(vidrio fusible). La primera (agitador) sirve para mezclar o
agitar sustancias, los extremos se redondean pulindolos a
la llama y se coloca a uno de ellos un trozo de 20-25 mm
de tubo de goma para evitar rayar el material de vidrio y
para orientar la cada de sustancias en un determinado
lugar. La varilla hueca posee diferentes dimetros, es
empleada en la conduccin de gases y lquidos. Puede
moldearse y servir como nexo entre los elementos de un
aparato, suelen unirse mediante tubos de caucho que le
permiten adquirir flexibilidad al aparato. Tambin son
empleados como tubos de desprendimiento.
Frasco para lavados o pisetas: Son de vidrio pirex,
pueden contener lquidos para lavados como: agua,
alcohol, ter, etc. Consta de un baln de fondo plano al
cual se han adaptado dos tubos, uno para insuflar aire y el
otro para la salida del lquido del lavado. Se utiliza para
realizar lavado de precipitados, para agregar volmenes de
agua en diversas operaciones.
Embudo: Se utiliza para trasvasar lquidos de un
recipiente a otro, como soporte de papel de filtro, etc. Tiene
forma cnica en tubo desage, es importante que este
ltimo est cortado en biset porque se agiliza la filtracin.
Puede ser de vstago corto o largo. Un embudo muy til es
el rizado o que presenta estras, porque aumenta la
superficie de contacto y acelera el proceso de filtracin.

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 Frasco Erlenmeyer: Son de forma cnica y fondo plano,

hay de diferentes formas y tamaos: de cuello estrello y
cuello ancho. Pueden tener cuello esmerilado lo que les
permite un cierre hermtico en caso de trabajar con
sustancias muy voltiles. Tambin hay de cuello no
esmerilado Se utiliza en especial en tcnicas volumtricas,
por

ejemplo

titulaciones.

Pueden

utilizarse

adems

diluciones o recoger un filtrado. Tambin son usados para

llevar a cabo evaporaciones ms lentas por su forma
cnica que acta de superficie de reflujo.
Baln: Sirven para mezclar sustancias lquidas o lquidas y
slidas y llevarlas a la accin del fuego. Tienen forma
esfrica y cuello fino para sostenerlo con pinzas. Se
fabrican de vidrio pirex y de diferentes capacidades desde
25 ml. hasta varios litros. Pueden ser anchos o angostos.
En algunos casos llevan adheridos al cuello del mismo un
tubo lateral en ngulo de 60, estos sirven para efectuar
destilaciones (baln de destilacin) Tambin estos balones
se clasifican de acuerdo a las bocas de ingreso: de 1 boca:
cuello corto, cuello largo y con tubuladura lateral. De 2
bocas, de 3 bocas y 4 bocas.
Cristalizador: Consta de un pico vertedor que le permite
trasvasar lquidos. Se usan para purificar sustancias por
medio de la cristalizacin. Mucho dimetro y poca altura.
Kitasato: Son de forma cnica y fondo plano. Poseen
paredes ms gruesas que los Erlenmeyer para resistir el
vaco. Tiene en la pared lateral un tubo que se conecta a
una fuente de vaco. Se emplea acoplado a un embudo
Buchner para efectuar filtraciones forzadas aplicando el
vaco.
Ampolla de decantacin: Reciben tambin el nombre de
embudos de decantacin o tubos de bromo. Se los usa
generalmente para separar lquidos inmiscibles (insolubles
entre s).

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 Refrigerante: Son utilizados para condensar vapores de

una destilacin, operaciones de reflujo y de extraccin. Hay
de diferentes tipos, con la finalidad de aumentar la
superficie de contacto entre el vapor y el lquido
refrigerante. Es necesario que al utilizar el refrigerante el
extremo final del mismo toque la pared interior del
recipiente a donde se va a colectar el condensado. En
algunos

casos

de

acuerdo

las

posibilidades

econmicas, se recomienda el uso de material esmerilado

porque sus piezas son fcilmente adaptables para armar
equipos que se emplean en los diversos procedimientos de
laboratorio.
Pesafiltro: se emplea para pesar fuera del contacto del
aire. Sus dimensiones varan desde los 20mm.de hasta
una altura de 100mm. Posee boca esmerilada y tapa.
Tubo de seguridad: Son tubos terminados en un embudo
en uno de sus extremos; los hay de varias formas, rectos,
de rosario, en ese, en trompeta, etc.; sirven para evitar
reabsorciones o para prevenir desprendimientos grandes
de gas, y por tanto explosiones en los aparatos, y tambin
utilizado para traspasar lquidos. Y ayudando a que el
lquido sea vertido en el lugar que se desea.
Frasco lavador de gases: Se fabrican de vidrio y como su
nombre lo indica, tienen por objeto lavar y secar gases por
medio de un lquido adecuado. El modo operatorio es el
siguiente: los gases son introducidos en el frasco por
medio de un tubo que termina a poca distancia del fondo,
burbujea en un lquido adecuado, y salen purificados por
otro tubo colocado en la parte superior del frasco.

14

IV.

CONCLUSIONES:

15

Los materiales, utensilios e implementos del Laboratorio

revisten gran importancia, porque son ellos los que nos
ayudan a llevar a cabos nuestras prcticas. Por esta razn es
importantsimo conocer sus nombres, usos y caractersticas

para su fcil identificacin y uso.

Debemos familiarizarnos con ellos para obtener el adecuado

xito en las infinitas experiencias en laboratorio.

Un laboratorio no es un sitio peligroso si el experimentador es
prudente y sigue todas las instrucciones con el mayor cuidado
posible.

V.

BIBLIOGRFIA:
Davis, J. E. Jr; Mac Nab,W.K.; Haenisch, E. L. 1975 MANUAL
DE LABORATORIO PARA QUMICA: EXPERIMENTOS Y

TEORAS. Editorial Revert S.A.:Espaa ISBN: 84-291-7560.

Guzman, B.; Ybarra, M. I.; Coronel, A del C.; Schabes, F; Fiori
Bimbi, M. V.; Mesurado, M. A. y Gonzlez M. 2004
PRCTICAS DE LABORATORIO EN QUMICA ORGNICA.

16

p.7,9 Imprenta TECNOGRAFIC San Miguel de Tucumn..

ISBN: 987-43-7385-7
Holum, J.R.. 1972 PRACTICAS DE QUIMICA GENERAL,
QUIMICA ORGNICA Y BIOQUMICA. p. 11-12,14-15, 20, 2328,104. EDITORIAL Limusa Wiley, S.A.., D.F. MEXICO

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