19102014

clula
NCLEO

Retculo
endoplasmtico
Profo. Arnon Dias Jurberg, PhD

Farmcia N
2014-2

A origem do ncleo e a
formao dos retculos

eucariotos

procariotos

a compartimentalizao celular cria ambientes locais,

aumentando as taxas das reaes bioqumicas

invaginaes da membrana plasmtica relacionadas com a

origem do ncleo e dos retculos

a compartimentalizao celular permite

especializao funcional

o tamanho do compartimento influencia a velocidade de

reaes limitadas por difuso

Alberts et al. (2008) In: Molecular Biology of the Cell. 5 ed.

O retculo endoplasmtico (RE)

rede interconectada de sacos ou tubos (cisternas)
achatados, delimitados por membrana

o lmen do RE (ou espao cisternal do RE) frequentemente

ocupa >10% do volume total da clula
Alberts et al. (2008) In: Molecular Biology of the Cell. 5 ed.

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o RE est diretamente conectado

membrana externa do envelope nuclear

o lmen do RE (ou espao cisternal do RE) frequentemente

ocupa >10% do volume total da clula
Alberts et al. (2008) In: Molecular Biology of the Cell. 5 ed.

a maioria das clulas possui regies escassas de RE liso

Alberts et al. (2008) In: Molecular Biology of the Cell. 5 ed.

microssomos podem ser separados em um gradiente

de sacarose devido a diferenas de densidade

o RE estruturalmente e funcionalmente diverso

RE rugoso

microssomos lisos possuem densidade menor, enquanto

microssomos rugosos possuem densidade maior
Alberts et al. (2008) In: Molecular Biology of the Cell. 5 ed.

RE liso

ribossomos aderidos
Alberts et al. (2008) In: Molecular Biology of the Cell. 5 ed.

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os ribossomos sintetizam protenas

os ribossomos podem estar associados

s membranas ou livres no citoplasma
polirribossomo

cada aminocido adicionado selecionado a partir do

pareamento complementar de base entre tRNA e mRNA
Alberts et al. (2008) In: Molecular Biology of the Cell. 5 ed.

polirribossomos no citoplasma do
incio sntese de protenas

Alberts et al. (2008) In: Molecular Biology of the Cell. 5 ed.

Retculo endoplasmtico rugoso

polirribossomos ligam uma nica molcula de mRNA

Alberts et al. (2008) In: Molecular Biology of the Cell. 5 ed.

polirribossomos traduzem diversas molculas de

protena a partir de uma nica molcula de mRNA

Alberts et al. (2008) In: Molecular Biology of the Cell. 5 ed.

Quais as funes do RE rugoso?

a membrana do RER cravejada de ribossomos

1) biossntese de protenas
2) biossntese de cadeias de carboidratos
3) biossntese

de fosfolipdeos

Alberts et al. (2008) In: Molecular Biology of the Cell. 5 ed.

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RE rugoso
secreta grande quantidade de protenas

clulas acinares do
pncreas

clulas secretoras de muco no

epitlio intestinal

1) biossntese de protenas
RIBOSSOMOS LIVRES
- protenas citoplasmticas
- protenas perifricas
- protenas transportadas para o
ncleo
- protenas a serem incorporadas
nos peroxissomos, mitocndrias e
cloroplastos

LINFCITO EM REPOUSO

LINFCITO B EFETOR
(PLASMCITO)

a importao de protenas para o RE

um processo co-translacional
ribossomo

mRNA

RIBOSSOMOS LIGADOS
MEMBRANA
- protenas secretadas
- protenas integrais de membrana
- protenas solveis no RE, complexo
de Golgi, lisossomos, endossomos,
vesculas e vacolos

translocao
co-translacional

translocao
ps-translacional

retculo endoplasmtico

mitocndria, cloroplasto,
ncleo e peroxissomo

Alberts et al. (2008) In: Molecular Biology of the Cell. 5 ed.

sequncias sinais direcionam

a sntese de protenas para o RER

Partcula de reconhecimento de sinal (SRP)

translocador

partcula complexa, com 6 cadeias polipeptdicas ligadas a

uma pequena molcula de RNA
Alberts et al. (2008) In: Molecular Biology of the Cell. 5 ed.

Alberts et al. (2008) In: Molecular Biology of the Cell. 5 ed.

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Partcula de reconhecimento de sinal (SRP)

direciona sequncias sinais especficas
ao receptor na membrana do RER

uma sequncia sinal de RE reconhecida duas vezes:

1) SRP no citoplasma, e 2) ligao ao translocador
SRP liga-se subunidade grande do ribossomo

translocador

presente em todas as clulas

Alberts et al. (2008) In: Molecular Biology of the Cell. 5 ed.

a SRP cicla entre a membrana do RE e o citoplasma

receptor de SRP

o reconhecimento duplo ajuda a garantir

especificidade de entrada no lmen do RE
Alberts et al. (2008) In: Molecular Biology of the Cell. 5 ed.

cadeia polipeptdica atravessa por um poro

aquoso do translocador
complexo Sec61

translocador

receptor de SRP

as sequncias sinais do RE variam em aminocidos, mas

todas possuem >8 aminocidos no-polares no seu centro

Alberts et al. (2008) In: Molecular Biology of the Cell. 5 ed.

translocao atravs da membrana do RE nem sempre

precisa de alongamento da cadeia polipeptdica

o poro uma estrutura dinmica,

que se abre apenas transitoriamente
Alberts et al. (2008) In: Molecular Biology of the Cell. 5 ed.

Como uma protena solvel

translocada atravs da membrana do RE?
uma peptidase sinal cliva a cadeia polipeptdica
aps a sua translocao completa

complexo
Sec62/63/71/72
SecA

complexo
Sec61
peptidase
sinal

a translocao ps-transducional envolve protenas

acessrias que alimentam a cadeia polipeptdica no poro
Alberts et al. (2008) In: Molecular Biology of the Cell. 5 ed.

uma abertura lateral permite que a sequncia sinal difunda-se pela

bicamada enquanto a protena solvel liberada no lmen do RE
Alberts et al. (2008) In: Molecular Biology of the Cell. 5 ed.

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Como uma protena transmembrana

integrada na membrana do RE?

A orientao da protena importa?

Como a protena sabe que orientao ter?
a carga dos aminocidos importa

COOH

translocao co-translacional iniciada, mas a cadeia

polipeptdica possui uma sequncia de parada de transferncia

NH2

Alberts et al. (2008) In: Molecular Biology of the Cell. 5 ed.

Alberts et al. (2008) In: Molecular Biology of the Cell. 5 ed.

Como uma protena transmembrana de passagem

mltipla integrada na membrana do RE?

grficos de hidrofobicidade identificam

regies transmembranas

sequncia sinal interna atua como sinal de incio de transferncia e

um sinal de parada de transferncia promove a sada do translocador

combinaes de sinais de incio de transferncia e parada de

transferncia determinam a topologia das protenas

Alberts et al. (2008) In: Molecular Biology of the Cell. 5 ed.

2) biossntese de cadeias de carboidrados

Alberts et al. (2008) In: Molecular Biology of the Cell. 5 ed.

dolicol mantm o precursor oligossacardeo na membrana

adio covalente de acares s protenas

oligossacaril
transferase

cadeia lateral
de asparagina

precursor oligossacardeo pr-formado

transferido para protenas no RE por oligossacaril transferase
Alberts et al. (2008) In: Molecular Biology of the Cell. 5 ed.

Alberts et al. (2008) In: Molecular Biology of the Cell. 5 ed.

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o oligossacardeo montado gradualmente

os oligossacardeos marcam os estado de

dobramento das protenas
diversas protenas precisam de glicosilao N-ligada para seu
dobramento adequado no RE

glicosil
transferase

glicosidase
calnexina

a sntese tem incio no lado citoplasmtico e

a molcula flipada para o lmen do RE
Alberts et al. (2008) In: Molecular Biology of the Cell. 5 ed.

protenas mal dobradas so exportadas para o

citoplasma e degradadas

calnexina liga-se s protenas incompletamente dobradas

contendo uma glicose terminal em oligossacardeos N-ligados
Alberts et al. (2008) In: Molecular Biology of the Cell. 5 ed.

Protenas mal dobradas no RE ativam uma

resposta de protenas desdobradas

RETROTRANSLOCAO OU DESLOCAMENTO

proteassomo

oligossacardeos N-ligados
funcionam como temporizadores.

protenas que dobram-se corretamente e saem do RE antes

da ao de manosidase escapam a degradao
Alberts et al. (2008) In: Molecular Biology of the Cell. 5 ed.

um aumento da transcrio de genes

codantes para chaperonas do RE
Alberts et al. (2008) In: Molecular Biology of the Cell. 5 ed.

a adeso de GPI ancora a protena ao RE

glicosilfosfatidilinositol (GPI)

Tripanossomos usam protenas ancoradas a GPI como

mecanismo de evaso imunolgica
Alberts et al. (2008) In: Molecular Biology of the Cell. 5 ed.

Alberts et al. (2008) In: Molecular Biology of the Cell. 5 ed.

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Retculo endoplasmtico liso

Quais as funes do RE liso?

a membrana do REL no possui ribossomos associados

1) biossntese de cidos graxos e hormnios

esterides (p.ex. estrognio e testosterona)
2) detoxificao heptica de compostos orgnicos,
como barbitricos e alcol
3) sequestro de ons de clcio

1) biossntese de cidos graxos

fosfatidilcolina produzida a partir de glicerol-3-fosfato,
citidina-difosfocolina e cidos graxos

clulas de Leydig produzem testosterona

a sntese de fosfolipdeos ocorre

exclusivamente no lado citoplasmtico
Alberts et al. (2008) In: Molecular Biology of the Cell. 5 ed.

novas molculas de lipdeos so adicionadas apenas na

metade citoplasmtica da bicamada

3) sequestro de ons de clcio e a contrao muscular

FIBRA MUSCULAR ESQUELTICA

scramblase

flipase

o RE tambm produz colesterol e ceramidas

retculo sarcoplasmtico

Alberts et al. (2008) In: Molecular Biology of the Cell. 5 ed.

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a contrao muscular depende de miosina II e

filamentos de actina

complexo
troponina
tropomiosina

o canal de liberao de Ca2+ na membrana do retculo sarcoplasmtico

abre-se pela ativao de canais de Ca2+ dependentes de voltagem

tropomiosina bloqueia a
ligao de miosina

a presena de Ca2+ expe o

local de ligao da miosina

a ligao de Ca2+ troponina libera o bloqueio de

tropomiosina da interao entre actina e a cabea de miosina

Alberts et al. (2008) In: Molecular Biology of the Cell. 5 ed.

Alberts et al. (2008) In: Molecular Biology of the Cell. 5 ed.

o espermatozide ativa o ocito

*fora de escala

fosfolipase C

modificado de Alberts et al. (2008) Molecular Biology of the Cell. 5 ed.

Wang & Kaufman (2014) In: Nat Rev Cancer

RE rugoso vs. RE liso

ribossomos na superfcie no associado a
externa
ribossomos
local de sntese de
protenas

destinadas a
secreo

envolvido no
metabolismo de lipdeos

Wang & Kaufman (2014) In: Nat Rev Cancer