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Cristiano Alves de Carvalho

Microbiologia
Ambiental

APRESENTAO
com satisfao que a Unisa Digital oferece a voc, aluno(a), esta apostila de Microbiologia Ambiental, parte integrante de um conjunto de materiais de pesquisa voltado ao aprendizado dinmico e autnomo que a educao a distncia exige. O principal objetivo desta apostila propiciar aos(s) alunos(as)
uma apresentao do contedo bsico da disciplina.
A Unisa Digital oferece outras formas de solidificar seu aprendizado, por meio de recursos multidisciplinares, como chats, fruns, aulas web, material de apoio e e-mail.
Para enriquecer o seu aprendizado, voc ainda pode contar com a Biblioteca Virtual: www.unisa.br,
a Biblioteca Central da Unisa, juntamente s bibliotecas setoriais, que fornecem acervo digital e impresso,
bem como acesso a redes de informao e documentao.
Nesse contexto, os recursos disponveis e necessrios para apoi-lo(a) no seu estudo so o suplemento que a Unisa Digital oferece, tornando seu aprendizado eficiente e prazeroso, concorrendo para
uma formao completa, na qual o contedo aprendido influencia sua vida profissional e pessoal.
A Unisa Digital assim para voc: Universidade a qualquer hora e em qualquer lugar!
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SUMRIO
INTRODUO................................................................................................................................................ 5
1 INTRODUO MICROBIOLOGIA............................................................................................. 7
1.1 Patgenos Procariontes e Eucariontes.....................................................................................................................7
1.2 Bactrias Tpicas e Atpicas............................................................................................................................................8
1.3 Nomenclatura....................................................................................................................................................................9
1.4 Microrganismos Procariticos e Eucariticos.....................................................................................................10
1.5 Principais Grupos de Microrganismos...................................................................................................................11
1.6 Resumo do Captulo.....................................................................................................................................................13
1.7 Atividades Propostas....................................................................................................................................................14

2 CARACTERIZAO DOS MICRORGANISMOS.................................................................. 15


2.1 Morfologia e Estrutura de Procariticos e Eucariticos..................................................................................18
2.2 Resumo do Captulo.....................................................................................................................................................25
2.3 Atividades Propostas....................................................................................................................................................28

3 ESTRUTURAS DE PROCARITICOS E EUCARITICOS................................................ 29


3.1 Nutrio e Meios de CulturaCultura.......................................................................................................................33
3.2 Classificao dos Microrganismos em Relao ao seu Tipo de Nutrio.................................................33
3.3 Meios de Cultura para Microrganismos................................................................................................................34
3.4 Resumo do Captulo.....................................................................................................................................................37
3.5 Atividades Propostas....................................................................................................................................................41

4 CULTIVO E CRESCIMENTO MICROBIANO............................................................................ 43


4.1 Crescimento dos Microrganismos..........................................................................................................................45
4.2 Crescimento de Cultura Bacteriana........................................................................................................................49
4.3 Metabolismo Microbiano...........................................................................................................................................50
4.4 Elementos de Enzimologia........................................................................................................................................51
4.5 Produo de Energia....................................................................................................................................................53
4.6 Catabolismo dos Carboidratos.................................................................................................................................55
4.7 Catabolismo dos Lipdios e das Protenas............................................................................................................57
4.8 Introduo Fermentao.........................................................................................................................................57
4.9 Resumo do Captulo.....................................................................................................................................................59
4.10 Atividades Propostas.................................................................................................................................................62

RESPOSTAS COMENTADAS DAS ATIVIDADES PROPOSTAS...................................... 63


REFERNCIAS.............................................................................................................................................. 69

INTRODUO
Caro(a) aluno(a),
Iniciaremos aqui o estudo da microbiologia. Entendemos por microbiologia o estudo dos microrganismos, que correspondem a um grande grupo de seres vivos que vivem como clulas nicas ou agrupadas. Com exceo dos vrus, todos os microrganismos possuem estrutura celular, podendo ser encontrados em todos os ambientes dos ecossistemas e estar associados com organismos multicelulares.
Habitam o corpo humano de indivduos saudveis de forma benigna (por exemplo, a flora intestinal). Os
que so prejudiciais aos seres humanos produzem compostos txicos ou causam uma infeco direta,
sendo denominados patgenos.
Voc sabia que, apesar de acreditarmos que as bactrias so perigosas, elas tm uma grande importncia em nosso ecossistema? Algumas bactrias so fixadoras de nitrognio e devolvem esse importante elemento qumico ao solo. Muitas so utilizadas em processos para fabricao de alimentos
e bebidas, por meio de um processo denominado fermentao, contedo que ser estudado ao longo
desta apostila.
Voc aprender diferenciar as principais caractersticas dos seres procariontes e eucariontes, bem
como sua morfologia e estrutura, a evoluo dos seres vivos, os reinos existentes e os principais grupos
de microrganismos bactrias, algas, fungos e protozorios. Os vrus no so considerados seres vivos,
mas tambm sero estudados.
Classificaremos os seres vivos em relao ao seu tipo de nutrio e estudaremos as caractersticas
de um microrganismo e as tcnicas existentes para podermos cultiv-lo. Tambm importante abordarmos os fatores que interferem no crescimento microbiolgico. Abordaremos, ainda, as organelas citoplasmticas dos microrganismos e suas principais funes para entendermos o metabolismo desses
importantes seres vivos. Entenderemos por que existem vrios tipos de meio de cultura e qual devemos escolher para determinada situao. Por fim, saberemos como os microrganismos se reproduzem
e como fazem para obter energia suficiente para realizar suas funes vitais por meio dos processos de
respirao celular e fermentao.
Desejamos bons estudos e esperamos que aproveite ao mximo este material preparado com muita dedicao!

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INTRODUO MICROBIOLOGIA

Caro(a) aluno(a),
Apresentaremos a seguir o conceito de microbiologia. Para que estud-la e compreender
melhor os microrganismos? Aproveite os seus
estudos, dedique-se o quanto for possvel e bom
aproveitamento!
Entendemos por microbiologia o estudo
dos microrganismos, que correspondem a um
grande grupo de seres vivos que vivem como

clulas nicas ou agrupadas. Com exceo dos


vrus, todos os microrganismos possuem estrutura celular, podendo ser encontrados em todos
os ambientes dos ecossistemas e estar associados
com organismos multicelulares. Habitam o corpo
humano de indivduos saudveis de forma benigna (por exemplo, a flora intestinal). Os que so
prejudiciais aos seres humanos produzem compostos txicos ou causam uma infeco direta,
sendo denominados patgenos.

1.1 Patgenos Procariontes e Eucariontes

Os microrganismos procariontes so classificados como bactrias e os eucariontes so os


fungos, as algas e os protozorios. Os vrus no
so considerados seres vivos por no apresentarem clula, mas estudaremos alguns de seus
conceitos por causarem doenas nos seres humanos. Ainda, os procariontes so divididos em dois

grupos: eubactrias, em que encontramos todas


as bactrias de importncia clnica, e arqueobactrias, em que encontramos alguns organismos
evolutivamente distintos.
As clulas procariontes e eucariontes apresentam muitas diferenas em relao sua estrutura. Observe as principais diferenas:

Quadro 1 Procariontes e eucariontes.

Fonte: profpaulosr.dynip.sapo.pt.

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1.2 Bactrias Tpicas e Atpicas

As bactrias tpicas so aquelas que apresentam formas que podem ser definidas como
bacilos, esferas ou espirais. Praticamente todas as
bactrias apresentam uma parede celular ao redor da membrana plasmtica, com exceo dos
micoplasmas. Por meio da parede celular, podemos classificar as bactrias como gram-positivas
e gram-negativas. A maioria das bactrias se multiplica por fisso binria, mas algumas podem
trocar informao gentica por meio dos plasmdeos, incluindo a informao para obter resistncia a determinado antibitico. Entre as bactrias
atpicas, encontramos o Mycoplasma, a Chlamydia e a Rickettsia. Apesar de serem procariontes,
no apresentam estruturas caractersticas ou metabolismos que os incluam nas bactrias tpicas.
Fungos
So organismos eucariontes no fotossintetizantes e geralmente saprofticos. Alguns so
apenas filamentos, sendo chamados bolores. Outros so unicelulares, sendo chamados leveduras.
Sua reproduo pode ser assexuada, sexuada ou
ambas e todos os fungos produzem esporos. As
doenas causadas por eles podem ser superficiais
(como micoses cutneas) ou profundas (micoses
profundas).

mas e tamanhos. Podem estar em vida livre ou ser


parasitas de seres humanos, infectando seus principais tecidos e rgos, sendo encontrados intra
ou extracelular nas regies urogenital e intestinal.
A infeco por esse parasita ocorre por meio da
ingesto de sua forma infectante ou por picada
de inseto.
Vrus
So seres que no possuem estrutura celular, sendo parasitas celulares obrigatrios. So
formados por uma molcula de cido desoxirribonucleico (DNA) ou cido ribonucleico (RNA),
envolvida por uma capa proteica. Tambm podem apresentar um envelope originado da membrana plasmtica da clula hospedeira da qual
foram liberados. Eles contm informaes genticas capazes de direcionar sua prpria replicao,
mas no possuem as organelas e maquinarias enzimticas que a fazem; devido a isso, escravizam
as clulas hospedeiras para sua replicao. Uma
clula hospedeira, aps a infeco viral, ou sofre
uma lise rpida, liberando novos vrus, ou abriga
os novos vrus (fase dormente), com uma liberao prolongada.

Algas
So organismos eucariontes, uni ou pluricelulares e fotossintetizantes. Podem viver em gua
doce ou marinha. Algumas apresentam parede
celular e outras no.
Protozorios
So eucariontes, unicelulares e no fotossintetizantes. Apresentam seres com vrias for-

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1.3 Nomenclatura

Os microrganismos so classificados de
acordo com a taxonomia hierrquica, ou seja, reino, filo, classe, ordem, famlia, gnero e espcie. A primeira letra do nome do gnero sempre
escrita com letra maiscula e o nome da espcie
sempre se inicia com letra minscula. Os nomes
so grifados quando manuscritos ou itlicos
quando digitados.

pouco sobre ela. O mdico e botnico Carolus


Linnaeus, em meados do sculo XVIII, classificou
todos os seres vivos e desenvolveu o sistema binomial dos nomes das espcies. Os sistemas de
classificao, principalmente para os microrganismos, esto em evoluo, pois os pesquisadores
ainda esto descobrindo algumas informaes
importantes em suas caractersticas fsicas e qumicas.

Classificao dos Microrganismos


Voc j ouviu falar sobre a classificao de
Lineu? Ento, caro(a) aluno(a), estudaremos um
Figura 1 Microrganismos.

Fonte: http://www.biomedicinapadrao.com/2012/02/classificacao-de-microrganismos.html.

Saiba mais
O reino protista foi proposto por Charles Darwin
e por Ernst H. Haeckel, um importante zoologista
alemo, pois, quando Linnaeus classificou os seres
vivos, adotou somente dois reinos: o plantae e o
animalia.

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1.4 Microrganismos Procariticos e Eucariticos

Com a descoberta do microscpio e o avano da microscopia eletrnica, muitos passos foram dados no estudo da microbiologia. Por volta
de 1940, descobriu-se que clulas poderiam ou
no apresentar seu material gentico envolvido
por uma membrana nuclear. As bactrias no
apresentam um envoltrio em seu material gentico e so chamadas clulas procariticas. Outras
clulas, como algas, fungos, protozorios, clulas
vegetais e animais, apresentam um envoltrio
nuclear e so denominadas clulas eucariticas.

O reino protista representado pelos seres


eucariticos e unicelulares e possui os trs tipos
nutricionais: as algas fazem fotossntese, os protozorios ingerem o seu alimento e os fungos inferiores (fungos limosos) nutrem-se por meio da
absoro dos alimentos.

Classificao dos Cinco Reinos

Nesse raciocnio, os microrganismos foram


classificados em trs dos cinco reinos: monera
(bactrias), protista (protozorios e algas microscpicas) e fungi (fungos microscpicos, leveduras
e bolores). Para Robert Whittaker, os seres vivos
evoluram do reino monera, conforme o esquema
a seguir:

Robert H. Whittaker, em 1969, props a classificao dos reinos dos seres vivos com base no
tipo de processo nutricional que o organismo utiliza em sua alimentao:
fotossntese: processo pelo qual a luz
fornece energia para converter o dixido de carbono
em gua e acares;

Nos reinos plantae (plantas verdes que realizam fotossntese e algas superiores), animalia
(animais que ingerem alimentos) e fungi (organismos que apresentam parede celular, mas no
clorofila, de modo que absorvem os alimentos),
esto os organismos eucariticos superiores.

Figura 2 Reinos.

absoro: captao de nutrientes qumicos dissolvidos em gua;


ingesto: entrada de partculas de alimentos no dissolvidas.
O reino monera formado por
seres procariticos e, at recentemente, era considerado o reino mais
primitivo. Pela teoria da evoluo das
espcies, acreditava-se que esse reino
era o ancestral dos eucariticos. Normalmente, esses seres obtm seus nutrientes por meio da absoro. Nesse
reino, encontramos as arqueobactrias e as eubactrias.
Fonte: http://proflilianem3.no.comunidades.net/index.php?pagina=1216861926.

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Atualmente, sabemos que um ancestral comum originou as arqueobactrias, eubactrias


(que so os procariticos) e eucariticos e que
existem cinco reinos de classificao dos seres
vivos: monera, protista, fungi, plantae e animalia.
Veja o esquema a seguir:
Figura 3 Procariticos e eucariticos.

Fonte: http://proflilianem3.no.comunidades.net/index.php?pagina=1216861926.

1.5 Principais Grupos de Microrganismos

Os principais grupos de microrganismos so


as bactrias, as algas, os fungos e os protozorios.
Os vrus no apresentam clulas, mas causam importantes doenas nos seres humanos e tambm
devem ser estudados nesta apostila.
Protozorios

So seres vivos unicelulares e eucariticos,
alimentam-se por meio da ingesto de partculas alimentares e no possuem clorofila e parede
celular. Alguns podem se movimentar em ambientes aquticos, graas presena de clios ou
flagelos. Outros realizam um movimento de arrastamento chamado movimento ameboide. Os
esporos, uma fase de vida dos esporozorios, so
imveis.

Apresentam-se disseminados no meio ambiente, principalmente em ambientes aquticos.


Alguns podem causar doenas nos homens e nos
animais e outros podem causar benefcios, como
os que so encontrados no estmago de gado,
carneiro e cupim, ajudando na digesto alimentar.
Algas

So seres vivos eucariticos, podem ser uni
ou multicelulares e apresentam grande variedade
de tamanho e forma. Por apresentarem clorofila e
uma parede celular rgida, so consideradas semelhantes s plantas. Desenvolvem-se em diversos
ambientes, com maior sucesso no aqutico. So
importantes fontes de alimento para os animais e
podem causar problemas, como entupimento de

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caixa-dgua, produo de substncias qumicas


e txicas em ambientes aquticos ou at mesmo
multiplicarem-se em piscinas. Tambm podem
ser benficas, sendo utilizadas como espessante
e emulsificante de alimentos, como sorvetes. Podem, ainda, ser utilizadas como anti-inflamatrios
para o tratamento de doenas como lceras ou
solues nutritivas para outros microrganismos,
como o gar.
Fungos
So seres vivos eucariticos, podem ser uni
ou multicelulares, apresentam parede celular e
podem ter vrios tamanhos, desde microscpicos
at muito maiores, como os cogumelos. No possuem clorofila e nutrem-se por meio da absoro
dos nutrientes presentes no ambiente.
Os bolores (fungos multicelulares que apresentam estruturas filamentosas microscpicas)
so facilmente encontrados em nosso dia a dia.
Eles apresentam uma estrutura denominada hifa
(microscpica), que pode ou no conter esporos.
Se a quantidade de hifas acumuladas for grande,
ser formada uma massa fngica chamada miclio, que visto a olho nu. Tm importante valor
em nossa vida, pois so usados para a produo
da penicilina, molho de soja, queijos, entre outros produtos. Contudo, podem causar prejuzos,
como deteriorao fngica no amendoim e doenas como micoses nos homens e animais.
Tambm existem as leveduras, que so um
tipo de fungo unicelular que pode ser encontrado
de vrias formas. So muito utilizadas na culinria,
pois ajudam a massa de farinha crescer por meio
da produo de gs. Tambm so fundamentais
para a produo de bebidas alcolicas fermentadas. Por outro lado, podem causar doenas, como
sapinho em crianas e vaginites em mulheres.
Bactrias
So seres vivos procariontes e unicelulares,
sendo divididos em dois grupos: as eubactrias e
as arqueobactrias.

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As eubactrias so encontradas em vrias


formas e as mais comuns so as esfricas, os bastonetes e os espirilos. Seu tamanho tambm pode
variar bastante. Apesar de serem unicelulares, as
eubactrias pode ser encontradas em pares, cadeias, ttrades ou agrupadas. Algumas podem
conter flagelos para movimento em meio aqutico. So fundamentais para a reciclagem do lixo
orgnico e tambm na produo de antibiticos,
como, por exemplo, a estreptomicina, mas tambm podem ser prejudiciais, causando infeces
nos homens, como tuberculose, ttano, peste e
clera.
As arqueobactrias diferenciam-se das eubactrias por sua composio qumica, sua atividade e seu tipo de desenvolvimento no ambiente. Elas apresentam grande capacidade de
sobreviver em ambientes com altas concentraes salinas, de acidez e altas temperaturas. Algumas apresentam importncia qumica, como a
de produzir o gs metano por meio de dixido de
carbono e hidrognio, e so encontradas somente em ambientes anaerbios, como no intestino
de ruminantes.
Vrus

So estruturas muito simples e muito menores do que qualquer outra j mencionada nesta apostila. Podem inserir o seu material gentico (DNA ou RNA) ao material gentico da clula
e causar enormes danos. Isso ocorre porque no
apresentam estruturas celulares necessrias para
o seu metabolismo e sua reproduo, devendo,
assim, ser parasitas intracelulares obrigatrios.
Apesar de serem muito simples, sua estrutura
pode apresentar vrias formas. A sndrome da
imunodeficincia adquirida (AIDS) um exemplo
de doena viral causada pelo vrus da imunodeficincia humana (HIV), mas tambm existem muitas outras doenas de importncia clnica, como
hepatites virais, tumores virais (vrus do papiloma
humano HPV, que causa tumor maligno no colo
do tero), mosaico do tabaco (doena da planta
do tabaco), entre outras.

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Ateno
Atualmente, sabemos que um ancestral comum originou as arqueobactrias, as eubactrias (que so os procariticos) e os eucariticos.

1.6 Resumo do Captulo

Caro(a) aluno(a),
Entendemos por microbiologia o estudo dos microrganismos, que correspondem a um grande
grupo de seres vivos que vivem como clulas nicas ou agrupadas. Com exceo dos vrus, todos os
microrganismos possuem estrutura celular, podendo ser encontrados em todos os ambientes dos ecossistemas e estar associados com organismos multicelulares. Habitam o corpo humano de indivduos saudveis de forma benigna (por exemplo, a flora intestinal). Os que so prejudiciais aos seres humanos
produzem compostos txicos ou causam uma infeco direta, sendo denominados patgenos.
Os microrganismos procariontes so classificados como bactrias e os eucariontes so os fungos,
as algas e os protozorios. Os vrus no so considerados seres vivos por no apresentarem clula, mas
estudaremos alguns de seus conceitos por causarem doenas nos seres humanos.
Os procariontes so divididos em dois grupos: eubactrias, em que encontramos todas as bactrias de importncia clnica, e arqueobactrias, em que encontramos alguns organismos evolutivamente
distintos.
As bactrias tpicas so aquelas que apresentam formas que podem ser definidas como bacilos,
esferas ou espirais.
Os fungos so organismos eucariontes no fotossintetizantes e geralmente saprofticos. Alguns
so apenas filamentos, sendo chamados bolores. Outros so unicelulares, sendo chamados leveduras
e algas. As algas so organismos eucariontes, uni ou pluricelulares e fotossintetizantes. Podem viver em
gua doce ou marinha. Algumas apresentam parede celular e outras no.
Os protozorios so eucariontes, unicelulares e no fotossintetizantes. Apresentam seres com vrias formas e tamanhos. Podem estar em vida livre ou ser parasitas de seres humanos, infectando seus
principais tecidos e rgos, sendo encontrados intra ou extracelular nas regies urogenital e intestinal. A
infeco por esse parasita ocorre por meio da ingesto de sua forma infectante ou por picada de inseto.
Os vrus so seres que no possuem estrutura celular, sendo parasitas celulares obrigatrios. Eles
so formados por uma molcula de DNA ou RNA envolvida por uma capa proteica. Tambm podem
apresentar um envelope originado da membrana plasmtica da clula hospedeira da qual foram liberados. Contm informaes genticas capazes de direcionar sua prpria replicao, mas no possuem as
organelas e maquinarias enzimticas que a fazem; devido a isso, escravizam as clulas hospedeiras para
sua replicao.
Os microrganismos so classificados de acordo com a taxonomia hierrquica, ou seja, reino, filo,
classe, ordem, famlia, gnero e espcie. A primeira letra do nome do gnero sempre escrita com le-

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tra maiscula e o nome da espcie sempre se inicia com letra minscula. Os nomes so grifados quando
manuscritos ou itlicos quando digitados.
Robert H. Whittaker, em 1969, props a classificao dos reinos dos seres vivos com base no tipo de
processo nutricional que o organismo utiliza em sua alimentao:
fotossntese: processo pelo qual a luz fornece energia para converter o dixido de carbono em
gua e acares;
absoro: captao de nutrientes qumicos dissolvidos em gua;
ingesto: entrada de partculas de alimentos no dissolvidas.
O reino monera formado por seres procariticos e, at recentemente, era considerado o reino
mais primitivo. Pela teoria da evoluo das espcies, acreditava-se que esse reino era o ancestral dos
eucariticos. Normalmente, esses seres obtm seus nutrientes por meio da absoro. Nesse reino, encontramos as arqueobactrias e as eubactrias.
O reino protista representado pelos seres eucariticos e unicelulares e possui os trs tipos nutricionais: as algas fazem fotossntese, os protozorios ingerem o seu alimento e os fungos inferiores (fungos limosos) nutrem-se por meio da absoro dos alimentos.
Nos reinos plantae (plantas verdes que realizam fotossntese e algas superiores), animalia (animais
que ingerem alimentos) e fungi (organismos que apresentam parede celular, mas no apresentam clorofila, de modo que absorvem os alimentos), esto os organismos eucariticos superiores.
Nesse raciocnio, os microrganismos foram classificados em trs dos cinco reinos: monera (bactrias), protista (protozorios e algas microscpicas) e fungi (fungos microscpicos, leveduras e bolores).
Atualmente, sabemos que um ancestral comum originou as arqueobactrias, eubactrias (que
so os procariticos) e eucariticos e que existem cinco reinos de classificao dos seres vivos: monera,
protista, fungi, plantae e animalia. Os principais grupos de microrganismos so as bactrias, as algas, os
fungos e os protozorios. Os vrus no apresentam clulas, mas causam importantes doenas nos seres
humanos e tambm devem ser estudados nesta apostila.

1.7 Atividades Propostas

1. O que microbiologia? Onde podemos encontrar os microrganismos?


2. Faa um quadro comparativo entre organismos procariontes e eucariontes, destacando as suas
principais diferenas.
3. Antigamente, os pesquisadores acreditavam que os seres eucariontes originaram-se dos seres
procariontes. Atualmente, o que sabemos a respeito dessa ideia?

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CARACTERIZAO DOS
MICRORGANISMOS

Caro(a) aluno(a),
Para determinarmos as caractersticas de
um microrganismo, ele deve estar em cultura
pura. Entendemos por cultura pura um determinado espao no qual est presente um microrganismo e/ou outros originados por meio de sua reproduo. Esse conceito diferente do de cultura
mista, que um determinado espao ou ambiente ocupado por espcies diferentes.
Conseguimos, em laboratrios, cultivar microrganismos em material nutriente, denominado meio de cultura. Os meios de cultura podem

ser preparados pelo prprio laboratrio por meio


de ps desidratados ou ser comprados prontos.
H diversos tipos de meio de cultura e sua escolha depende de muitos fatores, como a espcie
que o microbiologista espera cultivar, a origem
do material que ser analisado, suas necessidades
nutricionais, entre outros. O gar um exemplo
de nutriente para meio de cultura, mas existem
outros base de sangue e at mesmo bile.
Existem algumas tcnicas de isolamento de
microrganismos em cultura pura. Vejamos quais
so:

tcnica de esgotamento por meio de estrias superficiais: descrita como o esgotamento do


material presente em uma ala ou agulha de semeadura por meio de estrias na superfcie do
meio de cultura;
Figura 4 Tcnica de esgotamento por meio de estrias superficiais.

Fonte: www.fotonblog.com.

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tcnica de semeadura em superfcie: com o auxlio de uma ala de vidro, o inculo espalhado
na superfcie do gar;
Figura 5 Tcnica de semeadura em superfcie.

Fonte: www.biomedicinapadrao.com.

mtodo de pour plate: consiste na mistura do inculo em um gar fundido que tenha sido resfriado a 45 C e distribudo posteriormente em placas de Petri esterilizadas.
Figura 6 Mtodo de pour plate.

Fonte: www.vida-microscopica.blogspot.com.

Aps a inoculao do microrganismo em


determinado meio de cultura, ele se multiplica e
produz um grande nmero de clulas, que, juntas, formam uma colnia. Elas podem ser vistas
a olho nu e cada colnia gerada de um nico
ancestral.

16

Para manter as culturas puras com vistas a


estudos, podemos utilizar o controle de temperatura do meio em que elas estiverem. Para mant-las por um perodo curto (de dias a meses), elas
podem ser armazenadas em refrigeradores, de 4
a 10 C. Para longos perodos de armazenamento,
podemos manter as culturas em nitrognio lqui-

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do, a -196 C, ou at mesmo em freezers, de -70 a


-120 C. Ainda existe o processo de liofilizao,
no qual congelamos e desidratamos o microrganismo em cultura pura para mant-lo por muitos
anos. Esse processo muito utilizado por laboratrios.
Saiba mais
Nas viagens Lua, os astronautas recebem alimentos liofilizados, um dos mais seguros em
termos microbiolgicos, sensoriais e nutricionais
e o mais adequado para o armazenamento sem
condies especiais.

Para caracterizar os microrganismos, existem variadas tcnicas laboratoriais, desde uma


simples microscopia at tcnicas mais complexas, como a anlise do material gentico. Vejamos
quais so elas:
caractersticas morfolgicas: o arranjo
da clula, seu tamanho e sua forma podem ser identificados por meio de vrios tipos de microscpio e com vrios
mtodos de colorao. Dessa forma,
podem-se estudar as estruturas celulares internas e externas;
caractersticas nutricionais e culturais:
cada espcie de microrganismo pode
apresentar caractersticas particulares
em relao ao seu modo de se nutrir e
de formar culturas. O estudo sobre esses assuntos ajuda muito na sua identificao. Se soubermos com qual microrganismo estamos trabalhando, fica
mais fcil agrup-lo e classific-lo nos
grupos taxonmicos;

determinar a atividade metablica de


um microrganismo e, dessa forma, conseguimos identificar qual espcie ele
pertence;
caractersticas antignicas: conhecemos como antgeno a substncia que,
quando injetada em um organismo animal, estimula a sntese de seus anticorpos. As bactrias apresentam vrias estruturas fsicas em sua superfcie e estas
podem ter ao como se fossem antgenos, quando, em testes laboratoriais, estimulam a produo de anticorpos, que
podem ser utilizados para determinar a
presena de antgenos nicos, caracterizando, assim, uma espcie;
caractersticas patognicas: patognicos como chamamos os microrganismos que causam doenas. Os que
no causam so chamados no patognicos. O organismo infectado pelo
patgeno chamado hospedeiro. Precisamos identificar se o microrganismo
trabalhado ou no um patgeno;
caractersticas genticas: atualmente,
podemos contar com a anlise gentica dos microrganismos. Existem alguns testes, como a sonda de DNA,
por exemplo, que so comercializados
em forma de kits para fins de pesquisa
e diagnstico. Uma fita de DNA do microrganismo conhecido misturada
com a fita de um desconhecido. Caso
eles sejam da mesma espcie, as duas
fitas se combinam. No mercado, h
atualmente o kit para identificao da
Salmonella sp.

caractersticas metablicas: uma grande variedade de reaes qumicas ocorre no interior dos microrganismos, onde
molculas pequenas e simples podem
se transformar em grandes e complexas ou o contrrio. Esse processo conhecido como metabolismo. Por meio
de vrios testes laboratoriais, podemos
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2.1 Morfologia e Estrutura de Procariticos e Eucariticos

Estudaremos, nesta seo, as caractersticas


morfolgicas dos microrganismos procariticos e
eucariticos. Como j vimos, as bactrias so seres procariticos, sendo a sua maioria unicelular e
de forma simples.
Morfologia dos Procariticos Bactrias
Tamanho
So invisveis a olho nu. Utilizamos, geralmente, a medida em micrmetros (m), que so
equivalentes a 10 mm. O tamanho varia de acordo com as espcies, mas a mdia considerada
de 0,5 a 1 m em dimetro ou largura. Considerando a medida de 1 m, 10 mil bactrias coloca-

das uma ao lado da outra resultariam em apenas


1 cm. Em relao ao peso, estima-se que cerca de
1 trilho de bactrias pesariam apenas 1 g. Quando comparamos a rea de uma clula bacteriana
com o seu volume (rea x volume), encontramos
um resultado muito alto dessa relao. Isso garante uma chance maior de absoro dos nutrientes,
sendo responsvel pelo seu alto metabolismo e
pelo rpido crescimento da clula. Uma bactria
pode sofrer uma diviso celular a cada 20 minutos.
Forma
As bactrias encontradas individualmente
apresentam uma das trs seguintes formas:

cocos: so clulas esfricas ou arredondadas, podendo ser ovoides ou achatadas em um dos


lados (principalmente quando se encontram ao lado de outra clula);
Figura 7 Cocos.

Fonte: http://juliasarabioifes.wordpress.com.

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bacilos: so clulas cilndricas ou em forma de basto. Entre as espcies de bacilos, h uma


diferena considervel de comprimento e largura. Alguns bacilos podem apresentar suas pores terminais quadradas, arredondadas, afiladas ou pontiagudas;
Figura 8 Bacilos.

Fonte: http://magicnumbers-parussolo.blogspot.com.br.

espirilos: so bactrias que apresentam suas formas em estilo saca-rolha, espiral ou helicoidal.
Figura 9 Espirilos.

Fonte: http://es.wikipedia.org.

As formas apresentadas so as tradicionais,


mas podem existir modificaes delas. Por exemplo, temos a Pasteuria, que se apresenta em forma
de pera, e a Caryophanon, que tem forma de discos distribudos como pilhas de moedas. Tambm
existem as bactrias que possuem variaes de
forma dentro de uma mesma espcie, chamadas
pleomrficas, episdio conhecido como pleomorfismo. Isso pode nos levar a confundir que
uma cultura est contaminada por outro tipo de
bactria.

Arranjo
As diferentes espcies de bactria podem
se agrupar de algumas formas. Vejamos:

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Cristiano Alves de Carvalho

diplococos: ocorrem quando um coco se divide em um plano;


Figura 10 Diplococos.

Fonte: http://html.rincondelvago.com.

estreptoccicos: ocorrem quando um coco se divide em um plano e permanece ligado depois


de vrias divises, formando uma cadeia.
Figura 11 Estreptoccicos.

Fonte: http://thaisemoniquebioifes.wordpress.com.

Tambm podem ocorrer arranjos celulares


mais complexos, formando ttrades (quando
um coco se divide no ngulo direito no primeiro
plano de diviso), srcinas (quando ocorre uma
diviso adicional no terceiro plano, formando pa-

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cotes cbicos de oito clulas) e formas de cacho


de uva (quando ocorre diviso em trs planos de
forma irregular, formando agrupamentos).

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Figura 12 Ttrades.

Fonte: http://www.oocities.org.

Figura 13 Srcinas.

Devemos ressaltar que clulas da mesma


espcie podem sofrer modificaes em seus arranjos, ou seja, nem sempre encontraremos todas
as bactrias da mesma espcie com o mesmo arranjo.
Em relao aos bacilos, eles formam arranjos em uma variedade de padres caractersticos,
mas existem algumas excees: arranjo de paliada (grupo de clulas alinhadas lado a lado,
como palitos de fsforo), roseta (lembra as flores
penduradas em caules), cadeias (as clulas ficam
enfileiradas, mantendo uma pequena superfcie
de contato) e tricomas (so similares s cadeias,
porm a superfcie de contato entre as clulas
muito maior).
Figura 15 Forma de paliada.

Fonte: http://www.microbiologiaja.blogspot.com.br.

Figura 14 Forma de cacho de uva.

Fonte: http://microdidatica.wordpress.com.

Fonte: http://wwwdiversidadevirtual22.blogspot.com.br.

Ateno
As bactrias so seres procariticos, sendo a sua
maioria unicelular e de forma simples.

Formas Latentes de Procariticos



Algumas espcies de bactria produzem
esporos e cistos, que so formas latentes de alta
resistncia s condies climticas desfavorveis. Essas formas apresentam seu metabolismo
inativo. Em condies climticas favorveis, elas
podem germinar e reativar normalmente o seu
metabolismo.
Endsporos so os esporos exclusivos das
bactrias. Eles apresentam parede celular espessa

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Cristiano Alves de Carvalho

e refrativa (brilha muito com a luz do microscpio) e so muito resistentes s mudanas do meio
ambiente. A sua resistncia ao calor tem sido um
grande desafio aos microbiologistas. Acredita-se
que um processo de desidratao ocorrido durante a esporulao pode favorecer essa resistncia. Alm disso, a presena de cido dipicolnico
(DPA) tambm pode estar relacionada ao favorecimento dessa resistncia.

Morfologia dos Eucariticos Fungos


So exemplos de fungos as leveduras e os
bolores; entre eles, h diferenas morfolgicas
importantes. Vejamos:

Os cistos so outro tipo de forma latente semelhante aos endsporos, mas no apresentam
alta resistncia ao calor, podendo ser mais facilmente eliminados por processos como a fervura.

leveduras: unicelulares e geralmente maiores do que as bactrias, variam de 1 a 5 m em


largura e de 5 a 30 m em comprimento. Podem ser ovais, alongadas ou esfricas. As clulas
individuais, mesmo em cultura pura, podem apresentar variaes de tamanho e forma. Elas
no se locomovem. Em um meio de cultura, formam colnias lisas e brilhantes, lembrando as
colnias bacterianas;
Figura 16 Leveduras.

Fonte: http://confece.blogspot.com.br/2010/09/vez-da-levedura.html.

bolores: multicelulares que aparecem como filamentos. Seu corpo ou talo consiste em um miclio e seus esporos latentes. O miclio formado por uma massa de filamentos denominada
hifa, formada por muitas clulas e apresentando uma parede rgida constituda por quitina,
celulose e glicana. As hifas podem ser classificadas como cenocticas, no possuindo septos
originadas por invaginao da parede celular e formando um longo filamento , ou como

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septadas, apresentando um septo que divide os filamentos em clulas diferentes com ncleo;
cada filamento com ncleo gera um novo organismo. Elas tambm podem ser de dois tipos:
rizoides, que necessitam absorver o alimento dos locais onde ficam penetradas (como pes
ou solo), ou reprodutivas, que crescem em contato com o ar para disseminar os esporos que
produzem. H tambm as hifas sem funo especializada, chamadas vegetativas, e aquelas
que se organizam em grandes estruturas para formar os fungos maiores, como cogumelo e
orelha-de-pau.
Figura 17 Bolores.

Fonte: http://www.not1.xpg.com.br/bolor-o-que-e-especie-de-fungo-fotos-e-caracteristicas/.

Alguns fungos patognicos podem apresentar dimorfismo, ora sendo leveduras, ora sendo bolores, dependendo de onde esto presentes.
Morfologia dos Eucariticos Algas
Apresentam grande variedade de tamanho
e forma. Podemos encontrar organismos unicelulares vistos apenas por meio do microscpio,
como tambm multicelulares com vrios metros
de comprimento. Os unicelulares podem ser bastonetes, esfricos, em forma de clavas ou fusiformes. Algumas algas podem se mover. O grau de
diversidade das algas em relao variedade de
forma muito grande. Podem ser encontradas
em colnias e em simples agregados de clulas
individuais, bem como podem ser de clulas com
tipos especializados.

Morfologia do Procariticos Protozorios


Podem ser ovais, esfricos ou alongados. H
tambm os polimrficos, que apresentam vrias
formas ao longo de seu ciclo vital. Seu tamanho
muito variado, podendo ser desde 1 m a 2 mm.
No possuem parede celular e so capazes de se
locomover em alguma fase da sua vida. Alimentam-se por meio da ingesto de partculas. Possuem organismo completo, mesmo sendo uma
nica clula, isto , so capazes de manter todas
as funes necessrias para a sua sobrevivncia
sem depender de outros.
Outras Formas de Eucariticos
Formas latentes

Alguns microrganismos podem apresentar
formas latentes em seu ciclo vital. Essa forma

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fundamental para a sobrevivncia em condies


no favorveis clula. Os fungos e os protozorios apresentam essas formas para ajudar em sua
sobrevivncia e reproduo. As algas no formam
cistos, mas formam esporos, que tm uma funo
principal: reproduo.

do hospedeiro. No momento em que os cistos


detectam boas condies ambientais, formam
novamente as trofozotas, que se alimentam e se
desenvolvem.
Figura 19 Cistos.

Esporos
Os fungos produzem dois tipos de esporo:
os sexuados e os assexuados. Os sexuados so
produzidos pelo encontro de gametas e geram
uma clula fertilizada. So em menor nmero do
que os assexuados e auxiliam na identificao da
espcie e classificao dos fungos. Os assexuados
so produzidos pelas hifas areas, sem o encontro
de gametas. Tm como funo a disseminao da
espcie. Geralmente, so brancos quando formados e depois adquirem uma colorao especfica
de sua espcie.

Fonte: http://www.jornallivre.com.br/179240/tudo-sobre-a-entamoeba-coli.html.


Os cistos de reproduo no apresentam
as mesmas condies de resistncia dos cistos de
proteo e no sofrem influncia ambiental para
seu desenvolvimento.

Figura 18 Esporos.

Os cistos de proteo so uma importante


forma de transmisso de doenas entre os seres
humanos. So formados no intestino do hospedeiro e eliminados com as fezes, podendo contaminar alimentos e gua.

Fonte: http://pt.wikipedia.org/wiki/Protozo%C3%A1rio.

Cistos

A maioria dos protozorios produz cistos.
H dois tipos: os cistos de proteo e os cistos de
reproduo. Os protozorios apresentam uma
forma vegetativa denominada trofozota, que
produz os cistos protetores, os quais oferecem
proteo contra dessecamento, ausncia de oxignio e alimento e acidez presente no estmago

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2.2 Resumo do Captulo

Caro(a) aluno(a),
Para determinarmos as caractersticas de um microrganismo, ele deve estar em cultura pura. Entendemos por cultura pura um determinado espao onde est presente um microrganismo e/ou outros
originados por meio de sua reproduo. Esse conceito diferente do de cultura mista, que um determinado espao ou ambiente ocupado por vrias espcies.
Conseguimos, em laboratrios, cultivar microrganismos em material nutriente, denominado meio
de cultura. Os meios de cultura podem ser preparados pelo prprio laboratrio por meio de ps desidratados ou ser comprados prontos. H diversos tipos de meio de cultura e sua escolha depende de muitos
fatores, como a espcie que o microbiologista espera cultivar, a origem do material que ser analisado,
suas necessidades nutricionais, entre outros. O gar um exemplo de nutriente para meio de cultura,
mas existem outros base de sangue e at mesmo bile.
Aps a inoculao do microrganismo em determinado meio de cultura, ele se multiplica e produz
um grande nmero de clulas, que, juntas, formam uma colnia. Elas podem ser vistas a olho nu e cada
colnia gerada de um nico ancestral.
Para caracterizar os microrganismos, existem variadas tcnicas laboratoriais, desde uma simples
microscopia at tcnicas mais complexas, como a anlise do material gentico. Veja:
caractersticas morfolgicas;
caractersticas nutricionais e culturais;
caractersticas metablicas;
caractersticas antignicas;
caractersticas patognicas;
caractersticas genticas.
Morfologia e Estrutura de Procariticos e Eucariticos
Morfologia dos procariticos bactrias
Tamanho: so invisveis a olho nu. Utilizamos, geralmente, a medida em micrmetros (m), que
so equivalentes a 10 mm. O tamanho varia de acordo com as espcies, mas a mdia considerada
de 0,5 a 1 m em dimetro ou largura. Considerando a medida de 1 m, 10 mil bactrias colocadas uma
ao lado da outra resultariam em apenas 1 cm. Em relao ao peso, estima-se que cerca de 1 trilho de
bactrias pesariam apenas 1 g. Quando comparamos a rea de uma clula bacteriana com o seu volume
(rea x volume), encontramos um resultado muito alto dessa relao. Isso garante uma chance maior de
absoro dos nutrientes, sendo responsvel pelo seu alto metabolismo e pelo rpido crescimento da
clula. Uma bactria pode sofrer uma diviso celular a cada 20 minutos.
Forma: as bactrias encontradas individualmente apresentam uma das trs seguintes formas: cocos, bacilos ou espirilos.

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Arranjo: as diferentes espcies de bactria podem se agrupar de algumas formas: diplococos ou


estreptoccicos. Tambm podem ocorrer arranjos celulares mais complexos, formando ttrades (quando um coco se divide no ngulo direito no primeiro plano de diviso), srcinas (quando ocorre uma
diviso adicional no terceiro plano, formando pacotes cbicos de oito clulas) e formas de cacho de uva
(quando ocorre diviso em trs planos de forma irregular, formando agrupamentos). Clulas da mesma
espcie podem sofrer modificaes em seus arranjos, ou seja, nem sempre encontraremos todas as bactrias da mesma espcie com o mesmo arranjo.
Em relao aos bacilos, eles formam arranjos em uma variedade de padres caractersticos, mas
existem algumas excees: arranjo de paliada (grupo de clulas alinhadas lado a lado, como palitos
de fsforo), roseta (lembra as flores penduradas em caules), cadeias (as clulas ficam enfileiradas, mantendo uma pequena superfcie de contato) e tricomas (so similares s cadeias, porm a superfcie de
contato entre as clulas muito maior).
Formas Latentes dos Procariticos
Algumas espcies de bactria produzem esporos e cistos, que so formas latentes de alta resistncia s condies climticas desfavorveis. Essas formas apresentam seu metabolismo inativo. Em condies climticas favorveis, elas podem germinar e reativar normalmente o seu metabolismo.
Endsporos so os esporos exclusivos das bactrias. Eles apresentam parede celular espessa e refrativa (brilha muito com a luz do microscpio) e so muito resistentes s mudanas do meio ambiente.
Os cistos so outro tipo de forma latente semelhante aos endsporos, mas no apresentam alta
resistncia ao calor, podendo ser mais facilmente eliminados por processos como a fervura.
Morfologia dos Eucariticos Fungos
So exemplos de fungos as leveduras e os bolores. Entre eles, h diferenas morfolgicas importantes. Vejamos:
leveduras: unicelulares e geralmente maiores do que as bactrias, variando de 1 a 5 m em
largura e de 5 a 30 m em comprimento. Podem ser ovais, alongadas ou esfricas. As clulas
individuais, mesmo em cultura pura, podem apresentar variaes de tamanho e forma. Elas
no se locomovem. Em um meio de cultura, formam colnias lisas e brilhantes, lembrando as
colnias bacterianas;
bolores: multicelulares que aparecem como filamentos. Seu corpo ou talo consiste em um miclio e seus esporos latentes. O miclio formado por uma massa de filamentos denominada
hifa, formada por muitas clulas e apresentando uma parede rgida constituda por quitina,
celulose e glicana.
Alguns fungos patognicos podem apresentar dimorfismo, ora sendo leveduras, ora sendo bolores, dependendo de onde esto presentes.

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Morfologia dos Eucariticos Algas


Apresentam grande variedade de tamanho e forma. Podemos encontrar organismos unicelulares
vistos apenas por meio do microscpio, bem como multicelulares com vrios metros de comprimento.
Morfologia do Procariticos Protozorios
Alguns so ovais ou esfricos, mas tambm encontramos as formas alongadas. Tambm existem
espcies ditas polimrficas, que, em cada fase de vida, apresentam uma forma. Seu tamanho varia de
1 m a 2 mm. Eles no possuem parede celular, so capazes de se locomover mesmo que seja em algum estgio de sua vida e alimentam-se por meio da ingesto de partculas de alimento. Apresentam-se
como organismos completos, com as organelas necessrias para realizar todas as suas funes.
Outras Formas de Eucariticos
Formas latentes
Alguns microrganismos podem apresentar formas latentes em seu ciclo vital. Essa forma fundamental para a sobrevivncia em condies no favorveis clula.
Esporos

Os fungos produzem dois tipos de esporo: os sexuados e os assexuados. Os sexuados so produzidos pelo encontro de gametas e geram uma clula fertilizada. So em menor nmero do que os assexuados. Auxiliam na identificao da espcie e classificao dos fungos. Os assexuados so produzidos pelas
hifas areas, sem o encontro de gametas. Tm como funo a disseminao da espcie. Geralmente, so
brancos quando formados e depois adquirem uma colorao especfica de sua espcie.
Cistos

A maioria dos protozorios produzem cistos. H dois tipos: os cistos de proteo e os cistos de
reproduo. Os protozorios apresentam uma forma vegetativa denominada trofozota, que produz os
cistos protetores. Os cistos de reproduo no apresentam as mesmas condies de resistncia dos cistos de proteo e no sofrem influncia ambiental para seu desenvolvimento.
Os cistos de proteo so uma importante forma de transmisso de doenas entre os seres humanos. So formados no intestino do hospedeiro e eliminados com as fezes, podendo contaminar alimentos e gua.

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2.3 Atividades Propostas

1. Quais so as tcnicas de isolamento de bactrias em cultura pura?


2. Quais so as tcnicas laboratoriais utilizadas para caracterizar de forma especfica os microrganismos?
3. Quais so as formas que as bactrias podem apresentar?

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ESTRUTURAS DE PROCARITICOS E
EUCARITICOS

Figura 20 Membrana plasmtica.

Caro(a) aluno(a),
Nas bactrias, podemos encontrar as seguintes organelas ou estruturas: flagelos, pelos,
glicoclice, parede celular, membrana plasmtica,
ribossomos e material gentico. J nas clulas eucariticas, podemos encontrar mais estruturas ou
organelas, por serem mais complexas: flagelos,
clios, parede celular, membrana citoplasmtica,
ncleo, Retculo Endoplasmtico (RE), complexo
de Golgi, mitocndria e cloroplastos. Vejamos as
estruturas e suas devidas funes.

Fonte: http://www.sobiologia.com.br/conteudos/Corpo/Celula.
php.

Permeabilidade celular

Membrana Plasmtica

Toda clula viva revestida por uma pelcula muito fina que isola as organelas do ambiente
externo. Essa camada tem cerca de 5 nm de espessura e recebe o nome de membrana celular.
A membrana celular formada por duas camadas de fosfolipdios, com molculas de protenas
espalhadas entre elas. Tanto a camada dupla de
fosfolipdios quanto as protenas movem-se sem
perder a estrutura de formao.

A membrana celular tem a capacidade de


escolher o que entra e o que sai da clula. Algumas substncias podem atravessar a membrana
com facilidade, enquanto outras podem ter a sua
passagem bloqueada. Essa capacidade da membrana de selecionar a passagem de substncias
chamada permeabilidade seletiva ou semipermeabilidade.

Cerca de 50 tipos de protena j foram identificados na membrana plasmtica. Sabe-se que


alguns deles formam poros, facilitando a passagem de substncias entre os meios celulares
interno e externo. Outros ajudam a entrada ou
sada de substncias por meio da captura destas.
H tambm as protenas que reconhecem alguns
hormnios e, na presena deles, estimulam a clula a reagir de alguma maneira.

Endocitose e exocitose

A membrana plasmtica pode apresentar


alguns envoltrios externos: o glicoclice e a parede celulsica.

A exocitose a capacidade que a clula tem


de eliminar substncias previamente armazenadas em bolsas citoplasmticas.

Existem dois processos conhecidos de endocitose: a fagocitose e a pinocitose. A fagocitose ocorre quando uma clula captura uma
partcula geralmente grande por meio de invaginaes da membrana plasmtica. A pinocitose
um processo em que ocorre o englobamento de
lquido ou pequenas partculas.

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Citosol

Organelas do citosol

Aps atravessar a membrana plasmtica,


deparamo-nos com um gel aquoso, um fluido viscoso que inicialmente recebeu o nome de citoplasma. Hoje, sabemos que o citoplasma, atualmente chamado citosol, pode conter diversos
tipos de estrutura, cada qual com a sua funo,
exceto as clulas procariontes, que so relativamente simples, no apresentando sistemas de
membranas nem estruturas membranosas, alm
de redes de tubos e filamentos de protenas chamados citoesqueleto, o qual, alm de definir a
forma celular, permite a realizao de movimentos. Na maioria das clulas, o citosol o maior
compartimento nico. Nele ocorrem vrias reaes qumicas que so fundamentais para a sobrevivncia celular.

RE
uma rede de bolsas e tubos membranosos
presente nas clulas eucariontes e que preenche
grande parte do citosol. o local onde a maioria
dos componentes da membrana celular sintetizada. Ele pode ser de dois tipos: Retculo Endoplasmtico Liso (REL) ou no granuloso e Retculo
Endoplasmtico Rugoso (RER) ou granuloso.

Figura 21 RE.

Fonte: http://sorasoraia.blogspot.com.br/2012/03/reticulo-endoplasmatico-o-que-e-o.html.

Aparelho de Golgi, complexo golgiense ou


complexo de Golgi
Este componente formado por 6 a 20 sacos membranosos achatados, empilhados uns sobre os outros. Sua funo receber bolsas vindas
do RER, contendo protenas.

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Figura 22 Complexo de Golgi.

Fonte: http://doencasgenicas.blogspot.com.br/2008/02/organelo-celular-complexo-de-golgi.html.

Lisossomos

lula varia de dezenas a centenas, dependendo


da funo celular. As mitocndrias so organelas
que contm seu prprio DNA e se reproduzem
dividindo-se em duas. Alm disso, contm duas
membranas lipoproteicas, uma externa e uma
interna, que tm dobras e pregas denominadas
cristas mitocondriais. Seu interior composto
por um lquido denominado matriz mitocondrial, no qual ficam o DNA, o RNA, enzimas e ribossomos. Elas so geradoras de energia qumica
para a clula. Por meio da oxidao de molculas
de alimentos, a mitocndria produz trifosfato
de adenosina (ATP), que fornece energia para
a maioria das atividades celulares. Como nesse
processo h consumo de oxignio e liberao de
dixido de carbono, ele ficou conhecido como
respirao celular.
Figura 23 Mitocndria.

So bolsas que contm enzimas digestivas


capazes de digerir vrias substncias. Eles podem
agir de duas maneiras:
a) por meio da digesto de substncias
capturadas do meio externo celular por
fagocitose ou pinocitose;
b) por meio da digesto de algumas partes desgastadas da prpria clula.
Peroxissomos

Fonte: http://pt.wikipedia.org/wiki/Mitoc%C3%B4ndria.

So pequenas vesculas envolvidas por


membranas que contm em seu interior diversos
tipos de oxidase. Sua principal funo na clula
a oxidao dos cidos graxos, os quais sero utilizados para a sntese do colesterol e de outros importantes componentes. Tambm participam do
processo de respirao celular, o qual gera energia celular.

Plastos
So organelas presentes apenas em clulas
de algas e plantas. Apresentam trs tipos bsicos:
leucoplastos (incolores), cloroplastos (verdes) e
cromoplastos (vermelhos ou amarelos).
Citoesqueleto

Mitocndrias
Vistas ao microscpio eletrnico, lembram
a forma de um verme. Esto presentes na maioria das clulas eucariontes e seu nmero na c-

Presente apenas nas clulas eucariontes,


uma estrutura dinmica localizada no citosol,
constituda por tubos finssimos, chamados microtbulos, e filamentos proteicos da molcula

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Cristiano Alves de Carvalho

tubalina, podendo tambm conter queratina, actina e miosina. Tem variadas funes:
a) define a forma celular e organiza a sua
estrutura interna;

movimento de ondulao. Os clios so curtos e


numerosos e desempenham um movimento de
chicote. Sua principal funo a movimentao
celular.

b) permite a adeso celular clula vizinha e a superfcies extracelulares;

Pelos ou fmbrias

c) permite o deslocamento de substncias intracelulares.

So estruturas que no esto ligadas


mobilidade. Esto presentes principalmente em
bactrias gram-negativas. So filamentos ocos,
assim como os flagelos, retos e numerosos. H
diferentes tipos de pelo relacionados a diferentes
funes. Um dos pelos conhecido como F e est
relacionado com a reproduo sexual bacteriana.
Outro tipo de pelo j estudado o que auxilia a
bactria a se fixar em algumas clulas superficiais
que sero infectadas, como as geniturinrias, as
do trato respiratrio e as intestinais.

responsvel por diversos movimentos


realizados por uma clula eucarionte, entre eles:
a contrao muscular, o movimento de uma ameba, o movimento de clios e flagelos etc.
Figura 24 Citoesqueleto.

Fonte: http://www.sobiologia.com.br/conteudos/Citologia/
cito24.php.

Clios, flagelos e centrolo


Centrolo um cilindro formado por nove
conjuntos de trs microtbulos que so unidos
por protenas adesivas. Exceto os fungos e as plantas, a maioria das clulas apresenta essa organela.
Ele se apresenta em pares, um perpendicular ao
outro, localizados no centro celular ou centrossomo. Possui capacidade de autoduplicao e origina clios e flagelos.
Clios e flagelos so estruturas com filamentos mveis originados a partir dos centrolos que
migram para a periferia celular. Os flagelos geralmente so longos e poucos e desempenham um

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3.1 Nutrio e Meios de CulturaCultura

Os microrganismos so muito versteis e


exigentes em relao sua nutrio. Alguns podem crescer com apenas algumas substncias
orgnicas, enquanto outros necessitam de compostos orgnicos mais complexos. Apesar dessa
diferena, os organismos vivos compartilham
uma necessidade nutricional em comum: carbono, nitrognio e gua.
O carbono um dos elementos qumicos
mais importantes para o crescimento de bactrias e todos os organismos requerem carbono
de alguma forma. Ele forma a estrutura qumica
das trs maiores classes dos compostos orgnicos: protenas, lipdios e carboidratos. Estes so
importantes para fornecer energia para o crescimento celular e tambm servem como base do
material celular. Os microrganismos que utilizam
o carbono como principal fonte so chamados
heterotrficos. J os que utilizam o dixido de
carbono como sua principal fonte ou nica fonte
de carbono so chamados autotrficos.

O nitrognio tambm importante para o


crescimento de microrganismos. Ele parte essencial dos aminocidos que formam as protenas. Algumas bactrias fixam o nitrognio atmosfrico para a sntese celular, processo chamado
fixao de nitrognio. Outras podem utilizar compostos nitrogenados orgnicos ou inorgnicos.
Tambm so importantes o hidrognio, o
oxignio, o enxofre e o fsforo. O hidrognio e o
oxignio fazem parte de alguns compostos orgnicos. O enxofre essencial para a produo de
metionina, cistena e cistina. O fsforo faz parte
da sntese de ATP e cidos nucleicos.
Ateno
O nitrognio tambm importante para o crescimento de microrganismos e parte essencial
dos aminocidos que formam as protenas.
Algumas bactrias fixam o nitrognio atmosfrico para a sntese celular, processo chamado
fixao de nitrognio. Outras podem utilizar
compostos nitrogenados orgnicos ou inorgnicos.

3.2 Classificao dos Microrganismos em Relao ao seu Tipo de Nutrio

H duas classificaes bsicas:

Figura 25 Quimiotrficos.

quimiotrficos: aqueles que utilizam


compostos qumicos para obter energia;

Fonte: http://pt.wikipedia.org/wiki/Anexo:Taxonomia_do_
dom%C3%ADnio_Archaea.

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Cristiano Alves de Carvalho

fototrficos: aqueles que dependem


primariamente da energia solar.
Com base nesses conceitos, temos algumas
classes:
quimioautotrficos: so os organismos
que utilizam substncias inorgnicas
como fonte de energia e dixido de carbono como principal fonte de carbono;

Algumas espcies so versteis em relao


sua necessidade nutricional e no podem, portanto, ser classificadas como uma das possibilidades anteriores.
Figura 26 Metabolismo dos organismos fototrtipos.

quimio-heterotrficos: aqueles que utilizam substncias orgnicas como fonte de energia e compostos orgnicos
como principal fonte de carbono;
fotoautotrficos: aqueles que utilizam
luz solar como fonte de energia e dixido de carbono como principal fonte de
carbono;
foto-heterotrficos: aqueles que utilizam luz como fonte de energia e compostos orgnicos como principal fonte
de carbono.

Fonte: http://www.portaleducacao.com.br/Artigo/Imprimir/15542.

3.3 Meios de Cultura para Microrganismos

Figura 27 Meio de cultura.

O cultivo de microrganismos importante para o estudo de suas particularidades, como


velocidade de crescimento e identificao de espcie. Para isso, precisamos de meios de cultura
adequados, que so preparaes de nutrientes
que favorecem o crescimento em laboratrios.
Alguns podem crescer in vitro, ou seja, em meios
artificiais em laboratrio, e outros, in vivo ou em
um hospedeiro vivo.
O que so meios de cultura? Entendemos
por meios de cultura os conjuntos de substncias
formuladas de maneira adequada que so capazes de promover o crescimento de microrganismos em condies de laboratrio.

Fonte: http://www.splabor.com.br/blog/estufa-de-cultura-bacteriologica/meios-de-cultura-o-que-e-um-meio-de-cultura/.

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Para o cultivo e rotina no laboratrio e tambm para o estudo de microrganismos heterotrficos, utilizam-se meios de cultura complexos, que
so obtidos a partir de produtos naturais. Estes
so quimicamente indefinidos, mas conseguem
simular ou at mesmo melhorar o ambiente de
crescimento desses seres vivos.
Normalmente, a substncia escolhida para
o crescimento de microrganismos em meio solidificado o gar, um polissacardeo extrado das
algas marinhas. Tambm existem os meios de cultura comerciais que permitem o crescimento de
vrios microrganismos ou somente de um especfico. Eles tambm podem indicar a mudana de
pH ou induzir a produo de endsporos ou cpsulas. Tudo ir depender de qual meio de cultura
foi escolhido.

Meios de Cultura para Fungos


Os fungos absorvem os nutrientes do meio.
Todos eles so heterotrficos. Em laboratrio,
muitos podem crescer em uma simples mistura
contendo acar, nitrognio (orgnico ou inorgnico) e alguns minerais, sendo que alguns poucos
fungos necessitam da presena de algumas vitaminas. Por outro lado, outros fungos s conseguem crescer em um meio complexo, que contenha uma boa variedade de compostos orgnicos.
Figura 28 Meio de cultura para fungos.

Saiba mais
A maioria das bactrias pode ser cultivada em
laboratrio, utilizando meios de cultura.
Diferentes espcies de bactria apresentam uma
grande variedade quanto s exigncias mnimas
nutricionais.

Meios de Cultura para Bactrias


Geralmente, os meios de cultura escolhidos
para o crescimento bacteriano so aqueles que se
assemelham ao seu habitat. Se a bactria utilizar
glicose, esta poder ser adicionada ao meio. Se
necessitar de nitrognio ou carbono, estes podero ser adicionados tambm. Existem, ainda, as
bactrias fastidiosas, que so aquelas que exigem cerca de 20 aminocidos e vrias vitaminas
para crescer. Para elas, utilizamos os meios complexos, os quais contm uma grande variedade
de substncias orgnicas preparadas a partir de
substncias naturais.

Fonte: http://scienceblogs.com.br/meiodecultura/tag/meio-de-cultura/.

Meios de Cultura para Protozorios


Para o crescimento de protozorios, necessitamos do ajuste de pH, que oscila entre 6 e 8.
Por serem heterotrficos aerbios, possuem exigncias nutricionais complexas e muito variadas
entre as diferentes espcies.

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Figura 29 Protozorio.

Meios de Cultura Especiais


Meio de enriquecimento: geralmente apresenta-se na forma lquida, com
composio qumica rica em nutrientes. Sua finalidade permitir que as
bactrias contidas em uma amostra
clnica aumentem em nmero. Temos
como exemplos: caldo Brain Heart Infusion (BHI) e caldo tetrationato.

Fonte: http://entendendoumpoucodeciencias.blogspot.com.
br/2011/04/sesi-7-ano-protozoarios-e-algas.html.

Meios de Cultura para Algas


As algas utilizam luz para produzir energia
e, portanto, necessitam somente de dixido de
carbono, gua e alguns ons inorgnicos solveis
para o seu crescimento em um meio de cultura. Algumas algas, como a euglena, so capazes
de crescer na ausncia de luz solar, tornando-se
heterotrficas, necessitando, assim, de uma pequena quantidade de substratos. Existem poucos
meios de cultura comerciais para algas. Devido a
esse fato, muitas vezes, os meios devem ser preparados manualmente.
Figura 30 Algas.

Meio de transporte: consiste em um


meio isento de nutrientes. Nele, h um
agente redutor, que pode ser tioglicolato ou cistena. Geralmente, mantm o
pH favorvel. Previne a desidratao de
secrees durante o transporte. Evita a
oxidao e autodestruio enzimtica
dos patgenos presentes. So exemplos: meio de Stuart, meio de Cary-Blair
e caldo tioglicolato.
Meio seletivo: sua finalidade selecionar as espcies que se deseja isolar e
impedir o crescimento de outros microrganismos por meio da adio de
corantes, antibiticos e outras substncias com capacidade inibitria para alguns germes. So exemplos: gar manitol salgado e gar SS.
Meio diferencial: este meio possibilita
a diferenciao entre vrios gneros e
espcies de microrganismo por possuir
substncias especiais que permitem
uma distino presuntiva, evidenciada
na mudana de colorao ou na morfologia das colnias. So exemplos: gar
Eosin Methilene Blue (EMB), gar McConkey e gar Hektoen.
Meio indicador: utilizamos este meio
para o estudo das propriedades bioqumicas das bactrias e isso auxilia na sua
identificao. O mais simples aquele
usado no estudo das reaes de fermentao. So exemplos: gar Triple Sugar Iron (TSI) e gar citrato de Simmons.

Fonte: http://scienceblogs.com.br/meiodecultura/2012/05/
microrganismo-de-sexta-volvox/.

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Seleo dos Meios de Cultura


muito importante a escolha do meio de
cultura ideal. Ela est condicionada flora patognica desse local. Em geral, usado mais de um
tipo de meio, com o objetivo de fornecer condies de crescimento a todos os patgenos que
possam estar presentes no local de onde foi realizada a coleta.
Geralmente, so utilizados os meios de cultura na semeadura primria. Atualmente, o procedimento mais utilizado a aquisio de meios

pr-fabricados e fornecidos de forma desidratada. Para utiliz-los, fundamental a pesagem criteriosa da quantidade necessria ao volume desejado, seguida de dissoluo e esterilizao.
Os meios de cultura podem ser lquidos ou
caldos que promovem o crescimento indiscriminado com turvao do meio. Tambm podem ser
slidos, favorecendo o crescimento de colnias
isoladas, sendo muito utilizados para culturas puras. H tambm os semisslidos, que apresentam
uma menor adio de gar, o que favorece a mobilidade bacteriana.

3.4 Resumo do Captulo

Caro(a) aluno(a),
Nas bactrias, podemos encontrar as seguintes organelas ou estruturas: flagelos, pelos, glicoclice,
parede celular, membrana plasmtica, ribossomos e material gentico. J nas clulas eucariticas, podemos encontrar mais estruturas ou organelas, por serem mais complexas: flagelos, clios, parede celular,
membrana citoplasmtica, ncleo, RE, complexo de Golgi, mitocndria e cloroplastos. Vejamos as estruturas e suas devidas funes.
Membrana Plasmtica
Toda clula viva revestida por uma pelcula muito fina que isola as organelas do ambiente externo. Essa camada tem cerca de 5 nm de espessura e recebe o nome de membrana celular. A membrana
celular formada por duas camadas de fosfolipdios, com molculas de protenas espalhadas entre elas.
Tanto a camada dupla de fosfolipdios quanto as protenas movem-se sem perder a estrutura de formao.
A membrana plasmtica pode apresentar alguns envoltrios externos: o glicoclice e a parede celulsica.
Permeabilidade celular
Algumas substncias podem atravessar a membrana com facilidade, enquanto outras podem ter
a sua passagem bloqueada. Essa capacidade da membrana de selecionar a passagem de substncias
chamada permeabilidade seletiva ou semipermeabilidade.

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Endocitose e exocitose
Existem dois processos conhecidos de endocitose: a fagocitose e a pinocitose. A fagocitose ocorre quando uma clula captura uma partcula geralmente grande por meio de invaginaes da membrana plasmtica. A pinocitose um processo em que ocorre o englobamento de lquido ou pequenas
partculas.
A exocitose a capacidade que a clula tem de eliminar substncias previamente armazenadas em
bolsas citoplasmticas.
Citosol
Aps atravessar a membrana plasmtica, deparamo-nos com um gel aquoso, um fluido viscoso
que inicialmente recebeu o nome de citoplasma.
Organelas do citosol
RE
uma rede de bolsas e tubos membranosos presente nas clulas eucariontes e que preenche grande parte do citosol. Ele pode ser de dois tipos: REL ou no granuloso e RER ou granuloso.
Aparelho de Golgi, complexo golgiense ou complexo de Golgi
Este componente formado por 6 a 20 sacos membranosos achatados, empilhados uns sobre os
outros. Sua funo receber bolsas vindas do RER, contendo protenas.
Lisossomos
So bolsas que contm enzimas digestivas capazes de digerir vrias substncias. Eles podem agir
de duas maneiras:
a) por meio da digesto de substncias capturadas do meio externo celular por fagocitose ou
pinocitose;
b) por meio da digesto de algumas partes desgastadas da prpria clula.
Peroxissomos
So pequenas vesculas envolvidas por membranas que contm em seu interior diversos tipos de
oxidase. Sua principal funo na clula a oxidao dos cidos graxos, os quais sero utilizados para a
sntese do colesterol e de outros importantes componentes. Tambm participam do processo de respirao celular, o qual gera energia celular.

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Mitocndrias
Esto presentes na maioria das clulas eucariontes e seu nmero na clula varia de dezenas a centenas, dependendo da funo celular. As mitocndrias so organelas que contm seu prprio DNA e se
reproduzem dividindo-se em duas. Por meio da oxidao de molculas de alimentos, a mitocndria produz ATP, que fornece energia para a maioria das atividades celulares. Como nesse processo h consumo
de oxignio e liberao de dixido de carbono, ele ficou conhecido como respirao celular.
Plastos
So organelas presentes apenas em clulas de algas e plantas. Apresentam trs tipos bsicos: leucoplastos (incolores), cloroplastos (verdes) e cromoplastos (vermelhos ou amarelos).
Citoesqueleto

Presente apenas nas clulas eucariontes, uma estrutura dinmica localizada no citosol, constituda por tubos finssimos, chamados microtbulos, e filamentos proteicos da molcula tubalina, podendo tambm conter queratina, actina e miosina. Tem variadas funes:
a) define a forma celular e organiza a sua estrutura interna;
b) permite a adeso celular clula vizinha e a superfcies extracelulares;
c) permite o deslocamento de substncias intracelulares.
Clios, flagelos e centrolo

Centrolo um cilindro formado por nove conjuntos de trs microtbulos que so unidos por protenas adesivas. Exceto os fungos e as plantas, a maioria das clulas apresenta essa organela.
Clios e flagelos so estruturas com filamentos mveis originados a partir dos centrolos que migram para a periferia celular. Os flagelos geralmente so longos e poucos e desempenham um movimento de ondulao. Os clios so curtos e numerosos e desempenham um movimento de chicote. Sua
principal funo a movimentao celular.
Pelos ou fmbrias
Esto presentes principalmente em bactrias gram-negativas. Um dos pelos conhecido como F
e est relacionado com a reproduo sexual bacteriana. Outro tipo de pelo j estudado o que auxilia
a bactria a se fixar em algumas clulas superficiais que sero infectadas, como as geniturinrias, as do
trato respiratrio e as intestinais.
Os microrganismos so muito versteis e exigentes em relao sua nutrio. Alguns podem crescer com apenas algumas substncias orgnicas, enquanto outros necessitam de compostos orgnicos
mais complexos. Apesar dessa diferena, os organismos vivos compartilham uma necessidade nutricional em comum: carbono, nitrognio e gua.

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O carbono um dos elementos qumicos mais importantes para o crescimento de bactrias e todos os organismos requerem carbono de alguma forma. O nitrognio tambm importante para o crescimento de microrganismos. Ele parte essencial dos aminocidos que formam as protenas. Algumas
bactrias fixam o nitrognio atmosfrico para a sntese celular, processo chamado fixao de nitrognio. Outras podem utilizar compostos nitrogenados orgnicos ou inorgnicos. Tambm so importantes
o hidrognio, o oxignio, o enxofre e o fsforo.
H duas classificaes bsicas:
quimiotrficos: aqueles que utilizam compostos qumicos para obter energia;.
fototrficos: aqueles que dependem primariamente da energia solar.
Com base nesses conceitos, temos algumas classes:
quimioautotrficos: so os organismos que utilizam substncias inorgnicas como fonte de
energia e dixido de carbono como principal fonte de carbono;
quimio-heterotrficos: aqueles que utilizam substncias orgnicas como fonte de energia e
compostos orgnicos como principal fonte de carbono;
fotoautotrficos: aqueles que utilizam luz solar como fonte de energia e dixido de carbono
como principal fonte de carbono;
foto-heterotrficos: aqueles que utilizam luz como fonte de energia e compostos orgnicos
como principal fonte de carbono.

Algumas espcies so versteis em relao sua necessidade nutricional e no podem, portanto,
ser classificadas como uma das possibilidades anteriores.
O cultivo de microrganismos importante para o estudo de suas particularidades, como velocidade de crescimento e identificao de espcie. Para isso, precisamos de meios de cultura adequados, que
so preparaes de nutrientes que favorecem o crescimento em laboratrios. Alguns podem crescer in
vitro, ou seja, em meios artificiais em laboratrio, e outros, in vivo ou em um hospedeiro vivo.
Entendemos por meios de cultura os conjuntos de substncias formuladas de maneira adequada
que so capazes de promover o crescimento de microrganismos em condies de laboratrio.
Geralmente, os meios de cultura escolhidos para o crescimento bacteriano so aqueles que se assemelham ao seu habitat. Se a bactria utilizar glicose, esta poder ser adicionada ao meio. Se necessitar de
nitrognio ou carbono, estes podero ser adicionados tambm. Existem, ainda, as bactrias fastidiosas,
que so aquelas que exigem cerca de 20 aminocidos e vrias vitaminas para crescer. Para elas, utilizamos os meios complexos, os quais contm uma grande variedade de substncias orgnicas preparadas
a partir de substncias naturais.
Os fungos absorvem os nutrientes do meio. Todos eles so heterotrficos. Em laboratrio, muitos
podem crescer em uma simples mistura contendo acar, nitrognio (orgnico ou inorgnico) e alguns
minerais, sendo que alguns poucos fungos necessitam da presena de algumas vitaminas. Por outro
lado, outros fungos s conseguem crescer em um meio complexo, que contenha uma boa variedade de
compostos orgnicos.
Para o crescimento de protozorios, necessitamos do ajuste de pH, que oscila entre 6 e 8. Por serem
heterotrficos aerbios, possuem exigncias nutricionais complexas e muito variadas entre as diferentes
espcies.

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As algas utilizam luz para produzir energia e, portanto, necessitam somente de dixido de carbono,
gua e alguns ons inorgnicos solveis para o seu crescimento em um meio de cultura. Algumas algas,
como a euglena, so capazes de crescer na ausncia de luz solar, tornando-se heterotrficas, necessitando, assim, de uma pequena quantidade de substratos.
Existem alguns meios de cultura que chamamos especiais. So eles: meio de enriquecimento, meio
de transporte, meio seletivo, meio diferencial e meio indicador.
muito importante a escolha do meio de cultura ideal. Ela est condicionada flora patognica
desse local. Em geral, usado mais de um tipo de meio, com o objetivo de fornecer condies de crescimento a todos os patgenos que possam estar presentes no local de onde foi realizada a coleta.
Os meios de cultura podem ser lquidos ou caldos que promovem o crescimento indiscriminado
com turvao do meio. Tambm podem ser slidos, favorecendo o crescimento de colnias isoladas, sendo muito utilizados para culturas puras. H tambm os semisslidos, que apresentam uma menor adio
de gar, o que favorece a mobilidade bacteriana.

3.5 Atividades Propostas

1. Explique a diferena entre endocitose e exocitose.


2. O que mitocndria? Por que essa organela muito importante para o estudo da microbiologia?
3. O que so meios de cultura?
4. Quais so os meios de cultura especiais existentes para o crescimento microbiano?

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CULTIVO E CRESCIMENTO MICROBIANO

Caro(a) aluno(a),
Neste captulo, iremos entender por que
o cultivo de microrganismos muito importante para o estudo da microbiologia. Somente por
meio dele conseguimos fazer os microrganismos
viveis e crescerem para posterior estudo.
Em microbiologia, entendemos por crescimento o aumento do nmero de clulas e no
o aumento do tamanho celular. Muitos so os
fatores que podem interferir no crescimento de
microrganismos. As quatro principais condies
fsicas so temperatura, atmosfera gasosa, pH e
presso osmtica. Para obtermos sucesso em um
cultivo de microrganismos, alm da condio fsica ideal, necessria uma combinao de nutrientes apropriados.
Temperatura
Uma srie de reaes qumicas que ocorrem nos microrganismos sofre ao da temperatura; logo, entendemos por que este fator tem
uma grande importncia no seu cultivo.
Taxa de crescimento o nmero de divises celulares ocorridas por hora.
H trs tipos de temperatura para o crescimento microbiano: mnima, tima e mxima. Elas
so conhecidas como temperaturas cardinais e
podem variar dependendo do ciclo de vida da
espcie. Se a taxa de crescimento de uma determinada espcie de microrganismo rpida, dizemos que conseguimos obter a temperatura tima de crescimento.

Os microrganismos podem ser classificados em trs grupos de acordo com a temperatura


ideal para o seu crescimento:
psicrfilos: so assim denominados os
microrganismos que crescem em baixa
temperatura, que pode variar entre 15
e 20 C ou ser mais baixa. As razes pelas quais estes seres vivos s se desenvolvem nessas temperaturas no so
bem esclarecidas, mas sabe-se que em
altas temperaturas algumas enzimas
e a membrana citoplasmtica sofrem
danos. Podemos encontrar bactrias,
fungos, algas e protozorios nessas
condies. Eles so normalmente encontrados em guas frias, oceanos e regies polares. A maioria dos microrganismos marinhos est classificada neste
grupo;
mesfilos: so assim denominados os
microrganismos que crescem em temperaturas moderadas ou medianas. A
maioria dos microrganismos est classificada neste grupo. Eles crescem em
temperaturas que podem variar entre
25 e 40 C. As bactrias saprfitas, os
fungos, as algas e os protozorios crescem no limite mnimo dessa variao. J
os microrganismos que so parasitas de
intestino humano e animal crescem no
limite mximo. Os patgenos para o homem crescem melhor em temperaturas
em torno de 37 C;
termfilos: so assim denominados os
microrganismos que crescem em altas
temperaturas, que podem variar entre

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43

Cristiano Alves de Carvalho

estritos morrem na presena desse gs.


H uma variedade grande dos nveis de
tolerncia da presena do gs para os
microrganismos anaerbios;

40 e 85 C, crescendo melhor entre 50


e 60 C. Eles podem ser localizados em
reas vulcnicas, em nascentes quentes e at em misturas de fertilizantes. A
maioria destes seres vivos procaritica. No conhecida nenhuma clula
eucaritica que cresa em temperaturas acima de 60 C.

microrganismos microaerfilos: so
aqueles que podem utilizar oxignio
nas reaes qumicas ocorridas em seu
interior para obter energia. No entanto,
ao contrrio dos aerbios, eles no resistem a nveis de oxignio de 21% presentes na atmosfera e crescem melhor
em nveis que variam entre 1 e 15%.
Esse fato est relacionado aos radicais
perxido e perxido de hidrognio que
so originados nas culturas de microrganismos incubadas em condies de
anaerobiose.

Atmosfera Gasosa
Para o crescimento ideal dos microrganismos, necessria a presena de quantidades
variadas de gases, como oxignio, dixido de
carbono, nitrognio e metano. Alguns gases so
essenciais para o crescimento, assim como outros
podem ser letais. O dixido de carbono e o oxignio so os principais gases que afetam diretamente o crescimento de clulas microbianas.
Podemos classificar os microrganismos em
quatro grupos em relao ao oxignio gasoso:
microrganismos aerbios: so assim
classificados os microrganismos que requerem oxignio para o seu crescimento e podem crescer em uma atmosfera
padro de 21% de oxignio, sendo denominados aerbios;
microrganismos facultativos: so aqueles que conseguem crescer na presena
do ar atmosfrico e tambm so capazes de crescer em anaerobiose. Eles
no requerem oxignio, mas podem
utiliz-lo para produo de energia em
reaes qumicas. Em condies anaerbias, eles obtm energia por meio de
um processo denominado fermentao;
microrganismos anaerbios: so aqueles que podem morrer na presena de
oxignio, no podem crescer na presena dele e no o utilizam para a produo de energia. Alguns anaerbios at
conseguem suportar pequenas quantidades de oxignio, mas os anaerbios

44

pH
O pH timo para o crescimento dos microrganismos baseado no valor mdio da variao
de pH em que o crescimento ocorrer. So realizadas medies que aceleram ou retardam o crescimento em relao aos diferentes valores de pH
e calculada uma mdia de pH ideal para o desenvolvimento de cada espcie de microrganismo.
Para crescer bem em um meio cido ou bsico, um microrganismo deve conseguir manter
o seu pH intracelular em torno de 7,5, independentemente do valor do pH externo. Uma clula
viva possui recursos prprios para manter seu pH
interno constante pela expulso ou absoro de
ons de hidrognio pela clula. Dessa forma, o pH
do meio externo tem que sofrer mudanas drsticas antes que o pH interno da clula seja afetado.
H uma extensa variao de pH na natureza
e tambm h microrganismos espalhados por todos os lugares. Conclumos que as diferentes espcies de microrganismo apresentam diferentes
tolerncias de pH e, por isso, podem se adaptar
a diversos habitats. So exemplos de pH de microrganismos: para a maioria da bactrias, a valor
mnimo est em torno de 4 e o mximo, em torno
de 9; os bolores e as leveduras apresentam uma

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variao maior, sendo que o valor mdio timo


para seu desenvolvimento em torno de 5 a 6; os
protozorios toleram pH entre 6,7 e 7,7; e as algas
toleram entre 4 e 8,5.
Tambm devemos levar em considerao
alguns outros fatores para o crescimento de microrganismos. So eles:
luz: alguns microrganismos so fotossintticos e necessitam da presena de
luz solar para seu desenvolvimento;
gua: representa de 80 a 90% da clula
e afeta diretamente o crescimento microbiano;

presso hidrosttica: aquela exercida nas clulas pelo peso da gua que
permanece em sua superfcie. Os microrganismos que crescem no fundo
dos oceanos tm a presso hidrosttica
exercida sobre eles e, se no for criado
um ambiente semelhante em laboratrio, seu crescimento no ser possvel.
Eles morrem em um meio com baixa
presso hidrosttica, pois possuem vesculas de gs que se expandem na descompresso, rompendo a clula. Os microrganismos dependentes de presso
so denominados barfilos.

4.1 Crescimento dos Microrganismos

Se semearmos adequadamente os microrganismos e os incubarmos em condies timas


para a espcie, conseguiremos o crescimento esperado. Em algumas espcies de bactria, a populao atinge seu nmero mximo em 24 horas.
Outras necessitam de um perodo de incubao
maior para a sua populao atingir o nmero mximo.
O crescimento em uma populao normalmente significa um aumento no nmero de
clulas. Nessa fase, dois fenmenos ocorrem: o
crescimento ou a reproduo das clulas individualmente e o crescimento ou o aumento na populao.
Reproduo

A reproduo uma caracterstica presente em todos os seres vivos. ela quem define a
vida, sendo fundamental para a manuteno da
espcie. Como j foi estudado, os seres vivos s
surgem a partir de outros seres vivos iguais a
eles por meio da reproduo. A reproduo est
relacionada com a capacidade mpar do DNA de
se duplicar. Quem comanda e coordena todo o

processo de diviso celular o DNA presente nos


cromossomos.
Os seres vivos apresentam vrios tipos de
reproduo, mas todos eles podem ser agrupados em duas grandes categorias:reproduoassexuadae reproduo sexuada.

Reproduo assexuada
Os seres vivos que surgem por reproduo
assexuada so geneticamente idnticos entre si.
Esses indivduos s tero patrimnio gentico
diferente se sofrerem algum tipo de mutao gnica, ou seja, se ocorrer alterao nas sequncias
de bases nitrogenadas de uma ou mais molculas
de DNA. Vrios seres vivos se reproduzem assexuadamente e tambm existem vrios tipos de
reproduo assexuada.

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Cristiano Alves de Carvalho

Figura 31 Reproduo assexuada.

DNA e de todas as outras substncias e estruturas da clula. Est subdividida em trs perodos:
perodo G1: o perodo em que a clula est produzindo substncias. Ocorre
a produo de enzimas e tambm de
RNA. Neste perodo, a clula aumenta
de tamanho;
perodo S: perodo em que ocorrem a
sntese e produo do DNA;

Fonte: www.fcnoticias.com.br.

Nos eucariontes, tanto os unicelulares


quanto os multicelulares, a reproduo assexuada est relacionada com a mitose. No caso dos
microrganismos unicelulares, o tipo de reproduo assexuada que lhes permite se dividirem
em dois denominadobipartio. Esse processo
tambm ocorre nos procariontes, mas no h mitose, como nos eucariontes.
Mitose
A mitose um processo de reproduo
que ocorre na clula durante parte do ciclo celular. Resumidamente, o processo de mitose ocorre quando uma clula diploide d origem a duas
outras clulas diploides idnticas clula-me e
tambm entre si.
Possui quatro fases. Antes de estud-las, vejamos o processo do ciclo celular, que apresenta
duas fases.
Ciclo celular
o conjunto de fenmenos que ocorrem
na clula viva durante um perodo entre as suas
divises.
Fases do ciclo celular
1. Interfase: o perodo de maior metabolismo
celular. Nela ocorrem a sntese e a duplicao do

46

perodo G2:semelhante ao perodo G1,


porm, neste perodo, o DNA est duplicado.
2. Diviso celular: neste perodo que ocorre
a mitose. Todas as estruturas para formar uma
nova clula j esto duplicadas.
Fases da mitose
1.Prfase: fase em que acromatina(DNA) comea a se condensar. Os centrolos afastam-se
para os polos da clula, criando fibras, chamadas
fibras do fuso acromtico. A membrana nuclear
desaparece com os nuclolos.
2.Metfase: a principal caracterstica desta fase
a disposio dos cromossomos (cromatina)
bem no centro da clula, formando uma imagem
caracterstica conhecida como placa equatorial.
Para que isso ocorra, os cromossomos condensam-se totalmente e unem-se s fibras do fuso
por meio dos centrmeros.
3.Anfase: fase em que ocorre a separao. As
fibras do fuso se encurtam em direo aos polos,
levando consigo parte dos cromossomos, as cromtides. Cada uma delas passa a constituir um
cromossomo independente.
4. Telfase: os cromossomos j se encontram
nos polos junto aos centrolos. A cromatina comea a se descondensar. Ressurgem a membrana nuclear e os nuclolos e, por fim, a clula se
divide. A diviso em si chamada citocinese.

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Figura 32 Fases da mitose.

Fonte: www.fcnoticias.com.br.

Reproduo sexuada
Neste tipo de reproduo, um novo indivduo formado pela fuso de duas clulas sexuais
diferentes, denominadas gametas. Essas clulas
so originadas de pais de sexos diferentes ou tipos de relao sexuada. Quando os gametas se
encontram e se fundem, temos a fertilizao. A
clula formada no encontro recebe o nome de zigoto. Ele formado pela mistura do material gentico dos dois gametas. O zigoto sofre mitoses e
se torna um novo organismo.
Como se formam os gametas? Os gametas
so formados por meio de um processo chamado
meiose. Eles so haploides; isso quer dizer que
contm somente um cromossomo de cada par
de cromossomos presente nas clulas somticas,
conhecidas como 1n. Por exemplo, em humanos,
o nmero diploide ou 2n 46 e a haploide ou 1n
23.
Meiose

nmero de cromossomos de uma espcie. Esse


processo dividido em duas etapas: a primeira
chamada primeira diviso meitica ou meiose I e
a segunda chamada segunda diviso meitica
ou meiose II. A primeira etapa tambm chamada
reducional. Nela ocorre a diminuio do nmero
de cromossomos. Na segunda, tambm chamada
equacional, o nmero de cromossomos das clulas que se dividem mantido igual ao das clulas
que se formam.
A meiose pode ocorrer em diferentes momentos do ciclo de vida, dependendo da espcie
de ser vivo: na formao de gametas (meiose gamtica), na produo de esporos (meiose esprica) e logo aps a formao do zigoto (meiose
zigtica).
Fases da meiose
Prfase I: uma fase longa, subdividida
em cinco subfases:

A meiose um processo de diviso celular


no qual uma clula diploide (2n) origina quatro
clulas haploides (1n), reduzindo pela metade o

leptteno: inicia-se a individualizao dos cromossomos, estabelecendo a condensao (espiralizao), com maior compactao dos
cromonemas;

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47

Cristiano Alves de Carvalho

zigteno: aproximao dos cromossomos homlogos, processo


denominado sinapse;
paquteno: grau mximo de condensao dos cromossomos. Os
braos curtos e longos tornam-se
mais evidentes. Dois desses braos,
em respectivos homlogos, ligam-se, formando estruturas denominadas bivalentes ou ttrades. Nesse
momento, ocorre o crossing-over,
que significa a troca de segmentos
(permutao de genes) entre cromossomos homlogos;
diplteno: incio da separao dos
cromossomos homlogos, configurados de regies quiasmas (ponto
de intercesso existente entre os
braos entrecruzados, portadores
de caractersticas similares);
diacinese: finalizao da prfase I,
com separao definitiva dos cromossomos homlogos, agora com
segmentos trocados. A carioteca
desaparece temporariamente.
Metfase I: os cromossomos ficam agrupados na regio equatorial da clula,
associados s fibras do fuso.
Anfase I: encurtamento das fibras do
fuso, com deslocamento dos cromossomos homlogos para os
polos da clula. Nesta fase, no h
separao do centrmero (ponto
de ligao das cromtides irms
em um cromossomo).

se duplicam e se dirigem para os


polos, formando o fuso acromtico;
metfase II: os cromossomos se organizam no plano equatorial, com
suas cromtides ainda unidas pelo
centrmero, ligando-se s fibras do
fuso;
anfase II: separao das cromtides irms, que so puxadas pelas
fibras em direo a polos opostos;
telfase II: reaparecimento da carioteca. Reorganizao do nuclolo e
diviso do citoplasma, completando a diviso meitica, totalizando
quatro clulas filhas haploides.

Figura 33 Fases da meiose.

Telfase I: desespiralizao dos


cromossomos e retorno do aspecto de filamentos. Reaparecimento
do nuclolo e da carioteca. Diviso
do citoplasma (citocinese), originando duas clulas haploides.
Meiose II:

48

prfase II: os cromossomos se


condensam novamente. O nuclolo e a carioteca desaparecem novamente. Os centrolos

Fonte: www.lookfordiagnosis.com.

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4.2 Crescimento de Cultura Bacteriana

O crescimento bacteriano iniciado por uma


nica clula segue a Progresso Geomtrica (PG)
a seguir: 1 2 2 2 ... 2, em que o
expoente n est relacionado ao nmero de geraes. Durante o crescimento ativo de uma cultura
e quando no ocorre morte celular, as populaes de clulas crescem exponencialmente e seu
nmero aumenta por meio de uma PG.
O tempo de gerao o intervalo que um
microrganismo necessita para se dividir ou o
tempo necessrio para que a populao de uma
cultura se duplique. Ele varivel de espcie para
espcie.
O crescimento de uma espcie bacteriana
em cultura pode ser caracterizado em termos
quantitativos. Para tal, deve-se levar em considerao o nmero de geraes que se desenvolvem
em um determinado perodo de incubao, bem
como o tempo de gerao e a taxa de crescimento (que corresponde ao nmero de geraes por
hora). Os valores obtidos nos informam sobre a
natureza das espcies.
Tambm relacionada ao crescimento, pode-se obter a curva de crescimento de um microrganismo. Se as clulas microbianas crescem em um
frasco ou tubo contendo meio de cultura lquido,
dizemos que elas esto em um sistema fechado.
Isso porque nenhum nutriente novo adicionado e nenhum produto de excreo removido. A
partir desse sistema, podemos obter a curva de
crescimento em um sistema fechado. Essa curva nos traz informaes sobre o crescimento balanceado de uma espcie. Durante o crescimento
balanceado, h um aumento ordenado da clula,
mas depois de certo perodo a populao mxima atingida e ocorrem a exausto de nutrientes
e a intoxicao das clulas pelos prprios produtos de excreo. A partir desse fato, a reproduo
inibida e os microrganismos morrem.

avaliam o nmero de clulas e os mais sofisticados tambm conseguem avaliar o peso celular.
Algumas tcnicas determinam a quantidade dos
constituintes celulares, como RNA, DNA e protenas.
Pode-se obter o crescimento de microrganismos por meio da cultura contnua. O volume
da cultura e a concentrao de clulas so mantidos por meio da adio de meio estril fresco na
mesma proporo em que se remove o meio utilizado contendo os microrganismos. Nessas condies, a taxa em que as clulas so produzidas e
eliminadas mantm-se constante e em equilbrio.
Em um ambiente normal, os microrganismos crescem de acordo com as condies favorveis a cada um. As clulas no crescem todas ao
mesmo tempo. Contudo, em laboratrio, pode-se
obter o crescimento de todas as clulas ao mesmo tempo, a chamada cultura sincrnica. Essa
sincronizao no crescimento celular pode ser
obtida pela mudana de seu meio fsico ou da
composio qumica do meio em que se encontra. Esse tipo de crescimento importante, pois
permite o estudo do crescimento microbiano, a
organizao e a morfognese durante algumas
fases do ciclo de reproduo dos microrganismos.

A medida do crescimento de uma determinada populao obtida por vrias tcnicas, das
mais simples s mais sofisticadas. Esses mtodos
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49

Cristiano Alves de Carvalho

4.3 Metabolismo Microbiano

Quando conhecemos as estruturas das clulas procariticas, podemos estudar as atividades que capacitam os microrganismos a se desenvolver. Os processos realizados para manter a
vida deles envolvem e necessitam de um grande
nmero de reaes bioqumicas, desde as mais
simples at as mais complexas.
A maioria dos processos bioqumicos que
ocorrem nas bactrias tambm ocorre nos microrganismos eucariticos e nas clulas dos organismos pluricelulares, inclusive nos seres humanos.
No entanto, existem reaes bioqumicas que so
exclusivas das bactrias, que as condicionam
realizao de reciclagens que o ser humano no
pode realizar. So exemplos: a digesto da celulose e a utilizao de petrleo como nutriente. Devido presena desse metabolismo, as bactrias
so capazes de reciclar alguns elementos depois
que outros organismos utilizaram-nos. Algumas
bactrias tambm podem utilizar elementos
inorgnicos para se desenvolver, como dixido
de carbono, enxofre, ferro e hidrognio.
Ateno
Existem reaes bioqumicas que so exclusivas
das bactrias, que as condicionam realizao
de reciclagens que o ser humano no pode realizar.

Esto citadas a seguir as principais importncias do estudo do metabolismo microbiano:


relao existente entre microrganismos
e doenas;
funo dos microrganismos na natureza;
importncia econmica dos microrganismos;
controle e cultivo dos microrganismos;
estudo e desenvolvimento de mtodos
para diagnstico dos microrganismos;

50

estudo e controle dos processos de deteriorao de materiais;


reciclagem da matria orgnica.
Reaes Anablicas e Catablicas
Definimos metabolismo como o conjunto
de todas as reaes qumicas que ocorrem dentro
de um organismo vivo. Como as reaes qumicas liberam ou requerem energia, o metabolismo
pode ser interpretado como um ato de balanceamento de energia. Ele pode ser dividido em duas
classes de reaes qumicas: as que liberam energia e as que necessitam de energia.
Geralmente, nas clulas vivas, as reaes qumicas que so reguladas por enzimas que liberam
energia so aquelas envolvidas no catabolismo (
a quebra de compostos orgnicos complexos em
compostos mais simples). Essas reaes so geralmente reaes hidrolticas, ou seja, utilizam gua
para a quebra das ligaes qumicas, e exergnicas,
produzindo mais energia do que consomem. Podemos citar como exemplo a quebra do acar em
dixido de carbono e gua.
Outro fator que interfere na ocorrncia de
uma reao qumica a chamada taxa de reao.
Essa taxa de reao a frequncia na qual ocorrem
as colises, contendo energia suficiente para que a
reao acontea. Ela depende do nmero de molculas reagentes que estejam no nvel da energia de
ativao ou acima dele. Pode-se aumentar a taxa de
reao de uma substncia elevando sua temperatura. Dessa maneira, as molculas se movem mais rapidamente e o calor aumenta tanto a frequncia das
colises quanto o nmero de molculas que atingem o nvel da energia de ativao. Outra maneira
de aumentar o nmero de colises entre as molculas de uma reao qumica aumentar a presso.
Tambm podemos aumentar a concentrao dos
reagentes para acelerar a reao. Nos seres vivos, as
enzimas aumentam a taxa de reao e no elevam a
temperatura, o que seria um fator muito prejudicial.

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4.4 Elementos de Enzimologia

So denominados catalisadores todas as


substncias que podem acelerar uma reao qumica sem que ela seja alterada. Nas clulas, as
enzimas tm funo de catalisadores biolgicos.
Cada enzima atua em uma substncia especfica.
Elas so chamadas substratos da enzima e cada
uma catalisa apenas uma reao. Quando uma
enzima atua no substrato, forma-se um complexo, o chamado complexo enzima-substrato. Ele
permite que as colises sejam mais eficientes e
diminui a energia de ativao necessria para que
haja uma reao. A capacidade da enzima de acelerar uma reao sem a necessidade de elevar a
temperatura fundamental para os seres vivos. O
aumento exagerado da temperatura poderia causar a destruio das protenas celulares. A funo
das enzimas de acelerar as reaes bioqumicas,
causando um pequeno aumento da temperatura
que seja suportvel para o funcionamento normal celular.
As enzimas geralmente tm sua nomenclatura terminada em ASE. Elas podem ser agrupadas em seis classes. Esse critrio de agrupamento baseado no tipo de reao qumica que elas
realizam ou catalisam. De acordo com o tipo de
reao qumica que elas auxiliam, recebem a sua
nomenclatura. Podemos citar alguns exemplos:
a classe chamada oxidorredutase est envolvida no auxlio das reaes de oxidao-reduo.
As oxidorredutases que retiram o hidrognio a
partir de um substrato so chamadas desidrogenases; as enzimas que adicionam oxignio so
chamadas oxidases.

gnica, recebe o nome de coenzima. As pores


formadas pela apoenzima e pelo cofator recebem
o nome de holoenzima ou enzima completa
ativa. Sem o cofator, a apoenzima no tem funo. Alguns cofatores so ons metlicos, incluindo cobre, ferro, magnsio, mangans, clcio, cobalto e zinco. Eles podem auxiliar na catlise de
uma reao para formao de uma ponte entre a
enzima e o substrato.
A grande maioria das coenzimas derivada de vitaminas. Podemos citar duas coenzimas
muito importantes para o metabolismo celular:
a nicotinamida adenina dinucleotdeo (NAD+)
e a nicotinamida adenina dinucleotdeo fosfato
(NADP+). Ambas as enzimas so formadas por
derivados da vitamina B-niacina (cido nicotnico)
e suas funes no organismo so ser carreadoras
de eltrons. A NAD+ est principalmente envolvida em reaes catablicas, ou seja, aquelas que
produzem energia, e a NADP+ est principalmente envolvida nas reaes anablicas, ou seja,
aquelas que requerem energia.
Outras importantes coenzimas so as da
classe das flavinas. A flavina mononucleotdeo
(FMN) e a flavina adenina dinucleotdeo (FAD)
possuem em sua estrutura um derivado da vitamina B riboflavina e tambm so carreadoras de
eltrons. A coenzima A (CoA), outra importante
coenzima, contm um derivado da vitamina A,
o cido pantotnico. Essa coenzima tem um importante papel na sntese e na degradao das
gorduras em uma srie de reaes de oxidao
chamada ciclo de Krebs, o qual ocorre no interior
das mitocndrias.

Estrutura das Enzimas


Mecanismo de Ao das Enzimas
Algumas enzimas so formadas inteiramente por protenas e outras podem apresentar uma
poro proteica denominada apoenzima e uma
poro no proteica chamada cofator, que pode
ser formada por ons de zinco, ferro, magnsio ou
clcio. Caso esse cofator seja uma molcula inor-

As enzimas atuam nas reaes qumicas e


conseguem diminuir sua energia de ativao. Leia
a seguir a sequncia de ao de uma enzima sobre uma reao qumica:

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51

Cristiano Alves de Carvalho

1. a superfcie do substrato entra em contato com o stio ativo, o qual uma


regio especfica da superfcie da molcula da enzima;
2. formado o complexo enzima-substrato, o qual um processo intermedirio;
3. a molcula de substrato modificada
ou transformada pelo rearranjo dos
tomos j existentes, pela quebra da
molcula de substrato ou pela combinao com outra molcula;
4. as molculas de substrato transformadas, que so os produtos da reao, so
liberadas da molcula da enzima. Esse
processo ocorre porque elas no mais
se encaixam no stio ativo da enzima;
5. a enzima que permanece inalterada e
foi solta agora se encontra livre para
reagir com outras molculas de substrato.
Fatores que Influenciam a Atividade das
Enzimas
Vrios fatores podem influenciar a atividade
de uma enzima. Entre os mais importantes, podemos destacar a temperatura, a concentrao do
substrato, o pH e a ausncia ou presena de inibidores. Vejamos como esses fatores podem agir:
temperatura: na maioria das reaes
qumicas, com o aumento da temperatura, a velocidade das transformaes
tambm aumentada. As molculas
em altas temperaturas movem-se mais
rapidamente do que em baixas temperaturas. Em baixas temperaturas,
pode-se no ter calor suficiente para
uma reao qumica ocorrer. Mas tambm h um fator que deve ser levado
em considerao: uma elevao acima
da temperatura tima para a reao
enzimtica ocorrer reduz drasticamente a velocidade da reao. Isso ocorre
porque a enzima sofre desnaturao,

52

a chamada desnaturao enzimtica.


A desnaturao consiste na quebra de
ligaes de hidrognio e de outras ligaes no covalentes. Ela modifica o
arranjo dos aminocidos no stio ativo.
Como consequncia, sua forma alterada, o que causa a perda da atividade
cataltica da enzima. Algumas substncias, como metais pesados, lcool, cidos concentrados, radiao ultravioleta
e bases, tambm podem desnaturar
uma enzima. Em relao temperatura
tima para a maioria das bactrias se
reproduzirem no organismo humano,
podemos considerar entre 35 e 40 C;
pH: a alterao do pH ideal para que
ocorra uma ao enzimtica causa diminuio da velocidade da reao, independentemente se essa alterao
para cima ou para baixo. Se ocorrer mudanas drsticas no pH, poder ocorrer
desnaturao enzimtica;
concentrao do substrato: quanto
maior for a concentrao do substrato,
maior ser a velocidade da reao, at
que atinja a velocidade mxima. H
uma velocidade mxima a ser alcanada e isso depende da quantidade de
enzimas que podem catalisar uma reao especfica. Em alta concentrao
de substrato, a enzima encontra-se em
saturao. Isso quer dizer que seu stio
ativo permanece sempre ocupado por
molculas de substrato. Dessa forma,
um aumento na concentrao do substrato no afetar em nada a velocidade
da reao, pois todos os stios ativos j
estaro ocupados. Vale ressaltar que,
em condies celulares normais, as enzimas no esto saturadas com substrato;
inibidores: os inibidores enzimticos
so classificados como competitivos e
no competitivos:

inibidores competitivos: so aqueles que ocupam o stio ativo de uma

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enzima e competem por ele com


o substrato. Podemos citar como
exemplo a sulfanilamida. Essa substncia tem a capacidade de inibir a
enzima cujo substrato o cido para-aminobenzoico (PABA). O PABA
um nutriente essencial utilizado
por muitas bactrias na sntese do
cido flico. Na presena de sulfanilamida, a enzima que normalmente
converte PABA em cido flico se
combina com ela e o cido flico
no sintetizado. Dessa forma, as
bactrias no podem crescer. As
clulas animais e humanas no so
prejudicadas pela presena dessa
substncia, pois no utilizam PABA
para produzir o cido flico;

inibidores no competitivos: so
aqueles que no competem com
o substrato pelo stio ativo da enzima. Eles agem de outra maneira:
se ligam com outra parte da enzima, provocando a chamada inibio alostrica. Essa ligao causa
modificao da conformao do
stio ativo. Dessa forma, ele se torna
no funcional e tem a sua atividade
enzimtica reduzida. As interaes
alostricas tambm podem servir
para ativar uma enzima.

4.5 Produo de Energia

Todas as reaes que ocorrem nas vias catablicas concentram energia dentro das ligaes
do ATP. O ATP conhecido como a molcula que
possui ligaes de alta energia, mas, na realidade, o termo mais apropriado provavelmente seja
ligaes estveis. A energia contida nessas ligaes pode ser liberada de modo rpido e fcil,
apesar de no se encontrar em alta quantidade,
suprindo prontamente a clula para que ocorram
as reaes metablicas. Para compreender melhor esse assunto, vamos estudar os aspectos gerais da produo de energia: o conceito de oxidao-reduo e os mecanismos de gerao do ATP.

mado oxidao-reduo ou simplesmente redox.


tambm chamado desidrogenao, pois, na
maioria das oxidaes biolgicas, ocorre a perda
de tomos de hidrognio. As clulas utilizam as
reaes de redox em seu catabolismo para extrair
energia das molculas de nutrientes. A glicose
(C6H12O6), um exemplo de composto que possui
muitos tomos de hidrognio, altamente reduzida, contendo uma grande quantidade de energia potencial. Devido a esse fato, um nutriente
muito importante para os organismos.

Reaes de Oxidao-Reduo
A oxidao a remoo de eltrons de um
tomo ou molcula. Essa reao muitas vezes
produz energia. A reduo quando a molcula recebe um ou mais eltrons. As reaes de
oxidao e reduo ocorrem simultaneamente.
Cada vez que uma substncia oxidada, outra
reduzida. O pareamento dessas reaes chaUnisa | Educao a Distncia | www.unisa.br

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Cristiano Alves de Carvalho

Figura 34 Oxidao-reduo.

Fonte: www.mundodaquimica.com.br

Figura 35 Oxidao-reduo.

Fonte: www.quimicasemsegredos.com.

Formao de ATP

energia geralmente adquirida na reao em que o substrato foi oxidado;

A maior parte da energia liberada durante as


reaes de oxidao-reduo permanece armazenada no interior da clula para a formao de
ATP. Para form-lo, um grupo fosfato adicionado
ao difosfato de adenosina (ADP), com uma entrada de energia. Esse processo de adio de fosfato
a um composto qumico chamado fosforilao.
Os organismos utilizam trs mecanismos de fosforilao para gerar ATP a partir de ADP:
fosforilao em nvel de substrato:
neste processo, o ATP formado pela
transferncia de um grupo fosfato de
alta energia a partir de um composto
fosforilado ao ADP. Essa ligao rica em

54

fosforilao oxidativa: uma via metablica que utiliza energia liberada pela
oxidao de nutrientes, de maneira a
produzir ATP. O processo refere-se
fosforilao do ADP em ATP, utilizando,
para isso, a energia liberada nas reaes
de oxidao-reduo;
fotofosforilao: este processo ocorre
somente nas clulas fotossintticas, ou
seja, aquelas que contm pigmentos
que absorvem a luz, como a clorofila.

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Figura 36 Fosforilao.

Fonte: www.sobiologia.com.br.

4.6 Catabolismo dos Carboidratos

Grande parte dos microrganismos oxida os


carboidratos para utiliz-los como fonte primria
de energia celular. Entendemos por catabolismo
de carboidrato a quebra de suas molculas para
produo de energia, processo que de grande
importncia para o metabolismo celular. Entre os
carboidratos mais comuns como fonte de energia
para os microrganismos, podemos citar a glicose.
Os microrganismos podem realizar dois processos para obter energia por meio desse carboidrato: a respirao celular e a fermentao. Ambos
os processos tm incio com a gliclise. Aps, seguem vias diferentes. O processo de respirao,
utilizando a glicose para obter energia, ocorre em
trs principais passos. Vejamos:
1. a gliclise o processo de oxidao
da glicose em cido pirvico. Dessa
reao, h a produo de algum ATP e
NADH contendo energia;
2. o ciclo de Krebs a oxidao da acetilcoenzima A (acetil-CoA), que um derivado do cido pirvico, em dixido de
carbono. Dessa reao, h a produo
de algum ATP, NADH contendo energia

e outro produto que carreador de eltron reduzido, o FADH2;


3. a cadeia de transporte de eltrons
NADH e FADH2 sofre oxidao. Nesse
processo, os eltrons que transportam
os substratos so entregues para uma
cascata de reaes de oxidao-reduo, envolvendo uma srie de carreadores adicionais de eltrons. A energia
liberada nessas reaes utilizada para
formar uma quantidade considervel
de ATP. No processo de respirao, a
maioria do ATP formada por esse terceiro passo.
Respirao Celular
Aps a quebra da glicose em cido pirvico (tambm conhecido com piruvato), esse cido
pode ser utilizado tanto no processo de fermentao quanto no de respirao celular. Entendemos
por respirao celular o processo gerador de ATP.
Nela, molculas so oxidadas e o aceptor final de
eltrons geralmente uma molcula inorgnica.

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Cristiano Alves de Carvalho

Uma caracterstica da respirao a ao de uma


cadeia de transporte de eltrons.

Respirao aerbica

Existem dois tipos de respirao: a anaerbica e a aerbica. Na respirao aerbica, o microrganismo utiliza o oxignio para sua sobrevivncia e o aceptor final de eltrons o oxignio.
J na respirao anaerbica, o microrganismo
no utiliza o oxignio e pode ser morto pela sua
presena; o aceptor final de eltrons uma molcula inorgnica, no sendo o oxignio, ou ainda
mais raramente uma molcula orgnica.

Ciclo de Krebs
O ciclo de Krebs tambm conhecido como
ciclo dos cidos tricarboxlicos (TCA) ou ciclo do
cido ctrico. Entendemos por ciclo de Krebs o
processo em que ocorre uma srie de reaes
bioqumicas nas quais uma grande quantidade
de energia qumica armazenada na acetil-CoA e
liberada por etapas.

Figura 37 Ciclo de Krebs.

Fonte: http://aprendendobiologia.criaforum.com.

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Respirao anaerbica
Neste processo, o aceptor final de eltrons
uma substncia inorgnica, que no seja o oxignio. Algumas bactrias realizam respirao anaerbica e utilizam nitrato e sulfato como aceptores
finais. Esse processo realizado por elas fundamental para os ciclos do nitrognio e do enxofre
que ocorrem na natureza.

Somente uma parte do ciclo de Krebs funciona em condies anaerbicas e nem todos os
carreadores da cadeia de transporte de eltrons
participam desse tipo de respirao. Devido a
isso, a produo final de ATP nunca to elevada quanto na respirao aerbica. Consequentemente, os microrganismos anaerbicos crescem
mais lentamente que os aerbicos.

4.7 Catabolismo dos Lipdios e das Protenas

Apesar de mencionarmos somente a glicose como molcula utilizada para a produo de


energia, os microrganismos tambm oxidam lipdios e protenas para a mesma finalidade. Todas
essas reaes que ocorrem no interior de suas clulas esto relacionadas.
As gorduras so denominadas lipdios, que
so formados por cidos graxos e glicerol. Os microrganismos produzem uma enzima chamada
lipase, cuja funo quebrar a gordura em suas

menores unidades. Aps a ao dessa enzima, o


cido graxo e o glicerol so metabolizados separadamente.
As protenas tambm so importantes fontes de energia celular, porm so muito grandes.
Para entrarem na clula, as enzimas proteases e
peptidases quebram-nas em unidades menores,
os aminocidos. Somente nessa forma conseguem atravessar a membrana plasmtica.

4.8 Introduo Fermentao

Outro destino do cido pirvico gerado na


gliclise participar do processo chamado fermentao, sendo transformado em um produto
orgnico. Afermentao um processo anaerbio de produo de ATP, no qual no h o envolvimento da cadeia respiratria. Nesse processo, o
aceptor final de hidrognio um composto orgnico. um mecanismo muito importante na produo deenergiaem condies anaerbicas.
As bactrias podem realizar tanto o processo de fermentao quanto arespirao anaerbica. Para algumas bactrias anaerbias, a
simples presena do gs oxignio pode ser letal.
Isso faz com que esses microrganismos habitem
solos profundos e regies onde o teor de oxignio praticamente zero. Os organismos com es-

sas condies de sobrevivncia so conhecidos


como anaerbios estritos. Existem tambm outros microrganismos que so considerados anaerbios facultativos. Na presena do gs oxignio,
eles realizam o processo de respirao e, na sua
ausncia, realizam a fermentao. o caso dos
fungosSaccharomyces cerevisiae e de muitas bactrias.
Na fermentao, o cido pirvico metabolizado em vrios compostos, de acordo com o
tipo de fermentao. Vejamos os tipos de fermentao:
fermentao lctica: o piruvato (ou cido pirvico) convertido emcido lctico. Durante a gliclise, uma molcula

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Cristiano Alves de Carvalho

de glicose oxidada em duas molculas de piruvato. Essa oxidao fornece


energia, que utilizada para formar
duas molculas de ATP. A seguir, as duas
molculas de cido pirvico so reduzidas por duas molculas de NADH, que,
por sua vez, formam duas molculas de
cido lctico. O cido lctico o produto final da reao e no sofre mais oxidao. A maior parte da energia produzida pela reao permanece armazenada
no cido. Dois importantes gneros de
bactrias que realizam fermentao lctica so os Streptococcus e os Lactobacillus. Os microrganismos que produzem
somente cido lctico so conhecidos
como homolticos ou homofermentativos. A fermentao do cido lctico realizada por alguns microrganismos pode
resultar na deteriorao de alimentos,
mas tambm pode produzir chucrute a
partir de repolho, conservas de pepino
e iogurte a partir de leite;
Figura 38 Fermentao lctica.

fermentao alcolica: o piruvato


convertido em etanol e dixido de carbono. Este processo tem seu incio com
a gliclise de uma molcula de glicose
para produzir duas molculas de cido pirvico e duas molculas de ATP.
Seguindo o processo, as duas molculas de cido pirvico so convertidas
em duas molculas de acetaldedo e
duas de dixido de carbono. As duas
molculas de acetaldedo sofrem reduo por duas molculas de NADH para
formar duas molculas de etanol. Este
tambm um processo de baixo rendimento energtico, porque a maioria
da energia contida na molcula inicial
de glicose permanece em seu produto
final, o etanol. A fermentao alcolica
realizada por vrias bactrias e leveduras. O etanol e o dixido de carbono
que so produzidos pela levedura Saccharomyces so teis para os humanos.
O etanol produzido pelas leveduras o
lcool utilizado na produo das bebidas alcolicas e o dixido de carbono
quem permite a reao do crescimento
da massa do po;
fermentao heterocclica: o piruvato
convertido em cido lctico, outros cidos e lcoois. Os organismos que produzem cido lctico, com outros cidos
ou lcoois, so conhecidos como heterolcticos ou heterofermentativos.
Saiba mais
O dixido de carbono produzido na descarboxilao do piruvato pelas leveduras responsvel
pela carbonatao caracterstica do champanhe
(vinho) e da cerveja, assim como pelo crescimento da massa do po e do bolo.

Fonte: www.wikipedia.org.

58

Apesar de o processo de fermentao ocorrer na ausncia de oxignio, alguns microrganismos so capazes de realiz-lo mesmo na pre-

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sena de grandes concentraes de oxignio. As


leveduras so um exemplo.

no necessita utilizar o ciclo de Krebs ou


uma cadeia de transporte de eltrons;

Resumidamente, temos as principais caractersticas do processo de fermentao:

utiliza uma molcula orgnica como


aceptor final de eltrons;

sua finalidade liberar energia a partir


de acares ou outras molculas orgnicas, como aminocidos, cidos orgnicos, purinas e pirimidinas;

produz uma pequena quantidade de


ATP, uma vez que grande parte da energia original na glicose permanece nas
ligaes qumicas dos produtos orgnicos finais, como o etanol e o cido lctico.

no necessita do gs oxignio, mas sua


presena no impede a ocorrncia do
processo fermentativo;

4.9 Resumo do Captulo


Caro(a) aluno(a),
Em microbiologia, entendemos por crescimento o aumento do nmero de clulas e no o aumento
do tamanho celular. Muitos so os fatores que podem interferir no crescimento de microrganismos. As
quatro principais condies fsicas so temperatura, atmosfera gasosa, pH e presso osmtica. Para obtermos sucesso em um cultivo de microrganismos, alm da condio fsica ideal, necessria uma combinao de nutrientes apropriados.
Se semearmos adequadamente os microrganismos e os incubarmos em condies timas para a
espcie, conseguiremos o crescimento esperado. Em algumas espcies de bactria, a populao atinge
seu nmero mximo em 24 horas. Outras necessitam de um perodo de incubao maior para a sua populao atingir o nmero mximo.
O crescimento em uma populao normalmente significa um aumento no nmero de clulas. Nessa
fase, dois fenmenos ocorrem: o crescimento ou a reproduo das clulas individualmente e o crescimento ou o aumento na populao.
A reproduo uma caracterstica presente em todos os seres vivos. ela quem define a vida, sendo
fundamental para a manuteno da espcie. Como j foi estudado, os seres vivos s surgem a partir de
outros seres vivos iguais a eles por meio da reproduo. A reproduo est relacionada com a capacidade mpar do DNA de se duplicar. Quem comanda e coordena todo o processo de diviso celular o DNA
presente nos cromossomos.
Os seres vivos apresentam vrios tipos de reproduo, mas todos eles podem ser agrupados em
duas grandes categorias:reproduoassexuadae reproduo sexuada.
O crescimento bacteriano iniciado por uma nica clula segue a PG a seguir: 1 2 2 2 ...
2, em que o expoente n est relacionado ao nmero de geraes. Durante o crescimento ativo de uma
cultura e quando no ocorre morte celular, as populaes de clulas crescem exponencialmente e seu
nmero aumenta por meio de uma PG.
O tempo de gerao o intervalo que um microrganismo necessita para se dividir ou o tempo
necessrio para que a populao de uma cultura se duplique. Ele varivel de espcie para espcie.

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O crescimento de uma espcie bacteriana em cultura pode ser caracterizado em termos quantitativos. Para tal, deve-se levar em considerao o nmero de geraes que se desenvolvem em um determinado perodo de incubao, bem como o tempo de gerao e a taxa de crescimento (que corresponde ao
nmero de geraes por hora). Os valores obtidos nos informam sobre a natureza das espcies.
Tambm relacionada ao crescimento, pode-se obter a curva de crescimento de um microrganismo.
Se as clulas microbianas crescem em um frasco ou tubo contendo meio de cultura lquido, dizemos que
elas esto em um sistema fechado. Isso porque nenhum nutriente novo adicionado e nenhum produto
de excreo removido. A partir desse sistema, podemos obter a curva de crescimento em um sistema
fechado.
Pode-se obter o crescimento de microrganismos por meio da cultura contnua. O volume da cultura e a concentrao de clulas so mantidos por meio da adio de meio estril fresco na mesma proporo em que se remove o meio utilizado contendo os microrganismos. Nessas condies, a taxa em que as
clulas so produzidas e eliminadas mantm-se constante e em equilbrio.
Em um ambiente normal, os microrganismos crescem de acordo com as condies favorveis a cada
um. As clulas no crescem todas ao mesmo tempo. Contudo, em laboratrio, pode-se obter o crescimento de todas as clulas ao mesmo tempo, a chamada cultura sincrnica. Essa sincronizao no crescimento
celular pode ser obtida pela mudana de seu meio fsico ou da composio qumica do meio em que se
encontra. Esse tipo de crescimento importante, pois permite o estudo do crescimento microbiano, a organizao e a morfognese durante algumas fases do ciclo de reproduo dos microrganismos.
Quando conhecemos as estruturas das clulas procariticas, podemos estudar as atividades que capacitam os microrganismos a se desenvolver. Os processos realizados para manter a vida deles envolvem
e necessitam de um grande nmero de reaes bioqumicas, desde as mais simples at as mais complexas.
Esto citadas a seguir as principais importncias do estudo do metabolismo microbiano:
relao existente entre microrganismos e doenas;
funo dos microrganismos na natureza;
importncia econmica dos microrganismos;
controle e cultivo dos microrganismos;
estudo e desenvolvimento de mtodos para diagnstico dos microrganismos;
estudo e controle dos processos de deteriorao de materiais;
reciclagem da matria orgnica.

Definimos metabolismo como o conjunto de todas as reaes qumicas que ocorrem dentro de um
organismo vivo. Como as reaes qumicas liberam ou requerem energia, o metabolismo pode ser interpretado como um ato de balanceamento de energia. Ele pode ser dividido em duas classes de reaes
qumicas: as que liberam energia e as que necessitam de energia.
Geralmente, nas clulas vivas, as reaes qumicas que so reguladas por enzimas que liberam energia so aquelas envolvidas no catabolismo ( a quebra de compostos orgnicos complexos em compostos
mais simples). Essas reaes so geralmente reaes hidrolticas, ou seja, utilizam gua para a quebra das
ligaes qumicas, e exergnicas, produzindo mais energia do que consomem. Outro fator que interfere
na ocorrncia de uma reao qumica a chamada taxa de reao.
So denominados catalisadores todas as substncias que podem acelerar uma reao qumica sem
que ela seja alterada. Nas clulas, as enzimas tm funo de catalisadores biolgicos. Cada enzima atua
em uma substncia especfica. Elas so chamadas substratos da enzima e cada uma catalisa apenas uma

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reao. Quando uma enzima atua no substrato, forma-se um complexo, o chamado complexo enzima-substrato. Ele permite que as colises sejam mais eficientes e diminui a energia de ativao necessria
para que haja uma reao. As enzimas geralmente tm sua nomenclatura terminada em ASE. Elas podem
ser agrupadas em seis classes. Esse critrio de agrupamento baseado no tipo de reao qumica que elas
realizam ou catalisam.
Algumas enzimas so formadas inteiramente por protenas e outras podem apresentar uma poro
proteica denominada apoenzima e uma poro no proteica chamada cofator, que pode ser formada
por ons de zinco, ferro, magnsio ou clcio. A grande maioria das coenzimas derivada de vitaminas.
As enzimas atuam nas reaes qumicas e conseguem diminuir sua energia de ativao.
Vrios fatores podem influenciar a atividade de uma enzima. Entre os mais importantes, podemos
destacar a temperatura, a concentrao do substrato, o pH e a ausncia ou presena de inibidores.
Todas as reaes que ocorrem nas vias catablicas concentram energia dentro das ligaes do ATP.
O ATP conhecido como a molcula que possui ligaes de alta energia, mas, na realidade, o termo mais
apropriado provavelmente seja ligaes estveis. A energia contida nessas ligaes pode ser liberada de
modo rpido e fcil, apesar de no se encontrar em alta quantidade, suprindo prontamente a clula para
que ocorram as reaes metablicas.
A oxidao a remoo de eltrons de um tomo ou molcula. Essa reao muitas vezes produz
energia. A reduo quando a molcula recebe um ou mais eltrons. As reaes de oxidao e reduo
ocorrem simultaneamente. Cada vez que uma substncia oxidada, outra reduzida.
A maior parte da energia liberada durante as reaes de oxidao-reduo permanece armazenada
no interior da clula para a formao de ATP. Para form-lo, um grupo fosfato adicionado ao difosfato de
adenosina (ADP), com uma entrada de energia. Esse processo de adio de fosfato a um composto qumico chamado fosforilao.
Grande parte dos microrganismos oxida os carboidratos para utiliz-los como fonte primria de
energia celular. Entendemos por catabolismo de carboidrato a quebra de suas molculas para produo
de energia, processo que de grande importncia para o metabolismo celular. Entre os carboidratos mais
comuns como fonte de energia para os microrganismos, podemos citar a glicose. Os microrganismos podem realizar dois processos para obter energia por meio desse carboidrato: a respirao celular e a fermentao. Ambos os processos tm incio com a gliclise. Aps, seguem vias diferentes. O processo de
respirao, utilizando a glicose para obter energia, ocorre em trs principais passos: a gliclise, o ciclo de
Krebs e a cadeia de transporte de eltrons NADH e FADH2, que sofre oxidao.
Aps a quebra da glicose em cido pirvico (tambm conhecido com piruvato), esse cido pode ser
utilizado tanto no processo de fermentao quanto no de respirao celular. Entendemos por respirao
celular o processo gerador de ATP. Nela, molculas so oxidadas e o aceptor final de eltrons geralmente
uma molcula inorgnica. Uma caracterstica da respirao a ao de uma cadeia de transporte de eltrons.
Existem dois tipos de respirao: a anaerbica e a aerbica. Na respirao aerbica, o microrganismo
utiliza o oxignio para sua sobrevivncia e o aceptor final de eltrons o oxignio. J na respirao anaerbica, o microrganismo no utiliza o oxignio e pode ser morto pela sua presena; o aceptor final de eltrons uma molcula inorgnica, no sendo o oxignio, ou ainda mais raramente uma molcula orgnica.
O ciclo de Krebs tambm conhecido como ciclo de TCA ou ciclo do cido ctrico. Entendemos por
ciclo de Krebs o processo em que ocorre uma srie de reaes bioqumicas nas quais uma grande quantidade de energia qumica armazenada na acetil-CoA e liberada por etapas.
No processo de respirao anaerbica, o aceptor final de eltrons uma substncia inorgnica, que
no seja o oxignio. Algumas bactrias realizam respirao anaerbica e utilizam nitrato e sulfato como
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aceptores finais. Esse processo realizado por elas fundamental para os ciclos do nitrognio e do enxofre
que ocorrem na natureza.
Somente uma parte do ciclo de Krebs funciona em condies anaerbicas e nem todos os carreadores da cadeia de transporte de eltrons participam desse tipo de respirao. Devido a isso, a produo
final de ATP nunca to elevada quanto na respirao aerbica. Consequentemente, os microrganismos
anaerbicos crescem mais lentamente que os aerbicos.
Apesar de mencionarmos somente a glicose como molcula utilizada para a produo de energia,
os microrganismos tambm oxidam lipdios e protenas para a mesma finalidade. Todas essas reaes que
ocorrem no interior de suas clulas esto relacionadas.
As gorduras so denominadas lipdios, que so formados por cidos graxos e glicerol. Os microrganismos produzem uma enzima chamada lipase, cuja funo quebrar a gordura em suas menores unidades. Aps a ao dessa enzima, o cido graxo e o glicerol so metabolizados separadamente.
As protenas tambm so importantes fontes de energia celular, porm so muito grandes. Para entrarem na clula, as enzimas proteases e peptidases quebram-nas em unidades menores, os aminocidos.
Somente nessa forma conseguem atravessar a membrana plasmtica.
Outro destino do cido pirvico gerado na gliclise participar do processo chamado fermentao,
sendo transformado em um produto orgnico. Afermentao um processo anaerbio de produo de
ATP, no qual no h o envolvimento da cadeia respiratria. Nesse processo, o aceptor final de hidrognio
um composto orgnico. um mecanismo muito importante na produo deenergiaem condies anaerbicas.
Asbactrias podem realizar tanto o processo de fermentao quanto arespirao anaerbica. Para
algumas bactrias anaerbias, a simples presena do gs oxignio pode ser letal. Isso faz com que esses
microrganismos habitem solos profundos e regies onde o teor de oxignio praticamente zero. Os organismos com essas condies de sobrevivncia so conhecidos como anaerbios estritos. Na fermentao,
o cido pirvico metabolizado em vrios compostos, de acordo com o tipo de fermentao. H alguns
tipos de fermentao: fermentao lctica, fermentao alcolica e fermentao heterocclica.
Apesar de o processo de fermentao ocorrer na ausncia de oxignio, alguns microrganismos so
capazes de realiz-lo mesmo na presena de grandes concentraes de oxignio. As leveduras so um
exemplo.

4.10 Atividades Propostas

1. Em microbiologia, o que entendemos por crescimento? Quais so os principais fatores que


afetam o crescimento dos microrganismos?
2. O que metabolismo? Quais so as principais importncias do estudo do metabolismo microbiano?
3. Do que so formadas as enzimas? Quais so os fatores que podem interferir em sua atuao?
4. O que entendemos por catabolismo de carboidratos? Quais so os trs passos da respirao
celular?
5. O que fermentao? Quais so os processos que uma bactria realiza para produo de energia?

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RESPOSTAS COMENTADAS DAS


ATIVIDADES PROPOSTAS

CAPTULO 1
1. Entendemos por microbiologia o estudo dos microrganismos. Estes correspondem a um grande grupo de seres vivos que vivem como clulas nicas ou agrupadas. Com exceo dos vrus,
todos os microrganismos possuem estrutura celular. Eles podem ser encontrados em todos os
ambientes dos ecossistemas e estar associados com organismos multicelulares. Habitam o corpo humano de indivduos saudveis de forma benigna (por exemplo, a flora intestinal).
2. Quadro comparativo:

Fonte: profpaulosr.dynip.sapo.pt.

3. Atualmente, sabemos que um ancestral comum originou as arqueobactrias, as eubactrias


(que so os procariticos) e os eucariticos e que existem cinco reinos de classificao dos
seres vivos: monera, protista, fungi, plantae e animalia.
CAPTULO 2
1. As tcnicas de isolamento de microrganismos em cultura pura so:
tcnica de esgotamento por meio de estrias superficiais: descrita como o esgotamento
do material presente em uma ala ou agulha de semeadura por meio de estrias na superfcie do meio de cultura;
tcnica de semeadura em superfcie: com o auxlio de uma ala de vidro, o inculo espalhado na superfcie do gar;
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mtodo de pour plate: consiste na mistura do inculo em um gar fundido que tenha sido
resfriado a 45 C e distribudo posteriormente em placas de Petri esterilizadas.
2. Por meio de vrias tcnicas laboratoriais, podemos caracterizar os microrganismos de algumas
formas:
caractersticas morfolgicas: o arranjo da clula, seu tamanho e sua forma podem ser identificados por meio de vrios tipos de microscpio e com vrios mtodos de colorao. Dessa forma, podem-se estudar as estruturas celulares internas e externas;
caractersticas nutricionais e culturais: cada espcie de microrganismo pode apresentar caractersticas particulares em relao ao seu modo de se nutrir e formar culturas. O estudo
sobre esses assuntos ajuda muito na sua identificao. Se soubermos com qual microrganismo estamos trabalhando, fica mais fcil agrup-los e classific-lo nos grupos taxonmicos;
caractersticas metablicas: uma grande variedade de reaes qumicas ocorre no interior
dos microrganismos, onde molculas pequenas e simples podem se transformar em grandes e complexas ou o contrrio. Esse processo conhecido como metabolismo. Por meio
de vrios testes laboratoriais, podemos determinar a atividade metablica de um microrganismo e, dessa forma, conseguimos identificar qual espcie ele pertence;
caractersticas antignicas: conhecemos como antgeno a substncia que, quando injetada
em um organismo animal, estimula a sntese de seus anticorpos. As bactrias apresentam
vrias estruturas fsicas em sua superfcie e estas podem ter ao como se fossem antgenos, quando, em testes laboratoriais, estimulam a produo de anticorpos, que podem
ser utilizados para determinar a presena de antgenos nicos, caracterizando, assim, uma
espcie;
caractersticas patognicas: patognicos como chamamos os microrganismos que causam doenas. Os que no causam so chamados no patognicos. O organismo infectado
pelo patgeno chamado hospedeiro. Precisamos identificar se o microrganismo trabalhado ou no um patgeno;
caractersticas genticas: atualmente, podemos contar com a anlise gentica dos microrganismos. Existem alguns testes, como a sonda de DNA, por exemplo, que so comercializados em forma de kits para fins de pesquisa e diagnstico. Uma fita de DNA do microrganismo conhecido misturada com a fita de um desconhecido. Caso eles sejam da mesma
espcie, as duas fitas se combinam. No mercado, h atualmente o kit para identificao da
Salmonella sp.
3. Podemos encontrar vrias formas de bactria. As que so encontradas individualmente apresentam uma das trs seguintes formas:
cocos: so clulas esfricas ou arredondadas, podendo ser ovoides ou achatadas em um
dos lados (principalmente quando se encontram ao lado de outra clula);
bacilos: so clulas cilndricas ou em forma de basto. Entre as espcies de bacilos, h uma
diferena considervel de comprimento e largura. Alguns bacilos podem apresentar suas
pores terminais quadradas, arredondadas, afiladas ou pontiagudas;
espirilos: so bactrias que apresentam suas formas em estilo saca-rolha, espiral ou helicoidal.

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As formas apresentadas so as tradicionais, mas podem existir modificaes delas. Por exemplo, temos a Pasteuria, que se apresenta em forma de pera, e a Caryophanon, que tem forma
de discos distribudos como pilhas de moedas. Tambm existem as bactrias que possuem variaes de forma dentro de uma mesma espcie, chamadas pleomrficas, episdio conhecido
como pleomorfismo. Isso pode nos levar a confundir que uma cultura est contaminada por
outro tipo de bactria.
Arranjo
As diferentes espcies de bactria podem se agrupar de algumas formas. Vejamos:
diplococos: ocorrem quando um coco se divide em um plano;
estreptoccicos: ocorrem quando um coco se divide em um plano e permanece ligado
depois de vrias divises, formando uma cadeia.

Tambm podem ocorrer arranjos celulares mais complexos, formando ttrades (quando um
coco se divide no ngulo direito no primeiro plano de diviso), srcinas (quando ocorre uma
diviso adicional no terceiro plano, formando pacotes cbicos de oito clulas) e formas de
cacho de uva (quando ocorre diviso em trs planos de forma irregular, formando agrupamentos).
Em relao aos bacilos, eles formam arranjos em uma variedade de padres caractersticos,
mas existem algumas excees: arranjo de paliada (grupo de clulas alinhadas lado a lado,
como palitos de fsforo), roseta (lembra as flores penduradas em caules), cadeias (as clulas
ficam enfileiradas, mantendo uma pequena superfcie de contato) e tricomas (so similares s
cadeias, porm a superfcie de contato entre as clulas muito maior).
CAPTULO 3
1. Existem dois processos conhecidos de endocitose: a fagocitose e a pinocitose.
Fagocitose: ocorre quando uma clula captura uma partcula geralmente grande por meio
de invaginaes da membrana plasmtica.
Pinocitose: um processo no qual ocorre o englobamento de lquido ou pequenas partculas.
Exocitose a capacidade que a clula tem de eliminar substncias previamente armazenadas
em bolsas citoplasmticas.
2. Mitocndria uma organela citoplasmtica que est presente na maioria das clulas eucariontes e seu nmero na clula varia de dezenas a centenas, dependendo da funo celular. As
mitocndrias so organelas que contm seu prprio DNA e se reproduzem dividindo-se em
duas. Alm disso, contm duas membranas lipoproteicas, uma externa e uma interna, que tm
dobras e pregas denominadas cristas mitocondriais. Seu interior composto por um lquido
denominado matriz mitocondrial, no qual ficam o DNA, RNA, enzimas e ribossomos. Elas so
muito importantes para o estudo da microbiologia, porque so geradoras de energia qumica
para a clula. Por meio da oxidao de molculas de alimentos, a mitocndria produz ATP, que
fornece energia para a maioria das atividades celulares. Como nesse processo h consumo de

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oxignio e liberao de dixido de carbono, ele ficou conhecido como respirao celular, processo que muito estudado nesta disciplina.
3. Entendemos por meios de cultura os conjuntos de substncias formuladas de maneira adequada que so capazes de promover o crescimento de microrganismos em condies de laboratrio.
4. A seguir, esto descritos os meios de cultura especiais:
meio de enriquecimento: geralmente apresenta-se na forma lquida, com composio qumica rica em nutrientes. Sua finalidade permitir que as bactrias contidas em uma amostra clnica aumentem em nmero. Temos como exemplos: caldo BHI e caldo tetrationato;
meio de transporte: consiste em um meio isento de nutrientes. Nele, h um agente redutor,
que pode ser tioglicolato ou cistena. Geralmente, mantm o pH favorvel. Previne a desidratao de secrees durante o transporte. Evita a oxidao e autodestruio enzimtica
dos patgenos presentes. So exemplos: meio de Stuart, meio de Cary-Blair e caldo tioglicolato;
meio seletivo: sua finalidade selecionar as espcies que se deseja isolar e impedir o crescimento de outros microrganismos por meio da adio de corantes, antibiticos e outras
substncias com capacidade inibitria para alguns germes. So exemplos: gar manitol
salgado e gar SS;
meio diferencial: este meio possibilita a diferenciao entre vrios gneros e espcies de
microrganismo por possuir substncias especiais que permitem uma distino presuntiva,
evidenciada na mudana de colorao ou na morfologia das colnias. So exemplos: gar
EMB, gar McConkey e gar Hektoen;
meio indicador: utilizamos este meio para o estudo das propriedades bioqumicas das bactrias e isso auxilia na sua identificao. O mais simples aquele usado no estudo das reaes de fermentao. So exemplos: gar TSI e gar citrato de Simmons.
CAPTULO 4
1. Em microbiologia, entendemos por crescimento o aumento do nmero de clulas e no o aumento do tamanho celular. Muitos so os fatores que podem interferir no crescimento de microrganismos. As quatro principais condies fsicas so temperatura, atmosfera gasosa, pH e
presso osmtica. Para obtermos sucesso em um cultivo de microrganismos, alm da condio
fsica ideal, necessria uma combinao de nutrientes apropriados.
2. Definimos metabolismo como o conjunto de todas as reaes qumicas que ocorrem dentro
de um organismo vivo. As principais importncias do estudo do metabolismo microbiano so:
relao existente entre microrganismos e doenas; funo dos microrganismos na natureza;
importncia econmica dos microrganismos; controle e cultivo dos microrganismos; estudo
e desenvolvimento de mtodos para diagnstico dos microrganismos; estudo e controle dos
processos de deteriorao de materiais e reciclagem da matria orgnica.
3. Algumas enzimas so formadas inteiramente por protenas e outras podem apresentar uma
poro proteica denominada apoenzima e uma poro no proteica chamada cofator, que
pode ser formada por ons de zinco, ferro, magnsio ou clcio. Caso esse cofator seja uma molcula inorgnica, recebe o nome de coenzima. As pores formadas pela apoenzima e pelo

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cofator recebem o nome de holoenzima ou enzima completa ativa. Sem o cofator, a apoenzima no tem funo. Alguns cofatores so ons metlicos, incluindo cobre, ferro, magnsio,
mangans, clcio, cobalto e zinco. Eles podem auxiliar na catlise de uma reao para formao
de uma ponte entre a enzima e o substrato. Vrios fatores podem influenciar a atividade de
uma enzima. Entre os mais importantes, podemos destacar a temperatura, a concentrao do
substrato, o pH e a ausncia ou presena de inibidores.
4. Entendemos por catabolismo de carboidrato a quebra de suas molculas para produo de
energia, sendo esse processo de grande importncia para o metabolismo celular. Entre os carboidratos mais comuns como fonte de energia para os microrganismos, podemos citar a glicose. Os microrganismos podem realizar dois processos para obter energia por meio desse carboidrato: a respirao celular e a fermentao. Ambos os processos tm incio com a gliclise.
Aps, seguem vias diferentes. O processo de respirao, utilizando a glicose para obter energia,
ocorre em trs principais passos:
a gliclise o processo de oxidao da glicose em cido pirvico. Dessa reao, h a produo de algum ATP e NADH contendo energia;
o ciclo de Krebs a oxidao da acetil-CoA, que um derivado do cido pirvico, em dixido de carbono. Dessa reao, h a produo de algum ATP, NADH contendo energia e
outro produto que carreador de eltron reduzido, o FADH2;
a cadeia de transporte de eltrons NADH e FADH2 sofre oxidao. Nesse processo, os
eltrons que transportam os substratos so entregues para uma cascata de reaes de
oxidao-reduo envolvendo uma srie de carreadores adicionais de eltrons. A energia
liberada nessas reaes utilizada para formar uma quantidade considervel de ATP. No
processo de respirao, a maioria do ATP formada por esse terceiro passo.
5. Afermentao um processo anaerbio de produo de ATP, no qual no h o envolvimento
da cadeia respiratria. Nesse processo, o aceptor final de hidrognio um composto orgnico. um mecanismo muito importante na produo de energia em condies anaerbicas.
Asbactrias podem realizar tanto o processo de fermentao quanto arespirao anaerbica.

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REFERNCIAS

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