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Son varias las razones que explican los numerosos eventos fisiopatolgicos que se observan
simultneamente en la infeccin malrica, muy especialmente en el caso del parasitismo por Plasmodium
falciparum, la especie ms patgena. Los plasmodios tienen una muy alta tasa reproductiva, pues de 1
solo esporozoto infectante se pueden derivar alrededor de 20.000 merozotos provenientes de la fase
heptica, que una vez comienzan el ciclo eritroctico en el caso de P. falciparum tericamente se pueden
multiplicar X 36, lo cual equivale a 720.000 merozotos en las 48 horas siguientes, que a su vez pueden
multiplicarse por ese factor cada 48 horas, ocasionando altas cargas parasitarias en escasos 3 ciclos
eritrocticos en esta especie. El hecho de ser un hemoparsito que destruye eritrocitos derivando en
anemia y otras alteraciones vasculares, afecta en mayor o menor grado todos los tejidos del humano,
teniendo como consecuencia innumerables eventos fisiopatolgicos, causados directamente por el
parsito o indirectamente por mediadores de la respuesta inmune que genera su presencia. La sumatoria
de todos estos eventos pueden ocasionar una falla multisistmica (insuficiencia renal, heptica y
suprarrenal, anemia severa, edema pulmonar, isquemia cerebral y dao endotelial sistmico) de muy
difcil manejo teraputico, que con frecuencia culminan con la muerte del paciente.
Con fines didcticos, dividiremos por sistemas y o sntomas los principales eventos fisiopatolgicos
que ocurren en la malaria, particularmente causada por P. falciparum, pues es la especie mejor estudiada,
debido a su muy alta morbimortalidad y la posibilidad de cultivarla in vitro y mantenerla en diferentes
especies de simios.
Paroxismo malrico. El mismo consta de tres fases que dura entre 3 a 5 horas, que son: las fases de
escalofros, hipertermia y sudoracin profusa, que van a sucederse cuando se sincroniza el ciclo de la
esquizogonia eritroctica cada 48 horas en el caso de P. falciparum y P. vivax y cada 72 en el caso de P.
malariae. La liberacin de endotoxinas parasitarias en particular fosfolpidos (glicosilfosfatidilinositol-GPI)
y otros productos no bien identificados, al romperse los eritrocitos al finalizar la esquizogonia eritroctica,
conjuntamente con la produccin de ciertas citoquinas (IL1 y Factor de Necrosis Tumoral alfa-TNFa) por
monocitos y neutrfilos activados por antgenos del parsito, inducen la produccin de Prostaglandina E
(PGE) a nivel hipotalmico, que se traduce en los siguientes eventos generadores de calor:
vasoconstriccin perifrica, piloereccin, escalofros, estimulacin simptica y secrecin de tiroxina. Esto
conlleva a que inicialmente, se genere la fase de sensacin de hipotermia, seguida de la fase de
hipertermia y vasodilatacin perifrica y sudoracin profusa (Fig.1). Como consecuencia de la estimulacin
simptica se produce malestar general y sntomas digestivos tales como nuseas y vmitos, que sumado
a la hipertermia favorecen la deshidratacin.
El descenso de los productos de excrecin-secrecin (endotoxinas) y de la consiguiente ausencia de
estimulacin de monocitos, disminuye la produccin de PGE a nivel hipotalmico y en consecuencia se
activan todos los mecanismos de prdida de calor: vasodilatacin y sudoracin profusa.
Anemia. Habitualmente es normoctica y normocrmica, a menos que se asocie a problemas
nutricionales. Son varios los factores que causan la disminucin de los eritrocitos (Fig. 2). Ellos son: la
hemlisis causada por la peridica esquizogonia eritroctica cada 48 72 horas, el secuestro esplnico por
la hiperplasia esplnica y la disminucin de su capacidad de deformabilidad al paso por la
microvasculatura, el envejecimiento de los eritrocitos al oxidarse tempranamente la protena superficial
banda 3 (Tabla I) y fijarse a ella anticuerpos anti-banda 3, que permite su secuestro en el bazo, autoanticuerpos que causan hemlisis al fijar complemento y eventuales hemorragias, que sumado a la
disminucin de la eritropoyesis (falla nutricional, citoquinas pro-inflamatorias, etc), son los principales
causantes de la anemia. En paralelo, inicialmente hay leucocitosis, pero posteriormente hay tendencia a la
leucopenia y desviacin a la izquierda. La hemozoina resultante de la hemlisis, es fagocitada por clulas
del retculo-endotelio que se observan tanto a nivel de la circulacin (neutrfilos y monocitos) como en
ciertos tejidos (bazo e hgado).
Puede ocurrir hemlisis intravascular severa en pacientes con deficiencia de la enzima glucosa 6fosfato dehidrogenasa (G6PD) por consumo de algunos medicamentos, como es el caso de la primaquina.
Esta debe diferenciarse de los casos de hiperparasitemia.
En el caso de P. vivax, aproximadamente el 50% de los pacientes desarrollan plaquetopenia por
consumo de estas clulas, sin afectar su funcionalismo y por ende sin causar trastornos de la coagulacin,
con excepcin de los casos severos de coagulacin intravascular diseminada que se observan con P.
falciparum.
Hipoglicemia. Es consecuencia de varios factores: el alto consumo de glucosa por un parsito con una
alta tasa metablica que le permite garantizar su rpida replicacin; el alto consumo energtico por el
propio hospedero durante el paroxismo febril, en particular los escalofros; la disminucin nutricional por
hipo o anorexia y vmitos de los pacientes; el aumento del metabolismo basal (tiroxina) y la produccin de
una molcula smil de la insulina, favorecen la hipoglicemia (Fig. 2), que en ocasiones lleva al paciente al
shock, que debe diferenciarse de la malaria cerebral.
Hipotensin. Es causada fundamentalmente por el xido ntrico (ON), liberado por clulas endoteliales,
macrfagos y neutrfilos que han sido estimulados por IL-1, TFNa e IFNg, producido a su vez por
macrfagos activados por factores parasitarios (GPI) (Fig. 2). El ON relaja la musculatura vascular
produciendo vasodilatacin, que sumado a la prdida de agua y electrolitos durante los paroxismos
malricos, los vmitos y la disminucin de la ingesta de lquidos, condicionan la hipotensin. Con menor
frecuencia, en casos graves con coagulacin intravascular diseminada y dao endotelial se produce
edema de todos los tejidos y hemorragias que favorecen el shock hipovolmico.
Hipoxia tisular. Est condicionada por la sumatoria de los siguientes eventos patolgicos: la anemia, la
vasodilatacin perifrica, el incremento de la viscosidad sangunea producto de la deshidratacin
ocasionada por la fiebre, hiporexia y vmitos; el dao endotelial y subsiguiente coagulacin intravascular
diseminada. Muy en particular en el caso del parasitismo por P. falciparum, se aade la adhesin de los
glbulos rojos parasitados que expresan protenas adherentes en su superficie (rosetinas y la P.
falciparum erythrocyte membrane protein- y PfEMP-I ) que forman los botones de adhesin o knobs,
quienes en forma especfica se adhieren a receptores endoteliales (Trombospondina-TSP, Glicoproteinas IV
CD36, ICAM-1, VCAM-1 y E Selectina, Condroitn sulfato A y cido Hialurnico) de capilares y vnulas
post-capilares. (Fig. 2 y Tabla I). En este ltimo caso, se observa que los glbulos rojos infectados pueden
pegarse entre si formando rosetas y a su vez quedar adheridos al endotelio vascular bloqueando el flujo
sanguneo de los capilares. Finalmente, en los casos severos que desarrollan edema tisular y hemorragias,
se agrava la hipoxia de todos los rganos de la economa.
La asociacin de la hipoxia tisular con la hipoglicemia favorece la aparicin de la acidosis
metablica.
Malaria cerebral. Es una de las mas temidas complicaciones en la malaria causada por P. falciparum. La
etiologa de esta complicacin parece corresponder a la conjuncin de los mecanismos mecnicos, como
es la hipoxia tisular condicionada por los factores antes descritos como son: la obstruccin de la
vasculatura, la anemia, etc, sumado a los mecanismos bioqumicos, como es la produccin de ON, cuyo
origen ya fuera sealado anteriormente. Esta molcula, no solo favorece la hipoxia por la hipotensin, sino
que tambin por actuar como neurotransmisor aberrante puede llevar al paciente al coma (Fig. 2).
Insuficiencia renal. Esta grave complicacin se puede producir por hipoxia, por cuadros de hemlisis
severa (por alta parasitemia o por medicamentos como la primaquina), por deposicin de complejos
inmunes circulantes que puede ocasionar glomerulonefritis y en casos de malaria crnica por P. malariae,
se puede producir un sndrome nefrtico (Fig. 2). Es muy frecuente la proteinuria particularmente a
expensas de la hemoglobina, as como la presencia de cilindros hialinos, epiteliales y granulares. En casos
severos, evolucionan hacia la oliguria y uremia debido a la instalacin de la insuficiencia renal por
glomerulonefritis aguda.
Insuficiencia heptica. Se ha considerado que la fisiopatologa de esta entidad est asociada
primordialmente a la hipoxia tisular que ocasiona degeneracin y necrosis centrolobular, alterando el
funcionamiento y perfil sanguneo de las enzimas hepticas. Hay una gran sobrecarga del hgado en el
procesamiento de la hemoglobina circulante, observndose hipertrofia de las clulas de Kuffer, repletas de
glbulos rojos parasitados y hemozoina.
Malaria y embarazo. La mayor susceptibilidad en el primer embarazo se ha explicado por la ausencia de
anticuerpos anti-adhesin en la primigrvida que se ha expuesto por primera vez a una sub-poblacin de
parsitos malricos que se adhieren exclusivamente a condroitn sulfato A (CSA) y a cido hialurnico (AH)
en la placenta (sincitiotrofoblasto) que llevan a la insuficiencia placentaria, afectando el desarrollo y
viabilidad del feto. En los embarazos sucesivos se van produciendo anticuerpos que neutralizan la
adhesin de los glbulos rojos parasitados al endotelio de la vasculatura endometrial. La hipoglicemia, la
anemia severa y el edema pulmonar son las complicaciones mas frecuentes, que ocasionan mortalidad
materna, abortos, prematuros y recin nacidos de bajo peso.
Otros rganos y tejidos. El funcionamiento del resto de los tejidos del organismo no mencionados
previamente, como es el caso del aparato digestivo, los pulmones y las glndulas suprarrenales, se ven
afectados principalmente por la hipoxia tisular y algunas citoquinas proinflamatorias, que pueden llevar a
la necrosis parcial, alterando seriamente su funcionalismo. La Fig 2 resume la complejidad de los procesos
que se generan durante la infeccin malrica, cuya interaccin puede llegar a generar una falla
multisistmica, generalmente irreversible, que es de muy difcil manejo para el clnico.
TABLA I
enfermedad y son mximos a los 15-21 das; despus declinan y permanecen detectables poco ms o menos
durante toda la vida.
En infecciones no primarias, con virus de serotipo diferente, los anticuerpos IgG de reaccin cruzada
("heterotpicos" o secuenciales) son incapaces de neutralizar el virus y, al contrario, aumentan el nmero de
macrfagos infectados formando complejos anticuerpos-virus que son internalizados por las clulas. Dichos
anticuerpos amplificadores parecen persistir hasta 20 aos despus de la primera infeccin y quizs se
mantenga de por vida (14).
De reciente inters, es el rol que cumplen los anticuerpos IgE en la patognesis del dengue. Los anticuerpos
totales e IgE especficos se encuentran elevados en pacientes con DH/SSD en comparacin con aquellos que
solo tienen DC. Ms an en sujetos con exposicin previa, los niveles de IgE totales son significativamente
elevados (15).
En general, aunque estudios recientes demuestran que los ttulos de anticuerpos de las clases IgA e IgE se
elevan durante la infeccin aguda por dengue, no se conoce el papel que desempean estos anticuerpos desde el
punto de vista de la respuesta inmunitaria y la patogenia de la enfermedad. Se debe evaluar su valor diagnstico
y su posible utilidad para pronosticar la evolucin a formas graves de la enfermedad.
Pruebas de Laboratorio
Las pruebas de laboratorio con los que se cuenta actualmente son:
ELISA de captura
Para la determinacin de anticuerpos IgM e IgG. Esta prueba consiste en sensibilizar placas con
inmunoglobulinas de cabra anti-inmunoglobulinas humanas, las cuales reaccionarn con los anticuerpos del
tipo correspondiente presentes en la muestra del paciente; con la adicin del antgeno del virus del Dengue
(VD) y un conjugado formado por inmunoglobulinas anti-VD acopladas a la enzima peroxidasa del rbano, una
reaccin especfica se traducir en un cambio de color (densidad ptica) cuando se adiciona el substrato. (16).
ELISA de inhibicin
Para la determinacin de anticuerpos totales y clasificacin del tipo de infeccin (primaria o secundaria). Esta
prueba consiste en sensibilizar placas con inmunoglobulinas humanas anti-VD y a las cuales se aade el
antgeno del VD, que reaccionarn con los anticuerpos especficos presentes en la muestra del paciente e
impedirn la reaccin del conjugado cuando este se adicione. (16).
Neutralizacin por reduccin de placas (PRNT)
Para la identificacin de los serotipos de dengue involucrados en las infecciones previas. Esta prueba de
elevada especificidad consiste en enfrentar los anticuerpos presentes en la muestra con cada uno de los
serotipos que luego son inoculados en un sistema biolgico (cultivo celular), en el cual se evidencia la
neutralizacin o el bloqueo del efecto citoptico por la reaccin antigeno-anticuerpo ocurrida. (16).
Aislamiento viral
Procedimiento utilizado para la recuperacin del virus Dengue a partir de las muestras de suero en fase de
viremia, lo cual se realiza mediante cultivo en lneas celulares C6/36 obtenido de glndulas salivales de
mosquito Aedes albopictus(16).
Inmunofluorescencia (IF)
Procedimiento utilizado para la tipificacin del virus. Esta tcnica se basa en la unin inmunolgica de
anticuerpos monoclonales de los cuatro serotipos marcados con un fluorocromo (isotiocianato de fluorescena).
(16).
RT-PCR
La extraccin del ARN ser a partir de muestra de suero mediante el sistema QIAamp viral RNA minikit
(QIAGEN), para el RT-PCR se utilizara One-Step RT-PCR kit para amplificar 328 nucletidos de la regin ENS1. (16).
Secuenciamiento gentico
Se secuenciar 20ng de ADNc del producto amplificado utilizando ABI Prism Dye Terminator (Applied
Biosystems). Las secuencia obtenidas sern analizadas utilizando el software CHROMAS v 1.3 y sern
alineadas usando el programa SEQMAN, para determinar el consenso se aplicar el programa CLUSTAL X,
versin 1.83.
desarrollado diferentes sistemas inmunoenzimticos (ELISA) para el diagnstico del dengue. Estos son
econmicos, rpidos y fciles de ejecutar. Muestran a su vez elevada sensibilidad y especificidad cruzada, lo
que los hace de gran utilidad como pruebas de tamizaje. 35-45 Diferentes ELISA desarrollados para
determinar la presencia de anticuerpos totales antiflavivirus han demostrado su utilidad en estudios
seroepidemiolgicos y en el diagnstico serolgico. Vzquez y Fernndez, en 1989, desarrollaron un sistema
inmunoenzimtico que permite la deteccin y titulacin de inmunoglobulinas totales a virus dengue, mediante
un sistema de inhibicin donde una vez aadido el antgeno, la presencia de color en la reaccin depender de
la presencia o no de anticuerpos a dengue en el suero problema.35,36 El enlace al antgeno de los anticuerpos
antidengue, presentes en el conjugado, ser inhibido si en el suero problema (aadido con anterioridad) estn
presentes anticuerpos al agente en cuestin. Este sistema permite la deteccin de anticuerpos en suero y en
muestras de sangre colectadas en papel de filtro y ha sido aplicado con xito durante aos a la vigilancia y los
estudios serolgicos de dengue en Cuba. El ELISA de captura de IgM se ha constituido en uno de los sistemas
ms importantes y tiles del diagnstico y la vigilancia del dengue. Los anticuerpos IgM antidengue se
producen transitoriamente durante las infecciones primaria y secundaria y su deteccin indica una infeccin
activa o reciente por dengue. Los anticuerpos se desarrollan con rapidez y al 5to. d de la enfermedad y en la
mayora de los pacientes se detectan anticuerpos IgM. La deteccin de anticuerpos IgM se ha convertido en una
herramienta de incalculable valor para la vigilancia del dengue y de la FHD; resulta el mtodo de eleccin en la
mayora de los laboratorios. Diferentes estuches han sido desarrollados recientemente con diferentes grados de
sensibilidad y especificidad.38,43 La mayora de los sistemas se basan en un ELISA de captura de anticuerpos
IgM que incluyen los 4 serotipos virales, lo que incrementa la sensibilidad al sistema. Un estuche de captura de
IgM (dengue IgM) y un sistema ultramicroanaltico que utiliza solo 10 mL de muestra han sido desarrollados
por investigadores cubanos, los que son utilizados en el diagnstico y la vigilancia de dengue en varios 185
pases y muestran niveles de sensibilidad y especificidad elevados.11 Recientemente se ha desarrollado un
sistema visual de tira reactiva (PanBio) que permite la deteccin de anticuerpos IgM en menos de 5 min. El
sistema, que se basa en una cromatrografa, muestra niveles de sensibilidad y especificidad de 99 y 96 %,
respectivamente.38,42,43 Talarmin y otros45 demostraron la utilidad de la deteccin de anticuerpos IgA para el
estudio de la infeccin reciente de dengue. El sistema mostr 100 % de sensibilidad y especificidad al
compararlo al ELISA de captura de IgM, aunque esta ltima se detect como promedio a 3,8 d de comienzo de
los sntomas y la IgA a 4,6.