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Seccin: 2
9.- Objetivos.
Los objetivos estn considerados los elementos ms importantes en la formacin de la
imagen microscpica, ya que estos
sistemas de lentes establecen la
calidad de la imagen en cuanto a su
nitidez y la capacidad que tiene para
captar los detalles de la misma (poder
de resolucin).
Su principal funcin consiste en
colectar la luz proveniente del
espcimen y proyectar una imagen
ntida, real, invertida y aumentada
hacia el cuerpo del microscopio.
Constituyen un sistema ptico formado
por una o varias lentes, las cuales
deben estar centradas y los ejes
pticos de cada una deben coincidir
exactamente para formar el eje ptico del sistema. Sus lentes estn hechas a partir de
cristales (espatos, fluorita, entre otros) con un alto grado de calidad y funcionamiento; su
precio depende del poder de aumento, resolucin y de la correccin de las aberraciones.
Muchos fabricantes elaboran objetivos que pueden ser intercambiados y empleados en
microscopios de otras marcas comerciales.
Los objetivos se fabrican para ampliar las imgenes de los objetos observados en
diversos aumentos; as se tienen objetivos con aumentos propios de 3.5 x, 4x, 10x, 25x,
40x, 65x y 100x. Algunos objetivos tienen alrededor de ellos una lnea coloreada que
indica a simple vista el aumento propio.
Los objetivos tambin se clasifican de acuerdo al medio que existe entre el objeto
examinado y la lente frontal del objetivo. De acuerdo a esta caracterstica son secos o de
inmersin. Estos objetivos difieren entre s por la naturaleza del medio interpuesto entre el
cubre-objeto de la lmina histolgica y la lente frontal del objetivo. En los objetivos secos
el medio interpuesto es el aire cuyo ndice de refraccin (n=1) es muy diferente del ndice
del vidrio porta y cubre-objeto (n=1,5). Por el contrario, en los objetivos denominados de
inmersin el medio que separa al cubre-objeto de la lente frontal del objetivo es un lquido
cuyo ndice de refraccin es lo ms prximo al del vidrio. Este lquido puede ser agua
destilada (n=1,33) o mejor an aceite de cedro, que posee un ndice de refraccin
(n=1,515) casi idntico al del vidrio.
La ventaja de los objetivos de inmersin consiste en la disminucin o eliminacin de la
refraccin de los rayos luminosos entre el aire y el objetivo, en consecuencia la
luminosidad de la imagen est aumentada, mientras que en los objetivos secos, est
disminuida. El empleo de la inmersin aumenta el ngulo de apertura del objetivo y
permite mayor resolucin gracias a la captura de una mayor cantidad de rayos luminosos
refractados (11, 64) y solo puede utilizarse con objetivos de mayor aumento.
Otra clasificacin de los objetivos se refiere al tipo de correccin al que deben someterse
las lentes con la finalidad de disminuir o anular algunas aberraciones que se producen en
(a) Objetivo acromtico que contiene una lente frontal y dos pares internos.
(b) Objetivo semi-apocromtico o fluorita, con cuatro pares de lentes.
(c) Objetivo apocromtico que contiene un triplete, dos pares, un menisco y una lente
esfrica frontal.
10.-Ocular.
La misin del ocular es que se forme en l la imagen transmitida por el objetivo. Debe su
nombre porque la imagen final se observa a travs de l acercando el ojo a la lente
ocular del componente.
De los aumentos del ocular depender el tamao al que vemos la muestra, pero nunca el
poder de resolucin o la definicin de la imagen, caractersticas ambas que dependen del
objetivo.
No por usar un ocular de ms aumentos veremos mejor una imagen.
Los modernos oculares llevan rotulados los aumentos correspondientes.
Aunque existen diferentes modelos, segn la composicin de la ptica o tratamiento de
lentes, los suministrados por los fabricantes suelen ser de buena calidad. Los ms
habituales suelen ser de 5, 7, 10, 16 y 20 aumentos. Algunos oculares vienen rotulados
con las letras WF, lo cual indica que son de campo grande.
La mayor parte de los oculares modernos van montados en casquillos de 23 milmetros de
dimetro (esta medida corresponde a la parte que insertaremos en el tubo del
microscopio). Sin embargo, para adquirir nuevos oculares se deber comprobar cul es el
dimetro del tubo del microscopio.
En la generalidad de los casos, los oculares estn construidos por dos lentes
convergentes (planos convexos).
La primera lente se denomina de campo o frontal, est situada en la parte anterior del
ocular y, es la encargada de recoger y ampliar la imagen generada por el sistema de
lentes del objetivo. La lente posterior, en contacto estrecho con el ojo del observador, se
denomina lente ocular y es la responsable de aumentar nuevamente la imagen y
orientarla hacia el ojo del observador.
Se clasifican en:
Los modelos de microscopios binoculares tienen los objetivos dispuestos con una
inclinacin de 45 para realizar la observacin cmodamente.
Se denomina campo del microscopio al crculo visible que se observa en el ocular.
Tambin podemos definirlo como la porcin del plano visible observado a travs de las
lentes. Si el aumento es mayor, el campo disminuye, lo cual quiere decir que el campo es
inversamente proporcional al aumento del microscopio. La forma del campo est
determinada por el diafragma fijo del ocular, puede ser de forma circular o cuadrado, este
ltimo es til cuando se realizan estudios de coprologa o hematologa, en donde se
requiere reconstruir la totalidad del campo de observacin de la preparacin, lo cual se
dificulta con un campo circular clsico al quedar zonas superpuestas.
El ocular produce un aumento adicional a la imagen proporcionada por el objetivo. El valor
de este aumento est inscrito en la superficie del ocular y generalmente es de 10x, 12.5x,
15x, 20x o 25x. Otro valor es el nmero de campo que consiste en el dimetro en
milmetros de la apertura fija del diafragma, la cual puede variar desde 18mm hasta
26.5mm.
Otro
tipo
de
inscripciones
que
denotan
sus
UW: Ultra wide, en oculares que poseen un campo visual muy amplio.
caractersticas:
H: Para un alto punto focal del observador que usa lentes durante la observacin
microscpica.
K, C, comp: Para oculares compensadores.
Plan-comp: Objetivos que corrigen curvatura de campo y dan campos planos.
Otra de las aplicaciones del ocular consiste en la cuantificacin o medicin de estructuras
del espcimen en estudio.
Los oculares para la medicin poseen un mecanismo de enfoque mediante rotacin. Se
debe calibrar la escala de medicin del ocular con cada objetivo que se use.
Muchos oculares modernos poseen una copa de goma cuya finalidad es, por una parte
colocar los ojos a la distancia correcta de observacin y por otra, impedir la formacin de
reflejos luminosos que dificulten la visualizacin. Algunos microscopios binoculares
poseen un mecanismo de enfoque del ocular que ajusta las dioptras en caso que el
observador posea una disminucin de su agudeza visual.
11.-Lampara o bombilla.
Existen varios tipos de iluminacin elctrica.
Para que funcione bien, el campo del microscopio debe estar perfectamente centrado
respecto a la bombilla (la mxima intensidad de luz debe corresponder al centro del
campo de visin del microscopio).
Existen varios tipos de fuentes de luz artificial:
Bombillas de tungsteno y halgenas: La mayora de microscopios de luz estn dotados
de lmparas de este tipo cuyo poder oscila entre 10W y 100W. Se emplean como fuentes
principales o accesorias. Estas lmparas son radiadores trmicos que emiten una luz
continua en un espectro comprendido entre 300 1200 nm. Estn constituidas por un
bulbo de cristal relleno de un gas inerte y un filamento de tungsteno que es activado por
una corriente elctrica produciendo una importante cantidad de luz y calor. Varan mucho
en tamao, diseo y forma .Producen una luz blanca pero incrementan la intensidad del
azul al rojo. La luz puede ser muy brillante para la observacin y se reduce con filtros que
disminuyen la intensidad, denominados filtros de densidad neutra, disminuyendo la
intensidad sin alterar los colores. Tambin se emplean filtros de colores que compensen el
color rojo, de manera que se pueda observar la imagen del espcimen sobre un fondo
iluminado neutro, blanco y claro. El vidrio azul corrige el tinte amarillo que tiene la luz
incandescente y se obtiene una luz suave y agradable que aumenta la definicin.
Lmparas de arco elctrico: Son lmparas que pueden contener gases (vapor de
mercurio, xenn o circonio) y son empleadas para proveer una luz monocromtica con
filtros apropiados, ideal para microfotografa en blanco y negro o a colores. Tambin se
utilizan en microscopios especiales (fluorescencia).
Lser: En los ltimos aos se ha incrementado el uso de lser (Light Amplification by
Stimulated Emission of Radiation, Amplificacin de Luz por Emisin Estimulada de
Radiacin), que consiste en un dispositivo que genera un haz de luz con caractersticas
de tamao, coherencia, forma y pureza controladas. El lser de argn es uno de los ms
utilizados, cuya emisin est en el orden de 488-514 nm. Su costo es muy elevado y se
emplea principalmente en microscopa confocal.
LED: De las siglas en ingls Light-Emitting Diode (diodo emisor de luz) es un dispositivo
emisor de luz con caractersticas muy prximas a la luz monocromtica (espectro
reducido). La luz se produce cuando una corriente elctrica pasa a travs del material
semiconductor (arseniuro de galio-aluminio) del que estn hechos. Se utilizan en una
amplia gama de artefactos y lmparas. En comparacin con las bombillas
incandescentes, son ms interesantes porque permiten ahorro de energa con un mayor
rendimiento lumnico. Para microscopa se emplean LED de larga duracin que proveen
una luz muy brillante y fra; esto ltimo es una gran ventaja, puesto que no genera calor y
12.-Reostato
La mayora de los microscopios de laboratorio tienen un reostato que regula la intensidad
de la luz. Un disco - el regulador de voltaje - controla el reostato y se gira hacia la derecha
o hacia la izquierda hasta que una cantidad satisfactoria de luz ilumina la muestra.
13.- Condensador
El condensador es una pieza fundamental en el microscopio. De la calidad de la luz que
tengamos depender en gran medida la calidad de la imagen obtenida.
Existen diversos tipos de condensadores, algunos con lentes supletorias, habitualmente
acompaados de sistemas de filtros.
Si la fuente de iluminacin es blanca, podemos usar filtros de tono neutro (blanco), pero si
la luz es amarilla (lo ms comn) deberemos usar un filtro de color verde o azul para
obtener una imagen con fondo blanco.
Es un dispositivo que tiene por finalidad formar conos luminosos grandes, con aperturas
mayores, necesarios para ver con los objetivos de mayor aumento. El trmino
condensador puede considerarse inadecuado, ya que no produce una condensacin de
los rayos luminosos, por el contrario, produce un aumento de la seccin del cono
luminoso que a su vez forma una imagen ms clara.
El condensador est conformado por una o varias lentes situadas debajo de la platina del
microscopio, colocadas entre la fuente de luz y el espcimen.
Al igual que en los objetivos, las lentes del condensador poseen poder de aumento y
tambin producen aberraciones, sin embargo, stas tambin pueden corregirse.
Tipos de condensadores de acuerdo al grado de correccin de aberraciones pticas:
Condensador de Abbe: Es el ms simple, sin correccin de aberraciones y el ms
econmico. Compuesto de dos o ms lentes. Puede llegar a tener una apertura numrica
de 1.4 en modelos de tres lentes. Se emplea para observacin de rutina y con objetivos
de modesta apertura numrica y amplificacin. Una de las ventajas es el amplio cono de
iluminacin que puede producir.
Aplantico: Corrige aberraciones de esfericidad.
Acromtico: Corrige aberraciones cromticas. Contiene tres o cuatro lentes corregidas
para el azul y el rojo. Este condensador es til para observaciones de rutina con objetivos
secos y para microfotografa (blanco y negro o color).
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http://www.casa-cientifica.com/PDF/MICROSCOPIO%20BINOCULAR%20CON%20CAJA
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=X&ei=w2gTVO6sIsizogS_zoH4Bg&ved=0CAgQ_AUoAQ&biw=1280&bih=629#facrc=_&i
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