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Zamorano, Honduras
Noviembre, 2012
ZAMORANO
DEPARTAMENTO DE AGROINDUSTRIA ALIMENTARIA
Presentado por:
Zamorano, Honduras
Noviembre, 2012
ii
Aprobado:
________________________
Francisco Javier Bueso, Ph.D.
Asesor principal
____________________________________
Luis Fernando Osorio, Ph.D.
Director
Departamento de Agroindustria Alimentaria
________________________
Renn Pineda, Ph.D.
Asesor
____________________________________
Ral Zelaya, Ph.D.
Decano Acadmico
iii
RESUMEN
Espinal Mndez, A.F. 2012. Composicin de la semilla y evaluacin de la calidad del
aceite y torta desgrasada de tres variedades de pin (Jatropha curcas). Proyecto especial
de graduacin del programa de Ingeniera en Agroindustria Alimentaria, Escuela Agrcola
Panamericana, Zamorano. Honduras. 28 p.
El aceite obtenido de la semilla de pin (Jatropha curcas) se usa para la elaboracin de
biodiesel. La torta desgrasada es el subproducto obtenido de la extraccin del aceite.
Tiene un alto valor nutricional, que pudiera ser aprovechado para alimentacin animal y
humana si es previamente detoxificada. Los objetivos del estudio fueron evaluar
componentes nutricionales de la semilla, comparar las caractersticas fisicoqumicas de los
aceites y comparar la composicin nutricional de la torta desgrasada de tres variedades de
pin. Se utiliz un diseo completamente al azar (DCA) para evaluar tres variedades de
Jatropha curcas (Cabo Verde, Criolla Mexicana e Hind Salvadorea) con tres
repeticiones. Se realiz la extraccin del aceite y se determin su calidad comparando
caractersticas fsicas de viscosidad cinemtica (mm2/s), punto de turbidez (C), color
(Lab) y caractersticas qumicas de humedad (%), cidos grasos libres (%), ndice de
perxido (meq/kg), estabilidad oxidativa (horas), energa bruta (cal/100g) y perfil de
cidos grasos. Se realiz anlisis a la torta desgrasada de humedad (%), lpidos (%) y
protena cruda (%). Los resultados se analizaron mediante un ANDEVA y una prueba de
Tukey (P<0.05). La semilla entera Cabo Verde fue significativamente superior en el
contenido de lpidos. El aceite Hind Salvadorea present las mejores caractersticas
fsicas y qumicas de humedad, cidos grasos libres, energa bruta y punto de turbidez
respectivamente. La protena de la torta de Hind Salvadorea fue significativamente
superior a las variedades Cabo Verde y Criolla Mexicana. Se recomienda caracterizar los
genotipos de la coleccin de la Escuela Agrcola Panamericana.
Palabras clave: Cabo verde, criolla mexicana, hind salvadorea, perfil de cidos grasos,
rendimiento.
iv
CONTENIDO
Portadilla ...............................................................................................................
Pgina de firmas ....................................................................................................
Resumen ................................................................................................................
Contenido ..............................................................................................................
ndice de cuadros, figuras y anexos.......................................................................
i
ii
iii
iv
v
INTRODUCCIN ..............................................................................................
10
CONCLUSIONES ..............................................................................................
18
RECOMENDACIONES ....................................................................................
19
20
ANEXOS .............................................................................................................
23
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
10.
Figura
1.
Anexos
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
Pgina
2
9
10
12
13
13
14
15
16
17
Pgina
Pgina
23
23
24
24
25
25
26
26
vi
9.
10.
11.
12.
13.
27
27
28
28
29
1.
INTRODUCCIN
2
Cuadro 1. Norma de calidad para aceites vegetales DIN V 51605.
Parmetro
Lmites
Unidades
Humedad
Max. 0.075
%
cidos grasos libres
Max. 2.0
Mg KOH/g
ndice de yodo
95-125
g yodo/100g
ndice de cetano
Min. 39
Densidad (15C)
900-930
Kg/m3
Viscosidad cinemtica
Max. 36
mm2/s
(40C)
Estabilidad oxidativa
Min. 6
Horas
Energa bruta
Min. 860
cal/100g
Fuente: Second generation vegetable oil fuels (2011).
2.
MATERIALES Y MTODOS
Materiales
Semillas de pin de las variedades: Cabo Verde (cosecha 2011 Francisco
Morazn, Honduras), Criolla Mexicana (cosecha 2011 San Salvador, El Salvador)
e Hind Salvadorea (cosecha 2009 AGROIPSA Choluteca, Honduras)
cido ctrico monohidratado ( 98%) grado reactivo, Sigma Aldrich V07620
Metanol (99%) Grado HPLC, Sigma Aldrich . M1775
Alcohol etlico (95%) grado reactivo. Fisher A407-4
Hidrxido de sodio ACS, (>97%) Grado reactivo pellets, Merck S318-10
Fenolftalena. Grado reactivo, J.T. Baker 2870-4
cido Actico ACS, (95%) Grado reactivo, Merck 1000632500
Isoctano ACS Merck 1.04727.2500
Yoduro de potasio (99%) Grado reactivo, Sigma Aldrich 207969
Tiosulfato de Sodio pentahidratado (99%) Grado reactivo, Sigma Aldrich
217263
Sulfato de sodio ACS (>99%) Grado reactivo, Merck 1.06649.1000
Sodio dodecil sulfato (SDS) (98%) Grado reactivo, Sigma AldrichL-4509
cido Sulfrico (93%) Grado reactivo, J. T. Baker 9694-03
Rojo de metilo, grado reactivo J.T. Baker 2696-00
cido Brico ACS (1-4%) Grado reactivo, Fisher S9763
Lisina (99.9%) Grado reactivo, Sigma Aldrich L-5626
Benzina de petrleo, Merck
Celite 545, Solvente, Merck K11072593
ter de petrleo ACS, Sigma Aldrich 184519
Estndares componente FAME (GLC-463) Supelco 47885-U
Gas aire, nitrgeno e hidrgeno.
Maquinaria y equipo
Prensa sin fin modelo KEK-P0101, KEK Egon Keller, 2008
Pre-limpiadora de aire y zaranda modelo PG 3000, Superbrix
Centrfuga IEC modelo K, 115 volts, 7 amps, 60 Hz, hp
Karl Fisher, 787 Titrino, Metrohm
Remetro Brookfield LVD-III Ultra
Bao de temperatura, Brookfield, TC-501
Cromatgrafo de gases, Agilent
Generador de Hidrgeno, Parker
4
Unidad de digestin Kjeltec Tecator, Foss
Unidad de destilacin Kjeltec, 8200
Soxtec 2050, unidad de extraccin
Agitador vortex modelo 231. Fisher Scientific
Horno de aire forzado a 105C, Fisher Scientific
Balanza analtica Ohaus (0.1 mg de resolucin)
Hornilla, Fisher Scientific
Rancimat modelo 873 Metrohm
ColorFlex, Hunterlab
Bureta 50 mL Pyrex
Beaker 250 mL Pyrex
Beaker 600 mL Kimax kimble No. 14020
Beaker 1000 mL Pyrex No. 1003
Probeta de plstico 50 mL
Pipeta 1-2 mL Kimax
Pipeta 10-20 mL Kimax
Jeringas 10-3 mL
Algodn
Dedales de celulosa
Coladores de plstico
baldes de plstico de 5 galones.
5
Determinacin de humedad AOAC 952.08. Los resultados de humedad se determinaron
en porcentaje de humedad. Se evalu el anlisis por duplicado para las nueve unidades
experimentales.
Determinacin de grasa Soxtec AOAC 991.36 Los resultados del anlisis se expresaron
en porcentaje de contenido de grasa cruda. Se evalu el anlisis por duplicado para las
nueve unidades experimentales.
7
procedimiento fue el siguiente: se pes el aceite y se calcul el porcentaje de NaOH a
utilizar con la ecuacin 2, que utiliza una relacin del peso molecular de NaOH (40
g/mol) por el peso molecular del cido oleico libre (282 g/mol) como indica la ecuacin 1
ms un exceso de 0.175% (cido graso oleico es el ms usado debido a su presencia para
expresar el %AGL en un aceite vegetal). La cantidad de NaOH (solucin neutralizante) se
diluy al 10% en agua destilada y se mezcl el aceite y la solucin a temperatura
ambiente durante 20 minutos agitndola a 400 rpm. Luego se coloc en la centrfuga a
2500 rpm por 20 minutos hasta que se separaran las dos fases: sobrenadante (aceite) y fase
inferior (jabn). Se desech el jabn y se lav el aceite con agua destilada a 80C, usando
1/3 del peso del aceite como agua por cada lavado. Se repiti este paso hasta que el agua
residual fuese transparente.
= 0.142
[1]
Anlisis de calidad del aceite. Para determinar la calidad de los aceites luego de la
extraccin (aceite crudo) y el aceite semi-refinado se realizaron anlisis por duplicado
para cada variedad. Los anlisis realizados se describen a continuacin:..
cidos grasos libres AOCS Ca 5a-40. Se realiz el anlisis de cidos grasos libres al
aceite crudo para determinar la necesidad del proceso de neutralizado y al aceite semirefinado para determinar la calidad como aceite vegetal de acuerdo a la norma DIN V
51605 que establece que un aceite no debe contener ms de 2 mg KOH/g de muestra. Los
resultados fueron reportados como porcentajes de cido oleico. Se evalu el anlisis por
duplicado para las nueve unidades experimentales.
8
Estabilidad oxidativa AOCS Cd 12b-92. Esta prueba expone a oxidacin las muestras
de aceite con la adicin de constante oxigeno y temperatura. Los resultados se reportaron
en horas de induccin. Se evalu el anlisis por duplicado para las nueve unidades
experimentales. La norma DIN V 51605 establece un lmite mnimo de 6 horas de
induccin para aceite vegetales de calidad.
9
Cuadro 2. Mtodos y equipos utilizados en los anlisis de composicin nutricional de torta
desgrasada de Jatropha curcas.
Parmetro
Equipo utilizado
Mtodo
Humedad
Horno 105C
AOAC 952.08
Protena cruda
Kjeltec
AOAC 2001.11
Grasa cruda
Soxtec
AOAC 991.36
3.
RESULTADOS Y DISCUSIN
11
comparacin a la variedad Criolla Mexicana (20%) y Cabo Verde (15.7%) (Cuadro 3).
Los resultados mostraron que el contenido de protena cruda de la semilla entera tuvo una
relacin directa con el contenido final de protena cruda de la torta desgrasada.
Flores y Cruz (2010) realizaron anlisis proximales de pin de las variedades Cabo
Verde e Hind Salvadorea, donde determinaron resultados para protena de Cabo Verde
21.38% y para Hind Salvadorea de 20.20%. Para extracto etreo obtuvieron resultados
para la variedad Cabo Verde de 32.83% y para Hind Salvadorea de 41.80%. Se pud
observar en comparacin al estudio (Flores y Cruz 2010) que la variedad Hind
Salvadorea present menor contenido de protena; este porcentaje inferior est
directamente relacionado por contener mayor porcentaje de lpidos en su composicin.
12
Cuadro 4. Rendimiento de la extraccin de aceite de pin mtodo de prensa sin fin.
Variedad
Peso de semilla
Rendimiento
Rendimiento
(kg)
aceite crudo (%)
aceite refinado (%)
Cabo Verde
Criolla Mexicana
Hind Salvadorea
20.12
40.50
45.30
29
28
27
23
21
22
Anlisis de calidad del aceite. Se realizaron anlisis qumicos para determinar la calidad
de los aceites semi-refinados de pin de las variedades Cabo Verde, Criolla Mexicana e
Hind Salvadorea y a travs de un anlisis de varianza se determin que los aceites
semi-refinados de las variedades de Jatropha curcas evaluadas tuvieron caractersticas de
humedad, ndice de perxidos, cidos grasos libres, energa bruta y perfil de cidos grasos
significativamente diferentes (P<0.05). Por otro lado, los aceites semi-refinados de las
variedades de Jatropha curcas evaluadas no mostraron influencia en parmetros de
estabilidad oxidativa y viscosidad cinemtica.
Los aceites utilizados comercialmente como materia prima para la produccin de
biodiesel deben cumplir con estndares que aseguran la calidad y disminuyen los factores
que afectan los rendimientos esperados al momento de la transesterificacin.
Segn Jumat y Rozaini (2008) la mayora de estudios sobre los aceites de pin son
enfocados para determinar la calidad del aceite como materia prima para la produccin de
biodiesel y solo se realizan anlisis qumicos tomando parmetros de humedad y cidos
grasos libres.
Los anlisis de calidad mostraron que los aceites de las variedades de Jatropha curcas
(Cabo verde, Criolla Mexicana e Hind Salvadorea) cumplieron con los lmites de las
caractersticas qumicas propuestas por la norma DIN V 51605. Para humedad de los
aceites se observ que hubo diferencias significativas de la variedad Hind Salvadorea
con un menor porcentaje de humedad siendo para efectos de calidad un resultado positivo;
ningn aceite excedi el lmite establecido por la norma de calidad (0.0750%). En el
anlisis de cidos grasos libres se encontr que todas las variedades fueron
estadsticamente diferentes (P< 0.05) presentando un menor porcentaje de cidos grasos
libres la variedad Hind Salvadorea. Sin embargo, todos los aceites cumplieron con el
lmite mximo de cidos grasos libres permitido (2%).
13
Cuadro 5. Propiedades qumicas de los aceites semi-refinados de Jatropha curcas.
Variedad
Humedad
cidos grasos libres
Energa bruta
(%)
(%)
(Cal/100g)
1
Media + D.E.
Media + D.E.
Media + D.E.
a
a
Cabo Verde
0.058 + 0.0012 0.039 + 0.0012
899 b + 0.03
Criolla Mexicana
0.056b + 0.0007
0.028b + 0.0003
899 b + 0.01
Hind Salvadorea
0.052c + 0.0012
0.019c + 0.0003
900 a + 0.01
Norma DIN V
51605
Mximo
0.08%
Mximo
2%
Mnimo
860
abc
Los aceites de las tres variedades de Jatropha curcas cumplieron con los estndares
establecidos segn la norma del Codex para aceites vrgenes, grasas y aceites prensados
en fro (CODEX STAN 19-1981) el lmite mximo permitido es hasta 15 miliequivalentes
de oxgeno activo/kg de aceite. Los aceites de las tres variedades de Jatropha curcas
segn el anlisis de ndice de perxido indican que tienen diferentes contenidos de
perxidos o hidroperxidos producidos en la fase inicial de enranciamiento. El Cuadro 6
mostr que la variedad Cabo Verde tuvo un contenido mayor de ndice de perxidos; lo
cual indica que su degradacin se manifestar en un menor tiempo, por lo tanto se deber
tener un mayor cuidado y control de agentes oxidantes (luz, humedad y oxigeno) al
momento de su procesamiento y almacenamiento. El anlisis de estabilidad oxidativa
14
indic que no existe diferencias entre la vida de anaquel del aceite de la variedad Cabo
Verde (11.7 horas), Criolla Mexicana (11.2 horas) e Hind Salvadorea (10.7 horas).
En el estudio realizado por Jumat et al. (2011), se compar caractersticas qumicas en los
aceites de variedades de Jatropha curcas seleccionadas de diferentes pases (Malasia,
Indonesia e India) en dicha investigacin se encontr que hubo diferencias entre
variedades en el parmetro de cidos grasos libres. En el estudio se concluy que la
cantidad y calidad de aceite extrada depende de factores como tipos de suelo y zonas
geogrficas.
Se report en el Cuadro 7 las caractersticas fsicas para las tres variedades de Jatropha
curcas. Segn Asoiro et al. (2011), la temperatura tiene un efecto significativo en la
viscosidad cinemtica de los aceites vegetales con un nivel de confianza de 95%,
determinando que una viscosidad cinemtica muy alta (>41.62 mm2/s) indica una baja
calidad del aceite vegetal, ocasionando problemas al momento de su conversin a
biodiesel, debido a que tendr dificultades con la capacidad del inyector para alimentar
adecuadamente la cmara de combustin del motor. La recomendacin para obtener
aceites entre los lmites permitidos es realizar la extraccin del aceite a temperaturas de
60C. Los resultados de viscosidad cinemtica para los tres aceites de Jatropha curcas
cumplieron con los lmites establecidos por la norma DIN V 51605 (Cuadro 7).
El resultado de punto de turbidez indic que la variedad Criolla Mexicana form a una
mayor temperatura nubes y caractersticas de solidificacin; por encima de la variedad
Cabo Verde e Hind Salvadorea. El punto de turbidez est relacionado con el contenido
de cidos grasos saturados de cada aceite (Cuadro 9). Knothe (2005) indica la importancia
de conocer el comportamiento a bajas temperaturas de los aceites para la produccin de
biodiesel, el anlisis de punto de turbidez mostr la temperatura a la que el aceite formar
cristales de cera e impedir ser utilizable. El estudio recomend en pases fros realizar
modificaciones en el procesamiento del aceite de Jatropha curcas agregando mezcla de
aditivos al momento de utilizarlo como sustituto del diesel con el objetivo de reducir an
ms el punto de turbidez y evitar problemas de obstruccin en el filtro de aceite.
15
Los resultados de las propiedades fsicas de los aceites de Jatropha curcas (Cuadro 7)
fueron superiores al estudio realizado por Orkullo et al. (2011) donde concluyeron que la
Viscosidad cinemtica de aceite de Jatropha curcas neutralizado fue de (31.5
mm2/s1.16) y un punto de turbidez de (2C0.21).
Para el anlisis de color el aceite de la variedad Cabo Verde fue estadsticamente superior
en el valor de L (58.49) para oscuridad en comparacin a los aceites de las variedades
Criolla Mexicana e Hind Salvadorea. En el valor b el aceite que fue estadsticamente
ms amarillo fue el de la variedad Cabo Verde en comparacin a las variedades Criolla
Mexicana e Hind Salvadorea.
D.E.
0.02
0.04
0.20
abc
16
proporcin para las variedades Cabo Verde e Hind Salvadorea. En cuanto al cido alfa
linolico (18:2) present mayor contenido la variedad Criolla Mexicana.
El anlisis de perfil de cidos grasos difiere de la literatura mostrada por Harinder et al.
(2009) donde determinaron que los aceites de pin tuvieron en su composicin para
variedades txicas 22.3% de cidos grasos saturados, 42% de cidos grasos monoinsaturados y 35.7% de cidos grasos poli-insaturados.
: Letras diferentes en la misma fila indican diferencias estadsticas entre cidos grasos por variedad
(p<0.05).
1
D.E.: Desviacin estndar.
Los resultados de cidos grasos insaturados para la variedad Cabo Verde fue de 76.5%,
Criolla Mexicana de 75.7% e Hind Salvadorea de 76.46%. Estos contenidos de cidos
grasos insaturados coinciden con la literatura consultada. Archana (2011) especific el
contenido de cidos grasos insaturados para el aceite de Jatropha curcas siendo estos
cidos grasos mayora en su composicin obteniendo un porcentaje de 75.64%.
17
presentes en la torta desgrasada de Jatropha curcas en concentraciones superiores
indicadas para nios en edad pre-escolar.
Los resultados de las tortas semi-desgrasadas para humedad muestran que la variedad
Criolla Mexicana fue estadsticamente superior en comparacin a las tortas semidesgrasadas de las variedades Cabo Verde e Hind Salvadorea, obteniendo un resultado
menor de humedad para la variedad Criolla Mexicana 9.14%. En el anlisis de grasa
interactuaron diversos factores como la calidad de la extraccin, reproceso de la torta y
tratamiento trmico previo al prensado. Se obtuvo el mayor porcentaje de grasa residual
para la variedad Hind Salvadorea con 8.09%. El alto contenido de grasa residual en la
torta desgrasada de las variedades de Jatropha curcas presenta un problema para su
posterior comercializacin. Ghandi (2009) asegura que la torta desgrasada de soya al
contener porcentajes mayores a 1.5% de grasa residual y 9% de humedad no puede ser
comercializada esto debido a que el contenido elevado de lpidos y humedad aumentan
considerablemente las actividades de enranciamiento acortando significativamente su vida
de anaquel. Para mejorar los rendimientos de aceite extrado y disminuir los contenidos de
grasa cruda final en la torta desgrasada de Jatropha curcas, Sudradjat (2005) recomend
realizar un tratamiento de reproceso a la torta desgrasada.
4.
CONCLUSIONES
5.
RECOMENDACIONES
.
Caracterizar las semillas de la coleccin de genotipos de Jatropha curcas de la
Escuela Agrcola Panamericana.
Evaluar el efecto del ambiente sobre las semillas de la coleccin de genotipos de
Jatropha curcas de la Escuela Agrcola Panamericana.
Estandarizar el procesamiento de aceites crudos en laboratorio y posteriormente en
la planta de Biodiesel para evitar variaciones en parmetros fisicoqumicos de los
aceites refinados.
Evaluar tratamientos qumicos y enzimticos de detoxificacin de torta desgrasada
de Jatropha curcas mediante la cuantificacin de steres de forbl.
Evaluar el efecto en la nutricin de animales mediante la implementacin de torta
desgrasada de variedades de Jatropha curcas no txicas como fuente de protena
en dietas para concentrados.
6.
LITERATURA CITADA
21
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7.
Anexo 1. Efecto de las variedades
la semilla entera.
Componente nutricional
Humedad
Lpidos
Protena
GL= grados de libertad
ANEXOS
CM
0.67
29.57
22.29
F
0.63
81.09
318.61
P <0.05
0.56
< 0.0001
< 0.0001
%CV
3.10
1.16
1.07
24
CM
1.43
3.68
17.95
F
37.74
17.22
125.58
P < 0.05
0.0004
0.0033
< 0.0001
%CV
2.04
7.15
0.85
25
26
27
12.03
60
55
50
m
45
/ c
40
35
30
25
20
15
10
5
0
0
10
11
12
13
28
10.33
50
45
40
/ c m
35
30
25
20
15
10
5
0
0
10
11
11.38
50
45
40
/ c
35
30
25
20
15
10
5
0
0
10
11
12
13
29
Semilla
Extraccin
Filtrado
Aceite crudo
Desgomado
Neutralizado
Aceite refinado
Anexo 13. Flujograma de semi-refinado de aceite crudo de Jatropha curcas.