5.

- Determinacin experimental
5.1- Pesada de la placa filtrante
Se toman 3 placas filtrantes de vidrio del n 4, asegurndose que estn
bien limpias, se etiquetan y se guardan dentro de una estufa a 110 C
durante unos 30 minutos. Transcurrido este tiempo, se sacan las placas
cogindolas con una pinza termogravimtrica y se colocarn dentro de
un desecador durante unos 20 minutos. A continuacin, se proceder a
la pesada de las 3 placas filtrantes en balanza analtica. Una vez
obtenido el peso de stas, se mantendrn en el desecador hasta su
empleo.
5.2- Extraccin del calcio en la muestra de leche
Se toman alcuotas (3 veces) de la muestra de leche, de 50 mL, y se
transfieren a vasos de precipitados de 500 mL Se adicionan 50 mL de
cido tricloroactico al 24 % (p/v) y se agita la disolucin para separar el
calcio del resto de los componentes de la leche. Se observa la aparicin
de 2 fases, una fase lquida, el suero, que contiene el calcio y otra fase
con aspecto de slido pastoso que contiene el resto de los
constituyentes de la leche, fundamentalmente protenas y grasas. La
separacin de ambas fases se realiza empleando un embudo de vidrio y
filtro de pliegues, para aumentar la velocidad del filtrado. Se lava el
precipitado con agua destilada, recogindose las aguas de lavado, junto
con el filtrado en un vaso de precipitados de 500 mL.
5.3- Precipitacin del calcio en el suero.
Sobre el lquido procedente del filtrado anterior se adiciona agua
destilada hasta completar, aproximadamente, la mitad del vaso de
precipitados. Se introduce el vaso en un bao termosttico con una
temperatura comprendida entre 60-80 C. Se deja durante unos 15
minutos para que alcance la temperatura del bao y se adicionan 30 mL
de disolucin de Na2C2O4
0.1 M y, a continuacin, se adiciona
lentamente una disolucin de amonaco 2 M, observndose la aparicin
de un precipitado de color blanco. La adicin de la disolucin de
amonaco debe continuar hasta alcanzar un pH entre 8-9 (realice la
comprobacin con papel indicador de pH). Compruebe que ya no
precipita ms calcio, mediante la adicin de 1 mL ms de oxalato de
sodio.
5.4- Digestin, filtrado y lavado del precipitado

Se agita y se mantiene la disolucin durante unos 30 minutos en el bao

termosttico, aadiendo, de vez en cuando, unos mililitros de la
disolucin de amonaco 2 M (con objeto de reponer las prdidas de NH 3
como consecuencia de la evaporacin; de esta manera mantenemos el
pH entre 8-9). Transcurridos los 30 minutos de digestin del precipitado,
se enfra la suspensin en un bao de hielo durante unos 15 minutos y
se procede al filtrado mediante un sistema de succin a vaco muy
suave, utilizando las placas filtrantes previamente pesadas. Se recoge
todo el precipitado ayudndose con una varilla de vidrio. Se debe lavar
con abundante agua destilada para eliminar posibles impurezas que
acompaen al precipitado.
5.5- Secado y pesada del precipitado
Una vez lavado el precipitado, se llevar la placa filtrante a una estufa a
110-120 C, con la ayuda de pinzas termogravimtricas y se secar el
precipitado de CaC2O4.H2O obtenido durante, aproximadamente, 1 hora.
Transcurrido dicho tiempo, se introducir la placa filtrante en el
desecador hasta que llegue a temperatura ambiente y se pesa.