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Resumo Microbio

Aula 1
Em 1665 Robert Hooke com suas observaes no microscpio da inicio a Teoria
Celular, diz que todas as coisas vivas so compostas por clulas.
Fracesco Redi (1668):
Realizou um experimento com garrafas lacradas. Contestou a teoria da gerao
espontnea, ele colocou um pedao de carne em garrafas e vedou a garrafa, e ento no
nasceram microorganismos.
Os antagonistas questionaram que vedando as garrafas no entraria ar puro, ento ele
repetiu o experimento com garrafas tampadas com finas redes, permitindo a passagem do ar
puro, e mesmo assim no nasceram os microorganismos.
Anton Van Leeuwenhoek (1684)
Ele considerado o pai da microbiologia. Observou microorganismos em diversos
materiais e afirmou que eram vivos por apresentarem intenso movimento.
No sculo XVIII a Europa enfrentava uma pandemia de varola que matava at 40% dos
doentes. As pessoas que se recuperavam da doena tornavam-se imunes a novas infeces,
ento, na China, as crostas secas das leses eram inoculadas em pessoas sadias a fim de proteglas contra a doena.
Edward Jenner (1794)
Foi um medico rural ingls, ele observou que os ordenhadores de vacas s contraiam
varola bovina, uma forma branda, com leses eruptivas nas mos. Ele ento resolveu imunizar
um garoto de 8 anos com material de leses de varola bovina, e semanas depois inoculou pus
de leses de varola humana. Com base nisso, ele concebeu um mtodo de preveno da varola
baseado na varola de vacas.
Ingaz Philipp Semmeleweis
Antigamente as infeces ps-parto matavam muitas mulheres, pois os mdicos saiam
da sala de autopsia direto para a sala de parto. Ele demonstrou que lavar as mos podia
interromper a transmisso da doena.
Era de Ouro Da Microbiologia (1857-1914)

Identificao de bactrias causadoras de doenas;

Papel da imunologia na preveno e cura das doenas infecciosas;

Estabelecimento da microbiologia como cincia.

Joseph Lister
Lister publica um trabalho sobre um assunto que revolucionou a cirurgia: a anti-sepsia
cirrgica. O sistema de anti-sepsia baseava-se na esterilizao pelo calor dos instrumentos

cirrgicos e na pulverizao de um agente anti-sptico, o fenol ou acido carbnico, sobre a rea


e roupas cirrgicas. O decrscimo acentuado das infeces bacterianas devido ao fenol, permitiu
demonstrar indiretamente que os micro-organismos provocam doenas.
Louis Pasteur
Realizou um experimento fundamental para a microbiologia:
Colocou um liquido no estril vertido em um frasco, sendo que o pescoo deste frasco
era curvado. O liquido foi esterilizado pelo aquecimento. Depois, o liquido era lentamente
resfriado, e a poeira e os microorganismos ficavam aprisionados na curvatura do frasco, e
depois de um longo perodo o liquido continuava estril. Mas, quando o frasco era inclinado e o
liquido estril entrava em contato com a curva do frasco, onde estavam as partculas de poeira,
em pouco tempo cresciam microorganismos no liquido. Foi assim que ele criou o processo de
PASTEURIZAO.
Louis Pasteur desenvolveu um mtodo para atenuar a virulncia de um microorganismo
patognico, o agente da clera da galinha, de forma a que pudesse ser utilizado para imunizar a
galinha e no causar a doena. Com este trabalho, Pasteur estabelece o conceito de que
possvel gerar proteo contra uma doena inoculando o hospedeiro com uma estripe atenuada
do agente causador dessa doena. Pasteur reconheceu que este conceito surgiu a partir do
sucesso obtido por Edward Jenner na vacinao contra a varola em 1798.
Pasteur tambm foi o fundador da imunologia moderna, ele realizou um experimento
em que ele aplicava uma cultura bacteriana jovem em galinhas, e essas galinhas morreram.
Porem, quando ele aplicou uma cultura bacteriana velha em galinhas elas sobreviveram e
quando entraram em contato com uma cultura bacteriana jovem elas demonstraram resistncia e
no morreram. Ento, ele pode concluir que bactrias podem perder a capacidade de causar
doena, mas retm a capacidade de imunizao.
Robert Koch
Realizou um experimento em 3 etapas para demonstrar que o bacilo da tuberculose
provocava a tuberculose:
1) Detectou o bacilo da tuberculose (por colorao) em leses tuberculares de vrios
rgos de humanos e animais doentes;
2) Cultivou o bacilo em cultura pura a partir de soro de indivduos doentes;
3) A inoculao do bacilo isolado causou tuberculose em ratinhos da ndia;

Postulado de KOCH:

Frederick Griffith
Realizou um experimento com ratos, onde ele descobriu a transformao bacteriana e
estabeleceu as fundaes da gentica molecular.
Importncia dos microorganismos

Os processos de tratamento de esgotos utilizam as bactrias (anaerbicas) no processo


de degradao dos resduos orgnicos;

Nas usinas de reciclagem de lixo, so utilizados na produo de adubo;

Na indstria farmacutica so utilizadas para a produo de antibiticos e vitaminas.

A indstria qumica emprega as bactrias na produo de acetona, metanol, butanol e


outros.

Podem ser usadas na produo de alimentos, como iogurtes, queijos, leites fermentados
e outros;

A moderna biotecnologia permitiu a modificao do material gentico de algumas


bactrias, fazendo com que elas passassem a produzir insulina para o tratamento da
diabetes;

A cirurgia plstica faz o uso da toxina botulnica (produzida por bactrias) para
atenuao de rugas;

Controle de pragas de insetos por microorganismos;

Aula 2
Nveis de Biossegurana:

Classe de risco 1: organismo que no causam doenas em humanos e animais.

Classe de risco 2: patgeno que causa doena, mas no consiste em risco serio.

Classe de risco 3: patogeno que geralmente causa doenas graves em humanos e


animais, e pode representar serio risco para manipular.

Classe de risco 4: patogeno que representa grande ameaa para humanos e animais,
representa grande risco para o manipular e pode ser transmitido de um indivduo para
outro.

Alguns conceitos:

Limpeza: remoo mecnica de matria orgnica e microorganismos.

Descontaminao: limpeza com agentes qumicos ou fsicos.

Desinfeco: a eliminao parcial dos microorganismos de material inanimado


usando substancias qumicas, radiao ultravioleta, gua fervente ou vapor.

Anti-sepsia: semelhante desinfeco, porem relacionada a tecidos vivos, e realizada


por produtos qumicos denominados anti-spticos.

Esterilizao: a eliminao total dos microorganismos e esporos por mtodos


qumicos ou fsicos.

Calor mido: Autoclavao; Pasteurizao (aquecimento de produtos para reduo do


numero de microorganismos no esteriliza).

Calor seco: tem menor poder de penetrao que o calor mido e usam temperaturas e
tempos maiores.

Baixas temperaturas: causa diminuio na taxa de crescimento e atividade metablica,


dependendo do organismo. Congelamento torna os microorganismos dormentes, mas
no necessariamente os mata.

Radiao: reduz ou elimina microorganismos. Tem vrios efeitos sobre as clulas,


dependendo do seu comprimento de onda, intensidade e durao.

Fatores que influenciam o tratamento microbiano:


1. Tamanho da populao; 2. Natureza da populao; 3. Concentrao do agente; 4. Tempo de
contato; 5. Temperatura e pH; 6. Presena de matria orgnica;
Aula 3 Taxonomia e estrutura de microorganismos
Atualmente, os microorganismos podem ser classificados em 3 domnios de acordo com as
suas caractersticas:
1. Bacteria
2. Archaea
3. Eucaryota

Procariotos
O grupo Archaea um grupo distinto das bactrias com caractersticas prprias. So
encontradas em ambientes extremos (pH, temperatura, ...), tem utilidade em uso industrial, no
possuem parede composta por peptideoglicano e sim macromolculas variadas.
O grupo Bacteria (eubactria) inclui as bactrias que infectam o homem, e possuem a
parede composta por peptideoglicano (murena).

Morfologia:

Parede celular:
As clulas eucariticas que possuem parede clulas (celulose e quitina) so as clulas
vegetais, as algas e os fungos. As clulas animais e os protozorios no possuem parede celular.
Nos procariotos, as bactrias tem parede composta por peptideoglicano, as Archae tem
parede composta por protenas e carboidratos complexos.

Colorao Gram:
Gram-positivas: sua parede celular composta por uma bicamada lipdica seguida de uma
grande camada de peptideoglicano.
Gram-negativas: sua parede celular formada por uma bicamada lipdica, seguida de uma fina
camada de peptideoglicano, uma nova camada de fosfolipideos com porina, e uma ultima
camada de lipdeos.
Micobacterias: sua parede celular formada por uma bicamada lipdica, seguida de uma
camada de peptideoglicano, depois arabinogalactano, seguido por cido miclico com porinas, e
uma ultima camada de lipdeos.

Na tcnica de Gram, colora-se bactrias com um corante violeta especial. A bactria que
assim obtiver uma cor roxa, ser gram positiva e a que obtiver colorao rsea, gram negativa.
A gram positiva ganha colorao roxa porque sua a parede celular formada por peptideoglicano
absorve a tinta. J a gram negativa rsea porque, apesar de tambm ter parede celular, esta fica
abaixo de uma membrana adicional, parecida com a membrana plasmtica, tpica deste grupo de
bactrias, logo no ocorrendo absoro.
Procedimento:
1. Confeccionar o esfregao;
2. Corar com violeta de cristal por 60 segundos;
3. Lavar com esguicho de gua destilada;
4. Cobrir com Iodo de Gram ou Lugol por 60 segundos;
5. Lavar com esguicho de gua destilada;
6. Descorar com lcool a 95%, ou acetona, 10-20 segundos;

7. Lavar com esguicho de gua destilada;


8. Corar com safranina por 60 segundos
9. Lavar com gua destilada, secar e observar ao microscpio.
O primeiro corante penetra na bactria assim como o mordente (Soluto de Lugol).
Intracelularmente forma-se um complexo corante-iodo, insolvel em gua, que vai corar
o protoplasma e a parede celular. A camada de peptideoglicano maior em bactrias gram
positivas, as gram negativas, por sua vez possuem pouco peptideoglicano e so coradas pelo
vermelho de safranina.
A lavagem com lcool dissolve o complexo corante-iodo, e se a parede celular for
permevel a este, arrasta-o para fora da clula. As bactrias capazes de preservar a colorao
roxa do 1 corante designam-se por Gram positivas. As bactrias que, aps a lavagem com
lcool-acetona, so incapazes de reter o violeta de Genciana, designam-se por Gram negativas,
corando pela fucsina diluda que se fixa apenas nas bactrias Gram-negativas. Resumindo, as
bactrias Gram positivas coram de roxo e as Gram negativas coram de vermelho. Esta tcnica
de colorao permite ento a distino entre bactrias com parede celular mais ou menos rica
em peptideoglicanos.
Colorao Ziehl-Neelsen:
H bactrias que so resistentes colorao, mas que uma vez coradas vo resistir
fortemente descolorao, mesmo por cidos fortes diludos e lcool absoluto. s bactrias que
possuem esta propriedade dizemos que so cido-lcool resistentes. Esta caracterstica devida
ao elevado teor de lipdios estruturais (ex. cido miclico) na parede celular destas bactrias,
que provoca uma grande hidrofobicidade, dificultando a ao dos mordentes e diferenciadores
de corantes aquosos. A tcnica de Ziehl-Neelsen evidencia esta cido-lcool resistncia. Segue o
seguinte protocolo:
A fucsinaaa fenicada, atuando a quente, vai corar todas as clulas bacterianas e outras
estruturas presentes no esfregao de vermelho (o calor vai derreter os lipdios de membrana,
tornando-a permevel). O cido diludo em lcool aplicados vo descorar todas as bactrias
exceto as cido-lcool resistentes, que permanecem coradas de vermelho pela fucsina. Assim, ao
serem observadas aps colorao e contraste, com azul de metileno, encontraremos as bactrias:
cido-lcool resistentes: coradas de vermelho.
No cido-lcool resistentes: coradas de azul
Estruturas Externas Parede Celular

Cpsula: virulncia, adeso a diferentes superfcies, proteo contra desidratao.


Fmbria: funo de adeso, para evitar, por exemplo, remoo fsica e imunolgica.
Pili: transferncia de material gentico.
Flagelo: um longo apndice na superfcie da bactria composto principalmente por uma
protena globular denominada flagelina.
Classificao quanto a posio e quantidade de flagelos:
A) Monotrquias: nico flagelo em uma das extremidades;
B) Lofotrquias: tifo de flagelos em uma ou ambas as extremidades;
C) Anfitrquias: nico flagelo em cada extremidade;
D) Peritrquias: cercadas de flagelos;

Estruturas Internas Parede Celular


Membrana citoplasmtica:
composta por uma bicamada fosfolipidica ligada a protenas necessrias para o
metabolismo celular.
A membrana de procariotos difere da dos eucariotos pela ausncia de esteris, portanto
so menos rgidas.
A sua principal funo a permeabilidade seletiva e contem enzimas que catalisam
reaes de quebra de nutrientes gerando ATP.
Protenas se movem livremente sem destruir a estrutura da membrana e por esse arranjo
dinmico entre protenas e fosfolipideos denomina-se modelo do mosaico fluido.
DNA e Regio Nuclear:
O cromossomo bacteriano pode ser nico, circular ou dupla-fita, porem eles no
apresentam membrana nuclear.
Plasmideos: so um DNA circular auto-replicativo, e podem conferir caractersticas como
resistncia a antimicrobianos e fatores de virulncia, alem de ser transferido entre outras
bactrias.
Ribossomos:

Esto espalhados pelo citoplasma e so essenciais para a produo das protenas a partir
da informao contida no DNA.
Endsporos
So estruturas de resistncia de certas bactrias gram + formadas no interior da clula
quando em condies adversas, de temperatura, qumica, radiao e dessecao.

Fungos
So organismos eucariticos, unicelulares (leveduras) ou multicelulares (fungos
filamentosos), no possuem clorofila nem pigmento fotossinttico.
A grande maioria possui limitada patogenicidade, poucos causam doenas em humanos
e animais.
So utilizados em industrias de alimentos e decomposio de matria.
Parede: constituda de polmeros de glicose.
Membrana: ergosterol (no colesterol)
Citoplasma: contem ncleo, mitocndrias, ribossomos, reticulo endoplasmtico, etc.
Fungos filamentosos:
O talo de um fungo filamentoso consiste em filamentos longos de clulas conectadas.
Esses filamentos so denominados hifas. As hifas podem ser vegetativas (funo de nutrio) e
areas (funo reprodutiva).

Aula 4
Metabolismo
Compreende uma serie de transformaes qumicas e processos energticos que ocorre
nos seres vivos.Para que ocorra cada uma dessas transformaes, h a necessidade de enzimas
que originam substancias que sero produtos. O conjunto dessas reaes qumicas e enzimticas
denomina-se via metablica.
Reaes catabolicas: so reaes que transformam molculas complexas em simples e liberam
energia.
Reaes anablicas: so reaes que transformam molculas simples em complexas e
requerem energia.

Fatores necessrios para o crescimento bacteriano


Fsicos:
Temperatura: podem ser psicrfilos, mesfilos ou termfilos.
pH: a maioria dos microorganismo crescem melhor perto da neutralidade, mas h excees.
Presso osmtica: alguns organismos so capazes de crescer em diferentes concentrao de sal.
Qumicos:
gua: essencial para o transporte de nutrientes.
Carbono: essencial para a sntese de todos os compostos orgnicos (elemento estrutural bsico
para os seres vivos).
Nitrognio: utilizado na sntese de DNA, RNA, aa e protenas.
Enxofre: sntese de aa e vitaminas.
Fsforo: sntese de DNA, RNA e ATP.
Sais minerais: utilizados como co-fatores essenciais para a atividade de algumas enzimas.
Oxignio: extremamente importantes no desenvolvimento microbiano.
Organismos aerbios
Estritos: necessitem de O2.
Facultativos: no necessitam de O2, mas crescem melhor com O2.
Microaerfilo: necessitam de O2, mas em nveis menores.
Organismos anaerbios

Estritos: no toleram O2, so incapazes de se desenvolver em presena de oxignio pois no


possuem enzimas necessrias para inativao de produtos txicos.
Aerotolerantes: no necessitam de O2, mas crescem quando o O2 est presente.

Crescimento bacteriano
Diviso bacteriana: considerado o aumento no numero de indivduos e no no tamanho
celular.
Fisso binria:
1. Alongamento da clula e replicao do DNA cromossomal;
2. Inicio da invaginao da parede celular e da membrana plasmtica;
3. Em um determinado momento, a parede celular das duas clulas se encontram,
dividindo o DNA;
4. Separao das clulas, formando indivduos idnticos.
Fases de crescimento:

Lag:adaptao metablica, sntese de enzimas necessrias para o crescimento. O numero de


indivduos no aumenta nesta fase.
Log: as clulas iniciam seu processo de diviso entrando no perodo de crescimento
exponencial.
Estacionaria: em determinado momento a taxa de crescimento diminui (falta de nutrientes). O
numero de morte celular equivalente ao numero de clulas novas, ento, a populao torna-se
estvel.
Declnio: ocorre quando o numero de clulas mortas excede o nmero de clulas novas.
Aula 5 Interao Microorganismo-Hospedeiro
Vantagens da microbiota normal: inibem a colonizao por patgenos potencialmente
patognicos (atravs de competio de nutrientes), produzem vitaminas B e K no intestino e h
um estmulo antignico que assegura o desenvolvimento do sistema imune.

Desvantagens da microbiota normal: potencialmente patognica quando microorganismos


atingem locais estreis ou quando o sistema imune torna-se ineficaz.

Infeco: entrada e multiplicao de microorganismos.


Doena: condio na qual a infeco por um microorganismo gera sinais e sintomas (danos ao
hospedeiro).
Patogenicidade: habilidade de causar doena.
Virulncia: grau de patogenicidade.
Fator de virulncia: componente, produto ou estratgia bacteriana, que contribui para o
estabelecimento de uma doena.

Aderncia do microorganismo no hospedeiro


Tem funo de evitar a remoo fsica e imunolgica, para isso a bactria se adere a
superfcies celulares e/ou matriz extracelular e/ou superfcies solidas.
As adesinas so molculas proticas localizadas na superfcie do mo com capacidade
de se ligar especificamente as clulas e/ou tecidos do hospedeiro.
A regulao da expresso das adesinas pode ser regulada por temperatura, presso, pH,
alteraes genticas, etc. A expresso varia em funo do sitio do hospedeiro ou da presena no
ambiente externo.
Biofilmes
Geralmente, a dinmica de formao de um biofilme ocorre em etapas distintas.
Inicialmente temos os organismos denominados colonizadores primrios, que se aderem a uma
superfcie, geralmente contendo protenas ou outros compostos orgnicos. As clulas aderidas
passam a se desenvolver, originando microcolnias que sintetizam uma matriz
exopolissacardica (EPS), que passam a atuar como substrato para a aderncia de
microrganismos denominados colonizadores secundrios. Estes colonizadores secundrios
podem se aderir diretamente aos primrios, ou promoverem a formao de coagregados com
outros microorganismos e ento se aderirem aos primrios.

Assim, o biofilme corresponde a uma "entidade" dinmica pois, de acordo com os


microrganismos que o compem, teremos condies fsicas, qumicas e biolgicas distintas.
Estas alteraes fazem com que cada biofilme seja nico, de acordo com os microrganismos
presentes.
Desenvolvimento de um biofilme:
(a) Colonizao primria de um substrato;
(b) crescimento, diviso celular e produo do exopolissacardeo (EPS), com o desenvolvimento
de microcolnias;
(c) coadeso de clulas individuais, de clulas coagregadas e grupos de clulas idnticas,
originando um biofilme jovem, de mltiplas espcies;
(d) maturao e formao de mosaicos clonais no biofilme maduro.
Endotoxinas:
o LPS que liberado durante a lise bacteriana, fazem parte da poro externa da
parede celular das bactrias gram negativas. Essas toxinas simulam macrfagos para liberar
citocinas que estimulam sintomas, como febre, nusea e calafrios.
Exotoxinas:
So protenas secretadas (principalmente por bactrias Gram positivas) toxicas para
clulas eucariticas, que se ligam a receptores alterando a funo da clula e acelerando a sua
morte. So solveis, portanto podem ser disseminadas no hospedeiro.
Micotoxinas:
So substancias toxicas produzidas pelos fungos e causam danos as clulas hospedeiras,
so mutagnicas e carcinognicas.
Um patogeno de sucesso dever:
Ser transportado para um hospedeiro;
Entrar no hospedeiro e evitar sua remoo;
Migrar para um sitio que permita seu crescimento e multiplicao;
Evadir as defesas do hospedeiro e multiplicar-se nesse sitio preferencial;
Eventualmente, transferir-se para um novo hospedeiro e recomear o ciclo.
Aula 6 Introduo a Virologia

Os vrus so as menores estruturas com capacidade replicativa;

Historicamente caracterizados por sua capacidade de ultrapassar membranas filtrantes


que retm as menores clulas bacterianas;

Em sua forma bsica, consistem em um segmento de acido nuclico envolvido por uma
capa protica;

No possuem metabolismo prprio, ou seja, so parasita intracelulares obrigatrios;

Sua aparente simplicidade encobre uma complexidade de funes;

Estrutura dos Vrus


cido nuclico: DNA ou RNA;
Capsdeo: camada protica que envolve o genoma de cido nuclico;
Capsmeros: subunidades dos capsdeos;
Envoltrio, invlucro ou envelope: membrana lipdica que circunda algumas partculas virais;
Peplmeros (espculas): projees presentes no envelope compostas de glicoproteinas que so
sintetizadas pelo vrus.
Vrion: partcula viral completa com capacidade infecciosa;
Vrus defeituoso: vrus que no capaz de replicar-se em uma clula hospedeira;

cido nuclico viral: o DNA ou RNA contem as informaes genticas necessrias para sua
replicao, podem possuir filamentos nicos ou duplos, circular ou linear e segmentado ou no
segmentado.
Capsdeo viral: a estrutura que envolve o genoma viral, dando proteo e rigidez ao vrus.
Constitudo por uma ou varias protenas que formam as subunidades denominadas capsmeros.
Essas protenas so organizadas em camadas e padres regularmente repetidos:

Simetria Icosadrica: os capsideos so formados independentemente do acido nuclico


(podendo ocorrer a formao de partculas vazias). Tanto os vrus de DNA quanto os de
RNA podem exibir este tipo de simetria.

Simetria Helicoidal: as subunidades proticas esto ligadas de forma peridica ao


acido nucleio viral, girando at formar uma hlice. No possvel a formao de
partculas helicoidais vazias. Vrus animais com este tipo de simetria contem genoma de
RNA.

Simetria Complexa: partculas virais que no tem simetria cbica ou helicoidal


simples, mas exibem uma estrutura mais complexa. Por exemplo, o capsdeo
polidrico e a bainha helicoidal.

Envelope viral: os vrus envelopados so aqueles nos quais o nucleocapsdeos encontram-se


envolvido em uma bicamada lipdica, esta adquirida durante o processo de brotamento a partir
da membrana plasmtica da clula hospedeira.

Protenas virais
Estruturais:

Facilitam a transferncia do acido nuclico viral de uma clula para outra;

Proteo do genoma contra invases por nucleases;

Fixao da partcula a clula susceptvel;

Determinam caractersticas antignicas;

Atividades especificas: hemaglutinina;

Espculas: so formadas por glicoprotenas. Tem como funo o reconhecimento dos vrus pelo
sistema imune. Os antgenos reconhecidos pelos anticorpos produzidos pelo hospedeiro
inativam os vrus, e exatamente nestes genes que codificam protenas que compe as espculas
que os vrus sofrem mutaes. Por isso que no existe imunidade permanente contra alguns
vrus, como por exemplo, o vrus da gripe.

No estruturais:

Atividades enzimtica (presentes em pequenas concentraes);

Transcrio (polimerase);

Transcrio reversa (transcriptase reversa);

Enzimas que clivam receptores celulares (neuraminidases);

Lipdeos: Presentes no envelope viral, com origem celular pelo brotamento; Essencial para
conservar a capacidade infectiva da partcula; Vrus envelopados: sensveis ao tratamento com
ter e outros solventes orgnicos.
Carboidratos: Fazem parte do envelope viral e so provenientes da clula hospedeira.
Classificao dos vrus
Em 1998 o CITV props a Classificao Internacional dos vrus, atravs de
caractersticas tais como: Morfologia, propriedades fsico-qumicas, genoma, macromolculas,
propriedades antignicas e propriedades biolgicas.
Critrios taxonmicos:
a) Organismo hospedeiro: os organismos hospedeiros dos vrus foram encontrados em
todas as classes de seres vivos (procariotos e eucariotos).
b) Morfologia da partcula (simetria do capsdeo, presena ou no de envelope).
c) Tipo de genoma (DNA ou RNA).

Replicao dos Vrus


Ciclo de vida:
1. Ocorre a entrada do virus em uma clula hospedeira;
2. Liberao do genoma, RNA ou DNA;
3. Sntese de protenas iniciada;
4. Sntese de protenas precoces participantes da replicao;
5. Sntese das protenas tardias responsveis pelo empacotamento do genoma nos novos
capsdeos e as que alteram a estrutura e funo da clula hospedeira;
O ciclo reprodutivo dos virus tem em comum algumas fases:
Perodo de eclipse: tempo logo aps a entrada do virus na clula, que varia de acordo com o
virus, no sendo detectada nenhuma partcula viral fora da clula.
Perodo de maturao: acumulo da prognie viral dentro da clula. Se o virus ltico, a clula
para de funcionar e lisa, liberando a prognie, se o virus lisognico, o virus pode infectar
indefinidamente a clula hospedeira.
Ciclo de vida de bacterifagos: pode ser ltico (virulento) que quando o virus destri as
clulas bacterianas hospedeiras, ou pode ser lisognico (avirulento) que quando no h
destruio das clulas hospedeiras.
Bacterifagos

1. Ancoragem ou adsoro: o fago se fixam parede da bactria, atravs das fibras da


cauda, que se ligam a molculas especificas da parede celular bacteriana. necessrio
que exista uma complementaridade entre as molculas do fago e os receptores da
bactria.

2. Penetrao: a cauda do bacterifago libera lisozima, a bainha da cauda se contrai, o


centro da cauda atravessa a parede bacteriana e o fago injeta o DNA no interior da
bactria.
3. Biossintese: o DNA do fago induz a maquinaria de sntese da clula hospedeira a
produzir novos fagos. A sntese protica do hospedeiro interrompida pela degradao
de seu RNA induzida pelo virus pela ao de protenas virais que interferem na
transcrio.
4. Maturao: fase de combinao espontnea dos componentes virais, onde ocorre a
montagem das partculas do fago.
O DNA do fago empacotado no capsdeo; A cabea do fago ligada cauda e suas fibras por
ultimo; Lise celular auxiliada pela ao da lisozima codificada pelo fago;
5. Liberao: aps a montagem dos fagos, a clula se rompe, lanando-os no meio
externo. A lisozima, enzima codificada pelo fago, facilita a ruptura da parede bacteriana.
Fagos virulentos Ciclo ltico.

Conseqncias da lisogenia
1. Clulas lisognicas so imunes reinfeco pelo mesmo fago;
2. Alterao da constituio gentica da bactria. Converso lisognica (clulas
hospedeiras podem vir a apresentar novas propriedades);
3. Transduo especializada;
Virus Animais
1. Ancoragem ou Adsoro: ligao especifica de uma glicoproteina viral a um
constituinte da clula hospedeira, denominado receptor celular. Sem gasto de energia,
dependente da concentrao de clcio. A susceptibilidade de uma clula ao vrus
limitada presena de receptores (suscetibilidade X permissividade). Os virus no
envelopados tem os stios de fixao (protenas) na superfcie do capsdeo, e os virus
envelopados nas espculas (glicoproteinas).
2. Penetrao: evento dependente da energia que ocorre to logo o virus se adsorva
clula e envolve um dos trs mecanismos: a) Penetrao direta: translocao inteira do
virus para dentro da clula; b) Endocitose: mediada por receptores, resultando no

acumulo de partculas virais dentro de vesculas intracitoplasmticas; c) Fuso direta:


fuso do envelope do virus com a membrana plasmtica.
3. Descapsidao ou desnudamento: quando ocorre liberao do genoma viral (dentro da
clula) para sua completa expresso. Em alguns virus envelopados, o nucleocapsdeo
conduzido at prximo ao ncleo da clula, onde o acido nuclico penetra atravs do
poro do ncleo. O capsideo deixado de fora e desintegrado.
No citoplasma, alguns virus podem no ser totalmente desnudados, pois o genoma s
expresso se estiver parcialmente revestido; outros so desnudados em dois estgios,
com participao de enzimas e clulas virais.
4. Biossintese dos virus DNA e RNA: estratgias de replicao
Transcrio (inicial e tardia): Genoma com RNA traduzido imediatamente em protenas
virais, outros tipos de genomas so transcritos em RNAm e depois traduzidos em protenas.
Traduo: PROTENAS INICIAIS: so protenas que regulam a sntese celular e enzimas
para a replicao do genoma viral. PROTENAS TARDIAS: so estruturais e reguladoras
da transcrio e traduo.
Replicao: VIRUS DNA: ocorre no ncleo. VIRUS RNA: ocorre no citoplasma.

Caractersticas especiais da biossntese:


Em DNA fita simples e DNA fita dupla as enzimas celulares transcrevem o DNA viral
no ncleo.
Em DNA transcriptase reversa as enzimas celulares transcrevem o DNA viral no ncleo.
A transcriptase reversa copia o RNAm para sintetizar o DNA viral.
Em RNA fita positiva o RNA viral funciona como molde para a sntese de RNA
polimerase, que copia a fita negativa de DNA para fazer RNAm no citoplasma.
Em RNA fita negativa e RNA fita dupla as enzimas virais copiam o RNA viral para
fazer RNAm no citoplasma.
Em RNA transcriptase reversa as enzimas virais copiam o RNA viral para fazer DNA no
citoplasma, o DNA se desloca para o ncleo.
5. Maturao (montagem dos vrus):
Aps a sntese das protenas iniciais, transcrio do acido nuclico e sntese de protenas
estruturais, o vrus passa por uma fase de combinao espontnea dos componentes virais, antes
de sair da clula, as protenas dos capsmeros se agregam formando o pr-capsdeo, e o cido
nuclico ento inserido formando um nucleocapsdeo.
6. Liberao do vrus das clulas infectadas:
Os vrus no envelopados dependem da lise da clula para sua liberao. Os vrus
envelopados saem por brotamento das membranas celulares ou exocitose atravs de vesculas,
sem lise celular, que mais lento do que os no envelopados.
Alguns vrus j saem da clula infeccioso, outros precisam sofrer um processo de maturao
aps brotamento.

Aula 4
Cultura dos vrus
Existem 3 tipos bsicos de cultura celular:
a) Culturas primrias: com clulas dispersas derivadas de tecidos removidos do
hospedeiro.
b) Culturas de fibroblastos diplides: clulas imaturas que produzem colgeno e outras
fibras derivadas de tecidos fetais. Apresentam capacidade de rpidas e repetidas
divises.
c) Cultura celular contnua: linhagens de clulas diplides ou tecidos malignos que se
reproduzem por um grande numero de geraes.
Deteco de clulas infectadas por vrus:

Desenvolvimento de efeitos citopticos (CPE): lise ou necrose celular, formao de


incluses, formao de clulas gigantes e vacuolizao citoplasmtica.

Aparecimento de uma protena codificada por vrus: hemaglutinina (vrus da influenza).

Adsoro de eritrcitos s clulas infectadas: hemadsoro.

Deteco de cidos nuclicos especifico do vrus.

Morte de embrio quando h crescimento do vrus em ovo de galinha embrionado.

Quantificao dos vrus


Metodos fsicos: Metodos moleculares (PCR); Testes sorolgicos (radioimunoensaio e
imunoensaios de enzima); Ensaios de hemaglutinao (vrus com hemaglutinina); Microscopia
eletrnica;
Metodos biolgicos: dependem da morte e da infeco animal, ou dos efeitos citopticos em
cultura de tecido em uma serie de diluies do vrus. O titulo expresso como 50% da dose
infecciosa recproca da diluio do vrus que produz o efeito em 50% das clulas.
Vrus e teratognese
Teratognese ou teratogenia a induo de defeitos durante o desenvolvimento
embrionrio. O teratgeno o indutor de defeitos (vrus), a transmisso ocorre via placentria, e
quanto mais cedo ocorrer a infeco maiores so os danos celulares.
Como os vrus causam cncer?
Atravs de TRANSFORMAO NEOPLSICA, que quando ocorre a diviso
descontrolada das clulas infectada por vrus DNA tumoral. Depois da infeco h a insero de
todo ou parte de seu DNA em stios aleatrios do DNA hospedeiro. As protenas virais
bloqueiam os efeitos dos genes supressores de tumores, os quais impedem divises celulares
descontroladas).
Vrus RNA tumorais (retrovrus): O provrus codifica protenas que transformam as clulas
hospedeiras em clulas neoplsicas, clulas que no cessam suas divises.
Oncogenes: fragmentos de DNA do vrus que codificam protenas que causam divises
descontroladas celulares no hospedeiro.
Vrus DNA tumoral: oncogenes so genes mutantes que contem informao para gerar
neoplasia como tambm sntese viral de protenas para replicao.
Vrus de Plantas
Apesar das paredes celulares das plantas serem extremamente espessas e resistentes,
existem diversos vrus capazes de infectar plantas e, em plantas multicelulares, estes de
disseminam a partir de uma clula infectada, atingindo clulas vizinhas.
Todos os vrus de planta necessitam de um vetor para transmisso ou dano mecnico na
parede celular. Os vrus de plantas so transmitidos a curta distancia celula-celula pela
membrana plasmtica.
Infeco sistmica atravs do floema, que o tecido das plantas vasculares encarregado
de levar a seiva elaborada pelo caule at a raiz e aos rgos de reserva.

Semelhanas e diferenas entre os vrus animais e de plantas:

Exemplos de vrus em plantas: Vrus do Mosaico do Tabaco (TMV) e Vrus da Leprose dos
Citros (CiLV).
Virides

So partculas infecciosas de RNA menores que os vrus;

Consiste de uma nica molcula de RNA circular e de baixo peso molecular;

Dentro de clulas, no apresentam capsdeos ou envelopes;

No necessitam de vrus auxiliar;

No produzem protenas;

So copiados no ncleo da clula hospedeira;

Interrompem o metabolismo da clula hospedeira;

Podem inibir processamento de RNAm na clula hospedeira interrompendo a sntese


protica, ocasionando a morte celular;

Ainda no so conhecidos virides que infectam animais;

Ex: doena do tubrculo da batata;

Prons

uma partcula protica infecciosa extremamente pequena;

So resistentes a inativao por calor e radiao;

No so destrudas por enzimas, mas so sensveis a agentes que desnaturam protenas,


como fenol e uria.

Apresentam pareamento direto de aminocidos;

So protenas normais que se enrolam incorretamente, possivelmente como resultado de


uma mutao. As protenas dos prons parecem permanecer juntas no interior da clula
formando pequenas fibras ou fibrilas. Como as fibrilas no podem ser organizadas
corretamente na membrana plasmtica, estes agregados acabam matando a clula.

Princpios das doenas virais: Replicao do vrus; Resposta celular no aparente at efeitos
citopatolgicos; Morte celular ou neoplasia;
Etapas da Patogenia Viral:

Infeces Respiratrias Virais

Transmisso via respiratria, saliva ou perdigotos.

Defesa local: muco, ao ciliar e resposta local.

Definio clinica: por idade, poca do ano e padro da doena.

Infeces Gastrointestinais Virais:

Transmisso oral: alimentar.

Defesa local: resistncia a agentes cidos, detergentes e enzimticos.

Sintomatologia: diarria leve aquosa at doena febril grave com vomito, diarria e
protrao.

Definio clinica: por idade e poca do ano.

Rotavrus, norwalk, calcivrus.

Infeces Cutneas Virais


Os vrus so capazes de:

Romper barreira na pele;

Penetrar por pequenas escoriaes (herpesvrus);

Serem introduzidos por picadas de artrpodes (arbovrus);

Hospedeiros infectados (vrus da raiva);

Inoculados atravs de transfuses sanguneas;

Manipulao com agulhas contaminadas;

Podem permanecer localizados, causando leso ou se propagar;

Erupes cutneas generalizadas aps disseminao do vrus por corrente sangunea e


replicao;

Infeces Virais Do Sistema Nervoso Central

Disseminao hematognica (corrente sangunea): pode ser por via endotelial, passagem
para o liquido cefalorraquidiano, via celular, rompimento da barreira hematoenceflica,
disseminao para o crebro/medula espinhal e pode ocorrer viremia.

Fibras nervosas perifricas (neuronial): Vrions podem ser captados nas terminaes
motoras ou nervosas sensoriais e transportado por axnios atravs dos espaos
endoneurais.

Infeces Virais Congnitas

O vrus atravessa a barreira placentria e ocorre infeco in tero do feto;

Possvel morte fetal, nascimento prematuro, atraso do crescimento intra-uterino,


infeces ps natal persistente, malformaes de desenvolvimento, defeitos cardacos
congnitos, cataratas, surdez e microcefalia.

Princpios: 1) Capacidade do vrus de infectar a mulher grvida e ser transmitido para o


feto; 2) Estagio da gestao que ocorre a infeco; 3) capacidade do vrus de causar
leso diretamente ao feto ou indiretamente, por infeco da me.

Vrus de RNA fita positiva:

Poliovrus, Rhinovrus e vrus da hepatite A.

So pequenos, possuem RNA linear, replicao no citoplasma e simetria icosadrica


simples.

Vrus de RNA fita negativa:

Rhabidovrus (vrus da raiva), Orthomyxovrus (vrus da influenza), Vrus Ebola.

A transcrio ocorre no citoplasma.

Seqncia de eventos de replicao de um vrus de RNA negativo O primeiro tipo de


sntese de RNA resulta em uma serie de RNAm produzidos por genes virais. O segundo
corresponde ao RNA positivo cpia do genoma viral completo que so moldes para
molculas de RNA negativo, genoma da prognie de vrus.

Espcula:
1. Hemaglutinina: Anticorpos dirigidos impedem infeco da clula, neutralizando o vrus.
2. Neuraminidase: Cliva componente de cido silico da membrana plasmtica. Atua no
processo de montagem do vrus destruindo o acido silico (que impediria a montagem
de vrus).
3. Outras enzimas: RNA polimerase RNA dependente (converso RNA (-) em RNA (+);
RNA endonuclease (cliva o iniciador de precursores de RNAm contendo cap para a
inibio da sntese protica da clula hospedeira).

Variao antignica:
Vrus influenza: recombinao e rearranjo do genoma de duas linhagens geneticamente
distintas em uma clula. H modificao de antgenos de superfcie do vrus.
Conseqncia: Resistncia a anticorpos produzidos durante um processo de imunizao
e infeco de novos hospedeiros.
Vrus de RNA fita dupla:
Replicao do RNA do reovrus ocorre no citoplasma. O RNA de fita dupla inativo
como o RNAm e a primeira etapa na replicao corresponde transcrio utilizando a fita
negativa como molde na sntese de RNAm. Cada molcula de RNA no genoma codifica uma
nica protena, embora a protena final seja clivada.

A replicao do reovrus parece acontecer no interior de um equivalente intracelular do


cerne viral denominado partcula subviral, que permanece intacto na clula. Cada RNA fita
simples positivo com um cap montado no interior dessa estrutura sintetizadora de RNA fita
dupla.
RNA fita simples positiva com cap atuam como molde da sntese da prognie de RNA
genomico negativo originando prognie RNA fita dupla. H posterior encapsidao dessa
prognie. E os vrions maduros so montados.

Caracterstica gerais dos herpesvrus:

dsDNA, replicao e montagem nuclear;

Grandes, icosadricos e envelopados, penetrao por fuso e extruso por brotamento a


partir da membrana nuclear;

Codificam DNA polimerase, protenas regulatrias de sntese de RNAm, bloqueio de


sntese do hospedeiro.

Utilizam uma protena de superfcie celular da famlia das imunoglobulinas como


receptor.

Causam infeces persistentes, lticas (fibroblastos e clulas epiteliais) e latentes


(neurnios).

Patognese:
A doena inicia-se por contato direto, e o vrus infecta a maioria das clulas humana
(epiteliais e mucosas). Causa efeitos citopticos, latncia em neurnios alem de serem
reativados por estresse (trauma, febre, luz solar) e imunossupresso. Pode ser transmitido via
oral ou via sexual.