Hepatotoxicidade associada a drogas e toxinas - Laboratrio de Metabolismo e

de Toxicologia - Prof Alexandra Acco

=> Desenvolvimento da toxicidade
O agente txico chega ao stio de ao (rgo alvo) e faz alterao do meio
biolgico e interao com a molcula alvo, promovendo a toxicidade. Esta pode
ocorrer de maneira aguda ou tardiamente.
No entanto, existem mecanismos de reparao. Estes promovem a conteno
da liberao ou impedem a ao dos agentes txicos; interrompem a ao atravs de
respostas adaptativas; revertem a injria com mecanismos de reparao. Porm, se
estes falham, a toxicidade se manifesta.
A hepatotoxicidade por frmacos ou compostos qumicos pode se dar pelo
paracetamol, halotano (anestsico), etanol, tetracloreto de carbona, valproato
(anticonvulsivante).
-DILI => drug-induced liver injury: pode ser causado pela droga ou fatores
ambientes mais fatores do hospedeiro. No caso das drogas, o efeito causado vai
depender da classe toxicolgica dela, da durao do tratamento e da interao dela
com outros compostos. Nos fatores ambientais esto includos dieta, toxinas
ambientas, adio, alcoolismo e tabagismo, por exemplo. Por fim, quando se
considera o hospedeiro, a idade, o sexo, o peso, fatores genticos e imunolgicos
tambm so considerados.
=> Tipos de hepatotoxicidade
- esteatose heptica;
- necrose heptica;
- cirrose;
- hepatite viral-like;
- colestase;
- carcinogenese (carcinoma hepatocelular e colangiocarcinoma.
=> lcool
Pode causar vrios nveis de hepatotoxicidade. O uso abusivo de lcool gera,
em 90-95% das vezes, esteatose. Dez a vinte por cento dos casos de esteatose
podem evoluir para esteatofibrose. Esta pode evoluir para esteato-hepatite (40-50%) e
cirrose (8-20%). O carcinoma hepatocelular pode aparecer a partir da cirrose em 3 a
10% dos casos.
Os fatores que determinam a instalao e a evoluo dessas doenas incluem
a quantidade de lcool ingerida, gentica do indivduo, outras comorbidades

presentes e o meio ambiente. Existe uma correlao positiva entre o tempo e a

quantidade de lcool ingerida e a gravidade da doena.
=> Sinais de hepatotoxicidade
So geralmente genricos como: febre, anorexia, hipoproteinemia, coceira. Um
dos sinais patognomnicos mais evidentes a ictercia. Esses sinais podem alterar a
distribuio de frmacos no organismo.
=> Por que o fgado alvo?
O fgado responsvel por grande parte do metabolismo no nosso organismo.
Assim, ele pode produzir produtos do metabolismo que so txicos para o seu prprio
tecido. Pela veia porta h um grande fluxo sanguneo (90L/h), no qual so
transportadas muitas substncias. Dessas substncias, 80% extrado e
metabolizado e 20% escapa e vai para a circulao sistmica. No fgado existe uma
alta quantidade e variedade de enzimas responsveis pela biotransformao (pode
detoxificar ou ativar o frmaco).
=> Farmacocintica
O fgado participa da 3 fase: metabolizao e biotransformao. A
transformao qumica das substncias produz metablitos mais polares e
hidrossolveis, o que auxilia na eliminao do produto de uma droga.
Reaes da fase I - citocromo P450: muitas enzimas que fazem as principais
reaes do metabolismo. Ocorre 70 a 80% no retculo endoplasmtico liso, onde esto
localizadas as enzimas do CYP. As drogas podem sofrer oxidao, reduo e hidrlise
pela ao das enzimas e cofatores como NADP, NADPH e O2, tornando-se metablitos
polares, que so mais facilmente eliminados. Alguns metbolitos podem ser ativos,
causando intoxicao.
Reaes da fase II - enzimas da conjugao: a droga ou metablito vai ser
conjugada com um metablito endgeno formando um produto inativo. Nessa etapa
participam enzimas citoplasmticas e microssmicas. No caso dos metablitos que
eram txicos aps as reaes da fase I, aps a fase II eles no so mais txicos ou
ativos.
=> CYPs - Sistema de monooxigenases
Esto presentes nos rins, pulmes, intestino mas principalmente no fgado.
Neste rgo, esto menos presentes na rea P (portal) e mais presentes na rea
perivenosa. A rea perivenosa a mais afetada pela hepatotoxicidade. Quando ocorre
necrose perivenosa h uma rpida biotransformao, alta concentrao de

monooxigenases e baixa concentrao de glutationa-GSH, assim a clula fica mais

propensa a ao dos radicais livres.
=> Estresse oxidativo
Ocorre quando a concentrao de espcies reativas de oxignio (ROS) e
espcies reativas de nitrognio (RNS) maior do que a concentrao dos compostos
que fazem as defesas antioxidantes.
O acmulo de espcies reativas nos hepatcitos causa leso do tecido.
As principais espcies antioxidantes so: superxido dismutase, catalase, GPx,
GR e GSH. Essas enzimas so parmetros para avaliar o estresse oxidativo.
=> Perfuso heptica
um modelo de estudo do fgado que consistem em funcionamento do fgado
ex situ, onde os vasos de entrada e sada so canulados. um sistema norecirculante, sem hemoglobina, saturado com lquido nutritivo e com CO2 e O2 para a
manuteno da integridade do alvo.
=> Linhas de pesquisa no laboratrio

- Esteatose heptica alcolica: o estudo feito com a induo da esteatose por

consumo de etanol e dieta hiperlipdica em ratos. Para anlise, os ratos so
eutanaziados e amostras de fgado e sangue so colhidas. So feitas anlises de
histologia heptica, estresse oxidativo heptico (quantificao de espcies
antioxidativas e espcies reativas de oxignio e nitrognio), atividade mitocondrial e
bioqumica plasmtica. So pesquisadas drogas ou possveis frmacos (extratos de
plantas) que possam reverter o caso de esteatose ou ajudar na manuteno do
perfil lipdico do fgado.

- Cncer heptico: o cncer pode ser induzido pelo modelo tumor Walker 256 em
ratos. Compostos com potencial atividade antitumoral so investigados. As anlises
so feitas com amostras de fgado, do tumos e de sangue. Os nveis de
antioxidantes e de compostos pr-oxidativos so analisados, assim como
parmetros que identificam uma ao antitumoral ou pr-tumoral.
So realizados estudos com ratos hgidos, avaliando vias como a
gluconeognese, ureagnese, glicogenlise, amoniognese e consumo de oxignio.
Com ratos manipulados so avaliados a ativadade de frmacos, venenos, toxinas,
tumores, sepse, diabetes e etc.

UNIVERSIDADE FEDERAL DO PARAN

CURSO DE BIOMEDICINA

JESSICA BITTAR CAMARGO

RELATRIO DE INICIAO A PESQUISA I

Prof Eunice Andr

CURITIBA
2015