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Ao 2014
MECANISMOS GENTICOS BSICOS (PARTE I)
OBJETIVOS
Comprender que el mantenimiento de un alto grado de orden celular deriva de
la informacin gentica almacenada en el ADN que se puede replicar, mantener
y a veces reparar lesiones as como generar variabilidad mediante tres
mecanismos genticos bsicos: REPLICACION DEL ADN, REPARACION DEL
ADN Y RECOMBINACION GENICA.
UNIDAD DE CONOCIMIENTO
CONOCIMIENTOS PREVIOS REQUERIDOS: Para abordar el presente
Trabajo Prctico debern repasarse los contenidos del Trabajo Prctico referido
a Macromolculas.
TEMARIO
1. REPLICACIN DEL ADN
(1.1) Propiedades generales del proceso: semiconservacin, bidireccionalidad,
direccin de sntesis de cada cadena y semidiscontinuidad.
(1.2) Origen, Burbuja y Horquilla de replicacin.
(1.3) Etapas de la replicacin y enzimas intervinientes en cada una de ellas.
(1.4) Fidelidad de la rplica. Mecanismos de correccin.
(1.5) Comparacin del proceso en organismos procariontes y eucariontes.
(1.6) Replicacin de los telmeros.
2. REPARACIN DEL ADN
(2.1) Alteraciones del ADN: espontneas u ocasionadas por la accin de
factores ambientales.
(2.2) Estabilizacin gentica por reparacin de las diversas alteraciones del
ADN: mecanismos y enzimas intervinientes.
(2.3) Mutacin del ADN: tipos. Mutaciones gnicas: sustitucin, insercin y
delecin. Rol biolgico y consecuencias de las mutaciones.
3. RECOMBINACIN GENTICA
(3.1) Reordenamiento de secuencias genticas: recombinacin. Propiedades
generales e importancia biolgica. Variabilidad.
(3.2) Recombinacin general y especfica de lugar.
(3.3) Relacin con procesos de reparacin.
(3.4) Elementos genticos mviles.
VOCABULARIO ESPECFICO DEL TEMA
semiconservativo - cadena conductora - cadena retrasada - fragmentos de
Okazaki - burbujas de replicacin - primosoma - replisoma - ARN cebador
(primers) - antiparalelo - complementario - depurinacin - depirimidizacin
-desaminacin - gen - locus - loci - alelo - bacterifago - transposn desnaturalizacin - renaturalizacin - hibridacin.
BIBLIOGRAFA
- Alberts, B. y col. Biologa molecular de la clula. 3era. edicin. Ediciones
Omega. Barcelona. 1996
- Herrera, E. Elementos de Bioqumica. Editorial Interamericana. 1993
- Lehninger, A. Bioqumica. Editorial Omega. 1993
- De Robertis (h), Hib y Ponzio. Biologa Celular y Molecular. Editorial El
Ateneo. 1996
UNIDAD DE ACCIN
En su casa: El alumno deber:
- Investigar respecto a este T.P. basndose en el temario.
- Contestar el cuestionario gua de estudio a los efectos de autoevaluar si
cada uno de los puntos del temario han sido enfocados correctamente.
- Conocer el significado de todos los trminos que forman parte del vocabulario
especfico del tema.
- Intentar resolver los problemas de aplicacin.
En clase: resolver y discutir, con ayuda del docente, los problemas de
aplicacin para confirmar que los conceptos tericos estudiados en su casa
han sido integralmente comprendidos.
CUESTIONARIO GUA DE ESTUDIO
1. Propiedades generales de la replicacin del ADN
a) Por qu se dice que es semiconservativa?
b) Empieza en sitios al azar o en un/os punto/s preciso/s? Diferencias entre
procariontes y eucariontes al respecto.
c) A qu se denomina burbuja y horquilla de replicacin?
d) Qu ventajas presenta el hecho de que transcurra en forma bidireccional?
e) Por qu se dice que es semidiscontinua?
2. Respecto a la enzima responsable de la sntesis de ADN: ADN polimerasa
a) Escriba la ecuacin general de la reaccin catalizada por esta enzima.
b) Cules son los dos requisitos centrales para que la reaccin de
polimerizacin del ADN catalizada por esta enzima pueda llevarse a cabo?
c) La reaccin del inciso a) es energticamente desfavorable?, cmo explica
entonces que se lleve a cabo espontneamente en las clulas?
d) Todas las ADN polimerasas presentan (adems de su actividad polimerasa 5
3) una actividad exonucleasa 3 5. Para qu les sirve?
e) Se han descrito diferentes ADN polimerasas tanto para eucariotas como
para procariotas. En E. coli se han descrito tres: I, II y III. Indique las
principales caractersticas de cada una de ellas.
f) Mencione las ADN polimerasas presentes en eucariotas.
3. Respecto de las enzimas y protenas requeridas para la replicacin del ADN
a) Indique claramente la funcin desempeada por: helicasas, topoisomerasas,
protenas de fijacin al ADN monohebra (SSBP), primasas y ligasas.
b) A qu se denomina primosoma?
Gradiente de
CsCl
Ciclo 0
Molculas de ADN
(Interpretacin)
I
Ciclo 1
L
I
Ciclo 2
L
I
Ciclo 3
Referencias: P = banda pesada; I = banda intermedia; L = banda liviana
a) Interprete los resultados de los tubos.
b) Esquematice las molculas de ADN obtenidas en los ciclos 0, 1, 2 y 3.
c) De acuerdo a estos resultados, cul de las tres hiptesis se confirma?
Qu nombre recibe esta caracterstica de la replicacin del ADN?
3.- Una disolucin acuosa contiene ADN polimerasa I y las sales magnsicas
de dATP, dGTP, dCTP, dTTP.
A diferentes alcuotas de esta disolucin se les aaden las molculas de ADN
que se indican a continuacin. Cules de ellas conducirn a la sntesis de
ADN?
a.Una
cadena
desoxirribonucletidos.
polinucleotdica
circular
conteniendo
1000