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Prctica N 1
BIOQUMICA
PRCTICA 1
PREPARACIN DE SOLUCIONES Y EXTRACTOS
1. OBJETIVOS:
Aplicar los conceptos de soluciones y realizar su preparacin a distintas
concentraciones
Preparar extractos con diferentes muestras de vegetales para la aplicacin de los
diferentes anlisis estudiados en Bioqumica.
2. BASES CONCEPTUALES
EXTRACTOS
Se hacen para obtener un concentrado de principios activos. Existen extractos secos y
lquidos. Los secos se usan para elaborar pastillas.
Los extractos lquidos, principalmente de plantas, son la preparacin de una planta que se
disuelve normalmente con agua, se realiza una evaporacin del lquido excedente, o se hacen
extracciones repetidas del mismo lquido hasta que se obtiene la concentracin precisa. En
los extractos slidos o secos se hace una evaporacin total del extracto o tintura. En los
extractos se pueden producir prdidas de aceites voltiles.
La fuerza del extracto se establece como que un gramo del vegetal seco equivale a1
centmetro cbico del lquido (extracto).
En el laboratorio de bioqumica de alimentos se utilizan extractos acuosos y etanlicos segn
el anlisis que se va a realizar. El solvente depender de lo que se desea extraer, para
seleccionar el solvente se debe tomar en cuenta la polaridad de la sustancia a cuantificar.
La extraccin consiste en triturar finamente el tejido y colocarlo con el solvente, agitar para
permitir la liberacin de las sustancias de inters, centrifugacin para separar la fase slida
(pellet) de la fase lquida (en la que se encuentra el solvente y todo lo soluble en l), se
continua con la filtracin para separar el la fase lquida de la slida. Finalmente se conserva
las muestras en congelacin o refrigeracin, segn el tiempo que transcurrir hasta su
anlisis.
Para la preparacin de extractos debe tomarse en cuenta la adicin de reactivos que permiten
la separacin de compuestos especficos, por ejemplo, para la extraccin de enzimas debe
aadirse al solvente PMSF que es un reactivo que permite la separacin de las enzimas
ligadas a las membranas celulares, de no colocarse el reactivo no se lograra una total
extraccin enzimtica.
Como solvente puede usarse agua destilada, solucin buffer o tampn, acetona, ter, etanol,
entre otros.
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Nombre: Santiago Quezada
Ingeniera de alimentos
Curso: 3-M
Prctica N 1
REACTIVOS Y EQUIPAMIENTO DE LABORATORIO: Leer las secciones 1.2, 1.3, 1.4 y 1.5
del libro: ZUMBADO, H. (2002) ANLISIS QUMICO DE LOS ALIMENTOS MTODOS
CLSICOS. INSTITUTO DE FARMACIA Y ALIMENTOS UNIVERSIDAD DE LA HABANA. Se
realizar una evaluacin del contenido de estas secciones.
3. MATERIALES
Tubo Falcon
Pescabuzo
Buzo magntico
Tubos eppendorf
Vaso de precipitacin
Pipeta 20ml
Equipos
Centrfuga refrigerada
Micropipeta
Licuadora
Balanza
Reactivos
NaOH
H2O2
Sacarosa al 15 %.
Buffer pH 7
4. MTODO
I PARTE) PREPARACIN DE SOLUCIONES
Normalidad:
1. Preparar 50 mL de una solucin 0,1 N de NaOH
2. Conservar la solucin en un frasco plstico.
3. Rotular
Molaridad:
1. Preparar 10 mL de una solucin 900 mM H 2O2. El frasco del reactivo tiene 10v/v y
densidad 1,11 g/mL
2. Conservar la solucin en un frasco mbar en refrigeracin.
3. Rotular
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Nombre: Santiago Quezada
Ingeniera de alimentos
Curso: 3-M
Prctica N 1
Porcentaje:
1. Preparar 25 mL de una solucin de sacarosa al 15 %.
2. Conservar la solucin en un frasco de vidrio.
3. Rotular
II PARTE: PREPARACIN DE EXTRACTOS
1. Licuar el tejido congelado de la muestra designada a cada grupo, con pulsos de 5
segundos hasta que se triture sin descongelarse.
2. Pesar 10 gramos de muestra y colocar en un tubo Falcon
3. Aadir 15 mL de buffer pH 7 (proporcionado por el laboratorio).
4. Colocar un buzo magntico y agitar durante 15 minutos en refrigeracin (4C) y
oscuridad.
5. Retirar el buzo (usando un pescabuzo)
6. Centrifugar a 4C durante 15 minutos a 5500 rpm (centrfuga refrigerada)
7. Filtrar y recoger el filtrado en tubos eppendorf. Distribuir con micropipeta.
8. Congelar a -18C hasta su posterior anlisis.
9. ROTULAR (grupo, muestra, fecha de elaboracin).
5. CUESTIONARIO DE INVESTIGACIN
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Nombre: Santiago Quezada
Ingeniera de alimentos
Curso: 3-M
Prctica N 1
6. BIBLIOGRAFA
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Ingeniera de alimentos
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