Resumen : EFECTO EN EL APRENDIZAJE Y LA MEMORIA ESPACIAL

DE UN PPTIDO SINTTICO EN RATAS: ESTUDIO PRELIMINAR.

1.- INTRODUCCINUA PARA PAPER
Cul es el OBJETIVO del autor?
Evaluar los efectos de un pptido sinttico, diseado con base en las
molculas de conantoquinas, como posible agente sensible al receptor
de glutamato NMDA, en el aprendizaje y la memoria espacial en ratas.
Qu Hiptesis se comprobaran en el Experimento?
El uso de un pptido sinttico diseado con base en las molculas de
conantoquinas, causa un efecto estimulante sobre el receptor de
glutamato NMDA, y por consecuencia un aumento en la capacidad de
aprendizaje y memoria espacial en ratas.
Si tuviera Usted que disear un experimento para comprobar sta
hiptesis qu hara?
Un diseo experimental de etapas progresivas. Con ratas del mismo
sexo y misma familia. Las que se dividiran aleatoriamente en tres
grupos. Un grupo tendra por administracin una solucin salina (grupo
de control), otro grupo un agonista, y un ltimo bajo los efectos del
pptido sinttico (Grupos experimentales).
Con el uso de la Caja de Skinner, a los tres grupos de ratas se les
sometera bajo un proceso de condicionamiento, para el aprendizaje de
respuestas en base a refuerzos positivos. Respuestas que seran
progresivas, desde, inicialmente simples a ms complejas. Siendo
requisito para el avance, el dominio de la respuesta ms simple a la que
se va a aprender.
La recoleccin de datos se efectuara sobre el tiempo y el nmero de
intentos bajo el proceso de condicionamiento, que la rata demora en
aprender cada respuesta (una sola etapa), as como el proceso completo
(Todas las etapas)
El experimento consistira en comparar los efectos del pptido sinttico,
frente al grupo de control (solucin salina), as como la existencia de una
diferencia significativa frente a un agonista, en lo que respecta al
aprendizaje y memoria.
2.- MTODO

Cul es el mtodo?
Primero, uso de un diseo experimental de medidas repetidas. Con un
grupo de control y tres grupos experimentales, los cuales seran tratados
con un agonista (NMDA), un antagonista (MK-801) y con el pptido
sinttico (BLMP-101), respectivamente. Los sujetos seran 4 grupos de
ratas Wistar macho divididas aleatoriamente en 4 grupos iguales.
El instrumento a utilizar, es el laberinto de agua, el cual consiste en un
tanque circular con un dimetro de 150 cm y 64 cm de profundidad.
Llenado de agua hasta alcanzar 26 cm, con una temperatura de 27 C y
coloreada con azul de metileno. Una plataforma de escape de 10 cm de
dimetro y 25 cm de altura; es decir, a 1 cm por debajo del nivel del
agua. Los datos fueron registrados mediante una cmara de video Sony
Handycamp, referencia 450X (video 8), con visin nocturna, y
posteriormente proyectados para su anlisis en un televisor Panasonic
de 21. Adems, se utilizaron dos contadores de tiempo multifuncin,
referencia 54035A, y una llave de respuesta, referencia 58026, marca
Lafayette.
Mediante una administracin peritoneal, tanto el agonista como el
antagonista y el pptido sintetico, fueron diluidos en una solucin salina
y administrados a cada grupo de ratas. Siendo el grupo de control objeto
solamente de una solucin salina sin aditivos.
El diseo, tuvo una duracin de 16 das, dentro de los que se llevaron a
cabo tres fases. Consistentes en la diferente ubicacin de la plataforma.
Estando durante la primera fase, en el centro de uno de los cuadrantes
de laberinto, denominados arbitrariamente A, B, C y D, y en el cuadrante
A en las fases II y III del experimento.
En la primera fase o fase de adaptacin, con una duracin de 4 das, se
realizaron tres ensayos consecutivos diariamente con cada rata. En esta
fase, los sujetos de los cuatro grupos fueron inyectados con solucin
salina. La posicin de la plataforma fue cambiada a un cuadrante
diferente. Las ubicaciones de la plataforma para los ensayos fueron las
siguientes: da 1, A; da 2, B; da 3, C; y da 4, D. Para cada ensayo, el
animal fue ubicado dentro del laberinto desde un punto fijo de
colocacin, a partir del cual comenzaba a buscar libremente la
plataforma en un tiempo predeterminado de 90 s. Si la rata llegaba
dentro de este perodo, era dejada en la plataforma durante 30 s, ms si
el animal no encontraba la plataforma al cabo de los 90 s, el

experimentador proceda a ubicarla en ella, en la cual permaneca por

30 s. Al finalizar este tiempo, el animal era retirado de la plataforma y
era sostenido por el investigador durante 30 s, para luego iniciar el
segundo ensayo siguiendo el mismo procedimiento para este y el tercer
ensayo. El tiempo empleado por la rata para llegar a la plataforma fue
medido con un cronmetro.
La fase II o de entrenamiento se llev a cabo intercaladamente con la
fase III o de reconocimiento, las cuales tuvieron lugar los siguientes 12
das, durante los cuales cada rata fue inyectada 30 minutos antes de ser
puesta en el laberinto con las sustancias correspondientes a cada uno de
sus grupos: GC, solucin salina; GE1, pptido; GE2, NMDA; y GE1, MK801.
Durante estas fases, las ratas fueron ubicadas en el laberinto como se
describi en la fase I, teniendo en cuenta que la plataforma fue ubicada
nicamente en el cuadrante A. En los das impares correspondientes a la
fase II se efectuaron los tres ensayos como se describieron
anteriormente. En la fase III o de reconocimiento, los dos primeros
ensayos seguan el mismo procedimiento, y en el tercer ensayo la
plataforma era extrada del laberinto con el objetivo de medir la
memoria espacial de las ratas, en trminos de la sumatoria del tiempo
que empleaba cada rata en permanecer dentro del cuadrante realizando
bsquedas repetitivas de la plataforma, durante las seis sesiones. La
latencia de bsqueda de la plataforma se registr con un cronmetro,
observando la proyeccin del video en una pantalla de televisin en la
cual se haba demarcado los cuadrantes.
El autor responde a la hiptesis?
El autor, mediante a los resultados obtenidos acepta la hiptesis. El
pptido sinttico causa un efecto estimulante sobre el receptor diana, en
comparacin con el antagonista y con el grupo de control. Sin embargo,
pese a mostrar un aumento en comparacin con el grupo agonista, este
no es significativo, por lo que el autor, basado en la potencialidad del
pptido sintetico y su efecto sobre la capacidad de aprendizaje y
memoria, deja los resultados como base para futuras investigaciones.
Cules son las variables DEPENDIENTE; INDEPENDIENTE y CONTROL?
Variable dependiente: Aprendizaje y memoria espacial en ratas.

Variables independientes: Antagonista (MK-801), pptido sinttico

(BLMP-101), agonista (NMDA) (Variable independiente moderadora)
Variable de control: Solucin salina.
3.- RESULTADOS
Cmo interpretara los resultados?

Los resultados fueron analizados por medio de una anova (modelo

estadstico en el cual la varianza esta particionada), y luego con la
prueba de medida I-J, todos estos datos se ejecutaron con el programa
spss versin 11.0.

Resumen de los datos encontrados

Anlisis del tiempo empleado en llegar el cuadrante A: tabla 1.
fuente

sustancias

gl
Entre
sujetos
3

3.527*
(276.840)

.034

sujetos

20

78.497

secuencia

intra
sujetos
5

3.302**

.008

(186.507)
Secuencia x
sustancia

15

.965

.497

(54.498)
Error
100
56.475
secuencia
Nota: Los valores encerrados entre parntesis representan los errores
De medias cuadrticas.* p < .05. **p < .01.

Como se puede apreciar en la tabla 1, algunas sustancias utilizadas

ejercen influencia significativa (estadsticamente),(p<0.05) sobre la
realizacin de la prueba espacial de la misma manera la secuencia de
los ensayos produjo efectos importantes sobre el aprendizaje de la
localizacin de la plataforma con un nivel de significacin en el 992 por
miles de los casos Para identificar cul o cules fueron las sustancias
que generaron los efectos significativos sobre la memoria espacial, se
hizo el anlisis por pares basado en la media marginal, tal y como se
observa en la siguiente tabla:
Comparacin de medias entre cada par grupo: tabla 2
Diferencia
entre
medias*(I-j)

significacin

(I)sustancia
Salinas

(J)sustancia
pptidos

-4.447

.045

pptidos

MK-801

6.085

.009

NMDA

MK-801

4.644

.038

*basadas en las medias marginales estimadas.

p < .05.

El anlisis estadstico expuesto en la tabla 2 nos sugiere que el pptido

mejor la memoria espacial, en comparacin con el grupo control y con
el grupo MK con un nivel de significancia p < .05. Y en comparacin con
el NMDA mejor tambin la memoria espacial, aunque no
significativamente. Si se observa el nmero de sujetos de los cuales el
pptido mejor la memoria en comparacin con los sujetos del NMDA,
esta mejora se observ en el 50% de los sujetos. Lo que sugiere que
tanto el pptido como el NMDA se comportan de manera similar en el
aprendizaje espacial.
Estimaciones de la media y porcentaje de latencia de bsqueda: tabla 3
Media min
sustancia
Salina
pptido
NMDA
MK-801

17.958*
16.947
20.954
19.513
14.869

Latencia de bsqueda
%
34.36
43.65
40.65
30.97

*media global.

Porcentaje (%) calculado para el tiempo de latencia de bsqueda de

cada grupo en el cuadrante A. Hay que aclarar que el tiempo mximo
que podan estar los animales en el laberinto fue de 48 minutos. El
anlisis descriptivo que muestran los datos de la tabla 3 indica que a
mayor permanencia de la ratas, analizando la conducta en grupos, en el
cuadrante donde se encontraba la plataforma, mayor recuerdo de la
ubicacin de la plataforma. En otras palabras, si la ratas demoraban
menos tiempo en el cuadrante de marcado con la letra A, estaban
haciendo la bsqueda de la plataforma en el lugar equivocado.

4.- DISCUSIN
La discusin comprende la interpretacin de los datos por parte del
autor a manera de conclusiones. Una buena discusin ofrece respuesta a
la interrogante planteada en la introduccin.
El autor responde a la interrogante? explique cmo.

El anlisis estadstico expuesto en la tabla 2 sugiere que el pptido

mejor la memoria espacial, en comparacin con el grupo control y con
el grupo MK, con un nivel de significancia p < .05. Y en comparacin con
el NMDA mejor tambin la memoria espacial, aunque no
significativamente. Con base en los datos obtenidos en este estudio es
evidente que las premisas propuestas se cumplieron, hasta donde se
puede concluir, a saber: a) al pptido diseado a partir de la
conantoquina G como molde se le logr remover completamente su
caracterstica de neurotoxina,b) el pptido diseado conserv las clulas
del sistema nervioso, particularmente corteza cerebral, como su blanco

preferido, c) el pptido diseado conserv su capacidad y selectividad

por la interaccin con la subunidad NR2B del receptor iGluR-NMDA, y d)
la funcin derivada de la actividad qumica de dicha interaccin fue la de
mejorar los procesos de aprendizaje y memoria en ratas. Dado el
potencial que tiene el pptido, en funcin de los resultados, ste debe
ser determinado con investigaciones subsecuentes. Por tanto, se
recomienda para la continuacin de este estudio: a) validar los
resultados obtenidos, b) evaluar otros sistemas de aplicacin del
pptido, c) realizar estudios de farmacocintica del mismo, d) validar los
procesos de aprendizaje y memoria espacial con una batera tipo de
pruebas psicolgicas, e) realizar evaluaciones de otros aprendizajes
tanto simple como complejos, y f) evaluar la influencia de este pptido
en hembras y machos y en diferentes edades. Finalmente, si se tiene en
cuenta que cualquier droga o sustancia puede tener un efecto
extraordinario en una situacin conductual, y el hecho de que esta
situacin se presente ocasionalmente, puede ser suficiente para
mantener la conducta de bsqueda de los investigadores. De hecho, el
uso de sustancias farmacolgicas en el tratamiento de seres humanos
enfermos representa probablemente la aplicacin ms valiosa de la
ciencia farmacolgica desde el punto de vista social.