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Coprocultivos, priorizacin de

colonias, interpretacin y
Qu informar?
Edgar Gonzales

Infeccin Gastrointestinal
Las manifestaciones clnicas ms destacadas
de las gastroenteritis son fiebre, vmitos,
dolor abdominal y diarrea moderada a
intensa.
Causada por microorganismos que adems de
diarrea inducen inflamacin.
Aparecen leucocitos PMN en heces.
No producen toxinas.

Qu buscamos?

Salmonella
Shigella
Campylobacter
Yersinia
Aeromonas
Plesiomonas
Vibrio
E. coli diarrogenicas..???

Primero lo primero
Recepcin de la muestra:
si no se procesa
inmediatamente
colocar en CB

Datos completos: Nombre,


edad, sexo, procedencia, tto
previo, tiempo de enfermedad.
Caractersticas de la muestra
Reaccin inflamatoria
Coloracin VAGO (opcional)

1 da: Siembra primaria

Mc Conkey (sorbitol)
SS
XLD
TCBS
Campylobacter
(selectivo - filtrado)

Selenito F

2 da: Lectura de placas


MEDIO

VIRARON

SOSPECHOSAS

CRECIMIENTO

MC

Colonias
rojas

100 %

Colonias
transparentes

0%

3 +++

XLD

Colonias
amarillas

90 %

Rojas transparente
c/s pto negro (H2S)

10 %

3 +++

SS

Colonias
rojas

95 %

Col. transparentes
c/s pto negro (H2S)

5%

2 ++

TCBS

No hubo

Cualquiera:
Crecimiento
amarillo - verde

Campy

24h NEG

F - SS

Salmonella-Shigella

Con H2S
Lactosa negativo

Lactosa positivo

XLD: xilosa-lisina-desoxicolato

Sospechosas: Shigella

Sospechosas: Salmonella

Colonias amarillas:
Positivas a CH

TCBS:
tiosulfato-citrato-bilis-sacarosa

Medio para Campylobacter


Medios selectivos con ATB:
Skirrow, Butzler, Karmali
Filtrado (0.45um)
Temperatura 42 C
Tiempo 24 48 Horas
Microaerofilia:
5-10% O2
10-15% CO2
80-85% N2

2 da: Resiembra
Una serie de
cada tipo de
colonia
sospechosa:
TSI LIA
Siembra en SS
a partir del
Selenito F

Selenito F

TSI-LIA-TSA

Pruebas bioqumicas TSI y LIA


Dr. Grados - 1982
GRUPO I

HIDROGENO SULFURADO (H2S)

POSITIVO

GRUPO II

ANAEROGENICOS (GAS NEGATIVO)


TSI

GAS

H2S

LIA

K/A

o+

K/K

INDOL ENTEROBACTERIAS
-

Salmonella typhi

AEROGENICOS (GAS POSITIVO)


INDOL ENTEROBACTERIAS

HIDROGENO SULFURADO (H2S) NEGATIVO


ANAEROGENICOS (GAS NEGATIVO)

TSI

GAS H2S

LIA

K/A

K/A

A/A o K/A

K/K o K/N

A/A o K/A

K/A

INDOLENTEROBACTERIAS
- o + Shigella
+

Escherichia

TSI

GAS

H2S

LIA

K/A

2+

- o 4+

K/K

Salmonella

A/A

K/K

Serratia

K/A o A/A

2+

- o 4+

K/K

Arizona

K/A

R/A

Proteus

K/A o A/A

2+

- o 4+

K/K

- o + Citrobacter

K/A

R/A

Providencia

K/A o A/A

2+

4+

R/A

- o + Proteus

A/A

K/A

2+

4+

K/K

- o + Edwarsiella

GRUPO III OXIDASA POSITIVO


TSI

GAS

H2S

LIA

INDOL

BACTERIAS

K/A o A/A

- o 2+

K/K o K/A

Aeromonas

K/A

K/K

Plesiomonas

K/A o A/A*

K/K

K/A

K/K**

K/K o K/N

K/K o K/N

4+

- o + Enterobacter

A/A o K/A - o + Yersinia

AEROGENICOS (GAS POSITIVO)


TSI

GAS H2S

LIA

INDOLENTEROBACTERIAS

A/A o K/A

2+

K/K o K/N

Escherichia

A/A

4+

K/K

Vibrio cholerae

A/A o K/A

3+

K/K o K/A

Enterobacter

V. parahaemolyticus

K/A o A/A

2+

K/K

Serratia

K/K o K/N

BNF

K/A

(+)

K/A o R/A

Proteus

K/K o K/N

Ps. putrefaciens

K/A

K/A o A/A

S. paratyphi A

- o + Klebsiella

3 da: lectura de diferenciales


Proced

MC1
MC2
MC3
XLD
XLD
SS
SS
TCBS

TSI

LIA

H2S

Ind

A
K
K
K
K
K
A
K

A
A
A
A
A
A
A
A

+
+
-

K
K
K
K
R
K
A
K

A
K
K
A
A
K
A
K

+
+
+
+
+

Oxi

Bacteria

+
+
+

E coli
E coli
Aeromonas
Shigella
Proteus
Plesiomonas
Yersinia
Vibrio

Sero

Salmonella
S. typhi
Salmonella sp.

Con que lo puedo confundir


Proteus

Citrobacter

Shigella
Aislamientos

Shigella flexneri B
Shigella sonnei D
Shigella boydii C
Shigella dysenteriae A
Shigella sp.

Hospital Lab. Privado


(%)
(%)
53.2

20.0

32.5

58.0

8.4

6.0

0.8

0.0

5.1

16.0

Shigella

Campylobacter
Medio Selectivo:
Karmali

Mtodo de
Filtracin

Yersinia enterocolitica

TSI

LIA

Los oxidasa positivos


Fermentadores de
glucosa
Indol positivo

Aeromonas
Plesiomonas
Vibrio

Tambin puede
ser Aeromonas

Prueba de oxidasa

E. coli diarrognicas
E. coli son organismos de la
flora intestinal normal.
La definicin de E. coli
diarrognicas est basada
en la demostracin de
ciertas caractersticas de
virulencia.
Esto hace difcil el
diagnstico y tratamiento
oportuno.

E. coli

Ochoa TJ; 2006. Diarrea Producida por Escherichia coli

Mtodos
diagnsticos
Cultivos Mc Conkey
Debemos
utilizar
Cultivo en Mc
ConkeySorbitol paraANTISUEROS
O157:H7
para
Serologa para E. Coli
la deteccin de
Aglutinacin en latex
EPEC?
para O157:H7
ELISA o Cromatografia
para shiga toxina
PCR convencional
PCR a tiempo real

Identificacin con Vitek 2

inoculo

Lectura cod. barras

Tarjetas en el Rack

Llenado de tarjetas

Lectura de tarjetas

Eliminacin de tarjetas

Serologa

Positivo

Negativo

Shigella: B, D, C y A
Salmonella: antisuero
somtico polivalente
luego por grupos D, B, C...
Yersinia
Vibrio

Reporte de resultados
Cultivo positivo:

Shigella flexneri grupo B


Salmonella grupo D
Campylobacter spp.
Aeromanas hydrophila

Cultivo negativo a:
Salmonella, Shigella, Campylobacter y Vibrio

Aislamientos INSN 2011 - 2012


Microorganismo
Campylobacter sp.
Shigella flexneri
Shigella sonnei
Aeromonas sp.
Salmonella sp.
Plesiomonas shigelloides
Shigella boydii
Shigella sp.
Yersinia enterocolitica
Escherichia coli, enteroinvasive (EIEC)
Vibrio cholerae
TOTAL

Nmero

261
135
74
35
33
10
10
7
2
1
1
569

45.9
23.7
13.0
6.2
5.8
1.8
1.8
1.2
0.4
0.2
0.2
100.0

Gracias por la atencin


"Lo que tenemos que aprender,
lo aprendemos hacindolo"
egones_5@hotmail.com

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