Algas e Qualidade Agua

GOVERNO DO ESTADO DE SO PAULO
SECRETARIA DA AGRICULTURA E ABASTECIMENTO

AGNCIA PAULISTA DE TECNOLOGIA DOS AGRONEGCIOS
INSTITUTO DE PESCA
PROGRAMA DE PS-GRADUAO EM AQUICULTURA E PESCA
AVALIAO AMBIENTAL DE UM SISTEMA DE PISCICULTURA,

ATRAVS DO FITOPLNCTON E DE ENSAIOS
ECOTOXICOLGICOS COM A MICROALGA
Pseudokirchneriella subcapitata (CHLOROPHYCEAE)
Luciana Miashiro
Orientadora: Profa. Dra. Cacilda Thais Janson Mercante
Co-orientador: Prof. Dr. Julio Vicente Lombardi
Dissertao apresentada ao Programa de

Ps-graduao em Aquicultura e Pesca do
Instituto de Pesca APTA - SAA, como
parte dos requisitos para obteno do ttulo
de Mestre em Aquicultura e Pesca.
So Paulo
Dezembro - 2008
GOVERNO DO ESTADO DE SO PAULO

SECRETARIA DA AGRICULTURA E ABASTECIMENTO
AGNCIA PAULISTA DE TECNOLOGIA DOS AGRONEGCIOS
INSTITUTO DE PESCA
PROGRAMA DE PS-GRADUAO EM AQUICULTURA E PESCA
AVALIAO AMBIENTAL DE UM SISTEMA DE PISCICULTURA,

ATRAVS DO FITOPLNCTON E DE ENSAIOS
ECOTOXICOLGICOS COM A MICROALGA
Pseudokirchneriella subcapitata (CHLOROPHYCEAE)
Luciana Miashiro
Orientadora: Profa. Dra. Cacilda Thais Janson Mercante
Co-orientador: Prof. Dr. Julio Vicente Lombardi
Dissertao apresentada ao Programa de

Ps-graduao em Aquicultura e Pesca do
Instituto de Pesca APTA - SAA, como
parte dos requisitos para obteno do ttulo
de Mestre em Aquicultura e Pesca.
So Paulo
Dezembro - 2008
Ficha catalogrfica elaborada pelo Ncleo de Informao e Documentao Instituto de Pesca, So Paulo
M618a Miashiro, Luciana
Avaliao ambiental de um sistema de piscicultura atravs do
fitoplncton e de ensaios ecotoxicolgicos com a microalga
Pseudokirchneriella subcapitata (Chlorophyceae) / Luciana
Miashiro So Paulo, 2008
xi, 99f. ; il. ; grf. ; tab.
Orientadora: Cacilda Thais Janson Mercante
Co-orientador: Julio Vicente Lombardi
Dissertao(mestrado) Instituto de Pesca, Secretaria de
Agricultura e Abastecimento Agncia Paulista de Tecnologia
dos Agronegcios, So Paulo, 2008.
1. Piscicultura. 2. Fitoplncton. 3. Ensaios ecotoxicolgicos. I.
Ttulo. II. Mercante, Cacilda Thais Janson (orientadora). III.
Lombardi, Julio Vicente (co-orientador).
CDD 639.2
Nobuko Yamauchi
In memoriam
DEDICO
A meus pais, Olivio e Ritsuko, que

constantemente estiveram ao meu
lado, sempre apoiaram meus estudos
e, aguentando minha teimosia, me
ensinaram como valioso ter o amor
da famlia presente em nossa vida. A
vocs, ofereo minha eterna gratido.
OFEREO
AGRADECIMENTOS
Dedico meus sinceros agradecimentos a todos que, de alguma forma,
contriburam para a realizao deste trabalho:
Ao Instituto de Pesca APTA/SAA-SP e ao Programa de Ps-graduao
em Aquicultura.
FAPESP, Fundao de Amparo Pesquisa do Estado de So Paulo,
pela concesso do auxlio financeiro, Processo 05/05180-0, que beneficiou o
projeto do qual este trabalho fez parte.
Dra. Cacilda Thais Janson Mercante, pela confiana ao aceitar
orientar-me neste trabalho e pela dedicao no desenvolvimento do mesmo.
Ao Dr. Julio Vicente Lombardi, pelos ensinamentos em sua coorientao e exemplo profissional, que sempre foram uma grande inspirao.
Dra. Cleide Schmidt R. Mainardes Pinto e ao Ncleo de Aquicultura do
Plo Regional de Desenvolvimento Tecnolgico dos Agronegcios do Vale do
Paraba APTA/SAA-SP, de Pindamonhangaba, por permitirem a realizao
de nossas coletas e pela indispensvel colaborao.
Dra. Andrea Tucci, Pesquisadora Cientfica e Chefe da Seo de
Ficologia do Instituto de Botnica de So Paulo, que sempre me recebeu com
enorme simpatia e colaborou de forma preciosa neste trabalho. No posso lhe
agradecer o suficiente pela sua contribuio, seu valor inestimvel.
A todos os estagirios, funcionrios e alunos da Ps-graduao do
Instituto de Pesca, especialmente aos envolvidos no Projeto ECOTOX: Natlia
Caruso, Luis Evangelista, Joo Saviolo Osti, Jeniffer Sati, Felipe Madeira,
Renata Bazante e Luis Moreira, pelo companheirismo e trabalho em equipe.
ii
Aos pesquisadores Cientficos do Instituto de Pesca, por toda

colaborao ao Programa de Ps-graduao: Dr. Hlcio Luis de Almeida
Marques, Dra. Elizabeth Romagosa, Dr. Carlos M. Ishikawa, Dr. Clovis F. do
Carmo, Dr. Nilton E. T. Rojas, Dr. Marcelo B. Henriques, Dr. Andr M. Vaz dos
Santos, Dra. Suzana Sendacz, Dra. Cludia M. Ferreira, Dra. Maria Jos T.
Ranzani de Paiva e, em especial, Dra. Cintia Bardar Pedroso, pelos valiosos
conselhos dados durante o Exame de Qualificao.
Ao Dr. Carlos E. M. Bicudo e Dra. Regina Sfadi, que me honraram
com suas participaes na Comisso Examinadora para a Defesa desta tese.
A Michel Will, pela sua fiel amizade, pelos cuidados com o Pitoco, pela
cmera fotogrfica, que facilitou muito a identificao das microalgas deste
trabalho, e por tudo que me ensinou na arte de roubar almas. H anos atrs, a
Fotografia transformou meu olhar sobre o mundo, trazendo uma beleza em
minha vida que levarei para sempre. Muito disso tudo, eu devo a voc.
Dra. Vilma Palazetti de Almeida e ao Dr. Paulo Incio K. L. Prado, que
despertaram em mim, ainda durante a graduao, o gosto pela pesquisa
cientfica. Foram seus incentivos naquele incio que me trouxeram at aqui.
Aos amigos tropeiros, pela lealdade que vem me acompanhando nestes
ltimos anos, como fonte de fora e alegria: Cincotto, Itao, Melina, Thiago, Pri,
Marina, Ulisses, Thithola, Fer, Las e, em especial, Mller, pelo seu amor e pela
sua luz.
A Paulo Lahoz, pelo seu carinho, que surgiu durante essa caminhada e
me surpreendeu de uma maneira maravilhosa e muito especial. Sempre
guardarei nossos momentos com muito amor.
As melhores recordaes de todas as viagens, sejam elas reais ou
imaginrias, so aquelas que nos ensinam como somos fortalecidos pela
famlia e pelos amigos. Por isso, muito obrigada a todos!
iii
SUMRIO
RESUMO
ABSTRACT
xi
1. INTRODUO
2. MATERIAL E MTODOS
2.1. rea de estudo
10
2.2. Manejo do viveiro durante a engorda de tilpia do Nilo
10
2.3. Amostragens
11
2.4. Variveis abiticas e Clorofila a
14
2.5. Caracterizao do fitoplncton
16
2.6. Ensaios ecotoxicolgicos com Pseudokirchneriella subcapitata
19
3. RESULTADOS
24
25
33
48
4. DISCUSSO
52
61
70
4.4. Sntese da discusso
75
5. CONCLUSO
77
6. REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS
78
7. ANEXOS
85
iv
LISTA DE ABREVIATURAS
ABNT
Associao Brasileira de Normas Tcnicas
ACP
Anlise de Componentes Principais
APHA
American Public Health Association
APTA
Agncia Paulista de Tecnologia dos Agronegcios
CEO
Concentrao de Efeito Observado
CENO
Concentrao de Efeito No Observado
CONAMA
Conselho Nacional do Meio Ambiente
FAO
Food and Agriculture Organization of the United Nations
FAPESP
Fundao de Amparo Pesquisa do Estado de So Paulo
IET
ndice de Estado Trfico
INMET
Instituto Nacional de Meteorologia
LOEC
Lowest Observed Effect Concentration
NOEC
No Observed Effect Concentration
OD
Oxignio Dissolvido
SAA-SP
Secretaria de Agricultura e Abastecimento de So Paulo
STD
Slidos Totais Dissolvidos
UNT
Unidades Nefelomtricas de Turbidez
NDICE DE TABELAS
Tabela 1.
Volume da amostra para o preparo das solues-teste com

efluente (ABNT, 2005).
Tabela 2.
Dados
biomtricos
22
quantificao
do
manejo
alimentar
registrados durante o ciclo de produo de tilpia (Oreochromis

niloticus) no presente estudo (Plo Regional de Desenvolvimento
Tecnolgico dos Agronegcios do Vale do Paraba).
Tabela 3.
Vazo (L.s-1) medida no Afluente (E1), Efluente (E2) e no Corpo

receptor (E5) ao longo do perodo de estudo.
Tabela 4.
24
26
Valores mdios e desvio padro das variveis fsicas e qumicas

nas estaes de coleta e limites permitidos pelo CONAMA (2005)
para gua doce de classe 2.
Tabela 5.
ndice de Estado Trfico dos locais de amostragem ao longo do

perodo de estudo.
Tabela 6.
27
30
Coeficientes de correlao de Pearson e Kendall entre as

principais variveis abiticas e os dois primeiros eixos de
ordenao (N = 36).
Tabela 7.
32
Grupos funcionais fitoplanctnicos, segundo REYNOLDS et al.

(2002), dos txons considerados abundantes nas amostragens
de todo o perodo de estudo.
40
Tabela 8.
Frequncia de ocorrncia dos txons registrados.
41
Tabela 9.
Coeficientes de correlao de Pearson e Kendall entre as

variveis biolgicas (txons descritores com base na Frequncia
de Ocorrncia) e os dois primeiros eixos de ordenao (N = 36).
vi
47
NDICE DE FIGURAS
Figura 1.
Esquema de localizao das estaes de coleta.
12
Figura 2.
Imagem fotogrfica da Estao 1 (afluente).
12
Figura 3.
Imagem fotogrfica da Estao 2 (viveiro).
12
Figura 4.
Imagem fotogrfica da Estao 3 (efluente).
13
Figura 5.
Imagem fotogrfica da Estao 4 (zona de mistura).
13
Figura 6.
Imagem fotogrfica da Estao 5 (montante da zona de 13

mistura).
Figura 7.
Imagem fotogrfica da Estao 6 (jusante da zona de 13

mistura).
Figura 8.
Imagem
fotogrfica
da
microalga
Pseudokicrhneriella
subcapitata, sob aumento de 400x, em microscpio tico

19
comum.
Figura 9.
Imagem fotogrfica dos recipientes-teste no interior da

incubadora.
Figura 10.
22
Precipitao acumulada mensal e nmero de dias com chuva

registrados durante o perodo de estudo (Instituto Nacional de
Meteorologia, Estao de Taubat-SP).
Figura 11.
Ordenao biplot, pela ACP, das unidades amostrais (meses

de coleta) e das variveis abiticas.
Figura 12.
31
Contribuio das Classes taxonmicas para a riqueza de

txons de todo o perodo de estudo.
Figura 13.
25
33
Contribuio das Classes taxonmicas para a riqueza de

txons de cada estao de coleta, ao final do perodo de 34
estudo.
Figura 14.
Densidade de organismos (org.mL-1) de cada estao de

coleta ao longo das amostragens realizadas durante o perodo
de estudo.
Figura 15
36
Contribuio das Classes taxonmicas para a composio da

densidade de organismos ao longo das amostragens de cada
estao de coleta.
Figura 16.
38
Ordenao biplot, pela ACP, das unidades amostrais (meses

vii
de coleta) e dos txons descritores. As unidades amostrais

esto identificadas de acordo com a estao de coleta.
Figura 17.
46
Mdia do crescimento algceo nos ensaios com amostras

brutas. Barras vermelhas indicam diferena significativa, em
relao ao controle, nos resultados dos ensaios de cada
campanha amostral.
Figura 18.
49
Variao do crescimento algceo (cels.mL-1 x 104) nos

ensaios com amostras das Estaes 2 e 3 e concentraes de
Nitrognio total (mg.L-1)
Fsforo total (mg.L-1)
nas
respectivas amostragens.
Figura 19.
50
Mdia do crescimento algceo nos ensaios com diluio de

efluente. Barras vermelhas indicam diferena significativa, em
relao ao controle, nos resultados dos ensaios de cada
51
campanha amostral.
Figura 20.
Fases da curva de crescimento de algas em sistema de

cultivo esttico (SIPABA-TAVARES e ROCHA, 2001).
87
Figura 21.
Imagem fotogrfica da Cmara de Neubauer.
88
Figura 22.
Esquema da rea de contagem dos retculos da Cmara de

Neubauer (rea total: 9 mm2) (SIPABA-TAVARES e
ROCHA, 2001).
88
viii
ANEXOS
Anexo 1.
Composio da rao fornecida durante o ciclo de cultivo

(Informaes de rtulo).
Anexo 2
85
Solues para preparo do meio de cultura L. C. Oligo (ABNT,

2005).
86
Anexo 3.
Fases de crescimento de cultura de algas.
87
Anexo 4.
Contagem em Cmara de Neubauer (SIPABA-TAVARES e

ROCHA, 2001).
Anexo 5.
88
Informaes sobre o clima registradas no momento de cada

amostragem.
Anexo 6.
90
Fatores abiticos medidos em cada estao de coleta ao

91
longo do perodo de estudo.

Anexo 7.
Densidade total (org.mL-1) e Grupo funcional (REYNOLDS et

al., 2002) dos txons considerados abundantes em cada
estao de coleta.
Anexo 8.
Validao
dos
95
ensaios
ecotoxicolgicos
com 97
Pseudokirchneriella subcapitata.
Anexo 9.
Densidade algcea registrada em cada repetio ao final dos

ensaios
ecotoxicolgicos
subcapitata.
ix
com
Pseudokirchneriella 98
RESUMO
O objetivo deste estudo foi analisar a qualidade da gua de um sistema
de piscicultura continental, durante o perodo de engorda de tilpia do Nilo,
atravs da caracterizao qualitativa e quantitativa do fitoplncton e da
realizao de ensaios ecotoxicolgicos com Pseudokirchneriella subcapitata. A
rea de estudo foi a piscicultura experimental no Plo Regional de
Desenvolvimento Tecnolgico dos Agronegcios do Vale do Paraba, na cidade
de Pindamonhangaba, Estado de So Paulo. Foram realizadas seis
amostragens entre novembro de 2006 e maro de 2007, em seis estaes de
coleta: afluente (E1), viveiro (E2), efluente (E3), zona de mistura (E4), montante
e jusante a zona de mistura (E5 e E6, respectivamente). As Estaes 2 e 3
apresentaram altas concentraes de fsforo total (> 0,3 mg.L-1), nitrognio
total (> 2,5 mg. L-1), ortofosfato (> 39,0 g.L-1), nitrognio amoniacal total (> 1,7
mg. L-1) e clorofila a (> 80,0 g.L-1), promovidas pelo arraoamento, a excreo
dos peixes e a quantidade de matria orgnica depositada no fundo do tanque.
Essas alteraes nos aspectos abiticos refletiram na composio e estrutura
do fitoplncton em E2 e E3, que apresentaram altos valores de densidade
fitoplanctnica, com abundncia de espcies frequentes em locais eutrficos.
No corpo receptor, aps seu encontro com o efluente, houve incremento na
densidade e no nmero de txons. As caractersticas de ambiente ltico das
Estaes 1, 4, 5 e 6 influram diretamente nas caractersticas do fitoplncton,
com baixos valores de densidade e em maior representatividade de
organismos oportunistas. No corpo receptor, houve incremento nos valores de
densidade fitoplanctnica e no nmero de espcies frequentes em locais
eutrficos, aps seu encontro com o efluente. Os ensaios ecotoxicolgicos
confirmaram as caractersticas eutrficas de E2 e E3, apresentando maior
crescimento algceo, com diferena significativa, em relao ao controle,
apontada pelo Teste de Tukey. Os ensaios ecotoxicolgicos com amostras
brutas demonstraram que o potencial do efluente em estimular crescimento
algceo ainda pde ser detectado aps a zona de mistura. Esses ensaios
foram vlidos para demonstrar que o manejo do viveiro contribui diretamente
para o crescimento de algas. Nos ensaios de ecotoxicidade com diluio do
efluente foram verificados CEO de 25% e CENO de 12,5%. Os ensaios
ecotoxicolgicos com diluio de efluente se mostraram importantes para
verificar at que ponto o efluente deveria estar naturalmente diludo no corpo
receptor, para que os efeitos de estmulo de crescimento sejam neutralizados.
Concluiu-se que o manejo do viveiro influiu diretamente nas concentraes de
nutrientes da gua, promovendo o crescimento algceo e refletindo na
estrutura do fitoplncton, com aumento na abundncia e na riqueza de
espcies frequentes em locais eutrficos.
Palavras-chave: piscicultura, fitoplncton, ensaios ecotoxicolgicos.

x
ABSTRACT
The aim of this work was to evaluate the water quality of a pisciculture
system, during the rearing period of Nile tilapia, through qualitative and
quantitative characterization of phytoplankton and through toxicity tests with
Pseudokirchneriella subcapitata. The site for sampling was selected at the
Regional Center of Technologic Development of Agribusiness of Paraba
Valley, in Pindamonhangaba city, state of So Paulo. There were six field
sampling procedures between November 2006 and March 2007, in six stations:
affluent (Station 1), fishpond (Station 2), effluent (Station 3), mixing zone
(Station 4), upstream and downstream the mixing zone (Stations 5 and 6,
respectively). The Stations 2 and 3 presented high concentrations of total
phosphorus (> 0,3 mg.L-1), total nitrogen (> 2,5 mg. L-1). orthophosphate (> 39,0
g.L-1), total ammonia nitrogen (> 1,7 mg. L-1) and chlorophyll a (> 80,0 g.L-1),
promoted by the fish food and excretion, as well as the organic matter in the
bottom of the pond. These changes reflected in the composition and structure of
phytoplankton in E2 and E3, with high density and abundance of species that
are common in eutrophic environments. It was also noticed that there was an
increase in density and number of taxa in the water after the mixing zone. The
phytoplankton of Stations 1, 4, 5 and 6 were directly conected with the lotic
caractheristics of these sites, resulting in low density and presence of
opportunistic organisms. The toxicity tests confirmed the eutrophic
characteristics of Stations 2 and 3, showing higher algal growth, with significant
difference indicated by Tukey Test. The toxicity tests also showed that the
potential of the effluent in stimulating algal growth still could be detected
downstream the mixing zone. These tests demonstrated that the fishpond
management contributes directly to algal growth. The toxicity tests with effluent
dilution presented LOEC 25% and NOEC 12.5%. These tests were important to
verify the minimal effluent dillution required, so the effects of growth stimulation
are vanished. It was concluded that the fishponds management affects directly
the concentrations of nutrients in the water, promoting algal growth and
reflecting in the structure of phytoplankton, with increase in abundance and in
richness of species frequently found in eutrophic environments.
Keywords: pisciculture, phytoplankton, toxicity tests.

xi
1. INTRODUO
Nas ltimas dcadas, a produo mundial da aquicultura passou de
menos de um milho de toneladas, na dcada de 50, para 59,4 milhes de
toneladas em 2004. Neste perodo, esse mercado movimentou cerca de 70,3
bilhes de dlares e cresceu mais rpido do que qualquer outro setor de
produo de protena animal. Esta evoluo revelou uma taxa de crescimento
de 8,8% ao ano, desde 1970, comparada a 1,2% da pesca (FAO, 2007).
A intensificao da atividade, no entanto, contribui para a gerao de
impactos negativos sobre os recursos naturais. A poluio das guas pelos
efluentes dos sistemas aqucolas , provavelmente, o impacto mais comum de
ser denunciado (PAZ et al. 2005). Segundo CASTRO et al. (2006), a maioria
desses empreendimentos utiliza gua de boa qualidade e a devolve para os
rios e crregos com qualidade inferior, sem nenhum tipo de tratamento.
De acordo com PAZ et al. (2005), o potencial de poluio dos efluentes
aqucolas varia quanto quantidade e carga poluidora, uma vez que depende
da espcie cultivada, do sistema de produo e das tcnicas de manejo.
Quanto mais intensa a produo, maior a adio de nutrientes e produtos
qumicos e, consequentemente, maior o risco de impacto negativo ao meio
ambiente. Esses mesmos autores afirmam que os efluentes da atividade
podem conter uma srie de drogas teraputicas, utilizadas no controle de
doenas e pragas, que resultam em grandes quantidades de substncias
qumicas e seus metablitos para dentro do ecossistema aqutico.
MAXIMIANO et al. (2005) destaca alguns dos principais produtos
utilizados para controle sanitrio e de doenas: sulfato de cobre, perxido de
hidrognio, cloreto de sdio, permanganato de potssio, azul de metileno,
formaldedo, verde de malaquita, triclorfon, inseticidas organofosforados e os
antibiticos: tetraclicina, eritromicina e oxitetraciclina. Segundo esses autores,
no h legislao especfica para o uso de drogas em aquicultura, nem
produtos registrados para este fim. Esses produtos so avaliados pelo
1
Ministrio da Agricultura, Pecuria e Abastecimento sem participao dos

rgos de sade e de meio ambiente, o que significa que no h avaliao dos
perigos dessas substncias para a sade humana e para o meio ambiente e,
com a falta de produtos e regulamentos especficos, h margem para os
abusos e usos incorretos. De acordo com CAO et al. (2007), muitos estudos
relatam o aumento da resistncia e at da mltipla resistncia de patgenos
como resultado do largo uso de antibiticos aplicados na aquicultura.
Alm das substncias qumicas e teraputicas, a matria orgnica
tambm compe um dos principais descartes de sistemas de aquicultura
intensiva (CAO et al., 2007). Um dos maiores impactos ambientais causados
por esses efluentes a eutrofizao dos corpos dgua receptores, devido s
altas taxas de nutrientes, principalmente nitrognio e fsforo, presentes nas
guas dos viveiros (VALENTI, 2002).
SILVA et al. (2005) realizaram estudo com sistemas aqucolas de
pequeno, mdio e grande portes em Mato Grosso do Sul e constataram que
todos apresentaram altas taxas de nutrientes, e seus efluentes, lanados sem
controle ambiental, contribuam para alterao da qualidade da gua do Rio
Cuiab e de seus principais afluentes.
A utilizao de fertilizantes um dos fatores que pode influenciar o
aumento nos nveis de nitrognio e fsforo nos viveiros (MERCANTE et al.
2004). A fertilizao realizada para incrementar a produtividade primria, pois
esta serve como base de teias alimentares, que vo culminar no crescimento
dos animais cultivados (BOYD, 1981).
Praticamente todas as espcies de peixes passam por uma fase
planctfaga durante seu desenvolvimento. Algumas espcies, como a tilpia, a
carpa cabea grande e a carpa prateada, mantm sua preferncia planctfaga
mesmo na fase adulta. Alimentos naturais explorados pelos peixes possuem
grande valor energtico, alto nvel de protenas, minerais e vitaminas,
compensando uma eventual deficincia nas raes (KUBITZA 1998).
2
Para SIPABA-TAVARES et al. (2006), a taxa ideal de fertilizao a

quantidade de matria orgnica que pode ser efetiva e utilizada num viveiro,
sem efeitos prejudiciais na qualidade da gua e no crescimento dos peixes. A
necessidade da fertilizao varia de acordo com o tipo de piscicultura, das
condies climticas e dos nutrientes j presentes na gua.
A aplicao da calagem outro fator que favorece o aporte de nutrientes
nas guas dos viveiros e, consequentemente, o incremento da produtividade
primria (CASTAGNOLLI e CYRINO, 1986). Alm de assepsia, a aplicao da
calagem serve para correo de acidez, aumentando a dureza total,
alcalinidade e pH. Este procedimento tambm favorece a remoo de
substncias hmicas, disponibilizando carbono na forma de dixido de carbono
(CO2), enquanto acelera a circulao de nitrognio pelos processos de
decomposio, reforando o sistema tampo do tanque e ajudando a
neutralizar as reaes cidas do sedimento do fundo, propiciando assim a
entrada de fsforo na coluna dgua (RIBEIRO et al., 1997)
Alm dos fertilizantes, CAO et al. (2007) destacam o manejo alimentar
com rao como outro importante fator de contribuio para a entrada de
cargas de nutrientes e matria orgnica. A rao no consumida pode compor
at 38% dessa carga, dependendo do tipo de alimento, do manejo e das
espcies cultivadas. SIPABA-TAVARES et al. (1999) explicam que o alimento
no aproveitado e os produtos da excreo dos organismos cultivados se
acumulam nas guas, elevando as taxas de nitrognio e fsforo e favorecendo
o aumento da biomassa fitoplanctnica e, consequentemente, a eutrofizao.
Segundo KUBITZA (1998), em piscicultura intensiva, grande parte dos
problemas da qualidade da gua est relacionada com o uso de alimentos de
m qualidade e estratgias de alimentao inadequadas.
Na regio do Vale do Ribeira, Estado de So Paulo, CASTELLANI e
BARRELLA (2005) estudaram 42 pisciculturas e constataram que, na maioria
3
dos empreendimentos, a quantidade de rao distribuda nos tanques e

viveiros no era adequadamente controlada, uma vez que a biometria dos
peixes, para o clculo da rao mensal, no era realizada. Neste mesmo
estudo, os autores observaram que 1.817 toneladas de rao foram utilizadas
para produo anual de 617 toneladas de peixe, a uma converso alimentar de
2,9:1. Os mesmos autores afirmam que uma converso de 2:1 seria mais
adequada para peixes tropicais e, por isso, houve um excesso de 32% na
rao utilizada, com perda de lucratividade bruta de 43%.
CASTRO et al. (2006), atravs de um diagnstico socioeconmico e
ambiental da atividade de pesque-pague do Alto Tiet, em So Paulo, tambm
verificaram que o arraoamento era feito, sem controle, pela maioria dos
funcionrios e/ou proprietrios, constituindo uma das principais causas da
eutrofizao
de lagos
dos pesqueiros. Neste
mesmo
estudo,
foram
encontradas elevadas concentraes de nitrognio e fsforo nos efluentes

desses lagos e os autores enfatizaram sua contribuio para a degradao dos
corpos dgua jusante dos empreendimentos.
Segundo FIGUEIREDO et al. (2005), o processo de eutrofizao pode
causar diversas alteraes nos aspectos naturais da gua, interferindo
diretamente nas seguintes variveis: pH, transparncia da gua, oxignio
dissolvido, slidos suspensos, demanda bioqumica de oxignio, matria
orgnica, fsforo e nitrognio amoniacal total. Alm disso, a eutrofizao do
meio pode causar mudanas no fluxo de energia e na ciclagem de nutrientes,
bem como alteraes da biomassa e na estrutura das comunidades bnticas e
pelgicas (CAO et al., 2007).
De acordo com CAMARGO e ALONSO (2006), a eutrofizao dos
corpos dgua tambm pode causar efeitos ecolgicos e toxicolgicos que so
direta ou indiretamente ligados proliferao de produtores primrios. Segundo
esses autores, uma das manifestaes da hipxia em ecossistemas eutrficos
a grande mortandade de invertebrados e peixes. Alm disso, o declnio da
concentrao de oxignio, provocado pela intensa decomposio de matria
4
orgnica, tambm pode promover a formao de componentes reduzidos como

o sulfeto de hidrognio (H2S), que altamente txico e produz efeitos agudos
(mortandade) nos animais aquticos, mesmo em concentraes relativamente
baixas.
Em ambientes eutrofizados, so comuns as floraes de algas
fitoplanctnicas, principalmente de cianobactrias que, em mais de 60% dos
casos, so txicas (COSTA e AZEVEDO, 1994 in TUCCI et al., 2006). Essas
floraes podem provocar a morte de animais por insuficincia heptica e sua
exposio, em longo prazo, contribui para o desenvolvimento de tumores
cancergenos (MATTHIENSEN et al., 1999).
As floraes de cianobactrias, principalmente espcies dos gneros
Anabaena, Microcystis e Planktothrix, tambm representam um risco para a
sade humana, pois diversos problemas podem ocorrer com o contato ou a
ingesto de guas contaminadas, entre eles: irritao nos olhos, alergias
epidrmicas,
febre,
vmito,
diarria,
pneumonia,
gastroenterites,
hepatoenterites e paralisia muscular (CAMARGO e ALONSO, 2006).

Dentro do contexto da piscicultura, as cianotoxinas podem se acumular
nos tecidos dos peixes destinados ao consumo humano e causar srios
problemas de sade pblica, enfatizando o valor de estudos ecolgicos e
sanitrios com fitoplncton, que permitem o monitoramento da qualidade das
guas utilizadas nas diferentes atividades humanas (MATSUZAKI et al., 2004).
Segundo SMITH (1988), as floraes de algas, principalmente
cianobactrias, so resultados da disponibilidade de nitrognio e fsforo
presentes na rao no consumida. Os teores desses nutrientes esto
relacionados com os principais fatores no crescimento e estrutura do
fitoplncton e na acumulao de biomassa (MATSUZAKI et al., 2004).
A
caracterizao
do
fitoplncton
tem
grande
importncia
para
piscicultura, pois a produtividade de um sistema de criao de peixes tambm

5
depende da comunidade planctnica e de manejo eficiente dos viveiros

(MACEDO e SIPABA-TAVARES, 2005).
Alm de constituir o maior fornecedor da demanda de oxignio nos
viveiros de peixes (BOYD, 1981), as algas so a base de toda cadeia alimentar
aqutica e sustentam uma produo anual de recursos renovveis em algo em
torno de cem milhes de toneladas de pescado e, por isso, desempenham um
papel vital no cultivo de animais aquticos e so de interesse estratgico para a
aquicultura (MULLER-FEUGA, 2000).
As algas fitoplanctnicas so fundamentais na dinmica dos sistemas
aquticos, constituem o elo na transferncia de energia solar e dos nutrientes,
possibilitando a passagem destes aos consumidores e determinando a
produtividade de um ambiente (FARIA et al., 2001). Algumas espcies de algas
so capazes de retirar elementos qumicos do meio aquoso, sugerindo sua
utilizao na recuperao de sistemas aquticos. A caracterizao do
fitoplncton tambm oferece a possibilidade de avaliar o nvel de poluio de
um corpo dgua, baseado nos tipos de algas presentes (VIDOTTI e
ROLLEMBERG, 2004).
SCHNECK et al. (2007), na regio Sul do Brasil, estudaram a estrutura
da comunidade de diatomceas em um riacho impactado por efluentes de
piscicultura. Os autores demonstraram que o enriquecimento trfico provocado
pelo alto teor de nutrientes causou a substituio de espcies frequentes em
ambientes oligotrficos, por espcies de ambientes eutrficos, concluindo que
as diatomceas elpticas so ferramentas teis no biomonitoramento de
impactos causados por eutrofizao.
Outros trabalhos realizados dentro desta temtica reconhecem a
caracterizao do fitoplncton como forma de monitorar a qualidade das guas
de viveiros de piscicultura (MATSUZAKI et al., 2004; PESSOA e RIBEIRO,
2005) e de subsidiar estudos da cadeia trfica, com propostas de manejo
(BEYRUTH et al., 1998). A influncia de fertilizantes e adubos orgnicos sobre
6
a estrutura do fitoplncton tambm relatada em alguns trabalhos (RIBEIRO et

al., 1997; BURFORD e PEARSON, 1998; FARIA et al., 2001; MACEDO e
SIPABA-TAVARES, 2005; SIPABA-TAVARES et al., 2006; TERZIYSKI et
al., 2007).
Alm da caracterizao do fitoplncton, a realizao de ensaios
ecotoxicolgicos figura como uma importante ferramenta, com potencial de uso
para avaliao dos possveis impactos negativos causados por efluentes
lquidos, lanados nos corpos receptores naturais.
Nesses ensaios, os organismos-teste, que podem ser algas, peixes,
microcrustceos ou outros, so expostos a vrias concentraes da amostra a
ser testada (substncia qumica, efluente, extratos aquosos) por determinado
perodo de tempo. Aps esse perodo, verificam-se os efeitos da amostra sobre
os parmetros biolgicos, como mortalidade, crescimento, reproduo,
comportamento dos organismos, dentre outros. Os efeitos observados so
analisados estatisticamente e os resultados so expressos em unidades
numricas (ZAGATTO e BERTOLETTI, 2006). Esses autores afirmam, ainda,
que os ensaios de toxicidade podem ser utilizados para diversos fins, como:
determinar a toxicidade de agentes qumicos e efluentes lquidos; estabelecer
critrios e padres de qualidade da gua e limites mximos de lanamento de
efluentes lquidos em corpos hdricos; avaliar a necessidade de tratamento de
efluentes lquidos, a qualidade da gua, a toxicidade relativa de diferentes
substncias e a sensibilidade relativa de organismos aquticos; subsidiar
programas de monitoramento ambiental e estimar impactos provocados em
acidentes ambientais.
De modo geral, as algas planctnicas so frequentemente utilizadas
como material em estudos experimentais, pela facilidade de seu cultivo, pelo
fato de serem unicelulares e possurem baixo nvel de diferenciao histolgica
e um ciclo de vida simples, dando respostas rpidas s condies ambientais
(CCERES, 1996, GONZALEZ et al., 1995, VONSHAK e MASKE, 1989).
7
Dentre as vrias espcies fitoplanctnicas utilizadas para avaliao da

qualidade
dos
ambientes
aquticos,
destacam-se
Pseudokirchneriella
subcapitata (antes denominada como Selenastrum capricornutum), Chlorella

vulgaris e Scenedesmus subspicatus; padronizadas como organismos-teste em
ensaios ecotoxicolgicos (ABNT, 2005).
A manuteno do cultivo de algas em laboratrio dificilmente se
assemelha ao meio em que o fitoplncton cresce naturalmente, mas a utilidade
desses bioensaios no est no fato de imitarem o meio natural e sim, no fato
de que o cultivo em laboratrio permite isolar as variveis que influenciam na
populao algal, tornando mais precisas as concluses a respeito do teste em
questo (VIDOTTI e ROLLEMBERG, 2004).
O ensaio de toxicidade com algas, em particular com a espcie
Pseudokirchneriella subcapitata, tem registro em trabalhos com efluentes de
indstrias txteis (DELLAMATRICE e MONTEIRO, 2006), metais pesados em
suspenso (IVANOVA e GROUDEVA, 2006; GUGUEN et al., 2004), guas
provenientes de cultivo de arroz (MARQUES et al., 2008) e com substncias de
referncia como sulfato de cobre e sulfato de zinco (RODRIGUES et al., 2003).
MA et al. (2006) tambm utilizaram a espcie Pseudokirchneriella subcapitata
para avaliar a toxicidade de 40 herbicidas e ROJICKOV-PADRTOV e
MARSLEK (1999) compararam a sensibilidade de sete espcies de
microalgas em testes de toxicidade com metais e pesticidas e verificaram que
Pseudokirchneriella subcapitata foi, de forma geral, a mais sensvel.
A Resoluo 357/2005 do CONAMA estabelece o uso dos resultados de
ensaios de toxicidade como critrio para avaliao de padres de lanamentos
de efluente, de acordo com o Artigo 34, pargrafo 1: O efluente no dever
causar ou possuir potencial para causar efeitos txicos aos organismos
aquticos no corpo receptor, de acordo com os critrios de toxicidade
estabelecidos pelo rgo ambiental competente. Nesse mesmo artigo, no
pargrafo 2, a Resoluo recomenda que os critrios de toxicidade previstos
8
devem se basear em resultados de ensaios ecotoxicolgicos padronizados,

utilizando organismos aquticos, e realizados no efluente.
O presente estudo foi desenvolvido como parte de um projeto mais
amplo intitulado Anlises ecotoxicolgicas de efluentes de aquicultura
continental (Processo FAPESP 2005/05180-0), realizado durante o perodo de
maro de 2006 a maro de 2008, que teve como objetivo: Realizar ensaios
ecotoxicolgicos em amostras de gua provenientes de projetos de aquicultura
continental, a fim de avaliar impactos desta natureza, bem como analisar
qualitativa e quantitativamente a carga de poluentes orgnicos gerada na
atividade, com vistas ao fornecimento de subsdios tcnicos para as
proposies de tratamento de efluentes.
Portanto, o objetivo do presente estudo foi analisar a qualidade da gua
de um sistema semi-intensivo de piscicultura continental, durante o perodo de
engorda de tilpia do Nilo (Oreochromis niloticus), atravs da caracterizao
qualitativa e quantitativa do fitoplncton e da realizao de ensaios
ecotoxicolgicos
com
microalga
Pseudokirchneriella
subcapitata
(Chlorophyceae), a fim de avaliar os possveis impactos ambientais causados

pelos efluentes da atividade e subsidiar futuras medidas de monitoramento
e/ou tratamento a serem propostas.
2. MATERIAL E MTODOS
2.1. rea de estudo
A rea de estudo escolhida foi a piscicultura experimental localizada no
Plo Regional de Desenvolvimento Tecnolgico dos Agronegcios do Vale do
Paraba APTA Regional Agncia Paulista de Tecnologia dos Agronegcios
(SAA-SP), na cidade de Pindamonhangaba, localizada a 147 km da capital do
Estado de So Paulo, na altitude entre 530 e 550 metros, coordenadas
225550S 452722W.
O viveiro escolhido para o experimento foi operado em sistema semiintensivo e utilizado para engorda de tilpia do Nilo (Oreochromis niloticus). As
caractersticas estruturais do viveiro encerram as dimenses de 1,08 m de
profundidade mdia, 1.500 m2 de rea, 1.620 m3 de volume e 2,7 L.s-1 de
vazo mdia; tempo de residncia de 7 dias, com sistema de renovao de
gua individual, constante e sem aerao mecnica. Tanto o fundo do viveiro,
quanto os seus taludes, foram construdos por escavao direta em solo
natural, proporcionando contato constante entre a gua e a terra.
A gua de abastecimento era provida pelo Reservatrio do Borba. Este
Reservatrio, formado pelo barramento do Ribeiro de mesmo nome, possui
profundidade mxima de 3,6 metros e rea de 0,9 km2 (TAKINO et al., 1985). O
efluente era descartado, sem tratamento, jusante do Ribeiro do Borba,
afluente do Ribeiro do Curtume, parte de uma das sub-bacias do Rio Paraba
do Sul. A bacia do Rio Paraba do Sul estende-se por, aproximadamente,
55.400 km2, compreendendo os estados de So Paulo, Rio de Janeiro e Minas
Gerais e abrangendo 180 municpios (SOUZA JR., 2004).
Os dados a seguir, assim como outros relacionados morfometria dos
peixes e produtividade do sistema, foram coletados diretamente com os
10
operadores do manejo do viveiro estudado, que mantinham registros em

planilhas de campo.
Antes do povoamento, o viveiro foi submetido calagem com 150 kg de
cal virgem hidratado, por todo fundo do tanque e, posteriormente, a diversas
drenagens para remoo de excesso de cal. Aps o preenchimento do tanque,
a fertilizao foi realizada com superfosfato simples (6 g/m2) e fosfato de
amnia (4 g/m2).
O tanque foi povoado com 3.750 peixes jovens, linhagem monosexo
de
tilpia
do Nilo (Oreochromis
niloticus),
com peso
individual
de,
aproximadamente, 30 gramas. Os organismos foram alimentados com rao

extrusada, de 28% de protena bruta, duas vezes ao dia, na proporo de at
3% do peso vivo. A composio da rao fornecida pode ser observada no
Anexo 1. Os peixes foram alimentados duas vezes ao dia e a forma de
alimentao foi o lano.
2.3. Amostragens
Seis campanhas amostrais foram realizadas entre os meses de
novembro de 2006 e maro de 2007, sempre no perodo da manh, nas datas:
14 de novembro e 21 de dezembro de 2006; 22 de janeiro, 13 de fevereiro, 07
e 12 de maro de 2007. Essas datas foram identificadas como: nov/06, dez/06,
jan/07, fev/07, mar I/07 e mar II/07, respectivamente. O perodo amostral
abrangeu toda a fase de engorda de tilpia do Nilo (O. niloticus).
Seis estaes de coleta foram previamente demarcadas, de maneira a
cobrir todo o percurso do fluxo de gua ao longo do sistema, conforme
esquema da Figura 1 e das imagens fotogrficas das Figuras 2 a 7:
Estao 1 - afluente (gua de abastecimento do tanque, entrada do
viveiro);
Estao 2 - viveiro;
11
Estao 3 - efluente (gua de sada do viveiro);

Estao 4 - zona de mistura (estao em que efluente do viveiro
encontra o corpo dgua receptor);
Estao 5 - montante da zona de mistura (estao do corpo dgua
receptor a 11 metros antes do encontro com o efluente do viveiro);
Estao 6 - jusante da zona de mistura (estao do corpo dgua
receptor a 13 metros aps o encontro com o efluente do viveiro).
Figura 1. Esquema de localizao das estaes de coleta (As setas indicam o

sentido do fluxo da gua).
Figura
2.
Imagem
fotogrfica
da
Figura
3.
Imagem
Estao 2 (viveiro)
Estao 1 (afluente).
12
fotogrfica
da
Figura
4.
Imagem
fotogrfica
da
Estao 3 (efluente).
Figura
6.
Imagem
Figura
5.
Imagem
fotogrfica
da
Estao 4 (zona de mistura)
fotogrfica
da
Figura
7.
Estao 5 (montante da zona de
Estao
mistura).
mistura).
Imagem
(jusante
fotogrfica
da
zona
da
de
Para anlise do fsforo total, nitrognio total, nitrito, nitrato e nitrognio

amoniacal total, as amostras foram coletadas usando-se garrafa Van Dorn, e
transferidas para frascos de polietileno de um litro de capacidade. Essas
amostras foram levadas ao laboratrio, sendo que, as sub-alquotas destinadas
s anlises de nitrognio total e o fsforo total, foram imediatamente
congeladas,
para
posterior
processamento
e,
as
sries
inorgnicas
imediatamente filtradas em bomba a vcuo. Para a filtrao, foram utilizados

filtros Millipore com 0,45 m de tamanho de poro.
As amostras destinadas obteno de Clorofila a foram coletadas na
sub-superfcie da coluna dgua, com auxlio de garrafa Van Dorn. A gua foi
13
transferida para frascos de polietileno de um litro de capacidade, envoltos com

papel alumnio e mantidos em isopor com gelo at a chegada ao laboratrio,
onde as amostras foram filtradas imediatamente em bomba a vcuo. Para a
filtrao, foram utilizados filtros Millipore com 45 m de tamanho de poro.
As amostras de gua para anlise qualitativa do fitoplncton foram
filtradas, no momento da coleta, em rede de plncton de 20 m e preservadas
em formol 4%. Para anlise quantitativa, a amostra bruta foi fixada em soluo
de lugol actico 1%. As amostras foram armazenadas em frascos de vidro do
tipo snap-cap de volume de 200 mL, previamente descontaminados e
rotulados, e mantidos ao abrigo de luz.
As amostras de gua, destinadas aos testes ecotoxicolgicos, foram
armazenadas em recipientes de polietileno de dois litros, previamente
descontaminados e devidamente rotulados. Essas amostras foram filtradas em
rede de plncton de 60 m e congeladas no mesmo dia da coleta,
permanecendo
assim
at
realizao
dos
testes,
respeitando
as
recomendaes da Associao Brasileira de Normas Tcnicas (2005), que

estabelece a validade de dois meses para amostras congeladas.
2.3. Anlise das variveis abiticas e Clorofila a
No momento da coleta, a vazo (L.s-1) foi obtida para as Estaes 1, 3 e
5. Com auxlio da sonda multiparmetros Horiba U-22, tambm foram
medidos em todas as estaes de coleta: temperatura da gua (C),
condutividade eltrica (S.cm-1), oxignio dissolvido (mg.L-1), pontencial
hidrogeninico (pH), slidos totais dissolvidos STD (mg.L-1) e turbidez (UNT).
Tambm foram anotadas informaes sobre as condies climticas,
como temperatura do ar, presena de ventos e ocorrncia de chuvas, no dia da
coleta e no dia anterior mesma.
14
Os dados de precipitao acumulada mensal e nmero de dias com

chuva foram obtidos no Instituto Nacional de Meteorologia (INMET), na Estao
Meteorolgica da cidade de Taubat, localizada a 30 km de Pindamonhangaba.
As anlises limnolgicas foram realizadas pelo Laboratrio de Anlises
Fsicas e Qumicas da gua da Unidade Laboratorial de Referncia em
Limnologia Centro de Pesquisa e Desenvolvimento em Recursos Hdricos do
Instituto de Pesca (SP).
As anlises para determinao do fsforo total (mg.L-1) e nitrognio total
(mg.L-1) foram feitas simultaneamente, seguindo as tcnicas descritas em
VALDERRANA (1981). As anlises de nitrito (mg.L-1) e nitrato (mg.L-1)
seguiram a tcnica de Griess modificado descrita em GIN et al. (1980). Para a
nitrognio amoniacal total (mg.L-1) seguiu-se a tcnica de Nessler, descrita em
APHA (2005). A anlise da alcalinidade seguiu o mtodo descrito em
GOLTERMAN & CLYMO (1971), utilizando-se pHmetro e bureta comum, de
preciso de 0,05 mL. Os resultados foram obtidos em miliequivalentes por litro.
Todas essas determinaes tomaram como base os protocolos de
anlises recomendados no Standard Methods for the Examination for Water
and Wastewater (APHA, 2005).
A determinao de clorofila a (g.L-1) foi feita atravs da tcnica de
extrao de pigmentos, segundo MARKER et al. (1980) e SARTORY e
GROBELLAR (1984), utilizando etanol 90% como solvente orgnico.
O ndice de Estado Trfico de CARLSON (1977), ajustado por TOLEDO
et al. (1983) para ambientes tropicais, foi calculado, de acordo com a frmula:
IET (Pt) = 10 x [6 In (80,32/Pt) / In 2]
Onde: Pt = concentrao de fsforo total na superfcie ( g.L-1)
Oligotrfico = IET < 44
15
Mesotrfico = IET 44-54

Eutrfico = IET > 54
Os resultados das anlises das variveis abiticas e da clorofila a foram
submetidos a anlises multivariadas, atravs de Anlise de Componentes
Principais (ACP) (GOODALL, 1954 apud VALENTIN, 2000). Esta anlise foi
realizada para verificar a relao dos resultados das variveis abiticas com a
distribuio espacial das estaes de coleta e distribuio temporal das
amostragens. Foi utilizada matriz de covarincia, com dados transformados
pela amplitude de variao ranging ([(x-xmin)/(xmax-xmin)]).
O clculo do Coeficiente de Correlao de Pearson e Kendall (r) permitiu
a avaliao da relao entre os valores da ordenao (posio das unidades
amostrais nos eixos) e variveis individuais (abiticas) utilizadas na construo
da ordenao (McCUNE e MEFFORD 1997).
Os dados foram transformados atravs do programa FITOPAC
(SHEPHERD, 1996). As anlises multivariadas foram realizadas pelo programa
PC-ORD verso 3.1 para Windows (McCUNE e MEFFORD, 1997).
A identificao dos txons foi feita atravs de anlise do material
coletado preservado em formol 4%. As amostras foram examinadas em
microscpio binocular com ocular de medio, no aumento de 400x.
A identificao dos organismos seguiu os sistemas de classificao:
ROUND (1971) para a Classe Chlorophyceae, SIMONSEN (1979) para as
Bacillariophyceae, KOMREK e ANAGNOSTIDIS (1986, 1989, 1999) e
ANAGNOSTIDIS
KOMREK
(1988)
para
BOURRELLY (1981, 1985) para as demais classes.
16
Classe
Cyanophyceae
A determinao da densidade fitoplanctnica foi realizada atravs da

anlise do material preservado em lugol actico 1%. O material foi examinado
em microscpio invertido, sob aumento de 400x. As contagens dos organismos
seguiram o mtodo de UTERMHL (1958). Foram utilizadas cmaras de
sedimentao de 2 mL para as amostras provenientes das Estaes 2 (viveiro)
e 3 (efluente) e cmaras de sedimentao de 10 mL para as demais estaes
de coleta. O tempo de sedimentao foi de aproximadamente trs horas para
cada centmetro de altura da cmara, de acordo com LUND et al. (1958). Cada
clula, colnia, cenbio ou filamento foi considerado como indivduo.
A contagem de cada amostra foi finalizada seguindo dois critrios: a)
quando o txon mais abundante atingiu o nmero de 100 indivduos; b) grfico
de estabilizao do nmero de txons, obtido a partir de txons novos
adicionados com o nmero de campos contados.
A densidade, expressa em org.mL-1, foi determinada para cada txon de
cada amostra, de acordo com a frmula de WEBER (1973):
org.mL-1 = (Na/s.c).(1/h).(F)
Onde: Na = nmero total de indivduos do txon a contados na amostra
s = rea do campo (mm2) no aumento de 400x
c = nmero de campos contados
h = altura da cmara de sedimentao (mm)
F = fator de correo para mililitro (103 mm3.mL-1)
Considerou-se txons abundantes e dominantes, de acordo com o
critrio de LOBO e LEIGHTON (1986): txons abundantes, aqueles que
apresentaram densidade acima da densidade mdia da amostra e, txons
dominantes, aqueles que apresentaram densidade acima de 50% da densidade
total da amostra.
17
Os txons considerados abundantes foram classificados em grupos

funcionais, de acordo com REYNOLDS et al. (2002). Os autores classificam as
algas planctnicas em associaes, de acordo com o conhecimento da
ecologia das espcies e suas adaptaes.
Com os resultados das contagens dos organismos, a Frequncia de
Ocorrncia (F), expressa em porcentagem (%), foi calculada, seguindo a
frmula:
F = (Pa/P).100
Onde: Pa = nmero de amostras em que o txon a est presente
P = nmero total de amostras (36)
Foram considerados como constantes os txons que apresentaram
Frequncia de Ocorrncia F 50%; comuns, quando 10% F>50% e raras,
quando F<10%.
Com o clculo da Frequncia de Ocorrncia, obteve-se a lista de txons
descritores, sendo considerados aqueles que apresentaram F 50%.
Da mesma forma que os resultados das anlises das variveis abiticas
e Clorofila a, os resultados da Frequncia de Ocorrncia dos txons descritores
tambm foram submetidos a anlises multivariadas, atravs de Anlise de
Componentes Principais (ACP) (GOODALL, 1954 apud VALENTIN, 2000). Esta
anlise foi realizada para verificar a relao do comportamento da comunidade
fitoplanctnica, em termos de frequncia de ocorrncia, com a distribuio
espacial das estaes de coleta e a distribuio temporal das amostragens. Foi
utilizada matriz de covarincia, com transformao dos dados por [(log (x + 1)].
O clculo do Coeficiente de Correlao de Pearson e Kendall (r) permitiu
a avaliao da relao entre os valores da ordenao (posio das unidades
amostrais nos eixos) e variveis individuais (biticas ocorrncia dos txons
18
descritores) utilizadas na construo da ordenao (McCUNE e MEFFORD

1997).
Os dados foram transformados atravs do programa FITOPAC
(SHEPHERD, 1996). As anlises multivariadas foram realizadas pelo programa
PC-ORD verso 3.1 para Windows (McCUNE e MEFFORD, 1997).
O procedimento dos ensaios de toxicidade seguiu as recomendaes da
Associao Brasileira de Normas Tcnicas NBR 12648 Ecotoxicologia
aqutica Toxicidade crnica Mtodo de ensaio com algas (Chlorophyceae)
(ABNT, 2005). Todos os ensaios foram realizados no Laboratrio de
Exotoxicologia Aqutica do Instituto de Pesca (SP).
A espcie escolhida foi Pseudokirchneriella subcapitata (Korschikov)
Hindak, anteriormente denominada Selenastrum capricornutum (Figura 8).
Tambm se encontram trabalhos nos quais esta alga denominada como
Raphidocelis subcapitata (RODRIGUES et al., 2003; MA et al., 2006). Segundo
COMAS (1996), Ankistrodesmus subcapitatus Korschikov e Kirchneriella
subcapitata Korschikov constituem sinnimos de Raphidocelis subcapitata. No
presente estudo, denominou-se Pseudokirchneriella subcapitata, como em
ABNT (2005). uma espcie cosmopolita e comum em ambientes
mesotrficos a eutrficos (TORGAN, 2002).
Figura 8. Imagem fotogrfica da microalga Pseudokicrhneriella subcapitata, sob

aumento de 400x, em microscpio tico comum.
19
O meio de cultivo utilizado foi o L. C. Oligo, preparado a partir de sete

solues, descritas de acordo com o Anexo 2. Para o preparo de 1000 mL de
meio de cultivo, 1 mL das solues 1, 2, 3, 4 e 7 e 0,5 mL das solues 5 e 6
foram pipetados para um erlenmeyer de 2 litros. Ento, gua destilada foi
adicionada at que o volume de 1000 mL fosse atingido. Aps 1 hora de
agitao, o meio foi autoclavado por 15 minutos a 121C e utilizado apenas
aps esfriar.
O mtodo de ensaio foi o esttico, ou seja, a amostra no foi renovada e
os organismos-teste permaneceram expostos mesma soluo-teste, durante
todo o perodo do ensaio (KNIE e LOPES, 2004). O perodo de exposio foi
de 72 horas, durante o qual as algas permaneceram em incubadora, sob
condies constantes de agitao a 175 rpm, iluminao de 4.500 lux de
intensidade e temperatura a 25C.
Foram realizadas seis baterias de ensaios, cada uma correspondendo a
cada campanhas amostrais (nov/06, dez/06, jan/07, fev/07, mar I/07 e mar
II/07). Em cada bateria de ensaios, foram realizados ensaios testes com seis
amostras, em triplicata, cada uma correspondendo a cada uma das estaes
de coleta (E1 - afluente; E2 - viveiro; E3 - efluente; E4 - zona de mistura; 05 montante da zona de mistura e E6 - jusante da zona de mistura).
Trs dias antes de cada bateria de ensaios, um pr-cultivo foi montado,
a fim de que as clulas, que seriam expostas s amostras, estivessem em fase
exponencial de crescimento (Anexo 3).
O pr-cultivo foi montado com 1.000 mL de meio de cultivo L. C. Oligo e
50 mL de suspenso de Pseudokirchneriella subcapitata, mantido em
erlenmeyer de 2 litros, sob condies semelhantes s dos ensaios
(temperatura de 25C, iluminao de 4.500 lux e aerao constantes).
20
No dia do incio dos ensaios, o inculo (clulas algais que foram

expostas s amostras) foi preparado pela centrifugao de 100 mL do prcultivo, a 1.500 rpm, durante 15 minutos. O sobrenadante foi descartado e o
sedimento ressuspendido em 100 mL de meio de cultivo. Este procedimento foi
repetido e a densidade de clulas da suspenso resultante foi determinada
atravs de contagem em cmara de Neubauer (Anexo 4).
O inculo foi preparado a partir desta suspenso, de maneira que
sempre contivesse 1 x 105 clulas e volume entre 0,1 e 1 mL, seguindo a
seguinte frmula:
Vi= (Vf x Ci)/N
Onde: Vi = volume do inculo (mL)
Vf = volume final da soluo teste (mL)
Ci = concentrao inicial do recipiente teste (cels.mL-1)
N = nmero de clulas da suspenso (cels.mL-1)
Ento, com um inculo de 1 x 105 clulas, volume final da soluo teste
de 50 mL e estimando-se uma densidade algal da suspenso igual a 2 x 107
cels.mL-1, obtm-se:
Vi= (50 x 1 x 105)/2 x 107 = 0,25.
Ou seja, neste exemplo, o volume do inculo de 0,25 mL da
suspenso preparada.
Para as Estaes 1 (afluente), 2 (viveiro), 4 (zona de mistura), 5
(montante da zona de mistura) e 6 (jusante da zona de mistura) os recipientesteste foram preparados adicionando o inculo (1 x 105 clulas) a 50 mL de
amostra bruta. Para a Estao 3 (efluente), o inculo foi adicionado s diluies
da amostra, de acordo com a Tabela 1.
21
Tabela 1. Volume da amostra para o preparo das solues-teste com efluente

(ABNT, 2005).
Concentrao da
soluo-teste (%)
Fator de
diluio
Volume da
amostra
(mL)
Volume do
meio de cultura
(mL)
Volume final
(mL)
100
50
50
50
25
25
50
25
12,5
37,5
50
12,5
6,25
43,75
50
6,25
16
3,1
46,9
50
3,1
32
1,55
48,45
50
0 (Controle)
50
50
Todos os recipientes-teste consistiram em erlenmeyers de 125 mL,

contendo 50 mL de soluo-teste (amostra + inculo), com trs repeties,
cobertos com filme plstico e levados, imediatamente aps o preparo, para a
incubadora (Figura 9). Aps 72 horas de exposio, a densidade celular de
cada recipiente foi determinada, atravs de contagem em cmara de
Neubauer.
Figura 9. Imagem fotogrfica dos recipientes-teste no interior da incubadora.

A validao do ensaio foi feita de acordo com as recomendaes da
ABNT (2005). Foi considerado vlido o ensaio que: a) aps as 72 horas de
22
exposio, obtivesse biomassa algcea mdia do controle, 16 vezes maior que

a biomassa inicial; e b) apresentasse, no trmino do ensaio, o coeficiente de
variao da biomassa algcea, das repeties do controle, menor ou igual a
20%.
Os resultados das contagens em cmara de Neubauer foram analisados
estatisticamente pelo programa Toxtat 3.3 (GULLEY et al., 1991). Todos
passaram nos testes de normalidade e homogeneidade de varincias,
permitindo a aplicao do teste de Tukey para verificao da existncia de
diferenas significativas (p<0,05) entre os tratamentos.
Para os resultados dos ensaios com amostras brutas, o Teste de Tukey
foi aplicado de duas maneiras: a) a fim de verificar as diferenas significativas
entre os resultados dos ensaios das amostras coletadas no mesmo ms
(Exemplo: entre resultados das Estaes 1, 2, 3, 4, 5 e 6 no ms de novembro)
e b) a fim de verificar as diferenas significativas entre os resultados dos
ensaios de uma mesma estao nos diferentes meses de coleta (Exemplo:
entre os resultados dos meses de novembro, dezembro, janeiro, fevereiro,
maro I e maro II da Estao 1).
Para os resultados dos ensaios com a diluio do efluente (E3), o Teste
de Tukey foi aplicado a fim de se verificar as diferenas significativas entre as
diluies do efluente coletado a cada ms, ou seja, entre as concentraes de
100%, 50%, 25%, 12,5%, 6,2%, 3,1% e o controle de um mesmo ms.
Os resultados dos ensaios com a diluio do efluente (E3) foram
expressos em CEO (Concentrao de efeito observado), considerando a menor
concentrao da amostra que apresentou diferena significativa em relao ao
grupo controle, e CENO (Concentrao de efeito no observado), considerando
a maior concentrao da amostra que no apresentou diferena significativa
em relao ao grupo controle.
23
3. RESULTADOS
A Tabela 2 mostra o nmero de indivduos no viveiro, bem como o peso
mdio por indivduo e quantidade de rao fornecida ao longo do perodo
estudado.
Verificou-se o gasto total de 3.650 kg de rao para produo de 2.120
kg de peixe, a uma converso alimentar de 1,72:1, resultando uma
produtividade de 14.133 kg de peixe/ha/ciclo e taxa de sobrevivncia de 93%.
Tabela 2. Dados biomtricos e quantificao do manejo alimentar registrados

durante o ciclo de produo de tilpia (Oreochromis niloticus) no presente
estudo (Plo Regional de Desenvolvimento Tecnolgico dos Agronegcios do
Vale do Paraba).
Nmero de
Data
indivduos no
viveiro
Peso
aproximado
por indivduo
(g)
Peso
total
(ton)
% de
rao
Quantidade
de rao
diria (kg)
20/out/06
2.585 juvenis*
118,15
0,305
3,0
9,2
23/out/06
1.166 juvenis**
262,86
0,612
2,5
7,7
24/out/06
3.751 juvenis
NC
NC
2,5
16,8
06/dez/06
3.500 juvenis***
335,35
1,173
2,0
23,5
04/jan/07
3.500 tilpias
474,38
1,660
1,8
29,9
02/fev/07
3.500 tilpias
569,45
1,99
1,8
35,9
28/fev/07
3.163 tilpias****
662,85
2,096
1,5
31,4
13/mar/07
Despesca total
670
2,119
*Primeiro povoamento; **Segundo povoamento; ***Estimativa de perda de 251

indivduos; ****Despesca parcial de 337 tilpias; NC=no calculado
24
3.2. Variveis abiticas e clorofila a

A Figura 10 mostra a precipitao acumulada mensal e o nmero de
dias com chuva registrados durante o perodo de estudo, de acordo com os
dados do Instituto Nacional de Meteorologia, Estao de Taubat, a 30 km de
Pindamonhangaba. Os menores valores de precipitao acumulada e nmero
de dias com chuva foram registrados em janeiro. O maior valor de precipitao
acumulada foi registrada em dezembro e no ms de maro ocorreu o maior
nmero de dias com chuva.
Figura 10. Precipitao acumulada mensal e nmero de dias com chuva

registrados durante o perodo de estudo (Instituto Nacional de Meteorologia,
Estao de Taubat-SP).
Informaes sobre o clima do dia e do dia anterior de cada amostragem
podem ser verificadas no Anexo 5.
A Tabela 3 registra os dados de Vazo (L.s-1) nas Estaes 1 (afluente),
3 (efluente) e 5 (corpo dgua receptor) no momento de cada coleta. Os
maiores valores de vazo ocorreram em fevereiro para as Estaes 1 e 3 e em
janeiro para a Estao 5, enquanto que, os menores valores, em novembro
para as Estaes 1 e 3, e na ltima coleta de maro para a Estao 5.
25
Tabela 3. Vazo (L.s-1) medida no Afluente (E1), Efluente (E3) e no Corpo

receptor (E5) ao longo do perodo de estudo.
Coleta
Vazo (L.s-1)
E1
E3
E5
nov/06
1,40
0,86
79
dez/06
2,14
1,95
180
jan/07
3,22
3,19
2040
fev/07
3,77
3,28
316
mar I/07
2,88
2,22
143
mar II/07
3,12
2,00
36
Mdia
2,76
2,25
465,67
Desvio padro
0,85
0,90
777,28
CV (%)
30,8
39,9
166,9
A Tabela 4 apresenta os valores mdios das variveis abiticas e

clorofila a, sendo que os valores absolutos medidos em cada estao durante
os meses de estudo esto registrados no Anexo 6.
Os menores valores de temperatura da gua, para todas as estaes de
coleta, foram medidos em novembro, com mnima de 21,2C na Estao 6. Os
maiores valores foram medidos em dezembro e em maro I, com mxima de
31,3C em dezembro na Estao 2. Em todas as amostragens, as Estaes 2 e
3 apresentaram as temperaturas mais altas.
Os maiores valores de pH foram registrados em novembro, com valor
mximo de 6,84, medido na Estao 5. Os menores valores de pH foram
medidos em dezembro, sendo que o mais cido, de 5,04, foi registrado na
Estao 6.
A Estao 2 e a Estao 4 apresentaram, respectivamente, o maior e o
menor valor mdio para alcalinidade. O valor mximo (36,61 mgCaCO3.L-1) foi
26
registrado em fevereiro na Estao 2. O valor mnimo (18,54 mgCaCO3.L-1) foi

registrado em janeiro na Estao 6.
Tabela 4. Valores mdios e desvio padro das variveis abiticas e Clorofila a e limites
permitidos pela Resoluo CONAMA 357/2005 para gua doce de classe 2*.
Variveis
abiticas
Temperatura da
gua (C)
pH
Alcalinidade
(mgCaCO3.L )
Estaes de coleta
E3
E4
E1
E2
26,933,05
28,262,80
27,662,58
6,240,53
6,20,53
22,363,93
CONAMA
E5
E6
25,262,39
24,622,10
25,202,27
***
6,230,52
6,180,55
6,160,53
5,900,72
6,0 a 9,0
27,445,01
24,751,49
22,352,61
23,964,67
23,034,08
***
17,161,62
Dureza
(mg.L )
Condutividade
(S.cm )
17,162,05
19,141,02
18,991,58
18,660,98
19,143,47
***
66,179,28
72,838,89
75,008,22
68,3310,42 66,3310,56 80,8319,58
***
STD (mg.L )
42,205,76
45,834,22
47,503,83
43,835,85
51,179,47
500
Turbidez (UNT)
11,507,76
36,537,08
33,7512,33 45,0859,24 56,2881,85 48,7369,99
100
43,006,75
Matria orgnica
12,2321,04 23,0723,82 20,3929,91 27,3635,73 29,2244,99 34,0360,17
(mg.L )
OD (mg.L )
% Saturao
de O2
6,190,81
0,040,02
Ortofosfato
(g.L )
5,851,59
(mg.L )
5,210,66
7,180,35
7,590,36
7,380,63
105,3714,93 108,1724,5 91,5415,62 118,425,14 123,987,22 121,486,30
Fsforo
total (mg.L )
Nitrognio total
6,191,23
0,210,12
0,250,09
27,3822,75 19,0113,04
***
5 a 20 C
***
0,130,11
0,050,05
0,070,02
0,1 (ltico);
0,050
(intermedirio)
9,074,08
18,877,69
13,604,19
***
-1
1,27 g.L
0,200,12
1,100,91
1,121,18
0,330,17
0,260,17
0,340,20
(lntico e
efluente)
Nitrognio
amoniacal total
(mg.L )
0,520,07
Nitrito (g.L )
4,951,95
Nitrato
(g.L )
0,020,01
Clorofila a
(g.L )
2,873,13
0,830,59
0,860,59
41,2790,11 45,8990,46
0,020,02
0,030,02
52,6234,60 60,0343,79
0,590,15
9,999,48
0,580,09
0,610,09
24,9736,53 13,8510,82
3,7 **
0,001
0,090,08
0,050,02
0,070,03
0,01
4,254,06
2,872,41
3,032,99
30
*Categoria de gua destinada ao consumo humano, aps tratamento convencional; proteo

das comunidades aquticas e recreao de contato primrio; irrigao de hortalias, plantas
frutferas e de parques, jardins, campos de esporte e lazer; aquicultura e atividade de pesca;
**para pH 7,5; ***Valores no disponveis na Resoluo CONAMA 357/2005.
27
As Estaes 2 e 6 apresentaram os maiores valores mdios de dureza,

enquanto que as Estaes 1 e 5 apresentaram os menores valores mdios. O
maior valor (25,74 mg.L-1) foi medido em fevereiro na Estao 6, enquanto que,
o menor valor de dureza (13,86 mg.L-1), em maro I na Estao 1.
Os maiores valores de condutividade eltrica, em todas as estaes de
coleta, ocorreram em dezembro, com mximo de 100 S.cm-1, em E6. Os
menores valores ocorreram, tambm em todas as estaes de coleta, no ms
de janeiro, com mnimo de 55 S.cm-1, em E1 e E5.
Os maiores valores de slidos totais dissolvidos foram registrados, para
todas as estaes de coleta, em dezembro. Os menores valores foram
registrados em janeiro, exceto para E3, onde o menor valor foi medido em
fevereiro.
As maiores concentraes de matria orgnica ocorreram em dezembro,
para E1, E2 e E3, e em janeiro, para as Estaes 4, 5 e 6. O valor mximo
(152,50 mg.L-1) foi registrado em dezembro na Estao 6. A Estao 1
apresentou o menor valor mdio, com mnimo de 0,33 mg.L-1, medido em
maro II.
As Estaes 5 e 3 apresentaram, respectivamente, o maior e o menor
valor mdio de oxignio dissolvido. O valor mximo (8,65 mg.L-1) foi registrado
em novembro na Estao 6, e o valor mnimo (4,26 mg.L-1), em janeiro na
Estao 3.
valor mdio de % de saturao de O2. O maior valor (180,93%) ocorreu em
fevereiro na Estao 5, enquanto que, o menor valor (72,33%), em janeiro na
Estao 3.
valor mdio de fsforo total. O valor mximo (0,379 mg.L-1) foi medido em
28
maro II na Estao 3, e o valor mnimo (0,022 mg.L-1) em fevereiro na Estao

1.
valor mdio de ortofosfato, com mximo de 61,41 g.L-1, medido em maro I na
Estao 2, e mnimo de 3,56 g.L-1, medido no mesmo ms na Estao 1.
Em novembro foram registradas as menores concentraes de
nitrognio total para todas as estaes de coleta, exceto para E1. O valor
mnimo (0,037 mg.L-1) ocorreu em dezembro na Estao 1. A Estao 3
apresentou o maior valor mdio, com mximo de 3,426 mg.L-1, medida em
fevereiro.
valor mdio de nitrognio amoniacal total. A maior concentrao (1,87 mg.L-1)
foi registrada em maro I na Estao 2, e a menor concentrao (0,39 mg.L-1),
em maro I na Estao 4 e em maro II na Estao 3.
Destaca-se que a denominao de nitrognio amoniacal total contempla
tanto sua forma no ionizada (amnia, NH3), como sua forma ionizada (amnio,
NH4+). Estas formas predominam em funo dos valores de pH, sendo que, a
forma no ionizada (NH3) prevalece quando pH>10, e a forma ionizada (NH4+),
quando o pH<8,5 (MAINARDES-PINTO e MERCANTE, 2003). Portanto, podese afirmar que, no presente estudo, o nitrognio amoniacal foi predominante
sob a forma de amnio (NH4+), devido aos valores cidos de pH registrados.
As Estaes 3 e 1 tambm apresentaram, respectivamente, o maior e
menor valor mdio de nitrito. A maior concentrao de nitrito (229,15 g.L-1)
ocorreu em maro II na Estao 3, enquanto que, a menor concentrao (2,73
g.L-1), foi registrada em janeiro nas Estaes 1, 2 e 3.
A Estao 4 apresentou o maior valor mdio de nitrato, enquanto que as
Estaes 1 e 2, os menores valores mdios. A concentrao mxima (0,217
29
g.L-1) foi medida em novembro na Estao 2. A concentrao mnima (0,018

g.L-1) foi medida em fevereiro na Estao 5.
As Estaes 2 e 3 apresentaram os maiores valores mdios de clorofila
a, com mximo de 137 g.L-1, medido em maro II na Estao 3. As Estaes 1
e 4 apresentaram os menores valores mdios, com mnimo, de 0,9 g.L-1,
registrado em novembro e maro II na Estao 1 e em novembro na Estao 4.
A Tabela 5 registra os resultados dos clculos do ndice de Estado
Trfico das seis estaes de coleta ao longo de todas as amostragens
realizadas.
Tabela 5. ndice de Estado Trfico dos locais de amostragem ao longo do
perodo de estudo.
Amostragem
E1
E2
E3
E4
E5
E6
nov/06
51
67
66
45
53
49
dez/06
49
75
76
47
66
57
jan/07
51
74
74
69
58
64
fev/07
41
44
76
44
81
53
mar I/07
45
80
78
54
61
59
mar II/07
62
80
82
44
62
56
Mdia
50
70
75
51
64
56
Os resultados dos clculos do IET indicaram que as Estaes 1 e 4

classificaram-se como mesotrficos, enquanto as Estaes 2, 3, 5 e 6,
eutrficos.
A Anlise dos Componentes Principais (ACP) das variveis abiticas e
Clorofila a resumiu 61% da variabilidade conjunta dos dados. De toda a
variao, 36% foi explicada pelo Eixo 1, onde houve a separao das unidades
amostrais em funo da distribuio espacial das estaes de coleta. O Eixo 2
explicou 25% da variao dos resultados em funo da distribuio temporal
das amostragens (incio e fim do perodo de estudo) (Figura 11).
30
Figura 11. Ordenao biplot, pela ACP, das unidades amostrais (meses de
coleta) e das variveis abiticas. As unidades amostrais esto identificadas de
acordo com a estao de coleta. Correlao dos vetores conforme Tabela 6.
Conforme ilustra a Figura 11, todas as unidades amostrais referentes s
Estaes 2 (viveiro) e 3 (efluente), exceto as de novembro, posicionaram-se no
lado negativo do Eixo 1, associadas aos maiores valores de clorofila a,
nitrognio total, fsforo total, nitrognio amoniacal total, ortofosfato e
temperatura da gua. As unidades amostrais referentes s outras estaes de
coleta (E1, E4, E5 e E6) posicionaram-se do lado positivo do Eixo 1,
associadas aos maiores valores de pH, % de saturao de O2 e oxignio
dissolvido.
31
Os valores de coeficiente de correlao de Pearson e Kendall (Tabela 6)

mostraram que as variveis nitrognio total, fsforo total, nitrognio amoniacal
total, ortofosfato e clorofila a apresentaram maior correlao com o Eixo 1,
enquanto que, as variveis de pH e % de saturao de O2 tiveram maior
correlao com o Eixo 2. As variveis de temperatura da gua e oxignio
dissolvido tiveram correlao semelhante com os dois eixos de ordenao.
Tabela 6. Coeficientes de correlao de Pearson e Kendall entre as principais
variveis abiticas e os dois primeiros eixos de ordenao (N = 36).
Variveis abiticas
Abreviaes
Correlao
Eixo 1
Eixo 2
Nitrognio total
NT
-0,711
-0,358
Fsforo total
PT
-0,802
0,186
Nitrognio amoniacal total
NHx
-0,602
-0,092
Ortofosfato
Orto
-0,611
0,020
Clorofila a
Cla
-0,835
-0,002
pH
pH
0,153
-0,820
Oxignio dissolvido
OD
0,535
0,579
% de saturao de O2
%O2
0,306
0,703
Temperatura da gua
Temp
-0,639
0,549
36%
25%
Variao explicada
32

Foi registrado um total de 147 txons, distribudos entre as Classes:
Bacillariophyceae,
Crysophyceae,
Chlorophyceae,
Dinophyceae,
Cyanobacteria,
Euglenophyceae,
Cryptophyceae,
Zygnemaphyceae
Xantophyceae.
Conforme ilustra a Figura 12, a classe Chlorophyceae foi a mais
expressiva, contribuindo com 48% da riqueza total de organismos. A Classe
Euglenophyceae foi a segunda mais expressiva, com 16% da riqueza total,
seguida das Classes Zygnemaphyceae, com 10%; Cyanobacteria, com 9%;
Bacillariophyceae, com 8%; Xanthophyceae, com 4%; Cryptophyceae 3%; e
Crysophyceae e Dinophyceae com 1% cada.
Figura 12. Contribuio das Classes taxonmicas para a riqueza de txons de

todo o perodo de estudo.
A Figura 13 ilustra a contribuio das Classes taxonmicas para a
riqueza de cada estao de coleta, ao final do perodo de estudo.
A Classe Chlorophyceae foi a mais expressiva em todos os locais de
amostragem, contribuindo com mais de 40% das riquezas das Estaes 1, 4 e
5, e com mais de 50% das riquezas nas Estaes 2, 3 e 6.
33
E1
E2
E3
E4
E5
E6
Figura 13. Contribuio das Classes taxonmicas para a riqueza de txons de

cada estao de coleta, ao final do perodo de estudo.
A Classe Euglenophyceae apresentou maior contribuio para as
riqueza das Estaes 1 e 4. A Classe Zygnemaphyceae, para as Estaes 2 e
5.
Classe
Cyanobacteria,
para
as
Estaes
5.
Classe
Bacillariophyceae, para as Estaes 5 e 6. A Classe Xanthophyceae, para as

Estaes
3.
A Classe
Cryptophyceae
apresentou
contribuies
semelhantes para todos os locais de amostragens. A Classe Crysophyceae

contribuiu apenas para a riqueza das Estaes 1, 4 e 6. A Classe Dinophyceae
apresentou maior contribuio para a riqueza das Estaes 1 e 5.
Os resultados ilustrados nas Figuras 12 e 13 devem ser observados com
a ressalva de que os organismos foram identificados at gnero e, quando
possvel, tambm at espcie. Na Classe Bacillariophyceae, a grande maioria
34
dos organismos foi identificada apenas at gnero, sendo que, espcies

diferentes, pertencentes a um mesmo gnero, foram agrupadas em um mesmo
txon.
Por exemplo: espcies diferentes pertencentes ao gnero Nitzschia
foram
agrupadas
num
nico
txon,
Nitzschia
spp..
na
Classe
Euglenophyceae, houve maior possibilidade, para organismos de um mesmo

gnero, da identificao at espcie. Por exemplo: Phacus curvicauda e
Phacus tortus, ambos do mesmo gnero, mas considerados em txons
diferentes, pela possibilidade da identificao desses organismos at espcie.
A Figura 14 ilustra a variao da densidade de organismos (org.mL-1) de
cada estaes de coleta ao longo das seis amostragens realizadas durante o
perodo de estudo. Destaca-se a diferena nas escalas dos grficos de cada
local de amostragem, com os maiores valores registrados nas Estaes 2 e 3 e
os menores, na Estao 5.
Os maiores valores de densidade de organismos da Estao 1 foram
registrados nas amostragens de maro II e janeiro, acima de 6.000 e 4.000
org.mL-1, respectivamente. Nas outras amostragens, foram registrados valores
abaixo de 2.000 org.mL-1, sendo que a densidade mais baixa foi registrada em
novembro.
Os valores de densidade de organismos da Estao 2 e da Estao 3
foram semelhantes. Ambas estiveram acima de 50.000 org.mL-1 em todas as
amostragens, exceto em dezembro. Neste ms, a densidade de organismos
registrada, nas duas estaes de coleta, foi abaixo de 10.000 org.mL-1, a
menor de todo o perodo. Os valores mais altos de densidade de E2 e E3 foram
verificados em maro I, acima de 90.000 org.mL-1.
Os valores mais altos de densidade de organismos da Estao 4 foram
registrados em dezembro e novembro, com valores acima de 12.000 e 4.000
org.mL-1, respectivamente. Nas outras amostragens, os valores de densidade
de organismos estiveram abaixo de 2.000 org.mL-1.
35
Estao 1 (afluente)
Estao 2 (viveiro)
Estao 3 (efluente)
Estao 5 (montante a zona de mistura)
Estao 6 (jusante a zona de mistura)
Figura 14. Densidade de organismos (org.mL-1) de cada estao de coleta ao

longo das amostragens realizadas durante o perodo de estudo.
36

registrados em maro I e novembro, acima de 1.500 org.mL-1. Os menores
valores foram registrados foram registrados em dezembro, janeiro e fevereiro,
entre 500 e 1.000 org.mL-1.
registrados em dezembro e maro I, acima de 6.000 e de 4.000 org.mL-1,
respectivamente. A densidade de organismos mais baixa, abaixo de 1.000
org.mL-1, foi verificada em janeiro.
A Figura 15 ilustra a contribuio das Classes taxonmicas na
composio da densidade de organismos de cada amostragem.
A Classe Chlorophyceae foi a mais representativa, em termos de
densidade de organismos nas amostragens de todas as estaes de coleta.
As
Classes
Cryptophyceae
Euglenophyceae
foram
mais
representativas, em termos de densidade, nas Estaes 1, 4, 5 e 6. A Classe

Cyanobacteria e Xanthophyceae apresentaram suas maiores contribuies nas
Estaes 2 e 3.
A contribuio da Classes Bacillariophyceae para a composio da
densidade de organismos foi semelhante para todas as estaes de coleta,
variando em seus valores conforme a amostragem.
As
Classes
Zygnemaphyceae,
Dinophyceae
Crysophyceae
contriburam com 1% ou menos para a densidade de organismos das seis

estaes de coleta, apresentando pouca ou nenhuma representatividade em
suas composies ao longo das amostragens.
37
Estao 1 (afluente)
Estao 2 (viveiro)
Estao 3 (efluente)
Estao 5 (montante a zona de mistura)
Estao 6 (jusante a zona de mistura)
Figura 15. Contribuio das Classes taxonmicas para a composio da

densidade de organismos ao longo das amostragens de cada estao de
coleta.
38
Dos txons registrados nas amostragens de todas as estaes de

coleta, quatro clorofceas foram consideradas dominantes em diferentes
amostragens. Em novembro, Eutetramorus spp. foi dominante em E3. Em
maro I, Chlorella spp. foi dominante em E1 e em maro II, Asteracys spp. foi
dominante em E1 e E5. Nos meses de janeiro e fevereiro no houve nenhum
txon dominante em nenhuma das estaes de coleta.
Um total de 18 txons foram considerados abundantes na Estao 1,
sendo os que apresentaram maior densidade: Asteracys sp. e Chlorella spp..
Esses txons tambm foram os que apresentaram maior densidade na Estao
4, onde 26 txons foram considerados abundantes.
A Estao 2 apresentou 29 txons abundantes, dos quais destacam-se:
Eutretamorus spp., Chlorella spp. e Aphanocapsa delicatissima. Esses trs
txons tambm foram os que apresentaram maior densidade na Estao 3, que
apresentou um total de 31 txons considerados como abundantes.
Os txons Chlorella spp. e Cryptomonas spp. foram os que
apresentaram maior densidade nas estaes 5 e 6. Nessas estaes de coleta,
11 e 26 txons, respectivamente, foram considerados abundantes.
Na Tabela 7 esto registrados os grupos funcionais, segundo
REYNOLDS et al. (2002), de todos os txons considerados abundantes.
A densidade total de cada txon considerado abundante em cada
estao de coleta e seu respectivo grupo funcional esto registrados no Anexo
7.
39
Tabela 7. Grupos funcionais fitoplanctnicos, segundo REYNOLDS et al. (2002), dos txons
considerados abundantes nas amostragens de todo o perodo de estudo.
Associao
A
Habitat
Lagos limpos, pobres
em nutrientes e com boa
mistura vertical
Pequenos-mdios lagos
mesotrficos, com
mistura vertical
guas rasas, incluindo
rios, ricos em nutrientes
e com alta turbidez
Representantes tpicos
Tolerantes a
Sensveis a
Urosolenia, Cyclotella
comensis
Deficincia de
nutrientes
pH alto
Aulacoseira subarctica,
Aulacoseira islandica
Baixa disponibilidade
de luz
pH alto, depleo
de Slica e
estratificao
Synedra acus, Nitzschia

spp., Stephanodiscus
hantzschii
guas turbulentas
Depleo de
nutrientes
Epilmnio mesotrfico
Tabellaria, Cosmarium,
Staurodesmus
Epilmnio eutrfico
Fragillaria crotonensis,
Aulacoseira granulata,
Closterium aciculare
S1
guas com mistura e

turbidez
Planktothrix agardhii,
Limnothrix redekei,
Pseudoanabaena
Baixssima
disponibilidade de luz
guas turbulentas
guas com mistura e

baixa turbidez
Synechococcus
Picoplncton procariotas
de nutrientes
guas rasas com

mistura em condies
eutrficas
Predao e baixa
disponibilidade de
luz
Chlorella, Ankyra,
Monoraphidium
Estratificao
Deficincia de
nutrientes e
animais filtradores
Camadas limpas com

mistura em lagos rasos
e meso-eutrficos
Plagioselmis
Chrysochromulina
Estratificao
Animais filtradores
Cryptomonas
Baixa disponbilidade
de luz
fagotrficos
Clorofceas coloniais,
como Botryococcus,
Pseudosphaerocystis,
Coenochloris, Oocystis
lacustris
de nutrientes e alta
turbidez
Deficincia de CO2
X1
X2
Usualmente lagos
pequenos e ricos em
nutrientes
Epilmnio limpo
Colunas curtas e ricas

em nutrientes
Lo
Eplmnio de vero em
lagos mesotrficos
W1
Lagoas pequenas e
orgnicas
Lagos mesotrficos
rasos
Estratificao, pH
alto
Estratificao e
Depleo de Slica
Diminuio da
disponibilidade de
luz
guas rasas de lagoas e Pediastrum, Coelastrum,

Scenedesmus, Golenkinia
rios eutrficos
W2
Deficincia de
nutrientes
Moderada
disponibilidade de luz
e deficincia de
Carbono
Aphanothece,
Aphanocapsa
Alta mistura
Peridinium, Woronichinia,
Merismopedia
Segregao de
nutrientes
Mistura da gua
alta ou prolongada
Euglenides, Synura,
Gonium
Alta DBO
Predao
Trachelomonas
40
A Tabela 8 registra a Frequncia de Ocorrncia dos txons registrados,

calculada com os resultados das contagens dos organismos.
Tabela 8. Frequncia de ocorrncia dos txons registrados.
Txons
Frequncia de Ocorrncia (%)
Bacillariophyceae
1
Achnantindium spp.
13,89
Comum
Aulacoseira granulata
36,11
Comum
Aulacoseira spp.
19,44
Comum
Amphora spp.
38,89
Comum
Cyclotella spp.
91,67
Frequente
Cymbella spp.
5,56
Rara
Fragillaria spp.
5,56
Rara
Navicula spp.
41,67
Comum
Nitzschia spp.
72,22
Frequente
10 Pinullaria spp.
2,78
Rara
11 Suriella spp.
2,78
Rara
12 Actinastrum aciculare
8,33
Rara
13 Ankistrodesmus falcatus
2,78
Rara
14 Ankistrodesmus fusiformis
8,33
Rara
15 Ankistrodesmus gracilis
13,89
Comum
16 Ankistrodesmus spiralis
8,33
Rara
17 Asteracys sp.
50,00
Frequente
18 Botryococcus sp.
16,67
Comum
19 Chlamydomonas spp.
33,33
Comum
20 Chlorella spp.
94,44
Frequente
21 Coelastrum astroideum
5,56
Rara
22 Coelastrum pulchrum
8,33
Rara
23 Coelastrum reticulatum
2,78
Rara
24 Coelastrum spp.
33,33
Comum
Chlorophyceae
41
25 Crucigenia quadrata
30,56
Comum
26 Crucigenia tetrapedia
75,00
Frequente
27 Crucigeniella crucfera
33,33
Comum
28 Crucigeniella spp.
16,67
Comum
29 Dichotomococcus curvatus
30,56
Comum
30 Dictyosphaerium spp.
69,44
Frequente
31 Didymocystis fina
66,67
Frequente
32 Dimorphococcus lunatus
2,78
Rara
33 Eudorina sp.
2,78
Rara
34 Eutetramorus spp.
19,44
Comum
35 Frauceria echdina
2,78
Rara
36 Kirchneriella spp.
11,11
Comum
37 Monoraphidium arcuatum
25,00
Comum
38 Monoraphidium contortum
83,33
Frequente
39 Monoraphidium minutum
47,22
Comum
40 Monoraphidium sp.
58,33
Frequente
41 Nephrocytium aghardianum
5,56
Rara
42 Oocystis spp.
27,78
Comum
43 Pandorina morum
2,78
Rara
44 Pediastrum duplex
88,89
Frequente
45 Pediastrum tetras
2,78
Rara
46 Raphidocelis contorta
16,67
Comum
47 Rayssiella sp.
30,56
Comum
48 Sc. arcuatus f. gracilis
5,56
Rara
49 Scenedesmus bicaudatus
5,56
Rara
50 Scenedesmus bijugus
61,11
Frequente
51 Scenedesmus opoliensis
16,67
Comum
52 Scenedesmus quadricauda
16,67
Comum
53 Scenedesmus schroeteri
11,11
Comum
54 Scenedesmus spp.
16,67
Comum
55 Schroederia spiralis
2,78
Rara
56 Tetraedron caudatum
72,22
Frequente
42
57 Tetraedron incus
2,78
Rara
58 Tetraedron komarekii
38,89
Comum
59 Tetraedron minimum
44,44
Comum
60 Tetraedron trigonum
27,78
Comum
61 Tetrallantos langerheimii
16,67
Comum
62 Tetrastrum heteracantum
13,89
Comum
63 Treubaria spp.
11,11
Comum
64 Westella botryoides
63,89
Frequente
65 Aphanocapsa delicatissima
66,67
Frequente
66 Aphanocapsa sp.
5,56
Rara
67 Bacullaria sp.
2,78
Rara
68 Chroococcus spp.
11,11
Comum
69 Merismopedia spp.
61,11
Frequente
70 Oscillatoria spp.
30,56
Comum
71 Pseudoabaena spp.
8,33
Rara
72 Romeria gracilis
27,78
Comum
73 Spirulina spp.
8,33
Rara
74 Synechococcus sp.
19,44
Comum
75 Synechocystis sp.
22,22
Comum
76 Filamentosa no identificada
5,56
Rara
97,22
Frequente
11,11
Comum
79 Gymnodinium spp.
33,33
Comum
80 Peridinium spp.
19,44
Comum
81 Euglena acus
55,56
Frequente
82 Euglena spp.
50,00
Frequente
83 Lepocinclis spp.
5,56
Rara
Cyanobacteria
Cryptophyceae
77 Cryptomonas spp.
Chrysophyceae
78 Dinobryon sertularia
Dinophyceae
Euglenophyceae
43
84 Phacus cochleatus
8,33
Rara
85 Phacus curvicauda
2,78
Rara
86 Phacus suecicus
11,11
Comum
87 Phacus tortus
2,78
Rara
88 Strombomonas spp.
5,56
Rara
89 Trachelomonas armata
11,11
Comum
90 Trachelomonas similis
11,11
Comum
91 Trachelomonas volvocina
36,11
Comum
100 Trachelomonas spp.
69,44
Frequente
101 Closterium spp.
27,78
Comum
102 Cosmarium majae
38,89
Comum
103 Cosmarium spp.
2,78
Rara
104 Eutrastrum binale
8,33
Rara
105 Euastrum spp.
5,56
Rara
106 Haplotenium minutum
2,78
Rara
107 Straurastrum spp.
5,56
Rara
108 Goniochloris mutica
44,44
Comum
109 Tetradriella jovetti
22,22
Comum
110 Tetraplekton torsun
11,11
Comum
111 Xantofcea no identificada 1
5,56
Rara
112 Xantofcea no identificada 2
5,56
Rara
Zygnemaphyceae
Xantophyceae
Um total de 19 txons foi considerado como Frequentes (F 50%); 11

txons da Classe Chlorophyceae, 3 da Classe Euglenophyceae, 2 da
Cyanobacteria, 2 da Bacillariophyceae e 1 da Cryptophyceae.
Os txons considerados comuns (10% F 50%) totalizaram 47; 25 deles
foram da Classe Chlorophyceae, 5 da Bacillariophyceae, 5 da Cyanobacteria, 4
da Euglenophyceae, 3 da Xanthophyceae, 2 da Dinophyceae, 2 da
Zygnemaphyceae e 1 da Crysophyceae.
44
Os txons considerados como Raros (F<10%) totalizaram 38; 17 da

Classe Chlorophyceae, 5 da Classe Cyanobacteria, 5 da Euglenophyceae, 5 da
Zygnemaphyceae, 4 da Bacillariophyceae e 2 da Xanthophyceae.
Nota-se que o nmero de txons utilizados para o clculo da Frequncia
de ocorrncia, 104 txons, no corresponde ao nmero total de txons
identificados, 147 txons. Isto ocorreu por que alguns dos txons observados
durante a identificao (anlise da amostra concentrada, fixada em formol) no
foram registrados nas contagens (anlise da amostra bruta, fixada em lugol).
Alguns dos txons com Frequncia de Ocorrncia F 50% foram
selecionados como txons descritores e seus valores de densidade de cada
amostragem foram utilizados nas anlises multivariadas.
A Anlise dos Componentes Principais (ACP) dos txons descritores
resumiu 73% da variabilidade total dos dados em seus dois primeiros eixos.
Praticamente
toda
variao
foi
explicada
pelo
Eixo
(63%
de
explicabilidade), onde houve a separao das unidades amostrais em funo

da distribuio espacial das estaes de coleta. O Eixo 2 explicou apenas 10%
da variao dos resultados dos txons descritores em funo da distribuio
temporal das estaes de coleta.
Conforme ilustra a Figura 16, as unidades amostrais referentes s
Estaes 2 (viveiro) e 3 (efluente) posicionaram-se no lado negativo do Eixo 1,
associadas aos maiores valores de densidade dos txons descritores. A
maioria das unidades amostrais referentes s outras estaes de coleta (E1,
E4, E5 e E6) posicionaram-se do lado positivo do Eixo 1.
45
Figura 16. Ordenao biplot, pela ACP, das unidades amostrais (meses de
coleta) e dos txons descritores. As unidades amostrais esto identificadas de
acordo com a estao de coleta. Correlao dos vetores conforme Tabela 9.
Os coeficientes de correlao de Pearson e Kendall (Tabela 9)
mostraram que os resultados de frequncia de ocorrncia da maioria dos
txons teve maior relao com o Eixo 1. Apenas os resultados da frequncia de
ocorrncia da espcie Westella botryoides apresentaram maior relao com o
Eixo 2.
Os resultados da densidade dos txons Nitzchia spp., Trachelomonas
spp. e da espcie Euglena acus tiveram relao semelhante com os dois eixos
de ordenao.
46
Tabela 9. Coeficientes de correlao de Pearson e Kendall entre as variveis

biolgicas (txons descritores com base na Frequncia de Ocorrncia) e os
dois primeiros eixos de ordenao (N = 36).
Txons
Abreviaes
Correlao
Eixo 1
Eixo 2
Cyclo
-0,771
0,340
Nitzchia spp.
Nitz
-0,431
0,515
Chlorella spp.
Chlo
-0,718
0,216
Crucigenia tetrapedia
Cruc
-0,919
-0,122
Monoraphidium contortum
Mcont
-0,895
-0,087
Oocystis spp.
Oocy
-0,841
0,245
Westella botryoides
West
-0,555
-0,716
Aphanocapsa delicatissima
Apha
-0,940
0,084
Merismopedia spp.
Merismo
-0,917
0,062
Cryptomonas spp.
Crypto
-0,816
0,150
Euglena acus
Eacus
-0,313
0,478
Lepocinclis spp.
Lepo
-0,847
-0,006
Trachelomonas spp.
Trach
-0,520
-0,416
63%
10%
Cyclotella spp.
Variao explicada
47

Todos os ensaios foram considerados vlidos, de acordo com os
critrios da ABNT (2005). Os clculos para a validao dos ensaios podem ser
verificados no Anexo 8. A densidade algcea registrada em cada repetio no
final de todos os ensaios com amostras brutas e com diluio de efluente
encontra-se registrada no Anexo 9.
Contrariamente
ao
que
esperado
na
maioria
dos
ensaios
ecotoxicolgicos realizados com Pseudokirchneriella subcapitata, os resultados

revelaram um fenmeno de crescimento nas culturas de algas submetidas aos
testes.
A Figura 17 mostra a mdia do crescimento algceo nos ensaios com
amostra bruta.
Na anlise feita por estaes de amostragem, foi verificado que houve
maior crescimento algceo, com diferena significativa, em relao ao controle,
nas estaes 2 e 3 nos meses de novembro, janeiro e fevereiro; nas estaes
4 e 5 em dezembro; e nas estaes 3, 4 e 6 na primeira coleta de maro (mar
I). Na segunda coleta de maro (mar II), no houve diferena significativa, em
relao ao controle, entre as estaes amostrais. O controle apresentou
diferena significativa a E2 e E3, apenas em novembro.
Na anlise feita por perodo amostral, o crescimento algceo dos
ensaios com amostras da Estao 1 apresentou diferena significativa, em
relao ao controle, em fevereiro e na segunda coleta de maro (mar II);
apenas em maro II para a Estao 2; em dezembro, fevereiro, maro I e
maro II nas estaes 4 e 5; e em fevereiro e maro I e maro II na Estao 6.
Os resultados dos ensaios com amostras da Estao 3 no apresentaram
diferenas significativas entre si ao longo dos meses estudados, assim como
ocorreu com o grupo controle.
48
Figura 17. Mdia do crescimento algceo (cels.mL-1 x 104) nos ensaios com
amostras brutas. Barras vermelhas indicam diferena significativa, em relao
ao controle, nos resultados dos ensaios de cada campanha amostral.
A Figura 18 ilustra a variao do crescimento algceo dos ensaios das
estaes 2 e 3 e da concentrao de nitrognio total e fsforo total nas
respectivas amostragens.
Foi verificado que o crescimento algceo apresentou um padro
crescente, assim como as concentraes de fsforo total. No entanto, exceto
pela amostragem de maro II, esse crescimento variou de forma mais
semelhante s concentraes de nitrognio total, aumentando continuamente
at fevereiro e sofrendo queda na amostragem seguinte.
49
Figura 18. Variao do crescimento algceo (cels.mL-1 x 104) nos ensaios com
amostras das estaes 2 e 3 e concentraes de nitrognio total (mg.L-1) e
fsforo total (mg.L-1) nas respectivas amostragens.
Conforme ilustra a Figura 19, nos ensaios com diluio do efluente,
foram verificadas diferenas significativas, em relao ao grupo controle, nas
concentraes de 25% e 50% no ms de novembro; 50% e 100% em janeiro e
maro I; e apenas na concentrao de 100% em fevereiro e maro II. Os
resultados dos ensaios com amostras do ms de dezembro no apresentaram
diferenas significativas entre as diluies.
Dessa forma, obteve-se CEO (Concentrao de efeito observado) de
25% e CENO (Concentrao de efeito no observado) de 12,5% no ms de
novembro, CEO 50% e CENO 25% em janeiro e maro I, CEO 100% e CENO
50% em fevereiro e maro II.
50
Figura 19. Mdia do crescimento algceo (cels.mL-1 x 104) nos ensaios com
diluio de efluente. Barras vermelhas indicam diferena significativa, em
relao ao controle, nos resultados dos ensaios de cada campanha amostral.
51
4. DISCUSSO
4.1 Variveis abiticas e clorofila a
Os valores de temperatura da gua registrados no viveiro (E2) foram de
mnima de 23,8oC em novembro e mxima de 31,3oC em dezembro. Embora
as temperaturas recomendadas para o cultivo de peixes em ambientes
tropicais e subtropicais estejam entre 26,0oC e 28,0oC (BOYD, 1990), valores
semelhantes foram registrados por TOLEDO e CASTRO (2001), em viveiros da
estao de piscicultura de Alta Floresta, Mato Grosso (mnima de 21,7oC e
mxima de 35,6oC); por PAGGI e SIPABA-TAVARES (2007), tambm no
estado de Mato Grosso (mnima de 25,1oC e mxima de 33,2oC); e por
MERCANTE et al. (2006) em estudo com 30 pesqueiros na Regio
Metropolitana de So Paulo (mnima de 23,8C e mxima de 30,0oC, na
estao chuvosa).
Os valores de pH do efluente (E3) estiveram entre 5,59 e 6,75. Estes
valores esto dentro dos padres recomendados pela Resoluo CONAMA
357/2005 para as condies de lanamento de efluentes. De acordo com esta
Resoluo, o pH deve estar na faixa entre 5,0 e 9,0 (Tabela 4).
A Resoluo CONAMA 357/2005, tambm recomenda que para guas
de Classe 2, as quais contemplam, entre outras atividades, guas destinadas
aquicultura e atividade de pesca, o pH deve estar na faixa entre 6,0 e 9,0. As
guas do viveiro (E2) estiveram dentro desta faixa apenas nas amostragens de
novembro, janeiro e fevereiro. Os valores medidos nas amostragens de
dezembro, maro I e maro II foram de 5,43; 5,91 e 5,88, respectivamente,
estando abaixo, portanto, dos padres recomendados.
Esses valores, alm de estarem fora dos padres recomendados pela
Resoluo CONAMA 357/2005, tambm podem ser prejudiciais para os
organismos cultivados. Segundo SIPABA-TAVARES (1996), se a gua de um
viveiro de piscicultura for mais cida que 6,2 ou mais alcalina que 9,5 por um
longo perodo, consequncias negativas podem ocorrer na reproduo e no
52
crescimento dos peixes. Segundo ESTEVES (1998), valores cidos de pH

podem provocar alteraes em vrios processos fisiolgicos, sendo a absoro
e transporte de oxignio, regulao inica e equilbrio cido-base, os mais
importantes.
De maneira geral, as amostragens realizadas em dezembro, que
apresentaram os valores mais cidos de pH, tambm apresentaram as mais
altas Temperaturas da gua e os maiores valores de condutividade eltrica,
slidos totais dissolvidos e matria orgnica (Anexo 6). Nesse ms tambm foi
registrado maior valor de precipitao acumulada de todo o perodo de estudo
(Figura 10).
Altos valores de condutividade eltrica indicam elevadas taxas de
decomposio (SIPABA-TAVARES, 1994). A quantidade de slidos totais
existentes nos viveiros ocasionada pela quantidade advinda de alimentao
natural da gua de abastecimento do tanque, somada aos teores adicionados
atravs da fertilizao (adubao e calagem dos tanques), arraoamento e
produtividade primria (fitoplncton) (SILVA et al., 2005).
Assim, a ressuspenso do sedimento do fundo, provocada pelas chuvas,
possivelmente, implicou no aumento da concentrao de slidos totais
dissolvidos e de matria orgnica na coluna dgua. As chuvas tambm podem
ter interferido nesses fatores atravs da lixiviao da matria orgnica do solo
e, com as altas temperaturas, essas condies favoreceram os processos de
decomposio, refletindo nos altos valores de condutividade eltrica e na
acidez do pH.
Em estudo com a variao diria de parmetros limnolgicos em viveiros
de piscicultura, PDUA et al. (1997) afirmaram que as altas temperaturas
proporcionam condies para uma alta taxa de reciclagem da matria orgnica
(decomposio microbiana). Os organismos heterotrficos, como bactrias,
interferem no pH da gua, abaixando-o. Intensos processos de decomposio
e respirao tm como consequncia a liberao de dixido de carbono (CO2)
53
e, assim, a formao de cido carbnico e ons de hidrognio, provocando a

diminuio do pH.
Essas condies observadas em dezembro se repetiram na amostragem
de maro I, quando tambm foram obtidos valores cidos de pH e altos valores
de temperaturas da gua, condutividade eltrica e slidos totais dissolvidos. Os
valores de matria orgnica no foram altos como os valores medidos em
dezembro, provavelmente, devido menor precipitao acumulada em maro
(Figura 10), provocando uma ressuspenso de sedimento e lixiviao de
matria orgnica do solo menos intensa.
A relao entre as chuvas e a acidez das guas de viveiros de
piscicultura tambm foi discutida por MERCANTE et al. (2006). Os autores
realizaram estudo com as variveis abiticas de trinta lagos de pesque-pague
na Regio Metropolitana de So Paulo nas estaes seca e chuvosa. Neste
estudo, foi verificado que, na estao chuvosa, 88% dos pesqueiros
apresentaram valores de pH abaixo de 6,0. Segundo os mesmos autores isso
esteve relacionado s chuvas, que diluram as concentraes de clcio, bem
como ao maior aporte de matria orgnica lixiviada do solo, interferindo na
produo de CO2 e, consequentemente, de cido carbnico (H2CO3-) e outros
compostos de caractersticas cidas.
Os valores de alcalinidade das amostragens de maro I (final do ciclo de
cultivo) tambm podem ter sido influenciados pelas chuvas, atravs da diluio
das concentraes de clcio na gua, como observado no estudo de
MERCANTE et al. (2006). Em maro I foram registrados os menores valores de
Alcalinidade de todo o perodo para o E1 (18,46 mgCaCO3.L-1), E2 e E3 (22,56
mgCaCO3.L-1) e E4 (20,51 mgCaCO3.L-1). Em dezembro, quando foi registrada
a maior precipitao acumulada, as chuvas no tiveram efeito nos valores de
alcalinidade de E2 e E3, provavelmente, por que a calagem, realizada em
outubro, ainda era recente.
54
A alcalinidade refere-se concentrao de bases na gua e sua

capacidade em resistir s mudanas de pH para menos (poder tampo) (SILVA
et al., 2005). De acordo com SIPABA-TAVARES (1994), a alcalinidade
recomendada para cultivo deve estar acima de 20 mgCaCO3.L-1, estando a
faixa ideal entre 200 e 300 mgCaCO3.L-1, pois um bom aporte de carbonato de
clcio mantm o equilbrio entre bicarbonatos (HCO3-) e gs carbnico livre
(CO2), minimizando as variaes de pH.
A alcalinidade do viveiro (E2) apresentou-se sempre acima de 20
mgCaCO3.L-1, com o valor mnimo registrado em maro I (22,56 mgCaCO3.L-1),
e o valor mximo registrado em fevereiro (36,61 mgCaCO3.L-1).
Os maiores valores de oxignio dissolvido e % de saturao de O2 foram
registrados nas estaes localizados no corpo receptor (E4, E5 e E6). Isto pode
estar associado s baixas temperaturas registradas nesses locais, uma vez
que a solubilidade do oxignio aumenta conforme a temperatura diminui
(VINATEA-ARANA, 1997).
Da mesma forma, as altas temperaturas da gua medidas em E2 e E3
podem ter diminudo a solubilidade do oxignio no viveiro, resultando em
valores menores de OD e % de saturao de O2.
Os valores mnimos de oxignio dissolvido foram registrados em janeiro
na Estao 3 (4,26 mg.L-1), em fevereiro na Estao 2 (4,73 mg.L-1) e na
Estao 3 (4,68 mg.L-1). Esses valores esto abaixo do limite mnimo
recomendado pela Resoluo CONAMA 357/2005, de 5,0 mg.L-1.
Baixos valores de oxignio dissolvido tambm foram observados por
SOUZA et al. (2000), em estudo com manejo alimentar e tempo de residncia
em viveiros de pacu (Piaractus mesopotamicus). Os autores afirmaram que os
menores valores de Oxignio Dissolvido, observados em um dos viveiros de
seu estudo, ocorreram devido ao fornecimento dirio de rao, que, somado
aos produtos de excreo dos peixes, criaram um suprimento contnuo de
55
nutrientes, aumentando os processos de respirao e, consequentemente,

levando a uma alta taxa de decomposio.
Portanto, os baixos valores de oxignio dissolvido medidos em E2 e E3
tambm podem estar associados ao consumo de oxignio pelos processos de
decomposio da rao no consumida, uma vez que nesse ms tambm foi
registrada a maior quantidade de rao fornecida de todo o perodo (Tabela 2).
BACCARIN et al. (2000), em estudo sobre nutrientes em tanques de
tilpia vermelha, tambm registraram baixos valores de OD. Os autores
afirmaram que a renovao contnua da gua, que retira o excesso de matria
orgnica, diminuindo os processos de decomposio que consomem oxignio,
no foi suficiente para manter bons nveis de oxignio dissolvido.
Da mesma forma, a renovao da gua do viveiro estudado,
possivelmente, no foi suficiente na remoo desse excesso de matria
orgnica, levando s altas taxas de decomposio, consumindo o oxignio e,
assim, contribuindo para os baixos valores de OD.
Deve-se destacar que os valores de oxignio dissolvido sofrem
variaes ao longo do dia. As taxas de OD tendem a ser mais elevadas durante
o dia, devido aos processos de fotossntese que ocorrem somente no perodo
diurno, e podem sofrer quedas bruscas noite, por causa da respirao dos
organismos do viveiro (MERCANTE et al., 2007). As baixas concentraes de
oxignio dissolvido obtidas sugerem que os nveis de oxignio no viveiro (E2)
podem ter atingido nveis crticos durante a noite, uma vez que todas as
amostragens foram realizadas por volta das 10 horas da manh.
As estaes 2 e 3 tambm apresentaram altas concentraes de fsforo
total, nitrognio total, ortofosfato, nitrognio amoniacal total e clorofila a, em
relao s outras estaes de coleta. Esses resultados foram semelhantes aos
obtidos por SCHNECK et al. (2007). Os autores tambm observaram, em
estudo com impactos causados por efluentes de piscicultura, que os fatores
56
fsicos e qumicos mais pronunciados foram aqueles diretamente associados

ao manejo do viveiro, verificando altas concentraes de fsforo, nitrognio e
Clorofila a.
Uma vez que a gua de abastecimento (E1) no apresentou valores
altos para tais fatores, pode-se deduzir que isto se deve interferncia
causada pelo manejo. A entrada de compostos orgnicos e inorgnicos,
atravs de adubos, fertilizantes e rao, elevou os nveis de nitrognio e fsforo
em E2 e E3, o que favoreceu a intensificao dos processos fotossintticos,
refletindo no aumento da concentrao de clorofila a.
Em todas as amostragens, exceto em novembro, a zona de mistura (E4)
tambm apresentou valores de fsforo total acima do limite, de 0,1 mg.L-1,
recomendado pela Resoluo CONAMA 357/2005 para ambientes lticos. A
Estao 5 apresentou valores acima deste limite em janeiro e maro I e a
Estao 6, em dezembro, janeiro e maro I.
As concentraes de nitrognio total das estaes 2 e 3 esto,
possivelmente, associadas s quantidades de rao fornecida (Tabela 2), uma
vez que variaram de forma semelhante. Segundo PEREIRA e MERCANTE
(2004), em piscicultura intensiva, a principal fonte de compostos nitrogenados
incorporados gua a alimentao.
Tanto as concentraes de nitrognio total de E2 e E3 quanto
quantidade de rao fornecida aumentaram continuamente at fevereiro,
quando atingiram seus valores mximos (2,539 mg.L-1, 3,426 mg.L-1 e 35,9 kg,
respectivamente). Em maro, a quantidade de rao fornecida diminuiu para
31,4 kg, e as concentraes de nitrognio total de E2 e E3 tambm sofreram
queda, diminuindo para 1,133 mg.L-1 e 1,396 mg.L-1, respectivamente.
Dentre os compostos nitrogenados medidos em E2 e E3 (nitrognio
amoniacal Total, nitrito e nitrato), o nitrognio amoniacal total apresentou as
maiores concentraes. Isto tambm foi observado por SIPABA-TAVARES et
57
al. (1999), que atriburam esse fato s taxas de decomposio de matria

orgnica, excreo dos peixes e rao no consumida, normalmente altas em
viveiros de piscicultura.
As maiores concentraes de nitrognio amoniacal total de E2 e E3
foram registradas nas amostragens de fevereiro e maro I (final do ciclo de
cultivo). Nesses meses tambm foram registradas as maiores quantidades de
rao fornecida durante todo o estudo (Tabela 2) e as maiores concentraes
de ortofosfato e clorofila a (Anexo 6).
De acordo com SIPABA-TAVARES (2001), a maioria das algas
assimila
nitrognio
preferencialmente
na
forma
amoniacal,
por
ser
energeticamente mais vivel, enquanto que, segundo SILVA et al. (2005), a

forma predominante do fsforo nos tanques de piscicultura o ortofosfato,
prontamente assimilvel pelo fitoplncton.
Esses fatores sugerem que o aumento da concentrao de nitrognio
amoniacal e ortofosfato foi favorecida pela entrada de nutrientes da rao, o
que contribuiu para proliferao das algas, refletindo no aumento dos nveis de
clorofila a.
As estaes 2 e 3 apresentaram valores mdios para clorofila a de 52,62
-1
g.L e 60,03 g.L-1, respectivamente. Em todas as amostragens do viveiro e

do efluente, exceto em novembro (E2 e E3) e dezembro (apenas para E3), os
valores medidos estavam acima do limite mximo recomendado pela
Resoluo CONAMA 357/2005, de 30 g.L-1.
Os valores de clorofila a encontrados nas estaes localizados no corpo
receptor (E4, E5 e E6) foram baixos, quando comparados aos valores de E2 e
E3. Segundo SOUZA et al. (2000), o constante fluxo de gua carrega os
nutrientes e, consequentemente, a densidade fitoplanctnica, refletida nos
valores de clorofila a, diminui. Por isso, a vazo do corpo receptor contribuiu
para esses valores medidos em E4, E5 e E6, uma vez que a vazo mdia do
58
corpo receptor foi de 465,67 L.s-1, bastante alta quando comparada vazo
mdia da Estao 3, de 2,22 L.s-1 (Tabela 3).
A Anlise dos Componentes Principais (ACP) incluiu a relao dos
fatores: temperatura da gua, pH, oxignio dissolvido, % de saturao de O2,
Fsforo total, ortofosfato, nitrognio total, nitrognio amoniacal total e clorofila
a, com a distribuio espacial (Eixo 1) e temporal (Eixo 2) das amostragens.
O Eixo 1 resumiu 36% da variabilidade conjunta dos dados, enquanto
que o Eixo 2, 25% (Tabela 6). Isto significa que 36% da variabilidade dos
resultados desses fatores explicada em funo da distribuio espacial das
amostragens (localizao das estaes de coleta), e 25% em funo da
distribuio temporal das amostragens.
Conforme ilustra a Figura 11, a ACP mostrou que as condies das
guas das estaes 2 e 3 foram semelhantes, posicionando todas as
amostragens dessas estaes, exceto de novembro, no lado negativo do Eixo
1, associadas aos maiores valores de: nitrognio total, nitrognio amoniacal
total, fsforo total, ortofosfato, clorofila a e temperatura da gua.
Os coeficientes de correlao de Pearson e Kendall (Tabela 6)
mostraram que os fatores: nitrognio total, nitrognio amoniacal total, fsforo
total, ortofosfato e clorofila a estiveram fortemente associados distribuio
espacial das amostragens, representada pelo Eixo 1. Isto se deve fertilizao,
ao arraoamento e taxa de excreo dos organismos, que interferem na
variabilidade desses resultados, diferenciando a qualidade da gua de E2 e E3
das outras estaes de coleta.
As amostragens de novembro de E2 e E3 foram as nicas dessas
estaes que se posicionaram no lado positivo do Eixo 1, indicando
semelhana com as unidades amostrais posicionadas do mesmo lado deste
eixo.
59
Isto ocorreu por que, em novembro, incio do ciclo de cultivo, a

interferncia do manejo ainda no era intensa. A quantidade de rao fornecida
e as taxas de excreo dos organismos e decomposio de matria orgnica
ainda no eram suficientes para diferenciar, em termos de nitrognio total,
nitrognio amoniacal total, fsforo total, ortofosfato e clorofila a, a qualidade da
gua de E2 e E3 das outras estaes de coleta.
A ACP tambm mostrou que as condies das guas das estaes 1, 4,
5 e 6 so semelhantes, posicionando todas as amostragens referentes a essas
estaes no lado positivo do Eixo 1. Na Figura 11, os vetores referentes ao
oxignio dissolvido, % de saturao de O2 e pH encontram-se associados s
amostragens em que foram registrados seus maiores valores.
Os coeficientes de correlao de Pearson e Kendall referentes ao pH e
% de Saturao de O2 mostraram que a distribuio espacial das amostragens,
representada pelo Eixo 1, teve pouca relao na variao de seus resultados.
Por outro lado, tambm mostraram a alta relao desses fatores com a
distribuio temporal das amostragens, posicionando seus vetores prximos ao
Eixo 2.
Com esses resultados, a ACP demonstra que as guas das estaes 2 e
3 se diferenciaram das outras estaes de coleta, devido aos altos valores de
nitrognio total, nitrognio amoniacal total, fsforo total, ortofosfato e clorofila a
registrados nesses locais de amostragem. Com o arraoamento, adio de
fertilizantes e excreo dos peixes cultivados, o manejo do viveiro interferiu
diretamente em tais fatores e, por isso, a localizao das estaes de coleta
(Eixo 1) apresentou maior explicabilidade (36%) na variao dos resultados.
60

A Classe Chlorophyceae foi a mais expressiva, em termos de riqueza
(Figura 12). Dos 147 txons registrados durante todo o perodo estudado, 71
foram desta classe, corroborando com TUCCI et al. (2006). Segundo estes
autores, diversos estudos, em corpos dgua de diferentes condies
climticas, ambientais e graus de trofia, demonstraram que as clorofceas so
amplamente distribudas nas guas continentais brasileiras e quase sempre
so dominantes em nmero de txons.
A Classe Chlorophyceae tambm foi a mais representativa, em todas as
estaes de coleta, em termos de densidade (Figura 15). A elevada
abundncia
de organismos
desta
classe
tambm foi observada por
MATSUZAKI et al. (2004), em um lago de pesque-pague, e por MACEDO e

SIPABA-TAVARES (2006), em viveiro de piscicultura.
As anlises qualitativas e quantitativas demonstraram uma clara
distino das estaes 2 e 3 (viveiro e efluente) em relao s outras estaes
de coleta. As guas do viveiro e do efluente destacaram-se principalmente pela
densidade de organismos, quase dez vezes superior aos valores registrados
nos outros locais de amostragem (Figura 14).
Diversos autores discutem sobre como o manejo de viveiros de
piscicultura contribui para o aumento no aporte de nutrientes na gua e,
consequentemente, na proliferao de microalgas (SIPABA-TAVARES, 1994;
MAINARDES-PINTO e MERCANTE, 2003; MERCANTE et al., 2004; MACEDO
e SIPABA-TAVARES, 2005; PAZ et al., 2005; CASTRO et al., 2006).
Dessa forma, os altos valores de densidade fitoplanctnica de E2 e E3
refletem as mudanas nos aspectos abiticos causadas pela interferncia do
manejo do viveiro (ver captulo 4.1). Uma vez que a gua de abastecimento
(Estao 1) apresentou baixos valores de densidade de organismos, possvel
inferir que foi o aumento nas concentraes de nutrientes (principalmente
61
nitrognio e fsforo), que contribuiu para o desenvolvimento do fitoplncton no

viveiro.
Alm dos altos valores de densidade total de organismos, as estaes 2
e
tambm
apresentaram
maior
representatividade
das
Classes
Cyanobacteria e Xanthophyceae, em relao s outras estaes de coleta.

A Classe Cyanobacteria foi a segunda mais expressiva nas estaes 2 e
3, em termos de densidade de organismos (Figura 15). Isto pode estar
relacionado com as estratgias adaptativas deste grupo. De acordo com
SANTANNA et al. (2006), as cianobactrias possuem adaptaes, que
possibilitam seu intenso desenvolvimento em ambientes eutrficos, entre elas:
habilidade de armazenar fsforo no interior de suas clulas, tornando-se
capazes de realizar diviso celular mesmo quando esse nutriente se torna
limitante; capacidade de fixar nitrognio atmosfrico; habilidade de migrar na
coluna dgua graas presena de aertopos (vesculas de gs) nas clulas,
que lhes permitem se posicionar na zona euftica para aproveitar a luz e os
nutrientes disponveis de forma mais eficiente.
A Classe Xanthophyceae apresentou maior contribuio para a riqueza
(Figura 13) e para a densidade de organismos em E2 e E3 (Figura 15), onde
tambm foram registrados os maiores valores de temperatura e de
concentrao de fsforo (Tabela 4). Esses resultados corroboram com BOVOSCOMPARIN et al. (2005), que verificou a correlao positiva entre a
densidade de xantofceas e a temperatura, e entre sua biomassa e a
disponibilidade de fsforo.
Alm das xantofceas, as altas temperaturas registradas em E2 e E3
tambm podem ter favorecido o aumento da densidade de algas de todos os
grupos. A temperatura interfere na taxa de multiplicao dos organismos,
controlando as reaes enzimticas que ocorrem no interior das clulas (ALAM
et al., 2001). Em todas as amostragens, as estaes 2 e 3 apresentaram as
temperaturas mais altas. Isto pode ter interferido na velocidade dessas reaes
62
enzimticas,
acelerando
metabolismo
celular
e,
consequentemente,
contribuindo para o aumento da densidade fitoplanctnica.

Outro fator que contribui para a distino das estaes 2 e 3, em relao
aos outros locais de amostragem, so as caractersticas de ambiente ltico de
E1, E4, E5 e E6. A gua da Estao 1 tinha origem do Reservatrio do Borba
(ambiente lntico), mas era canalizada, por toda a distncia do reservatrio at
o viveiro. O excedente desse reservatrio desaguava no Ribeiro do Borba
(ambiente ltico), onde as estaes 4, 5 e 6 estavam localizados.
Segundo RODRIGUES et al. (2007), os ambientes lticos fornecem
habitats que esto sujeitos a constantes mudanas e, nestes ambientes, a
manuteno e o desenvolvimento do fitoplncton podem ocorrer, porm
raramente so mantidos por um longo perodo, pois so transportados
continuamente jusante. Os mesmos autores concluem que na medida em
que o ambiente se torna ltico, a abundncia e a riqueza fitoplanctnicas
tendem a diminuir. Isto explica as baixas densidades de organismos das
estaes 1, 4, 5 e 6, em relao a E2 e E3.
Esse mesmo fator, possivelmente, explica a razo de a Classe
Cryptophyceae ter tido maior representatividade, em termos de densidade, nas
estaes 1, 4, 5 e 6 (Figura 15). TUCCI et al. (2006) afirma que organismos
desta classe so considerados como oportunistas e indicam alteraes nas
caractersticas ambientais, na medida em que essas alteraes levam
excluso de outros grupos e as criptofceas ocupam os novos nichos.
Ou seja, a mudana de ambiente lntico para ltico provocou alteraes
na comunidade de algas, com aumento da representatividade de criptofceas
nas estaes 1, 5 e 6, devido sua alta taxa de reproduo e maior
adaptabilidade mistura turbulenta da coluna dgua (SILVA et al., 2001).
A Classe Euglenophyceae tambm apresentou maior representatividade
nas estaes 1, 4, 5 e 6, em relao a E2 e E3 (Figura 15). De acordo com
63
GIANI et al. (1999), a capacidade de locomoo das euglenofceas as tornam

capazes de se aproveitar dos nutrientes das camadas mais profundas e, em
seguida, voltar para a regio euftica. Como esses locais de amostragem
possuem caractersticas de ambiente ltico, a Classe Euglenophyceae pode ter
sido favorecida por sua adaptao locomotora.
Portanto, em termos de densidade fitoplanctnica, as estaes 2 e 3
apresentaram os valores mais altos devido entrada de nutrientes causada
pelo manejo do viveiro. Com isso, as altas concentraes de nitrognio e
fsforo promoveram o desenvolvimento das algas.
Por outro lado, as caractersticas do corpo dgua receptor provocaram a
queda dos valores de densidade de organismos devido mudana de
ambiente lntico (Reservatrio do Borba, no caso de E1 e E5, e viveiro, no
caso de E4 e E6) para ltico (corpo dgua). Essas alteraes na comunidade
levaram diminuio da representatividade, ou mesmo excluso, de alguns
grupos, (como Xanthophyceae e Zygnemaphyceae, de E3 para E4), enquanto
outros, como os flagelados (Cryptophyceae e Euglenophyceae), foram
favorecidos por suas adaptaes. Assim, as estaes 1, 4, 5 e 6 apresentaram
baixos valores de densidade de organismos (Figura 14), com maior
representatividade de criptofceas e euglenofceas (Figura 15).
Deve-se destacar que a origem das guas da Estao 5 (Ribeiro do
Borba) o excedente do reservatrio, montante, do prprio ribeiro. Como
este reservatrio no foi includo no desenho amostral, no foi possvel discutir,
de forma consistente, as causas das variaes na estrutura das comunidades
desses locais de amostragem. Da mesma forma ocorre com a Estao 1 (a
gua de abastecimento que era canalizada deste reservatrio at o viveiro).
As estaes 2 e 3 apresentaram valores de densidade de organismos
semelhantes em todas as amostragens. Os menores valores foram registrados
em dezembro, quando tambm foram registrados os maiores valores de slidos
totais dissolvidos.
64
Em dezembro, tambm foi registrada a maior precipitao acumulada

(Figura 10). Possivelmente, as chuvas tiveram um efeito de diluio no viveiro,
refletindo em baixos valores de densidade fitoplanctnica. Tambm podem ter
favorecido a ressuspenso do sedimento do fundo, contribuindo em maiores
valores de slidos totais dissolvidos, o que diminuiria a penetrao de luz na
zona euftica e, consequentemente, menores valores de densidade de algas.
Os maiores valores de densidade de E2 e E3 foram registrados na
amostragem de maro I. Nesta amostragem, tambm foram verificados os
maiores valores de temperatura da gua, nitrognio amoniacal total, fsforo
total e ortofosfato.
Como j foi citado no captulo 4.1, a maioria das algas assimila
nitrognio preferencialmente na forma de amoniacal, por ser energeticamente
mais vivel (SIPABA-TAVARES, 2001), e o ortofosfato, forma predominante
do fsforo nos viveiros de piscicultura, prontamente assimilvel pelo
fitoplncton (SILVA et al., 2005). Portanto, pode-se inferir que os altos valores
de nitrognio amoniacal total, fsforo total e ortofosfato contriburam
diretamente para o aumento nos valores de densidade verificados em maro I.
Esse aumento foi tambm favorecido pelas altas temperaturas da gua (Anexo
6).
No houve semelhana entre as variaes de densidade da Estao 1
com a Estao 2. As alteraes fsicas e qumicas do viveiro (captulo 4.1),
causadas pelo arraoamento, excreo dos peixes e decomposio de matria
orgnica, refletiram diretamente nos valores de densidade fitoplanctnica do
viveiro ao longo das amostragens. Assim, o manejo do viveiro interferiu nas
caractersticas da gua de tal forma que as variaes da densidade de algas
da Estao 2 se mostrou diferente daquela da Estao 1.
As estaes 4, 5 e 6 apresentaram os menores valores de densidade de
organismos na amostragem de janeiro. Possivelmente, devido ao alto valor de
65
vazo registrado neste ms (Tabela 3). Segundo SOUZA et al. (2000), o

constante fluxo de gua carrega os nutrientes e, consequentemente, a
densidade fitoplanctnica diminui.
Na amostragem de dezembro, a Estao 4 apresentou os maiores
valores de densidade de organismos. Esses resultados no eram esperados,
uma vez que, em dezembro, tanto E3, quanto E5, apresentou baixos valores de
densidade, em relao s outras amostragens.
A Estao 4 (zona de mistura) resultado da mistura da dinmica de
seus contribuintes (E3 e E5), constituindo um local de caractersticas
heterogneas. Por isso, as razes dos altos valores de densidade registrados
na amostragem de dezembro no foram conclusivas.
A Estao 6 apresentou a variao dos valores de densidade de
maneira relacionada tanto a E4 quanto a E5. Nota-se que assim como E4, os
maiores valores foram registrados em dezembro. E, assim como E5, houve
aumento da densidade de organismos de fevereiro para maro I, com queda
logo na amostragem seguinte. Dessa forma, foi demonstrado que a estrutura
do fitoplncton de E6 est sob influncia direta das caractersticas da Estao
4 e da Estao 5.
A classificao dos txons abundantes em grupos funcionais, segundo
REYNOLDS et al. (2002), evidenciou as caractersticas eutrficas das estaes
2 e 3. Tambm mostrou que lanamento direto do efluente no corpo dgua
promoveu o aumento no nmero de txons pertencentes a associaes
frequentes em locais eutrficos.
De todos os grupos funcionais registrados no perodo de estudo, a
associao X1 apresentou os maiores valores de densidade em todos os locais
de amostragem (Anexo 7).
66
Segundo REYNOLDS (1997), os organismos pertencentes associao

X1 so nanoplanctnicos, sendo potencialmente de crescimento rpido e de
alta
produtividade,
dominando
rapidamente
os
ambientes
com
alta
disponibilidade de nutrientes e de luz. O mesmo autor afirma que as espcies

X1 esto associadas com as clorofceas do grupo J, tipicamente, em guas
rasas e eutrficas.
Nas estaes 2 e 3 foram observadas as maiores incidncias de txons
da associaes X1 e J, com altos valores de densidade de Chlorella spp.,
Monoraphidium
(associao
contortum,
X1)
de
Monoraphidium
Crucigenia
minutum
tetrapedia,
Treubaria
Dictyosphaerium
spp.
spp.,
Scenedesmus spp. e Tetraedron minimum (associao J). Esses resultados,

portanto, apontam para as caractersticas eutrficas de E2 e E3, provocadas
pelo aumento na concentrao de nutrientes, consequentes do manejo do
viveiro.
Outro fator, que influi na alta densidade de tais espcies no viveiro,
que a tilpia do Nilo tambm se alimenta do fitoplncton. De acordo com
FIGUEREDO e GIANI (2005), as algas no podem ser selecionadas
visualmente pela tilpia, mas a habilidade de certas espcies de evitar a
ingesto ou a digesto pode levar a mudanas na estrutura do fitoplncton. Ou
seja, a excluso das espcies mais vulnerveis representa uma vantagem para
o desenvolvimento de espcies capazes de escapar da predao.
FIGUEREDO e GIANI (2005), em seu estudo sobre as interaes
ecolgicas entre a tilpila do Nilo e o fitoplncton, verificaram que as
clorofceas de tamanho reduzido escapavam passivamente da predao dos
peixes, tornando-se dominantes. Isto ocorreu por que a tilpia do Nilo no
capaz de se alimentar de espcies menores do que 8 m (TURKER et al.,
2005).
Portanto, pode-se inferir que a alta densidade de clorofceas
nanoplanctnicas nas estaes 2 e 3 ocorreu devido s suas caractersticas de
67
rpido crescimento e alta produtividade. Rapidamente puderam dominar o

ambiente, favorecidas pela alta concentrao de nitrognio e fsforo e por seu
tamanho reduzido, que lhes permitiu evitar a predao dos peixes.
A alta densidade de Aulacoseira granulata e Aphanocapsa delicatissima,
associaes P e K, respectivamente, nas estaes 2 e 3, reforam as
caractersticas eutrficas desses locais de amostragem. Ambas so espcies,
normalmente, encontradas em locais enriquecidos com nutrientes (Tabela 7).
As associaes X1 e J tambm ocorreram em altos valores de
densidade nas estaes 4 e 6. No entanto, em menor escala do que em E2 e
E3, uma vez que apresentaram densidade reduzida de txons de ambas as
associaes. Isto indicaria condies menos eutrficas nas estaes 4 e 6, em
relao a E2 e E3.
As estaes 1 e 5 apresentaram abundncia da associao X1, mas
baixssima de J, o que indicaria condies mais pobres em nutrientes do que
as encontradas em E4 e E6.
Outro fato que indica menor concentrao de nutrientes em E1 e E5 a
presena da associao Z, considerada abundante apenas nesses locais de
amostragem. A associao Z, representada por gneros como Synechococcus
e Synechocystis, tpica de guas mais oligotrficas (REYNOLDS, 1997).
Com isso, ao compararmos E1 (gua de abastecimento) com E3
(efluente), verifica-se que o aporte de nutrientes, promovido pelo manejo do
viveiro, favoreceu o aumento na densidade e no nmero de txons de algas
frequentes em locais eutrficos. Ao compararmos E4, E5 e E6, observa-se que,
aps o encontro do efluente com o corpo dgua, tambm houve incremento na
densidade fitoplanctnica e no nmero de txons de associaes X1 e J.
Os resultados da ACP tambm apontaram para a diferena de E2 e E3,
em relao s outras estaes. Conforme ilustra a Figura 16, a ACP posicionou
68
todas as amostragens relativas ao E2 e E3 no lado esquerdo do Eixo 1,

associadas aos maiores valores de densidade de todos os txons descritores.
A maioria das amostragens relativas s outras estaes foi posicionada do lado
direito desse mesmo Eixo.
De toda a variao desses resultados, 63% ocorreram em funo da
distribuio espacial das amostragens (localizao das estaes de coleta),
representada pelo Eixo 1. A distribuio temporal das amostragens,
representada pelo Eixo 2, explicou em apenas 10% da variao desses
resultados.
Novamente, as altas concentraes de nutrientes favoreceram o
desenvolvimento fitoplanctnico no viveiro, refletindo nos valores de densidade
dos txons descritores, diferenciando as estaes 2 e 3 dos outros locais de
amostragem. Por isso, 63% da variabilidade dos resultados analisados pela
ACP ocorreram em funo da localizao das estaes de coleta (Eixo 1).
69

Conforme ilustra a Figura 17, o Teste de Tukey mostrou que, de maneira
geral, as diferenas significativas, em relao ao grupo controle, concentraramse nas estaes 2 e 3 (viveiro e efluente). Isto ocorreu devido s altas
concentraes de nutrientes nas guas do viveiro, que promoveram maior
crescimento algceo quando Pseudokirchneriella subcapitata foi exposta a
essas amostras.
Nas outras amostragens, houve apenas diferena significativa, em
relao ao controle, nas estaes 4 e 5, na amostragem de dezembro e nas
estaes 4 e 6, na amostragem de maro I.
Destaca-se, novamente, que a Estao 4 (zona de mistura) um local
de caractersticas heterogneas, pois recebe influncia das guas de E3 e de
E5 (Figura 1). Em dezembro, como foram registradas diferenas significativas
apenas nas estaes 4 e 5, pode-se inferir, que os fatores que contriburam
para o crescimento algceo nos ensaios da Estao 5 tambm contriburam
para os resultados obtidos na Estao 4. No entanto, a origem das guas da
Estao 5 (Ribeiro do Borba) o excedente do reservatrio montante do
prprio Ribeiro. Como este reservatrio no foi includo no desenho amostral,
no foi possvel discutir, de forma consistente, as razes do crescimento
algceo obtido nos ensaios com amostras da Estao 5. Da mesma forma
ocorre com a Estao 1 (a gua de abastecimento que era canalizada deste
reservatrio at o viveiro).
Na amostragem de maro I, foram verificadas diferenas significativas,
em relao ao controle, apenas nas estaes 3, 4 e 6. Nesta amostragem, no
foi verificada diferena significativa, em relao ao controle, na Estao 5, o
que indica que os fatores que contriburam para o crescimento algceo
registrado no ensaio da Estao 3, tambm contriburam para os resultados
obtidos na Estao 4 e na Estao 6. Ou seja, nesta amostragem, o potencial
70
do efluente em estimular o crescimento algceo continuou presente na gua,

mesmo aps seu encontro com o corpo receptor.
O Teste de Tukey tambm demonstrou que, ao longo dos meses
estudados, houve maior crescimento algceo nos ensaios realizados com
amostras coletadas na segunda metade do perodo de estudo. Isto ocorreu,
possivelmente, devido ao acmulo contnuo de nutrientes na gua do viveiro.
Com Pseudokirchneriella subcapitata sendo exposta a amostras mais
enriquecidas, seu crescimento se mostrou mais intenso, resultando em maiores
valores de densidade algcea ao final dos ensaios.
Conforme ilustra a Figura 18, o crescimento algceo dos ensaios com
amostras
do
viveiro
do
efluente
acompanhou,
principalmente,
as
concentraes de nitrognio total, aumentando continuamente at fevereiro e

sofrendo queda na amostragem seguinte. Esta variao tambm acompanhou
a quantidade de rao fornecida (Tabela 2), que tambm aumentou
continuamente at fevereiro, sofrendo uma pequena queda na amostragem
seguinte.
Como j foi citado no captulo 4.1, em piscicultura intensiva, a principal
fonte de compostos nitrogenados incorporados gua a alimentao
(PEREIRA e MERCANTE, 2004).
Portanto, esses resultados sugerem que o crescimento algceo,
observado nos ensaios das estaes 2 e 3, foi condicionado pelas
concentraes de nitrognio total, determinadas pela quantidade de rao
fornecida.
Os resultados dos ensaios com diluio de efluente mostraram, pelo
Teste de Tukey, diferena significativa, em relao ao grupo controle, apenas
nas concentraes de 25%, 50% e 100%, em diferentes amostragens (Figura
19). Obteve-se CEO (Concentrao de efeito observado) de 25% e CENO
(Concentrao de efeito no observado) de 12,5% no ms de novembro, CEO
71
50% e CENO 25% em janeiro e maro I, CEO 100% e CENO 50% em fevereiro
e maro II.
Assim, para uma margem de segurana maior, considerou-se CEO de
25% e CENO de 12,5%. Ou seja, no sistema estudado, infere-se que a pluma,
de efeito estimulante da produo primria do efluente, pode-se estender at
onde esse efluente encontrar-se naturalmente diludo em 12,5% de sua
concentrao inicial.
Na
maioria
dos
trabalhos
realizados
com
Pseudokirchneriella
subcapitata, os autores observaram inibio de crescimento em seus

resultados
(RODRIGUES
et
al.,
2003;
GUGUEN
et
al.,
2004;
DELLAMATRICE e MONTEIRO, 2006; IVANOVA e GROUDEVA, 2006; MA et

al., 2006). No entanto, os resultados observados no presente estudo foram de
estimulao de crescimento, e no de inibio. Isto ocorreu, possivelmente,
devido s caractersticas mesotrficas e eutrficas das amostras analisadas
(Tabela 5).
O arraoamento, a excreo dos peixes e a decomposio de matria
orgnica promoveram o aumento da concentrao de nutrientes na gua.
Assim, quando Pseudokirchneriella subcapitata foi exposta s amostras do
viveiro e do efluente, houve estmulo de crescimento de algas, e no inibio.
O crescimento observado nos ensaios com amostras das estaes 4 e 6
tambm pode ter sido promovido pelos nutrientes ainda presentes na zona de
mistura e jusante dela, uma vez que o efluente do viveiro era descartado sem
tratamento.
As estaes 1 e 5 no estiveram sob influncia das guas do viveiro,
devido ao sentido do fluxo da gua do sistema (Figura 1). No entanto, conforme
o ndice de Estado Trfico calculado (Tabela 5), as guas de E1 e E5 so
mesotrficas e eutrficas, respectivamente. Isto significa que as amostras
72
provenientes desses locais de amostragem possuam caractersticas nos

aspectos fsicos e qumicos capazes de estimular o crescimento algceo.
Portanto, a inibio do crescimento algceo no foi observada nos
ensaios por causa das caractersticas mesotrficas (E1 e E4) e eutrficas (E2,
E3, E5 e E6) das guas do sistema estudado (Tabela 5). Essas caractersticas
promoveram o crescimento algceo, quando Pseudokirchneriella subcapitata
foi exposta s amostras coletadas.
No entanto, de acordo com MAXIMINIANO et al. (2005), alm de altos
teores de matria orgnica, os efluentes de piscicultura podem conter
substncias qumicas, prejudiciais sade humana e ao meio ambiente, que
so utilizadas para controle de patgenos e parasitas. Por isso, deve-se
considerar tambm a possibilidade do crescimento algceo obtido nos ensaios
ter mascarado a presena de substncias de efeito txico. Ou seja, a alta
concentrao de nutrientes do viveiro pode ter sido alta o suficiente para ter
estimulado o crescimento das algas a tal ponto que o efeito de inibio no
pde ser detectado apenas com os resultados dos testes ecotoxicolgicos
realizados com este tipo de organismo.
MARQUES et al. (2008) realizaram ensaios com Chlorella vulgaris e
Pseudokirchneriella subcapitata em guas superficiais de plantao de arroz.
Alm de conclurem que Pseudokirchneriella subcapitata foi mais sensvel do
que Chlorella vulgaris, tambm obtiveram, em algumas de suas amostragens,
estmulo de crescimento algceo, ao invs de inibio. Os autores atriburam
este crescimento s maiores quantidades de fosfatos e nitratos, presentes nos
fertilizantes das plantaes. Da mesma forma, no presente estudo, os
nutrientes presentes nas amostras estimularam o crescimento de algas nos
ensaios, sobrepondo possveis efeitos de inibio.
Ao mesmo tempo, os ensaios ecotoxicolgicos com as amostras brutas
foram vlidos para demonstrar que o manejo do viveiro contribui diretamente
para o crescimento de algas, refletindo em maiores valores, com diferena
73
significativa, em relao ao controle, nos ensaios das Estaes 2 e 3. Os

ensaios tambm demonstraram que os efeitos do enriquecimento da gua do
viveiro ainda puderam ser detectados no corpo receptor, como foi observado
na amostragem de maro I.
YAMAGUISHI
(2007)
realizou
ensaios
ecotoxicolgicos
com
Ceriodaphnia dubia com as mesmas amostras deste estudo. Em seus ensaios

com amostras brutas, obteve toxicidade aguda e crnica para todas as
estaes de coleta. Isso indica que os ensaios com Pseudokirchneriella
subcapitata foram mais eficazes para indicar o incremento de nutrientes como
o fator de maior modificao ao longo do fluxo de gua no sistema, uma vez
que os resultados dos ensaios com Ceriodaphnia dubia foram semelhantes
para todas as estaes.
J os ensaios ecotoxicolgicos com diluio de efluente se mostraram
importantes para verificar at que ponto o efluente deveria estar naturalmente
diludo no corpo receptor, para que os efeitos de estmulo de crescimento
sejam neutralizados. No caso deste estudo, os efeitos de estmulo de
crescimento algceo, provocados pelos nutrientes do viveiro, no seriam
detectados, no corpo receptor, a partir da estao em que o efluente se
encontra naturalmente diludo em, pelo menos, 12,5% de sua concentrao
inicial. Esse conhecimento pode servir como uma importante ferramenta para
mapear a extenso dos efeitos de eutrofizao dos corpos receptores, que
constitui um dos maiores impactos ambientais causados pelo lanamento de
efluentes de piscicultura.
74
4.4 Sntese da discusso

O arraoamento, a excreo dos peixes e a quantidade de matria
orgnica depositada no fundo do tanque promoveram o aumento da
concentrao de fsforo total, nitrognio total, nitrognio amoniacal
total, ortofosfato e clorofila a nas Estaes 2 e 3.
Tais alteraes nos aspectos abiticos refletiram na composio e na
estrutura do fitoplncton, com aumento nos valores de densidade e
no nmero de txons nas Estaes 2 e 3. Nesses locais de
amostragem, tambm foi verificada alta abundncia de espcies de
associaes X1 e J, frequentes em locais eutrficos.
As caractersticas de ambiente ltico das Estaes 1, 4, 5 e 6
influram diretamente nas caractersticas do fitoplncton, com baixos
valores de densidade e em maior representatividade de organismos
oportunistas.
No corpo receptor, houve incremento nos valores de densidade
fitoplanctnica e no nmero de espcies frequentes em locais
eutrficos, aps seu encontro com o efluente.
A Anlise de Componentes Principais (ACP) dos fatores abiticos e
Clorofila a e a ACP dos txons descritores demonstraram que a
localizao das estaes de coleta teve maior influncia na
variabilidade dos resultados. As maiores concentraes de fsforo
total, ortofosfato, nitrognio total, nitrognio amoniacal total, clorofila
a e os maiores valores de densidade dos txons descritores
estiveram associados s amostragens das Estaes 2 e 3. A entrada
de nutrientes, que ocorre em funo do manejo do viveiro, eleva a
concentrao de tais fatores abiticos e, consequentemente,
favorece o desenvolvimento do fitoplncton, diferenciando as
caractersticas dessas estaes dos outros locais de amostragem.
75
Os ensaios ecotoxicolgicos realizados com Pseudokirchneriella

subcapitata confirmaram o potencial das guas das Estaes 2 e 3
em estimular o crescimento algceo.
Os
ensaios
ecotoxicolgicos
com
amostras
brutas
tambm
demonstraram que o potencial do efluente em estimular o

crescimento algceo ainda pde ser detectado no corpo receptor,
como foi observado na amostragem de maro I.
Os ensaios ecotoxicolgicos com diluio do efluente mostraram que,
neste estudo, o potencial do efluente em provocar estmulo de
crescimento algceo se estende at o momento em que o mesmo
encontrar-se naturalmente diludo em, pelo menos, 12,5% de sua
concentrao inicial.
76
5. CONCLUSES
A realizao deste trabalho permitiu concluir que o manejo do viveiro
provocou alteraes nas caractersticas fsicas e qumicas da gua,
principalmente nas concentraes de nitrognio e fsforo.
Tais alteraes refletiram diretamente na estrutura do fitoplncton, que
variou conforme as caractersticas ambientais de cada local de amostragem.
Por isso, a anlise qualitativa e quantitativa da comunidade de microalgas
constituiu uma ferramenta til na caracterizao ambiental do sistema
estudado.
Neste estudo, tambm verificou-se que o efluente provocou o
incremento na abundncia e na riqueza fitoplanctnica jusante do local onde
o mesmo lanado no o corpo receptor.
Os ensaios ecotoxicolgicos com Pseudokirchneriella subcapitata
demonstraram ser uma ferramenta vivel na determinao do potencial do
efluente de piscicultura em estimular o crescimento algceo nos corpos
receptores e, assim, estimar a extenso dos riscos de eutrofizao do meio.
77
6. REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS
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84
7. ANEXOS
Anexo 1. Composio da rao fornecida durante o ciclo de cultivo
(Informaes de rtulo).
Nutrientes
mg.kg-1
de rao
Contedo
cido flico
0,8
cido pantotnico
15,0
Farelo de soja;
Biotina
0,4
Farelo de trigo;
Cobalto
0,1
Farinha de carne e ossos;
Cobre
3,0
Farinha de peixe;
Colina
400,0
Farinha de vsceras;
Ferro
40,0
Milho modo;
Inositol
50,0
leo de soja degomado ou purificado;
Iodo
1,0
Soja integral extrusada;
Mangans
5,0
Sorgo integral modo.
Niacina
15,0
Selnio
0,2
Nveis de garantia
3.000 Ul.kg-1
do produto
Vitamina A
Vitamina B 1
5,0
Vitamina B 12
10.000 mcg
Vitamina B 2
8,0
Extrato Etreo (Min) = 5,0000%
Vitamina B 6
6,0
Fsforo (Min) = 0,8000%
Vitamina C
Vitamina D 3
Clcio (Mx) = 3,0000%
1.2000,0
1.500 Ul.kg
Matria Fibrosa (Mx) = 6,0000%

-1
Matria Mineral (Mx) = 12,0000%
Vitamina E
60,0
Protena Bruta (Min) = 28,0000%
Vitamina K
2,0
Umidade (Mx) = 12,0000%
Zinco
60,0
85
Anexo 2. Solues para preparo do meio de cultura L. C. Oligo (ABNT,

2005).
Soluo
Reagente
Quantidade
(mg)
Nitrato de clcio
tetrahidratado
Ca(NO3)2.4H2O
4.000
Dissolver e completar para 100

mL com gua processada
10.000

3.000

4.000

Nitrato de potssio
KNO3
Sulfato de magnsio
heptahidratado
MgSO4.7H2O
Fosfato de potssio
dibsico
K2HPO4
Sulfato de cobre
pentahidratado
CuSO4.5H2O
Molibdato de amnia
tetraidratado
(NH4)6Mo7O24.4H2O
Sulfato de zinco
heptahidratado
ZnSO4.7H2O
Cloreto de cobalto
hexahidratado
CoCl2.6H2O
Nitrato de magnsio
tetraidratado
Mn(NO3) 2.4H2O
cido ctrico
C6H8O2.H2O
cido brico
H3BO3
Citrato de ferro
pentaidratado
C6H5FeO7.5H2O
Cloreto frrico
hexaidratado
FeCl3.6H2O
Sulfato de ferro
heptaidratado
FeSO4.7H2O
Bicarbonato
de sdio
NaHCO3
30
Preparo
Dissolver e completar para 1.000

60
60
60

60
60
60
1.625
625

625
15.000
86

Anexo 3: Fases de crescimento de cultura de algas.

De acordo com SIPABA-TAVARES e ROCHA (2001), o cultivo de
algas composto por distintas fases de crescimento:
a) Fase de induo ou lag: a maioria das clulas vivel, mas no est
em condies de se dividir imediatamente.
b) Fase exponencial ou log: as clulas comeam a se dividir a uma taxa
constante. A taxa de crescimento mxima nessa fase e varia
conforme a espcie algal.
c) Fase de reduo do crescimento: ocorre diminuio da taxa de
crescimento.
d) Fase estacionria: a populao no aumenta, pois a taxa de
crescimento compensada pela taxa de mortalidade.
e) Fase de senescncia ou de declnio: a taxa de mortalidade maior
que a taxa de reproduo e formao de clulas novas.
As diferentes fases de crescimento durante a evoluo do cultivo de
algas podem ser observadas na Figura 20.
Figura 20. Fases da curva de crescimento de algas em sistema de cultivo

esttico (SIPABA-TAVARES e ROCHA, 2001).
87
Anexo 4: Contagem em Cmara de Neubauer (SIPABA-TAVARES e

ROCHA, 2001).
A Cmara de Neubauer (Figura 21) consiste em uma grossa lmina de
vidro retangular, com um lado em forma de H, formando duas depresses
laterais com uma profundidade de 0,1 mm. A rea total de cada retculo da
Cmara de 9 mm2. Os quatro cantos do quadrado (1 mm x 1 mm) so
subdivididos em 61 quadrados e o centro do quadrado (1 mm x 1 mm)
subdividido em 25 quadrados menores, cada um contendo uma rea de 0,04
mm2 (0,2 mm x 0,2 mm) (Figura 22).
Figura 21. Imagem fotogrfica da Cmara de Neubauer.
Figura 22. Esquema da rea de contagem dos retculos da Cmara de

Neubauer (rea total: 9 mm2) (SIPABA-TAVARES e ROCHA, 2001).
88
Preenchimento da cmara:
Limpar a cmara e colocar a lamnula, deve estar livre de sujeira, fibra de
algodo ou gordura. Colocar a lamnula na rea central marcada, observar
contra luz e apertar at que se visualize os anis de Newton (como pequenos
arco-ris na borda da lamnula).
Usando uma pipeta de Pasteur limpa, colocar uma gota de amostra bem
homogeneizada na parte em V da ranhura da superfcie central da lmina.
Encher ambas as cmaras. Verificar se ocorre igualdade na distribuio das
clulas no microscpio. Se ocorrerem bolhas e m distribuio, repetir o
procedimento anterior. Deixar as clulas se sedimentarem por 3 a 5 minutos,
antes de realizar a contagem.
Contagem:
Para clulas pequenas e populaes densas, as contagem so feitas
apenas nas reas A, B, C, D e E (Figura 22), do centro do bloco. As contagens
devem ser feitas nos dois retculos da cmara.
Clculo:
Quando as clulas so contadas somente nos cinco quadrados do centro
do bloco, a seguinte frmula deve ser utilizada:
cels.mL-1 = nmero de clulas contadas nos dois retculos
10 x 4 x 10-6
Onde: 10 = dez quadrados contados nos dois retculos (5 em cada)
4 x 10-6 = volume que equivale rea dos pequenos quadrados.
89
Anexo 5: Informaes sobre o clima registradas no momento de cada

coleta.
Condies do
Temperatura do ar
tempo no
momento da
E1
E2
23,5
24
E3
E4
E5
E6
Mdia
amostragem
nov/06
dez/06
jan/07
fev/07
mar I/07
mar II/07
Ausncia de sol,
chuva e vento,
Nublado. Chuva
fraca no dia e no
dia anterior.
Sol, ausncia de
chuva, poucas
nuvens e vento
fraco. Sem chuva
no dia anterior.
Ausncia de sol,
ventos fortes com
chuva fraca.
Nublado, chuva
forte no dia
anterior.
Sol, ausncia de
chuva e de
ventos, poucas
nuvens. Chuva
forte no dia
anterior
Sol, ausncia de
chuva, de nuvens
e de ventos. Sem
chuva no dia
anterior.
Sol, ausncia de
chuva, de nuvens
e de ventos. Sem
chuva no dia
anterior.
Desvio
Padro
24,0 22,0 22,0 22,0
22,9
1,02
30,5 30,5 30,5 28,0 28,0 28,0
29,2
1,37
25,0 25,0 22,5 22,5 22,5
23,6
1,24
26,5 26,5 26,5 21,0 21,0 21,0
23,7
3,01
31,7 31,7 31,7 29,7 29,7 29,7
30,7
1,10
30,0 30,0 30,0 26,0 26,0 26,0
28,0
2,19
24
90
Anexo 6: Fatores abiticos medidos em cada estao de coleta ao longo

do perodo de estudo.
Fator
gua (C)
(mgCaCO3.L-1)
(mg.L-1)
Dureza
Alcalinidade
pH
Temperatura da
abitico
Coleta
Estaes de coleta
E1
E2
E3
E4
E5
E6
nov/06
22,0
23,8
23,5
21,1
20,7
21,3
dez/06
29,8
31,3
30,3
28,1
26,8
27,6
jan/07
25,4
27,0
26,8
25,0
24,8
24,8
fev/07
26,1
27,1
26,5
24,7
24,8
24,6
mar I/07
29,9
30,5
29,9
26,5
25,9
27,2
mar II/07
28,3
29,8
29,0
26,2
24,7
25,7
nov/06
6,56
6,70
6,75
6,81
6,84
6,68
dez/06
5,41
5,43
5,59
5,43
5,47
5,04
jan/07
6,62
6,57
6,49
6,18
6,21
6,01
fev/07
6,72
6,68
6,74
6,81
6,71
6,64
mar I/07
5,78
5,91
5,67
5,78
5,85
5,08
mar II/07
6,32
5,88
6,11
6,07
5,89
5,97
nov/06
27,26
27,26
27,26
27,26
20,45
27,26
dez/06
26,79
28,85
24,73
22,67
32,98
22,67
jan/07
20,61
24,73
24,73
20,61
20,61
18,54
fev/07
22,56
36,61
24,61
20,51
22,56
28,71
mar I/07
18,46
22,56
22,56
20,51
22,56
20,51
mar II/07
18,46
24,61
24,61
22,56
24,61
20,51
nov/06
19,80
19,80
19,80
19,80
19,80
19,80
dez/06
17,82
18,82
18,90
18,90
17,82
17,82
jan/07
17,82
19,80
19,80
17,82
17,82
15,84
fev/07
17,82
17,82
19,80
17,82
15,84
25,74
mar I/07
13,86
19,80
19,80
17,82
15,84
17,82
mar II/07
15,84
19,80
15,84
19,80
15,84
17,82
91
Fator
eltrica (S.cm-1)
dissolvidos (mg.L-1)
(UNT)
(mg.L-1)
(mg.L-1)
Oxignio dissolvido
Matria orgnica
Turbidez
Slidos totais
Condutividade
abitico
Coleta
E1
E2
E3
E4
E5
E6
nov/06
71
74
73
72
72
75
dez/06
70
83
84
79
77
100
jan/07
55
62
63
57
55
58
fev/07
58
70
69
59
56
99
mar I/07
80
83
83
81
78
83
mar II/07
63
65
78
62
60
70
nov/06
46
48
48
47
47
49
dez/06
50
50
50
50
50
60
jan/07
36
40
41
37
36
38
fev/07
40
40
40
40
40
60
mar I/07
40
50
50
50
50
50
mar II/07
41
42
51
40
39
46
nov/06
6,60
40,60
29,00
11,50
10,80
8,80
dez/06
jan/07
6,70
30,90
32,30
133,00
178,00
153,00
fev/07
22,70
30,20
22,50
27,70
30,50
25,40
mar I/07
mar II/07
10,00
44,40
51,20
8,10
5,80
7,70
nov/06
6,00
19,67
13,33
5,67
7,33
3,00
dez/06
55,00
69,00
81,00
52,00
41,00
42,00
jan/07
3,33
13,33
11,00
89,50
116,00
152,50
fev/07
4,40
6,40
7,00
10,33
1,00
3,33
mar I/07
4,33
4,97
3,00
3,33
5,33
2,00
mar II/07
0,33
25,33
7,00
3,33
4,67
1,33
nov/06
5,20
5,09
5,20
7,47
7,48
8,64
dez/06
5,70
6,00
6,00
6,80
7,10
7,00
jan/07
7,47
6,48
4,26
7,58
7,62
7,28
fev/07
6,51
4,73
4,68
7,07
7,38
6,98
mar I/07
6,50
6,70
6,10
7,40
7,90
7,20
mar II/07
5,73
8,15
5,53
6,76
8,08
7,20
92
Fator
de O2
(mg.L-1)
(g.L-1)
(mg.L )
(mg.L-1)
-1
amoniacal total
Nitrognio
Nitrognio total
Ortofosfato
Fsforo total
% de saturao
abitico
Coleta
E1
E2
E3
E4
E5
E6
nov/06
80,92
81,92
83,20
114,02
113,54
132,62
dez/06
102,13
109,24
108,80
117,96
120,55
120,51
jan/07
123,74
110,30
72,33
124,65
124,86
119,29
fev/07
109,17
80,71
78,97
115,57
180,93
113,47
mar I/07
116,47
121,17
109,30
124,86
131,99
123,02
mar II/07
99,78
145,65
97,42
113,50
132,08
120,08
nov/06
0,043
0,134
0,118
0,050
0,028
0,036
dez/06
0,038
0,234
0,251
0,119
0,031
0,064
jan/07
0,042
0,219
0,205
0,068
0,154
0,105
fev/07
0,022
0,270
0,236
0,337
0,027
0,049
mar I/07
0,029
0,327
0,283
0,088
0,054
0,074
mar II/07
0,079
0,330
0,379
0,095
0,026
0,059
nov/06
7,85
12,74
10,30
20,40
15,19
13,36
dez/06
6,32
6,93
6,62
21,01
6,62
17,64
jan/07
5,40
6,68
8,46
17,03
12,44
13,66
fev/07
4,78
49,17
29,27
5,40
4,17
13,66
mar I/07
3,56
61,41
39,07
20,40
9,07
17,33
mar II/07
7,32
27,38
20,40
28,97
6,93
6,01
nov/06
0,059
0,093
0,084
0,066
0,044
0,042
dez/06
0,037
0,466
0,485
0,159
0,054
0,172
jan/07
0,314
1,755
1,471
0,376
0,444
0,395
fev/07
0,296
2,539
3,426
0,434
0,312
0,626
mar I/07
0,221
1,133
1,396
0,471
0,397
0,381
mar II/07
0,252
0,604
0,816
0,446
0,327
0,422
nov/06
0,55
0,56
0,49
0,76
0,70
0,57
dez/06
0,47
0,52
0,45
0,60
0,65
0,58
jan/07
0,45
0,45
0,59
0,54
0,50
0,51
fev/07
0,48
1,21
1,51
0,49
0,46
0,58
mar I/07
0,64
1,87
1,70
0,39
0,57
0,76
mar II/07
0,53
0,40
0,39
0,84
0,62
0,67
93
Fator
(g.L-1)
(g.L-1)
(g.L-1)
Clorofila a
Nitrato
Nitrito
abitico
Coleta
E1
E2
E3
E4
E5
E6
nov/06
4,15
4,99
4,71
4,99
3,58
6,12
dez/06
8,39
4,71
3,30
5,28
5,84
6,97
jan/07
2,73
2,73
2,73
5,28
3,30
8,39
fev/07
4,43
5,84
4,15
4,71
4,43
7,25
mar I/07
4,15
4,15
31,28
10,93
94,03
32,13
mar II/07
5,84
225,19
229,15
28,74
38,63
22,24
nov/06
0,029
0,217
0,067
0,054
0,059
0,059
dez/06
0,023
0,046
0,027
0,059
0,067
0,073
jan/07
0,013
0,014
0,013
0,039
0,044
0,023
fev/07
0,006
0,035
0,026
0,028
0,018
0,034
mar I/07
0,016
0,007
0,009
0,236
0,055
0,093
mar II/07
0,009
0,011
0,017
0,125
0,086
0,115
nov/06
0,9
20,9
20,9
0,9
2,7
0,9
dez/06
1,8
38,2
24,6
1,8
0,9
0,9
jan/07
1,8
72,8
72,8
9,1
3,6
6,4
fev/07
9,1
90,0
61,0
9,1
7,3
7,3
mar I/07
2,7
92,8
51,0
4,6
0,9
1,8
mar II/07
0,9
81,9
137,1
1,8
0,9
94
Anexo 7: Densidade total (org.mL-1) e Grupo funcional (REYNOLDS et al.,

2002) dos txons considerados abundantes em cada estao de coleta.
Grupo
Txons
Bacillariophyceae
E1
E2
Achnantnidium spp.
P
E3
E4
E5
E6
10.328,6
Aulacoseira granulata
17.912,6
7.053,9
Aulacoseira spp.
279,5
908,7
Cyclotella spp.
523,8
Cymbella spp.
361,1
Navicula spp.
Nitzschia spp.
12.204,2
10.210,1
1.60,6
229,8
389,5
836,4
190,5
340,9
198,2
1.895,1
244,7
4.121,0
2.213,5
3.597,7
31.231,0
39.373,6
3.428,9
223,1
Chlorophyceae
Asteracys sp.
X2
Chlamydomonas spp.
X1
Chlorella spp.
4.803,7
589,7
138,6
3.273,4
2.649,3
3.093,6
Coelastrum spp.
170,9
Crucigenia quadrata
474,6
258,1
Crucigenia tetrapedia
1.846,5
1.175,2
Crucigeniella crucifera
Crucigeniella sp.
120,9
26.117,4
34.640,6
1.588,5
350,1
Dichotomococcus curvatus
3.431,8
4.752,0
Dictyosphaerium spp.
2.583,8
1.962,7
387,3
638,5
4.101,2
348,9
174,6
34.894,0
42.950,1
336,9
17.374,6
17.202,6
1.104,4
Didymocystis fina
Eutetramorus spp.
X1
Monoraphidium contorntum
X1
M. griffithii
3.124,0
4.723,7
X1
M. minutum
2.020,2
2.851,1
15.909,9
14.589,5
1.510,5
13.105,8
7.436,7
326,1
6.798,1
4.414,9
281,9
1.572,3
191,4
174,6
533,2
207,3
Oocystis spp.
Sc. arcuatus f. gracilis
Scenedesmus spp.
118,9
2.044,6
186,0
Schroederia spiralis
J
Tetraedron komarekii
T. minimum
2.959,9
2.285,2
T. trigonum
5.908,4
3.696,4
Tetrallantos langerheimii
1.039,1
Treubaria spp.
2.096,4
2.273,8
Westella botryoides
4.138,0
5.433,3
95
125,1
447,2
244,8
224,7
945,2
2.210,0
119,3
122,4
74,5
118,2
743,3
Cyanobacteria
K
Aphanocapsa delicatissima
Lo
Merismopedia spp.
S1
Pseudoanabaena spp.
1.006,3
Romeria gracilis
5.602,9
165,4
Synechococcus spp.
303,6
Synechocystis spp.
198,0
31.205,5
32.955,0
996,0
469,9
15.527,5
19.274,5
197,3
108,8
6.010,1
756,8
216,9
74,5
Cryptophyceae
Y
Cryptomonas spp.
1.758,5
28.657,1
11.937,6
1.441,1
1.068,1
2.660,9
2.863,1
516,1
155,9
272,7
Euglenophyceae
W1
Euglena acus
W1
Euglena spp.
W1
Lepocinclis spp.
476,4
W2
Trachelomonas volvocina
196,7
W2
Trachelomonas spp.
281,6
176,0
2.741,2
5.196,1
242,5
1.355,7
Zygnemaphyceae
N
Cosmarium majae
1.616,1
1.896,5
14.876,0
5.737,2
Xanthophyceae
Goniochloris mutica
Xantofcea no identificada 1
5.418,5
96
386,7
259,2
Anexo 8: Validao dos ensaios com Pseudokirchneriella subcapitata.
Densidade inicial de
todos os recipiente-teste
volume algceo do inculo/volume da soluo-teste

1 x 105 cels/50 mL = 2000 cels.mL-1
Repetio
nov/06
dez/06
jan/07
fev/07
mar I/07
mar II/07
no incio de cada ensaio
72,5
82,5
75
80
75
62,5
80
70
72,5
71,5
77,5
67,5
67,5
87,5
67,5
67,5
57,5
70
73,3
80
74
73,3
70
66,7
Desvio Padro
6,29
9,01
6,56
6,29
10,90
3,82
Coeficiente de variao (%)
8,6
11,3
8,9
8,6
15,6
5,7
Densidade algcea das

repeties do controle
ao final dos ensaios
(cels.mL-1 x 104)
Mdia
(cels.mL-1 x 104)
Densidade final for, no mnimo, 16 vezes >

densidade inicial
O ensaio valido quando
16 x densidade inicial = 16 x 2000 = 32000 =

3,2 x 104 cels.mL-1
Coeficiente de variao das repeties do
controle for menor que 20%
97
Anexo 9: Densidade algcea (cels.mL-1 x 104) registrada em cada

repetio ao final dos ensaios ecotoxicolgicos com Pseudokirchneriella
subcapitata.
Organismo-teste: Pseudokirchneriella subcapitata

Substncia-teste: Amostra de gua superficial de atividade de piscicultura
Controle
E4
E5
E6
Nov/06
72,5
A
80
B
67,5
C
Mdia 73,3
22,5
42,5
45
36,7
60
70
55
61,7
62,5
32,5
30
41,7
27,5
30
37,5
31,7
37,5
35
42,5
38,3
55
70
57,5
60,8
100
105
117,5
107,5
137,5
127,5
97,5
120,8
90
85
72,5
82,5
55
57,5
62,5
58,3
77,5
62,5
70
70
Dez/06
A
B
C
Mdia
87,5
92,5
75,0
85,0
50
52,5
60,0
54,2
72,5
67,5
65,0
68,3
95,0
145,0
102,5
114,2
90,0
97,5
87,5
91,7
75,0
85,0
77,5
79,2
80,0
60,0
75,0
71,5
75,0
67,5
62,5
68,3
42,5
52,5
77,5
57,5
95,0
72,5
80,0
82,5
62,5
82,5
87,5
77,5
70,0
52,5
75,0
65,8
Jan/07
Rplicas
E2
A
B
C
Mdia
75,0
67,0
80,0
74,0
42,5
47,5
55,0
48,3
110,0
115,0
102,5
109,2
45,0
52,5
60,0
52,5
50,0
70,0
67,5
62,5
45,0
40,0
65,0
50,0
122,5
92,5
100,0
105,0
97,5
95,0
92,5
95,0
60,0
67,5
57,5
61,7
45,0
60,0
47,5
50,8
60,0
55,0
52,5
55,8
55,0
70,0
62,5
62,5
A
B
C
Mdia
82,5
70,0
87,5
80,0
102,5
105,0
112,5
106,7
192,5
142,5
190,0
175,0
127,5
97,5
117,5
114,2
110,0
105,0
142,5
119,2
107,5
140,0
97,5
115,0
117,5
177,5
185,0
160,0
97,5
105,0
112,5
105,0
100,0
92,5
107,5
100,0
72,5
55,0
70,0
65,8
92,5
95,0
62,5
83,3
60,0
75,0
65,0
66,7
A
B
C
Mdia
75,0
77,5
57,5
70,0
87,5
60,0
75,0
107,5
100,0
140,0
150,0
127,5
110,0
102,5
112,5
150,0
140,0
102,5
152,5
157,5
132,5
102,5
145,0
122,5
75,0
62,5
55,0
90,0
77,5
60,0
77,5
47,5
65,0
47,5
30,0
55,0
70,0
72,5
94,2
139,2
108,3
130,8
147,5
123,3
64,2
75,8
63,3
44,2
A
B
C
62,5
67,5
70,0
252,5
240,0
162,5
107,5
302,5
247,5
237,5
157,5
182,5
135,0
170,0
175,0
180,0
217,5
242,5
100,0
135,0
305,0
82,5
122,5
70,0
57,5
50,0
105,0
57,5
85,0
57,5
110,0
130,0
100,0
120,0
77,5
107,5
Mdia 66,7 218,3 219,2 192,5 160,0 213,3
180,0
91,7
70,8
66,7
113,3
101,7
Mar II/07
E1
Fev/07
Estaes de coleta
Mar I/07
Amostragem
Durao do teste: 72 horas em incubadora
E3
98
100% 50%
25%
12,5% 6,2% 3,1%
99

Algas e Qualidade Agua

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GOVERNO DO ESTADO DE SO PAULO

SECRETARIA DA AGRICULTURA E ABASTECIMENTO

AVALIAO AMBIENTAL DE UM SISTEMA DE PISCICULTURA,

Dissertao apresentada ao Programa de

GOVERNO DO ESTADO DE SO PAULO

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2.4. Variveis abiticas e Clorofila a

2.5. Caracterizao do fitoplncton

2.6. Ensaios ecotoxicolgicos com Pseudokirchneriella subcapitata

3.2. Variveis abiticas e Clorofila a

3.3. Caracterizao do fitoplncton

3.4. Ensaios ecotoxicolgicos com Pseudokirchneriella subcapitata

4.2. Caracterizao do fitoplncton

4.3. Ensaios ecotoxicolgicos com Pseudokirchneriella subcapitata

4.4. Sntese da discusso

Associao Brasileira de Normas Tcnicas

Anlise de Componentes Principais

American Public Health Association

Agncia Paulista de Tecnologia dos Agronegcios

Concentrao de Efeito Observado

Concentrao de Efeito No Observado

Conselho Nacional do Meio Ambiente

Food and Agriculture Organization of the United Nations

Fundao de Amparo Pesquisa do Estado de So Paulo

ndice de Estado Trfico

Instituto Nacional de Meteorologia

Lowest Observed Effect Concentration

No Observed Effect Concentration

Secretaria de Agricultura e Abastecimento de So Paulo

Slidos Totais Dissolvidos

Unidades Nefelomtricas de Turbidez

Volume da amostra para o preparo das solues-teste com

registrados durante o ciclo de produo de tilpia (Oreochromis

Vazo (L.s-1) medida no Afluente (E1), Efluente (E2) e no Corpo

Valores mdios e desvio padro das variveis fsicas e qumicas

ndice de Estado Trfico dos locais de amostragem ao longo do

Coeficientes de correlao de Pearson e Kendall entre as

Grupos funcionais fitoplanctnicos, segundo REYNOLDS et al.

Frequncia de ocorrncia dos txons registrados.

Coeficientes de correlao de Pearson e Kendall entre as

Esquema de localizao das estaes de coleta.

Imagem fotogrfica da Estao 1 (afluente).

Imagem fotogrfica da Estao 2 (viveiro).

Imagem fotogrfica da Estao 3 (efluente).

Imagem fotogrfica da Estao 4 (zona de mistura).

Imagem fotogrfica da Estao 5 (montante da zona de 13

Imagem fotogrfica da Estao 6 (jusante da zona de 13

subcapitata, sob aumento de 400x, em microscpio tico

Imagem fotogrfica dos recipientes-teste no interior da

Precipitao acumulada mensal e nmero de dias com chuva

Ordenao biplot, pela ACP, das unidades amostrais (meses

Contribuio das Classes taxonmicas para a riqueza de

Contribuio das Classes taxonmicas para a riqueza de

Densidade de organismos (org.mL-1) de cada estao de

Contribuio das Classes taxonmicas para a composio da

Ordenao biplot, pela ACP, das unidades amostrais (meses

de coleta) e dos txons descritores. As unidades amostrais

Primeiro povoamento; Segundo povoamento; Estimativa de perda de 251