MANEJO DE LOS PRINCIPALES EQUIPOS E INSTRUMENTOS,

PREPARACIN DE MATERIAL DE VIDRIO, MATERIAL AUXILIAR Y SU

FORMA DE ESTERILIZACIN
INTRODUCCION:
Limpieza, desinfeccin y esterilizacin El material que se utiliza en el
laboratorio de microbiologa se contamina y se contamina con
grmenes. Al reutilizarlo, este material puede transmitir los grmenes
a otras personas o a la muestra que se est analizando,
contaminndola y afectando a los resultados de los anlisis que se
lleven a cabo con ella. Ambos problemas conducen a enfermedades, a
repeticin de anlisis, a errores en el diagnstico, etc. Para evitar esos
riesgos tenemos dos opciones:

Utilizar material desechable, que se elimina despus de un solo

uso.

Lavar el material utilizado, desinfectarlo y, si es necesario,

esterilizarlo antes de su reutilizacin.

La esterilizacin es un procedimiento fsico, qumico o combinado,

que destruye todos los microorganismos y las esporas de una
superficie o de un material.
Podemos clasificar en tres grupos los objetos que se esterilizan en un
laboratorio:

Aquellos que utilizars para tomar muestra, siempre que haya

de hacerse con material estril: frascos contenedores,
esptulas, bisturs, pinzas, etc.

Los objetos de vidrio o de acero inoxidable que usars en los

distintos anlisis microbiolgicos: los tubos de vidrio en los que
se han realizado las diluciones decimales, las pipetas.

Mtodos fsicos de esterilizacin: del mismo modo que la

desinfeccin, la esterilizacin se puede llevar a cabo usando mtodos
fsicos o qumicos. Los mtodos fsicos se basan en aplicar a un objeto
una energa tan intensa que elimine los seres vivos. Esta energa
puede producirse mediante calor seco, calor hmedo o irradiacin con
rayos gamma, aunque tambin se puede esterilizar utilizando filtros
que impidan el paso de los microorganismos.
La esterilizacin mediante calor seco: El calor seco oxida las
protenas o incluso carboniza la materia orgnica. Puede aplicarse
mediante incineracin, flameado o calor seco. - La incineracin Los
objetos o los productos de desecho se introducen en un horno, que se
calienta a una temperatura muy alta, de modo que elimina los

microorganismos al mismo tiempo que destruye el objeto. En ellos se

incineran los residuos clnicos infecciosos o los cadveres de animales
de experimentacin o sus rganos. En empresas especializadas se
incineran
residuos
qumicos,
como
frmacos
citostticos,
medicamentos caducados, productos del revelado de radiografas,
envases vacos de anestsicos o incluso envases del plstico PVC. - El
flameado El flameado consiste en colocar el objeto dentro de una
llama durante un mnimo de 20 segundos. Este procedimiento est
actualmente en desuso.
Las estufas de esterilizacin En trminos sencillos, una estufa de
esterilizacin funciona como un horno elctrico: unas resistencias
calientan su interior hasta 200C y un reloj y un termostato regulan el
proceso. El aparato tiene estantes y una pared doble, aislante, para
conservar el calor y evitar quemaduras a las personas que lo
manipulan. Existen dos variantes de estas estufas: la estufa Poupinel,
que es ms pequea, y el horno Pasteur. En las estufas de calor seco
pueden esterilizarse los objetos de vidrio o de porcelana y los
instrumentos metlicos, despus de empaquetarlos en cajas
metlicas o en bolsas de papel de aluminio. Se necesita 1 hora a 170
C para los dos primeros y 2 horas a 160C para los segundos y el
tiempo empieza a contar desde que el aparato alcanza la
temperatura indicada. Por eso la duracin total del ciclo de
esterilizacin, incluyendo calentamiento y enfriamiento, puede ser de
dos horas en el primer caso y de ms de dos horas y media en el
segundo.

La estufa de calor seco tiene varias desventajas :

o
o
o
o

Es un sistema lento (porque se esterilizan pocos

instrumentos en cada ciclo).
Algunos materiales no soportan estas temperaturas (los
plsticos, las gomas o los tejidos).
Deteriora el filo de los instrumentos metlicos delicados .
Aun as, es un mtodo sencillo y relativamente barato y
su utilizacin es frecuente en laboratorios farmacuticos y
veterinarios.

Procedimiento de uso de la estufa de esterilizacin

o Coloca los instrumentos en el interior de la estufa, una
vez empaquetados.
o Ponla en marcha.
o Selecciona la temperatura en el termostato y el tiempo en
el reloj, en funcin del material que vayas a esterilizar. La
temperatura se va elevando progresivamente hasta
alcanzar
la
seleccionada,
algo
que
puedes
ir
comprobando con el termmetro interior.

o
o

El aparato se detiene cuando se consume el tiempo

programado.
Deja que vaya descendiendo la temperatura hasta que
est a menos de 30 C. Abre entonces el horno y cierra
las cajas de instrumental antes de sacarlas.

La esterilizacin mediante calor hmedo El mtodo de

esterilizacin ms conocido que utiliza el calor hmedo es el
autoclave, aunque con l puede conseguirse esterilizacin o
desinfeccin, en funcin del tiempo y de la temperatura
seleccionados. El autoclave En nuestra vida cotidiana
aprovechamos dos cualidades del vapor de agua: su
penetracin y su facilidad para difundir el calor. Estas dos
cualidades son la base del autoclave. La autoclave es un
recipiente de paredes gruesas con tapa hermtica, con mandos
para regular la temperatura, el tiempo y la presin. En trminos
sencillos, un autoclave funciona como una olla a presin. El
vapor de agua es mucho ms penetrante que el calor seco , lo
que permite que el autoclave pueda trabajar a temperaturas
ms bajas que la estufa Poupinel y conseguir el mismo
resultado.

La esterilizacin en fro La esterilizacin en fro se consigue

usando rayos gamma, una forma de radioactividad, que son
radiaciones con mucha energa, capaces de destruir los
grmenes. Estas radiaciones son tan penetrantes que
esterilizan el material aunque est envuelto en plstico e
incluso dentro de cajas de cartn o madera. La irradiacin no
deja residuos radioactivos en los objetos. Ahora bien, a causa
de esta inmensa capacidad de penetracin, es imprescindible
que las instalaciones para la irradiacin estn muy bien
aisladas, para evitar que los rayos gamma afecten a las
personas o se dispersen por el ambiente. Dado que estas
instalaciones son muy complejas y caras, las emplean las
industrias especializadas que fabrican material desechable,
como catteres intravenosos, vlvulas, placas de Petri o
material plstico de un solo uso, como asas de siembra, pipetas
y puntas de pipeta.

Los
mtodos
qumicos
de
esterilizacin
Algunos
instrumentos no soportan temperaturas superiores a 60C,
como los que contienen fibra ptica o los plsticos termolbiles,
por lo que es necesario esterilizarlos en fro mediante
sustancias qumicas. El problema es que las sustancias

qumicas, utilizadas en concentraciones y durante perodos

suficientes para ser letales para todos los microorganismos, son
txicas tambin para las personas, de modo que hay que
usarlas con unas precauciones especiales. Existen diferentes
compuestos utilizables como esterilizadores qumicos: el ms
comn es el glutaraldehdo.