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1995 Miguel Snchez Marn

Oposiciones Secundaria Biologa y Geologa


Temario especfico - Tema 33

Tema 33. Reino Moneras. Las Cyanophytas. Las bacterias y


su importancia en sanidad, la industria y la investigacin
bsica.
1 E.S.O. Bloque 3 Tema 7
1 Bach. Biologa y Geologa. Bloque 5: Clasificacin de los organismos.
2 Bach. Biologa. Boque 4: Microbiologa y tecnologa.
SUMARIO
33.1. Moneras. Caractersticas generales.
33.1.1. Tcnicas de reconocimiento e identificacin de microorganismos (OPCIONAL)
33.2. Bacterias
33.2.1. Morfologa bacteriana.
PARED BACTERIANA
CPSULA BACTERIANA
MEMBRANA PLASMTICA
RIBOSOMAS
REGIN DEL NCLEO O NUCLEOIDE
INCLUSIONES
FLAGELOS
FIMBRIAS O PILI
33.2.2. Fisiologa bacteriana: nutricin, relacin y reproduccin

1. Conjugacin
2. Transduccin

3. Transformacin
33.2.3. Clasificacin de las bacterias
33.3. Cianobacterias o Cianofceas. Caracteres generales
33.4. Importancia de las bacterias
33.4.1. Las bacterias y el cierre del ciclo de la materia
33.4.2. Algunas enfermedades producidas por bacterias
33.4.3. Bacterias de inters industrial. Fermentaciones
33.4.4. Aplicaciones agroalimentarias
33.4.5. Aplicaciones en la minera e industria (descontaminacin)
33.4.6. Las bacterias en la investigacin bsica de gentica

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33.1. Moneras. Caractersticas generales.


Constituyen el grupo de clulas ms primitivas. Su organizacin es tpicamente unicelular y procariota.
Su carcter ms distintivo es el de poseer ADN disperso por el citoplasma, sin estar rodeado de una
membrana (aparentemente desprovista de ncleo). Tambin carecen de muchos de los orgnulos celulares.
A este grupo pertenecen las cianobacterias, las bacterias y los micoplasmas. Evolutivamente, su origen
(3400 millones de aos) es anterior al de las clulas eucariotas.
Recientes estudios genticos muestran que unos microorganismos anaerobios, incluyendo los
productores de metano y las bacterias sulfreas, estn tan alejados del resto de procariontes como lo
estn de los eucariontes y probablemente representan un reino aparte (Archeobacterias). En este caso los
procariontas seran los Moneras y las Archeobacterias
33.1.1. Tcnicas de reconocimiento e identificacin de microorganismos (OPCIONAL)
Hay muchos mtodos de enfocar el estudio e identificacin de los microorganismos, segn el tipo de
organismos en estudio y de los medios disponibles. Podemos agruparlos en tres grupos: Tcnicas
clsicas, tcnicas numricas y tcnicas genticas o moleculares.
Las tcnicas clsicas constituyen el mtodo utilizado durante ms de 100 aos:

El estudio de las bacterias se realiza mediante cultivos, que consisten en extractos


nutritivos estriles, ya sean lquidos o slidos.
Los lquidos, preparados en tubos de ensayo debidamente tapados con algodn graso y
esterilizados, suelen ser caldo de carne, suero sanguneo y sangre, enriquecidos con
ciertas sustancias sin las cuales no pueden reproducirse (aminocidos, proteosa-peptona,
etc.).
Los slidos se obtienen a partir de lquidos mediante la adicin de agar-agar o gelatina en
caliente, luego se vierten sobre tubos de ensayo inclinados o sobre cajas de Petri;
posteriormente se esterilizan, se siembran utilizando el asa de platino y se colocan en la
estufa a de cultivo a la t adecuada que favorezca la multiplicacin.
Cuando una clula se coloca sobre el medio en una placa, comenzar a dividirse. Tras la
incubacin aparecer una colonia o clon donde antes slo haba una clula. La
superposicin de colonias da lugar a un medio confluente. Las diferentes morfologas que
se observan entre las colonias estn generalmente bajo control gentico.
Algunas bacterias pueden crecer en medio mnimo que contenga carbono y una fuente de
energa (por ejemplo, glucosa), unas cuantas sales inorgnicas y agua. Las bacterias que
pueden crecer en tales medios son prototrficas. Si debe adicionarse al medio mnimo
cualquier otra sustancia orgnica para obtener crecimiento, se dice que la bacteria es
auxotrfica. Por ejemplo, una cepa que tiene un defecto enzimtico en la ruta de produccin
del aa histidina no crecer en el medio mnimo ser, por tanto, auxotrofa para la histidina.
La tcnica de rplica en placa (Lederberg), es una tcnica de deteccin que nos permite
conocer rpidamente si una bacteria es auxotrfica para un metabolito dado. Se inoculan
bacterias en una placa Petri que contenga un medio completo. Aparecern colonias que
adoptarn una determinada posicin sobre la placa. Se presiona esta placa con una
superficie de terciopelo esterilizado y a continuacin esta superficie se utiliza para inocular
(con la misma configuracin de la placa original) un cierto n de placas, cada una de ellas
con un medio que carece de un metabolito determinado. Si una colonia que creca en el
medio completo, no lo hace en un medio al que le falta un determinado metabolito, se infiere
que est formada por bacterias auxotrficas para ese metabolito. El requerimiento nutricional
de esta cepa es su fenotipo.
De manera similar se puede proceder para el estudio de resistencia y sensibilidad a los
frmacos, los fagos y a otros ataques ambientales.

Mediante microscopa y tincin se observan varias caractersticas, principalmente


estructurales y morfolgicas. En los procariotas los detalles de las estructuras slo pueden
observarse en grandes bacterias y en las cianofceas. En los ms pequeos slo puede

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observarse su forma (cocos, etc.), la tincin (gramm + o -) y la existencia de flagelos. El M. E.


Permite observar las diferencias estructurales.
Tambin pueden conocerse algunas caractersticas no morfolgicas: composicin qumica
de la cpsula, pared celular, pigmentos, inclusiones, productos de reserva, requerimientos
nutritivos, fuentes de C, N, S y energa, productos de fermentacin, necesidades gaseosas,
requerimientos y tolerancia de t y pH, caractersticas inmunolgicas, sensibilidad a los
antibiticos, patogenicidad, relaciones simbiticas y hbitat.

La tcnica numrica tiene en comn con la anterior en que se determina sistemticamente un gran n
de caractersticas y, en lugar de reconocer los datos ms o menos aleatoriamente, se utiliza un
ordenador para comparar todas las caractersticas del organismo con las de los otros mediante una
base de datos.

Las tcnicas genticas o moleculares se basan en identificar el patrn gentico de los


microorganismos. Estas tcnicas hacen uso de comparaciones, entre el microorganismo investigado y
los diferentes microorganismos, de las secuencias de bases del ADN, hibridacin del ADN, su
capacidad de apareamiento y recombinacin gentica.

33.2. Bacterias
Forman el grupo ms numeroso de los procariotas (1600 especies). Son organismos unicelulares
procariotas, cuyo tamao oscila entre 1-10 adaptadas a vivir en cualquier ambiente, terrestre o acutico,
pues en las diferentes estirpes bacterianas pueden observarse todas las formas de nutricin conocidas:
auttrofas (fotosintticas y quimiosintticas) y hetertrofas (saprofticas, simbiticas y parsitas). Esta
notable diversidad de funciones convierte a las bacterias en organismos indispensables para el
mantenimiento del equilibrio ecolgico, ya que, como explicaremos, contribuyen al mantenimiento de los
ciclos biogeoqumicos que permiten el reciclaje de la materia en la biosfera.
A pesar de su reducido tamao, las bacterias pueden considerarse como los organismos ms resistentes,
ya que pueden sobrevivir a temperaturas de congelacin, vivir en aguas termales a elevadas t y algunas
incluso pueden resistir la accin de cidos en caliente.
33.2.1. Morfologa bacteriana.
La mayora de las bacterias adoptan formas caractersticas, aunque en ocasiones la configuracin
puede verse influida por las condiciones del medio de cultivo. Como ya se ha dicho son unicelulares,
pero tambin aparecen agrupadas cuando se mantienen unidas tras la biparticin. Entre las formas ms
frecuentes destacan segn Leewenhock (1883):
Bacilos. Alargados y cilndricos, en forma de bastn; a veces se presentan en cadenas lineales o
ramificadas.
Cocos. Tienen aspecto redondeado, aparecen aislados o en grupos de dos (diplococos), otras veces
forman cadenas arrosariadas (estreptococos), grupos arracimados (estafilococos) o masas cbicas
(sarcinas). La diversidad de clulas depende de que la divisin de las clulas se d a lo largo de uno, dos o
tres ejes.
Espirilos. Tienen forma espiral o de hlice; las espiroquetas tienen un aspecto similar, pero con la espiral
ms acusada.
Vibrios. De aspecto curvado en forma de coma.
La ultraestructura de las bacterias slo se puede apreciar con el microscopio electrnico en conjuncin
con tcnicas bioqumicas y citolgicas adecuadas (ultracentrifugacin, marcaje por istopos radiactivos,
utilizacin del medios de cultivo diferenciales, etc.). Los componentes estructurales bsicos de las
bacterias son.
PARED BACTERIANA

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Los componentes fundamentales de la pared son los peptidoglicanos o murenas, que forman alrededor
de la bacteria un retculo delgado y rgido, comprendido entre las dos membranas plasmticas (interna y
externa) que la rodean.
Los peptidoglicanos estn formados por un armazn de naturaleza polisacrida, en la que, largas cadenas,
originadas por la repeticin de unidades alternantes de N-acetilglucosamina (NAG) y cido N-acetil
murmico (NAM), se unen y entretejen mediante enlaces peptdicos establecidos entre los aminocidos de
su corta fraccin proteica .
Hace un siglo, el mdico dans Christian Gram desarrollo una tcnica de tincin, que se sigue empleando,
para distinguir dos grandes grupos de bacterias.
La tcnica de Gram se basa en el empleo de un colorante bsico, el violeta cristal, y de una disolucin de
iodo. Una vez teida la muestra se trata con alcohol o acetona: las bacterias grampositivas permanecen
coloreadas, mientras que las gramnegativas aparecen decoloradas.
Pared bacteriana
Espesor
Composicin

Gramnegativas
100
1 o dos capas de murena

Grampositivas
150-800
Numerosas capas de murena
unidas, entre s, por cidos teicoicos
no

Membrana lipdica externa


Otros aspectos

si
El periplasma separa la membrana
plasmtica y la externa.
La membrana externa est
La murena es la responsable de la
aravesada por unas protenas
reaccin gram +
(porinas) que actan de canales.

La pared mantiene la forma de la bacteria frente a las variaciones de presin osmtica. Tambin acta
como una membrana semipermeable, regulando el paso de los iones. La destruccin de la pared deja
inerme a la bacteria.
Los antibiticos cefalosporinas y penicilinas, inhiben el crecimiento bacteriano porque impiden la
formacin de peptidoglicanos. La lisozima rompe los enlaces glucosdicos de los peptidoglicanos,
provocando la lisis o destruccin de la bacteria.
Algunos antibiticos y su mecanismo antibacteriano
ANTIBITICO
Penicilina G
Tetraciclina
Estreptomicina
Terramicina
Eritromicina
Bacitracina

ORIGEN MICROBIANO
Penicillium chrysogeum
Streptomyces aureofaciens
Streptomyces griseus
Streptomyces rimosus
Streptomyces erythraeus
Bacillus subtilis

MODO DE ACCIN
Bloquea la sntesis de la pared celular
Bloquea la sntesis de protenas
Interfiere con la sntesis de protenas
Bloquea la sntesis de protenas
Bloquea la sntesis de protenas
Bloquea la sntesis de la pared celular

CPSULA BACTERIANA
Aparece en la parte externa de muchas bacterias patgenas. Es una capa gelatinosa cuyo grosor oscila
entre 100 y 400 . Est formada por glcidos (glucosa, cido urnico y acetilglucosamina).
Tiene como funcin la de regular el intercambio de agua, iones y sustancias nutritivas. Sirve como almacn
de alimentos, defensa frente a anticuerpos, bacterifagos y clulas fagocticas. Tambin protege a la
bacteria de las desecaciones, ya que contiene mucha agua. Es la que permite la formacin de colonias
bacterianas.
La presencia de cpsula no es, sin embargo, un carcter especfico, ya que determinadas bacterias pueden
o no formarla en funcin de las condiciones del medio de cultivo. A las bacterias capsuladas se les llama
formas S, porque cuando crecen en medio slido (agar) dan lugar a colonias de aspecto liso (smooth, en
ingls); en ocasiones pueden mutar espontneamente y originar formas R, carentes de cpsula, que
constituyen colonias de aspecto rugoso (rough, en ingls).

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MEMBRANA PLASMTICA
Las bacterias estn dotadas de un sistema de doble membrana, similar al de las mitocondrias y los
cloroplastos de las clulas eucariotas; ambas membranas (externa e interna) poseen estructura y funciones
diferentes y estn unidas entre s en determinadas regiones (puntos de adherencia). La membrana interna
se repliega hacia el protoplasma y origina unas estructuras membranosas (mesosomas) y aparecen en
formas muy variadas (tubulares, laminares, dendrticas, etc.). En las bacterias fotosintticas los repliegues
membranosos se llaman tilacoides, por analoga con los cloroplastos.
Las bacterias tienen una ATP sintetasa en la membrana plasmtica, as como una cadena de transporte de
electrones, cuyo aceptor final es:
El oxgeno en las aerobias
Nitratos, nitritos, sulfitos, sulfatos y compuestos orgnicos en las anaerobias.
Algunas anaerobias estrictas pueden obtener su energa slo de la glucolisis.
En la superficie de la membrana interna y en los mesosomas se localizan diversos sistemas enzimticos
responsables de importantes funciones celulares, entre las que destacamos.

Permeabilidad selectiva de sustancias.


Sntesis de componentes de la membrana, pared y cpsula.
Fotofosforilacin cclica mediante sus fotosistemas.
Regulacin de la duplicacin del ADN mediante la ADNpolimerasa.
Asimilacin del N2 por parte de las bacterias nitrificantes.

RIBOSOMAS
Son orgnulos similares a los eucariotas, aunque de menor tamao (70 S), compuestos por una subunidad
de 30 S y otra de 50 S, cada subunidad, a su vez, est compuesta por ARN y protenas 1 . Se encuentran
dispersos por el protoplasma bacteriano, aislados o asociados en cadenas de ARNm (polirribosomas), su
funcin, como es lgico es la de la sntesis de protenas.
(OPCIONAL) Los antibiticos se han revelado como interesantes a propsito de la biosntesis de
protenas. Por ejemplo, un antibitico que bloquee el ribosoma 70S bacteriano sin afectar al 80S humano
podra resultar excelente.
La puromicina se une al locus A del ribosoma bacteriano, impidiendo una posterior elongacin de la
protena (el descubrimiento de los locus A y P del ribosoma se deben a ella).
La estreptomicina inhibe la iniciacin de la biosntesis de protenas en bacterias al unirse a la subunidad
30S. Si la iniciacin ya ha comenzado, provoca lecturas errneas de los codones al tener alterada la
subunidad 30S.
La tetraciclina bloquea la sntesis porque evita la unin del aminoacil-ARNt al locus A.
El cloranfenicol bloquea la reaccin de transferencia del enlace peptdico en la subunidad 50S del ribosoma
procaritico, no afecta al eucaritico.
Los antibiticos, no obstante, deben usarse con precaucin ya que, aunque no afecten al ribosoma
eucaritico, si pueden hacerlo a los ribosomas mitocondriales dado su parecido con los de los procariotas.
REGIN DEL NCLEO O NUCLEOIDE
Aunque las bacterias, y los procariotas en general, carecen de ncleo propiamente dicho, separado del
citoplasma por la membrana nuclear, en las imgenes obtenidas por el microscopio electrnico aparece una
zona interna, menos densa que el protoplasma circundante, que contiene el cromosoma bacteriano,
formado por una doble hlice de ADN desnudo y circular con superenrollamientos y asociado en parte a
los mesosomas.
Tambin puede existir pequeas cantidades de material gentico en forma de pequeas molculas de
ADN (plasmidios). Algunos plasmidios contienen genes que confieren resistencia a los antibiticos.

1 La 30 S tiene: ARN de masa molecular 600.000 y 21 protenas distintas; la 50 S tiene: dos molculas de

ARN y 34 protenas.

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INCLUSIONES
En el protoplasma bacteriano se encuentra una gran variedad de granulaciones, que cumplen, en general,
la funcin de depsito de sustancias de reserva, como por ejemplo, granos de volutina (acmulos de
polifosfatos encargados de almacenar grupos fosfato y energa); gotas lipdicas (triglicridos, ac.
polihidroxibutrico); polisacridos (almidn y glucgeno); azufre, etc.
Una inclusin comn es el cido poli -hidroxibutrico (PHB), cuyos polmeros estn siendo estudiados
como sustitutos del plstico, pues tienen una consistencia similar y adems son biodegradables.
FLAGELOS
Son apndices filiformes de mayor longitud que la bacteria que permiten su locomocin, estn formados
por una zona basal y el tallo.
El flagelo bacteriano se caracteriza por:
Es ms delgado que los cilios d eucariotas.
No est envuelto por la membrana plasmtica; se considera una estructura extracelular.
Lo constituye un filamento en espiral, formado por una protena (flagelina, que se une a un gancho o
estructura unciforme (en forma de garfio) que, a su vez, se ancla en la pared bacteriana y la membrana
plasmtica mediante anillos, proporcionando un movimiento rotacional.
Su n y disposicin es variable; segn sta las bacterias pueden ser: montricas (un slo flagelo),
loftricas (varios flagelos en un slo punto), anftricas (grupos de flagelos en ambos polos) y pertricas
(flagelos rodeando a la bacteria).
FIMBRIAS O PILI
Son filamentos proteicos huecos, delgados (40 - 80 ) y rectos, situados en la superficie de determinadas
bacterias Gram - y cuya funcin no est relacionada con la locomocin, sino con la adherencia a los
sustratos y el intercambio de fragmentos de ADN de ADN durante la conjugacin.
33.2.2. Fisiologa bacteriana: nutricin, relacin y reproduccin
FUNCIONES DE NUTRICIN
Las bacterias constituyen el conjunto de los organismos capaces de obtener energa del medio en el que
viven por todas las formas de nutricin conocidas: auttrofas (fotosintticas y quimiosintticas) y
hetertrofas (saprofticas, simbiticas y parsitas).

1. Bacterias auttrofas
1.1. Fotosintticas. Hay un grupo de bacterias (sulfobacterias verdes y purpreas) capaces de realizar
la fotosntesis; para lo que disponen de cromatforos, que contienen un tipo de clorofila (P-890 o
bacterioclorofila), asociada a otros pigmentos del fotosistema I.
Como slo disponen del fotosistema I realizan nada ms que la fosforilacin cclica, de manera que los
e- de los donantes (sulfuros, tiosulfatos, hidrgeno o compuestos orgnicos) se transportan hasta el
NADH sin que se libere O2 , ya que no se da la fotolisis del agua.

1.2. Bacterias quimiosintticas (quimiolittrofas)


Obtienen la energa de oxidacin de sustratos inorgnicos, que se comportan como dadores de e-. A ttulo
de ejemplo sealamos
Bacterias del azufre (Archeobacterias). Oxidan Azufre o compuestos de azufre. Son aerobias obligadas.
SH2 + 1/2 O2 S + H2O + Energa

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2S + 3O2 + 2H2O 2SO4= + 4H+ + Energa


H2S2O3 + 1/2 O2 SO4= + S + Energa
Bacterias del Nitrgeno. Oxidan compuestos reducidos de nitrgeno: Nitrificantes (Nitrosomonas):
Transforman el amonaco en nitrito. Nitrificantes (Nitrobacter): Transforman los nitritos en nitratos.
Bacterias del Hierro. Oxidan compuestos ferrosos a frricos.
Bacterias del Hidrgeno y del Metano (Archeobacterias). Son quimioauttrofos facultativos, que
pueden utilizar hidrgeno molecular y metano como fuentes de e-. El hidrgeno se transforma en agua y
el metano en dixido de carbono.

Asimilacin reductora del carbono y del nitrgeno


La energa obtenida de la oxidacin de estos sustratos inorgnicos la utilizan para la sntesis de ATP y
NADPH o NADH, que despus se emplean el reducir la fuente de carbono (ciclo de Calvin) y la del
nitrgeno y del azufre.
Para la asimilacin del N, la mayora de las bacterias, igual que las plantas, debe reducir los nitratos a
nitritos y estos a amoniaco, con el fin de incorporarlo como grupo amino de sus aminocidos y dems
compuestos nitrogenados. Pero existe un grupo de bacterias capaces de reducir directamente el nitrgeno
atmosfrico y fijarlo como nitrgeno orgnico en sus compuestos nitrogenados; entre ellas las hay de
vida libre (Azotobacter sp., que vive en los suelos), y otras que viven en simbiosis con las races de ciertas
plantas (leguminosas), como Rhizobium sp. tambin son capaces de fijar el nitrgeno las cianofceas, las
bacterias fotosintticas y algunos hongos actinomicetos.
FUNCIONES DE RELACIN
Las bacterias responden a un n elevado de estmulos ambientales diversos mediante modificaciones de su
actividad metablica o de su comportamiento. Ciertas clases, ante los estmulos adversos del ambiente,
provocan la formacin de esporas de resistencia, que al ser intracelulares, se denominan endosporas. En
estas condiciones pueden soportar t superiores a los 80 C, sequedad, accin de agentes qumicos y
radiaciones durante mucho tiempo. Al aparecer de nuevo condiciones propicias, germina y da lugar a
bacterias normales (forma vegetativa).
Pero la respuesta ms generalizada consiste en movimientos de acercamiento o distanciamiento respecto
a la fuente de los estmulos (taxias); stos pueden ser flagelares, de reptacin o flexuosos, etc. Se han
comprobado respuestas fototcticas y quimiotcticas.
FUNCIONES DE REPRODUCCIN
Generalmente las bacterias se multiplican por biparticin o divisin binaria: tras la duplicacin del ADN,
que est dirigida por la ADN polimerasa de los mesosomas, crece la pared bacteriana hasta formar un
tabique transversal separador de las dos nuevas bacterias.
PARASEXUALIDAD BACTERIANA: Adems de la reproduccin asexual, las bacterias poseen tambin
una serie de mecanismos, definidos como parasexuales, mediante los cuales intercambian fragmentos de
ADN entre dos razas diferentes; una vez introducido el fragmento de ADN, es generalmente estabilizado al
ser incorporado al cromosoma bacteriano. Esta transferencia de informacin gentica de una bacteria a otra
puede realizarse de tres formas distintas.

1. Conjugacin
Se define como el mecanismo parasexual mediante el cual una bacteria donadora transmite, a travs de las
fimbrias o pili, un fragmento de su ADN a otra bacteria receptora. Las bacterias donadoras son las que

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tienen pequeas cadenas de ADN de doble hlice y circulares (episomas o factores F), adems del
cromosoma bacteriano. El factor F es un plsmido 2 , formado casi exclusivamente por crculos de ADN
bicatenario de tamao mucho menor que el cromosoma bacteriano.
Estas bacterias se denominan F+ cuando el factor F est separado del cromosoma; pero en ocasiones, este
factor puede integrarse en el cromosoma, que se abre y se transforma en una cadena lineal, con lo que la
bacteria F+ queda convertida en Hfr (alta frecuencia de recombinacin). Las bacterias receptoras, al
carecer de episoma, se denominan F-.
En las bacterias Hfr el episoma se encuentra inserto en la regin terminal. Estas bacterias pueden transferir
la totalidad o parte de su ADN cromosmico a travs de los pelos F3 a una bacteria F-. La clula donante
no pierde su cromosoma, porque slo se transfiere una de las dos cadenas del ADN bicatenario; la otra
cadena es rpidamente replicada, y una de las copias del cromosoma puede trasladarse a una bacteria F(generalmente, slo pasan fragmentos cromosmicos debido a la fragilidad de los pelos).
Durante la conjugacin uno de los factores F de una bacteria F+ pasa a travs de los pelos F a una bacteria
F-, transformndola en F+ . La clula donante no pierde su factor F, porque slo se transfiere una de las dos
cadenas del ADN bicatenario; la otra cadena es rpidamente replicada.
Como slo se transfiere una de las dos cadenas del ADN bicatenario donante desde la clula F+ o Hfr a la
clula F-, la replicacin del ADN en la clula receptora reconstituye el ADN bicatenario.
Durante un corto perodo de tiempo, en el proceso de transferencia de una clula Hfr a una F- , sta
contiene dos copias de aquellos loci cromosmicos que han sido transferidos: la propia y la que ha
recibido; la clula por tanto es parcialmente diploide (merocigoto). El ADN extrao (exogenote) puede
incorporarse al genoma del husped (endogenote) por un n par de rupturas. El ADN lineal no incorporado
es degradado.
Tambin en el proceso de transferencia de una clula Hfr a una F- , el factor F con parte del genoma de la
clula (factor F) puede abandonar la clula husped. Este nuevo factor confiere a las clulas receptoras
una alta tasa de integracin espontnea en su genoma, integrndose el factor F en el mismo punto que
ocupaba originariamente en la cepa Hfr. Este factor F enriquece el genoma de la clula receptora, adems
de con el factor F, con otros genes prximos a l. A este proceso de le llama sexduccin.
Tal y como demostraron F. Jacob y E. Wollman (tcnica del apareamiento interrumpido), la transferencia de
material gentico de la clula donante a la receptora es lineal.
2. Transduccin
En este caso la transferencia de material gentico de una bacteria a otra, se realiza a travs de un virus
bacterifago que se comporta como vector intermediario entre dos bacterias.
Antes de la lisis (ver ciclo ltico del bacterifago en el tema 32), cuando el ADN del fago est siendo
empaquetado dentro de la cabeza del fago, puede tener lugar un error ocasional que consiste en la
incorporacin de ADN bacteriano dentro de la cubierta del fago. Los genes bacterianos pueden ser
transferidos a otra bacteria . Hay dos formas de transduccin: especializada o restringida y generalizada.

Especializada o restringida. Anloga a la sexduccin y depende de que se produzca un error durante


el proceso de escisin. Slo se pueden transferir los loci adyacentes al lugar de insercin del fago.
Mediante la transduccin Generalizada se puede transducir cualquier locus. El mecanismo no depende
de una escisin errnea, sino de la inclusin aleatoria de un fragmento del cromosoma del husped
dentro de la cubierta del fago. La partcula transductora (fago defectivo con ADN bacteriano en vez de
vrico) es inyectada en un nuevo husped y se incorpora al cromosoma de este ltimo por
recombinacin.

3. Transformacin
2 Segn Lederberg, son partculas genticas independientes que se autorreplican.
3 El factor F contiene los genes para la formacin del pelo sexual (en E. coli hay de uno a tres) y para la

transferencia del ADN a una clula F-.

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Consiste en el intercambio gentico producido cuando una bacteria es capaz de captar fragmentos de
ADN de otra bacteria que se encuentran dispersos en el medio donde vive.
Fue descrita por primera vez por Griffith (1920) y despus por Avery, Mcleod y McCarthy (1944), y es
responsable de la transformacin de cepas bacterianas no virulentas (R) en virulentas (S), cuando se
cultivan en medios que contienen los fragmentos bacterianos procedentes de cepas S destruidas
previamente con calor.
Para ser capaz de transformar, el ADN extracelular debe tener doble cadena y ser relativamente grande.
Para poder ser transformada, una clula debe tener una protena de superficie (factor de competencia), que
se enlaza con el ADN extracelular en una reaccin que requiere energa. Cuando el ADN extracelular es
introducido en la clula, una de sus cadenas es hidrolizada por una ADNasa intracelular que
aparentemente utiliza la energa de la hidrlisis para incorporar la otra cadena no hidrolizada dentro de la
clula. La cadena sencilla incorporada se incorpora en el genoma husped por un entrecruzamiento no
recproco; el ADN de cadena sencilla restante ser degradado.
La transformacin es un mtodo muy eficaz para cartografiar las bacterias poco eficaces en la transduccin
(Bacillus subtilis).
Estos mecanismos explican la variabilidad que pueden presentar algunas bacterias al habitar junto a otras
distintas. Un ejemplo de este proceso es la resistencia a antibiticos que presentan ciertas bacterias
patgenas al convivir en el intestino con bacterias simbiontes que resisten bien la accin de estos
productos farmacuticos
33.2.3. Clasificacin de las bacterias
El Manual de Bergey de Bacteriologa Sistemtica es la autoridad reconocida sobre taxonoma bacteriana.
El Manual est dividido en cuatro volmenes. Cada volumen contiene varias secciones y cada seccin
contienen varios gneros relacionados. Cada volumen contienen lo siguiente:
Bacterias gram - de importancia mdica y comercial
Bacterias Gram + de importancia mdica y comercial
Bacterias Gram - restantes.
Actinomicetos filamentosos y bacterias relacionadas.
Esta clasificacin de las bacterias es muy compleja. Nosotros nos limitamos a algunos de los phyla ms
importantes:
BACTERIAS FERMENTADORAS. Anaerobias estrictas, extraen la energa necesaria para sus funciones
vitales de procesos de fermentacin. Entre los gneros ms importantes se encuentran Streptococcus y
Lactobacillus (fermentacin lctica), Clostridium, que puede llevar a cabo distintas fermentaciones (actica,
butrica, alcohlica)
ESPIROQUETAS. Son bacterias largas, delgadas y de cuerpo ondulante. Disponen de flagelos internos y
pueden moverse mediante movimientos de torsin o flexin. Dentro de las espiroquetas est la bacteria
mayor que se conoce (Treponema pallidum causante de la sfilis humana) que puede alcanzar 500 micras.
BACTERIAS FIJADORAS DEL NITRGENO. Son bacterias anaerobias Gram negativas y muchas
disponen de flagelos. Pueden captar el nitrgeno atmosfrico (Azotobacter y Rhizobium).
BACTERIAS QUIMIOAUTTROFAS. Son bacterias que forman sus compuestos orgnicos gracias a la
energa liberada en reacciones oxidativas de compuestos inorgnicos.
OMNIBACTERIAS. Son bacterias anaerobias facultativas, y entre ellas se encuentran las llamadas
enterobacterias, por ser frecuentes en los tubos digestivos de los animales. Destacan la Eschirichia,
Salmonella, Klebsiella y Vibrio.
ACTINOBACTERIAS. Llamadas antes bacterias-hongo o actinomicetes, por formar filamentos
multicelulares parecidos a las hifas de los rganos verdaderos. Muchas actinobacterias son capaces de
formar actinosporas (Mycobacterium, Streptomyces que se usa en la fabricacin de estreptomicina y
otros antibiticos).

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ARCHEOBACTERIAS.
Las arqueobacterias (ver tema 32, apartado 32.2.2.) habitan en medios de caracters ticas ms extremas como
salmueras (halobacterias), aguas termales cidas (termoacidfilas), profundidades marinas,etc.
Son bastante distintas de las eubacterias:
Sus membranas celulares son semejantes en estructura, pero carecen de cidos grasos, sustituidos por
mitades de hidrocarburos unidos al glicerol por enlaces ter (-C-O-C-), en lugar de ster.
Las paredes celulares son variables, pero sus peptidoglucanos son distintos y, si poseen aa,
predominan las formas L.
Poseen extremoenzimas.
Entre ellas estn las metangenas, que viven en pantanos y cinagas en ausencia de oxgeno y que
transforman el CO2 y el H2 en metano y agua (se utilizan industrialmente para transformar basuras en
combustibles.
Haloflicas, que soportan salinidad extrema: Halobacterium salinarum
Hipertermoflicas: t > 80 C; S reducido. Pyrolobus fumarii (aislados en volcanes terrestres y submarinos).
Acidfilas. Acidez extrema. Termoplasma (sin pared celular), Sulfolobus (pH = 2)
Aunque su nombre hace referencia a bacterias antiguas (arcaicas), presentan ms semejanzas con
eucariotas que con eubacterias.
MICOPLASMAS
Son las clulas ms pequeas con de vida libre con organizacin procaritica, generalmente inmviles que
tienen membrana celular, pero carecen de pared celular. Su membrana resiste la lisis osmtica (suelen
vivir en un ambiente isotnico). Por su pequeo tamao (son menores que las bacterias) y su facilidad
para deformarse atraviesan fcilmente los filtros que retienen las bacterias. Su genoma es un tercio del
bacteriano, poseen ADN bicatenario circular, ARN, ribosomas y diversas protenas.
Se conocen unas setenta especies de micoplasmas; unos viven en relacin de comensalismo en plantas,
animales o humanos; otros son parsitos y producen enfermedades. En el hombre se encuentran como
comensales en la mucosa oral y urogenital, pero, sin duda, el ms conocido y estudiado ha sido el
Mycoplasma pneumoniae, agente causante de las neumonas, afectando a los epitelios de las mucosas
presentes en el aparato respiratorio. Como carecen de pared los antibiticos no son eficaces contra ellos.
RICKETTSIAS (Rickettsia, Chlamydia).
Son las clulas ms pequeas que se conocen. Patgenos (tifus, tracoma), todas las especies parsitas
intracelulares obligadas. Las enfermedades que provocan han costado ms vidas que cualquier otra
infeccin (excepto el paludismo), dado que se transmiten por piojos (tifus), por lo que su contagio se ve
favorecido por condiciones de hacinamiento. Se reproducen por biparticin, son inmviles y poseen una
pared celular rgida.

33.3. Cianobacterias o Cianofceas. Caracteres generales


Tambin se les llama algas verde-azuladas por la posesin, adems de clorofila por la posesin adems
de clorofila a, de otros pigmentos, como ficocianina, de color azulado; la ficoeritrina, de color rojo el mar
Rojo recibe su nombre debido a la abundancia de cianobacterias rojas); o la xantofila, de color
amarillento. Realizan la fotosntesis igual que las algas o las plantas superiores. A ellas se les atribuye el
cambio de la atmsfera primitiva (de reductora a oxidante) hace 2000 millones de aos. Algunas de ellas
son capaces de fijar el nitrgeno del aire. Difieren de las eubacterias fotosintticas en varios aspectos
importantes: su clorofila, como hemos dicho, es la misma que la de las plantas superiores, utilizan el
agua como fuente de e- para reducir el CO2 y desprenden O2.
Son unicelulares; a veces pueden formar colonias celulares poco organizadas, de forma filamentosa o
laminar, a veces toda la colonia est envuelta por una cpsula mucilaginosa. Tienen una pared celular
similar a la de las bacterias Gramm - (tienen una capa interna de murena).
Su citoplasma aparece dividido en dos zonas: una central de aspecto translcido (centroplasma),
donde est el ADN; y el resto (cromoplasma), donde se localizan los sculos con los pigmentos

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fotosintticos. Poseen tambin ribosomas, granos de volutina y vacuolas de gas y carboxisomas (enzimas
que fijan el CO2).
Su reproduccin es exclusivamente asexual por biparticin simple. Una manera de propagarse es la
separacin de las colonias de conjuntos celulares (hormogonios) que tienen cierto movimiento reptante
en medio lquido. En las formas coloniales de tipo arrosariado (Nostoc), pueden observarse unas clulas
de mayor tamao (heterocistes) y que son elementos de resistencia del alga. La fragmentacin se realiza
por los heterocistes y cada segmento forma una nueva colonia.
Este grupo de individuos (ms de 2000 especies) se ha adaptado a gran variedad de hbitats, tanto
acuticos como simplemente hmedos. Las hay en el mar y en las aguas dulces; otras son capaces de
resistir t de hasta 90 C (las que viven en los giseres). Otras como las del gnero Gleocapsa son muy
abundantes y forman tapices de color verde oscuro sobre el suelo de los charcos durante el invierno.
Finalmente, otras forman asociaciones simbiticas con hongos (lquenes) y plantas superiores (Anabaena
con el helecho).
33.4. Importancia de las bacterias
El xito biolgico de las bacterias se debe a:

Al tamao de sus clulas.


A su gran capacidad reproductora y a su tasa mutacional.
A su capacidad para vivir prcticamente en todos los ambientes.
A que forman esporas de resistencia ante condiciones adversas, pudiendo permanecer en estado
latente durante mucho tiempo.

33.4.1. Las bacterias y el cierre del ciclo de la materia


Las Bacterias quimiosintticas (en este grupo se incluyen las bacterias del suelo) sintetizan el ATP a partir
de la energa que se desprende en las reacciones de oxidacin de determinadas sustancias inorgnicas. De
esta forma, estas sustancias inorgnicas producto del catabolismo de los seres vivos, se transforman en
productos inorgnicos oxidados integrndose en los ciclos biogeoqumicos donde, tras la fotosntesis, se
incorporan a los seres vivos en forma de, en la mayora de los casos, productos orgnicos.
33.4.2. Algunas enfermedades producidas por bacterias
Excluimos la exposicin de las enfermedades venreas por considerar que deben abordarse en el tema 60.
Tuberculosis. (Mycobacterium tuberculosis), que, tambin se le conoce como bacilo de Koch (en honor a
su descubridor). Es inmvil, cido resistente y aerobio estricto. La bacteria ataca al pulmn (tisis), huesos
(mal de Pott), ganglios (escrofula, propia de los nios), meninges (meningitis tuberculosa), o al organismo
entero (tuberculosis galopante). Lo mas frecuente es la tuberculosis pulmonar o tisis.
El rgano atacado presenta tuberculillos (de ah el trmino tuberculosis) amarillentos (bacilos con
leucocitos rodeados por clulas). Se multiplica tanto intracelular como extracelularmente. Una vez
instalados en los pulmones, el bacilo atacante comienza a destruir los tejidos, formando las cavernas
pulmonares. Si estas se producen junto a alguna arteria importante, esta se rompe (hemoptisis),
hemorragia que puede ser mortal. La edad de riesgo oscila entre los 16 y 30 aos. Una alimentacin
deficiente, la falta de higiene, debilidad, etc. favorecen su desarrollo. Las toxinas del bacilo no han sido
identificadas; al menos parte de los daos sufridos por el hospedador son resultado de reacciones de
hipersensibilidad de tipo retardado. La antiguamente llamada peste blanca, va siendo superada gracias a
la estreptomicina, medidas higinicas y los adelantos sanitarios.
Difteria. (Orynebacterium difteriae). Bacilo Gram +, inmvil, suele tener forma de maza. Los movimientos
que siguen a la escisin dan lugar a la disposicin en empalizada caracterstica; anaerobio facultativo.
Prolifera, sobre todo, en la garganta de los nios, formando una falsas membranas (pseudomembrana
diftrica), que pueden llegar a producirles la muerte por asfixia. Produce una exotoxina que es
diseminada por el torrente circulatorio por todo el cuerpo, produciendo intensa fiebre, taquicardia y
paralizacin muscular parcial.

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Cerca del 1 % de la poblacin son portadores sanos y constituyen una fuente de contagio. Como ste es
directo, el enfermo debe ser aislado, incluso despus de curado. Aunque es una enfermedad casi
erradicada por las eficaces campaas de vacunacin, si se presenta puede combatirse con sueros
antidiftricos.
Tosferina (Bordetella pertussis), bacilos pequeos, inmviles, gram negativos. Producen un catarro
contagioso, caracterizado por una insistente tos, acompaada por una respiracin ruidosa y penosa;
puede durar varios meses pero pocas veces es mortal. Puede complicarse con bronquitis y con pulmona.
No se extiende a otras partes del organismo.
Ttanos. (Clostridium tetani), Gram positivo, esporulado, flagelos peritricos. Anaerobio estricto. produce
una toxina (neurotoxina) muy potente, particularmente activa en los centros nerviosos (astas anteriores
de la mdula) y motores, irritndolos de tal forma que somete a los msculos a intensas y continuas
contracciones (tetanizacin). Cuando la tetaninacin afecta a los msculos respiratorios puede dar lugar
a la asfixia. La contaminacin, a travs de heridas, entra en el cuerpo por la suciedad o contacto con
objetos sucios. El bacilo se encuentra en el suelo, especialmente en los excrementos del ganado equino, ya
que el bacilo anida en el intestino de estos animales.
Gracias al suero antitetnico de caballo (Behring, 1890), la enfermedad ha dejado de ser un riesgo grave.
Una vez que la toxina ha invadido el organismo la antitoxina es intil.
Escarlatinas. Eruptiva, epidrmica y contagiosa. Su nombre alude al color rojo de la piel del enfermo que la
padece. Est causada por estreptococos (Streptococcus pyogenes), que penetran por la faringe; Gram
positivos, crecen en cadenas.
Liberan una toxina eritrognicas: si el individuo es sensible a la toxina, aparece una erupcin cutnea. La
erupcin se presenta en forma de puntos rojos en frente, mejilla, abdomen y muslos. Es ms grave en los
adultos que en los nios y puede traer como complicaciones las anginas y la difteria. La posterior difusin
por el organismo puede conducir a una mastoiditis, peritonitis, fiebre puerperal, celulitis de la piel o
erisipelas. El contagio es directo y en los nios se da la mxima receptividad entre los 2-14 aos. El
aislamiento debe durar unos 40 das y la desinfeccin ha de realizarse concienzudamente.
Fiebre tifoidea. (Salmonella typhi), es un bacilo Gram - con flagelacin peritrica, anaerobio facultativo. Se
le pueden asociar otras especies de Salmonellas, que hacen la enfermedad muy compleja. Por afectar a las
vsceras abdominales, se le llama tambin tifus abdominal. La infeccin se produce por contaminacin
fecal. Los organismos primero se multiplican en el tracto intestinal. Se pueden diseminar por todo el
cuerpo a travs de los conductos linfticos intestinales. Crece abundantemente en el tracto biliar, a partir
del cual se infecta el intestino. La infeccin puede pasar tambin a la mdula sea, bazo, vsceras y
originar una septicemia.
Los sntomas son: fiebre elevada, diarrea continua y una gran postracin en el enfermo; grandes
ulceraciones de las paredes intestinales, que pueden producir desde hemorragias a peritonitis. La
incubacin dura dos o tres semanas y el periodo de actividad de cuatro a cinco semanas. La convalecencia
es larga y las recadas frecuentes. La inmunizacin se logra al vacunarse con bacilos muertos a 60 C. Se
combaten con cloromicetinas.
Otras Salmonellas (S. typhimurium, S. schottmller, S. choleraesuis), son las causantes de las Fiebres
entricas, Gastroenteritis y Septicemias. Son tambin bacilos Gram negativos con flagelacin peritrica y
anaerobios facultativos. Se contagian tambin por contaminacin fecal; al igual que el tifus, se
caracterizan por su amplia diseminacin por todo el cuerpo. La fiebre entrica que producen es ms
benigna que la tifoidea.
Clera. (Vibrio cholerae), bacilo curvado, Gram negativo, con flagelo polar y anaerobio facultativo. El
microorganismo slo se multiplica en el intestino delgado. Se transmite por contaminacin fecal, siendo
un clsico ejemplo de las consecuencias de la falta de saneamiento, en especial con respecto al
abastecimiento de agua. Hace un siglo era una enfermedad frecuente en todas las ciudades (pandemia);
hoy en da es una enfermedad endmica en la India (clera asitico), habiendo continuas epidemias
en frica y Sudamrica.

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Su exotoxina acta sobre las clulas de la mucosa, produciendo intensas diarreas, profunda postracin.
Las deposiciones son tpicas (deposiciones en agua de arroz). Es una enfermedad grave y su epidemia
produce mucha mortalidad.
La Shigella dysenteriae, un bacilo Gram negativo, inmvil y anaerobio facultativo, produce la Disentera
bacilar, lesionando la parte terminal del leon y colon, provocando clicos intestinales, diarreas y fiebre.
Tambin se transmite por contaminacin fecal.
Botulismo. (Clostridium botulinum). Bacteria anaerobia y puede prosperar incluso en el interior de los
botas de conserva; de ah las precauciones exigidas a industriales y consumidores.
La toxina botulnica es absorbida en el estmago e ni testino. Afecta al complejo neuromuscular,
produciendo una parlisis flcida, particularmente en el rostro, ojos y sistema respiratorio. Produce un
elevado ndice de mortandad (68 %). Los cuatro alimentos en conserva ms commnmente responsables
del botulismo son: el maz, las judas, las acelgas y los esprragos. Los alimentos cidos o azucarados
rara vez causan botulismo.
La Gangrena gaseosa (Clostridium perfringens, C. novyi, C. septicum), son bacilos Gram positivos,
esporulados con flagelacin peritrica. El desarrollo del organismo en heridas anaerbicas va acompaado
por la acumulacin de hidrgeno gaseoso originado por la fermentacin. Se produce una gran variedad
de toxinas solubles, que incluyen una lecitinas (C. perfringens).
Lepra. (Mycobacterium leprae o bacilo de Hansen), cuya forma es idntica a la del M. tuberculosis. No es
muy seguro que este sea el nico bacilo productor de la lepra. Se contagia por los exudados de los
lepromas de los enfermos. La incubacin dura varios aos. No es hereditaria. Lo desagradable de la
enfermedad proviene de la deformacin del cuerpo y de la destruccin de los tejidos, con formacin de
cicatrices. Se cura utilizando aceites de extractos vegetales.
Meningitis meningoccica (Neisseria meningitidis), es un coco Gram positivo que forma diplococos
tpicos. Son transportados por las vas respiratorias (nasofaringe), sin que produzcan ni daos ni
molestias para ms del 25 % de la poblacin, por causas desconocidas. Pueden invadir el torrente
circulatorio y entonces se localizan en las meninges de la mdula espinal. Se contagia por exhalacin.
Neumona pneumoccica. (Streptococcus pneumoniae), tambin es Gram + que forma diplococos tpicos.
Entre el 40-70 % de la poblacin adulta los lleva en la garganta. Los microorganismos llegan a los
pulmones cuando las barreras naturales no funcionan bien (por ejemplo, durante infecciones respiratorias
debidas a virus).
La peste neumnica (Yersinia peste). Bacilo inmvil, Gram - y anaerobio facultativo. Es una enfermedad de
los roedores domsticos, transmitida al hombre por picadura de pulga, se contagia por exhalacin.
Aumenta el tamao de los ganglios linfticos (bubones), de donde se transmite a todos los rganos, y
cuando se infectan los pulmo nes se hace particularmente contagiosa.
Otras enfermedades bacterianas en el hombre, contagiadas por contacto directo con animales son: el
carbunco (Bacillus anthracis), Brucelosis o fiebres de malta (Brucella melitensis, B. abortus, B. suis); la
Tularemia (Francissella tularensiss), etc.
33.4.3. Bacterias de inters industrial. Fermentaciones
La tecnologa microbiana tradicional implica la utilizacin de microorganismos para fabricar, a gran escala,
productos resultantes de su actividad biolgica natural. En estos procesos biotecnolgicos la tarea
fundamental de los microbilogos es modificar el organismo o el proceso, para obtener le mximo
rendimiento.
La ingeniera gentica implica la utilizacin de microorganismos alterados genticamente mediante la
insercin, en ellos, de genes extraos con la informacin del producto que se desea que produzca..
Adems este microorganismo pude ser cultivado a gran escala para su explotacin comercial.
El tercer sector de las biotecnologas (ver temas 46 y 64) es el de los procesos de fermentacin, centro de
las aplicaciones industriales de la microbiologa y la ingeniera gentica. Efectivamente, para producir

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sustancias tiles en la industria, los microorganismos naturales o portadores de un mensaje gentico


extrao se cultivan en cubas de fermentacin. En los procesos clsicos, se llenan las cubas con un lquido
nutritivo y la sustancia que se ha de transformar y se deja que los microorganismos acten durante
algunos das; despus se vacan las cubas y los compuestos producidos se concentran y purifican.
Estos procedimientos se utilizan para la biosntesis de antibiticos y vitaminas y para la produccin
industrial de enzimas usados en la industria del almidn o en la fabricacin de levaduras.
Se est extendiendo la llamada fermentacin en continuo. Consiste en introducir constantemente en la
cuba un flujo de sustancias nutritivas y del sustrato que se va a trasformar, y extraer de forma regular el
producto de la fermentacin. Estas operaciones se controlan automticamente mediante procedimientos
informticos.
Asimismo, en la fermentacin en continuo, los microorganismos o los enzimas aislados pueden estar en
suspensin en el lquido, englobados en microsferas porosas (tcnica del lecho fluido) o inmovilizados
sobre un soporte slido poroso, por cuyos intersticios circula el lquido.
La mejora de las condiciones con miras a incrementar el rendimiento de la fermentacin, sea por
inmovilizacin de los enzimas o las clulas, sea por el reciclaje de los procesos de floculacin o
centrifugacin, constituye un foco de investigacin muy activa: la ingeniera enzimtica.

Produccin de etanol
Con miras a la produccin de etanol a partir de celulosa, las investigaciones actuales inciden en la
bioconversin de celulosa en glucosa por intervencin de unos enzimas especiales (celulasas). Dichos
enzimas son fabricados por diversos microorganismos (los hongos Trichoderma, Schizophyllum; y las
bacterias Thermonospora y Clostridium).
Los microorganismos producen el enzima en los fermentadores. Despus, las molculas del enzima se
colocan en otros fermentadores llenos de pasta lquida de celulosa para hidrolizarla. La glucosa as
obtenida se convierte en etanol en una tercera serie de fermentadores.
El acoplamiento entre celulasas y levaduras permite utilizar un slo fermentador para convertir la
celulosa en etanol en una sola operacin. Para aumentar el rendimiento de esta operacin se ha
conseguido clonar los genes de las celulasas de hongos o bacterias en un plsmido de E. coli.
33.4.4. Aplicaciones agroalimentarias
De forma tradicional, el campo de las industrias alimentarias ha utilizado microorganismos para la
obtencin de numerosos productos: derivados de la leche (yogour, queso); productos obtenidos por
fermentacin alcohlica (vino o cerveza, vinagre, pan, etc.)
Un foco de investigacin se centra en la bacteria Agrobacterium, que infecta las plantas provocndoles
la "agalla del cuello". El gen que confiere el carcter tumoral es portado por un plsmido de la bacteria
(plsmido Ti). Este gen se inserta en la planta infectada por lo que es posible prever la transferencia de
caracteres ventajosos asociados a este gen. La tcnica del plsmido Ti, en la fase actual, slo es de
aplicacin en Dicotiledneas, ya que la bacteria no infecta a las Monocotiledneas (cereales).
Los japoneses han comercializado un pptido herbicida producido por bacterias del gnero Streptomyces.
La insercin de los genes nif, posibilita el aprovechamiento del nitrgeno atmosfrico por parte de algunas
bacterias y cianobacterias, en el genoma de plantas superiores.
La industria agroalimentaria constituye uno de los campos predilectos de la ingeniera enzimtica (el 70
% de los enzimas del mercado son el resultado de este sector industrial). En la actualidad, el mercado se
halla muy especializado, tanto en lo referido a los enzimas como en el de las industrias consumidoras. La
industria del almidn (-amilasa, glucoamilasa y glucosa isomerasa), mientras que el cuajo se emplea
especialmente en las industrias lcteas.

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La hidrlisis enzimtica del almidn se lleva a cabo mediante el Bacillus licheniformis (posee una -amilasa
muy eficaz); la glucosa se transforma en fructosa (glucosa isomerasa) que tiene mayor poder edulcorante.
Esta investigacin fue consecuencia del encarecimiento del mercado del azcar en 1974.
El cuajo (necesario en las industrias lcteas) es el nico enzima de origen animal que se utiliza en gran
escala. Se extrae del cuajar de la ternera, permite la coagulacin de la leche al hidrolizar especficamente un
enlace peptdico de la casena. Actualmente se puede sustituir por proteasas de Mucor sp., de Endothia
sp., etc. (el 40 % de los quesos de EE. UU. se fabrican con estos enzimas). Recientemente se ha
conseguido aislar el gen responsable de la sntesis de la quimosina (uno de los constituyentes del cuajo);
la comercializacin del enzima fabricado por bacterias recombinantes es ya un hecho.
Produccin de aminocidos (para aditivos). El edulcorante artificial aspartane es un dipptido de cido
asprtico y fenilalanina (aa que se producen por fermentacin). Otros aminocidos que tambin se
producen son: cido glutmico, lisina y triptfano. Tambin se producen microbiolgicamente varias
vitaminas, que incluyen riboflavina, vitamina B12 y cido ascrbico (vitamina C).
33.4.5. Aplicaciones en la minera e industria (descontaminacin)
Algunos minerales contienen cantidades apreciables de metales preciosos (oro, plata, platino) o de inters
econmico (magnesio, molibdeno). Hay ya aplicaciones industriales para el caso de algunos de estos
metales; por ejemplo, las aguas de lavado de extracciones mineras ricas en uranio pasan a travs de
fermentadores que contienen algas unicelulares (Chlorella) y bacterias (Streptomyces) inmovilizadas sobre
soportes porosos. El rendimiento de la recuperacin es de un 90 - 100 %.
A partir de bacterias (E. coli), por ingeniera gentica, se pueden fabricar protenas animales que quelan los
metales (metalotioninas), y que tienen gran afinidad por el oro, la plata o el plomo. El sustrato puede ser el
agua de lavado de extracciones mineras o incluso el agua del mar. Esta tcnica se sita en la frontera entre
la valorizacin de desechos mineros y la descontaminacin, en el caso de que los metales fijados por las
bacterias sean nocivos (Plomo).
Una aplicacin importante es la disminucin de la contaminacin ocasionada por procesos industriales:
Mediante procesos de fermentacin se podra atenuar la contaminacin atmosfrica causada por fbricas
de purificacin de cobre; el SO2 sera transformado en H2SO4. As se evitara la lluvia cida, importante
factor contaminante en los pases industrializados.
La utilizacin sistemtica de fermentaciones bacterianas para la descontaminacin del medio ambiente est
a la orden del da; permitira eliminar toda clase de factores contaminantes de origen orgnico: desechos
urbanos, residuos de industrias agroalimentarias, excrementos, pulpa de madera, paja, etc. Estos desechos
podran transformarse en biogs (CH4 + CO2), o bien servir para la nutricin de microorganismos para la
produccin de protena de organismo unicelular (POU), que se utilizan para alimentar el ganado.
33.4.6. Las bacterias en la investigacin bsica de gentica
Alguno de los hitos ms importantes de la moderna biologa se han alcanzado usando las bacterias
como material biolgico experimental. A ttulo de ejemplo sealamos:
El ADN es la molcula portadora de la informacin biolgica. La prueba definitiva la aportaron Avery,
McLeod y McCarty en 1944, investigaron las transformaciones bacterianas que fueron observadas por
Griffith (1928, un neumococo denominado Diplococcus pneumoniae). Demostraron experimentalmente que
slo los extractos de bacterias S muertas que contenan ADN eran capaces de infectar.
Replicacin semiconservativa. Las pruebas experimentales apoyan la validez de este modelo tanto para el
cromosoma bacteriano de E. coli (experimento de Meselson y Stahl, y de Cairns) como para el de
eucariontes (experimento de Taylor).

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Cairs (1963) observ la duplicacin del ADN de E. coli en un medio con timina marcada con tritio (H3).
Ratific la teora semiconservativa y descubri la existencia de un punto concreto como origen de la
replicacin del ADN bacteriano.
El modelo opern. El descubrimiento de cmo se controla la sntesis de ARNm se inici a partir del
llamado "efecto glucosa" observado por J. Monod (1947). Si a un medio de cultivo bacteriano con E. coli
y lactosa se aade glucosa, el nivel de la enzima -galactosidasa disminuye sensiblemente.
Posteriormente (aos 50), Jacob y Monod, trabajando con E. coli, descubrieron que, en experimento
anterior, eran tres los enzimas que intervenan. De este hecho se concluye que el sustrato (glucosa) no
slo reprima una enzima, sino todo el conjunto de enzimas que intervienen en una misma va metablica.
En 1961, Jacob y Monod propusieron un modelo denominado opern que explica cmo se efecta el
control de la biosntesis proteica
Existen cuatro pasos principales en la mayora de los trabajos de ingeniera gentica:
1) Aislar una secuencia de nucletidos (gen) de inters.
2) El segmento se une a un "vector de clonacin", como un fago o un plsmido.
3) El vector se introduce en una clula husped (con frecuencia una bacteria) donde se replica muchas
veces mediante la tcnica de la clonacin.
4) El gen o su producto protenico se aisla a partir de un clon.
Son dos los propsitos que se persiguen con la clonacin:
a) Para obtener grandes cantidades de un segmento para secuenciacin de ADN (esto permitira
detectar las diferencias entre un gen normal y otro anormal).
b) Para producir grandes cantidades de un producto gnico (ARN o protena, producir en grandes
cantidades una protena de una cpsida viral para usarla como vacuna, etc.).
La ingeniera gentica, por tanto, consiste en modificar el patrimonio hereditario de un organismo
introduciendo en su haber gentico uno o varios genes pertenecientes a un organismo de una especie
distinta. El proceso se puede utilizar tanto con bacterias como con clulas animales o vegetales.
En el primer caso, el gen extrao no se inserta sobre el cromosoma bacteriano, sino sobre un plsmido
(anillo de ADN portador de un mensaje gentico). El principio de la reproduccin por clonaje consiste en
extraer un plsmido de una bacteria y, para facilitar la insercin del ADN en el ADN vector, es conveniente
cortar ambos con la misma enzima de restriccin (cortan secuencias llamadas palindrmicas dando
cortos oligonucletidos a ambos lados del corte, de modo que uno es complementario del otro). Esto
facilita la formacin de ADN recombinante. El plsmido, tras la insercin del gen extrao, se vuelve a
cerrar mediante otro enzima (ligasa). El plsmido modificado se introduce en la bacteria. Como las
bacterias proliferan rpidamente, es posible obtener con este procedimiento numerosos ejemplares del
gen en poco tiemp o.
Cuando no se conoce la estructura del gen que se busca se puede proceder de dos maneras:
a)

Partiendo de una clula especializada (por ejemplo, la que produce una hormona). Se sabe que
contiene muchas molculas de ARNm necesario para la sntesis de la hormona. Se aisla unas de estas
molculas y se utiliza el enzima transcriptasa inversa para producir ADN a partir de una hebra de
ARNm. Este ADN se denomina copia (ADNc).

b) Se trata de clulas en las que se expresan varios genes. Entonces estamos ante diferentes ARNm y
otras tantas protenas correspondientes a ellos. No es posible conocer el ARN responsable de cada
protena, por lo que no es posible utilizar los ARN como sondas, ya que no se podran relacionar los
genes a los que se unieran con una de las protenas presentes en la clula.
Idntico problema ocurre cuando la protena fabricada por la clula es producida en pequea cantidad; en
tal caso, en efecto, es casi imposible detectar o aislar el ARNm responsable de esta microproduccin y
hacer de l una sola sonda. La solucin es construir la sonda a partir de la protena. Esta tcnica se
est experimentando en California. Utiliza un aparato llamado secuenciador que analiza los

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1995 Miguel Snchez Marn

Oposiciones Secundaria Biologa y Geologa


Temario especfico - Tema 33

aminocidos que componen las protenas, despus reconstruye el ARNm que origina su sntesis. Slo
queda fabricar una sonda en ARNm que permita localizar el ADN del gen implicado en la sntesis de la
protena descifrada.
Hay otro campo en el que los investigadores de Instituto Tecnolgico de California estn trabajando, el
de la sntesis de los genes. Se trata de reconstruir y ensamblar los nucletidos que los componen. Tal
procedimiento tiene la ventaja, frente al del clonaje, que permite modificar la disposicin de las bases y con
ello mejorar los rendimientos del gen o bien conferirle nuevas posibilidades.
En la mayora de los casos se utiliza la bacteria Eschirichia coli; los genes introducidos en su
patrimonio hereditario gobiernan la sntesis de protenas "tiles" para la industria o suponen un avance
para la investigacin mdica o biolgica. Para aumentar el rendimiento de la sntesis de protena
deseada se utiliza la tcnica denominada de amplificacin del gen, que permite obtener de una sola clula
hasta tres mil copias del plsmido modificado. La protena segregada se extrae, concentra y purifica por
va qumica a medida que se produce.
Los sectores de aplicacin de la biotecnologa son mltiples y variados.
Gracias a la ingeniera gentica, y de otras tcnicas, se pueden producir a escala industrial sustancias que
los organismos vivos slo sintetizan en cantidades infinitesimales, como el interfern, la hormona del
crecimiento humano o ciertos anticuerpos. Pero, al mismo tiempo, la industria farmacetica produce por
fermentacin un cierto nmero de sustancias de accin terapetica: antibiticos, vitaminas y hormonas
desde hace ya varios decenios. Los resultados obtenidos por cepas productoras mejoradas por seleccin
o mutacin han multiplicado el rendimiento de la produccin por 1000 o por 10.000 desde que, hace medio
siglo, se descubrieron los antibiticos.
Otros productos, en particular hormonas humanas, se han sintetizado por el mismo proceso: insulina,
hormona del crecimiento, neuropptidos, etc. La insulina humana es la primera hormona que se consigui
sintetizar por la E. coli (1978).
La insulina tiene dos cadenas de aminocidos (el pptido A con 21 y el B con 30). Una vez aisladas, las
dos secuencias de nucletidos se introducen por separado, mediante plsmidos, en dos estirpes diferentes
de bacterias, a nivel del opern lac. stas proporcionan en muy poco tiempo muchas bacterias portadoras
de esos genes. Al aadir lactosa al medio, las bacterias empiezan a sintetizar pptidos A o B. Luego se
retiran, purifican y se activan los grupos -SH para que interacten los dos pptidos y se forme la insulina
humana madura. Como el metabolismo bacteriano es muy elevado, esta va de obtencin ha resultado
rentable. Adems se trata de insulina humana en lugar de la porcina empleada hasta ahora.
La hormona del crecimiento es un nico polipptido de 191 aminocidos. Tambin se ha introducido en
bacterias gracias a un plsmido en el lugar regulado por el promotor del opern lac. Se emplea para tratar
algunos casos de enanismo. Puede tener gran inters en la produccin animal.
El interfern (IFN) es una protena de peso molecular entre 16.000 y 20.000, que contiene una cadena
glucosdica. Se aisl en clulas animales como respuesta a infecciones vricas. Esta sustancia limita e
incluso anula los efectos de la infeccin. Su aplicacin ha resultado eficaz en enfermedades vricas
(resfriados, hepatitis, herpes, rabia, etc.) y, en aplicaciones prolongadas, disminuye los efectos del cncer.
Se conocen tres tipos de interferones, segn el tipo de clulas a partir de las cuales se extrae. En la
actualidad se ha conseguido aislar el ADN responsable del interfern en leucocitos y fibroblastos
infectados. Este ADN se ha introducido en colibacilos y, aunque la tasa de obtencin es muy baja debido
a la inestabilidad de esta molcula, se espera que en el futuro se mejorar el rendimiento.
La ingeniera gentica tambin se aplica en el tratamiento de algunas enfermedades. La talasemia (propia
de poblaciones humanas de la cuenca mediterrnea) es un grupo de enfermedades relacionadas con la falta
total o parcial de ARNm de la globina o de la globina , provocando una anemia ms o menos grave. Se
debe a alteraciones en los genes de las globinas. Su tratamiento consiste en retirar clulas de la mdula
sea del enfermo, mediante una puncin, e introducir en ellas el gen correcto y volverlas al torrente
sanguneo para que se implanten de nuevo en la mdula sea.

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