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Cromatografia de Processo
1. Introduo e Histrico
A cromatografia um processo fsico
pelo qual uma mistura de produtos qumicos
pode ser separada e se tornou rapidamente
uma das tcnicas analticas mais bem
sucedidas, tanto em laboratrio como em
linha com processo.
O processo cromatogrfico trabalha de
um modo descontinuo, semelhante a uma
distilao em batelada. Uma pequena
amostra tomada e os componentes
individuais da mistura so retidos em uma
coluna em diferentes larguras, como se eles
tivessem sido distilados um a um. Por causa
de sua natureza, a separao normalmente
ocorre de 1 a 10 minutos. Quando os
componentes emergem do processo, eles
so individualmente medidos e relatados.
Note que isto um processo fsico;
nenhuma mudana qumica envolvida. Na
pratica, usualmente se trata de gases
dissolvidos em lquidos ou sendo atrados
para a superfcie de materiais slidos.
A inveno da cromatografia atribuda
ao trabalho do bioqumico russo Tswett, que
estava interessado na substncia de cor
verde encontrada nas plantas. Em 1903 ele
escreveu um relatrio sobre a separao de
diferentes pigmentos da planta que eram
visveis como faixas coloridas quando uma
soluo de clorofila era lavada por um
solvente conveniente atravs de um tubo
contendo um adsorvente, como um p de
giz. Em um paper publicado em 1906,
Tswett chamou esta tcnica de
Cromatografia de Processo
A cromatografia hoje reconhecida
como uma das mais importantes
ferramentas analticas, com a grande
vantagem de fazer a separao e o clculo
quantitativo de componentes em uma
amostra de modo rpido e simples.
2. Tipos de Cromatografia
A base da cromatografia que uma
amostra da mistura a ser analisada
transportada atravs de um meio esttico
por um portador mvel. Os vrios tipos de
cromatografia so classificados pela
natureza do portador (ou fase mvel) e a
natureza do meio esttico (ou fase
estacionaria). H portanto quatro
possibilidades possveis:
Fase mvel
Lquida
Lquida
Gasosa
Gasosa
Fase estacionria
Lquida
Slida
Lquida
Slida
LLC
LSC
GLC
GSC
Fig. 1-1 Cromatgrafo gs-lquido bsico
3. Cromatografia Gs-Lquido
Os componentes bsicos de um
cromatgrafo simples gs-lquido so
mostrados na Fig. 1.1. O gs portador, que
normalmente nitrognio, hlio ou
hidrognio, flui continuamente atravs da
coluna, onde ocorre a separao. As
amostras, que podem ser gs (volume tpico
de 0.5 mL) ou lquido (volume tpico de 1
L), so injetadas periodicamente no gs
portador por uma vlvula especialmente
projetada chamada de vlvula de injeo da
amostra. As amostras lquidas devem ser
Cromatografia de Processo
champanhe ou uma lata de cerveja. Mais
importante, a quantidade de gs carbnico
dissolvido excede muito a quantidade de ar
que pode ser dissolvido na gua. Este
segundo fato importante, que gases
diferentes se dissolvem em quantidades
diferentes no mesmo lquido a base
fundamental da cromatografia a gs.
Para explicar o mecanismo, considere
como um gs se comporta em um modelo
do processo cromatogrfico. Imagine-se um
lquido e algum ar em um vaso
completamente fechado, como mostrado na
Fig. 1.2a e pense no que ir acontecer se
algum bixido de carbono (ou outro gs) for
adicionado ao ar. O bixido de carbono
comea a dissolver mas logo alcana um
ponto onde a tendncia de dissolver mais
balanceada exatamente com a tendncia de
algum gs j dissolvido sair da soluo.
Esta condio de equilbrio mostrada na
Fig. 1.2b.
A relao de quantidade de bixido de
carbono em cada fase no ponto de
equilbrio conhecida como coeficiente de
partio K:
K
Cromatografia de Processo
fechados, similares aqueles considerados
na Fig. 1.2. No momento, o interesse est
restrito ao que acontece se um gs puro,
como o bixido de carbono, injetado no
gs portador. O gs portador fluindo
transporta a amostra no primeiro
compartimento. Neste ponto, imagine-se
que a vazo do gs de arraste parou e o
compartimento selado. Agora, tem-se uma
situao similar anterior. Logo se
estabelece o equilbrio com metade da
amostra dissolvida no lquido e a outra
metade permanecendo na fase gasosa,
como mostrado na Fig. 1.3a. Uma vez
atingido o equilbrio, assum-se que a vazo
do gs de arraste restabelecida,
permitindo mover uma distncia equivalente
a um compartimento e parando de novo
para outro estudo. A amostra na fase
gasosa carregado com o gs de arraste
para o segundo compartimento, perturbando
o equilbrio e levando formao de dois
novos equilbrios, com mostrado na Fig.
1.3b.
Cromatografia de Processo
picos reais obtidos do cromatograma; as
medies necessrias para fazer isto so
mostradas na Fig. 1.5. Os compartimentos
so conhecidos como pratos tericos,
anlogos ao pratos tericos de uma coluna
de distilao. O nmero de pratos tericos
(N) calculado nas medies do
cromatograma pela expresso:
tR
N 5,54
W
0,5
onde
tR o tempo de reteno da injeo e
W 0,5 a largura do pico meia altura.
Embora isto seja somente um modelo
descontinuo de um processo contnuo, til
e poderoso. Muita da teoria avanada est
relacionada como os outros fatores
operacionais afetam o nmero de pratos
tericos. Isto porque a teoria que ajuda a
projetar colunas com mais pratos levar a
picos mais estreitos e a uma separao
mais eficiente dos componentes. Por este
motivo, N usado como uma medida da
eficincia da coluna.
5. Cromatografia Lquida
A cromatografia lquida conhecida h
mais tempo que a gasosa, porm, seu uso
limitado ao laboratrio. Atualmente h
grandes pesquisas na cromatografia lquida;
hoje ela est no estagio que a gasosa se
encontrava h 30 anos atras. Mesmo assim,
a cromatografia lquida uma tcnica
analtica de laboratrio bem definida.
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6. Equipamentos da CG
Neste seo, os componentes
individuais do sistema de cromatografia gslquido de processo mostrado na Seo 1.3
so discutidos com mais detalhes, em
particular os conceitos bsicos usados no
projeto.
Cromatografia de Processo
elemento de aquecedor e termostatos de
segurana fornecem a proteo em caso de
defeito do controlador. Os fornos aquecidos
a vazo no so comuns desde que eles
no podem operar em alta temperatura.
Para analise de temperatura moderada, eles
proporcionam uma instalao barata e
segura.
Controle Programado de Temperatura
Para a operao do GC de laboratrio, a
programao de temperatura muito usada,
principalmente para analise de
componentes com grande faixa de ebulio.
Com esta tcnica, a temperatura do forno
gradualmente aumentada de modo
controlado aps a injeo da amostra, para
aumentar a velocidade da separao do
componentes com alto ponto de ebulio. A
tcnica pouco usada em GC, embora
vrios fabricantes ofeream esta opo.
possvel que com a crescente confiabilidade
dos circuitos sequenciadores e de controle,
os GCs com temperatura programada se
tornem mais atraentes e usados.
Segurana dos fornos de GC
essencial saber e entender os perigos
de segurana inerentes na situao onde
amostras inflamveis so conduzidas em
um invlucro aquecido, como um forno de
GC. H duas fontes de concentrao de
gases explosivos:
1. a atmosfera externa circundante em si
2. o vazamento da amostra dentro do
invlucro.
Assim muito importante que o
analisador no seja uma fonte de ignio
em condies normais e anormais. As
fontes potenciais de ignio incluem os
circuitos eltricos, a alta temperatura
causada pelo aquecedor de temperatura e
as superfcies quentes durante a operao
normal.
A proteo contra a ignio de fontes de
energia eltrica usualmente feita com
conduites convencionais especificados para
os gases constituindo o perigo. O NEC
especifica os gases pelos grupos A, B, C e
D. Outras normas nacionais so similares,
embora os grupos sejam diferentes.
importante entender que o perigo causado
Cromatografia de Processo
quente com ar frio antes de alimenta-lo no
forno. Um problema desta mistura que a
difuso do ar do forno no ar quente do
aquecedor pode provocar falha do ar
comprimido. Outro problema pode ser a
capacidade termal do aquecedor, fazendo
as superfcies de contato superaquecerem
aps o desligamento do ar e da
alimentao. Cada projeto individual deve
ser testado cuidadosamente na condio e
de desligamento para garantir a segurana.
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hlio. Isto melhor feito antes da instalao.
Quando se faz analise de componentes
com menos de 1000 ppm ou se usa uma
coluna de slido ativa, deve-se usar sempre
um tubo secador contendo filtro molecular
na linha do gs de arraste, prxima do GC.
Um sistema com dois tubos, com vlvulas
de bloqueio (shut-off) permite um secador
ser trocado enquanto o outro est em uso.
O secador usado pode ser reativado pela
purga com hlio ou nitrognio puro,
aquecido a 300 oC.
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Cromatografia de Processo
amostra constante para se ter resultados
reprodutveis. Para garantir bom
desempenho e repetibilidade do GC, o
volume total da amostra deve ser injetado
na coluna em perodo de tempo desprezvel
comparado com a largura mais estreita do
pico esperado. Normalmente se quer a
"injeo de plug". Tambm se procura
colocar a vlvula de amostragem o mais
perto possvel da coluna, para diminuir o
volume morto entre a vlvula e a coluna.
As vlvulas de injeo da amostra so
dispositivos mecnicos e devem ser
projetadas cuidadosamente para ter uma
vida de operao adequada depois de um
ritmo rpido e repetitivo de analises. Note
que um ciclo de analise de um minuto
requer cerca de 500 000 operaes da
vlvula por ano e que o ambiente severo do
processo pode reduzir este desempenho da
vlvula abaixo do tempo de vida de
operao especificado para as condies
ideais.
Os tipos de vlvulas de injeo de
amostra so os seguintes:
Vlvula rotatria
Uma das primeiras vlvulas de injeo
de amostra usadas em GC de processo foi
a do tipo rotatrio, mostrada na Fig. 1.9. Na
condio de repouso, a amostra do
processo flui atravs do volume medido,
enquanto o gs de arraste flui na coluna. A
vlvula gira cerca de 60 graus quando
energizada, causando o gs de arraste
introduzir o volume medido da amostra na
coluna. Aps poucos segundos, a vlvula
desenergizada para reencher o volume de
amostra, aprontando-o para a prxima
injeo.
Uma vlvula rotatria para injeo de
lquido mostrada na Fig. 1.10. Esta vlvula
rota cerca de 90 graus para operar. O
volume medido neste caso uma pequena
abertura no roto. Todas vlvulas de amostra
tem um volume de entrega nominal; a sua
repetibilidade que conta, no a exatido do
volume.
Vlvula Deslizante
Este tipo de vlvula de injeo de
amostra o mais popular atualmente; um
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Cromatografia de Processo
pisto usada principalmente quando se
tem um grande volume de amostra.
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Cromatografia de Processo
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Cromatografia de Processo
Operao das Vlvulas
As vlvulas mencionadas podem ser
atuadas remotamente por solenides,
pneumtica ou atuadores de motor eltrico.
A variedade pneumtica a mais comum e
requer a alimentao de 15 a 60 psig.
Normalmente, vlvulas solenides de trs
vias, a prova de exploso, so usadas para
controlar o ar para o cilindro operador. A
maioria das vlvulas usa uma mola de
retorno; a minoria usa operadores de ao
dupla.
Materiais de Construo
A seleo dos materiais de construo
das vlvulas de injeo de amostra
importante. Eles devem ser compatveis
com a corroso ou outras formas de ataque
por qualquer substncia qumica na
amostra, nem devem catalisar alteraes
qumicas dentro da amostra em si. Em vista
da possibilidade de vazamento da amostra,
o mesmo critrio se aplica aos materiais
externos de construo. As vlvulas de
amostra so dispositivos de preciso, que
empregam superfcies opticamente planas
com passagens muito pequenas. Materiais
de uso comum na construo da planta
pode durar poucos dias em uma vlvula de
amostra.
Em muitos casos, o ao inoxidvel e o
PTFE so convenientes, mas h excees.
Por exemplo, o ao inoxidvel atacado por
cloro e acido clordrico. Para estes
compostos, deve-se usar hastelloy, tntalo
ou apenas TPFE. PTFE excelente para a
resistncia qumica, mas macio e entra em
extruso sob presso. Ele tambm sujeito
penetrao de alguns lquidos, como
estireno, causando o bloqueio da passagem
de gs, alterando o volume da amostra.
Muitas vlvulas usam vidro com PTFE, que
oferece melhor estabilidade dimensional
mas pior resistncia ao ataque d lquidos
orgnicos. Uma vlvula usa duas placas
metlicas com uma membrana fina de TPFE
entre elas para agir como selo e lubrificante.
Cermica com alumina fundida um novo
material para vlvulas deslizantes, pois
quimicamente inerte, duro e pode ser polido
quase perfeitamente. O problema a ruim
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Cromatografia de Processo
a relao das concentraes de dois
componentes e como a relao cancela os
erros, este mtodo perfeitamente valido e
muito mais simples do que tentativa de
controlar o volume da amostra em uma
presso abaixo da ambiente.
Injeo da Amostra de Lquido
Para amostras lquidas, o objetivo
injetar aproximadamente a mesma
quantidade molar da amostra como na
injeo de gs, seguida por uma
vaporizao rpida da amostra. Isto requer
a medio precisa de volumes muito
pequenos de lquido. Os volumes de
amostra lquida usualmente ficam entre 0.5
a 10 microlitros. A amostragem de lquido
mais difcil que a de gs. Jatos do processo
que podem ser mantidos facilmente em
estado de vapor devem ser vaporizados
antes da amostra. Amostras com ponto de
ebulio acima da temperatura da coluna
devem ser injetados na fase lquida.
Quando se injeta lquido, importante
que a presso da amostra seja
suficientemente alta para evitar formao de
bolhas de gs no lquido quando a amostra
aquecida at a temperatura do analisador,
desde que mesmo uma pequena bolha tem
um efeito desastroso no volume da amostra
injetada. As vlvulas de amostra lquida so
especificadas para presso de at 300 psig.
Porem, no prudente tentar fazer injeo
de amostra lquida acima de 135 psig,
desde que todas as vlvulas tem uma
tendncia a falhar quando usadas
repetidamente em condies to adversas.
O lquido que chega do processo deve
ser pre-aquecido para a temperatura da
vlvula de amostra antes de entrar na
vlvula. Muitas vezes se pensa que a
temperatura da vlvula de amostra deveria
estar acima do ponto de ebulio da
amostra de modo que a amostra se
vaporizasse quando injetada. Na prtica,
porem, boas injees podem ser obtidas em
temperaturas da vlvula 100 oC abaixo do
ponto de ebulio. Temperatura mais baixa
age favoravelmente, pois ela aumenta a
separando, prolongando a vida das colunas
e vlvulas e evita que as amostras se
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Cromatografia de Processo
mar) e melhor para separar compostos
qumicos polares.
Ambos os tipos de suporte so
disponveis em vrios tamanho mesh e
tratamentos qumicos. Para colunas de
dimetro de 1/8", normalmente 80-100 ou
100-120 mesh, o quanto maior o tamanho
mesh menor o tamanho da partcula.
Partculas menores geralmente fornecem
maior eficincia na separao mas
requerem maior presso do gs de arraste
para conseguir a mesma vazo do gs de
arraste.
O objetivo do tratamento qumico do
suporte melhorar sua inrcia. H dois
tipos:
1. lavagem a acido (AW)
2. tratada com silicone (DMCS)
Coluna slida ativa
Estas colunas so cheias de um slido
granulado com rea de grande superfcie. A
separao ocorre como resultado das
atraes variveis das molculas do gs
para a superfcie do slido (adsoro). As
colunas slidas ativas so convenientes
para a separao de apenas alguns gases.
Elas tem a tendncia de adsorverem
permanentemente as molculas mais
pesadas (principalmente gua) e seu uso
tem diminudo em favor dos polmeros
porosos.
O nico slido ainda com uso regular o
filtro molecular que valioso por sua
habilidade de separar oxignio, argnio,
nitrognio, hidrognio e metano. Para
proteger a coluna de molculas
desativantes, usa-se uma pr coluna,
usualmente de Poropak-T.
Enchimento sinttico
O mais popular destes novos
desenvolvimentos o Poropak, que
consiste de esferas de poliestireno. Suas
propriedades superam as fases slidas e
lquidas ativas tornando o Poropak til para
analise de gases permanentes e
hidrocarbonos leves. As novas colunas
devem ser condicionadas em 200 oC e em
baixa vazo do gs de arraste. Cada tipo
6.5. Detetores
O detetor responde aos componente que
saem das colunas e fornece um sinal
eltrica que pode ser processado para
produzir os dados da concentrao dos
componentes. Na prtica, todos detetores
em uso operam baseados em princpios
diferentes, isto , mostram uma resposta
constante para o gs de arraste, geram um
sinal relativamente grande sempre que um
componente se separa da coluna e retorna
para a linha-base de regime depois que o
componente passou completamente.
Em GC de processo, as exigncias para
a estabilidade a longo prazo em um
ambiente hostil e sensitividade generalizada
para uma grande faixa de produtos
qumicos tem limitado a escolha dos
detetores aos tipos de condutividade termal
(TCD), ionizao de chama (FID) e de
chama fotomtrica (FPD). Os detetores de
fotoionizao (PID) so usados
principalmente em monitorao ambiental.
Qualquer detetor usado em um GC de
processo deve responder rapidamente e
preferivelmente de modo linear s variaes
na concentrao dos componentes. A
resposta no deve ser muito sensvel s
variaes nos parmetros de operao,
como vazo do gs de arraste e
temperatura. A calibrao em base semanal
deve ser suficiente para manter boa
preciso. A resposta da linha-base deve ser
estvel durante uma analise e no deve
variar fora dos limites do sistema de
compensao eltrica por longos perodos
de tempo (meses). A construo fsica deve
ser simples, barata e capaz de suportar
vibrao e longa exposio ao ambiente
industrial. Instalado, deve estar de
conformidade com as normas de segurana
eltrica aplicveis ao local do usurio.
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Cromatografia de Processo
Detetor de Condutividade Termal
O TCD o detetor mais usado para GCs
de processo. As principais razes de sua
popularidade so histricas e econmicas.
O TCD possui duas vantagens:
1. sensvel maioria dos componentes
encontrados da amostra exceto ao gs
de arraste
2. muito simples e barato, requerendo
somente um circuito eltrico simples.
H, porem, serias desvantagens, tais
como:
1. o elemento termal vulnervel queima
e sujeito aos efeitos de oxidao que
alteram suas caractersticas,
2. so sensveis ao choque e vibrao,
3. podem se tornar quebradios depois de
algum tempo em servio,
4. so muito sensveis temperatura,
resultando em desvio da linha-base e
calibrao, de modo que se torna
essencial um bom controle de
temperatura do forno,
5. a faixa dinmica linear restrita a cerca
de ordens de grandeza, que, embora
adequada para instrumentos antigos de
faixa fixa, limita sua utilidade com
circuitos modernos de faixa automtica.
Em vistas destas limitaes, se
questiona porque ainda o TCD to
popular. Antes de 1960 ele era o nico
detetor disponvel. Ele foi submetido a
grande pesquisa e desenvolvimento neste
perodo por causa do rpido crescimento do
GLC e embora sua resposta fosse explicada
pobremente pela teoria, seu projeto prtico
era bem entendido. Acima de tudo, ele era
simples e barato. A geometria da clula do
detetor foi sujeita a considervel
desenvolvimento. Os primeiros trabalhos
produziram projetos lineares, a semidifuso
e a difuso. Estes eram compromissos entre
resposta rpida (linear) e alta estabilidade
(difuso). O projeto de difuso expe o
elemento ao efeito termal de um
componente da amostra sem o contato
fsico direto e usado em medio de
gases corrosivos, como o cloro. Exemplos
so mostrados na Fig. 1.16.
Atualmente, o desenvolvimento foi
concentrado em reduzir o volume interno do
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Cromatografia de Processo
energia da alimentao como a varivel
medida. As vantagens so maior vida til e
melhor tempo de resposta.
Na dcada de 1960, os termistores
pareciam ser uma promessa como a base
para detetores pequenos e sensveis na
GC. Porem, apareceram muitos problemas
prticos:
1. o termistor possui a maior sensitividade
em baixas temperaturas,
2. no estvel durante longos perodos
de tempo, principalmente com
hidrognio,
3. possui uma caracterstica no-linear.
Como resultado, o uso dos fios resistivos
predominou sobre o uso de termistores.
Para aplicaes de processo, so usados
metias resistentes corroso como platina,
nquel, platina-irdio, tungstnio-rnio. Outro
enfoque foi revestir o elemento com ouro,
PTFE, vidro, para melhorar o tempo de
resposta.
Quando se analisam amostras com
cloro, acido clordrico ou outros produtos
corrosivos, conveniente evitar que o
material corrosivo entre no detetor, pelo
chaveamento da coluna. Se os gases
corrosivos devem ser medidos diretamente,
uma geometria de clula de difuso reduz o
contato direto com os elementos termais e
prolongam sua vida til.
A configurao das vazes do gs de
arraste atravs do TCD merece ateno
especial. Os elementos de referencia devem
ser idnticos para os elementos de medio
e expostos exatamente nas mesmas
condies. TCDs para GLCs de processo
so usualmente do tipo com quatro
elementos. Pode-se usar inteligentemente
todos os quatro elementos com o acesso
separado de cada um. Por exemplo, um
detetor com oito portas pode ser usado para
medir hidrognio em arraste de nitrognio
de um lado e metano e bixido de carbono
em arraste de hlio em outro lado.
Essencialmente isto mistura dois detetores
em um e permite o uso de nico circuito de
processamento de sinal, evitando a
resposta anormal para o hidrognio com o
gs de arraste hlio. Um enfoque
semelhante pode ser usado para medir
oxignio e hidrognio em um lado e bixido
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Cromatografia de Processo
muitos casos onde, por falta de
padronizao, os usurios especificam o
FID para todas as aplicaes, desde
medio de percentagem como de ppm. A
sensitividade e linearidade inerentes do FID
fornecem uma faixa dinmica que pode ser
explorada pelo processamento de dados por
computador para fornecer medies
precisas de 10 ppm at 100%. Sua alta
sensitividade e pequeno volume interno
permitem o uso de volumes de amostra
muito pequenos e colunas com pequeno
dimetro, conseguindo-se separaes
rpidas e altamente eficientes.
Os seguintes pontos devem ser
considerados no projeto de um FID;
1. o jato do queimador deve ser resfriado
por um dissipador de calor para evitar
que ele fique muito quente. Se isto
acontecer, os componentes podem ser
carbonizados antes de atingirem a
chama e os depsitos de carbono
resultantes na boca do jato causaram
sinais de rudo.
2. se o jato usado como um eletrodo, ele
deve ser positivo, pois isto fornece um
melhor sinal.
3. a melhor geometria para o coletor em
forma de um cilindro, que d a mxima
coleta de ons e o maior nvel de sinal.
Os eletrodos positivo e negativo devem
ser separados de 6 mm.
4. o detetor deve ser sintonizado pelo
ajuste da vazo de hidrognio para
mxima resposta, otimizando a
temperatura da chama para a produo
de ons.
5. o detetor deve ser operado em uma
temperatura do forno suficientemente
alta para evitar que a gua produzida
pela combusto condense na clula.
6. o detetor deve ter um vent no fundo, de
modo que qualquer gua condensada
quando o forno estiver frio seja drenada
para fora. O dreno (vent) do detetor
deve ser climatizado para evitar
congelamento e entupimento, em climas
muito frios.
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Cromatografia de Processo
7. Engenharia das Colunas
A teoria bsica da GLC de processo foi
explicada e foi mostrado como a separao
na coluna cromatografia conseguida. Este
captulo trata dos conceitos fundamentais
do que conhecido como "engenharia da
coluna" e resume os vrios parmetros que
devem ser ajustados para se obter a
mxima eficincia da coluna. Para fazer
isto, deve-se primeiro entender o significado
da interferncia do pico, resoluo e
eficincia da fase liquida e a eficincia da
coluna e como eles esto interrelacionados.
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Cromatografia de Processo
7.2. Eficincia da Fase Lquida
Os fatores que afetam a separao
entre picos podem ser deduzidos do modelo
do processo cromatogrfico descrito
anteriormente. Eles so:
1. A identidade de dois picos, isto , sua
solubilidade na fase lquida.
2. A fase lquida em si.
3. A temperatura da coluna.
4. A presso da coluna.
5. A vazo atravs da coluna.
6. A quantidade de fase lquida (%) na
coluna.
Para saber exatamente o que a fase
lquida est fazendo em termos de
separao de componente, deve-se
aprender a ler o cromatograma. Seja o
exemplo da Fig. 1.22. Os dois componentes
A e B elutem em 8 e 10 minutos,
respectivamente, em relao ao tempo de
injeo da amostra. O pico de ar elute em 1
minuto. O componente tem somente duas
opes:
1. se move na velocidade do gs de
arraste (tempo morto da coluna) ou
2. se dissolve no lquido (tempo no lquido).
Assim, o tempo do pico do ar igual ao
tempo morto da coluna para a vazo
particular do gs de arraste. O tempo em
frente do pico do ar no tem nada a fazer
com a fase lquida, mas a fase lquida
totalmente responsvel pelo tempo aps o
pico do ar.
solubilidade de B
so lub ilidade de A
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Cromatografia de Processo
7.3. Eficincia da Coluna
Tendo otimizado a eficincia da fase
lquida, geralmente se conclui que as
tentativas adicionais de tentar aumentar a
separao dos picos, usualmente pelo
aumento do comprimento da coluna, resulta
em picos mais largos. Tambm, alguns
esquemas para reduzir a largura dos picos
resultam em menor separao dos picos.
De qualquer modo, a eficincia da coluna
depende mais do aumento da separao
dos pulsos do que da diminuio da largura
dos pulsos. Assim, uma coluna eficiente
pode ser definida como aquela que produz
picos que sejam estreitos com relao ao
seu tempo de reteno (tempo do pico da
injeo da amostra), isto ,
eficincia coluna
tempo reteno
l arg ura pico
ou
TR
W
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Cromatografia de Processo
Note que para a maior eficincia da
coluna, a altura do prato deve ser
minimizada.. Para colunas cheias, H
tipicamente de 0.3 a 1.0 mm e uma boa
coluna cheia pode ter os seguintes
parmetros:
L = 1.0 m
N = 2000
H = 0.5 mm
H o comprimento da coluna
teoricamente necessrio para se conseguir
um nico equilbrio gs-lquido ou
equivalente ao nmero de "compartimentos"
ou "referencias" no modelo original descrito
em 1.4.
A escolha da vazo do gs de arraste
fundamental na eficincia da coluna. A
vazo fcil de se ajustar, tem um efeito
direto, ajuda a dar um entendimento do
efeito da alterao do comprimento da
coluna, determina o tempo de analise e
considera os efeitos de todas as outras
variveis. Acima de tudo, h muita teoria
para explica-la. Van Deemter expressou a
dependncia da altura do prato (H) sobre a
velocidade linear do gs de arraste (u) com
a equao
2Dg 8u
K'
H 2dp
2
u
(1 K ' )2
2d2f
D
L
onde
= densidade do enchimento da coluna
dp = tamanho mdio da partcula de
enchimento
= fator de tortuosidade dos canais no
enchimento
Dg = difuso molecular da amostra na
fase gs
K = coeficiente de distribuio
K'= KFL/Fg
Fg = frao de volume do gs na coluna
FL = frao de volume do lquido na
coluna
df = espessura media estatstica do filme
do lquido estacionrio
DL = difuso molecular da amostra na
fase lquida
B
Cu
u
Um grfico da velocidade do gs de
arraste versus altura do prato, de acordo
com a equao simplificada de Van Deemter
mostrado na Fig. 1.24. A, que constante,
expressa como a largura de pico
aumentada devido s mltiplas trajetrias
do gs na coluna:
A = tamanho da partcula x fator de
enchimento
A pode ser mantida pequena reduzindo o
tamanho da partcula sem causar queda
excessiva da presso; 100/120 mesh
timo para a maioria das colunas. Tambm,
o fator de enchimento pode ser mantido
baixo usando mesh conveniente (close-cut)
e evitando pulverizao, vazios e perdas. A
obteno de enchimento uniforme mais
difcil para partculas menores, assim, existe
um tamanho timo de compromisso da
partcula. Para coluna com dimetro de 1/8",
o melhor tamanho 100-120 mesh.
23
Cromatografia de Processo
B
24
Cromatografia de Processo
critico para a confiabilidade da operao e o
pessoal de manuteno no entende como
eles funcionam ou como os ajustes devem
ser feitos. Normalmente, isto o resultado
de uma documentao pobre fornecida pelo
fabricante.
Exigncias para um Sistema Efetivo
O projeto da coluna ideal separaria os
componentes necessrios de todos os
outros componentes, mas esta
caracterstica somente conseguida com o
aumento da complexidade e diminuio da
confiabilidade. A soluo de compromisso
proteger a separao do efeito de outros
componentes provveis de ocorrer no
processo. mais importante que a
especificao do cromatgrafo de processo
inclua a composio da amostra, no
somente para a condio normal de
operao, mas para as condies com
distrbios. Isto permite ao projetista
considerar cada componente e as
interferncias possveis no trabalho de
engenharia da coluna.
Uma vez estabelecida a especificao
completa do produto, o prximo problema
decidir quais componentes devem ser
medidos. o usurio que decide isso e
define a complexidade do sistema de
coluna. O projetista da coluna atender a
analise especificada, usualmente fazendo
recomendaes alternativas somente se a
separao estiver muito difcil. No passado,
os usurios faziam muitas medies para
justificar o custo do analisador. Da
experincia, muitos aprenderam a balancear
o valor de cada medio com sua
contribuio para a complexidade final do
sistema do cromatgrafo.
Um nico componente, com uma ou
duas excees, pode ser facilmente
separado de todos os outros componentes
usando um sistema simples de coluna. Dois
componentes causaro dificuldades
raramente, mas a separao de trs ou
quatro componentes requer normalmente
um sistema mais complexo de coluna a no
ser que todos os membros so da mesma
serie homologa. Para separar mais do que
quatro componentes sempre se requer um
sistema complexo de colunas mltiplas.
25
Cromatografia de Processo
5. Mantm um bom desempenho
garantindo que a coluna no acumula
impurezas da amostra.
A idia bsica atras do backflush que
se um componente que leva T segundos
para fluir para frente da coluna, ele levar
exatamente T segundos para retornar para
a frente da coluna em backflush, como
mostrado na Fig. 1.25a para dois
componentes A e B. Assim, sob condies
ideais, a vazo durante backflush (B/F)
idntica para a vazo para frente, o pico B/F
exatamente recombinado aps igual
tempo e o pico B/F exatamente metade
eludo aps igual tempo. Assim, o backflush
deve ocorrer durante a primeira metade do
ciclo (idealmente 30-40% do ciclo), nunca
durante a ultima metade do ciclo.
Obviamente, se isto fosse feito, os
componentes iriam permanecer na coluna e
iriam interferir com a prxima analise.
26
Cromatografia de Processo
5. Relao do comprimento da coluna
backflush para o comprimento da coluna
principal.
6. Presso de sada da coluna.
O problema com a queda de presso na
coluna que quando ela alta, a relao
entre a presso da coluna e a distncia ao
longo da coluna no-linear. Este efeito
ilustrado na Fig. 1.26, assumindo uma
presso de entrada da coluna de, e.g. 75
psig e uma presso de sada de coluna de
e.g. 15 psia. Como uma regra, a coluna de
backflush deve ser o dobro em eficincia
que a coluna principal. Se as duas colunas
tem o mesmo enchimento, a coluna de
backflush deve ter um tero do comprimento
total da coluna.
A Fig. 1.27 mostra um exemplo de um
projeto ruim de sistema backflush. As duas
colunas so do mesmo tipo e possuem o
mesmo comprimento. Sempre que isso
ocorrer, sempre haver os seguintes
problemas.
1. O tempo perdido no fim do ciclo
esperando para os picos de backflush
desaparecem antes que a prxima
injeo possa ser feita.
2. Os picos medidos podem ser misturados
com o pico de presso de backflush.
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Cromatografia de Processo
Injeo da amostra com 10-portas e
backflush
Este sistema, mostrado na Fig. 1.28b,
usado somente para amostras de vapor.
Ele muito usado por economia, pois de
usa apenas ma vlvula para injetar a
amostra e fazer o backflush. O principal
problema com este sistema que a injeo
da amostra ocorre no topo do pico de
presso do backflush, tornando o sistema
menos flexvel para pesquisa de defeito.
Tambm, no se pode ter backflush com
baixa presso.
Balano da presso com backflush
Este sistema tem a vantagem de no
usar vlvulas de preciso; pois os volumes
entre as colunas podem ser eliminados. O
backflush feito em baixa presso, que
bom para remover componentes fortemente
retidos. O maior problema que o sistema
requer ajustes mais rigorosos. Ele se baseia
em uma presso intermediria constante;
assim, uma pequena variao na resistncia
da vazo ir perturbar a operao. Se a
alimentao para, h uma perna morta
(dead-leg) seria na conexo da coluna. O
regulador de presso deve ser capaz de
variar de uma vazo de gota at cerca do
dobro da vazo normal do gs de arraste,
em presso constante. Este sistema muito
usado na Europa e pouco usado nos EUA.
Corte da cauda por backflush
Este mtodo freqentemente usado
para separar um pequeno componente que
aparece no fim do componente principal
aps a eluio da coluna. Ele efetivo
somente se o rabo totalmente formado na
coluna 1 e se a coluna 2 retm fortemente o
componente de interesse. Para picos
menores que cerca de 1000 ppm, este
mtodo no satisfatrio e deve-se usar o
heart-cut. Em condies favorveis, o
sistema de corte do rabo por backflush
uma soluo elegante.
Regras bsicas para backflush
Da discusso anterior e dos exemplos,
possvel derivar algumas regras bsicas a
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Cromatografia de Processo
como mostrado na Fig. 1.29. Para bons
picos, a cauda somente um problema para
uma relao de tamanho de 100:1 ou mais.
Note que que uma cauda normal, mas um
pico triangular no o . essencial
reconhecer a diferena.
Como j mencionado, a tcnica de corte
de cauda backflush muito efetiva para
este tipo de separao mas o problema
maior que o tempo crtico. Se chavear
muito cedo, parte do pico perdida e se
chavear muito tarde, obtm-se uma linha
base ruim. Tambm, 1000 ppm o limite
para o corte da cauda backflush (B/F), fora
disso mais simples usar o heart-cut.
29
Cromatografia de Processo
na mesma velocidade na coluna 2 (o tempo
de reteno de cada componente). Se,
porem, houver dois cortes de componentes
grandes na coluna 2, haver dois
remanescentes, que iro se mover em
velocidades diferentes na coluna 2. Isto
pode tornar um pouco mais difcil a leitura
do cromatograma. Se um grande
remanescente (20:1 ou mais) cortado, ele
ir iniciar outra cauda na coluna 2. Neste
caso, o tempo de frente do corte deve ser
ajustado ou ento a coluna 1 pode no ter
potncia suficiente.
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Cromatografia de Processo
8.1. Avanos Recentes na Tecnologia
Sistemas a computador
Um dos avanos mais significativos na
tecnologia atual foi o advento do
microprocessador. Este dispositivo produziu
um efeito notvel na instrumentao em
geral, resultando no desenvolvimento de
sistemas digitais. A presena do
microprocessador foi mais marcante no
campo da instrumentao analtica, por
causa da complexidade inerente a este
ramo da instrumentao.
Um dos primeiros usos do
microprocessador no campo da analtica foi
na rea da cromatografia gasosa de
processo. A cromatografia gasosa uma
tcnica nica, em que um analisador
descontnuo (com um tempo de ciclo finito)
que requer meios de programar sua
operao para executar suas funes, como
injeo da amostra, chaveamento da
coluna, zero automtico e deteco de pico.
Alm disso, sua sada bsica um
cromatograma, que diferente da sada
convencional dos transmissores de vazo,
presso, temperatura e nvel da
instrumentao.
O primeiro cromatgrafo em linha
introduzido no fim da dcada de 1950 tinha
programadores com cams acionadas por
motor e microswitches para fazer o
chaveamento necessrio. Os picos dos
componentes eram mostrados em um
registrador usando um formato de grfico de
barras (bargraph). Era muito difcil para o
operador de processo ler, especialmente
quando eram medidos muitos componentes
e o cromatograma era muito diferente dos
registros de tendncia fornecidos por outras
variveis de processo. Quando a tecnologia
eletrnica avanou na dcada de 1960, os
circuitos de peak picking foram introduzidos
para fornecer sadas de tendncias para
componentes.
O prximo avano foi a introduo da
tecnologia de circuito a estado slido nos
programadores de cromatografia gasosa.
Isto eliminou as incertezas do tempo
associadas com o programador tipo cam e
tambm levou s tcnicas avanadas de
31
Cromatografia de Processo
7. A capacidade do microprocessador pode
ser usada para fazer rotinas de calculas
especiais, como densidade, energia,
mdia ponderada de tempos Podem ser
executadas rotinas mais sofisticadas de
anlise da resoluo de picos.
A cromatografia a microprocessador
atualmente est estabelecida e consolidada
na indstria e continua a se desenvolver em
sofisticao e complexidade. Os sistemas
mais modernos so muito poderosos e
flexveis e resolvem os problemas de
confiabilidade e redundncia atravs da
aquisio e apresentao de dados.
Cromatografia capilar
Outro desenvolvimento importante que
ocorreu no campo da cromatografia foi na
rea da tecnologia de coluna. Quase todo o
trabalho feito neste campo foi iniciado no
laboratrio, mas os resultados foram usados
para atualizar tambm o desempenho dos
cromatgrafos a gs em linha com
processo.
O primeiro cromatgrafo a gs de
processo usou colunas convencionais com
dimetro de 0,25", com uma habilidade de
separao limitada. Com o avano da
tecnologia de coluna, estas colunas foram
substitudas por outras com dimetro menor
(p. ex., 0,187 e 0.125") que resultou em
melhor resoluo do pico. Porem, h ainda
limitaes na resoluo e ainda h algumas
separaes de componentes difceis de
serem conseguidas com estas colunas.
As colunas capilares tem sido usadas
em laboratrio h muitos anos. Elas
fornecem uma excelente resoluo de
componentes, menor tempo de anlise e
executam separaes impossveis de serem
conseguidas em colunas convencionais. A
maior restrio no uso de colunas capilares
em cromatgrafo a gs de processo
devida principalmente ao grande volume
interno dos componentes, tais como injeo
da amostra e vlvulas de chaveamento da
coluna. Mesmo assim, a Siemens tem
usado colunas capilares com slica fundida
em seus cromatgrafos de processo
durante muitos anos, principalmente para
aplicaes de monitorao do ar ambiente.
Para evitar o problema do volume interno,
32
Cromatografia de Processo
9. Cromatografia Lquida em Linha
9.1. Desenvolvimento Histrico
Nos ltimos 30 anos houve um grande
desenvolvimento na tcnica conhecida
como cromatografia lquida de alto
desempenho (high performance lquid
chromatography, HPLC). Embora seja muito
difcil comparar a evoluo das vrias
tcnicas analticas usadas no laboratrio, o
crescimento da HPLC considerada por
muitos cientistas como algo sem paralelo no
campo da qumica analtica, mesmo quando
comparada com a cromatografia a gs.
O termo HPLC, como aplicado tcnica
atual, no implica que as tcnicas anteriores
no exibiam um alto desempenho. Na
realidade, todas as separaes feitas
tinham um alto desempenho. Porm, o
termo alto desempenho se referia alta
presso, desde que a mudana das
condies atmosfricas e vazo sob
gravidade para sistemas com bombeamento
e alta presso constitua a principal
diferena entre as tcnicas antiga e atual.
Porm, a alta presso no era a principal
caracterstica da nova tcnica. O nome foi
mudado para cromatografia lquida de alto
desempenho por C. Horvath em 1970 e foi
quase imediatamente aceito
internacionalmente para descrever a
cromatografia lquida moderna.
H basicamente 4 reas onde o
desempenho da cromatografia lquida
moderna superior ao obtido nas primeiras
tcnicas:
1. Velocidade. Separaes que levavam de
uma a duas horas, h 40 anos atrs,
agora levam minutos.
2. Desempenho da coluna. A cromatografia
lquida atual mais simples, mais
precisa e reprodutvel, principalmente
por causa das melhorias na tecnologia
da coluna.
3. Tamanho da amostra. Enquanto a
tecnologia clssica envolvia tcnicas
preparativas de laboratrio, a HPLC
uma microtcnica que requer amostras
muito pequenas.
33
Cromatografia de Processo
3. muitos produtos petroqumicos e
hidrocarbonos que requerem alta
temperatura para anlise por cromatografia
gasosa podem ser analisados por
cromatografia lquida em temperaturas
relativamente mais baixas.
4. alguns produtos se decompem ou se
polimerizam quando aquecidos e por isso
no podem ser analisados em cromatografia
gasosa; eles podem ser analisados sem
problemas com cromatografia lquida.
5. a cromatografia lquida pode medir a
distribuio da massa molecular de
polmeros, uma medio impossvel em
cromatografia gasosa.
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Cromatografia de Processo
Apostilas\Analtica
Clevett.doc
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