Colorantes Histologicos PDF

Tcnicas de
Histologa
Inmunohistoqumica
Hibridacin
In Situ
Hospital Militar Gmez Ulla
NDICE
TCNICAS DE HISTOLOGA
Tcnicas segn los tejidos ............................................................................... pg. 1
Hematoxilinas
Hematoxilina frrica de Weigert ......................................................... pg. 3
Hematoxilina iodada ............................................................................ 3
Hematoxilina de Mayer ....................................................................... 3
Coloraciones para tejido conjuntivo
Tricrmico de Masson ......................................................................... pg. 4
PTAH de Mallory ................................................................................ 5
Van Gieson .......................................................................................... 6
Orcena ................................................................................................. 7
Gallego ................................................................................................. 8
Plata Metenamina. Para rin .............................................................. 9
Reticulina ............................................................................................. 10
Wilder .................................................................................................. 10
Coloraciones para hidratos de carbono
PASdiastasa ........................................................................................ pg. 12
QSM .................................................................................................... 12
Carmn de Best ..................................................................................... 14

Mucicarmn .......................................................................................... 15
Mucicarmn (Variante) ............................................................. 16
Tcnicas para el amiloide
Rojo Congo ............................................................................... 16
Violeta de Cristal ...................................................................... 17
Tioflavina T .............................................................................. 17
Coloraciones para el sistema nervioso
Nissl ..................................................................................................... pg. 19
Kluber Barrera del AzulXilol ............................................................. 19
Coloraciones para pigmentos
Hierro ................................................................................................... pg. 21
Pigmento biliar ..................................................................................... 21
Fontana. Para la melanina ..................................................................... 22
Coloraciones para lpidos
Oil Red O ............................................................................................. pg. 23
Sudn Negro ......................................................................................... 23
Coloraciones para los microorganismos
Gram ..................................................................................................... pg. 25
Ziehl Neelsen ........................................................................................ 25
Mtodo de la plata metenamina. Modificacin de Grocott .................. 26
Coloraciones para ADN y ARN
Verde metilopironina ........................................................................... pg. 28
Coloraciones para grupos fosfatos y carbonatos
Von Kossa ............................................................................................. pg. 29
INMUNOHISTOQUMICA
Qu marcan estos anticuerpos? ....................................................................... pg. 30

Clasificacin segn especificidad del anticuerpo .............................................. 41
HIBRIDACIN IN SITU DE ADN
CON SONDAS MARCADAS DE FLUORESCENCIA
Preparacin de reactivos ................................................................................... pg. 44
Protocolo ........................................................................................................... 45
TCNICAS DE HISTOLOGA
1. TCNICAS SEGN LOS TEJIDOS
Generalmente, para determinados tipos de muestras se suelen hacer ciertas tcnicas. Incluso, hay pequeos
protocolos en el Servicio dependiendo del tejido en cuestin:
Tcnicas Renales:
Hematoxilinaeosina, PAS, tricrmico de Masson, plata metenamina, e inmunofluorescencia (IgG, IgA, IgM,
CD3)
Tcnicas hepticas:
Hematoxilinaeosina, PASdiastasa, tricrmico de Masson, orcena, Hierro (cortes a 5), Wilder (cortes a 3)
e inmunologa (hepatitis C, B, HVC, HBC, HBS)
Tcnicas de ganglios:
Hematoxilinaeosina (dejando menos tiempo en la hematoxilina, con 1 minuto o poco ms es suficiente),
Giemsa, PAS y Wilder.
Tcnicas de mdula sea:
Se recibe en un fijador comercial:
A = B5 modificado; se tiene en ste 2 horas y se lava bien.
B = E.D.T.A. en buffer cido; se tiene como mnimo 2 horas y a continuacin se mete en el procesador de
tejidos.
Hematoxilinaeosina y Giemsa.
Tcnicas de endometrio:
1.Se recibe en alcohol de 96
2.Alcohol de 100 durante 24 horas 3.Toluol, 6 horas
4.Se mete en parafina en estufa a 60 hasta el da siguiente.
3
5.Se hace el bloque

6.Hematoxilinaeosina y Carmn de Best.
Tcnicas de piel:
Hematoxilinaeosina con permanganato potsico:
Permanganato potsico cido, 15 min.
Decolorar con cido oxlico
Hematoxilina de Carazzi, 2 min. Lavar
Eosina, 67 pases. Lavar
Deshidratar, aclarar y montar.
2. HEMATOXILINAS
2.1. Hematoxilina frrica de Weigert
Solucin A: Hematoxilina 1 g.
Alcohol 96 100 ml.
Dejar madurar mnimo 15 das.
Solucin B: Percloruro de hierro 4 ml.
c. Clorhdrico 1 ml.
Agua destilada 95 ml.
Solucin de trabajo: Mezclar las soluciones A y B a partes iguales en el momento de usar; la mezcla dura
aproximadamente 30 min.
2.2. Hematoxilina iodada
Hematoxilina 3 g.
Alcohol etlico 25 ml.
Yodo metlico 1% 100 ml.
Alumbre amoniacal saturado 150 ml.
Mezclar todos los componentes y se hierven.
2.3. Hematoxilina de Mayer
Hematoxilina 5 g.
Alumbre potsico amoniacal 50 g.
4

Glicerina 300 ml.
Iodato potsico 0,5 g.
cido actico 20 ml.
Mezclar todos los componentes, echando poco a poco al final el cido actico.
Para disolver bien los componentes, hervir los 3 primeros junto con el iodato.
3. COLORACIONES PARA TEJIDO CONJUNTIVO
3.1. Tricrmico de Masson.
Reactivos:
Solucin de alumbre frrico 5%
Hematoxilina de Weigert
Solucin de c. Pcrico: cido pcrico a saturacin 2 partes.
Alcohol de 96 1 parte.
Fucsina cida xilidina de Ponceau: 1 parte de fucsina y 2 de xilidina.
Fucsina cida:
fucsina cida 1 g.
c. Actico glacial 1 ml.
Solucin Xilidina de Ponceau:
Xilidina de Ponceau 1 g.
Solucin cida de cido fosfomolbdico al 1 %
Solucin verde luz: Verde luz 1 g.
Tcnica:
Desparafinar e hidratar
Alumbre frrico en estufa a 60, 30 min.
5
Lavar.
Hematoxilina de Weigert, 5 min.
Lavar en agua corriente.
Diferenciar en alcoholcido pcrico, 10 min.
Lavar 10 min.
Fucsinaxilidina de Ponceau, 5 min.
Lavar.
cido fosfomolbdico, 5 min.
Sin lavar
Verde luz, 1012 min.
Lavar
Deshidratar, aclara y montar.
Resultados:
Ncleos en negro; citoplasma en rosa
Fibras musculares en rojo
Colgeno en azul
3.2. PTAH de Mallory.
Reactivos:
Hematoxilina fosfotungstica
Hematoxilina 0,1 g.
c. Fosfotungstico 2 g.
Se disuelve por separado y luego se mezclan para que madure rpido. Se pueden aadir unos cristales de
permanganato potsico.
Mezcla para postcromado
Cromato potsico sol. ac. 3% 3 partes.
c. Clorhdrico sol. ac. 10% 1 parte.
Permanganato potsico cido
Permanganato potsico sol. ac. 0,5% 47,5 ml.
c. Sulfrico sol. ac. 3% 2,5 ml.
c. Oxlico al 1%.
Tcnica:
Desparafinar e hidratar. Lavar y eliminar los restos mercuriales del material fijado en Zenker.
Postcromado, 30 min.
Lavar muy bien.
Diferenciar con permanganato potsico cido, 1 min.
Lavar
Blanquear con cido oxlico 1%
Lavar muy bien
Hematoxilina fosfotungstica 12 24 horas. Portas invertidos
Derramar el colorante; secar en papel de filtro
Deshidratar rpido en alcohol de 96, 100; aclarar y montar.
Resultados:
Fibrina, neurogla y hemates en azul oscuro
Ncleos en azul brillante
Colgeno rosado o rojo
Estriacin muscular en azulnegro
El balance rojoazul depende del postcromado y de la eliminacin del cromato
con el permanganato; cuanto ms cromato se deje, ms azul oscuro se ver.
3.3. Van Gieson
Reactivos:
Hematoxilina de Weigert
Picrofucsina
Fucsina cida 10% 5 ml.
c. Pcrico sol. alcohlica a saturacin 100 ml.
Tcnica:
Desparafinar e hidratar. Si proceden de congelacin se pasa por alcohol de 96, 3 min y lavamos en agua.
Hematoxilina de Weigert, 14 min. No ms tiempo
Lavado en agua hasta color azul. No usar amoniaco para acelerar el viraje.
Picrofucsina, 1 min
Lavado rpido en agua destilada
Deshidratar, aclara y montar
Resultados:
Fibras colgenas en rojo brillante
Ncleos en azul o negro
3.4. Orcena.
7
Reactivos:
Mordiente: Permanganato potsico cido
Permanganato potsico 0,15 g.
cido sulfrico concentrado 0,015 ml.
c. Oxlico al 2 %
Orcena
Orceina 1 g.
c. Clorhdrico conc. 0,6 ml.
Alcohol 70 100 ml
Disolver la orceina en alcohol de 70 y luego aadir el cido clorhdrico. Dejar madurar 2 das.
Alcoholcido:
cido clorhdrico 10 g.
Alcohol absoluto 100 ml.
Tcnica:
Mordiente, 3 min.
cido oxlico, 5 min.
Lavar en agua
Orcena, 2030 min.
Lavar en alcohol de 96 hasta quitar el exceso de color
Lavar en alcoholcido
Hematoxilina para contrastar, si se desea
Deshidratar, aclara y montar
Resultados:
Fibras elsticas: desde un tono prpura hasta el marrn o negro.
3.5. Gallego
Fijacin: Preferiblemente en formalina o Bouin.
Cortes: En parafina o por congelacin
Reactivos:
Gallego n 1:
8

Formalina comercial 2 gotas.
c. Ntrico 1 gota.
Cloruro frrico 10 % 1 gotas.
Gallego n 2:
c. Actico 2 gotas.
Fucsina fenicada de Ziehl 25 gotas.
Solucin de PicroIndigo Carmn.
c. Pcrico a saturacin en agua, se aade ndigo de Carmn al 1% y se comprueba el color con papel de filtro
en relacin con la que ya tengamos hecha en el laboratorio.
Tcnica:
Los cortes por congelacin se lavan en agua.
Los cortes en parafina, se desparafinan e hidratan.
Sensibilizar con gallego n1, 1030 segundos.
Sin lavar, se agrega el Gallego n2. Hay que controlar el color al microscopio. Aprox. 15 min.
Lavar muy bien en agua destilada
Virofijacin en gallego n1, 5 min.
Lavar en agua destilada y contrastar con Picrondigo Carmn
Lavar
Resultados:
Las fibras elsticas se tien en violeta oscuro
Ncleos en violeta. Cartlago y moco en azul violeta
3.6. Plata Metenamina. Para rin.
Reactivos:
Solucin madre de plata:
Nitrato de plata 0,5% 2,5 ml.
Metenamina 3% 50 ml.
Borax 5% 3 ml.
9
Mantener por separado hasta usarla

Diferenciador:
cido sulfrico 0,5% 1 parte
Sulfato frrico 0,2% 1 parte
Para desinfectar el material de cristal que se utiliza durante toda la tcnica, empleamos una mezcla crmica
que se pone el da anterior. Antes de usar, se lava bien.
Tcnica:
c. Peridico 0,5 %, 10 min.
Lavar en agua
c. Crmico 5%, 45 min.
Lavar en agua corriente, 12 min.
Bisulfito sdico al 2%, 1 min. Para eliminar el c.crmico
Poner los cortes en plata metenamina a 5560C durante aprox. 23 horas. Se mira al microscopio cuando
va cogiendo color tabaco oscuro, cada 10 min. Y se va controlando si se tien las membranas basales. Se
ponen en agua destilada. Si la tcnica es ligera, se mete otra vez en plata; si estn muy teidos, se trata con
el diferenciador.
Lavar con agua destilada
Dorar con cloruro de oro al 0,2 %, 2 min.
Lavar en agua destilada abundante
Tiosulfato sdico al 3%, 2 min.
Lavar en agua destilada
Contrastar si se desea con hematoxilina o verde luz
3.7. Reticulina
Reactivos:
Permanganato potsico 0,51%
c. Oxlico 5%
Nitrato de plata 2%
Carbonato de plata medio piridinado
Formol 5%
Agua amoniacal. Amonaco 1 ml.
Tcnica:
Oxidar con el permanganato, 35 min.
Blanquear con el c. Oxlico, 1 min.
Agua amoniacal, 30 seg.1 min.
Nitrato de plata hasta tomar color tostado
10
Lavar en agua con piridina

Reduccin en formol hasta gris homogneo. Lavar
Resultados: Fibras reticulares en negro.
3.8. Wilder
Los cortes deben estar bien pegados al porta con albmina o con calor.
Fijacin: Varios fijadores, incluso lquido de Helly
Reactivos:
Permanganato potsico cido
Permanganato potsico sol.ac. 0,5% 47,5 ml.
c.sulfrico sol.ac. 3% 2,5 ml.
Oxlico sol.ac. 1%
Bao argntico de Wilder:
A 5 ml. de nitrato de plata al 10% se va gregando amoniaco 28% gota a gota hasta que el precipitado de color
oscuro desaparezca y quede claro. A continuacin se aaden 5 ml. de NaOH al 3% y se vuelve de color
oscuro; se sigue aadiendo gota agota amoniaco 28% gota a gota hasta que vuelva a quedar claro y desparezca
el olor a moniaco. Completar con agua destilada hasta 50 ml. Dura de 3 a 6 meses en nevera o a oscuras.
Cloruro de oro 0,2%
Tiosulfato sdico 5%
Alumbre frrico al 2%
Sulfato frricoamnico 2 g.
Formol 10 %
Tcnica:
Oxidar con permanganato potsico, 5 min.
Lavar en agua
Blanquear con cido oxlico, 1 min
Lavar en agua
Alumbre frrico 2 %, 30 min.
Lavar bien en 2 cambios de agua destilada
Bao argntico de Wilder, 30 seg. 1 min.
Lavado rpido en agua destilada
Reducir en formol neutro 10%, 10 min.
Lavar (preferible agua destilada)
Si los cortes estn poco impregnados, volver al paso 10
11
Cloruro de oro, 5 min.

Lavar
Fijar en tiosulfato sdico 10 min.
Lavar
Deshidratar, aclarar y montar
Resultados: Fibras reticulares en negro.
4. COLORACIONES PARA HIDRATOS DE CARBONO
4.1. PAS diastasa
En una cpsula de Petri se pone el porta con saliva sobre el tejido y unos papeles mojados al lado para
conservar la humedad. Se deja en la estufa a 60C durante 30 min.
Lavamos con agua corriente y seguimos haciendo un PAS rutinario.
Lo que se produce es la digestin del glucgeno por la amilasa.
4.2. Q.S.M.
Es una tcnica para queratina y sustancias mucinoides
Reactivos:
Hematoxilina de Mayer
c. Clorhdrico (opcional)
Eritrosina
Azul celeste
Se dejan disolver durante la noche 5 g. de alumbre frrico (sulfato frrico amnico) en 100 ml. de agua
destilada. Aadir 0,5g. de azul celestn y hervir durante 3 min. Enfriar y filtrar. Aadir 14 ml. de glicerina.
Esta solucin se conserva durante varios meses.
Verde alcian
Mezclar 50 ml. de solucin acuosa al 1% de verde Alcin con 50 ml. de c. actico al 1 % y aadir 20 mg. de
timol. Filtrar antes de usar.
Azafrn etanlico
Triturar en un mortero 1 g de estambres secos de azafrn del Galtinais o 4 g de azafrn espaol. El azafrn se
tritura con ms facilidad si previamente se congela a una temperatura muy baja. El polvo, junto con 100 ml de
etanol absoluto, se coloca en un matraz al que se adapta un condensador de reflujo, introducindolo despus al
bao Mara, donde se deja hervir durante 1 hora. La solucin amarilla se decanta en un frasco apropiado y se
vierte en el matraz otros 100 ml de etanol. Se hierve durante otra hora y se decanta la solucin en el frasco
para guardar. Esta operacin se puede repetir ms veces; se mezclan los extractos y se filtra la mezcla,
obtenindose una solucin de color amarillo oscuro. La solucin se debe conservar en un frasco bien cerrado.
Tcnica:
12
Azul celeste, 5 min.

Lavar en agua
Hematoxilina de Mayer, 5 min.
Lavar en agua tibia o fra, 15 min
c. Clorhdrico opcional (mejor no usarlo)
Lavar
Eritrosina filtrada, 1015 min.
Lavar en agua
Diferenciar en alcohol 96
Lavar
Verde alcin, 5 min
Lavar en agua
Deshidratar rpidamente con alcohol 96
Azafrn etanlico, 5 min
Alcohol 100, 2 baos
Xileno y montar
Resultados:
Ncleos en azul oscuro
Mucopolisacridos cidos en verde
Tejido conjuntivo en amarillo o naranja
Queratina en rojo oscuro
Otros elementos en diversos tonos de rojo
4.3. Carmn de Best
Reactivos:
Hematoxilina de Carazzi o de Harris
Solucin madre de Carmn de Best
Carmn Gurr's 8 g.
Carbonato potsico 1 g.
Cloruro potsico 5 g.
Si se utiliza Carmn de Best Gurr's, la solucin madre es:
Carmn de Best Gurr's 8 g.
En ambos casos, se dejan hervir todos los componentes en un matraz de 200 ml. (5 min); cuidado al hervir no
se salga. Se enfra y se agregan 20 ml de amoniaco puro. Se pone en el frigorfico y en frasco oscuro (1 2
13
meses).
Solucin de trabajo de Carmn de Best
Amoniaco 2 partes
Alcohol metlico 3 partes
Solucin madre de Carmn de Best 2 partes (filtrado)
Diferenciador de Best
Alcohol metlico absoluto 40 ml.
Alcohol etlico absoluto 80 ml.
Tcnica:
Hematoxilina de Carazzi o Harris, 2 min.
Lavar
Solucin de trabajo 20 30 min.
Diferenciador hasta que no salgan nubecillas de color
Deshidratar con alcohol absoluto, 5 min.
Aclarar y montar.
Resultados:
El glucgeno aparece en rojo brillante
Ncleos en azul
Es una coloracin muy caprichosa, falla rotundamente en ocasiones y en otras produce preparaciones muy
bellas.
4.4. Mucicarmin
Reactivos:
Solucin de Mucicarmn:
Carmn 1 g.
Hidrxido de aluminio 1 g.
Alcohol etlico 100 ml.
Cloruro alumnico anhdrido 0,5 g.
Se pone el carmn y el polvo de hidrxido alumnico en un recipiente; se agita y se agrega alcohol 50 y
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cloruro alumnico (previamente pulverizado en un mortero), y se coloca en bao a ebullicin. Se hierve y

agita durante 2 horas y media. Enfriar rpidamente y filtar. Es estable unos meses. Para uso hay que diluir la
solucin madre 1 : 4 con agua destilada. Se utiliza en pocas horas.
Tcnica:
Hematoxilina de Carazzi, 515 min. Lavar en agua
Mucicarmn diluida, 1520 min. Lavar en agua
Resultados:
Mucopolisacridos cidos en rojo
Mucinas en rojo brillante.
Ncleos en azul.
4.4.1. Mucicarmn (Variante)
Tcnica:
Hematoxilina de Carazzi, 5 min.
Solucin de Mucicarn pura, 75 min. a 60C en estufa
Solucin Tartrazine, 13 seg.
La solucin de mucicarmn se puede reutilizar 34 veces.
4.5. Tcnicas para el amiloide
4.5.1. Rojo Congo
Fijacin: Alcohol, lquido de Carnoy y formol
Reactivos:
Solucin de cloruro sdico alcalino alcohlico
Se prepara con 40 ml. de alcohol 80, se satura con NaCl. Se alcaliniza antes de usar aadiendo 0,4 ml de
NaOH al 1%
Sol. de Rojo Congo alcalinizado
A 40 ml. de alcohol 80 se le aade NaCl hasta saturacin y despus con rojo Congo se alcaliniza antes del
uso con 0,4 ml de NaOH al 1%
15
Tcnica:
Desparafinar e hidratar. Si se usa fijador mercurial se deben eliminar los restos mercuriales
Teir con hematoxilina, 510 min. Lavar
Sol. NaCl alcalino alcohlico, 15 min. Hacerlo con los portas invertidos para evitar precipitados
Sol. Rojo Congo alcalinizado, 15 min.; con los portas invertidos.
Deshidratar en 3 baos de alcohol absoluto. Aclarar y montar
Resultados:
Amiloide en rojo y muestra birrefrigencia a la luz polarizada
Fibras elsticas ligeramente rojizas
Ncleos en azul
4.5.2. Violeta de Cristal
Reactivos:
Cristal de violeta 0,1%
c. Actico en sol.ac. 1%
Tcnica:
Cristal violeta, 10 min. Lavar en agua
c. Actico hasta que el amiloide aparezca en rojo prpura y el fondo en azul.
Lavar en agua
Montar en gelatina glicerina
Resultados:
El amiloide aparece en rojo prpura.
4.5.3. Tioflavina T
Fijacin: deben evitarse los fijadores que contengan mercurio ya que ste provoca autofluorescencia
espontnea de mltiples estructuras.
Reactivos:
Sol. de hematoxilina de Harris
Sol. ac. de tioflavina T al 1%
Sol. de cido actico 1%
Tcnica:
Hematoxilina de Harris, 2 min., para eliminar la fluorescencia espontnea del ncleo (el DNA es
fluorescente y podra dar falsos positivos)
16
Aclarar en agua destilada

Tioflavina T, 3 min.
Diferenciar en c. actico 1% en 2 cambios de 10 min. cada uno
Lavar en agua destilada y montar en medio acuoso, o deshidratar, aclarar y montar en medio no
fluorescente.
Resultados:
Amiloide: amarillo o verde amarillento, sobre un fondo oscuro o azul, dependiendo del filtro utilizado.
5. COLORACIONES PARA EL SISTEMA NERVIOSO
5.1. Nissl.
Tcnica:
Desparafinar hasta alcohol 96
Azul luxol al 0,1% en alcohol ms el 0,5% de cido actico al 10%. Una noche a 60 C
Alcohol 96 para quitar el exceso del colorante.
Diferenciar en carbonato de litio al 0,05%
Alcohol de 70 hasta diferenciar sustancia blanca de gris
Enjugar en agua destilada
Carbonato de litio hasta diferenciar completamente
Varios cambios en alcohol 70
Violeta de cresilo al 0,1% (aadir al usar 15 gotas por 100 ml. de cido actico, filtrar y calentar a 60C), 6
min.
Diferenciar en alcohol 96.
Aclarar y montar
5.2. Kluber Barrera del AzulXilol
Reactivos:
Solucin 0,1% azulxilol en alcohol 96
Solucin acuosa al 0,005% de carbonato de litio
Tcnica:
Alcohol absoluto
Colorear con el azulxilol a t 60 C durante 618 horas
Enjugar con alcohol 70 y luego en agua
Diferenciar con carbonato de litio, 30 min.2 horas.
Lavar en agua
Colorear los ncleos Rojo nuclear slido (25 min).
Lavar con agua
Resultados:
17
Fosfolpidos en azul. Es probable que se coloreen igual los ganglisidos y cerbrsidos.

6. COLORACIONES PARA PIGMENTOS
6.1. Hierro
Fijacin: Recomendable el formol tamponado a pH 7
Reactivos:
Ferrocianuro potsico sdico 2%
c. clorhdrico sol. ac. 2%
Solucin de trabajo: a partes iguales 1 + 2
Tcnica:
Solucin de trabajo, 3 veces de 10 min. cada una.
Lavar, dejar mucho tiempo en agua para que se oxide bien
Contrastar con eosina o fucsina diluida
Resultados:
El pigmento frrico trivalente aparece de color azul oscuro o verdoso.
6.2. Pigmento biliar
Reactivos:
Reactivo de Stein
Lugol 2 partes
Yodo, sol. alcohlica 7% 1 parte
La sol. de lugol est formada por:
Ioduro potsico 6 g.
Disolver y aadir poco a poco 2 g. de yodo
Tcnica:
Stein 618 horas. Lavar
Decolorar con hiposulfito sdico 5%
18
Pase rpido en safranina 0,5%

Lavar en agua y secar en papel de filtro
Deshidratar con acetona; acetonaxilol
Xilol y montar.
6.3. Fontana. Para la melanina.
Reactivos:
Solucin de Fontana
Nitrato de plata al 5 % en agua destilada; se va aadiendo amoniaco gota a gota hasta que se disuelva el
precipitado; tiene que quedar la solucin transparente y no huela a amoniaco.
Solucin de viraje: a partes iguales a + b
Cloruro de oro 0,2%
Sulfocianuro de amonio al 2% 3 ml.
Hiposulfito sdico 3 g.
Tcnica:
Llevar al lquido de Fontana en oscuridad toda la noche.
Lavar en agua destilada, 10 min.
Lquido de viraje, 10 min. Lavar
Hiposulfito 5%, 5 min. Lavar
Contrastar con fucsina de Ziehl
Resultados:
Grnulos de melanina en negro o pardo oscuro.
7. COLORACIONES PARA LPIDOS
7.1. Oil Red O
Cortes: Por congelacin
Reactivos:
Sol. madre a saturacin del alcohol isoproplico con Oil Red O
Sol. de trabajo
Sol. madre filtrada 6 ml.
Se deja reposar 10 min. y se filtra sobre los portas.
19
Tcnica:
Los cortes por congelacin se les deja en la solucin de trabajo durante 10 30 min., con los portas
invertidos o flotando en ella
Lavar con mucho cuidado
Hematoxilina de Carazzi, 10 min
Lavar
Montar en gelatina glicerinada
Resultados:
Lpidos en rojo.
Ncleos en azul.
7.2. Sudn negro
Cortes: Por congelacin
Es una tcnica para lipofucsinas tempranas.
Reactivos:
Sol. de Sudn Negro saturado en alcohol 70
2. Fucsina de Ziehl diluida
Gelatina glicerinada o lquido de Apathy
Tcnica:
Sudn Negro 30 min.
Lavar
Fucsina de Ziehl diluida, contrastar.
Lavar
Montar en gelatina glicerinada o lquido de Apathy.
Resultados:
Grasas en rojo brillante. Ncleos en azul.
8. COLORACIONES PARA LOS MICROORGANISMOS
8.1. Gram
Cortes: En parafina
Reactivos:
Violeta de Genciana 1%
Lugol
Solucin alcoholacetona:
20
Alcohol absoluto 6 ml.

Acetona 3 ml.
Fucsina de Ziehl muy diluida, 1% aprox.
Tcnica:
Violeta de Genciana 1%, 8 min.
Lugol, 5 min.
Lavar en alcoholacetona
Aclarar en agua
Contrastar con Fucsina de Ziehl
Deshidratar en alcohol absoluto, aclarar y montar
8.2. Ziehl Neelsen.
Cortes: En parafina
Fijacin: Varios; preferibles lo mercuriales o el formol neutro
Reactivos:
Solucin de carbolfucsina
Fucsina bsica 1 g.
Alcohol etlico absoluto 10 ml
c. fnico fundido 5 ml.
La fucsina se disuelve en el alcohol y el fenol se disuelve en agua. Se mezclan las 2 y se filtra antes del uso.
Alcoholcido
Alcohol 70 100 ml.
c. clorhdrico 1 ml.
Tcnica:
Desaparafinar e hidratar
Carbolfucsina, 30 min en estufa a 60C 12 horas a temperatura ambiente
Lavar en agua
Decolorar con: solucin de alcoholclorhdrico
alcohol 96
agua destilada; hasta que no suelte colorante.
21
Lavar en agua
Contrastar con azul de metileno 1%, 1 min.
Lavar
Resultados:
Bacilos cidoalcohol resistentes en rojo brillante
Mtodo de plata metenamina.
Modificacin de Grocott
Reactivos:
Solucin de cido crmico 5% en agua destilada
Solucin madre de plata metenamina
Metenamina sol. ac. 3% 100 ml.
Nitrato de plata sol. ac. 5% 5 ml.
Agitar hasta disolver el precipitado. Guardado en frigorfico, dura meses.
2.a. Sol. diluida de plata metenamina; (sol. de trabajo)
Borax sol. ac. 5% 2 ml.
Sol. madre 25 ml.
Preparar en el momento de uso
Bisulfito sdico 1%
Cloruro de oro 0,1%
Hiposulfito sdico 2%
Tcnica:
Oxidar en c. crmico, 60 min.
Bisulfito sdico 1%, 1 min.
Sol. de trabajo a 48C, 6090 min. Controlar el tiempo con el microscopio
Lavar en agua destilada, 3 cambios de 2 min. cada uno
Cloruro de oro, 5 min.
Hiposulfito sdico, 2 min.
Contrastar con hematoxilina o verde de metilo 1%. Lavar
22
Resultados:
Paredes del histoplasma y hongos en negro.
Eritrocitos en pardo
9. COLORACIONES PARA ADN Y ARN
9.1. Verde metilo pironina
Fijacin: Alcohol o lquido de Carnoy son los recomendados
Reactivos:
Sol. de trabajo verde metilo pironina
Sol. verde metilo 7,5 ml.
Sol. de pironina 12,5 ml.
Tampn acetato 30 ml.
A. Sol. de verde metilo: sol. ac. 2%, agitando bien. Colocarlo en un embudo separador, se aaden 100 ml. de
cloroformo y se agita furtemente. Hay que dejar reposar varias horas y extraer el cloroformo. Repetir la
operacin (2 3 veces), hasta que se extraiga todo el color violeta
B. Sol. de pironina ac. 2%
C. Tampn acetato; pH = 4,8. 30 ml de sol. 1 + 20 ml. de sol. 2
Sol. 1.: Acetato sdico 0,2 M. 1,64 g en 100 ml de agua destilada
Sol. 2.: cido actico 0,2 M. 1,2 ml en 100 ml de agua destilada
Tcnica:
Sol. de trabajo verde metilo pironina, 10 min.
Derramar el colorante y secar con papel de filtro (no usar agua)
Deshidratar rpidamente con acetona absoluta
Aclarar con xilol al 10% en acetona absoluta
Aclarar con xilol al 50% en acetona absoluta
Aclarar en xilol puro
Montar en blsamo
Resultados:
El DNA se tie verde y el RNA en rojo.
10. COLORACIONES PARA GRUPOS FOSFATOS Y CARBONATOS
10.1. Von Kossa
23
Fundamento:
La plata se deposita en los complejos clcicos dotados de grupos fosfatos o carbonatos presentes en el corte.
La plata, una vez depositada, es reducida por la luz del sol, despus de haber arrastrado toda la plata no fijada
por medio del hiposulfito de sodio.
Reactivos:
Nitrato de plata en sol. ac. 1%
Hiposulfito sdico al 5%
Safranina al 0,1%
Tcnica:
Hidratar los cortes de parafina
Lavar bien en agua destilada
Sol. de nitrato de plata, a la luz, pero procurando que sta no sea directa del sol, durante 10 30 min.
Enjuagaren sol de hiposulfito y dejar luego actuar sta durante 10 30 min.
Lavar detenidamente en agua del grifo
Teir durante 30 seg. Con safranina
Diferenciar y deshidratar en alcohol 96 y luego en alcohol absoluto
Aclarar en xilol y montar
Resultados:
Los grupos fosfato y carbonato unidos al calcio, se tien de negro
Ncleos en rojo y el resto del tejido en tonos rojizos ms suaves
INMUNOHITOQUMICA
Qu marcan estos anticuerpos?
Actina: Clulas musculares: lisas, esquelticas y cardacas.
AlfaFetoprotena: Positivo para clulas germinales. Se aplica para la identificacin de hepatomas,
carcinoma de testculo y ovario.
HGC (Hormona Gonadotropina Corinica): Marca dicha hormona. Da positivo en: seminoma, carcinoma
embrionario, coriocarcinoma, disgerminoma (Puede o no ser positivo); en los teratomas las clulas
sincitiotropobsticas son ocasionalmente positivas para HGC. El control positivo recomendado es placenta.
BLA.36 (Antgeno Linfocito B): El antgeno definido por DAKO como BLA.36 ha sido descrito como una
glicoprotena con una masa molecular de 36 kD. Es encontrado en clulas B inmaduros y activados, pero no
en el resto de clulas B. El antgeno BLA.36 est tambin presente en la superficie de las clulas de
ReedSternberg y sus variantes mononucleares, por ejemplo las clulas de Hodgkin. No se presenta en clulas
T.
CEA (Antgeno Carcinoma Embrionario): No es especfico, se emplea (poco) para la diferenciacin de
adenocarcinomas, mesoteliomas o carcinomas renales, hepatocelulares y de origen prottico.
Cerb B2: Es positivo entre 1530% de carcinomas ductales invasivos, virtualmente todos los casos de
24
enfermedad de Paget y sobre el 70% de los carcinomas ductales in situ. Marca la membrana de las clulas
tumorales.
CD7: Marcador de linfocitos T, leucemias de linfoblastos T en nios.
CD10: Diagnstico de leucemias linfocticas agudas y leucemias hematopoyticas.
CD15: Encontrado en los granulocitos maduros, clulas de Hodgkin y Reed Stenberg.
CD 20 L26: Es un marcador de clulas B en sangre perifrica y tejidos linfoides, tiendo los citoplasmas de
dichas clulas. En tejido linfoide, tie fuertemente inmunoblastos B y blastos de centros germinales. No
reacciona con clulas no linfoides normales o malignas. La mayor parte de linfomas de clulas B son
reactivos, al igual que clulas ReedSternberg en casos de la enfermedad de Hodgkin.
CD 30: Se pone de manifiesto por las clulas de Hodgkin y Reed Stenberg en la enfermedad de Hodgkin, por
clulas tumorales de la mayora de linfomas de clulas grandes anaplsicas y por una proporcin variada de
clulas T y B activadas. Fuera del sistema linfohematopoytico, el antgeno CD 30 normalmente de positivo
en carcinomas embrionarios.
CD 31: Marcador de megacariocitos y ocasionalmente clulas plasmticas. Marca dbilmente zonas ocultas
de clulas B, clulas T perifricas y neutrfilos (cls. endoteliales) Debido a su reactividad con las clulas
endoteliales pueder ser eficaz en la evaluacin de tumores vascularizados.
CD 34: Tie el citoplasma de clulas endoteliales y reacciona con el colgeno de la membrana basal. El
control positivo recomendado es el angiosarcoma.
CD 35: Tie las clulas foliculares de centros germinales, macrfagos y podocitos glomerules renales. El CD
35 es ampliamente marcador en diferentes clulas, incluyendo eritrocitos, clulas B, monocitos y granulocitos.
CD 45 LCA: Marca clulas linfoides y en menor medida macrfagos, histiocitos y granulocitos. La mayora
de las cls. B y T neoplsicas se tien positivas en leucemias y linfomas no Hodgkin, mientras que la mayora
de neoplasias mieloides y cls. eritroides son negativas.
CD 68: Se emplea para la localizacin de macrfagos en una amplia variedad de tejidos humanos, incluyendo
clulas de Kuffer y macrfagos en bazo, intestino, pulmn y mdula sea.
Citomegalovirus: Reacciona con los ncleos de las clulas infectadas. Este anticuerpo no reacciona con otros
herpes virus.
CK AE1/AE3 Citoqueratina pool: Marca clulas epiteliales y especfica de epitelios queratinizados.
CK ! (o CK AE1, de bajo peso molecular): Marcador de clulas de origen epitelial. Puede ser til en el
estudio de la histognesis de tumores indiferenciados.
CK ! (o CK AE3, de alto peso molecular): Particularmente es apropiado distinguir carcinomas diferenciados
de otras neoplasias no epiteliales.
CK 7: Usado para distinguir entre carcinomas de ovario y colon entre hepatomas y colangiocarcinomas.
CK 20: Reacciona con ciertos tipos de carcinomas como adenocarcinomas de colon, carcinomas de clulas
transicionales de la vejiga y clulas Merkel de tumores de la piel. El control positivo recomendado es el
carcinoma de colon.
25
Complemento C3: Demuestra la presencia del C3 humano.

Core HBc (Anticuerpo Anti antgeno Nuclear de la Hepatitis B): Reconoce el antgeno Core (nuclear) de
la hepatitis B en tejidos hepticos infectados. Marca el ncleo, aunque tambin ha sido visto en citoplasma
perinuclear.
Cromogranina: Este anticuerpo reconoce la Cromogranina A y otros polipptidos afines a la cromogranina
del hombre, mono o cerdo. Casi todos los tipos de tumores neuroendocrinos son reactivos. El control positivo
recomendados es el pncreas
Desmina: Este anticuerpo tie clulas musculares en tejido humano.
Policlonal: Tie especficamente clulas musculares; tumores musculares como rabdomiosarcomas y algunos
leiomiosarcomas, diferencindolos de otros tejidos tumorales, linfomas, carcinomas y tumores de origen
neuronal o de la glia.
Monoclonal: Ms usado para msculo liso.
EMA (Antgeno de la Membrana Epitelial): Tie epitelios normales de varios tejidos, incluyendo la porcin
apical de epitelio glandular, y en menor medida el epitelio escamoso. Marcando es el ms fuerte en el epitelio
mamario (normal o neoplsico, primario o metstasis) Tambin puede marcar mesoteliomas, meningiomas o
neoplasias mesenquimales.
Endoglina: Es un fuerte marcador de clulas endoteliales vasculares.
EGF (Factor de Crecimiento Epidermal): Este anticuerpo reacciona con el 170 kD EGF receptor de
glicoprotena transmembranosa. Los anlisis inmunohistoqumicos de secciones tumorales muestran el EGF
receptor en el 74% de clulas escamosas de carcinomas, 34% de adenocarcinomas, 33% de clulas grandes de
sarcomas y 0% de clulas pequeas y tumores carcinoides.
Estrgenos Receptor (ER): Este anticuerpo tie el receptor de estrgenos nucleares en secciones tisulares por
tcnicas inmunohistoqumicas.
Factor VIII: Anticuerpo anti antgeno Factor VIII que es un componente del complejo Factor VIII del que se
han identificado 3 componentes: 1. Factor VIII con actividad precoagulante; 2. Factor VIII con capacidad
antgena, y 3: Componente de Von Willerbrand.
HBsAg (Antgeno Hepatitis B de superficie): Este anticuerpo reacciona positivamente en clulas infectadas
por el virus tipo B de la hepatitis, en cirrosis y en carcinoma hepatocelular. El HbsAg est presente en el
citoplasma de las clulas infectadas y es detectado en el suero de los individuos infectados durante el estado
presintomtico de la hepatitis B aguda.
HBcAg (Antgeno Hepatitis B nuclear): Este anticuerpo reacciona con el antgeno de la hepatitis B nuclear.
Es visto en el ncleo y no se detecta en el suero de individuos infectados aguda o crnicamente.
HCV (Virus Hepatitis C): Este anticuerpo reacciona especficamente con el virus de la hepatitis C fijado por
ELISA. Reconoce un antgeno citoplasmtico del virus de la hepatitis C humano en tejidos infectados. No
reacciona con el virus de la hepatitis A o hepatitis B detectados en biopsias.
Herpes virus tipo I y tipo II: Es un virus perteneciente a la familia Herpesvitidae que incluye tambin a los
Herpes Zoster, Citomegalovirus y EpsteinBarr. Todos los virus de esta familia crecen en el ncleo, aunque
empiezan a desarrollarse en la membrana nuclear y causan infecciones latentes.
26
HGH (Hormona del Crecimiento Humano): Este anticuerpo reacciona con la hormona del crecimiento
humano y con las clulas de la glndula pituitaria. Se aplica para la tincin de las clulas productoras de la
hormona del crecimiento, adems de clasificar adenomas de la pituitaria.
Ia (HLADR): Es un anticuerpo monoclonal de ratn IgG2a, Kappa. Tie predominantemente clulas B y
reticulares en los folculos linfoides. En el resto del organismo, clulas B y monocitos. No marca las clulas T.
Los controles positivos recomendados son: piel, amdalas y melanomas.
HMB 45 (Antimelanoma): IgG1 de ratn que reacciona contra antgenos citoplasmticos de clulas
melnicas. Reacciona en: melanomas, nevus displsicas, nevus de Spitz, actividad de la unin, melanocitos
fetales y neonatales, melanocitos reactivos, hiperplasia melanoctica atpica, lntigo maligno, algunos
neuroblastomas y los carcinomas de clulas claras. No reacciona en nevus intradrmicos ni melanocitos
normales.
Inmunoglobulinas: IgA, IgD, IgG, IgM, Kappa, Lambda: Son anticuerpos monoclonales que pueden
emplearse en tcnicas inmunohistoqumicas (P.A.P o Peroxidasa Anti Peroxidasa) y de inmunofluorescencia.
Son tiles en el diagnstico de: leucemias, plasmocitomas, linfomas no Hodgkin (derivados de las clulas B);
tempranas positividades de monoclonalidad en ndulos linfticos de determinadas enfermedades inmunes
(Sndrome de Sjrgrens, SIDA...). Diagnsticos diferenciales entre carcinomas indiferenciados y linfomas,
entre plasmocitosis reactivas y plasmocitomas bien diferenciados, reacciones foliculares atpicas y linfomas
foliculares. Detectar depsitos de inmunocomplejos en nefropatas glomerulares y lesiones cutneas (lupus,
pnfigo vulgar).
IgA humana: Este anticuerpo reacciona con el unida a la IgA humana. El control positivo recomendado:
amgdala.
IgM humana: Reacciona especficamente con unida a la IgM humana. Control positivo: amgdalas.
Insulina: Hormona polipptica sintetizada por las clulas de los islotes de Langerhans de pncreas
endocrino. Este anticuerpo se puede usar para la identificacin de clulas del pncreas normal y en tumores
de origen en dichas clulas, el insulinoma.
Kappa Kappa de Cadena Ligera: Este anticuerpo es empleado para detectar la inmunoglobulina Kappa
(citoplasmtica) en clulas B normales o neoplsicas. Pero la Ig Kappa extracelular tambin puede ser teida.
No reacciona con la Lambda de Cadena Ligera ( Lambda). El control positivo recomendado: amgdalas, que
contiene abundantes clulas plasmticas; la lmina propia del intestino tambin es rica en clulas plasmticas.
Ki 67: Este anticuerpo reacciona con un antgeno nuclear humano expresado en todas las clulas proliferantes.
El control positivo recomendado es el linfoma.
Lambda Lambda de Cadena Ligera: Este anticuerpo se emplea para detectar la inmunoglobulina se
superficie en clulas B normales y neoplsicas. Pero la Ig Lambda extracelular tambin teirse. El control
positivo recomendado para este anticuerpo es piel o adenocarcinoma.
L26 CD 20: Es un marcador de clulas B en sangre perifrica y tejidos linfoides, tiendo los citoplasmas de
dichas clulas. En tejido linfoide, tie fuertemente inmunoblastos B y blastos de centros germinales. No
reacciona con clulas no linfoides normales o malignas. La mayor parte de linfomas de clulas B son
reactivos, al igual que clulas ReedSternberg en casos de la enfermedad de Hodgkin.
LCA o CD 45: Marca clulas linfoides y en menor medida macrfagos, histiocitos y granulocitos. La mayora
de las cls. B y T neoplsicas se tien positivas en leucemias y linfomas no Hodgkin, mientras que la mayora
de neoplasias mieloides y cls. eritroides son negativas.
27
Lisozyma: Enzima bacterioltica sintetizada en clulas mieloides, monocitos e histiocitos. Tie: histiocitos,
clulas gigantes (Gaucher's, clulas xantomatosas y clulas gigantes en reas de necrosis), histiocitos
epiteliodes (sarcoidosis, tuberculosis y Crohm's).
La enzima estar presente en leche, lgrima, saliva y suero.
En intestino delgado fijarn el contraste de clulas de Paneth, las de Kuffer en hgado, tbulos proximales de
rin, acinos de glndulas lacrimales, clulas serosas de glndulas salivares, base de clulas epiteliales de los
acinos secretores en glndulas mamarias durante la lactancia, lgrimas cartilaginosas, histiocitos en ndulos
linfticos reactivos, histiocitos de tejidos de granulacin, clulas gigantes del xantoma, histiocitos y
eosinfilos del granuloma eosinfilo.
Utilidad: evaluacin de los desrdenes mieloproliferativos, deteccin de las neoplasias mieloides o
monocitoides escasamente diferenciadas, identificacin de linfomas malignos y de procesos tumorales
constituidos por histiocitos tpicos.
MAM6 (Protena Globular Grasa de Leche Materna): Este anticuerpo reconoce la MAM6, una
mucoglucoprotena de >400kD que est principalmente en el glucocalix de la mayora de clulas epiteliales
glandulares y en el citoplasma, y en la membrana de la mayora de clulas de carcinomas. El control positivo
recomendado es el carcinoma de mama.
Mioglobina: Protena constituyente del msculo esqueltico y cardiaco. Tie las fibras musculares estriadas y
da positivo en rabdomiosarcomas.
Miosina: Es especfico para el msculo esqueltico.
MB1: IgG1 que reacciona contra antgenos de membrana de todas las clulas B, con excepcin de las clulas
plasmticas y algunas clulas T maduras. No marca clulas T inmaduras.
MB2: IgG1 que reacciona contra antgeno citoplasmtico presente en todas las clulas B con excepcin de las
plasmticas. Puede reaccionar con clulas endoteliales y varios tipos de clulas epiteliales. No reacciona con
linfocitos T ni timocitos.
MT1: IgG1 que reacciona contra antgeno de membrana presente en todas las clulas T. Tambin puede
reaccionar con: timocitos, monocitos, macrfagos, Langerhans, Kuffer, clulas mieloides, clulas mieloides y
precursores reitrocitarios. No reacciona con linfocitos B maduros o activados.
MT2: IgG1 que reacciona contra antgeno ligado a membrana presente en linfocitos T maduros no activados y
clulas B maduras. Tambin reacciona en ganglios linfticos y bazo con los linfocitos del manto de los
folculos linfoides y linfocitos del paracortex. No reacciona con los linfocitos T inmaduros y B activados de
los centros germinales.
Neurofilamentos: Filamento intermediario compuesto por 3 polipptidos mayores de 210kD, 160kD y 68kD,
aprox., presentes en dendritas y axones neuronales.
El anticuerpo antineurofilamento va a ser una subclave de IgG1 y se fijar en clulas derivadas de la cresta
neural (neuronas del sistema nervioso central y perifrico)
Da positivo para tumores de naturaleza neuronal, carcinomas pulmonares de clulas pequeas y
feocromocitomas.
NSE (Enolasa Neuroespecfica): Anticuerpo monoclonal capaz de marcar un polipptido III de 78 Kdaltons
28
y su presencia en neuronas, clulas del sistema APUD y neoplasias derivadas de ellas. Estar presente en
neuronas, clulas parafoliculares de tiroides, clulas cromafines de mdula suprarrenal, pituitaria, islotes de
Langerhans y pineal. Positividad: Neoplasias neuroendocrinas, feocromocitomas, tumores adrenales,
paragangliomas, melanomas malignos, carcinomas de clulas pequeas y carcinoides pulmonares, tumores
pancreticos, adenomas paratiroideos y neoplasias de estirpe neuronal.
Papilomavirus humano (HPV): Anticuerpos de conejo frente a papilomavirus tipo I. El papilomavirus
pertenece a la familia de los papovavirus de los que se han descrito 16 tipos de los papilomavirus humanos
(esta clasificacin est basada en la secuencia de polinucletidos). Es especfico en PVs humanos y animales.
Visualmente la tincin es intranuclear.
PCNA (Antgeno Nuclear de Clulas Proliferativas): Este anticuerpo reacciona con las clulas proliferantes
en todos los tejidos humanos. Los controles recomendados son bazo, amgdalas y carcinomas.
p53: Este anticuerpo tie ncleos donde hay protena p53. No reacciona con fibroblastos normales. La
protena p53 se presente en baja concentracin en clulas normales, pero los niveles aumentan en algunos
cnceres comunes. Por tcnicas de inmunohistoqumicas ha sido detectada la acumulacin de p53 en
carcinomas de mama, pulmn, colon, vejiga, estmago y testculo; sarcomas de tejidos blandos y melanomas.
Polipptido Pancretico: Polipptido neuroendocrino II segregado por clulas de los islotes, que acta
inhibiendo la secrecin de enzimas por el pncreas, incrementa la produccin cida por el estmago, ocasiona
contraccin de los ductos biliares y relajacin de la vescula biliar. Se emplea para tumores de clulas
insulares.
Progesterona Receptor (PR): Este anticuerpo tie mediante tcnicas de inmunohistoqumicas los tejidos
donde hay presencia de receptor de progesterona. La tincin de este anticuerpo monoclonal es principalmente
nuclear. El control positivo recomendado es el carcinoma de mama, lobular o tubular.
Prolactina: Es altamente especfico para la molcula de prolactina. No reacciona con HCG, FSH, LH, TSH y
HGH. El control positivo recomendado es la pituitaria.
Protena cida Gliofibrilar (GFAP): Este anticuerpo tie las clulas de la gla Bergman y astrositos.
Policlonal: Reacciona con la GFAP del hombre, ratn y rata.
Monoclonal: Este anticuerpo ha sido testado para la localizacin inmunohistoqumica de la GFAP del
hombre, cerdo y rata.
Protena bcl2: Este anticuerpo monoclonal est designado para la localizacin especfica de la protena
humana bcl2. Se emplea para determinar su existencia, no para dar un diagnstico. Reacciona con linfocitos
pequeos en reas de clulas T y tejido linfoide, pero no con los centros germinativos. De cualquier modo,
este anticuerpo reacciona fuertemente con el linfoma folicular, linfomas de alto grado de clulas B y T,
linfoma linfoblstico y linfoma Ki1 (linfoma anaplsico de clulas grandes).
PSA (Antgeno Especfico de Prstata): Este anticuerpo reacciona con clulas del epitelio ductal prosttico
normal, o tejido prosttico hipertrfico o neoplsico.
PSAP (Fosfatasa cida Especfica de Prstata): La fosfatasa prosttica es una glicoprotena de 100 kD
presente en la glndula prosttica y sus secrecciones. Aparece concentrada en las vacuolas secretoras
supranucleares del epitelio columnar prosttico. Marca tanto a las clulas epiteliales benignas como a las
malignas del parnquima prosttico. Es positivo para hipertrofias y adenocarcinomas protticos.
29
S100: Anticuerpo de conejo que reacciona contra un antgeno denominado S100 (termolabil y soluble en
soluciones de sulfato de amonio a pH neutro. Da positivo: en piel: clulas de Langerhans (Histiocitosis X),
melanocitos (Melanomas).
en sistema nervioso: astrositos, oligodendrocitos, neuronas, clulas ependimarias y clulas de la piamadre
(astrocitomas, oligodendrogliomas, ependinomas, tumores neuronales).
De forma genrica, marca clulas normales o tumorales de estirpe neuroectodrmica.
Sinaptofisina: Este anticuerpo reconoce vesculas presinpticas de neuronas, cerebro, mdula espinal, uniones
neuromusculares, retina e islotes pancreticos. Es detectado en clulas normales, reactivas y neoplsicas de
tipo neuroectodermal y neuroendocrino, como feocromocitoma, carcinoma medular de tiroides, tumores del
pncreas endocrino y tumores carcinoides.
Tiroglobulina: Glicoprotena 19S de 650 kD sintetizada en el tejido tiroideo. Se emplea para procesos
patolgicos cuyo origen primario sean los folculos tiroideos.
UCHL1: Tie la mayora de los timocitos, clulas T maduras, y clulas de la serie mielomonoctica
(granulocitos y monocitos). Es negativo para clulas B normales. Se emplea para la identificacin de clulas T
normales y neoplsicas, y en el estudio de la activacin de las clulas T.
Ulex Europeus: Tie la pared vascular (endotelio) y las clulas precursoras de eritrocitos.
Vimentina: IgG2A monoclonal de ratn. Marca filamentos intermediarios de clulas mesenquimales o
derivados mesenquimales no del tipo
30

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Tcnicas de

Carmn de Best ..................................................................................... 14

Qu marcan estos anticuerpos? ....................................................................... pg. 30

5.Se hace el bloque

Agua destilada 700 ml.

Agua destilada 10 ml.

Mantener por separado hasta usarla

Lavar en agua con piridina

Cloruro de oro, 5 min.

Azul celeste, 5 min.

cloruro alumnico (previamente pulverizado en un mortero), y se coloca en bao a ebullicin. Se hierve y

Aclarar en agua destilada

Fosfolpidos en azul. Es probable que se coloreen igual los ganglisidos y cerbrsidos.

Pase rpido en safranina 0,5%

Alcohol absoluto 6 ml.

Complemento C3: Demuestra la presencia del C3 humano.

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