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NCLEO DE SUCRE
ESCUELA DE CIENCIAS
DEPARTAMENTO DE BIOANLISIS
CUMAN, 2011
NDICE GENERAL
AGRADECIMIENTO .......................................................................................... i
DEDICATORIA .................................................................................................. ii
LISTA DE TABLAS ..........................................................................................iii
LISTA DE FIGURAS ........................................................................................ iv
RESUMEN .......................................................................................................... v
INTRODUCCIN ............................................................................................... 1
METODOLOGA................................................................................................ 8
Muestra poblacional ........................................................................................ 8
Obtencin de la muestras................................................................................. 8
Deteccin de anticuerpos anti- T. cruzi ........................................................... 9
Pruebas confirmatorias .................................................................................. 10
Anlisis de datos ............................................................................................ 11
RESULTADOS Y DISCUSIN ....................................................................... 12
CONCLUSIONES ............................................................................................. 26
RECOMENDACIONES ................................................................................... 27
BIBLIOGRAFA ............................................................................................... 28
HOJA DE METADATOS ................................................................................. 35
AGRADECIMIENTO
DEDICATORIA
ii
LISTA DE TABLAS
Tabla 1. Estadstica descriptiva para la edad de los donantes de los bancos de sangre
pblicos del estado Sucre y su distribucin segn el gnero. ..................................... 13
Tabla 2. Seroprevalencia para la infeccin por Trypanosoma cruzi en los dos bancos
de sangre evaluados en el estado Sucre....................................................................... 14
Tabla 3. Frecuencia de las distintas variables epidemiolgicas evaluadas en los
donantes de los dos bancos de sangre pblicos del estado Sucre. .............................. 21
33
LISTA DE FIGURAS
RESUMEN
INTRODUCCIN
atraviesan la piel por el sitio de la picadura o por las mucosas. En el mamfero, los
tripomastigotes metacclicos se introducen en el tejido laxo, adquieren la forma
amastigotes, stos se multiplican por fisin binaria, repletan las clulas, las cuales al
romperse quedan libres los parsitos en la circulacin bajo la forma de tripomastigotes,
diseminndose por todo el organismo, produciendo inflamacin local y sangunea de
ganglios, hgado, bazo, pulmn y miocardio. El ciclo biolgico se completa cuando los
tripomastigotes son ingeridos por otro vector, por va hematfaga (Botero y Restrepo,
2003).
Despus del perodo de incubacin, de 7-10 das en caso de transmisin vectorial y
de 20-40 das en caso de transmisin por transfusiones sanguneas,
aparecen los
1 a 2
semanas despus de adquirir la infeccin, dentro de los afectados cerca del 90,00% son
nios. Las manifestaciones de la fase aguda incluyen fiebre, anorexia, diarrea,
inflamacin de los ganglios, hepatoesplenomegalia, miocarditis y compromiso nervioso.
La sintomatologa de esta fase se resuelve espontneamente de 4 a 8 semanas. El perodo
latente o indeterminado se caracteriza porque la sintomatologa desaparece una vez
transcurrido el perodo agudo, en esta etapa ocurre una lenta multiplicacin intracelular
de los parsitos y oligoparasitemias, sin signos clnicos; sin embargo, las pruebas
serolgicas son positivas. Este perodo puede durar toda la vida o pasar a la forma
crnica de la enfermedad, la cual aparece en forma habitual despus de diez o ms aos
de la primoinfeccin. Se caracteriza por el dao irreversible de algunos parnquimas,
especialmente el corazn y los rganos huecos (Atias, 1998).
La transmisin natural de T. cruzi en la que interviene el vector se lleva a cabo en
postransfusionales, como es el caso de Estados Unidos donde ocurri una infeccin por
T. cruzi debido a una transfusin de plaquetas (Grant et al., 1989). En Mxico, se
encontr una prevalencia de 0,28% de anticuerpos contra T. cruzi en los donantes que
asistieron al banco de sangre en el rea metropolitana (Ramos et al., 1993). En Costa
Rica, la prevalencia obtenida fue de 0,08%, siendo el porcentaje ms bajo del rea
Centroamericana (Torres et al., 2004). En Argentina, se detect una seropositividad para
infeccin por T. cruzi de 2,41% en los donantes de sangre que asistieron al Banco de
Sangre General de Corrientes (Czernik at al., 2006). En Chile, la prevalencia de
individuos con anticuerpos anti T. cruzi fue de un 0,31% en el ao 2004, lo cual
demostr un descenso en relacin con la prevalencia descrita para el ao 1968 que era de
3,00% (Galaz et al., 2007).
Recientemente, en un estudio realizado en Mxico para el ao 2010, donde se
determin la deteccin de anticuerpos anti-T. cruzi en donantes de sangre de los 71
bancos de sangre del pas (n= 230 074), se encontr una prevalencia de 0,40% para la
infeccin por T. cruzi (Garza et al., 2010).
En Venezuela, los territorios con mayor prevalencia de la enfermedad de Chagas,
se ubican en las regiones del occidente y centro del pas, en los cuales se han reportado
una seroprevalencia para esta parasitosis de 9,20%, estimndose que la poblacin en
riesgo a esta infeccin es de 4 millones de individuos (Ach y Matos, 2001).
Maekelt (1957) report por primera vez en Venezuela, el peligro de la transmisin
de la infeccin chagsica por transfusin de sangre, encontrando 12,00% de
seropositivos en 449 donantes del banco de sangre de Valencia, estado Carabobo. Mora
et al. (1960) report en 1 650 soldados donantes procedentes del banco de sangre de las
Fuerzas Armadas de Venezuela una seropositividad para T. cruzi de 8,20%. Pifano et al.
(1961) estimaron que entre 3,50% y 5,00% de los donantes de sangre de Venezuela eran
portadores de anticuerpos contra T. cruzi. Salazar et al. (1962) comprueban la
transmisin de T. cruzi por transfusiones de sangre, al confirmar 3 casos de infeccin
post-transfusin.
Estudios de prevalencias realizados en los bancos de sangre de Venezuela,
demuestran el descenso que ha existido desde el ao 1993 hasta 2005, debido a que es
obligatorio en todos los bancos de sangre venezolanos realizar el tamizaje para T. cruzi
al 100,00% de los donantes. De esta forma, para el ao 1993 la seroprevalencia era
13,20% (n= 204 316), para 1995 la prevalencia fue de 8,00% (n= 202 515), en 1997
existi un 7,80% de seroprevalencia (n= 262 295), luego para 1999 descendi hasta un
6,00% de prevalencia (n= 302 100), desde ese momento la seroprevalencia para la
infeccin por T. cruzi se mantuvo entre 6,70%, 6,50% y 6,10% para los aos 2001, 2003
y 2005 respectivamente (Schmunis, 2010).
En un estudio realizado en Venezuela (2006) para validar diferentes antgenos de
T. cruzi (epimastigotes y tripomastigotes fijados, antgenos de excrecin secrecin de las
formas tripomastigotes de T. cruzi) en un ensayo inmunoenzimtico ligado a una enzima
(ELISA), se analizaron 2 038 muestras provenientes de bancos de sangre del estado
Bolvar y el estado Portuguesa, lograron una sensibilidad de 100,00% y una
especificidad mayor de 99,00%. Igualmente, al realizar las pruebas confirmatorias para
infeccin para T. cruzi en los donantes, se encontr que las pruebas validadas fueron
superiores a la prueba de diagnstico de rutina utilizada en esos bancos de sangre
venezolanos, ya que fueron capaces de identificar siete reacciones falsas negativas y dos
reacciones falsas positivas (Berrizbeitia et al., 2006).
En un estudio realizado para confirmar infeccin por T. cruzi de muestras
provenientes de bancos de sangre pblicos y privados de Venezuela, se encontr que de
254 donantes, 129 fueron confirmados como positivos (50,79%) por la tcnica de
ELISA, usando como antgeno extracto total de epimastigotes y el 8,50% por
xenodiagnstico artificial. De los 129 donantes confirmados serolgicamente, 68 eran
residentes de la regin capital y 61 del interior del pas (Daz et al., 2008).
METODOLOGA
Muestra poblacional
Los sueros que fueron utilizados en este trabajo de investigacin se recolectaron en
el banco de sangre del Hospital Universitario Antonio Patricio de Alcal (n=462) y el
banco de sangre del Hospital Santos Anbal Dominicci (n=337), en el periodo
comprendido desde mayo 2009 a marzo 2010, y se almacenaron a -70C hasta su
procesamiento. Las muestras de suero para este estudio fueron consecutivas para as
poder establecer, la seroprevalencia real en el banco de sangre evaluado. Asimismo, se
siguieron los lineamientos establecidos por la declaracin de Helsinki y las normas
internacionales
para
las
investigaciones
biomdicas
en
poblaciones
humanas
1 mol.l
durante 24 horas en cmara hmeda. Las placas fueron lavadas cuatro veces con
solucin amortiguadora fosfato salino (PBS) (pH 7,4) conteniendo 0,05% de Tween 20
(solucin de lavado). Posteriormente, las placas se bloquearon por 1 hora a 37C en PBS
con 5,00% de leche descremada y 0,10% de Tween 20 (solucin bloqueadora). Luego,
se le adicion el suero del donante, previamente diluido con solucin bloqueadora
(1:400) y se incub por 1 hora a 37C. Seguidamente, se realizaron 4 lavados con PBST,
se le agreg una solucin de anti-IgG humana conjugada a peroxidasa de rbano picante,
diluida 1:45 000 con solucin bloqueadora y se incubaron por 30 minutos a 37C,
despus de 4 nuevos lavados con PBST, se revel la reaccin con tetrametilbencidina
(TMB) por 10 minutos a temperatura ambiente y en la oscuridad. La reaccin se detuvo
-1
RESULTADOS Y DISCUSIN
57.80
%
42.2
0
%
Car pano
Cuman
Tabla 1. Estadstica descriptiva para la edad de los donantes de los bancos de sangre
pblicos del estado Sucre y su distribucin segn el gnero.
Bancos de
Edad
Rango
Gnero
Sangre (n)
X
DS
31,66
Cuman
(462)
Carpano
(337)
Min
59
9,54
9,71
Max
18
31,26
(%)
56 (12,10)
406
(87,90)
18
59
F (%)
31 (9,20)
306
(90,80)
462
458
0,50%
0-
0,86%
1,14%
Carpano
337
337
0,021,71%
---
------
------
0-
------
------
--Total
799
795
0,50%
1,14%
con
otros
pases
de
Latinoamrica,
Venezuela
ha
presentado
(24,16)
Paludismo
15
en
reas paldicas
21
(1,38)
previa
788
(98,62)
15
Enfermedad
(98,12)
(1,88)
Habitar
784
la (1,88)
784
(98,12)
donacin
Hepatitis
2
(0,25)
2
(0,25)
Rechazo
previo
(99,75)
Picadura de
chipo
797
797
(99,75)
11
788
(98,62)
como (1,38)
donante
Enfermedad
cardiaca
7
(0,88)
n: poblacin; %: porcentaje
792
(99,12)
un
estudio
realizado
en
Argentina,
se
evaluaron
las
alteraciones
(ELISA),
CONCLUSIONES
RECOMENDACIONES
BIBLIOGRAFA
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Sangre
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HOJA DE METADATOS
Ttulo
Subttulo
Autor(es)
Apellidos y Nombres
Cdigo CVLAC /
CVLAC
GONZLEZ FAVIANNY
e-mail
e-mail
CVLAC
e-mail
e-mail
35
18754490
favy025@hotmail.com
rea
Subrea
CIENCIAS
BIOANALISIS
Resumen (abstract):
ROL
ROL
MARIOLGA
BERRIZBEITIA
Cdigo CVLAC
CA
AS
TU
CVLAC
6119292
mberriz@yahoo.com
e-mail
JU
e-mail
ROL
JESSICCA RODRIGUEZ
CVLAC
e-mail
CA
AS
TU
JU
12505363
jnrmar@gmail.com
e-mail
ROL
CA
AS
TU
JU
JU
CHELITA HERNANDEZ
CVLAC
e-mail
e-mail
ROL
5681460
figher@cantev.net
CA
AS
TU
Mes
Da
2011
10
21
Lenguaje: spa
9306352
delguifa67@gmail.com
Tipo MIME
TESIS-gonzalezf.doc
Aplication/Word
Alcance:
Espacial :
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(Opcional)
39
6/6
40