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Universidade Federal de Santa Catarina

Centro de Cincias Fsicas e Matemtica CFM


Departamento de Qumica da UFSC
QMC 5218 Qumica Orgnica Biolgica Experimental
Turma: 07205
Professor: Ricardo Jos Nunes

Experincia 01

Testes para carboidratos

Leandro Alves
Janine Biesek
Stefani Laise da Silva

12 de Setembro de 2014

Resumo
Neste trabalho experimental abordou-se a identificao de diferentes amostras de
carboidratos atravs de tcnicas qualitativas, utilizando o reagente de Molisch, detectouse a presena de carboidratos. Utilizou-se o teste de Barfoed para diferenciar
monossacardeos de dissacardeos, o teste de Benedict para identificao de acares
redutores, o teste de Bial para identificar pentoses de hexoses, teste de Seliwanoff para
distinguir aldoses de cetoses e o teste com iodo para deteco de amido. Alm desses
testes verificou-se a rotao ptica da sacarose e investigou-se o seu comportamento
mutarrotacional.

Introduo
Os carboidratos so normalmente definidos como aldedos e cetonas poliidroxiladas
ou substncias que hidrolisam para produzir tais compostos.

Os carboidratos

receberam este nome pelo fato da frmula emprica geral de muitos deles ser C n(H2O)n
ou seja, carbono hidratado.
Ns nos alimentamos desses compostos, quando comemos acar, pes, batatas,
arroz, etc. O algodo e o linho, fibras tradicionais de manufaturao de tecidos, a
madeira e o papel materiais indispensveis nos dias de hoje, so compostos quase que
exclusivamente de carboidratos.
A produo de carboidratos na natureza ocorre nas plantas verdes, atravs da
fotossntese, onde a clorofila catalisa a converso de CO 2 e gua em acares. Enquanto
as plantas sintetizam carboidratos, a partir de CO 2 e gua, os animais degradam os
carboidratos a CO2 e gua. Os animais comem as plantas e combinam os carboidratos
com o O2 do ar para executar a reao inversa da fotossntese. A oxidao de
carboidratos d ao animal a energia necessria para manter os processos vitais e
regenera o CO2 que a planta utilizar na fotossntese.

Classificao
Segundo a ocorrncia ou no de hidrlise os carboidratos so classificados em:

Monossacardeos
Os monossacardeos geralmente tm sabor adocicado, de frmula estrutural
Cn(H2O)n. Podendo variar de 3 a 7 carbonos (trioses, tetroses, pentoses, hexoses e
heptoses), sendo os mais importantes as pentoses e hexoses.
Pentoses:
-Ribose C5H10O5 forma o RNA
-Desoxiribose C5H10O4 forma o DNA

Pentoses so monossacardeos de 5 carbonos. Para os seres vivos, as pentoses mais


importantes so a ribose e a desoxirribose, que entram na composio qumica dos
cidos nuclecos, os quais comandam e coordenam as funes celulares.
Hexoses:
-Glicose C6H12O6
-Frutose C6H12O6
-Galactose C6H12O6
Hexoses so monossacardeos de 6 carbonos, que obedecem frmula geral
CnH2n0n (n=6). As hexoses mais importantes so a glicose, a frutose e a galactose,
principais fontes de energia para os seres vivos. Ricas em energia, as hexoses
constituem os principais combustveis das clulas.

Oligossacardeos
Grupamento de dois a dez monossacardeos atravs de ligao glicosdica. Os mais
importantes so os dissacardios.

Dissacardeos: Quando, por hidrlise, produzem dois monossacardeos.

Exemplo: Sacarose + H2O glicose + frutose Maltose + H 2O glicose + glicose


Lactose + H2O glicose + galactose

Trissacardeos: Quando, por hidrlise, produzem trs monossacardeos.


Rafinose.

Exemplo: Rafinose + 2 H2O glicose + frutose + galactose


Os oligossacardeos ou acares pequenos so carboidratos constitudos de duas a
dez molculas de monossacardeos. Interessa-nos, aqui, apenas aqueles formados por
duas unidades de monossacardeos, tambm chamados dissacardeos
Dissacardeos so acares constitudos, por ligao glicossdica, de dois
monossacardeos com desprendimento de uma molcula de gua (hidrlise).

Dissacardeos tm molculas relativamente pequenas, solveis em gua, razo por que


interferem, assim como os monossacardeos, no equilbrio osmtico das clulas. So
tambm a principal forma de transporte dos carboidratos.
A sacarose, o "acar de cana" ou de beterraba, constitudo por uma molcula de
glicose ligada a uma frutose. A maltose um dissacardeo, pois formada por duas
molculas de glicose. A lactose encontrada somente no leite. Resulta da unio de uma
glicose com uma galactose.

Polissacardeos
Sofrem hidrlise produzindo grande quantidade de monossacardeos. Ocorrem no talo e
folhas vegetais e camada externa de revestimento de gros e so insolveis em gua.
Exemplo: Celulose, Amido e Glicognio
Os polissacardeos ou acares mltiplos so carboidratos formadas pela unio de
mais de dez molculas monossacardeas, constituindo, assim, um polmero de
monossacardeos, geralmente de hexoses. Ao contrrio dos mono e dos dissacardeos, os
polissacardeos so insolveis em gua; no alteram, pois, o equilbrio osmtico das
clulas e se prestam muito bem funo de armazenamento ou reserva nutritiva. De
acordo com a funo que exercem os polissacardeos classificam-se em energticos e
estruturais. Polissacardeos energticos tm funo de reserva nutritiva. Os mais
importantes so o amido e o glicognio.

Amido - principal produto de reserva nutritiva vegetal (mandioca, batata doce,


car), caules do tipo tubrculo (batatinha), frutos e sementes (pinho). Constitui
um polmero de glicose (mais ou menos 1.400 unidades de glicose) com ligao
glicosdica.

O amido constitui-se de dois tipos diferentes de polissacardeos: a amilose com cerca de


1.000 unidades de glicose numa longa cadeia no ramificada enrolada em hlice e a
amilopectina com cerca de 50 a 60 unidades de glicose dispostas em cadeias mais curtas
e ramificadas. Espiral helicoidal da amilose

Glicognio - polissacardeo de reserva nutritiva dos animais, o glicognio


encontrado, principalmente, nos msculos. Tambm produto de reserva dos

fungos. Constitui um polmero de glicose (mais ou menos 30.000 resduos de


glicose) com ligao glicossdica e vrias ramificaes.

Objetivos
Os testes tm por objetivo identificar e distinguir carboidratos, como por
exemplo, distinguir aldoses de cetoses, pentoses de hexoses, acares redutores de no
redutores e diferenciar mono, di e polissacardeos.

Materiais e mtodos
1. Teste de Molisch: verificar se a molcula um carboidrato
Adicionam-se dez gotas das solues 1% de glicose, sacarose e amido em trs
tubos de ensaio distintos. Dilui-se cada soluo com dois mililitros de gua. Adicionamse duas gotas de soluo de -naftol em cada um dos tubos e agita-se. Sem agitar o tubo
de ensaio, inclina-se o tubo de ensaio e adiciona-se lenta e cuidadosamente trs
mililitros de cido sulfrico concentrado para formar uma fase abaixo da soluo de
acar. A formao de um anel prpura na interface indica a presena de carboidrato.
Fazer o teste para trs amostras.
Preparao da soluo de -naftol: dissolver 10 g de alfa naftol em 100 mL de etanol
95%.
2. Teste de Barfoed: distinguir mono e dissacardeos.
Adicionam-se 2,5 mililitros do reagente de Barfoed a diferentes tubos de ensaio
e aos mesmos adiciona-se 2,5 mL de soluo 1% de diferentes carboidratos. Agita-se e
colocam-se os tubos (todos ao mesmo tempo) em banho de gua fervente! Os tubos so
aquecidos por cerca de 3 min. Durante este tempo observa- se os tubos e anota-se
qualquer mudana de cor. Teste positivo para monossacardeos indica a formao de
precipitado vermelho tijolo de Cu2O dentro de 1 a 2 minutos. A no formao de
precipitado neste tempo indica a presena de dissacardeo. Registra se os tempos em
que as mudanas de colorao aconteceram. Com o intuito de comparar as cores,
aconselhvel usar um tubo controle (branco) contendo somente gua.

Preparao do reagente de Barfoed: dissolver 66,5 g de acetato de cobre II em 800 mL


de gua, adicionar 6,0 mL de cido actico glacial e completar, com gua destilada, o
volume at 1000 mL.
3. Teste de Benedict: acares redutores
Fizeram-se os testes usando solues de carboidrato a 1%. Adicionou-se 2,5 mL
do reagente de Benedict e 1 mL da soluo de cada carboidrato em diferentes tubos de
ensaio e foi agitado. Colocaram-se os tubos em banho-maria (todos ao mesmo tempo).
Aps 5-6 min foram observadas as alteraes que esto anotadas na tabela.
Adicionou-se 4-5 gotas de soluo de HCl 3M a 5 mL de soluo de sacarose e
aqueceu-se em banho-maria por 5 min. Foi feito o mesmo com uma soluo 1% de
amido onde foi deixado aquecer por cerca de 30 min. Foi realizado o teste de Benedict
usando 1-2 mL das solues acidificadas (sacarose e amido) e comparou-se os
resultados obtidos com as solues sem a adio de cido.
4. Teste de Bial: distingue pentoses de hexoses
Adicionou se 0,5 mL de solues de carboidratos em diferentes tubos de
ensaio e aos mesmos adicionou se 2 mL do reagente de Bial acidificado. Agita se e
colocam se os tubos em banho - maria por 10 minutos. Um teste positivo para
pentose indicado pelo desenvolvimento de corverde a azul intenso. Hexoses produzem
cor marrom ou marrom esverdeada. Realizou se s teste com trs amostras.
Preparao do reagente de Bial: dissolver 6 g de orcinol em 200 mL de etanol 95% e
adicionar 40 gotas de soluo 10% de FeCl3.6H2O.
5. Teste de Seliwanoff: distingue cetoses e aldoses.
Colocou-se 2-3 gotas de solues de carboidratos em diferentes tubos de ensaio.
Adicionou - se 5 mL de soluo de resorcinol (dissolver 0,05 g de resorcinol em 100 mL
de soluo de HCl diludo HCl:H2O, 1:2). Ento, leva-se

todos os tubos para banho-

maria. Anota - se a cor em cada tubo de ensaio aps 1 min e aps 4 min. O
desenvolvimento de cor vermelha aps 4 min constitui teste positivo para cetoses.
Aldoses reagem mais lentamente.
Ceto-hexoses: soluo vermelho-cereja
Cetopentoses: soluo azul esverdeada.
Aldoses: no h desenvolvimento de cor.

Dissacardeos: no h desenvolvimento de cor.


6. Reao com iodo:
Em um tubo de ensaio coloca se 5,0 ml de gua destilada, 10 gotas de amido
1% e uma gota de Lugol (soluo iodo-iodetada). Verifica se o aparecimento de uma
intensa colorao azul, que desaparece pelo aquecimento brando (banho maria), e
reaparece, porm, mais fraca, pelo resfriamento rpido.
7. Reao de hidrlise do amido: (chapa de aquecimento, temperatura baixa):
Coloca se aproximadamente de 20,0 ml de soluo de goma de amido 1%
em um frasco erlenmeyer de 100 ml. Adicionou-se 1,0 ml de cido clordrico
concentrado (procedimento deve ser realizado na capela!) agita-se e transfere-se
imediatamente 1,0 mL da mistura para um tubo de ensaio.
Acrescenta-se esta, 1 gota de Lugol e verifica-se a mudana cor. Coloca-se o
erlenmeyer sobre a chapa metlica, em banho Maria.
Iniciada a ebulio, retira-se cerca de 1,0 ml da amostra, a cada 4 minutos, em tubos de
ensaio previamente numerados (sero necessrios 6 a 7 tubos). Adiciona-se em cada
tubo, com exceo do ltimo tubo, 1 gota de Lugol.
8. Reao de hidrlise da sacarose. (Inverso da Sacarose)
Prepara se 50 mL de uma soluo de sacarose 10%. Medir a rotao tica da
soluo preparada no polarmetro. Calcula - se a sua rotao especfica.
Transfere - se a soluo (aproximadamente 40 ml) para um erlenmeyer e
adicionam-se 20 gotas de cido clordrico concentrado, tapa - se com um filme, no
se esquecendo de fazer um furo no filme.
Coloca-se em banho-maria contendo gua fervente, por aproximadamente de 10 15 minutos (ou at que a soluo fique levemente amarelada). Aps o resfriamento,
mede-se a rotao tica novamente.

Resultados e Discusses

1. Teste de Molisch
utilizado para indicar a presena de carboidratos atravs da desidratao dos
grupos -OH com o uso de um cido forte, e gerando desta maneira monossacardeos,
qualquer grupo pode ser hidrolisado (dissacardeos ou polissacardeos) e todos resultam
em um monossacardeo. Uma hexose desidratada para o composto furfural, j uma
pentose para o hidroximetilfurfural.

Ambos resultam em uma colorao prpura, os resultados positivos foram obtidos para
sacarose, amido e glicose.
2. Teste de Barfoed
O reagente de Bafoed consiste em uma soluo contendo acetato de cobre II em
cido actico glacial. usado na caracterizao de monossacardeos resultando assim
em um positivo quando a soluo apresentar uma cor vermelho tijolo, que resultado da
oxidao pelo on Cu2+ resultando em um cido carboxlico e o precipitado cor
vermelho tijolo (Cu2O)

O teste positivo se d quando o precipitado se forma em menos de 3 minutos. O


resultado positivo foi obtido para frutose, glicose, galactose, manose, e xilose.
3. Teste de Benedict
O reagente uma soluo alcalina constituda de ons de Cu2+ e ons de
complexo de citrato cprico. Os acares contm grupos aldedos e cetonas capazes de
reduzir sais de metais pesados, desses mais usados so sais de cobre II. A soluo
mencionada acima oxida e fornece teste positivo na presena de aldoses, cetoses e todos
os carboidratos que possuem um grupo hemiacetal. Nessa soluo alcalina, cetoses so
convertidas em aldoses que so ento oxidadas pelos complexos cpricos. A formao
de um precipitado vermelho tijolo, CuO 2, surge quando uma aldose oxidada, indicando
que o teste deu positivo. Carboidratos que apresentam grupos acetais so chamados de
acares no redutores.

Na primeira etapa desse teste, obteve-se resultado positivo para a lactose frutose,
glicose, galactose, manose e xilose. Na segunda etapa, em meio cido, ocorreu hidrlise
da sacarose e assim decompondo o acetal. Na hidrlise da sacarose produzido a Dglicose e a D-frutose, o que resultou em um teste positivo.

4. Teste de Bial
uma reao de identificao de pentoses e carboidratos contendo pentoses, a
reao intenciona obter uma colorao azul, tpica quando h pentoses.
O reagente consiste de orcinol em meio cido concentrado na presena de Fe3+. O
furfural proveniente da desidratao de pentoses, quando aquecido na presena do
reagente de Bial da uma colorao verde. O hidroxifurfural (hexose) reage quando
dando uma colorao que vai do amarelo ao marrom.

Aps o banho-maria, constatou-se que a amostra de lactose apresentou uma colorao


marrom-esverdeada, que indica se tratar de uma hexose. As demais amostras so,
portanto, para a galactose uma hexose cor marrom e para a xilose que se trata de uma
pentose apareceu uma colorao azul intensa.

5. Teste de Seliwanoff
O teste de Seliwanoff permite diferenciar cetoses de aldoses, atravs da ao
desidratante do cido clordrico, que permite o aparecimento de um complexo entre
furfural e resorcinol. A reao com cetoses ocorre de maneira mais rpida e mais intensa
devido a facilidade das mesmas de formarem o complexo, aldoses tambm podem
reagir, porem de forma mais lenta.
O teste foi realizado com todas as amostras. Aps 1 minuto de reao, as
solues de sacarose e frutose iniciaram a apresentar um leve tom rosado, e aps 4
minutos houve o aparecimento de uma cor vermelha intensa, confirmando assim o fato
de serem ceto hexoses. Para as demais solues, no houve desenvolvimento de cor.
6. Reao com iodo:
Um dos fatos interessantes da reao do amido com o iodo foi o aparecimento de
uma intensa colorao azul. O amido um polissacardeo que constitudo basicamente
por outros dois polissacardeos: a amilose e a amilopectina. A amilopectina e a amilose
possuem estruturas semelhantes, ambas apresentam estrutura helicoidal, porem a
amilopectina possui ramificaes em determinados pontos de sua cadeia e a amilose
no. A estrutura helicoidal aprisiona de certa forma o iodo, formando um complexo
que resulta na colorao azul.

Se a reao fosse realizada com glicognio (que constitui-se de uma molcula


ramificada formada por unidades de glicose), o teste daria positivo, devido a sua
semelhana estrutural, como podemos ver a seguir:

A seguir descreve se as diferenas estruturais entre:

a) Amilose e celulose.
A diferena estrutural entre as duas est basicamente nas ligaes 1 e 4 onde a
diferena entre a ligao alfa da amilose e -glicose da celulose resulta em
caractersticas muito diferentes.

Estrutura da celulose

b) Amilose e amilopectina.

Discutidas anteriormente.

c) Amilopectina e glicognio.
Ambos possuem o mesmo monmero, e tm ligaes alfa-1,4 e alfa-1,6 entre
carbonos de cadeias de duas glicoses diferentes, a ligao alfa-1,6 responsvel pela
ramificao da estrutura. A diferena bsica da amilopectina e do glicognio esta nas
ramificaes, no glicognio, uma ramificao aparece a cada 12 carbonos e na
amilopectina uma ramificao percebida a cada 24-30 carbonos, isso resulta em
diferenas se tratando em estoque de carboidratos, pois um maior nmero de
ramificaes resulta em um abastecimento mais rpido em um menor espao de tempo.

d) Celulose e quitina.

A diferena entre ela esta em seus monmeros, o que da as mesmas caractersticas


diversas, como por exemplo o tempo de meia vida, a quitina biodegradvel enquanto a
celulose possui um tempo de mia vida de 300 anos. Podemos observar a seguir, a
diferena clara entre as estruturas, onde o grupo NOCH4 da quitina substitudo por um
grupo -OH na celulose.

7. Reao de hidrolise do amido


Na reao de hidrlise do amido observamos a quebra gradual do amido at que
restasse somente glicose em soluo, observamos isso atravs da gradual mudana de
colorao, passando de uma colorao azul intensa.
Isso ocorre porque ao aquecer o amido, separamos os seus principais componentes:
a amilose e amilopectina. A hidrlise do amidos faz com que a enzima -amilase rompa
as ligaes glicosdicas -1,4 da amilose originando uma mistura de maltose,
amilopectina e glicose. Rompe tambm as ligaes -1,4 da amilopectina, originando
uma mistura de polissacardeos denominadas dextrinas. A enzima -amilase rompe as
ligaes -1,4 dos polissacardeos resultantes da hidrlise da amilopectina, originando
maltose pura.
Realizamos teste de Benedict no ultimo tubo de ensaio, e o teste gerou um resultado
positivo,, indicando que ocorreu hidrolise da maltose em duas molculas de glicose.

Na reao de hidrlise do amido foi possvel observar um degrade na colorao, onde


tem-se:

Amido

colorao violeta intensa

Amilodextrina

colorao verde

Eritrodextrina

colorao laranja claro

Acrodextrina

colorao amarelo fraco

8. Reao de hidrlise da sacarose (Inverso da sacarose)


Os dissacardeos sofrem hidrlise resultando em monossacardeos, ou seja, essa
reao de formao da sacarose pode ocorrer no sentido inverso, com a formao de
uma mistura de glicose e frutose, que chamada de acar invertido.
Reao de hidrlise da sacarose resultando em glicose e frutose:

Analisou-se uma soluo aquosa de sacarose ([]D = +66,37) em um polarmetro e


uma soluo de glicose e frutose equimolar, observamos que elas possuem atividade
ptica inversa, sendo que a soluo de sacarose desvia o plano de luz polarizada para a
direita e dextrogira, j a soluo de -D-glicose ([]D = + 52,5 ) e -D-frutose ([]D =
-92 ) desvia o plano de luz polarizada para a esquerda e levogira. Devido a este
resultado experimental, diz se que so aucares invertidos.

Clculo da rotao especfica:

D=

( l .C )

D terico=19,63

D=

C=

x
=66,65
( 2. C )

13,00
=0,099 g/mL
( 2. 66,65 )

D=

x
( 2 x 0,099 )

y180 =x
176,9180=3,1

D=

3,1
=15,65
( 2 x 0,099 )

Concluso
Os carboidratos so os constituintes orgnicos mais abundantes nas plantas e de
grande importncia para os animais, alm de serem fonte de energia para os organismos
vivos eles tambm so importantes na estruturao de tecidos de suporte tanto em
animais como vegetais. Conhecer as estruturas dos carboidratos fundamental para o
entendimento de suas respectivas funes, e por meio dos testes realizados neste
experimento podemos distinguir os carboidratos como sendo redutores, no redutores,
polissacardeo, monossacardeo, dissacardeo, aldoses, cetoses, pentoses e hexoses.

Referncias Bibliogrficas
Qumica Orgnica/ Norman Alinger [et al] Rio de Janeiro, Guanabara, 1985. Pg. 621622
Solomons T.W.Gr. Qumica Orgnica Vol II 6. Ed pg 354
http://qnesc.sbq.org.br/online/qnesc29/03-CCD-2907.pdf
http://web.ccead.puc-rio.br/condigital/video/e%20tempo%20de
%20quimica/alimentos/carboidratos/guiaDidatico.pdf