CROMOSOMA 21 Y SINDROME DE DOWN

Definicin del sndrome de Down (DS).

El sndrome de Down es una condicin gentica causante de la mayora de los
casos de retraso mental en Occidente. Aparece con una frecuencia de 1 de
cada 700 nacimientos vivos, y no tiene distincin de ambiente geogrfico o de
clase social. Su elevada incidencia en la poblacin hace del sndrome de Down
el mas llamativo de todos los sndromes humanos de origen gentico.
Los genes implicados en algunos de sus sntomas son los mismos que los de
diversos trastornos clnicos (leucemia, Alzheimer). Por ello es causa de una
intensa investigacin. El sndrome de Down no es una enfermedad reciente: se
ha encontrado por ejemplo un crneo sajn del siglo IX, e interpretaciones
artsticas del siglo XV. El sndrome se reconoci formalmente en 1866: John
Langdon Down public la primera descripcin global de la enfermedad.
Un individuo con sndrome de Down presenta un cuadro con distintas
anomalas que abarcan varios rganos y sistemas, debido a un desbalance que
afecta a numerosos genes (se explicar mas adelante). Los signos y sntomas
mas importantes son:

retraso mental
corta estatura corporal
hipotona muscular marcada (flaccidez muscular)
marcado pliegue epicntico de los ojos
abertura palpebral sesgada hacia arriba y afuera
rasgos faciales aplanados
cuello corto y piel abundante en la nuca
hipoplasia maxilar y del paladar que determinan la protrusin de la
lengua
dedos cortos con hipoplasia de la falange media del quinto dedo y
pliegues anormales en las manos (surco o pliegue simiesco en la palma
de la mano)
pies con una amplia abertura entre el primer y el segundo dedo, con un
surco que se extiende proximalmente en la superficie plantar
alteraciones cardacas congnitas (en un 40% de los casos),
generalmente por defectos del tabique ventricular, conducto arteriosos
permeable
aresia o estenosis duodenal
en caso de ojos claros, aparicin de manchas de Brushfield (manchitas
blancas colocadas en forma concntrica en el tercio ms interno del iris)
riesgo elevado de desarrollar cataratas u otros trastornos visuales
relacionados con defectos de los cristalinos
elevado nivel de purinas (posible causa de los defectos neurolgicos)
deficiencias en el sistema inmunitario

incremento de la susceptibilidad a las infecciones

aumento (20 a 50 veces) del riesgo de padecer leucemia.

El viejo trmino "mongolismo" (alguna vez utilizado para referirse a este

trastorno) refleja el aspecto en cierto modo oriental del semblante que
producen los pliegues epicnticos caractersticos y las fisuras palpebrales
"achinadas". En la actualidad, el trmino se considera inapropiado y no debera
utilizarse.
El retraso mental es el signo mayor en el sndrome de Down. Usualmente los
adultos tienen un coeficiente intelectual (CI) de 25 a 50, pero se considera que
el nivel alcanzable puede variar de acuerdo con los estmulos que recibe de
sus familiares y de su entorno. El CI vara durante la infancia, obteniendo su
mximo relativo al normal, entre los 3 y 4 aos de edad, luego de lo cual
declina ms o menos uniformemente (vease grfica "Cambios de coeficiente
intelectual de acuerdo con la edad en el sndrome de Down"). Desde el punto
de vista psicolgico son alegres, obedientes, pueden tener sentido musical y no
tienden a la violencia.
Se ha observado que los individuos que superan la edad de 35 aos
desarrollan en el cerebro el mismo tipo de placas seniles y de nudos
neurofibrilares microscpicos anormales que las personas que mueren por la
enfermedad de Alzheimer, la forma ms frecuente de demencia presenil.
El promedio de vida de los individuos afectados, gracias a los adelantos de la
atencin mdica, se ha pasado de los 9 aos de vida media en 1929 a por
ejemplo los 30 aos en 1980. La supervivencia de los pacientes de DS
depende basicamente de la gravedad de las malformaciones viscerales que
pueden tener. Estas malformaciones determinan el fallecimiento de muchos en
los primeros aos, de modo que los mayores de 5 aos tienen expectativas de
vida razonablemente largas. Actualmente, un 25% alcanza la edad de 50 aos
La fertilidad de los pacientes es totalmente diferente en los dos sexos: mientras
en el varn con sndrome de Down la espermatognesis se bloquea en la etapa
meitica y son estriles, las mujeres son frtiles. La descendencia de una
paciente de sndrome de Down se ajusta a las predicciones tericas, puesto
que aproximadamente el 50% de sus hijos son normales, y el otro 50% es
trismico por transmisin de un cromosoma 21 excedente.

Historia y DS.
A lo largo de la historia mas reciente diversas teoras han sido propuestas para
explicar la aparicin de individuos afectados con el sndrome de Down: hasta
1909 se atribua la aparicin del sndrome por malformaciones de las glndulas
endocrinas, o porque los progenitores estaban afectados por tuberculosis o
sfilis. En 1909, tras la observacin de que un nmero importante de nios con
sdrome de Down eran los ltimos vstagos de familias numerosas, se sugiri
que era consecuencia del "agotamiento uterino" (G. E. Shuttleworth).

En 1930, Adrian Bleyer y P. J. Waardenburg observaron el comportamiento

anmalo de los cromosomas de la planta llamada primavera tarda, en la que
una separacin incorrecta de los cromosomas provocaba la aparicion de
individuos estriles con 15 cromosomas (en lugar de los 14 normales). Se
sugiri por primera vez que el sndrome de Down podra estar relacionado con
la no disyuncin (la no disyuncin es el fracaso en la separacin de los
cromosomas durante la meiosis).
En 1950 se determin que el nmero normal de cromosomas en el hombre es
de 46 (Joe Hin Tjio y Albert Levan) y se verific la relacin entre sndrome de
Down y no disyuncin. La observacin de cariotipos de individuos con
sndrome de Down (Jerme Lejeune, Marthe Gauthier y Raymond Turpin)
determin que la causa era una trisoma del cromosoma 21 como
consecuencia de un efecto de no disyuncin (vease dibujo "No disyuncin
durante la primera y segunda divisin meitica").
Un feto trismico como norma general no suele sobrevivir y los que lo logran
sufren mltiples alteraciones bioqumicas y fsicas. La alta frecuencia de
trisomas del cromosoma 21 se debe a su pequeo tamao.
Otra causa de sndrome de Down es una translocacin de un fragmento del
cromosoma 21 a otro cromosoma (generalmente 13, 14, 15, 21 o 22). En este
caso durante la meiosis surgen problemas de emparejamiento y el fragmento
del cromosoma 21 aparece en una de las clulas hijas junto con un cromosoma
21 normal. Estudios demuestran que basta la trisoma del tercio terminal del
cromosoma 21 para producir la enfermedad.
El diagnstico clnico del DS generalmente no presenta dificultades. Sin
embargo, el cariotipo est indicado para confirmar y proporcionar las bases
para el consejo gentico. Si bien el cariotipo especfico que genera el DS tiene
muy poco o ningn efecto en el fenotipo del paciente, resulta esencial para la
determinacin del riesgo de recurrencia.
Generalmente todos los pacientes con DS reconocido clnicamente tienen solo
una trisoma parcial en el 21. Muchos laboratorios tienen sin embargo
colecciones de DNA de pacientes con:

caractersticas fenotpicas de DS y trisoma parcial en el 21

trisomas parciales del 21 sin los rasgos fenotpicos del DS
fenotipos de DS sin ninguna anomala cromosmica observable.

Este ltimo grupo de pacientes es intrigante desde el punto de vista de un

cuidadoso y extensivo anlisis molecular, ya que no ha sido encontrada
triplicacin del HC21 y todava el anlisis de estos pacientes cumple con los
mnimos criterios para la diagnosis de DS. Es posible que estos pacientes
tengan una pequea regin triplicada del HC21 esta ha escapado a la
deteccin o esta anomala es de unos pocos genes en el HC21, o en otra parte,
obtenindose un fenotipo similar a aquellos que tienen DS.

Todos estos casos posibles se explican detalladamente en los siguientes

apartados.

DS por trisoma libre del cromosoma humano 21

(HC21).
En alrededor del 95% de todos los pacientes, el sndrome de Down presenta
trisoma para el cromosoma 21, que se producie por la no disyuncin meitica
del par cromosmico 21.
Est establecida la relacin entre la edad materna y el riesgo de dar a luz a un
trismico. Este riesgo aumenta aproximadamente 40 veces entre la edad de 20
aos y las edades mayores de 45 aos. Veas en la grfica "Sndrome de
Down y edad materna" como la frecuencia frente a la edad se mantiene lineal
hasta aproximadamente los 32 aos y luego va aumentando de manera
exponencial; a la edad de mayor riesgo (ms de 45 aos) la frecuencia no
excede del 3% (comparada con una frecuencia cercana al 0.07% a los 20
aos). Esta relacin entre edad materna y trisoma sugiere inmediatamente que
el origen de esta anomala estriba en la meiosis materna. Y efectivamente, la
trisoma 21 se origina preponderantemente por no disyuncin en la meiosis de
la madre (veas esquema de la meiosis materna). La frecuencia de nodisyuncin aumenta correlativamente con la edad de la mujer, en la cual todos
los ovocitos ya estn formados al nacimiento, y algunos de ellos se van
activando en los ciclos menstruales sucesivos hasta la menopausia. La edad
materna asociada a errores en meiosis materna I es de 31.2 aos, y dan
cuenta de un 77.5% de errores meiticos maternos del total de errores en la
meiosis, y del 68% de todos los ejemplos de trisoma 21 libre. Los errores en la
meiosis materna II constituyen el 22.5% de los errores de origen materno y el
20% de todos los casos de trisoma 21 libre. La edad materna media de estos
errores es de 32.5 aos.
Contrariamente, la produccin de espermatocitos es continua durante la vida
adulta del varn, lo cual no significa que el varn est totalmente libre de que
ocurra no-disyuncin en sus espermatocitos. Si bien la mayora de las trisomas
21 ocurren debido a no-disyuncin materna, una minora (slo el 6.7%) es
debida a no disyuncin durante la espermatognesis en el padre (vease Tabla
sobre "Frecuencias del origen de trisoma usando polimorfismos del DNA"). En
el caso del nmero total de familias en las que no haba separacin de los
cromosomas paternos durante la gametognesis, hay mas errores en meiosis II
que errores en meiosis I (62% y 38% de errores en meiosis paterna II y I,
respectivamente). Las edades maternas y paternas medias en esta categora
son similares a la edad media reproductiva en sociedades occidentales.
La no-disyuncin es esencialmente un suceso espordico, de manera que si
una mujer ha tenido un hijo con DS por trisoma, el riesgo de tener otro est
solamente relacionado con su edad.

En un 5.5% de la trisoma 21 libre, el HC21 extra parece ser resultado de un

error en la mitosis. En estas familias la edad materna media es de unos 28
aos, la cual es similar a la edad materna reproductiva media. Como era de
esperar, no hay preferencia por la que el HC21 se duplique en errores
mitticos, y el cromosoma extra puede igualmente que derive de cualquiera de
los padres.
Es importante realizar el estudio cariotpico porque hay un 2% de pacientes con
mosaicismo, cuyo pronstico es ms benigno. El mosaicismo generalmente es
de una linea celular con trisoma y otra linea diploide normal, es decir
47,XY+21/46,XY.
La disponibilidad de marcadores polimrficos de ADN altamente repetitivos ha
permitido la determinacin del origen paternal del cromosoma 21 extra en la
trisoma 21 libre, la cual constituye el 95% de los casos de trisoma 21.
Adems, los marcadores de ADN cercanos a la regin centromrica indican el
estado de meiosis en el que el error de segregacin ha tenido lugar. La
homocigosis para todos los marcadores a lo largo del 21q, incluyendo los
marcadores pericntricos, se interpreta como resultado de un error mittico
postcigtico.

DS por translocacin.
Hay varios tipos de translocaciones que dan lugar al sndrome de Down;
prcticamente todas son de tipo robertsoniano. Las mas frecuentes son las que
involucran un acrocntrico grande (del grupo D) y el nmero 21, y las que
involucran dos acrocntricos pequeos. Un 4% de los pacientes con sndrome
de Down tienen 46 cromosomas, uno de los cuales constituye una
translocacin robertsoniana entre el cromosoma 21q y el brazo largo de uno de
los otros cromosomas acrocntricos, generalmente el cromosoma 14 o 22.
Las translocaciones observadas en el sndrome de Down que involucran
siempre cromosomas acrocntricos ocurren de la siguiente forma: dos
cromosomas acrocntricos sufren rupturas cerca del centrmero, y se
recomponen en dos nuevos cromosomas: uno compuesto por los dos brazos
largos y el otro por los dos brazos cortos; este ltimo es un cromosoma muy
pequeo y compuesto por heterocromatina, que generalmente se pierde sin
efectos fenotpicos. El otro cromosoma derivado de esta translocacin
robertsoniana es un cromosoma diferente de los normales, metacntrico o
submetacntrico, que como contiene casi todo el material gentico de los
cromosomas que intervinieron en la translocacin, no expresa tampoco efectos
fenotpicos en la clula original o en su clon de descendientes: se trata de una
translocacin balanceada, porque no sobra ni falta material (salvo el pequeo
trozo de heterocromatina perdida). Se denomina balanceada cuando no hay
trisoma o monosoma parcial, es decir, que el cromosoma derivado representa
a los dos acrocntricos, y la clula tiene adems los homlogos ntegros que
no intervinieron en la translocacin.

El problema puede suscitarse cuando una clula germinal que lleva este
cromosoma translocado entra en meiosis, luego de la cual un gameto
(espermatozoide u vulo) lleva el cromosoma translocado y uno de los
homlogos. Como el cromosoma translocado representa el material de dos
cromosomas, este gameto lleva un cromosoma redundante, y en la fertilizacin
producir una trisoma virtual porque el paciente tendr el nmero normal de 46
cromosomas, pero en realidad el cromosoma translocado son dos
cromosomas, por lo cual hay una trisoma del brazo largo del 21. Por
consiguiente, los enfermos de Down con translocacin, tienen 46 cromosomas,
y su progenitor, si es portador, tiene 45 cromosomas.
As, un portador de una translocacin robertsoniana que incluya los
cromosomas 14 y 21 posee slo 45 cromosomas; faltan un cromosoma y un
21, que estn reemplazados por el cromosoma de translocacion, t(14q21q).
Los gametos que se muestran en la ilustracin (ver grfica "Gametos que
puede producir un portador de una translocacin robertsoniana t(14q21q)") nos
indican los diferentes gametos que puede formar un portador. En teora, existen
seis tipos posibles de gametos, pero parece que tres de stos no pueden
generar descendencia viable. De los tres tipos viables, uno es normal, uno
resulta equilibrado, y el otro, desequilibrado, este ltimo con ambos
cromosomas 21, el de la translocacin y el normal. En combinacin con un
gameto normal, esto puede generar un nio con DS por translocacin. En
teora, los tres tipos de gametos se producen en cantidades iguales y, por lo
tanto, el riesgo terico de un nio con sndrome de Down ser de 1 de cada 3.
Sin embargo, extensos estudios poblacionales han mostrado que los
complementos cromosmicos desequilibrados aparecen slo en el 15% de la
descendencia de madres portadoras y en muy pocos de los descendientes de
padres portadores de translocaciones que incluyen el cromosoma 21.
A diferencia de la trisoma 21 estndar, el DS por translocacin no muestra
relacin con la edad materna, pero presenta un riesgo de recurrencia
relativamente alto en las familias cuando un progenitor, especialmente la
madre, es portador de la translocacin. Por esta razn, el cariotipo de los
padres y posiblemente de otros parientes es necesario antes de proporcionar
un consejo gentico.
Cuando la translocacin involucra los dos cromosomas 21, que forman un
cromosoma compuesto por los dos brazos largos, es decir, t(21q,21q), su
portador solo puede producir gametos anormales:

la mitad de los gametos irn con su dosis doble de material gentico del
cromosoma 21, siendo la descendencia potencial trismica (afectados
de DS).
la otra mitad carecer de este cromosoma t(21,21), siendo la
descendencia potencial monosmica, que casi nunca es viable.

Es decir, un individio suficientemente desafortunado como para tener este

defecto tiene un 100% de riesgo de producir un hijo con sndrome de Down,
siendo incapaz de procrear hijos normales y solo engendrar hijos afectados de

DS. Este es uno de los pocos casos de riesgo total en las enfermedades
genticas.
En un total de 24 casos examinados de transposicin t(14;21) de trisoma 21 de
novo, el cromosoma 21 extra es de origen materno. En la mayora (14 de 17
casos) de transposicin t(21;21) de novo de trisoma 21, el cromosoma anormal
es un isocromosoma (dup21q) ms que el resultado de una transposicin
causada por una fusin entre dos cromatinas heterlogas (translocacin
robertsoniana). Sobre la mitad de los isocromosomas estudiados eran de
origen paterno, y la mitad de origen materno. El dup21q est formado
probablemente por un fallo de separacin, bien de las cromtides en meiosis II
o bien de una cromtide hermana en una meiosis temprana. Finalmente, todas
las transposiciones t(21;21) verdaderamente de novo son de origen materno,
similar a la t(14;21).

DS por trisoma 21 parcial.

Con muy poca frecuencia, el sndrome de Down se diagnostica en un paciente
en el que slo una parte del brazo largo del cromosoma 21 est presente por
triplicado, e incluso ms raramente se identifica un paciente con sndrome de
Down con anomalas cromosmicas no visibles desde el punto de vista
citogentico. Estos pacientes son de particular inters porque pueden mostrar
qu regin del cromosoma 21 es probable que genere el fenotipo del sndrome
de Down (la "regin crtica") y qu regiones pueden triplicarse sin provocar el
fenotipo. La detallada caracterizacin citogentica y molecular de dichos
enfermos ha reducido el segmento crtico a la banda cromosmica 21q22. Se
supone que esta regin contiene al menos de 50 a 100 genes.
Los intentos para correlacionar la dosis triple de genes especficos con
aspectos particulares del fenotipo del sndrome de Down hasta ahora han
resultado infructuosos. Un problema es que, aunque pocos pacientes tienen
triplicacin slo de un segmento muy pequeo del cromosoma 21, la mayora
de los pacientes presentan trisoma para el cromosoma completo y no slo
para la regin crtica. Tiempo atrs, cuando el gen de la enfermedad familiar de
Alzheimer se mape en el cromosoma 21, se supuso una conexin causal,
porque los cambios patolgicos caractersticos de esta enfermedad tambin se
observan en pacientes con sndrome de Down. Si bien es posible que estos
cambios se deban a la presencia del gen de la enfermedad de Alzheimer en
dosis triple, hoy se sabe que este gen se encuentra fuera de la regin crtica
para el sndrome de Down. Una tarea futura ser separar los genes cruciales
para la expresin del sndrome de Down de aquellos que slo son sintnicos
con respecto a stos en el cromosoma 21.

DS en mosaicismo.
Alrededor del 1% de los pacientes con DS tienen mosaicismo, generalmente
con poblaciones celulares con un cariotipo normal y con trisoma 21. Es
probable que la mayora de pacientes con sindrome de Down en mosaico
derive de cigotos con trisoma 21, como se ha mencionado en los apartados
anteriores. El fenotipo puede ser menos grave que el de la trisoma 21 tpica,
pero existe una amplia variabilidad en los fenotipos entre pacientes mosaicos,
lo que posiblemente refleja la proporcin variable de clulas de trisoma 21 en
el embrin durante el desarrollo temprano. Es probable que los pacientes
detectados con sndrome de Down en mosaico representen los casos ms
anormales, ya que resulta menos probable que las personas afectadas de
forma leve sean cariotipados. El mosaicismo de grado bajo en el tejido germinal
de un progenitor es una de las causas postuladas del sndrome de Down,
especialmente entre los pacientes que nacen de madres de los grupos ms
jvenes de edad o en las raras familias con ms de un hijo trismico.

Mapas del HC21.

Como se ha dicho antes el origen del sndrome de Down radica en una
trisoma del cromosoma 21 o en una trisoma parcial como resultado de que se
haya producido una translocacin en dicho cromosoma. El uso de tcnicas
moleculares ha supuesto un gran avance en el estudio de esta anomala
gentica. Esto es as porque con el uso de estas tcnicas se podr descubrir
que genes estn implicados y poder en alguna medida mejorar la calidad de
vida de los individuos afectados por estas anomalas cromosmicas. Durante
muchos aos se ha tratado de ver que genes estn implicados en el sndrome
de Down para esto se han seguido una serie de estrategias.
Un paso previo antes de saber que genes estn implicados ha sido el estudio
de los cromosomas. El cromosoma 21 es un cromosoma acrocntrico, cuyo
brazo largo (21q) tiene una longitud aproximada de 37 Mb constituyendo as el
1 % del genoma humano. El brazo pequeo de este cromosoma (21p) presenta
una gran homologa con la de los otros cromosomas acrocntricos. Se ha
observado que la informacin gentica presente en el brazo pequeo es
mnima, en caso de haber, ya que no se han observado fenotipos clnicos
asociados a la trisoma por translocacin debido a la t(21;21) en el cual el brazo
21p es eliminado de los cromosomas translocados y cuyo fenotipo no presenta
diferencia con la de los individuos con trisoma en el cromosoma 21. El brazo
21p no es considerado importante en la contribucin al sndrome de Down.
Este sndrome sirve como un modelo en el desarrollo de las tecnologas
genticas. Durante los ltimos 19 aos se han elaborado varios mapas del
cromosoma 21. La informacin que se ha obtenido a partir de estos mapas est
siendo integrada en un sistema unificado, ayudado de la clonacin del HC21
usando contings (principalmente BACs y PACs) que estn siendo utilizados en
el esfuerzo para determinar la secuencia nucleotdica completa del HC21q. La

secuencia nucleotdica debe llevar definitivamente a la definicin de todos los

genes en el HC21. Los diferentes mapas que se han obtenido presentan ciertas
ventajas e inconvenientes como expondremos a continuacin.
Chromosomal breakpoint map o mapas cromosmicos de puntos de ruptura:
Estos mapas se han construido usando para ello cromosomas en los que se
han producido translocaciones responsables de anomalas cromosmicas.
Dichos cromosomas anormales han sido introducidos en el interior de hbridos
de clulas somticas de ratn y hombre. Estos mapas permiten dividir el
cromosoma en intervalos de unas pocas megabases cada uno.
Long-range restriction site map o Mapas de sitios de restriccin de
largo alcance: estos mapas nos permiten determinar de una forma muy
exacta la distancia en Kb entre dos seales de escisin seleccionados
de endonucleasas de restriccin, despus de haber realizados un
anlisis de los fragmentos que se ha originado. Son tiles ya que nos
permiten obtener informacin acerca del tamao de cromosoma. Un
mapa usando para ello el enzima Notl fue realizado para el 21q.
Linkage o mapas genticos de ligamiento: estos mapas son los ms
usados ya que nos permiten la localizacin de loci para enfermedades
monognicas y polignicas en un cierto cromosoma. Estos mapas se
han realizado usando marcadores polimrficos de DNA ordenados por
frecuencias de recombinacin. La mayora de estos marcadores
polimrficos usados son debidos a la variacin de cortas secuencias
repetidas y pueden ser detectadas despus mediante una amplificacin
por PCR. Estos mapas presentan una ventaja y es que permiten una
utilizacin ms cmoda para los anlisis automatizados. El actual mapa
del 21q es el ms denso de todos los cromosomas humanos. Ms de
130 marcadores han sido analizados y situados en el mapa de unin; el
promedio de distancia gentica entre distancias genticas es menor del
1.5 % de recombinacin. Aquellos mapas construidos usando meiosis
femeninas difieren de aquellos que se han construido usando meiosis
masculina, esto puede que sea debido a que el proceso meitico sea
diferente en ambos sexos. El mapa femenino es usualmente ms largo
en la mitad proximal del 21q, sin embargo, en la regin ms distal del
21q hay un exceso de recombinacin masculina y es ms largo el mapa
linkage masculino. La longitud total de ambos mapas genticos oscila
entre 55 y 80 cM (centiMorgan), el mapa sexo promedio es de 67 cM de
longitud. El mapa as obtenido del cromosoma 21 es una herramienta
excepcional para mapear rasgos mendelianos y de complejos
polignicos, la identificacin de cromosomas especficos involucrados en
aneuploidas o en procesos malignos y para diagnosticar el grado de
trisomas parciales del HC21.
Mapas de radiation hibryds: cuando clulas hbridas que contienen
todo el DNA cromosmico humano o un solo HC21 son irradiados y
entonces fundidos con una linea celular de roedor se obtienen unos
hibridos radiados que contienen slo pequeos fragmentos de HC21 o
de DNA genmico humano. Examinando un gran nmero de tales
hbridos por la presencia o ausencia de loci particulares, otros mapas
pueden ser construidos. Loci vecinos es ms probable que estn

presentes juntos en estos hbridos, mientras que loci distantes estn

separados. La mayor ventaja es que no se necesita que haya
marcadores polimrficos y cualquier trozo de DNA puede ser asignado a
este mapa. Este tipo de mapas esta siendo cada vez es ms poblado
con la adiccin de ETSs (sitios etiquetados por la expresin), las cortas
secuencias de cDNA humano en clones de clulas. El mapa RH ms
recientemente construido se construy con hbridos obtenidos tras la
irradiacin con 10,000 rads. El mapa contiene 161 marcadores y su
longitud total es de 1562 cR (24 kb/cR).
Clonacin del HC21 en clones superpuestos: la clonacin del DNA
del cromosoma 21 y la identificacin de los diferentes contings es un
paso esencial en la caracterizacin de genes relacionados con distintas
enfermedades, secuenciacin de DNA cromosmico, mapeo preciso de
genes, y estudio de la trisoma parcial en el HC21 en los fenotipos DS.
Varios vectores han sido usados para clonar fragmentos de DNA; los
ms usados son los csmidos, YACs, bacteriofagos P1, PACs y BACs.
Un ordenamiento continuo de los YACs fue producido para el 21q y sirve
como columna vertebral para muchos intentos de mapeo en
combinacin con los mapas linkage y radiation hybrids. El conting YAC
esta compuesto por 810 YACs y se extiende desde 21cen hasta 21
quter. Hay algunas reas no cubiertas y regiones que presentan
ordenamientos errneos, este tipo de mapas estn continuamente
siendo reformados. Estos mapas basados en los YAC son de particular
importancia en el proyecto genoma desde que mostraron a la comunidad
cientfica y las agencias financieras que los mapas fsicos de los
cromosomas humanos pueden hacerse, y que las promesas del
proyecto genoma podran ser totalmente completados y realizados a
tiempo. Sin embargo, contings usando vectores de clonacin basados
en bacterias, principalmente BACs, han mostrado ventajas sobre los
YACs para estudios de mapas transcripcionales y son vitales para la
realizacin de una completa secuencia de nucletidos del HC21. Un
csmido conting para la regin de 4 Mb en la llamada regin crtica del
DS ha sido construido. Tambin han sido construidos contings
bacterianos para otras regiones del 21q. Todos estos mapas de
superposicin son necesarios para la identificacin y caracterizacin de
los genes del HC21 involucrados en varios fenotipos de enfermedades
incluyendo aquellos genes implicados en el DS.

Secuenciacin y mapeo de genes en el HC21.

La secuenciacin de la regin codificante de las protenas del HC21 y en el
21q en particular es probable que tenga una importancia ms inmediata que la
secuenciacin del DNA extragnico, por razones mdicas y por otro tipo de
razones. Mucho "pre-HC21 secuenciado" esfuerzo de las investigaciones de
los ltimos 5 aos se han dirigido a la secuenciacin de genes en general, en
especial de los genes de la regin crtica del Sndrome de Down (DSCR) y
otras regiones del HC21 involucradas en desrdenes monognicos.

La longitud del brazo largo es el 1 % de la longitud de todos los cromosomas.

El genoma humano contiene entre 70,000-100,000 genes, asumiendo esto el
21q contiene del orden de 700-1000 genes. Pero, la densidad gnica no es
constante a travs de todo el genoma y hay dos tipos de regiones: regiones
ricas en genes o gen-rich y otras regiones pobres en genes o gen-poor.
Tambin se pueden encontrar cromosomas ricos en genes y otros pobres en
genes. El mapeado de 13,048 ESTs nos proporciona una mayor precisin del
contenido en genes del HC21; en el HC21 se han localizado 105 genes y el
nmero total de genes podra ser de 560 a 800 genes. En la tabla que se
muestra ms adelante se muestra que genes haban sido clonados en el ao
1997. Muchos de estos genes estn situados en el 21q22.3 y muy pocos en el
21q21; esto confirmara que la cantidad de genes no es constante en todo el
cromosoma, pero tambin podra reflejar una actividad transcripcional diferente
entre diferente regiones cromosmicas. La funcin de algunos de estos genes
y la contribucin al fenotipo del sndrome de Down y otros fenotipos est bajo
investigacin.
Porcentaje
Genes clonados

12

Unigene ESTs

ESTs

43

Se han hecho estos clculos asumiendo que el nmero total de genes es de

700 genes en el HC21. En la base de datos Unigene ETSs hay parcialmente
secuenciados en torno a 55 secuencias que suponen un 8 % del total de genes
que se cree que est presente en el HC21. Se ha observado que la densidad
de los exones en la DSCR es de 1 en 5 Kb.

Regin crtica de DS.

Generalmente, est asociado triplicaciones con esta regin a la manifestacin
del DS. Es muy raro encontrar pacientes con trisoma parcial en el HC21. Los
laboratorios tienen colecciones de DNA procedentes de los siguientes tipos de
pacientes:

caractersticas fenotpicas de DS y trisoma parcial en el 21.

trisomas parciales sin los rasgos fenotpicos de DS.
Fenotipos de DS sin anomala cromosmica observable

Este ltimo grupo de pacientes es muy intrigante y se sugiere que quizs

tengan una pequea regin triplicada del HC21 que ha escapado a la deteccin

o esta anomala este asociada a unos pocos genes en el HC21, o en otra parte,
obtenindose un fenotipo similar a aquellos que tienen DS.
Los estudios sugera que hay una regin de 4 Mb entre los marcadores de DNA
D21S17 y ETS2. Se observ que la triplicacin de esta regin estaba
frecuentemente asociada a las siguientes caractersticas del DS:

Puente nasal llano.

Lengua saliente.
Bveda alta o paladar estrecho.
Orejas plegadas.
Manos anchas y cortas.
Clinodactilia del quinto dedo.
Extensas uniones entre el primer y segundo dedo.
Hiperlaxilidad.
Hipotona muscular.
Baja estatura.
Retraso mental.

Por esto, dicha regin fue denominada como regin crtica del sndrome de
Down (DSCR). Sin embargo, se ha observado que triplicaciones de la zona
comprendida entre los marcadores BCEI incluyen caractersticas adicionales
tales como:

Fisura de los ojos oblicua.

Sitios de Brushfield.
Pliegues palmares transversales.
Seales dermoglficas anormales.

Hay tres pacientes conocidos con triplicaciones proximales del 21q (no se
extiende al DSCR) y presentan las siguientes caractersticas fenotpicas:

Microcefalia.
Baja estatura.
Hipotona.
Dermatoglifos anormales.
Retraso mental.
Caractersticas faciales.

Estos datos parecen ir en contra de que una nica regin cromosmica sea
responsable de muchas de estas caractersticas. Los datos conflictivos podran
ser explicados por una DSCR como se describa en la parte distal del 21q.
Muchos ms casos son necesarios para determinar la contribucin de varias
regiones 21q a los fenotipos del DS y su preciso mapeado. Un defecto
caracterstico del DS que es el canal atrioventricular ha sido mapeado a lo largo
de la regin de 5 a 6 Mb entre D21S267 y MX1.
Se define actualmente DSCR como la regin entre D21S17 y ETS2.

Genes del cromosoma 21.

Se ha demostrado que unos pocos genes son capaces de producir
desrdenes monognicos en humanos. La evidencia de estas implicaciones en
enfermedades fenotpicas fue proporcionada por el descubrimiento de
enfermedades asociadas en el respectivo fenotipo. Todas la relaciones genfenotipo de los genes del HC21 fueron descubiertas en la vida del genoma. Los
genes en los que esto se conoce son los siguientes:
Precursor de la protenaEsta protena esta mutada en la enfermedad de Alzheimer.
amiloideSe ha observado que los individuos que padecen sndrome
APP (MIM 104576) de Down suelen presentar a los 40 o 50 aos las lesiones
cerebrales tpicas de esta enfermedad. Slo un 5 % de los
casos tempranos de la enfermedad pueden ser atribuidos a
la mutacin de APP. Se producen deposiciones amiloides
en las clulas del sistema nervioso que provocan la muerte
de las neuronas adyacentes a dicha placa.
Holocarboxilasa sintasa Mutaciones en este gen son responsables de carboxilasas
HLCS (MIM 253270) deficientes asociadas a biotina. Esto supone un error muy
grave en el metabolismo.
Superoxido dismutasa 1 Mutaciones sin sentido de en este gen es una forma
SOD1 (MIM 147450) dominante de esclerosis lateral amiotrfica. Se ha
encontrado que esta mutacin es recesiva para la
enfermedad.
Canal de potasioSe manifiestan modificaciones en esta protena cuando
activado por voltaje est en homocigosis. Es responsable del sndrome de
KCNE1 (MIM 176261) Jervell y Laugen-Nielsen. Este sndrome se caracteriza por
una sordera congnita y muerte sbita.
Gen reguladorSe piensa que codifica un posible regulador de la
autoinmune 1 transcripcin, tiene motivos de los dedos de zinc. Ciertas
AIRE1 (MIM 240300) mutaciones en homozigosis una distrofia autoinmune,
poliendocrinopatologico, candiasis, ectodrmica. Este
desorden podra ser usado como un modelo para
autoinmunidad no asociada al complejo HLA.
Cistationina-b -sintetasa Este gen esta involucrado en la homocistinuria. Es una
CBS (MIM 236200) enfermedad metablica recesiva que se caracteriza por
retraso mental y esqueltico, ocular y anormalidades
vasculares. Mutaciones en el gen anulan su expresin in
vitro y se ha demostrado que causa la enfermedad in vivo.
Se concluy que nivel de homocistena es un factor de
riesgo para la enfermedad arteriosclertica independiente
no relacionada con la hiperlipidemia, hipertensin, diabetes
y tabaco.
Cadenas a-1 y a-2 delSe ha encontrado que mutaciones en estos genes estn
colgeno tipo VI relacionados con la miopata congnita dominante y
COL6A1 (MIM 120220) benigna de Bethlen. La enfermedad provoca moderada
COL6A2 (MIM 158810) debilidad y atrofia de los msculos del tronco y
extremidades con inicio temprano y una lenta progresin y

contracturas al flexionar los codos, articulaciones

interfalangeas y tobillos.
Gen de la Cistena B Es responsable de la enfermedad recesiva y progresiva
CSTB (MIM 601145) epilepsia myoclonus de tipo Unverricht y lundborg. La
mayora de las mutaciones son debidas a la expresin de
una repeticin de 12mer (CCCCGCCCCGCG) en la regin
5 flanqueante del gen CSTB. La poblacin normal es
polimrfica para la repeticin 21 mer y contiene 2 o 3
copias. De 12 a 17 copias de la repeticin son alelos
inestables en los que se da con alta frecuencia pequeas
expansiones. Los alelos EMP1 contienen de 35 a 70
repeticiones. La expansin de la repeticin resulta en una
reduccin clula-especfica de la expresin del gen CSTB.
Gen de la Integrina b-2 Este gen codifica para una protena presente en la
ITGB2 (MIM 600065) superficie celular. Mutaciones en este gen estn asociadas
con el sndrome de una deficiente adhesin leucocitaria, es
un desorden recesivo caracterizado por recurrentes
infecciones bacterianas.
Subunidad 2 del factor deEst asociado en translocaciones con la leucemia mieloide
asociacin al ncleo conaguda. En translocaciones t(3;21) en casos poco comunes
dominio runt de mielodisplasia y trasnformacin blast de leucemia
CBFA2 o AML1 (MIMmielgena crnica, CBFA2 es fusionado con el gen EVI1,
151385) qu codifica un factor de transcripcin que contiene el
motivo de los dedos de zinc, o cualquiera de dos genes
alternativos de funcin desconocida, EAP y MDS1, qu se
localizan adyacentes a EVI1 en 3q26. En translocaciones
t(12;21) en casos de leucemias linfocitarias, hay una
protena de fusin que est formado en el extremo Nterminal del gen TEL, qu es un miembro de la familia de
los factores de transcripcin del tipo Ets, con un casi
completo CBFA2. El anlisis de un gran nmero de casos
peditricos ALL demostraron del trnscrito quimrico TELCBFA2 en aproximadamente el 25% de los casos con un
progenitor de inmunofenotipo B, a pesar de la carencia de
la evidencia citogentica de esta translocacin en la
mayora de los casos.
En la regin DSCR se han encontrado una serie de genes cuya funcin es
desconocida, en algunos casos se sospecha, y son los siguientes:
Carbonilo reductasa Es un elemento monomrico, oxidoreductasa NADPH
CBR dependiente. Presenta una gran especificidad por
componentes carbonilos. Linfoblastos con un elevado
nmero de copias presentan un incremento en la
actividad aldo-, ceto- y quinona reductasa.
SIM2 Este gen es homologo al presente en Drosophila. Es un
regulador maestro en el desarrollo del linaje de la mitad
de las lineas celulares del sistema nervioso de la mosca.
Tres copias de este gen se piensan que puede contribuir
de alguna forma a varias de las caractersticas

especficas del fenotipo 1 de DS.

Gen de la subunidad p60La subunidad p60 se une al factor 1 de la cromatina
humana. Codifica una protena que pertenece a la familia
de protenas con el motivo WD e interacta con otras
subunidades del poliptido para promover la unin de
histonas con el DNA replicante.
Holocarboxilasa sintetasaCataliza la incorporacin de biotinas en varias
carboxilasas involucradas en la sntesis de cidos grasos,
HCS gluconeognesis o catabolismo de los aminocidos.
Oncogn ERG Este gen esta relacionado con la familia ets de oncogenes
asociadas a protenas ricas en purinas. Se cree que
participa en el mantenimiento y diferenciacin temprana
de las clulas hematopoyticas. Translocaciones del
HC21 estn asociadas con algunas formas de leucemias
amiloides o sarcomas de Erwing, en esos casos aparecen
puntos de ruptura en el gen ERG resultando una anormal
fusin de los transcritos.
Canal rectificador deEste gen ha sido mapeado en el interior de la DSCR. Es
potasio asociadoel responsable de la mutacin weaver en ratn. Pertenece
internamente a protenaa una familia de protenas que participa en la formacin
G de canales heteromultimricos cuya activacin est
GIRK2 regulada va protena G acoplada al receptor.
IRKK Este gen se expresa de una forma ubcua como un canal
rectificador de potasio.
Gen para TPRD Este gen codifica para una protena, es un
tetratricopptido, con motivos repetidos en el mapeo de
esta regin. Protenas con estos motivos fueron
encontradas en protenas involucradas en la regulacin
de la sntesis de RNA o mitosis.
Protena kinasaLos genes relacionados ms cercanos son en la
especfica paraDrosophila "minibrain" (mnb) y en la rata los genes Dyrk,
treonina/serinasituados es la DSCR. El patrn de expresin espacial y
MNBH temporal de MNBH muestra una mayor seal en la
materia gris, medula espinal y retina. Se ha observado
que un bajo nmero de copias en ratones transgnicos
para un YAC que contena MNBH haca que los ratones
mostrasen defectos en el aprendizaje y en la memoria
esto sugiere que la MNBH puede estar involucrado en la
anorma neurognesis encontradas en el sndrome de
Down.
ETS2 Es un proto-oncogen y un factor de transcripcin. Durante
el desarrollo de los mridos se expresa una gran cantidad
en la formacin del cartlago, las clulas precursoras del
hueso y en los primordios vertebrales.
Una importante cuestin en la aneuploida es como tres copias de genes
normales contribuyen a fenotipos anormales. No se ha encontrado un enlace
funcional convincente entre la sobreexpresin de alguno de los genes
conocidos en HC21 con los diferentes fenotipos que constituyen el sndrome de

Down. Estos genes del HC21 que son los probables causantes del fenotipo DS
pueden codificar genes como:

factores de transcripcin
receptores y ligandos
protenas importantes en el patrn de formacin en el desarrollo
enzimas
molculas implicadas en interacciones clula-clula
subunidades de protenas multimricas

Fenotipos asociados al HC21.

Aparte del sndrome de Down (DS) se han encontrado que existen otros
desrdenes genticos asociados al HC21.Los genes responsables para estos
fenotipos son corrientemente desconocidos. Estos fenotipos son los siguientes:
DFNB8/10 (MIM 601072) Es una enfermedad recesiva que se manifiesta en nios
como sordera, es una enfermedad asndromica. Aparece
en familias en las que hay una gran consanguineidad, se
ha localizado en familias de Palestina y Pakistn. Se ha
localizado en el 21q22.3, parece que se sita de una
forma ms probable en la parte distal de D21s212.
Sndrome de KnoblochEs una enfermedad recesiva autosmica. Los individuos
KS o KNO (MIM 267750) afectados por este sndrome presentan miopa,
degeneracin vitreoretina, separacin retinal y
encefalopata occipital. Los genes para este sndrome
parece que estan en 21q22.3. Se ha encontrado en
brasileos que presentaban una gran consanguineidad.
Solo los marcadores D21S171 mostraban
homocigosidad en los individuos afectados. Se ha
propuesto que su localizacin ms probable se
encuentra entre los marcadores D21S171 y D21S1446.
FPDMM (MIM 601399) Es una enfermedad hereditaria dominante. Se
caracteriza porque los individuos afectados presentan
una leve a moderada trombocitopenia, un prolongando
tiempo de sangrado y anormal agregacin plaquetaria
asociada con maligninidad mieloide. Esta enfermedad
ha sido localizada en 21q22.1 entre D21S1265 y
D21S167, es una regin crtica de 15 cM.
Sndrome de Usher tipoEsta enfermedad recesiva se caracteriza porque
1Epresentan un profundo y congnito dao auditivo,
USH1E (MIM 602097) temprana rinitis pigmentosa y constante disfuncin
vestibular. Fue mapeado en familias de Marruecos en el
21q21 en un intervalo de 15 cM entre D21S1905 y
D21S1913.
BPAD (bipolar affectingSe piensa que esta en el extremo distal de 21q22.3. All
disorder) puede estar presente un locus para una de las formas
de sicosis manacas depresivas. Se ha detectado la

asociacin en 1 de cada 47 familias en PFKL en

21q22.3. El estudio de dos caracterstica parece
apoyarla presencia de un locus para el desorden bipolar
en 21q22.3 con incremento de un alelo mostrado en
D21S171.
HoloprocencefalopataEste sndrome esta siendo usado como un modelo
HPE! (MIM 236100) gentico para el desarrollo craneofacial. Se caracteriza
porque los individuos afectados presentan un amplio
espectro de caracterstia faciales desde ciclopa hasta
proboscis sobre un ojo a hipetelorismo ocular. Es una
enfermedad con una entidad etiolgicamente muy
heterognea, pero los factores genticos estn
afectados por acontecimientos de tipo familiar. Se
sugiere que esta monosoma esta asociada a un gen
llamado HEP1 y esto podra ser suficiente en dos o tres
casos asociados con monosoma parcial del cromosoma
21. El tamao mnimo para la regin crtica para HPE
podra estar en 21q22.3.
Adems, se ha demostrado que un gen en el cromosoma humano 21
localizado en la regin 21q22.2 a 21q22.3 codificaba un factor necesario para
la trasnsduccin de seales y respuesta antiviral para interferones tipo I
( ISF21).

El ratn como modelo para el estudio del DS.

El ratn de laboratorio ha atraido la atencin como un modelo potencial para la
trisoma 21. Desde tres copias de muchos genes contribuyen a DS, ratones
transgnicos com 3 o mas copias de genes homlogos del HC21 de ratn
puede servir como modelo de sobreexpresin de genes seleccionados.
HC21 es homlogo a segmentos de 3 cromosomas de ratn, cromosomas 16,
17 y 10. El DSCR integramente es includo en el cromosoma 16 de ratn. Un
ratn con trisoma 16 que exhibi algunas caractersticas de DS fueron
descubiertas; aunque, su valoracin fue limitada porque el cromosoma 16 de
ratn contiene muchos genes encontrados en cromosomas humanos distintos
al 21, y a por la letalidad fetal. Un ratn modelo mas reciente para DS (Ts65Dn)
ha sido generado usando una translocacin cromosmica recproca, que
contiene trisoma parcial 16 correspondiendo a HC21 de marcadores APP a
MX1, el cual incluye todo el DSCR (Reeves et al., 1995). En adicin, los
ratones Ts65Dn son trismicos para una pequea regin pericentromrica del
cromosoma 17 de ratn no sintnicos al HC21. El ratn Ts65Dn expone una
variedad de fenotipos anormales incluyendo desarrollo embrionario temprano,
reducido peso de nacimiento, temblores musculares, esterilidad del macho,
rasgos faciales anormales, degeneracin temprana de las regiones colinrgicas
del cerebro, y aprendizaje y conducta deficiente. El defecto caracterstico de
DS nunca ha sido observado en ratones Ts65Dn recien nacidos, tampoco
muestran ataques tempranos de la enfermedad de Alzheimer. Una evaluacin

mas extensiva del fenotipo de los Ts65Dn es necesaria para encontrar mas
similitudes de este modelo de ratn con la trisoma humana 21.
Un ratn modelo mas reciente, Ts108cje, fue el resultado de translocacin
12;16 y es parcialmente trismico para una regin syntenic de Sod1 a Mx1
(Sago et al.,1997). No hay cromosoma balanceado adicional en este modelo. El
anlisis fenotpico de Ts108Cje es preliminar; aunque, parece que estos
ratones tienen la habilidad de aprender son muy lentos en la adquisicin de
conocimientos. La comparacin de los diferentes fenotipos de estos ratones y
aquellos con trisoma simple y multignica puede guiarnos a una mayor
comprensin de la contribucin de genes y segmentos genmicos, en los
fenotipos de la trisoma 21.
Muchos laboratorios han empezado a producir ratones transgnicos
sobreexpresando genes HC21 individuales como SOD1 (por ejemplo, Epstein
et al., 1987; Avraham et al., 1988), APP (por ejemplo, Carlson et al., 1997),
genes DSCR, MNBH y ETS2, para estudiar la contribucin de cada gen al
fenotipo. Ratones con menos ETS2 sobreexpresin en partculas desarrollo de
rganos neurocraneales, viscerocraneales, y esqueleto cervical presentan
anormaliades con similitud a las anormalidades esquelticas encontradas en
una trisoma 16 de ratn y humano con sndrome de Down. La crianza de
ratones transgnicos con diferentes transgenes producir razas con mas de un
gen sobreexpresado.
El uso de YACs o BACs para microinyectar materia en el interior de oocitos de
ratn, o recombinaciones para producir modelos de ratn, permitir tambien
estudiar la sobreexpresin de varios genes vecinos (quizas todos los genes de
DSCR) en una raza transgnica. Por ejemplo, ratones transgnicos con un bajo
nmero de copias para un YAC, conteniendo MNBH muestra defectos en el
aprendizaje y memoria (Smith et al., 1997); aunque es desconocido si este YAC
contiene otros genes distintos. Varios ratones transgnicos, para otros YACs
han sido tambien producidos, y esos ratones pueden posiblemente ser usados
para excluir genes implicados en los fenotipos del DS.
Ahora tambin es posible realizar translocaciones/recombinaciones dirigidas
usando el sistema de recombinacin cre-lox (Smith et al., 1995). Como la
syntenic del HC21 a cromosomas de ratn es refinada, una serie de complejas
manipulaciones pueden resultar en un ratn trismico para toda la regin
cromosmica syntenic a HC21.Cruzamientos de ratones producidos por alguna
de estas tres tcnicas, en adicin a ratones parcialmente trismicos ocurridos
por translocaciones naturales, pueden ser usados para realizar hiptesis de la
contribucin de genes sencillos, combinacin de genes, o combinacin de
HC21 regiones sintnicas.

Bibliografa y enlaces de interes.

Las causas del sndrome de Down.

David Patterson
Investigacin y Ciencia 133, 28-35 (1987)

10 Years of Genomics, Chromosome 21, and Down Syndrome.

Stylianos E. Antonarakys (e-mail:
Stylianos.Antonarakis@medecine.unige.ch).
Genomics 51, 1-16 (1998)
Article no. GE985335

Gentica en medicina
Thompson y thompson 208 - 213

Base de datos bibliogrfica del NCBI: http://www.ncbi.nlm.nih.gov/PubMed

The Genome Database (GDB): http://www.gdb.org

http://www-eri.uchsc.edu/chr21/eridna.html

http://www.expasy.ch/cgi-bin/lists?humchr21.txt

http://www.infobiogen.fr/services/aneu21

ESTE ARTCULO FUE TOMADO DE:

http://orbita.starmedia.com/~sohail/down.htm