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Tesis Doctoral
Vicente Gianna
Crdoba
2013
Comisin Asesora
Dr. Carlos Alberto Guzmn Director
Dr. Edgardo Luis Calandri
Dr. Abel Gerardo Lpez
Crdoba
2013
Longobardi.
II
Agradecimientos
A todas las personas que de alguna manera colaboraron en la
realizacin de ste trabajo, fundamentalmente al director de sta tesis, Dr.
Carlos Guzmn, un amigo no solo por su gua sino tambin por el apoyo moral
en un momento crtico y doloroso como fue mi jubilacin en el cargo de
Profesor Titular por Concurso. Tambin a la Comisin de tesis constituida por
los doctores Abel Lpez y Edgardo Calandri por sus esclarecedores y buenos
consejos.
A la Dra. Gloria Barboza de la Facultad de Ciencias Qumicas de la UNC
por el asesoramiento botnico.
A mis compaeros de la Planta Piloto del ICTA.
A mi Ayudante de Investigacin Alumno Ing. Juan Manuel Montes.
INDICE GENERAL
III
Dedicatoria
Agradecimientos..
II
ndice General.
III
Resumen... 1
Abstract.
Resumo...
Abreviaturas.. 7
Antecedentes Generales
Antecedentes generales
Taxonoma...
12
20
Valor nutricional.
21
25
26
La industria en la Argentina..
28
32
34
39
41
42
44
46
Hiptesis......
47
Objetivos..
47
INDICE GENERAL
IV
49
49
49
50
2.2.1 Fundamentos.
50
2.2.2 Viscosidad..
53
54
57
57
58
2.4.2 Metodologa
59
60
61
64
68
68
70
73
74
74
76
78
78
78
80
3.4 Conclusin
82
INDICE GENERAL
83
83
83
84
86
87
88
90
92
5.2.1 Cromatografa.....
92
92
92
94
5.2.4 Procedimiento.
95
5.3 Purificacin. 99
Conclusiones generales
Mtodos de extraccin.
102
Purificacin....
103
Bibliografa
Bibliografa....
Tesis Doctoral
104
-1RESUMEN
Los principales objetivos de este trabajo fueron dos; por un lado determinar
las condiciones ptimas de extraccin de las saponinas de los frutos de
Chenopodium quinoa Willd, por dos mtodos originales: la extraccin asistida con
microondas y la extraccin de esta sustancia a alta presin, que permiten una
extraccin eficiente en un tiempo breve comparado con los mtodos tradicionales,
como ser el de Soxhlet, reflujo, etc. Por otro lado se estableci un mtodo para
cuantificar el contenido de saponinas.
El trabajo se divide en Antecedentes Generales y 5 captulos. En el primero
se describen los orgenes de su nombre, la quinoa como alimento vegetal, su valor
nutricional, la taxonoma, las caractersticas del fruto, produccin y consumo
mundial y aplicaciones industriales de la quinoa.
En el Captulo 1 se describen qumicamente las saponinas que se
encuentran en el aquenio de quinoa, las estructuras de las mismas, las agliconas
ms importantes, las aplicaciones de las saponinas y los procesos para eliminarlas
(desamargado de las semillas) por va seca y hmeda, las ventajas y desventajas
de los mismos.
En el Captulo 2 se aborda la extraccin asistida por microondas (EAM); se
analizaron los fundamentos del calentamiento por microondas, el procedimiento
experimental empleado y la optimizacin del proceso extractivo mencionado
utilizando un diseo experimental de Taguchi. Las variables estudiadas fueron: i)
temperatura, ii) tiempo, iii) relacin volumen de solvente/gramo de aquenio, y iv)
porcentaje de alcohol (se utilizaron mezclas etanol-agua e isopropanol-agua).
En el Captulo 3 se desarroll la extraccin a alta presin con un gas inerte
(nitrgeno). Se discute el diseo del reactor empleado y su operacin, se analizan
los fundamentos de este proceso extractivo, y el procedimiento experimental
empleado. Las variables fueron: i) presin manomtrica inicial, ii) tiempo, iii)
temperatura y iv) porcentajes de alcohol en las mezclas hidroalcohlicas
En el Captulo 4, se realiz un anlisis comparativo de los rendimientos de
extraccin antes mencionados con los mtodos de Soxhlet y de extraccin con
agitacin lineal (shaker). El mtodo que mostr mayor rendimiento extractivo y
Tesis Doctoral
Tesis Doctoral
-3-
ABSTRACT
The main objectives of this study were two on one hand determine the
optimum conditions of extraction of saponins from the fruits of Chenopodium quinoa
Willd by two original methods: microwave-assisted extraction and extracting this
substance under high pressure, both methods have an efficient extraction in a short
time of process compared with conventional methods such as: Soxhlet or reflux. In
a second place it was established a quantifying method for saponins content.
The work organization starts with general antecedents and is followed by five
chapters. It begins with a description about the origin of its name, information of
quinoa as vegetable food, its nutritional value, taxonomy, fruit characteristics,
production, global consumption and industrial applications of quinoa seeds.
In Chapter 1, the quinoa saponins are described chemically. It is shown its
structure, the most important aglycones, saponins applications and processes to
eliminate it (to obtain debittered seed) that can be accomplished by dry or wet
method, also the advantages and desadvantages are mentioned.
Chapter 2 deals with microwave-assisted extraction (MAE) where the
fundaments of microwave heating were analyzed, is explain the experimental
procedure employed and the extraction process optimization using Taguchi
experimental design. The variables studied were: i) temperature, ii) time, iii) volume
ratio of solvent / gram of achene, and iv) percentage of alcohol (were considered
mixtures of ethanol-water and isopropanol-water).
In Chapter 3 was developed high-pressure extraction with an inert gas
(nitrogen) (HPSE: high pressure solvent extraction). It discusses the reactor design
and the operation employed, are explained the base of this extraction process and
the experimental procedure. Variables were: i) initial gauge pressure, ii) time, iii)
temperature and iv) percentage of alcohol in alcohol mixtures
In Chapter 4, is found a comparative analysis of yields in extraction methods
suggested here with the normal yields obtained in Soxhlet extraction and linear
shaking ("shaker"). The method that showed a higher performance and a shorter
extractive time is the method with high pressures (HPSE).
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Tesis Doctoral
-5-
RESUMO
Os principais objetivos deste estudo foram duas, por um lado determinar as
melhores condies de extrao de saponinas dos frutos de Chenopodium quinoa
Willd por dois mtodos originais: extrao assistida por microondas e remoo desta
substncia a alta presin.
Os principais objetivos deste estudo foram, por um lado determinar a
extrao tima das saponinas dos frutos de Chenopodium quinoa Willd originais
dois mtodos de extrao: extrao de microondas e remoo desta substncia
sob presses superiores a atmosfrico, permitindo a extraco eficiente de um
curto perodo de tempo em comparao com os mtodos convencionais, tais como
o Soxhlet de refluxo, etc. Por outro lado, foi establecido um mtodo para a
quantificao do teor de saponinas.
O trabalho est dividido em fundos generais e em cinco captulos. No
primeiro descrevem-se as origens de seu nome, quinoa e alimentos vegetais, o
seu valor nutricional, taxonomia, caractersticas de frutos, produo e consumo
global e aplicaes industriais de quinoa.
No Captulo 1 descrevem-se quimicamente as saponinas encontradas na
quinoa aqunio, as estruturas dos mesmos, as agliconas mais importantes,
aplicaes saponinas e de processos de eliminao (semente desamargada) por
seca e molhada, as vantagens e desvantagens dos mesmos.
O Captulo 2 trata da extrao assistida por microondas (MAE), foram
analisados os fundamentos do aquecimento por microondas, o procedimento
experimental empregado e a otimizao do processo de extrao mencionado,
utilizando o desenho experimental de Taguchi. As variveis estudadas foram: i) a
temperatura, ii) o tempo, iii) relao do volume de solvente / grama de aqunio, e
iv) o percentual de alcohol (utilizaram-se misturas de etanol-gua e guaisopropanol).
No Captulo 3 foi desenvolvido a extrao a alta presso com um gs inerte
(azoto) (HPSE: (High pressure solvent extraction). Discute-se o disenho do reator
empregado e sua operao, analisando os fundamentos de este processo
extrativo, e o procedimento experimental empregado. As variveis estudadas
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temperatura e iv)
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-7ABREVIATURAS
HPLC
AOAC
CC
Cromatografa en columna
CCD
RMN
FAO
ONUDI
Gal
D-galactosa
GlcA
cido D-glucurnico
GalA
cido D-galacturnico
Rha
L-ramnosa
Ara
L-arabinosa
Xyl
D-xilosa
Fuc
D-fucosa
ASTM
American
Society
for
Testing
Materials.
Sociedad
MO
Microondas
EAM
PLE
ASE
PLPW
PSE
HPSE
SLE
Tesis Doctoral
-8PEV
SFE
Supercritical
fluid
extraction.
Extraccin
con
fluido
supercrtico.
UV
Ultra violeta
VIS
Visible
IR
Infra rojo
min
Minuto
rpm
Gramo
C2H6
Etano
C2H4
Eteno
C3H8
Propano
mL
Mililitros
FAB
TLC
Tesis Doctoral
Antecedentes Generales
Estudio Integral de la
planta y de las semillas
de quinoa provenientes
del noroeste argentino
Antecedentes Generales
-9-
ANTECEDENTES GENERALES
lneas
de
investigacin
desarrolla
mtodos
en
seco
de
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Antecedentes Generales
- 10 -
Tesis Doctoral
Antecedentes Generales
- 11 -
Tesis Doctoral
Antecedentes Generales
- 12 -
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Antecedentes Generales
- 13 -
puede
utilizar
en
la
fabricacin
de
papel
cartn
(ONUDI, 2006).
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Antecedentes Generales
- 14 -
Las hojas son alternas y polimorfas en la misma planta; las de la base son
romboides, triangulares las de la parte media y las hojas superiores son
lanceoladas.
Son bastante higroscpicas, captando la humedad atmosfrica nocturna,
controlan la excesiva transpiracin por humedecimiento de las clulas y reflejan los
rayos luminosos disminuyendo la radiacin directa sobre las hojas evitando el
sobrecalentamiento (Mujica et al., 2001).
Las hojas son de carcter polimorfo en una sola planta; las de la base son
romboides, mientras que las hojas superiores, ubicadas alrededor de la
inflorescencia, son lanceoladas. Ver Figura 2.
La coloracin vara de verde claro en la variedad Nario, hasta verde oscuro
en Kcancolla; se transforma en amarilla, roja o prpura segn la madurez,
cayndose finalmente las hojas en la base.
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Antecedentes Generales
- 15 -
Figura 2. Quinoa. Formas de hojas segn las panojas (Tapia et al., 2007)
Tesis Doctoral
Antecedentes Generales
- 16 -
Tesis Doctoral
Antecedentes Generales
- 17 -
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Antecedentes Generales
- 18 -
Tesis Doctoral
Antecedentes Generales
- 19 -
protena total del grano; la radcula, muestra una pigmentacin de color castao
obscuro (Mujica et al., 2011).
El perisperma es el principal tejido de almacenamiento y est constituido
mayormente por granos de almidn, es de color blanquecino y representa
prcticamente el 60% de la superficie de la semilla. Sus clulas son grandes de
mayor tamao que las del endosperma, de forma poligonal con paredes delgadas,
rectas y con grandes agregados de almidn (Mujica et al., 2011).
Dimensiones geomtricas de las semillas de quinoa, variedad Cica.
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Antecedentes Generales
- 20 -
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Antecedentes Generales
- 21 -
grandes propiedades benficas y por sus mltiples usos, sino tambin por
considerarla como una alternativa para solucionar los graves problemas de
nutricin humana.
Por otro lado el cultivo tiene una extraordinaria adaptabilidad a diferentes
pisos agroecolgicos, puede crecer con humedades relativas desde 40% hasta
88%, y soporta temperaturas desde -4C hasta 38C. Es una planta eficiente en el
uso de agua, es tolerante y resistente a la falta de humedad del suelo, y permite
producciones aceptables con precipitaciones de 100 a 200 mm. (Bojanic, 2011).
La NASA tambin la incluy para alimentar a sus tripulantes en los viajes
espaciales de larga duracin por ser un alimento de composicin nutritiva
excelente, de aprovechamiento integral, su breve ciclo de cultivo y su capacidad de
crecer en ambientes adversos (Miralla, 2009).
La quinoa cuenta con ms de tres mil variedades o ecotipos tanto cultivadas
como silvestres que se resumen en cinco categoras bsicas segn el gradiente
altitudinal: ecotipos del nivel del mar, del altiplano, de valles interandinos, de los
salares y de las Yungas (Bojanic, 2011).
Valor nutricional
La calidad nutricional de un producto depende tanto de la cantidad como de
la calidad de sus nutrientes.
Protena
Grasa
Fibra cruda
Cenizas
Carbohidratos
14,4
6,0
4,0
2,9
72,6
Quinoa
Kaiwa
Kiwicha
Arroz
Trigo
cido asprtico
7,8
7,9
7,4
8,0
4,7
Treonina
3,4
3,3
3,3
3,2
2,9
Serina
3,9
3,9
5,0
4,5
4,6
cido glutmico
13,2
13,6
15,60
16,8
31,3
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Antecedentes Generales
- 22 -
Prolina
3,4
3,2
3,4
4,0
10,4
Glicina
5,0
5,2
7,4
4,1
6,1
Alanina
4,1
4,1
3,6
5,2
3,5
Valina
4,2
4,2
3,8
5,1
4,6
Isoleucina
3,4
3,4
3,2
3,5
4,3
Leucina
6,1
6,1
5,4
7,5
6,7
Tirosina
2,5
2,3
2,7
2,6
3,7
Fenilalanina
3,7
3,7
3,7
4,8
4,9
Lisina
5,6
5,3
6,0
3,2
2,8
Histidina
2,7
2,7
2,4
2,2
2,0
Arginina
8,1
8,3
8,2
6,3
4,8
Metionina
3,1
3,0
3,8
3,6
1,3
Cistina
1,7
1,6
2,3
2,5
2,2
Triptofano
1,1
0,9
1,1
1,1
1,2
% N del grano
2,05
2,51
2,15
1,52
2,24
% protena
12,8
15,7
13,4
9,5
14,0
Tabla 2. Contenido de aminocidos (mg de amino cido/16 g de nitrgeno). (RepoCarrasco et al., 2003)
Si bien la quinoa no tiene un alto contenido de protenas es sumamente
importante la calidad de las mismas.
Su valor alimenticio radica en la composicin aminoacdica de su protena,
como se puede observar en la Tabla 2.
Como se puede observar en la tabla antes mencionada, la qunoa, tiene un alto
contenido en lisina, un aminocido que no es muy abundante en el reino vegetal.
Adems contiene otros aminocidos esenciales, particularmente arginina e
histidina, que son muy apropiados para la alimentacin infantil. Adems contiene
leucina, isoleucina, metionina, fenilamina, treonina, triptofano y valina.
Cervilla et al., (2012), evaluaron la cantidad y calidad proteica de harinas
obtenidas de dos lotes de granos provenientes del noroeste argentino, variedad
CICA. La calidad proteica se
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Antecedentes Generales
combinacin con la PDCAAS terica (protein
- 23 -
Los resultados del trabajo son similares a los hallados por Repo Carrasco,
(2003), y, aunque este autor no menciona el origen y variedad de la muestra
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Antecedentes Generales
- 24 -
Albminas+globulinas
Prolaminas
Glutelinas+protenas insolubles
Quinoa
45
23
32
Kaiwa
41
28
31
una
alternativa
interesante
para
sustituir
almidones
modificados
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Antecedentes Generales
- 25 -
Tesis Doctoral
Antecedentes Generales
- 26 -
Tesis Doctoral
Antecedentes Generales
- 27 -
Cultivos ms frecuentes
Cultivos aislados
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Antecedentes Generales
- 28 -
La industria en la Argentina
La siembra se realiza a partir de septiembre y se cosecha y trilla
manualmente en abril.
El NOA se constituye como la zona tradicional de cultivo de quinoa. La
produccin se localiza en
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Antecedentes Generales
- 29 -
Tesis Doctoral
Antecedentes Generales
- 30 -
Storani,
(2010),
obtuvieron
almidn
de
quinoa
determinaron las caractersticas del mismo que sirvieren al diseo del proceso.
Desarrollaron las etapas del proceso para obtencin de almidn, y la
secuencia de operaciones comprendidas en cada etapa a escala de laboratorio y a
escala piloto.
Obtenido el producto realizaron los anlisis fsicos qumicos al almidn para
verificar si el
Alimentario Argentino.
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Antecedentes Generales
- 31 -
Tesis Doctoral
Captulo 1
Las saponinas de
la quinoa: propiedades
Los procesos de
desaponificacin por va
seca y hmeda
- 32 -
Captulo 1
1. Saponinas
1.1. Definicin: Las saponinas constituyen un amplio grupo de glucsidos
encontrados en las plantas, su nombre proviene de la planta del gnero Saponaria,
cuya raz se utiliz como jabn
(Francis et al.,
2002).
Las saponinas de quinoa se concentran en el exterior de las capas del
grano, el cual es un aquenio con un pericarpio adherido cubriendo dos capas como
si fueran un revestimiento de la semilla (Varriano-Marston y DeFrancisco, 1984).
Las estimaciones del contenido de saponinas en los granos en diferentes cultivares
de quinoa van desde valores prximos a 0 a 12,0 mg/g (0 a 1,2%) segn (Wahli,
1990; Koziol, 1991). Sin embargo Szakiel et al., 2011 consideran que el contenido
de saponinas oscilan entre el 0,1 y el 5%. Las diferencias en el contenido de
saponinas que se encuentran en la bibliografa se deben a factores ambientales y/o
genticos.
Son glucsidos de alto peso molecular que consisten de una azcar ligada a
un ncleo policclico. La definicin clsica de saponina se basa en sus
propiedades tensioactivas, formando en agua espumas estables. Esto hace que
presenten actividad hemoltica, sean txicas para los peces y adems de tener un
sabor amargo. Sin embargo, estas propiedades no son comunes a todas las
saponinas y no se pueden utilizar para definir lo que es una saponina. Por eso es
ms conveniente definirlas por sus caractersticas estructurales. Las saponinas
estn formadas por una aglicona policclica unida a una o ms cadenas laterales
de azcares. La aglicona, o porcin no sacrida de la molcula de saponina se
denomina sapogenina o genina, y puede ser un esteroide (C27), o un alcaloide
esteroidal (C27) o un triterpeno (C30). La capacidad de formacin de espuma de
Tesis Doctoral
- 33 -
Captulo 1
las saponinas es causada por la combinacin de la sapogenina hidrfoba y un
azcar hidrfilo.
Tesis Doctoral
- 34 -
Captulo 1
Tesis Doctoral
- 35 -
Captulo 1
Tesis Doctoral
- 36 -
Captulo 1
R1=GlcA
R2=H
R3=Glc
R4= CH3
1a
R1=GlcA
R2=H
R3=H
R4= CH3
R1=Ara
R2=OH
R3=Glc
R4= CH3
2a
R1=Ara
R2=OH
R3=H
R4= CH3
R1=Ara(31)Glc R2=OH
R3=Glc
R4= CH3
3a
R1=Ara(31)Glc R2=OH
R3=H
R4= CH3
R1=Ara
R2=OH
R3=Glc
R4=COOCH3
4a
R1=Ara
R2=OH
R3=H
R4=COOH
R1=Ara(31)Glc R2=OH
R3=H
R4=COOCH3
R1=Ara(31)Glc R2=OH
R3=Glc
R4=COOCH3
-D-glucopiranosil ster
-D-glucopiranosil ster
-D-
.glucopiranosil ster
4: 3-O- -L-cido arabinopiranosil fitolacagnico-28-O-
-D-glucopiranosil ster
-D-glucopiranosil ster
Tesis Doctoral
- 37 -
Captulo 1
1: Aglicn: cido fitolacagnico, sustituyente en el C-3 -D-Glc (13)--LAra, se puede ver en la figura 13.
2: Aglicn: cido fitolacagnico y un sustituyente en el carbono 3: -LAra se puede ver en la figura 14.
Tesis Doctoral
- 38 -
Captulo 1
Tesis Doctoral
- 39 -
Captulo 1
4: Aglicn del cido oleanlico con un sustituyente en el carbono 3: -DGlcA. Ver en la figura 16.
Tesis Doctoral
- 40 -
Captulo 1
superficial, es decir son sustancias tensioactivas y adems poseen propiedades
emulsificantes.
Algunas tienen efecto hemolizante en los glbulos rojos, esta propiedad la
presentan las saponinas monodesmosdicas
por
su
actividad
antiviral,
como
analgsico,
antiinflamatorio,
Tesis Doctoral
- 41 -
Captulo 1
Tesis Doctoral
- 42 -
Captulo 1
realizarse no solo sin alterar las cualidades nutricionales de la semilla sino adems
sin contaminar los cursos de agua.
Analizar brevemente los mtodos que se emplean para la remocin de las
saponinas:
Por su estructura qumica, las saponinas pueden ser parcialmente
eliminadas por lavado con agua (Chauhan et al., 1999), pero incluso despus del
lavado algunas saponinas permanecen en la semilla. Zhu et al., (2002),
recomiendan el uso de agua ligeramente alcalina en lugar de agua neutra. Brady et
al., (2007), han informado que el sabor amargo puede ser reducido mediante
procesos de extrusin y
sugieren el escarificado.
Por esto, los mtodos de eliminacin de saponinas pueden ser clasificados
en: mtodos hmedos, mtodos secos y mtodos combinados.
El lavado manual con agua requiere grandes consumos de 10 a 14 m 3 de
agua por cada tonelada de semillas, lo cual no es recomendable por los grandes
volmenes de agua que se utilizan y contaminan.
El mtodo seco que consiste en la eliminacin del pericarpio por abrasin,
ya sea a temperatura ambiente o con calor seco. El mtodo hmedo que consiste
en lavar las semillas con agua y un tercer mtodo que combina los dos anteriores,
en este mtodo es la semilla la que se escarifica en primer trmino y luego se r
ealiza el lavado con agua para eliminar los restos de saponinas que quedaron por
escarificado. (Bacigalupo y Tapia 2000)
Tesis Doctoral
- 43 -
Captulo 1
que permiten un raspado eficiente de las semillas. El polvillo que se genera pasa a
travs de un tamiz que separa el episperma de la semilla, las semillas escarificadas
son sometidas a una corriente de aire lo que permite una eficiente separacin del
polvillo y de las semillas. La eficiencia y capacidad de procesamiento de la
escarificadora fue del 94,6% segn los autores, los contenidos de saponina en el
producto final oscilan entre el 0.04 y 0.25%. En la figura debajo se puede ver un
esquema de la mquina escarificadora desarrollada por Torres y Minaya, (1980).
Este mtodo presenta en ocasiones el inconveniente que se desprende el
germen del grano disminuyendo la calidad proteica del mismo, pero hasta el
momento no se ha podido disear un equipo que permita sin tratamiento posterior,
eliminar totalmente las saponinas y evitar la disminucin de la calidad proteica de la
semilla.
Mquina escarificadora de quinoa
Tesis Doctoral
- 44 -
Captulo 1
con un quemador, posteriormente por medio de una zaranda se separaban la
cascarilla tostada de la semilla. Brady et al., (2007) han informado de que el sabor
amargo impartida por saponinas potencialmente se podra reducir mediante
procesos de extrusin y el tostado. La desventaja de estos procesos radica en la
dificultad de obtener un tostado uniforme sin quemar una parte de los granos. A
esto se le suma las prdidas apreciables de nutrientes, especialmente de
aminocidos como lisina, con el uso del calor seco. (Len y Rosell, 2007)
Tesis Doctoral
- 45 -
Captulo 1
- La mayor parte de la desaponificacin se debe a un efecto mecnico
Tesis Doctoral
- 46 -
Captulo 1
1.4.3. Desaponificado por mtodo combinado
Lo que menor contenido de saponinas deja en la semilla es una combinacin
del proceso de escarificado y posteriormente de extraccin por va hmeda, dando
mejores resultados que por va hmeda o seca, por otra parte al aplicar el mtodo
combinado se produce un significativo ahorro del volumen de agua empleado en el
proceso, y una reduccin de la ruptura de los granos. Este proceso combinado fue
perfeccionado exitosamente en Ecuador y en Oruro, Bolivia (Bacigalupo y Tapia,
2000). Mediante el escarificado se elimina alrededor del 65% de la saponina, luego
la quinoa pasa al proceso de lavado y a un secado final. En este caso, el agua de
lavado, a pesar de no tener una alta concentracin de saponinas, es sometida a un
proceso de filtracin antes de ser vertida en el sumidero.
Tesis Doctoral
- 47 -
Captulo 1
HIPTESIS
OBJETIVOS
Objetivo General
El objetivo general de la presente Tesis fue determinar las condiciones
ptimas de extraccin de saponinas de semillas de quinoa por mtodos no clsicos
para luego cuantificar la misma por un mtodo analtico.
Objetivos Especficos
Tesis Doctoral
- 48 -
Captulo 1
7. Establecer el procedimiento ms conveniente para obtener cristales de
saponinas de alta pureza.
Tesis Doctoral
Captulo 2
Extraccin de las
saponinas asistida
por microondas
Determinacin de las
condiciones ptimas de
extraccin
- 49 -
Captulo 2
A la muestra tomada para los ensayos se les elimin impurezas tales como
palillos, piedritas, semillas partidas, etc. Para ello se utilizaron una serie de 3
tamices montados en el vibrador, pertenecientes a la Planta Piloto del ICTA y el
colector, como se puede ver en la Foto 6
Tesis Doctoral
- 50 -
Captulo 2
2.2.1 Introduccin
Tesis Doctoral
- 51 -
Captulo 2
las microondas tienen frecuencias comprendidas entre 300 MHz a 300 GHz (lo
que corresponde a longitudes de onda comprendidas entre 1 m y 1 mm, la
frecuencia ms usada a nivel industrial y dispositivos domsticos es de 2,45 G
Hz (Lidstrm et al., 2001).
La utilizacin del microondas para la extraccin de compuestos orgnicos
se desarroll por primera vez utilizando un horno de microondas domstico a
finales de la dcada de los 80 (Ganzler et al., 1986).
La interaccin entre la energa de la microonda y el medio depende de las
propiedades dielctricas de la sustancia que se est calentando y de la cantidad de
radiacin de microonda que puede penetrar una sustancia.
Los materiales conductores de la electricidad no se calientan bajo la accin
de las microondas y las reflejan completamente; los materiales aislantes como el
vidrio y el tefln tampoco se calientan y dejan pasar completamente esta energa, y
los materiales dielctricos las absorben y se calientan. La medida de este
comportamiento es el coeficiente dielctrico
representa la
convertida en calor.
La capacidad de los materiales de absorber la energa de microondas y
convertirla en calor depende de ambos parmetros y es llamado factor de
disipacin, relacionados mediante la ecuacin:
La capacidad de un
Tesis Doctoral
- 52 -
Captulo 2
dipolar y la conductancia inica), la calefaccin con microondas es muy rpida y se
produce en el seno de la muestra, dando lugar a extracciones muy rpidas.
Tesis Doctoral
- 53 -
Captulo 2
Microondas difundidas
Celdas de extraccin
Magnetrn
Microondas
difundidas
Plato giratorio
Sistema cerrado
Tornillo
Disco
Cubierta
Solvente
Celda
Muestra
Soporte de
mdulos
2.2.2. Viscosidad
La viscosidad es un parmetro importante ya que afecta al tiempo de
relajacin de forma directa, (requerido para que un sistema que est sometido a
irradiacin por microondas regrese a su estado de desorden; cuanto menor sea el
tiempo de relajacin mayor va a ser la eficiencia de absorcin de las microondas
para convertirse en calor). (Gabriel et al., 1998).
r3
=
k
= Tiempo de relajacin
k = Constante de velocidad
Tesis Doctoral
= viscosidad
r = Radio molecular
Vicente Gianna, 2013
- 54 -
Captulo 2
T = Temperatura
El campo electromagntico generado por el magnetrn hace rotar a las
molculas de agua o que contengan el dipolo O-H, la orientacin del campo
electromagntico cambia 2.450.000 veces por segundo por lo cual las molculas
de agua (qu rotan) se calientan debido a la agitacin molecular y el calor
producido est relacionado de manera directa con la agitacin molecular.
(Valderrama, 2008)
Tesis Doctoral
- 55 -
Captulo 2
Una tapa torneada de Tefln provista
Tesis Doctoral
- 56 -
Captulo 2
Tesis Doctoral
- 57 -
Captulo 2
T real
T seteada
Nivel de coccin
50C
37C
10%
60C
50C
20%
70C
66C
30%
80C
77C
60%
90C
87C
90%
95C
90C
100%
Tesis Doctoral
- 58 -
Captulo 2
minutos, entre otras cosas porque en principio se calienta el solvente extractante y
no el recipiente que lo contiene. Adems, hace uso de pequeos volmenes de
disolventes orgnicos, entre los 20 y los 50 mL (Chee et al., 1996).
La EAM (Extraccin asistida con microondas)
, como en la
Tesis Doctoral
- 59 -
Captulo 2
La optimizacin de las condiciones de la Extraccin Asistida por Microondas
(EAM) fue investigada empleando diseos factoriales para encontrar las
condiciones ptimas de extraccin (Eguizabal et al., 1998) .
La EAM ha sido aplicada con xito para diversos tipos de compuestos y de
muestras. En una revisin realizada por Eskilsson y Bjorlund, (2000), se describen
una interesante serie de aplicaciones analticas.
2.4.2. Metodologa
Tesis Doctoral
- 60 -
Captulo 2
Tesis Doctoral
- 61 -
Captulo 2
se derivatizaron
Tesis Doctoral
- 62 -
Captulo 2
deshidratacin, formando grupos metilenos no saturados que dan productos de
condensacin coloreados con los aldehdos.
Abisch & Reichstein, (1960), puntualizan que los triterpenos dan un color
rojo y los esteroides color verde con la mezcla de anhdrido actico y cido
sulfrico, lo cual permite diferenciar las saponinas triterpnicas de las esteroidales.
Baccou et al., (1977) describen la formacin de compuestos coloreados
entre las agliconas triterpnicas y vainillina disuelta en cido perclrico
concentrado.
En esta investigacin se utiliz la tnica analtica descripta en Monje et al.,
(2006).
Las absorbancias fueron medidas con un espectroftmetro Perkim Elmer
Lambda 35 que se puede ver en la Foto 15.
Tesis Doctoral
- 63 -
Captulo 2
destacar que si los reactivos se mezclan al revs, se forman compuestos de color
amarillo que puede llegar a ser intenso si no se enfri adecuadamente.
Se
1,2
1,1
1,0
0,9
0,8
0,7
0,6
0,5
0,4
460
480
500
520
527,97
540
560
580
nm
Name
Cursor Description
Sample23.Sample 1,2442 A
Figura
20
527,97 nm.
Tesis Doctoral
600
- 64 -
Captulo 2
2.5.1. Curva de calibracin
AS = AM AR - AP
Tesis Doctoral
[Saponinas]
0.033222222
0.066444444
0.132888889
0.199333333
Absorbancia
0.17
0.328
0.635
0.909
- 65 -
Captulo 2
Absorbanciancia
0.4
0.5
0.6
0.8
0.9
0.265777778
0.332222222
0.398666667
0.531555556
0.598
1.234
1.52
1.837
2.4599
2.751
Curva de calibracin
A = 4.5725x[Saponinas] + 0.0164
R2 = 0.9999
2.8
2.6
2.4
2.2
2
1.8
1.6
1.4
1.2
1
0.8
0.6
0.4
0.2
0
0
0.05 0.1 0.15 0.2 0.25 0.3 0.35 0.4 0.45 0.5 0.55 0.6 0.65
Concentracin de saponinas mg/mL
Tesis Doctoral
- 66 -
Captulo 2
N
7
R
1,00
R Aj ECMP
1,00 2,1E-04
AIC
-39,77
BIC
-39,93
Est.
E.E.
LI(95%)
LS(95%)
p-valor
0,02
0,01
2,2E-03
0,04
2,86
0,0355
Eje de las X
16078,97
4,57
0,02
2,96
3,07
138,90
<0,0001
p-valor
<0,0001
<0,0001
Tesis Doctoral
n
7
Media D.E.
0,00 0,01
W*
0,89
p (una cola)
0,3409
- 67 -
Captulo 2
Cuartil
es
observa
dos
(RDUO
_Eje Y
)
Tesis Doctoral
- 68 -
Captulo 2
Los resultados se expresan como mg de saponinas/mL.
Para calcular el rendimiento de la extraccin R, se utiliz la siguiente
ecuacin:
R =100 x [V. C/1000]
R = 10 x V x C/masa de semilla (en gramos)
Dnde: V = volumen del extracto total en mL
C = concentracin de saponinas en el extracto
2.6. Resultados y discusiones
2.6.1. Diseo experimental
Con el fin de encontrar las mejores condiciones de extraccin, se analizaron
cuatro variables independientes o factores, cada una con cuatro niveles.
Para lograr este objetivo, se recurri al diseo experimental de Taguchi
(Montgomery, 2004; Anderson and Witcomb, 2007).
Factor B
Factor C
Tiempo, min.
TC
15
50
20
II
20
15
60
60
III
25
20
70
80
IV
30
30
90
95
Nivel
Factor D
% alcohol
Tesis Doctoral
- 69 -
Captulo 2
Taguchi, bastan
extraccin. Cada una de las filas indicadas desde la 1 a la 15 contiene los niveles
(valores) en que debe encontrarse cada uno de los factores (variables) para cada
experimento. Las dos ltimas columnas presentan los rendimientos obtenidos para
cada experimento, con mezclas etanol-agua e isopropanol-agua, respectivamente.
Cada extraccin se realiz por triplicado (n=3) y la cuantificacin de
saponinas para cada extraccin tambin por triplicado, aplicando como criterio de
aceptacin o rechazo de datos el criterio Q, el valor del rendimiento en la tabla
siguiente es el valor medio desvo estndar, que fue determinado con el InfoStat.
Tabla 6 Taguchi diseo experimental L16(44).
Resultados experimentales(*)
Experimento
Factor A
Vol. Solvente/g semillas
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
I(15)
I
I
I
II(20)
II
II
II
III(25)
III
III
III
IV(30)
IV
IV
IV
Factor B
Tiempo min
I(5)
II(15)
III(20)
IV(30
I
II
III
IV
I
II
III
IV
I
II
III
IV
Factor C
TC
Factor D
% de
alcohol
Vacante
I(50)
II(60)
III(70)
IV(90)
II
I
IV
III
III
IV
I
II
IV
III
II
I
I(20)
II(60)
III(80)
IV(95)
III
IV
I
II
IV
III
II
I
II
I
IV
III
I
II
III
IV
IV
III
II
I
II
I
IV
III
III
IV
I
II
Rendimiento promedio: g
saponinas/100 g de semillas
Mezclas
Mezclas
isopropanoletanol-agua
agua
0,7650,03
0,8040,03
0,7970,03
1,0080,02
1,0700,02
0,4770,03
0,3390,04
0,0120,07
0,5020,03
0,1960,05
0,1070,07
0,0150,06
1,5550,02
2,6630,01
1,2360,02
1,3800,02
0,0650,04
0,0020,07
0,7490,03
0,3870,04
0,8770,03
0,8980,03
0,9330,01
1,5680,02
0,7420,02
0,9210,03
0,8900,01
1,5650,02
0,0730,05
0,0010,09
0,7220,03
0,3850,04
*Cada experimento se efectu con factores en el correspondiente nivel, indicado en nmeros romanos (ver Tabla 5) y siguiendo el
procedimiento explicado en Materiales y Mtodos.
En esta tabla se proporcionan las siguientes condiciones en el experimento. Por ejemplo, para el experimento 1: volumen de solvente es 15
mL/g de semillas, aplicado un tiempo de 5 minutos, a una temperatura de 50C y el porcentaje de alcohol es 20%. El rendimiento
experimentalmente medido es 0,804. Este valor es el promedio de cinco experimentos desarrollados en las mismas condiciones.
Tesis Doctoral
- 70 -
Captulo 2
Tiempo de extraccin: 20 minutos.
Temperatura de extraccin: 90C.
Porcentaje de alcohol: 20%.
Los resultados muestran que:
1. El mejor extractante fue una mezcla de isopropanol-agua al 20%.
2. El aumento de temperatura favorece la difusin del soluto que est en
el slido hacia el solvente.
(a)
Rendimiento (g de
saponinas/100g de semillas)
3.5
3
2.5
2
1.5
1
0.5
0
0
Tesis Doctoral
10
15 t (min) 20
25
30
35
- 71 -
Captulo 2
(b)
Rendimiento (g de
saponinas/100 g de semillas)
3.5
3
2.5
2
1.5
1
0.5
0
0
10
15
20
25
30
35
40
45
% Alcohol
c)
Rendimiento (g de
saponinas/100g de semillas)
3
2.5
2
1.5
1
0.5
0
0
10
15
20
25
30
35
(d)
Rendimiento (g de
saponinas/100 g de semillas)
3
2.5
2
1.5
1
0.5
0
50
55
60
65
70
75
80
85
90
95
100
Temperatura C
Figuras 24 (a-d)
Tesis Doctoral
- 72 -
Captulo 2
(a) Efecto del tiempo de irradiacin ( isopropanol;
---- etanol).
Tesis Doctoral
- 73 -
Captulo 2
Eficiencia (g de saponinas/100g
de frutos)
Figura 25 (a)
Eficiencia de la extraccin en etapas
3
2.75
2.5
2.25
2
1.75
1.5
1.25
1
0.75
0.5
0.25
0
1
Etapa
Figura 25 (b)
Porcentajede saponinas
2
Etapa
Esta investigacin mostr que el mtodo Taguchi es til para determinar las
condiciones ptimas de extraccin de saponinas con MO.
El rendimiento de la extraccin por microondas fue significativamente mayor
que el correspondiente a la extraccin con Soxhlet, y el uso de alcohol como
disolvente facilita la disolucin de las saponinas.
El tiempo de extraccin EAM es considerablemente menor que con el
mtodo de Soxhlet (captulo 6, pgina 87); por consiguiente, hay menos riesgo de
gelificacin del almidn, lo que hace ms fcil la microfiltracin y evita la
carbonizacin del mismo por la accin del cido sulfrico concentrado contenido en
el reactivo de Lieberman-Burchard. La carbonizacin del almidn gelificado
produce interferencias en el mtodo analtica.
Tesis Doctoral
Captulo 3
Extraccin de las
saponinas a altas
presiones
- 74 -
Captulo 3
3. EXTRACCIN DE LAS SAPONINAS A ALTAS PRESIONES
Material vegetal
Materiales y equipos
3.2. Introduccin
Fundamentos de la extraccin de saponinas bajo presin
Tesis Doctoral
- 75 -
Captulo 3
Tesis Doctoral
- 76 -
Captulo 3
El dimetro externo fue de 4,0 cm y el interno de 3,2 cm, el alto total del
cilindro es de 16 cm. El volumen que puede contener es de 350 cm 3.
Tesis Doctoral
- 77 -
Captulo 3
Las partes que lo componen se pueden observar en la siguiente fotografa
Tesis Doctoral
- 78 -
Captulo 3
garantizar hermeticidad en las condiciones extremas de los ensayos realizados
(100 C y 5 bar).
Tesis Doctoral
- 79 -
Captulo 3
tiempo de contacto y presin inicial a la cual es inyectado el nitrgeno. De la
combinacin de las variables en sus distintos niveles se obtuvieron las condiciones
de cada ensayo. La relacin volumen de solvente/gramo de semillas se mantuvo
en todos los experimentos 20:1, que es la relacin ptima para la extraccin con
MO (Gianna et al., 2012) La tabla 7 presenta la matriz de diseo experimental para
las extracciones presentadas:
Tabla 7. Matriz de diseo experimental
Nivel
Factor A
Presin manomtrica inicial (bar)
I
II
III
IV
3
2
1
0
Factor B
Tiempo (min)
5
15
20
30
Factor C Factor D
T (C) % alcohol
50
20
60
60
70
80
90
95
Los factores A, B, C y D son las variables independientes cada una con cuatro
niveles (I a IV). A: presin manomtrica inicial; B: tiempo; C: temperatura y D: % de
alcohol en el solvente.
Tabla 8. Diseo experimental de Taguchi L16 (44)a
Experimento
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
Factor A
Factor B
Presin
Tiempo
manomtrica
(min)
inicial
I(3)
I
I
I
II(2)
II
II
II
III(1)
III
III
III
IV(0)
IV
IV
IV
I(5)
II(15)
III(20)
IV(30
I
II
III
IV
I
II
III
IV
I
II
III
IV
Factor C
T C
Factor D
%
alcohol
I(50)
II(60
III(70)
IV(90)
II
I
IV
III
III
IV
I
II
IV
III
II
I
I(20)
II(60)
III(80)
IV(95)
III
IV
I
II
IV
III
II
I
II
I
IV
III
Resultados experimentales
g de saponinas/100 g de
semillasb
Mezclas
Mezclas
IsopropanolEtanol-agua
agua
1.0520,03
1.0230,02
0.9110,04
0.1750,02
0.2880,02
0.0340,01
1.8320,03
1.1590,02
0.0560,05
0.7690,02
0.5050,01
0.5720,01
0.5780,01
0.8260,02
0.0320,05
0.6810,02
0.8990,03
0.4260,02
0.3190,02
0.1380,03
0.1300,04
0.5840,02
2.8820,01
0.7340,02
1.0870,02
1.2280,02
0.7420,03
1.4760,02
1.3090,02
1.4810,02
1.0660,02
0.1830,03
Notas: a. En nmeros romanos se indica el nivel del factor o variable independiente, como se presenta en la tabla 8. Cada
experimento en la tabla fue realizado con el conjunto de condiciones que surgen de tomar el correspondiente nivel para cada
factor, b. promedio de los rendimientos para tres extracciones.
Tesis Doctoral
- 80 -
Captulo 3
3.5
3
2.5
2
1.5
1
0.5
0
0
(a)
Tesis Doctoral
20
40
60
80
t (min)
- 81 -
Rendimiento (g de saponinas/100
g de semillas
Captulo 3
3.5
3
2.5
2
1.5
1
0.5
0
0
10
20
30
40
50
60
% de alcohol
(b)
Rendimiento (g de saponinas/100 g
de semillas
3.5
3
2.5
2
1.5
1
0.5
0
0
Presin (bar)
Rendimiento (g de saponinas/100 g
de semillas
(c)
3.5
3
2.5
2
1.5
1
0.5
0
60
(d)
Tesis Doctoral
70
80
90
100
110
Temperatura C
- 82 -
Captulo 3
Figuras 26 (a-d). Se puede observar como el rendimiento es afectado por cada
variable mientras las otras se mantienen constantes.
3.4 Conclusiones
Se verific que una presin mayor a la atmosfrica aument el rendimiento
de la extraccin, posibilitando la remocin total en menor tiempo. Todo esto parece
ser consecuencia de una mayor difusin del extractante en el pericarpio.
La extraccin con isopropanol implic un 63% ms de eficiencia que con
etanol. Por consiguiente, sera un solvente apropiado para fines analticos, pero su
alto costo lo vuelve prohibitivo como solvente industrial. Esto ltimo solo sera
posible si la recuperacin del isopropanol se demostrara como econmicamente
viable.
Sea con etanol o con isopropanol, las extracciones con solventes a altas
presiones se presentan como alternativas para el desamargado por va hmeda
de la quinoa con la posibilidad de recuperacin posterior de las saponinas, para
fines comerciales, a travs del conveniente escalado a nivel industrial.
Los ensayos de tendencia previamente analizados demuestran el buen
funcionamiento del mtodo de Taguchi para la bsqueda de las condiciones
ptimas de extraccin de saponinas de quinoa, mediante el HPSE.
Tesis Doctoral
Captulo 4
Anlisis comparativo de
la EAM y la HPSE con
dos mtodos clsicos de
extraccin
- 83 -
Captulo 4
4. INTRODUCCIN
En este captulo se comparan los mtodos extractivos investigados.
Tesis Doctoral
- 84 -
Captulo 4
2. Difusin del soluto en el solvente dentro de los poros del slido por
difusin cintica o molecular sin conveccin.
3. Paso del soluto de la superficie del slido a la masa de la solucin, dada
por la difusin y conveccin de la masa lquida. (Ocn y Tojo, 1970).
Tesis Doctoral
- 85 -
Captulo 4
Tesis Doctoral
- 86 -
Captulo 4
Tamao de la
extractiva
fase slida
EAM
No es
Solvente
Eficiencia
Tiempo
Fundamental
Elevada
Mnimo
importante
Maceracin
Importante
Fundamental
Elevada
Largo
Percolacin
Importante
Fundamental
Baja
Medio
Soxhlet
Importante
Fundamental
Elevada
Largo
Fludo
Importante
Fundamental
Media
Medio
No es
Fundamental
Elevada
Medio
Fundamental
Elevada
Mnimo
supercrtico
Ultrasonido
importante
HPSE
No es
importante
Tesis Doctoral
- 87 -
Captulo 4
Mtodo
Tiempo [min]
Solvente
Etanol 95%
Consumo de
Solvente
[mL/g]
40
Rendimiento
de extraccin
[%]
2,58
Extraccin con
agitacin
Extraccin
Ultrasnica
Extraccin a
reflujo
SFE
720
30
Etanol 95%
60
1,72
120
Etanol 95%
40
2,22
180
Etanol 95% +
CO2
Etanol 95%
1,52
MAE
25
5,11
4.3. Metodologa
4.3.1 Soxhlet
Para determinar el final de la extraccin, lo que se hizo fue medir el ndice de
refraccin de la solucin a intervalos de tiempo regulares hasta que el mismo se
mantuvo constante e igual a la del solvente puro (introduciendo un tubo por el
extremo del refrigerante hasta la cmara y sacando una gota antes del
sifonamiento del solvente). Posteriormente la concentracin final de saponinas en
el extracto se cuantific por el mtodo espectrofotomtrico antes mencionado.
Los resultados promedio de 3 mediciones fueron los siguientes:
Solvente
Tiempo de extraccin
% de saponinas extradas
310 minutos
1,520,20
390 minutos
2,570,15
Tesis Doctoral
- 88 -
Captulo 4
determin
en
cada
muestra
el
porcentaje
de
saponinas
extradas
espectrofotomtricamente.
Los resultados obtenidos promedio de 3 mediciones fueron los siguientes:
Etanol 20%-agua
Rendimiento
de
Tiempo, Extraccin
h
[%]
1
0.6250.05
2
0.8500.06
3
0.9080.05
4
0.9880.03
6
1.2680.05
8
1.8530.03
10
1.9850.02
12
2.0270.01
13
2.0270.01
Tabla 12. Extraccin con shaker
10
11
12
13
14
Tiempo en horas
Tesis Doctoral
- 89 -
Captulo 4
Isopropanol 20%-agua
Rendimiento
de
Tiempo, Extraccin
hs
[%]
1
0.9130.06
2
1.1450.07
3
1.1740.05
4
1.280.05
6
1.3390.04
8
1.7230.04
10
1.9560.06
12
2.3250.05
13
2.6230.02
14
2.6230.01
Tabla 13. Extraccin con shaker
6
7
8
9
Tiempo en horas
10
11
12
13
14
15
Tesis Doctoral
- 90 -
Captulo 4
Tiempo (min.)
Solvente
extractivo
Temperatura
Rendimiento
de extraccin
[%]
EAM
20
Etanol 20%-agua
90
1.56
EAM
20
Isopropanol 20%-
90
2.66
agua
HPSE
20
Etanol 20%-agua
90
1.83
HPSE
20
Isopropanol 20%-
90
2.88
agua
Soxhlet
310
Etanol 20%-agua
80
2.03
Soxhlet
390
Isopropanol 20%-
90
2.62
agua
20
Extraccin con
720
Etanol 20%-agua
780
Isopropanol 20%-
2.03
agitacin
Extraccin con
agitacin
20
2.62
agua
Tesis Doctoral
- 91 -
Captulo 4
Mtodo
Tiempo (min.)
Solvente
extractivo
Temperatura
Porcentaje de
saponinas
extradas (1)
EAM
20
Etanol 20%-agua
90
56.9
EAM
20
Isopropanol 20%-
90
91.7
agua
HPSE
20
Etanol 20%-agua
90
63.1
HPSE
20
Isopropanol 20%-
90
99.3
agua
Soxhlet
310
Etanol 20%-agua
80
70
Soxhlet
390
Isopropanol 20%-
90
90.3
agua
20
Extraccin con
720
Etanol 20%-agua
780
Isopropanol 20%-
70
agitacin
Extraccin con
agitacin
20
90.3
agua
4.5 Conclusin
Por lo cual el mejor mtodo extractivo es el HPSE, ya que en una sola etapa
de 20 minutos se extrae prcticamente la totalidad de las saponinas (99,3%). Con
microondas, extrayendo en 2 etapas de 20 minutos cada una, se extrae el 97,1% y
en tres etapas (20 minutos ms) se extrae prcticamente el 100%.
Tesis Doctoral
Captulo 5
Purificacin de las
saponinas a partir de las
soluciones de las
extracciones realizadas
Determinacin por
anlisis de la pureza
Captulo 5
- 92 -
Tesis Doctoral
Captulo 5
- 93 -
Tesis Doctoral
Captulo 5
- 94 -
Segn McHugh y Krukonis, (1994), al haber una gran compresibilidad los grandes
cambios de densidad del fludo y, en consecuencia, el poder de solvatacin,
pueden ser realizados mediante pequeos cambios en la presin a temperatura
constante si se trabaja a temperaturas prximas a la crtica.
Al depender la fuerza solvatante de un fluido supercrtico de su densidad, la
posibilidad de solvatacin de una sustancia en particular puede ser modificada
fcilmente cambiando la presin de extraccin y, en menor medida, la temperatura.
Esto hace que la extraccin con fluidos supercrticos sea selectiva.
Adems, con la propiedad de que la transferencia de masa est mejorada, el
uso de la extraccin con fluidos supercrticos proporciona tiempos de extraccin
ms breves y una mayor eficiencia de extraccin debido a una mejor penetracin
en la matriz (Wright et al., 1987). Debe considerarse tambin un efecto qumico,
que explica la interrelacin entre el fluido supercrtico y el soluto, y que es diferente
para cada soluto y depende de su polaridad, propiedades cido-bsicas y de la
formacin de enlaces puentes de hidrgeno.
Tesis Doctoral
Captulo 5
- 95 -
5.2.4. Procedimiento
Las soluciones de extracciones de las saponinas de las semillas de quinoa
(por EAM y HPSE) fueron de aproximadamente 3 L,
se concentraron en un
Tesis Doctoral
Captulo 5
- 96 -
Tesis Doctoral
Captulo 5
- 97 -
Tesis Doctoral
Captulo 5
- 98 -
Tesis Doctoral
Captulo 5
- 99 -
Tesis Doctoral
Captulo 5
- 100 -
Tesis Doctoral
Captulo 5
- 101 -
Tesis Doctoral
Con
CONCLUSIONES
GENERALES
CONCLUSIONES
GENERALES
Conclusiones Generales
- 102 -
CONCLUSIONES GENERALES
MTODOS DE EXTRACCIN
Del anlisis de los resultados de las extracciones de las saponinas asistidas
por microondas y a alta presin se pone de manifiesto que estos mtodos
extractivos presentan ventajas frente a los mtodos clsicos como la extraccin
Soxhlet y reflujo habitualmente utilizados en los laboratorios.
Tesis Doctoral
Conclusiones Generales
- 103 -
PURIFICACIN
Tesis Doctoral
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