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BIOQUMICA
GUA DE PRCTICAS
SEGUNDO AO
Profesores: Q.F. Del Castillo Cotillo, Helda, Mg (Responsable)
Ing.Qum. Benel Fernndez, Doyle, Mg (Coordinador)
Ing.Qum. Vlez Verona, Javier.
Ing.Qum. Quiones Chapon, Liliana.
Bil. Murrugarra Bringas, Victoria
Bil. Lezama Vigo, Hlmer, MSc.
Md. Llimpe Mitma, Rafael
Bil. Jer Apaza, Csar.
Bil. Loayza Estrada, Carolina, Mg. (Asistente)
2015-II
INTRODUCCIN
La Bioqumica es la ciencia de la vida que estudia el metabolismo de los
organismos vivos, es decir el conjunto de todas las reacciones qumicas, y sus
diferentes mecanismos, vas y regulacin que hacen posible la vida. Las
aplicaciones de la investigacin bsica en bioqumica son numerosas, siendo
indispensable el conocimiento del metabolismo para el desarrollo de cualquier
medicamento, su aplicacin y la determinacin de sus efectos.
La gua de prcticas del curso de Bioqumica tiene como objetivo entrenar al
estudiante con los procedimientos llevados a cabo en el laboratorio y
desarrollar su pensamiento cientfico que lo lleve a comprender los trminos
bsicos de la Bioqumica.
El estudiante debe emplear esta gua en cada prctica de laboratorio y estar
informado sobre la prctica que se llevar a cabo en cada sesin.
El alumno debe cumplir con los objetivos planteados al final de cada prctica.
As mismo debe presentar su gua de prctica terminada la misma.
PROGRAMACIN DE CONTENIDO
SE
FECHA
1
2
3
4
5
6
7
8
JU-06-08
JU-13-08
JU-20-08
JU-27-08
JU-03-09
JU-10-09
JU-17-09
JU-24-09
9
10
11
12
13
14
15
16
JU-01-10
JU-08-10
JU-15-10
JU-22-10
JU-29-10
JU-05-11
JU-12-11
JU-19-11
CONTENIDO
PRACTICAS DE LABORATORIO
1. Introduccin y organizacin de grupos.
2. Bioseguridad.
3. Instrumentacin: centrifugacin
4. Instrumentacin: colorimetra
5. Instrumentacin: potenciometra
6. Cintica Enzimtica
1. Digestin de carbohidratos
PRIMERA EVALUACION PARCIAL DE PRACTICAS
PRIMERA EVALUACION CONTINUA
SEMANA DE EVALUACIONES
FERIADO
2. Absorcin de carbohidratos
3. Gliclisis
4. Lipoprotenas sanguneas
5. Transaminasas y cromatografa
1. Evaluacin nutricional
EVALUACION FINAL DE PRACTICAS
SEGUNDA EVALUACIN CONTINUA
DOCENTE
D. Benel
J. Vlez
L. Quiones
V. Murrugarra
NORMAS PERSONALES
1. Lea con atencin, antes de cada prctica, las indicaciones de su gua. Siga
todas las instrucciones a menos que el profesor realice alguna
modificacin.
2. Cada grupo de prcticas se responsabilizar de su zona de trabajo y de su
material. Se trabajar con cuidado y de manera organizada. As mismo se
mantendr cada mesa de trabajo limpia, seca y ordenada.
3. Es obligatorio la utilizacin de mandil que le cubra brazos, piernas, torso y
pies. Estn prohibidos el uso de sandalias, pantalones cortos, faldas, polos
cortos, etc. en el laboratorio. La persona inapropiadamente vestida para
trabajar en el laboratorio le ser negado el ingreso.
4. No deben llevarse las manos a la boca ni a la cara pues pueden estar
contaminadas.
5. Si tienes el pelo largo, es conveniente que lo lleves recogido.
6. Est terminantemente prohibido fumar, tomar bebidas ni comidas.
7. En caso de derrame, accidente o dao avise inmediatamente al profesor.
8. Al trmino de cada prctica limpiar el rea de trabajo y lavar los materiales
utilizados con agua de cao. Lavarse las manos meticulosamente con agua
y jabn. Finalmente cerciorares que las llaves de gas y agua estn
cerradas.
REACTIVOS QUIMICOS
1. Usar lentes de seguridad cuando trabaje con reactivos qumicos peligrosos
que puedan salpicar o derramarse.
2. Antes de utilizar un compuesto, asegurarse bien de que es el que se
necesita, fijarse bien el rtulo.
MATERIAL DE VIDRIO
1 Use material de vidrio limpio y no rajado.
2 El vidrio caliente no se diferencia a simple vista del vidrio fro. Para evitar
quemaduras use guantes o trapos.
3 Si tienes que calentar a la llama el contenido de un tubo de ensayo,
observa cuidadosamente estas dos normas:
-Ten sumo cuidado y ten en cuenta que la boca del tubo de ensayo no
apunte a ningn compaero. Puede hervir el lquido y salir disparado, por lo
que podras ocasionar un accidente.
-Calienta por el lateral del tubo de ensayo, nunca por el fondo; agita
suavemente (mira la figura).
EQUIPOS ELCTRICOS
1 Manipule cualquier equipo elctrico con las manos secas y asegrese que el
rea de trabajo tambin este seca.
2
Ningn cordn electrifico debe colgar fuera de la mesa de trabajo.
3
Cuando desconecte algn equipo de tomacorriente, jlelo por el enchufe
y no por el cordn.
UTILIZACION DE BALANZAS
1 Cuando se determinan masas de productos qumicos con balanza, se
colocar papel sobre los platos de la misma y si el producto fuera corrosivo,
se utilizar una luna de reloj.
2 Se debe evitar cualquier perturbacin que conduzca a un error, como
vibraciones debidas a golpes, aparatos en funcionamiento, soplar sobre los
platos de la balanza, etc.
MANIPULACIN DE ESPECMENES
1 Manipule los microorganismos crecidos en una placa petri o tubo de cultivo
con extremo cuidado. Siempre utilice tcnicas de esterilidad (a la llama del
mechero, guantes, palillos estriles, etc.).
2
Nunca llevar a la boca plantas o partes de ellas como semillas, frutos y
hojas.
NIVELES DE RIESGO BIOLOGICO EN UN LABORATORIO
Clasificacin de microorganismos por grupos de riesgo para el trabajo de
laboratorio:
Grupo de riesgo 1 (riesgo individual y poblacional escaso o nulo)
Microorganismos que tienen pocas probabilidades de provocar enfermedades
en el ser humano o los animales.
Grupo de riesgo 2 (riesgo individual moderado, riesgo poblacional bajo)
Agentes patgenos que pueden provocar enfermedades humanas o animales
pero que tienen pocas probabilidades de entraar un riesgo grave para el
personal de laboratorio, la poblacin, el ganado o el medio ambiente. La
exposicin en el laboratorio puede provocar una infeccin grave, pero existen
medidas preventivas y teraputicas eficaces y el riesgo de propagacin es
limitado.
Grupo de riesgo 3 (riesgo individual elevado, riesgo poblacional bajo)
Agentes patgenos que suelen provocar enfermedades humanas o animales
graves, pero que de ordinario no se propagan de un individuo a otro. Existen
medidas preventivas y teraputicas eficaces.
Grupo de riesgo 4 (riesgo individual y poblacional elevado)
Agentes patgenos que suelen provocar enfermedades graves en el ser
humano o los animales y que se transmiten fcilmente de un individuo a otro,
6
PRCTICA GUIADA N 1
CARACTERISTICAS
EJEMPLOS DE
PATOGENOS
10
11
Centrifugar a 600g x 10
Centrifugar el sobrenadante
a 4000g x 15
Sedimento:
mitocondrias
Centrifugar el sobrenadante
a 16 500g x 15
Sedimento:
lisosomas
Centrifugar el sobrenadante
a 100 000g x 40
Sedimento:
microsomas
Sobrenadante: citosol
12
TIPOS DE CENTRIFUGACIN
1.
2.
TUBOS DE CENTRIFUGACIN:
13
14
Rayos X
1nm a 1pm
Rayos
< 1pm
Ultravioleta:
400nm a 1nm
Microondas:
25um a 1mm
Infrarrojo:
750nm a 25 um
Ondas de radio
> 1mm
Los cuerpos luminosos como el sol o las lmparas elctricas emiten un gran
espectro electromagntico que comprende amplias longitudes de onda, de las
cuales muy pocas corresponden al espectro visible. En el cuadro anterior se
aprecian todas las radiaciones electromagnticas conocidas.
Los cuerpos coloreados, absorben luz de determinada longitud de onda y
reflejan el resto del espectro luminoso visible e invisible (colores
complementarios) Esta luz reflejada es la que observamos como color propio
del cuerpo coloreado. No interesa particularmente los colores que absorbe la
solucin que queremos medir. La selectividad de absorcin que queremos
medir. La selectividad de absorcin de una partcula por una longitud de onda
se basa en el hecho de que cada longitud de onda de luz corresponde a un
distinto nivel de energa, y para excitar los electrones de cada partcula
necesitamos un particular nivel de energa.
15
Longitud de onda
400-435
435-480
480-490
490-500
500-560
560-580
580-595
595-610
610-750
Color
violeta
azul
verde-azul
azul-verde
verde
amarillo-verde
amarillo-verde
anaranjado
rojo
Colores complementarios
amarillo-verde
amarillo-verde
anaranjado
rojo
purpura
violeta
azul
verde-azul
azul-verde
L =
FOTOCOLORIMETRIA ESPECTROFOTOMETRIA
La fotocolorimetra es la medida de la luz absorbida por una solucin mediante
un aparato que es un fotocolormetro. El equipo consta de una fuente de luz
artificial, un monocromador que separa exclusivamente luz de una sola longitud
de onda (la que sea preferente para la medida), un recipiente o tubo de vidrio
(que alberga la solucin a medir), una clula fotoelctrica que transforma la luz
trasmitida en corriente elctrica y una unidad de medida de la corriente
elctrica o galvanmetro.
16
Luz Incidente Io
Luz trasmitida It
La
calificacin
de colormetro o espectrofotmetro depende del
monocromador, s ste es un filtro tendremos un fotocolormetro, pero si es un
prisma, o cualquier aditamento que proporcione luz de diversas longitudes de
onda tendremos un espectrofotmetro.
Fuente de luz blanca
Muestra: Absorcin
Monocromador
Galvanmetro
Celda
17
Factor de Calibracin
Curvas de calibracin
CS
=
DOp
CP
cp=Dp x -------Dost
PARTE EXPERIMENTAL
PREPARACIN DE UNA CURVA DE CALIBRACIN
El experimento consiste en preparar tubos de concentracin creciente de un
colorante y leerlos al fotocolormetro o al espectrofotmetro, llevando a cero (0)
el aparato con agua destilada. Construir una grfica usando papel milimetrado
18
1
2
8
Concentracin (mg/mL)
%T
2
4
6
Tubo N
3
4
6
8
4
2
5
10
0
A (A=2-logT%)
Desconocido 1
Desconocido 2
1.40
1.20
1.00
0.80
0.60
0.40
0.20
0.00
0
Concentracin (mg/mL)
COMENTARIO
...
Usando los valores obtenidos en % de trasmitancia, grafique usando el papel
semilogartmico de esta pgina.
19
% T (540 nm)
100
80
60
40
20
0
0
Concentracin (mg/mL)
COMENTARIO
20
Batera
0V
AAg.Aa
HclgCl.HCl.Vidrio
1V
Solucin
Problema
.
KCl.Hg2Cl2.Hg
21
PARTE EXPERIMENTAL
TITULACIN DE UN CIDO DBIL CON UNA BASE FUERTE.
Se trata de determinar el pH de un grupo de tubos con varios niveles de
titulacin de cido actico con hidrxido de sodio. Cuando se titula un cido
dbil con una base fuerte se produce un aumento de pH inicialmente rpido
para luego hacerse lento, dentro de ciertos mrgenes y al final se alcaliniza
rpidamente. La identificacin del cambio de pH en cierto perodo de la
titulacin, se debe a la formacin transitoria de una combinacin de cido dbil
y la sal correspondiente. En el caso del experimento ser la combinacin de
cido actico y acetato de sodio y son los componentes ordinarios de una
solucin amortiguadora o solucin buffer.
Para la experiencia preparar 11 tubos de acuerdo al siguiente esquema:
Tubo No
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
mL actico 0,1 N
5,0
5,0
5,0
5,0
5,0
5,0
5,0
5,0
5,0
5,0
5,0
mL NaOH 0,1 N
mL agua destilada
0,0
0,5
1,0
1,5
2,0
2,5
3,0
3,5
4,0
4,5
5,0
5,0
4,5
4,0
3,5
3,0
2,5
2,0
1,5
1,0
0,5
0,0
22
pH
14
13
12
11
10
9
8
7
6
5
4
3
2
1
0
4
10
11
12
Volumen (mL)
COMENTARIO
23
E + S
ES
C
E+P
C
El pH acta sobre los grupos ionizados que pertenecen a los centros activos
de las enzimas. Los grupos que pierden la ionizacin pierden la capacidad de
interaccionar con el sustrato. Cada enzima tiene un pH ptimo de trabajo.
Preparar cinco tubos con:
24
TUBO N
1
1,0
5,0
2,0
0,0
0,0
pH
mL albmina
mL HCL 1N
mL CO3Na2
mL agua destilada
2
1,5
5,0
0,5
0,0
1,5
3
6,0
5,0
0,0
0,0
2,0
4
9,5
5,0
0,0
0,5
1,5
5
11
5,0
0,0
2,0
0,0
mL albmina
mL HCL 1N
mL agua destilada
5,0
0,5
3,5
5,0
0,5
3,5
5,0
0,5
3,5
5,0
0,5
3,5
5,0
0,5
3,5
10
1,0
1,0
1,0
1,0
1,0
1y6
2y7
3y8
4y9
10
Temperatura
O C
Amb.
37 C
70 C
37 C
100 C
Agregar los respectivos tubo N 6 al N 10 a los que hay que incubar a las
temperaturas a que se pre-incuban los tubos 1 5.
5.
25
TUBO N
mL albmina
5,0
5,0
5.0
5,0
5,0
mL HCL 1N
0,5
0,5
0.5
0,5
0,5
mL agua destilada
1,5
2,5
3.5
4,0
4,5
mL pepsina
0,0
0,0
0.0
0,0
0,0
3,0
2,0
1,0
0.5
0,1
mL albmina
2,0
3,0
4,0
5,0
6,0
7,0
mL HCL 1N
0,5
0,5
0,5
0,5
0,5
0,5
mL agua destilada
7,0
6,0
5,0
4,0
3,0
2,0
mL pepsina 1%
0,0
0,0
0,0
0,0
0,0
0,0
Leer a 420 nm (filtro azul). Anotar los resultados: incubar a 37C. Colocar 0,5
mL que pepsina pre-dirigida. Incubar por otros 5 minutos a 37C. Leer al
fotocolormetro a 420 nm (filtro azul). Restar la segunda lectura de la primera.
Graficar y comentar los resultados.
26
Experimento: Efecto de la
temperatura
% Formacin producto
100
80
60
40
20
100
80
60
40
20
0 1
2 3 4
5 6 7
8 9 10 11 12
20
Comentario:
% Formacin producto
% Formacin producto
80
60
40
20
0
6
10
12
Comentario:
100
Experimento: Efecto de la
concentracin de sustrato
100
80
Comentario:
Experimento: Efecto de la
concentracin de enzima
60
Temperatura (C)
pH
40
100
80
60
40
20
0
0
Concentracin de sustrato
Comentario:
27
ml almidn 1%
ml HCL 0,3N
3,4
ml Suero fisiolgico
2,4
ml Agua destilada
2,4
0,6
0,6
28
Pasado este tiempo tomar 0,5ml de cada tubo y preparar cuatro tubos
ms de acuerdo al esquema
TUBO
ml digestin tubo 1
0, 5
ml digestin tubo 2
0,5
ml digestin tubo 3
0,5
ml digestin tubo 4
0,5
ml HCL 0,05N
ml Solucin yodada
0,5
0,5
0,5
0,5
Dejar en reposo por 15 minutos. Leer al fotocolormetro con filtro rojo
(660nm)
Fecha:
1.05
0.90
Abs
0.75
0.60
0.45
0.30
0.15
0.00
Tubo 1
Tubo 2
Tubo 3
Tubo 4
Tubo 5
COMENTARIO:
29
SEMANA N 8
EVALUACION PARCIAL DE PRACTICAS
PRIMERA EVALUACION CONTINUA
SEMANA N 9
SEMANA DE EVALUACIONES
SEMANA N 11
FERIADO
30
31
1.
l agua destilada
50
l patrn 20 mg/dL
50
50
0
0
0
50
Incubar a 37C por 10 minutos. Enfriar y leer en el fotocolormetro a
520nm. Usando el tubo 1 como blanco
COMENTARIO:
32
GLUCOSA + 2ADP + Pi
33
1. EXPERIMENTO.- Gliclisis.
La gliclisis anaerbica (parcialmente) se demuestra por el aumento
de compuestos cidos (pirvico y lctico) en el tubo de reaccin.
Para el efecto preparar cuatro tubos de acuerdo al esquema.
TUBO
2,5
2,5
2,5
2,5
ml Glucosa 0,1 m
0,5
0,5
0,5
0,5
0,2
0,0
0,2
0,2
ml ATP 5m g/ml
0,2
0,2
0,2
ml Nicotinamida 0,4m
0,1
0,1
0,1
0,1
ml Yodoacetato 0,1m
0,1
0,3
ml Agua destilada
0,1
0,3
Colocar en bao de mara 37C por 5 minutos
Gotas de rojo de fenol
ml homogenizado de hgado
Ii
Ii
ii
Ii
0,5
0,5
0,5
0,5
.
RESPIRACIN TISULAR
La respiracin tisular es el proceso por el cual se
aprovecha la energa almacenada en los
nutrientes (glucosa, cidos grasos, aminocidos)
a travs del Actil CoA, mediante procesos de
oxidacin.
Durante el proceso de oxidacin del Acil Coa se
forman equivalentes reductores en forma de
hidrgeno o electrones que ingresan a la cadena
respiratoria, localizada en las mitocondrias y
genera muchas molculas de ATP. Como puede
apreciarse en el esquema adjunto hay tres
fuentes de generacin de electrones que
producen 3 molculas de ATP, el isocitrato, el
cetoglutarato y el malato y una que slo
proporciona dos ATP que es el succinato, debido
34
FRASCO N
0,3
ml Agua destilada
0,7
ml Homogenizado
0,5
Cerrar bien los frascos. Incubar a temperatura ambiente. Medir cada 2 minutos
la modificacin del nivel del manmetro. Prepara un grfico de consumo de
oxgeno vs tiempo.
35
0.4
(cm3)
Volumen O2 consumido
0.5
0.3
0.2
0.1
0
0
10 12 14 16 18 20
Tiempo (Minutos)
Comentario:
36
37
0,02
0,02
0,02
0,02
0,02
0,02
38
39
40
Revelado:
- Finalizada la separacin, depositar las tiras en una cubeta con solucin de
tincin, de modo que queden cubiertas por el lquido, durante 10 minutos.
- Lavar las tiras en solucin de destincin hasta que se observen bien las
bandas de protena (rojo) sobre un fondo blanco.
TRATAMIENTO Y DISCUSION DE LOS RESULTADOS
Dibujar el patrn de bandas que se ha obtenido tras la electroforesis de
protenas sricas, indicando la posicin de nodo y ctodo as como el punto
de aplicacin de la muestra. Identificar las protenas que corresponden a cada
banda y justificar el orden.
Comentario:
41
R=CH-COOH + R-C-COOG
Nh2
R-C-COOH+R-CH-COOH
O
NH2
PROCEDIMIENTO CROMATOGRFICOS
La cromatografa es un procedimiento de anlisis por el cual una mezcla de
molculas es separada en sus componentes mediante el uso de una fase
estacionaria y una mvil.
La fase estacionaria o soporte da nombre al tipo de cromatografa: papel,
columna, capa fina y la fase mvil es lquida o gaseosa.
42
0,3
0,3
0,3
0,3
0,3
0,3
0.,3
0,3
0,4
0,4
0,4
0,4
a
RF =-----------------
a
a
43
Incubar todos los tubos por 45 minutos a 37C. Retirar los tubos del bao de
Mara y agregar 6ml de alcohol etlico a cada tubo. Agitar y esperar por dos
minutos. Centrifugar y usar los sobrenadantes para la cromatografa.
Cromatografa
Marcar a 3 cm del borde una lnea suave con un lpiz, tratando de no daar la
slica gel. Marcar en esa lnea seis puntos separados por 2 cm cada uno.
Colocar en cada punto cinco gotas del respectivo sobrenadante y en las dos
ltimas 5 gotas de alanina y cinco de glutamato respectivamente. Dejar secar
Colocar la cromatoplaca en una cmara de cromatografa con una mezcla de
propanol: agua en la proporcin de 8: Dejar correr hasta que el nivel lquido le
falte 1 cm para llegar al extremo de la placa. Marcar el nivel al que alcanz el
lquido con un lpiz y dejar secar.
Aplicar con un spray una solucin de ninhidrina al 0,1% e butanol. Colocar a la
estufa por 10 minutos. Marcar las manchas obtenidas.
Obtener el Rf de cada mancha mediante la frmula:
Comentario:
44
Protena
29,0
81,8
16,4
17,3
15,0
20,1
18,2
21,3
48,1
11,3
20,2
19,9
19,5
12,8
15,9
25,8
2,9
Lpido
4,8
2,8
0,9
0,2
15,1
20,2
10,2
1,6
9,4
61,4
0,7
0,9
6,6
11,8
26,6
20,5
3,3
Carbohidratos
0,0
0,0
0,0
2,5
0,0
0,0
0,0
0,0
0,0
0,0
0,0
0,0
3,6
1,0
0,0
0,0
7,0
45
Lenguado
Merluza
Pejerrey
Queso Fresco
Queso mantecoso
Tocino
Trucha
Alimento
Arroz (seco)
Arveja (verde)
Avena
Bizcocho
Camote
Fideos
Frejol negro
Frejol soya
Frejol tarhui
Galletas (soda)
Galletas (Vainilla)
Garbanzo
Alimento
Lentejas
Maz (cancha)
Maz (choclo)
Man
Nuez
Olluco
Pallares
Pan (frances)
Papa blanca
Papa Seca
Quinua
Yuca
Aceitunas
Blanquillo
Cebolla
Coco
Col
Coliflor
Lechuga
Nabo
19.0
19,3
18,7
16,0
25,8
9,1
18,2
Protena
6,5
8,3
10,6
8,8
1,2
8,7
21,2
33,4
40,9
9,4
6,0
19,1
Protena
22,8
6,7
3,3
28.8
13,7
0,8
19,9
9,2
2,1
8,3
11,9
0,8
1,2
0,6
0,9
3,8
1,4
2,0
1,4
0,8
0,5
0,8
1,2
10,3
20,2
65,0
1,0
Lpido
0,7
0,7
0,9
6,9
0,2
0,3
1,7
16,4
13,4
14,7
12,7
5,1
Lpido
1,2
2,7
0,8
46,9
67,2
0,1
1,1
0,3
0,3
0,5
4,7
0,2
33,2
0,1
0,1
18,9
0,0
0,6
0,2
0,2
0,0
0,0
0,0
3,7
7,4
1,6
0,0
Carbohidratos
78,1
24,2
68,5
64,4
27,1
78,3
53,3
35,5
27,3
67,9
75,0
61,4
Carbohidratos
59,4
79,8
27,8
18,1
13,2
14,2
61,8
68,2
22,4
73,2
67,6
39.3
6,8
17,1
7,4
19,7
5.2
5,8
3,3
5,2
46
Pepina
Rabanitos
Tomate
Zanahoria
Zapallo
Alimento
Aceite
Azucar
Chocolate
Cocoa
Gelatina(seca)*
Limn
Maizena
Margarina
Naranja
Palta
Papaya
Platano isla
Uva negra
0,5
0,8
0,8
0,6
0,7
0,1
0,0
0,2
0,4
0,2
Protena
0,0
0,0
2.0
9,0
85,6
0.5
8,0
0,6
1.2
1,7
0,4
0,8
0,3
2,7
3,1
4,0
9,5
6,4
Lpido
Carbohidratos
100
0,0
30,0
19,0
0,1
0,0
3,0
81
0,0
12,6
0,1
0,2
0,1
0,0
99,5
60,0
31,0
0,0
11,2
74,0
0,4
11,2
6,5
8,3
23,8
17,9
* Se usan al 3-4g%
GASTOS DE ENERGIA DE ACUERDO A ACTIVIDAD Y SEXO
ACTIVIDAD
Durmiendo
Muy Ligera: manejo de auto,
laboratorio, mecanografa, coser
y planchar
Ligera: caminar, carpintera,
mecanica, lavado de ropa
Moderada:
fregar
pisos,
ciclismo, tenis, baile
Pesada: albail, natacin, ftbol,
bsquetbol.
MUJER :
HOMBRE :
Kcal /kg/hora
Kcal /k Kg/hora
1,1
1,0 1,2
,92,0
1,2
2.5
1,13,9
5,9
10,0
2,5-4,9
2,05,0-7,4
4,07,5-12,0
6,0-
47