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UNIVERSIDADE FEDERAL DE UBERLNDIA

FACULDADE DE ENGENHARIA QUMICA


PROGRAMA DE PS-GRADUAO EM ENGENHARIA QUMICA

OTIMIZAO DINMICA DA FERMENTAO ALCOLICA NO


PROCESSO EM BATELADA ALIMENTADA

PATRICIA CAROLINA SANTOS BORGES

Uberlndia MG
2008

UNIVERSIDADE FEDERAL DE UBERLNDIA


FACULDADE DE ENGENHARIA QUMICA
PROGRAMA DE PS-GRADUAO EM ENGENHARIA QUMICA

OTIMIZAO DINMICA DA FERMENTAO ALCOLICA NO


PROCESSO EM BATELADA ALIMENTADA

Patricia Carolina Santos Borges

Orientadores: Prof. Dr. Elozio Jlio Ribeiro


Profa. Dra. Valria Viana Murata

Dissertao submetida ao Programa de PsGraduao

em

Engenharia

Qumica

da

Universidade Federal de Uberlndia como parte


dos requisitos necessrios obteno do ttulo
de Mestre em Engenharia Qumica

Uberlndia MG
2008

Dados Internacionais de Catalogao na Publicao (CIP)

B732o

Borges, Patrcia Carolina Santos, 1981Otimizao dinmica da fermentao alcolica no processo embatelada
alimentada / Patrcia Carolina Santos Borges. - 2008.
141 f. : il.
Orientadores : Elozio Jlio Ribeiro, Valria Viana Murata.

Dissertao (mestrado) Universidade Federal de Uberlndia, Programa de Ps-Graduao em Engenharia Qumica.


Inclui bibliografia.
1. Fermentao - Teses. 2. lcool - Teses. I. Ribeiro, Elozio Jlio. II.
Murata, Valria Viana. III. Universidade Federal de Uberlndia. Programa
de Ps-Graduao em Engenharia Qumica. III. Ttulo.
CDU: 663.15
Elaborada pelo Sistema de Bibliotecas da UFU / Setor de Catalogao e Classificao

DISSERTAO DE MESTRADO SUBMETIDA AO PROGRAMA DE PSGRADUAO EM ENGENHARIA QUMICA DA UNIVERSIDADE FEDERAL DE


UBERLNDIA

COMO

PARTE

DOS

REQUISITOS

NECESSRIOS

PARA

OBTENO DO TTULO DE MESTRE EM ENGENHARIA QUMICA, EM 7 DE


MARO DE 2008.

BANCA EXAMINADORA

____________________________________________
Prof. Dr. Elozio Jlio Ribeiro
Orientador (PPGEQ/UFU)

____________________________________________
Profa. Dra. Valria Viana Murata
Co-orientadora (PPGEQ/UFU)

____________________________________________
Profa. Dra. Miriam Maria de Resende
(PPGEQ/UFU)

____________________________________________
Prof. Dr. Lus Cludio Oliveira Lopes
(PPGEQ/UFU)

____________________________________________
Prof. Dr. Roberto de Campos Giordano
(PPGEQ/UFSCar)

Este trabalho dedicado minha me,


pela confiana depositada em mim, pelo
incentivo e apoio aos meus estudos.

AGRADECIMENTOS

A Deus, por me confortar e dar nimo nos momentos difceis, e equilbrio nos momentos
felizes.
Aos professores Elozio Jlio Ribeiro e Valria Viana Murata, pela orientao da
dissertao, pela amizade, pela confiana em mim depositada e pela oportunidade de
desenvolver este trabalho.
Aos demais professores da banca examinadora, Miriam Maria de Resende, Lus Cludio
Oliveira Lopes e Roberto de Campos Giordano, pela participao e sugestes.
A toda minha famlia: minha me (Maria Aparecida) pelo apoio incondicional, meu pai,
(Paulo Borges) pelo exemplo de humildade e honestidade, meu Irmo, Cunhada, Sobrinha,
Tios, Primos e Avs, pela compreenso, dedicao e amizade.
Ao meu namorado (Celso Augusto) pela pacincia, pelo companheirismo e colaborao
nas atividades no laboratrio.
Ao Fran Srgio e Adriene, por me ajudarem na compreenso dos mtodos de
estimao de parmetros e otimizao, alm das dicas extras.
Patrcia Tavares, Sandra, e Patrcia Anglica pelos conhecimentos compartilhados
e pela colaborao na fase experimental da dissertao. Ao Marcelo Leite, por me instruir
com relao operao do fermentador.
Aos alunos da graduao Mirismar, Luana, Alex e Edelise, por me ajudarem nas
anlises das fermentaes, pelo carinho e amizade.
Empresa Mauri Brasil Ind. Com. e Imp. Ltda, pelo fornecimento das leveduras S.
cerevisiae Y904.
todos os professores e funcionrios da FEQ/UFU, pelo apoio, pelos ensinamentos e
participao na minha formao profissional. Em especial gostaria de agradecer s
Professoras Miriam e Vicelma, e aos funcionrios Zuleide e Ansio, por me ajudarem com o
fornecimento de materiais e instrumentos usados nos experimentos, e ao dio, pela
colaborao com relao aos programas computacionais utilizados.
s amigas Renata Ftima, D. Maria e D. Graa, pelo carinho, pelo apoio e amizade.
Capes pelo apoio financeiro.

SUMRIO

LISTA DE FIGURAS ......................................................................................................... iii


LISTA DE TABELAS ......................................................................................................... x
NOMENCLATURA ............................................................................................................ xii
RESUMO .......................................................................................................................... xiv
ABSTRACT ....................................................................................................................... xv

CAPTULO 1 INTRODUO ......................................................................................... 1

CAPTULO 2 FERMENTAO ALCOLICA EM BATELADA ALIMENTADA .............. 5


2.1 Reviso Bibliogrfica ................................................................................................... 5
2.1.1 Processos Fermentativos ................................................................................... 5
2.1.2 Microrganismos da Fermentao Alcolica ........................................................ 6
2.1.3 Cintica da Fermentao Alcolica .................................................................... 9
2.2 Materiais e Mtodos .................................................................................................... 16
2.2.1 Cultura e Meio .................................................................................................... 16
2.2.2 Procedimento e Configurao Experimental ...................................................... 16
2.2.3 Mtodos Analticos ............................................................................................. 17
2.3 Resultados e Discusses ............................................................................................ 18
2.4 Concluses .................................................................................................................. 31

CAPTULO 3 DESENVOLVIMENTO DO MODELO CINTICO .................................... 33


3.1 Reviso Bibliogrfica .................................................................................................. 33
3.2 Materiais e Mtodos .................................................................................................... 37
3.2.1 Cultura e Meio .................................................................................................... 37
3.2.2 Procedimento e Configurao Experimental ...................................................... 38
3.2.3 Mtodos Analticos ............................................................................................. 38
3.2.4 Modelos Matemticos ......................................................................................... 38
3.2.5 Metodologia Aplicada na Estimao dos Parmetros ........................................ 41
3.3 Resultados e Discusses ............................................................................................ 42
3.3.1 Estimao dos Parmetros do Modelo para as Fermentaes em Batelada .... 42
3.3.2 Estimao dos Parmetros do Modelo para as Fermentaes em Batelada
Alimentada ......................................................................................................... 55
3.4 Concluses ................................................................................................................. 70

CAPTULO 4 ANLISE DE SENSIBILIDADE PARAMTRICA ..................................... 73


4.1 Reviso Bibliogrfica ................................................................................................... 73
4.2 Anlise de Sensibilidade Paramtrica ......................................................................... 75
4.3 Estimativa da Correlao entre os Parmetros ........................................................... 77
4.4 Resultados e Discusses ............................................................................................ 79
4.4.1 Anlise de Sensibilidade Paramtrica ................................................................ 79
4.4.2 Correlao dos Parmetros ................................................................................ 86
4.5 Concluses .................................................................................................................. 88

CAPTULO 5 OTIMIZAO DINMICA DA FERMENTAO EM BATELADA


ALIMENTADA ......................................................................................... 91
5.1 Reviso Bibliogrfica ................................................................................................... 91
5.1.1 O Problema Geral de Otimizao ....................................................................... 97
5.1.2 Mtodos Numricos de Soluo de Problemas de Otimizao Dinmica ......... 101
5.2 Metodologia da Otimizao Dinmica da Fermentao em Batelada Alimentada ..... 103
5.3 Resultados e Discusses ............................................................................................ 107
5.4 Concluses .................................................................................................................. 114

CAPTULO 6 CONCLUSO GERAL E SUGESTES .................................................. 117

APNDICES ..................................................................................................................... 119


APNDICE A DADOS DOS EXPERIMENTOS ............................................................. 119
Apndice A.1 Resultados dos Experimentos em Batelada ................. 119
Apndice A.2 Resultados dos Experimentos em Batelada Alimentada 120
APNDICE B CURVAS DE CALIBRAO ................................................................... 125
Apndice B.1 Curvas de Calibrao para a Determinao da
Concentrao de Sacarose ........................................... 125
Apndice B.2 Curvas de Calibrao para a Determinao da
Concentrao de Etanol ............................................... 128

ANEXO .............................................................................................................................. 131

REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS ................................................................................. 135

LISTA DE FIGURAS

2.1

Configurao do fermentador para o experimento em batelada alimentada ......

2.2

Concentraes de sacarose, clulas e etanol para os experimentos em

17

batelada alimentada com te = 3 h e diferentes concentraes de substrato


alimentado ...........................................................................................................
2.3

19

Concentraes de sacarose, clulas e etanol para os experimentos em


batelada alimentada com te = 4 h e diferentes concentraes de substrato
alimentado ...........................................................................................................

2.4

20

Concentraes de sacarose, clulas e etanol para os experimentos em


batelada alimentada com te = 5 h e diferentes concentraes de substrato
alimentado ...........................................................................................................

2.5

Variaes dos rendimentos em clulas () e em produto () com a


concentrao de sacarose na alimentao para te = 3 h ....................................

2.6

22

Variaes dos rendimentos em clulas () e em produto () com a


concentrao de sacarose na alimentao para te = 5 h ....................................

2.8

21

Variaes dos rendimentos em clulas () e em produto () com a


concentrao de sacarose na alimentao para te = 4 h ....................................

2.7

20

22

Variaes da percentagem de utilizao do acar () e concentrao


percentual de etanol () com a concentrao de sacarose na alimentao para
te = 3 h .................................................................................................................

2.9

24

Variaes da percentagem de utilizao do acar () e concentrao


percentual de etanol () com a concentrao de sacarose na alimentao para
te = 4 h .................................................................................................................

25

2.10 Variaes da percentagem de utilizao do acar () e concentrao


percentual de etanol () com a concentrao de sacarose na alimentao para
te = 5 h .................................................................................................................

25

2.11 Variao da produtividade de etanol com a taxa inicial de adio do acar ao


fermentador para te = 3 h .....................................................................................

25

2.12 Variao da produtividade de etanol com a taxa inicial de adio do acar ao


fermentador para te = 4 h .....................................................................................

26

2.13 Variao da produtividade de etanol com a taxa inicial de adio do acar ao


fermentador para te = 5 h .....................................................................................

26

2.14 Variaes dos rendimentos em clulas () e em produto () com o tempo de


enchimento do fermentador (te) para os experimentos com sF 218 g/L ...........

iii

27

2.15 Variao da produtividade de etanol com o tempo de enchimento do


fermentador (te) para os experimentos com sF 218 g/L ....................................

27

2.16 Variaes dos rendimentos em clulas yxs (smbolos cheios) e em produto yps
(smbolos vazios) com o tempo de fermentao (a) e concentrao de etanol
(b) para os experimentos com sF 218 g/L .........................................................

28

2.17 Variaes dos rendimentos em clulas () e em produto () com o tempo de


enchimento do fermentador (te) para os experimentos com sF 245 g/L ...........

29

2.18 Variao da produtividade de etanol com o tempo de enchimento do


fermentador (te) para os experimentos com sF 245 g/L ...................................

29

2.19 Variaes dos rendimentos em clulas yxs (smbolos cheios) e em produto yps
(smbolos vazios) com o tempo de fermentao (a) e concentrao de etanol
(b) para os experimentos com sF 245 g/L .........................................................

29

2.20 Variaes dos rendimentos em clulas () e em produto () com o tempo de


enchimento do fermentador (te) para os experimentos com sF 285 g/L ...........

30

2.21 Variao da produtividade de etanol com o tempo de enchimento do


fermentador (te) para os experimentos com sF 285 g/L ...................................

30

2.22 Variaes dos rendimentos em clulas yxs (smbolos cheios) e em produto yps
(smbolos vazios) com o tempo de fermentao (a) e concentrao de etanol
(b) para os experimentos com sF 285 g/L .........................................................

30

3.1

Classificao dos Mtodos de Otimizao (Adaptado de Vanderplaats, 1999) ..

34

3.2

Configurao do fermentador para o experimento em batelada .........................

38

3.4

Taxa especfica mxima de crescimento celular experimental para a


fermentao em batelada com s0 = 154 g/L ........................................................

3.5

Taxa especfica mxima de crescimento celular experimental para a


fermentao em batelada com s0 = 180,1 g/L .....................................................

3.6

45

Taxa especfica mxima de crescimento celular experimental para a


fermentao em batelada com s0 = 195,6 g/L .....................................................

3.7

45

45

Perfil da concentrao de sacarose para s0 = 154 g/L () Dados


experimentais. () Simulado com parmetros estimados por ED. (---)
Perturbao de 5% no perfil simulado ..............................................................

3.8

46

Perfil da concentrao de clulas para s0 = 154 g/L () Dados experimentais.


() Simulado com parmetros estimados por ED. (---) Perturbao de 5%
no perfil simulado ................................................................................................

3.9

47

Perfil da concentrao de etanol para s0 = 154 g/L () Dados experimentais.


() Simulado com parmetros estimados por ED. (---) Perturbao de 5%
no perfil simulado ................................................................................................

iv

47

3.10 Perfil da concentrao de sacarose para s0 = 180,1 g/L () Dados


experimentais. () Simulado com parmetros estimados por ED. (---)
Perturbao de 5% no perfil simulado ............................................................

48

3.11 Perfil da concentrao de clulas para s0 = 180,1 g/L () Dados experimentais.


() Simulado com parmetros estimados por ED. (---) Perturbao de 5%
no perfil simulado ................................................................................................

48

3.12 Perfil da concentrao de etanol para s0 = 180,1 g/L () Dados experimentais.


() Simulado com parmetros estimados por ED. (---) Perturbao de 5%
no perfil simulado ................................................................................................

49

3.13 Perfil da concentrao de sacarose para s0 = 195,6 g/L () Dados


experimentais. () Simulado com parmetros estimados por ED. (---)
Perturbao de 5% no perfil simulado ............................................................

49

3.14 Perfil da concentrao de clulas para s0 = 195,6 g/L () Dados experimentais.


() Simulado com parmetros estimados por ED. (---) Perturbao de 5%
no perfil simulado ................................................................................................

50

3.15 Perfil da concentrao de etanol para s0 = 195,6 g/L () Dados experimentais.


() Simulado com parmetros estimados por ED. (---) Perturbao de 5%
no perfil simulado ................................................................................................

50

3.16 Perfil da concentrao de sacarose para s0 = 154 g/L () Dados


experimentais. () Simulado com parmetros estimados por ED a partir dos 2
experimentos em batelada com s0 = 154 e 180,1 g/L. (---) Perturbao de
5% no perfil simulado ..........................................................................................

52

3.17 Perfil da concentrao de clulas para s0 = 154 g/L () Dados experimentais.


() Simulado com parmetros estimados por ED a partir dos 2 experimentos
em batelada com s0 = 154 e 180,1 g/L. (---) Perturbao de 5% no perfil
simulado ..............................................................................................................

52

3.18 Perfil da concentrao de etanol para s0 = 154 g/L () Dados experimentais.


() Simulado com parmetros estimados por ED a partir dos 2 experimentos
em batelada com s0 = 154 e 180,1 g/L. (---) Perturbao de 5% no perfil
simulado ..............................................................................................................

53

3.19 Perfil da concentrao de sacarose para s0 = 180,1 g/L () Dados


experimentais. () Simulado com parmetros estimados por ED a partir dos 2
experimentos em batelada com s0 = 154 e 180,1 g/L. (---) Perturbao de
5% no perfil simulado ..........................................................................................
3.20 Perfil da concentrao de clulas para s0 = 180,1 g/L () Dados experimentais.
() Simulado com parmetros estimados por ED a partir dos 2 experimentos

53

em batelada com s0 = 154 e 180,1 g/L. (---) Perturbao de 5% no perfil


simulado ..............................................................................................................

54

3.21 Perfil da concentrao de etanol para s0 = 180,1 g/L () Dados experimentais.


() Simulado com parmetros estimados por ED a partir dos 2 experimentos
em batelada com s0 = 154 e 180,1 g/L. (---) Perturbao de 5% no perfil
simulado ..............................................................................................................

54

3.22 Taxa especfica mxima de crescimento celular experimental aps o tempo de


enchimento de 5 horas para batelada alimentada com sF = 217 g/L ..................

57

3.23 Taxa especfica mxima de crescimento celular experimental aps o tempo de


enchimento de 5 horas para batelada alimentada com sF = 241,4 g/L ...............

58

3.24 Taxa especfica mxima de crescimento celular experimental aps o tempo de


enchimento de 5 horas para batelada alimentada com sF = 285 g/L ..................

58

3.25 Perfis das variveis de estado para sF = 217 g/L e te = 5 h. () Dados


experimentais. () Simulado com parmetros estimados por ED. (---)
Perturbao de 5% no perfil simulado. (a) Sacarose (b) Clulas (c) Etanol (d)
Volume ................................................................................................................

59

3.26 Perfis das variveis de estado para sF = 241,4 g/L e te = 5 h. () Dados


experimentais. () Simulado com parmetros estimados por ED. (---)
Perturbao de 5% no perfil simulado. (a) Sacarose (b) Clulas (c) Etanol (d)
Volume ................................................................................................................

60

3.27 Perfis das variveis de estado para sF = 285 g/L e te = 5 h. () Dados


experimentais. () Simulado com parmetros estimados por ED. (---)
Perturbao de 5% no perfil simulado. (a) Sacarose (b) Clulas (c) Etanol (d)
Volume ................................................................................................................

61

3.28 () Taxa de crescimento especfico e () concentrao de sacarose em


funo da concentrao de etanol para a fermentao em batelada alimentada
com te = 5 h e sF = 217 g/L ..................................................................................

62

3.29 () Taxa de crescimento especfico e () concentrao de sacarose em


funo da concentrao de etanol para a fermentao em batelada alimentada
com te = 5 h e sF = 241,4 g/L ...............................................................................

62

3.30 () Taxa de crescimento especfico e () concentrao de sacarose em


funo da concentrao de etanol para a fermentao em batelada alimentada
com te = 5 h e sF = 285 g/L ..................................................................................

63

3.31 Perfis das variveis de estado para sF = 245 g/L e te = 3 h. () Dados


experimentais. () Simulado com parmetros estimados por ED. (---)
Perturbao de 5% no perfil simulado. (a) Sacarose (b) Clulas (c) Etanol

vi

65

(d) Volume ...........................................................................................................


3.32 Perfis das variveis de estado para sF = 245 g/L e te = 4 h. () Dados
experimentais. () Simulado com parmetros estimados por ED. (---)
Perturbao de 5% no perfil simulado. (a) Sacarose (b) Clulas (c) Etanol
(d) Volume ...........................................................................................................

66

3.33 Perfis das variveis de estado para sF = 217 g/L e te = 5 h. () Dados


experimentais. () Simulado com parmetros estimados por ED pelos trs
experimentos em batelada alimentada com te = 5h. (---) Perturbao de 5%
no perfil simulado. (a) Sacarose (b) Clulas (c) Etanol (d) Volume ....................

68

3.34 Perfis das variveis de estado para sF = 241,4 g/L e te = 5 h. () Dados


experimentais. () Simulado com parmetros estimados por ED pelos trs
experimentos em batelada alimentada com te = 5h. (---) Perturbao de 5%
no perfil simulado. (a) Sacarose (b) Clulas (c) Etanol (d) Volume ...................

69

3.35 Perfis das variveis de estado para sF = 285 g/L e te = 5 h. () Dados


experimentais. () Simulado com parmetros estimados por ED pelos trs
experimentos em batelada alimentada com te = 5h. (---) Perturbao de 5%
no perfil simulado. (a) Sacarose (b) Clulas (c) Etanol (d) Volume ...................
4.1

70

Perfil de sensibilidade da concentrao de sacarose em relao aos


parmetros do modelo () batelada com s0 = 154 g/L e (---) batelada
alimentada com sF = 217 g/L e te = 5h ................................................................

4.2

81

Perfil de sensibilidade da concentrao de clulas em relao aos parmetros


do modelo () batelada com s0 = 154 g/L e (---) batelada alimentada com sf =
217 g/L e te = 5h .................................................................................................

4.3

82

Perfil de sensibilidade da concentrao de etanol em relao aos parmetros


do modelo () batelada com s0 = 154 g/L e (---) batelada alimentada com sF =
217 g/L e te = 5h .................................................................................................

4.4

82

Perfil de sensibilidade da concentrao de sacarose em relao aos


parmetros do modelo () batelada com s0 = 180,1 g/L e (---) batelada
alimentada com sF = 241,4 g/L e te = 5h .............................................................

4.5

83

Perfil de sensibilidade da concentrao de clulas em relao aos parmetros


do modelo () batelada com s0 = 180,1 g/L e (---) batelada alimentada com sF
= 241,4 g/L e te = 5h ...........................................................................................

4.6

83

Perfil de sensibilidade da concentrao de etanol em relao aos parmetros


do modelo () batelada com s0 = 180,1 g/L e (---) batelada alimentada com sF

4.7

= 241,4 g/L e te = 5h ...........................................................................................

84

Perfil de sensibilidade da concentrao de sacarose em relao aos

84

vii

parmetros do modelo () batelada com s0 = 195,6 g/L e (---) batelada


alimentada com sF = 285 g/L e te = 5h ................................................................
4.8

Perfil de sensibilidade da concentrao de clulas em relao aos parmetros


do modelo () batelada com s0 = 195,6 g/L e (---) batelada alimentada com sF
= 285 g/L e te = 5h ..............................................................................................

4.9

85

Perfil de sensibilidade da concentrao de etanol em relao aos parmetros


do modelo () batelada com s0 = 195,6 g/L e (---) batelada alimentada com sF
= 285 g/L e te = 5h ..............................................................................................

5.1

85

() Perfil timo da concentrao de sacarose. (---) Perfil simulado a partir do


modelo estimado. () Dados experimentais para batelada alimentada com sF =
285 g/L e te = 5 h. As linhas em azul representam os eventos ts1 e ts2 ...............

5.2

109

() Perfil timo da concentrao de clulas. (---) Perfil simulado a partir do


modelo estimado. () Dados experimentais para batelada alimentada com sF =
285 g/L e te = 5 h. As linhas em azul representam os eventos ts1 e ts2 ...............

5.3

110

() Perfil timo da concentrao de etanol. (---) Perfil simulado a partir do


modelo estimado. () Dados experimentais para batelada alimentada com sF =
285 g/L e te = 5 h. As linhas em azul representam os eventos ts1 e ts2 ...............

5.4

110

Perfil timo do volume do fermentador. (---) Perfil simulado. () Dados


experimentais para batelada alimentada com sF = 285 g/L e te = 5 h. As linhas
em azul representam os eventos ts1 e ts2 ............................................................

5.5

111

() Perfil timo da vazo de alimentao de substrato varivel de controle.


(---) e () Vazo de alimentao utilizada no experimento e na simulao em
batelada alimentada com sF = 285 g/L e te = 5 h. As linhas em azul
representam os eventos ts1 e ts2 ..........................................................................

111

5.6

Funo Identificadora de Fase ............................................................................

112

5.7

() Rendimento timo em etanol. (---) e () Rendimento final em etanol obtido


experimentalmente ..............................................................................................

5.8

112

() Taxa tima de crescimento celular especfica. (---) Taxa de crescimento


celular especfica a partir do modelo estimado. () Taxa de crescimento celular
especfica obtida pelos dados experimentais ............................................

5.9

113

() Perfil da produo de etanol (Funo Objetivo) alcanada pela


otimizao. (---) Produo de etanol obtida pelo modelo estimado. ()
Produo de etanol obtida dos dados experimentais .......................................... 113

B.1
B.2

Curva de Calibrao utilizada nos experimentos em batelada com s0 = 154


g/L, e batelada alimentada com sF = 218 g/L e te = 3h ........................................

125

Curva de Calibrao utilizada no experimento em batelada com s0 = 180,1 g/L

126

viii

B.3

Curva de Calibrao utilizada no experimento em batelada com s0 = 195,6 g/L

B.4

Curva de Calibrao utilizada nos experimentos em batelada alimentada com


sF = 218 g/L e te = 4 e 5 h; sF = 245 g/L e te = 3 h ...............................................

B.5

127

Curva de Calibrao utilizada no experimento em batelada alimentada com sF


= 285 g/L e te = 4 e 5 h ........................................................................................

B.7

127

Curva de Calibrao utilizada nos experimentos em batelada alimentada com


sF = 245 g/L e te = 4 e 5 h; sF = 285 g/L e te = 3 h ...............................................

B.6

126

128

Curva de Calibrao utilizada em todos os experimentos em batelada e nos


experimentos em batelada alimentada com sF = 218 g/L e te = 3, 4 e 5 h; sF =
245 g/L e te = 3h ..................................................................................................

B.8

Curva de Calibrao utilizada nos experimentos em batelada alimentada com


sF = 245 g/L e te = 4 e 5 h; sF = 285 g/L e te = 3, 4 e 5h ......................................

129
129

Gerao dos indivduos da populao representados por vetores no mtodo


de Evoluo Diferencial

132

ix

LISTA DE TABELAS

2.1

Modelos matemticos existentes para a fermentao alcolica .........................

12

2.2

Parmetros cinticos dos modelos apresentados na Tab. 2.1 ...........................

14

2.3

Resultados experimentais da fermentao em batelada alimentada para te =


3h ........................................................................................................................

2.4

Resultados experimentais da fermentao em batelada alimentada para te =


4h ........................................................................................................................

2.5

23

Rendimentos mdios em etanol para cada experimento em batelada


alimentada ...........................................................................................................

3.1

23

Resultados experimentais da fermentao em batelada alimentada para te =


5h ........................................................................................................................

2.6

22

27

Escalas caractersticas para a obteno dos valores adimensionais das


variveis dos modelos para as fermentaes nos processos em batelada e
batelada alimentada ............................................................................................

3.2

Valores dos parmetros cinticos do modelo adimensional e condies iniciais


para a estimao dos parmetros .......................................................................

3.3

Valores

dos

parmetros

cinticos

na

forma

dimensional

4.1

64

Condies iniciais e parmetros estimados para os experimentos em batelada


alimentada para sF 245 g/L na forma dimensional ..........................................

3.10

56

Condies iniciais e parmetros estimados para os experimentos em batelada


alimentada para sF 245 g/L na forma adimensional ........................................

3.9

56

Condies iniciais e parmetros estimados para os experimentos em batelada


alimentada na forma dimensional .......................................................................

3.8

51

Condies iniciais e parmetros estimados para os experimentos em batelada


alimentada na forma adimensional .....................................................................

3.7

44

Parmetros estimados pelos 2 experimentos em batelada com s0 = 154 e


180,1 g/L .............................................................................................................

3.6

43

Taxas especficas mximas de crescimento obtidas pelos resultados


experimentais ......................................................................................................

3.5

42

dados

experimentais ......................................................................................................
3.4

39

64

Parmetros estimados considerando os trs experimentos em batelada


alimentada para te = 5h .......................................................................................

67

Correlaes dos pares de parmetros do modelo batelada com s0 = 154 g/L ...

87

4.2

Correlaes dos pares de parmetros do modelo batelada alimentada com sF


= 217 g/L..............................................................................................................

5.1

Funes Objetivo empregadas no POD envolvendo o processo de


fermentao em batelada alimentada .................................................................

5.2

88
98

Restries impostas no POD envolvendo o processo de fermentao em


batelada alimentada ............................................................................................

98

5.3

Estratgia de controle e ndice diferencial definido por fase ............................... 105

5.4

Dados operacionais do processo em batelada alimentada utilizados no


experimento, simulao e otimizao .................................................................

107

5.5

Resultados da fermentao, eventos e funo objetivo dos perfis estudados ...

108

5.6

Comparao entre solues timas obtidas com e sem restrio na


produtividade ....................................................................................................... 114

A.1

Resultados do experimento em Batelada com s0 = 154 g/L ...............................

119

A.2

Resultados do experimento em Batelada com s0 = 180,1 g/L ............................

119

A.3

Resultados do experimento em Batelada com s0 = 195,6 g/L ............................

120

A.4

Resultados do experimento em Batelada Alimentada com sF = 218,4 0,1 g/L,


te = 3 h ...............................................................................................................

A.5

Resultados do experimento em Batelada Alimentada com sF = 218,0 2 g/L, te


= 4h .....................................................................................................................

A.6

122

Resultados do experimento em Batelada Alimentada com sF = 245,0 3 g/L, te


= 4h .....................................................................................................................

A.9

121

Resultados do experimento em Batelada Alimentada com sF = 245,0 4 g/L, te


= h .......................................................................................................................

A.8

121

Resultados do experimento em Batelada Alimentada com sF = 217 1 g/L, te =


5 h .......................................................................................................................

A.7

120

122

Resultados do experimento em Batelada Alimentada com sF = 241,4 0,1 g/L,


te = 5 h ................................................................................................................

123

A.10 Resultados do experimento em Batelada Alimentada com sF = 277,0 3 g/L, te


= 3h .....................................................................................................................

123

A.11 Resultados do experimento em Batelada Alimentada com sF = 285,0 4 g/L, te


= 4h .....................................................................................................................

124

A.12 Resultados do experimento em Batelada Alimentada com sF = 285,0 4 g/L, te


1

= 5 h ....................................................................................................................

124

Estratgias de cruzamento propostas por Storn e Price (1995) .........................

133

xi

NOMENCLATURA

Taxa de diluio

1/h

Vazo de alimentao de substrato

L/h

Fa

Vazo de alimentao de substrato adimensional

ki

Constante de inibio do crescimento celular pelo substrato

Ki

Constante de inibio do crescimento celular pelo substrato

g/L

adimensional
ks

Constante de saturao para o crescimento celular

KS

Constante de saturao para o crescimento celular adimensional

ms

Constante de manuteno celular

MS

Constante de manuteno celular adimensional

Potncia do termo de inibio pelo produto

Concentrao de produto

Concentrao de produto adimensional

pa

Parmetros

pm

Concentrao de produto onde cessa o crescimento microbiano

Pmax

Concentrao de produto onde cessa o crescimento microbiano

g/L
1/h

g/L

g/L

adimensional
Qe

Produtividade do etanol

g/h

Qp

Produtividade do etanol

g/Lh

Qs

Taxa inicial de adio do acar ao fermentador

g/h

Concentrao de substrato

g/L

Concentrao de substrato adimensional

sei

Sensibilidade paramtrica da varivel de estado y em relao ao


parmetro pai (sei = dy/dpai)

sF

Concentrao de substrato na alimentao

g/L

SF

Concentrao de substrato na alimentao adimensional

sr

Concentrao de substrato residual

Tempo da fermentao

te

Tempo de enchimento do meio no fermentador

Te

Tempo de enchimento do meio no fermentador adimensional

tf

Tempo final da fermentao

ts1

Tempo em que comea a fase singular

ts2

Tempo em que termina a fase singular

g/L

xii

Varivel de controle (Vazo de alimentao de substrato)

L/h

Volume do meio no fermentador

vT

Volume total do meio no fermentador

Volume do meio no fermentador adimensional

Concentrao celular

Concentrao celular adimensional

Variveis de estado (x, s, p e v) na anlise de sensibilidade

Vetor das variveis de estado na anlise de sensibilidade

yps

Rendimento do produto com relao ao substrato

YPS

Rendimento do produto com relao ao substrato adimensional

yxs

Rendimento das clulas com relao ao substrato

YXS

Rendimento das clulas com relao ao substrato adimensional

Varivel de estado na otimizao dinmica

g/L

get/gsac
gcel/gsac

Letras gregas:

Variveis adjuntas

Taxa especfica de crescimento celular

Taxa especfica de crescimento celular adimensional

Taxa especfica mxima de crescimento celular

max

Taxa especfica mxima de crescimento celular adimensional

Taxa especfica de formao de produto

1/h

max

Taxa especfica mxima de formao de produto

1/h

Taxa de consumo de substrato

1/h

Taxa de consumo de substrato adimensional

Taxa de formao de produto

Taxa de formao de produto adimensional

Tempo da fermentao adimensional

1/h
1/h

1/h

Subscritos:
0

Condio inicial

Condio no tempo de fermentao de 1 hora

Condio final

max

Valores mximos

min

Valores mnimos

et

Etanol produzido

cel

Clulas produzidas

sac

Sacarose consumida

xiii

RESUMO

Este trabalho apresenta um estudo terico e experimental da otimizao dinmica da


fermentao alcolica em batelada alimentada utilizando a levedura Saccharomyces
cerevisiae num fermentador de 5 L. Foram realizados doze experimentos, trs em batelada
e nove em batelada alimentada, com concentraes iniciais de sacarose na faixa de 154 a
195,6 g/L para os experimentos em batelada e na faixa de 217 a 285 g/L para os
experimentos em batelada alimentada. Os tempos de enchimento do fermentador variaram
de 3 a 5 horas. O volume do inculo correspondeu a 30% do volume do fermentador com
concentrao de lcool igual a 4%, tpica dos processos industriais.
So apresentados resultados sobre a influncia do tempo de enchimento e da
concentrao de sacarose alimentada sobre os perfis de concentrao de clulas, substrato
e produto e sobre os rendimentos e produtividades na fermentao em batelada alimentada.
A estimao dos parmetros do modelo cintico no estruturado proposto por Tosetto
(2002, Dissertao de Mestrado em Engenharia Qumica Universidade Estadual de
Campinas, Campinas-SP. 82p) usando os resultados experimentais da fermentao em
batelada e da fermentao em batelada alimentada, foi obtida pelo algoritmo de evoluo
diferencial
de
Storn
e
Price
(1995,
disponvel
em
http://www.ICSI.
Berkeley.edu/~storn/code.html, acesso: 13 novembro 2007). A anlise de sensibilidade
paramtrica e a estimativa do grau de correlao entre os parmetros por meio da matriz de
sensibilidade dos modelos foram feitas com o cdigo DDASPK (Petzold et al., 2000, Code
DDASPK. Copyright. University of Califrnia, 1-206) e com a metodologia proposta por
(Sanz e Voss, 2006, Advances in Water Resources, 29, 439-457) respectivamente. O
modelo cintico proposto representou satisfatoriamente a fermentao em batelada
alimentada apesar da alta correlao entre os parmetros, e o Problema de Otimizao
Dinmica foi formulado para um caso experimental especfico que resultou na maior
produo de etanol (concentrao de substrato alimentado = 285 g/L e tempo de
enchimento = 5 h). O perfil timo simulado da vazo de substrato alimentado que maximiza
a produo de etanol, sujeito a restries no volume, na vazo de alimentao e no
rendimento, foi obtido pela metodologia proposta por Lobato et al. (2006, XXII IACChE
(CIIQ) 2006 / V CAIQ AAIQ Asociacin Argentina de Ingenieros Qumicos IACChe Interamerican Confederation of Chemical Engineering), que utiliza a Funo Identificadora
de Fases para determinar a seqncia de arcos no singulares e singulares e os tempos de
transio entre as fases. O perfil timo formado por uma seqncia: vazo mxima-vazo
singular-vazo mnima, com tempo de fermentao de 5,11 h, definida com base na anlise
das condies operacionais que favoreciam o crescimento celular na fase inicial e a
formao de produto na fase final, conforme indicado por Modak et al. (1986, Biotechnol.
Bioeng., 28, 1396-1407).

Palavras-chave: Fermentao em Batelada Alimentada, Etanol, Evoluo Diferencial,


Sensibilidade Paramtrica, Otimizao Dinmica.

xiv

ABSTRACT

This work presents an experimental and theoretical study of the dynamic optimization of
the alcoholic fermentation in fed-batch mode utilizing the Saccharomyces cerevisiae yeast in
a bioreactor of 5 L. Twelve experiments were carried out, three them in batch and nine in
fed-batch mode, with initial sucrose concentrations between 154 and 195.6 g/L for the
experiments in batch and between 217 and 285 g/L for the experiments in fed-batch. The
filling times for the bioreactor varied from 3 to 5 hours. The inoculum volume corresponded
to 30% of the bioreactor volume with alcohol concentration like 4%, typical of the industrial
processes.
The results about the influence of the filling time and of the fed sucrose concentration
about the substrate, product and cells concentration profiles and about the yields and
productivities in the fed-batch fermentation are presented. The estimation of the parameters
of the non structured kinetic model proposed by Tosetto (2002, Dissertation in Chemical
Engineering Campinas Estadual University, Campinas-SP. 82p), using the experimental
results of the batch and fed-batch fermentation, was obtained through the algorithm of
differential evolution by Storn and Price (1995, available in http://www.ICSI.
Berkeley.edu/~storn/code.html, access: november 13 2007). The analysis of parametric
sensitivity and the estimate of the rank correlation between the parameters through the
sensitivity matrix of the models were realized through the code DDASPK (Petzold et al.,
2000, Code DDASPK. Copyright. University of Califrnia, 1-206) and by using the
methodology proposed by Sanz e Voss (2006, Advances in Water Resources, 29, 439-457)
respectively. The kinetic model proposed represented satisfactorily the fermentation in fedbatch despite of the high correlation between the parameters, and the Dynamic Optimization
Problem was formulated for a specific experimental case that resulted in the biggest ethanol
production (fed substract concentration = 285 g/L and filling time = 5 h). The simulated
optimal profile of the fed substract rate that maximizes the ethanol production, subject to
constraints in the volume, in the feed rate and in the yield, was obtained by the methodology
proposed by Lobato et al. (2006, XXII IACChE (CIIQ) 2006 / V CAIQ AAIQ Asociacin
Argentina de Ingenieros Qumicos IACChe - Interamerican Confederation of Chemical
Engineering), which utilizes the Switching Function to define the sequence of singular and
non singular arcs and the switching times. The optimal profile is formed by the following
sequence: minimum feed rate-singular feed rate-maximum feed rate, with time of
fermentation of 5.11 h, defined on the basis of the analysis of the operational conditions that
favored the cellular growth in the initial phase and the formation of product in the final phase,
as indicated by Modak et al. (1986, Biotechnol. Bioeng., 28, 1396-1407 ).

Keywords: Fed-batch Fermentation, Ethanol, Differential Evolution, Parameter Sensitivity,


Dynamic Optimization.

xv

__________________________________________________________________Captulo 1 - Introduo

CAPTULO 1
INTRODUO

Em anos recentes, pesquisas para melhorar a produo de etanol tm aumentado por


razes ecolgicas e econmicas, principalmente para seu uso como uma alternativa aos
combustveis base de petrleo. O combustvel etanol pode ser produzido de duas formas:
pela rota petroqumica a partir da hidratao do etileno e pela rota biotecnolgica a partir da
fermentao da biomassa agrcola por microrganismos. O desafio identificar os gargalos
que limitam os processos de fermentao industriais e desenvolver processos que forneam
alta produo de etanol (Alfenore et al., 2004).
O Brasil o maior exportador e segundo maior produtor de lcool, atrs apenas dos
EUA que lideram a produo de lcool basicamente a partir do milho. tambm o pas com
maior potencial de expanso da produo de biocombustveis atualmente no mundo por ter
condies privilegiadas de solo e clima para a produo em larga escala (Furtado e
Scandiffio, 2006; Strapasson, 2006; Cabrini e Marjotta-Maistro, 2007). O Brasil dever moer
468 milhes de toneladas de cana-de-acar para a indstria, na safra 2008/09 da regio
Centro-Sul, sendo que 56% sero destinadas para a produo de lcool e 44% para o
acar. O aumento de 12,8% em relao ao ciclo 2007/08. Esta estimativa prevista
devido s instalaes de novas usinas e aumento da demanda interna (JornalCana, 2007).
O Estado de So Paulo detm dois teros da produo de lcool do Brasil e 75% das
exportaes do produto. O plantio de cana utiliza cerca de 16% do territrio do Estado, o
que representa 4,2 milhes de hectares (Usinas, 2007). O Estado de Minas Gerais o
terceiro produtor de cana, lcool e acar sendo que o Tringulo Mineiro concentra 68% da
produo de cana, 79% da produo de acar e 61% do lcool no estado. A taxa de
crescimento da produo de cana em Minas Gerais de 8,6% ao ano, contra 4,81% da
mdia nacional (Tringulo, 2007).
Vrios pases ampliaram a utilizao de lcool, com destaque para os EUA, Brasil,
Colmbia, Peru, Venezuela e Paraguai. O programa de combustveis renovveis da Unio
Europia avanou com o biodiesel. Apesar de os EUA possurem uma demanda potencial
muito maior do que sua capacidade de abastecimento atual, eles impem tarifas para a
importao de lcool. Foi o pas que mais expandiu a produo de lcool, sendo que sua
produo aumentou mais do que o esperado entre 2000 e 2006, ultrapassando a produo
brasileira. Japo, China e Tailndia tm grande expectativa de aumento do consumo de
lcool, tendo em vista os programas de implementao do uso do lcool como combustvel.
1

Captulo 1 Introduo___________________________________________________________________________________

O Japo o maior importador potencial, devido basicamente grande demanda por


combustveis renovveis, ao alto consumo de gasolina, baixa produo de lcool e tarifa
de importao praticamente nula (Cabrini e Marjotta-Maistro, 2007).
O custo do etanol brasileiro menor que o do petrleo e o do lcool produzido de outras
biomassas, pois quando se usa cana como matria-prima, no necessria a converso do
amido em glicose, o que ocorre nos processos que utilizam milho (EUA) e trigo (Alemanha)
como matria-prima. Alm disso, o bagao da cana contm uma grande quantidade de
energia, o que diminui o custo de produo por no requerer a queima de combustveis
fsseis (Furtado e Scandiffio, 2006).
Entre os desenvolvimentos responsveis por ganhos na produo do etanol, esto os
processos de fermentao. A escolha entre processo contnuo ou em batelada para
produo de etanol por fermentao tem sido muito discutida.

Tradicionalmente as

destilarias e usinas brasileiras usam o sistema descontnuo ou de batelada alimentada,


porm a polmica entre processos concorrentes sempre existiu na rea industrial das
usinas. No Brasil, o sistema de batelada considerado mais confivel por muitos
engenheiros por apresentar sistema de assepsia mais fcil. No h estatsticas exatas, mas
os pesquisadores acreditam que o processo contnuo seja responsvel pela produo de
25% a 30% do etanol fabricado no Brasil o sistema batelada domina o mercado das
operaes fermentativas. Algumas usinas voltaram ao processo em batelada aps alguns
anos de operao contnua. Quando se faz acar e lcool, o sistema mais aceito pelos
tcnicos o batelada (Revista Alcoolbrs, 2006). No processo em batelada convencional, se
for considerado o tempo necessrio para encher as dornas, este processo se compara ao
batelada alimentada (Andrietta et al., 2003).
Com a implantao do programa Prolcool em 1975, houve um aumento considervel da
capacidade de produo das unidades industriais, assim como um aumento no volume dos
fermentadores. A varivel tempo passou a ter influncia muito grande no processo de
fermentao alcolica. Assim, as velocidades de enchimento passaram a ter um papel
importante nesse processo. Vazes muito elevadas implicam tempos de enchimento
menores, que podem provocar transbordamentos do meio em fermentao devido
formao excessiva de espuma, com perdas para o processo, ou mesmo inibio do
metabolismo das leveduras pelo acmulo de substrato no meio em fermentao. Alm
dessas perdas, o tempo de fermentao pode aumentar, e por isso, diminuir a
produtividade. Vazes muito baixas conduzem a tempos de fermentao elevados, o que
ocasiona menores produtividades (Vasconcelos e Valdman, 1988).
Vasconcelos (1993) estudou a influncia da variao da vazo de alimentao na
produtividade e eficincia fermentativa por meio de dados obtidos em escala piloto e
industrial, e destacou a importncia da fase de enchimento da dorna no processo
2

__________________________________________________________________Captulo 1 - Introduo

fermentativo. Andrietta et al. (2003) tambm analisaram a interferncia da velocidade de


enchimento sobre a produtividade e rendimento do processo em batelada alimentada a
partir de experimentos realizados em laboratrio num fermentador em batelada alimentada
com diferentes tempos de enchimento e vazo de alimentao constante. Os autores
determinaram, ainda, por estes mesmos experimentos, os parmetros do modelo cintico de
Lee et al. (1983) modificado com a adio de um termo de inibio pelo substrato.
Para otimizar processos industriais em termos de concentrao de etanol, produtividade
e rendimento necessria a quantificao do comportamento dinmico do microrganismo
fermentativo em condies reais. Dentre as vrias etapas compreendidas na formulao de
um modelo matemtico a partir de um conjunto de resultados experimentais, destaca-se,
pela sua dificuldade, a de obteno dos parmetros que melhor ajustam os dados
disponveis (Augusto et al., 1994). H muita discusso a respeito de qual processo usar:
contnuo, batelada ou batelada alimentada, para estimar os parmetros do modelo cintico
da fermentao alcolica. Pertev et al. (1997) estimaram parmetros de um modelo cintico
para produo de leveduras pelo processo em batelada e batelada alimentada. Pela
diferena dos conjuntos de parmetros obtidos, estes autores concluram que os valores dos
parmetros podem mudar dependendo das condies operacionais e do tipo de processo
utilizado.
A estimativa de parmetros de modelos no estruturados, que descrevem o crescimento
microbiano, muitas vezes realizada pela fermentao contnua. Experimentos contnuos
so demorados e de natureza complexa. Ao contrrio, experimentos mais simples podem
ser alcanados com a fermentao em batelada, o que no reduz a dificuldade de estimar
os parmetros cinticos de um modelo de Monod clssico (Baltes et al., 1994). Geralmente,
um modelo cintico, estabelecido a partir de observaes experimentais em batelada,
aplicado para avaliar os perfis de concentrao de massa celular, substrato e produto para
processos fermentativos em batelada alimentada. Entretanto, o efeito da diluio causa
diferentes morfognesis (mudanas estruturais que ocorrem durante o desenvolvimento de
um organismo, rgo, ou parte dele) do microrganismo se comparado ao processo em
batelada. Por outro lado, o modelo cintico estabelecido por observaes experimentais em
batelada alimentada pode no ser adequado para predizer os perfis de concentrao para
fermentao em batelada (Wang e Sheu, 2000).
Nos modelos cinticos, pequenas variaes no valor de alguns dos parmetros podem
ocasionar uma completa distoro nos resultados. A determinao qualitativa e quantitativa
deste comportamento permite uma melhor compreenso dos mecanismos de fermentao
propostos pelo modelo, e aponta ainda os parmetros cuja variao mais sentida pelo
modelo e que, portanto, devem ser calculados com maior preciso (Aboutboul et al., 1988).
A anlise de sensibilidade paramtrica de modelos algbrico-diferenciais e a correlao
3

Captulo 1 Introduo___________________________________________________________________________________

entre os parmetros, obtida pela matriz de sensibilidade, podem produzir informaes


usadas para estimativa de parmetros, otimizao, sensibilidade do processo e
simplificao do modelo (Maly e Petzold, 1996; Sanz e Voss, 2006).
Por outro lado, a Otimizao Dinmica do Processo (POD) pode fornecer subsdios para
a anlise do processo com todas as suas implicaes e estabelecer as condies de
operao mais favorveis. Um POD formulado a partir do modelo matemtico do processo
e das restries fsicas que ele impe (Santos et al., 2005). A importncia da otimizao de
processos em batelada alimentada est crescendo com o desenvolvimento da indstria
bioqumica. Como os produtos desta indstria usualmente so caros, um pequeno aumento
no rendimento pode ter um efeito considervel no processo como um todo, e leva
maximizao de um ndice de desempenho, usualmente o produto de interesse no final do
ciclo da batelada (Palanki et al., 1993; Costa, 1996; Costa et al., 1998).
O presente trabalho apresenta um estudo da fermentao alcolica em batelada
alimentada abordando os seguintes itens:
9 A discusso a respeito da influncia das variaes na velocidade de alimentao
e nas concentraes de substrato alimentado sobre o processo;
9 A estimativa dos parmetros do modelo cintico no estruturado, apresentado
por Tosetto (2002), a partir de experimentos em batelada e batelada alimentada,
pela utilizao de um mtodo evolutivo;
9 O estudo da anlise de sensibilidade e correlao entre os parmetros do
modelo, realizado utilizando o cdigo DDASPK (Petzold et al., 2000);
9 A formulao do problema de otimizao dinmica para determinar o perfil timo
de alimentao de substrato que maximiza a produo de etanol, pela
determinao da seqncia de arcos no singulares e singulares e dos tempos
nos quais ocorre a transio entre eles, obtidos a partir de uma metodologia
proposta por Lobato (2006) que calcula a Funo Identificadora de Fases.

__________________________________________Captulo 2 Fermentao Alcolica em Batelada Alimentada

CAPTULO 2
FERMENTAO ALCOLICA EM BATELADA ALIMENTADA

2.1 Reviso Bibliogrfica


2.1.1 Processos Fermentativos
O processo descontnuo ou batelada simples o mais seguro quando se tem problemas
de manuteno e de assepsia, pois ao final de cada batelada o reator deve ser esterilizado
juntamente com o novo meio de cultura, recebendo um novo inculo que dever ser
submetido a todos os controles necessrios para assegurar a presena nica do
microrganismo desejado para o processo (Schmidell e Facciotti, 2001). Alm de menores
riscos de contaminao, este processo apresenta grande flexibilidade de operao, devido
ao fato de poder utilizar os fermentadores para a fabricao de diferentes produtos e melhor
condio de controle com relao estabilidade gentica do microrganismo. A fermentao
descontnua pode levar a baixos rendimentos e produtividades, quando o substrato
adicionado de uma s vez no incio da fermentao exerce efeitos de inibio, represso ou
desvia o metabolismo celular a produtos que no interessam (Carvalho e Sato, 2001a). O
processo em batelada muito utilizado como base para as comparaes de eficincias
atingidas com relao aos outros processos, mas a sua baixa eficincia estimula o
surgimento de formas alternativas (Schmidell e Facciotti, 2001).
O processo contnuo caracteriza-se por possuir uma alimentao contnua do meio de
cultura a uma determinada vazo, sendo o volume de reao mantido constante pela
retirada contnua de caldo fermentado (Facciotti, 2001). Vrias indstrias utilizam processos
contnuos na produo de etanol, que bem operados levam a uma maior produtividade,
porm com custos iniciais e de operao muito maiores, exigindo sistemas de controle mais
sofisticados. Alm disso, a fermentao contnua um processo que requer maior
conhecimento do comportamento do microrganismo em relao ao meio ambiente onde ele
atua. Fatores como pH, temperatura, concentraes de sacarose, etanol e biomassa e
viabilidade celular, dentre outros, influenciam na produtividade do sistema, exigindo maior
controle sobre o processo (Atala et al., 2000). Nos processos de fermentao contnuos tm
sido verificadas mutaes nas clulas das leveduras, no s de comportamento
fermentativo, como tambm relacionado s suas caractersticas genticas (Finguerut, 2005).
5

Captulo 2 Fermentao Alcolica em Batelada Alimentada_____________________________________________________

Os processos em batelada alimentada, tambm conhecidos como Melle-Boinot, tm se


mostrado eficientes e versteis na grande maioria dos processos fermentativos, inclusive
nos de fermentao alcolica. Alm de menores riscos de contaminao, este processo
apresenta grande flexibilidade de operao, por permitir a utilizao dos fermentadores para
a fabricao de diferentes produtos, pela possibilidade de realizar fases sucessivas no
mesmo recipiente, pelo controle mais estreito da estabilidade gentica do microrganismo e
pela capacidade de identificar todos os materiais relacionados quando se est
desenvolvendo um determinado lote de produto (Carvalho e Sato, 2001a). Em tais
processos, especialmente naqueles com altas densidades celulares, a produtividade alta
devido ao grande nmero de clulas viveis no meio em fermentao. A batelada
alimentada permite o controle da concentrao de acar, minimizando os efeitos de
inibio pelo substrato e permitindo a adio do mesmo nos momentos mais propcios
durante a fermentao (Mcneil e Harvey, 1990). A vazo de alimentao pode ser constante
ou variar com o tempo, e a adio de mosto pode ser de forma contnua ou intermitente.
Devido flexibilidade de utilizao de diferentes vazes de enchimento dos reatores com
meio nutriente, possvel controlar a concentrao de substrato no fermentador, de modo
que o metabolismo microbiano seja deslocado para uma determinada via metablica,
levando ao acmulo de um produto especfico (Carvalho e Sato, 2001b). possvel
trabalhar com altas concentraes de substrato, o que leva ao acrscimo da produtividade
do etanol e diminuio da quantidade de vinhaa produzida e do volume necessrio de
reatores (Impe Van et al., 1994; Queinnec e Dahhou, 1994).

2.1.2 Microrganismos da Fermentao Alcolica


De forma simplificada, a estequiometria da fermentao alcolica representada como
segue:
C6H12O6 fermentao 2C2H5OH + 2CO2

54 kcal/mol

(2.1)

Os principais microrganismos utilizados na produo de etanol correspondem aos


fungos (leveduras) e algumas bactrias. Vrios estudos relacionados com a melhoria das
caractersticas da levedura ou com o processo de produo tm sido apresentados na
literatura, com o objetivo de aumentar o rendimento e a produtividade de processos
fermentativos. Estes estudos incluem a utilizao de novas cepas de microrganismos,
mudanas na composio e concentrao de nutrientes do meio de cultura e reciclagem de
resduos (Navarro et al., 2000). As do gnero Saccharomyces so as mais utilizadas e
apresentam-se normalmente na forma unicelular e com 2 a 8 micrmetros de dimetro. A
6

__________________________________________Captulo 2 Fermentao Alcolica em Batelada Alimentada

transformao da sacarose em etanol e CO2 por essas leveduras envolve 12 reaes em


seqncia ordenada, cada qual catalisada por uma enzima especfica. Tal aparato
enzimtico est confinado no citoplasma celular, sendo, portanto, nessa regio da clula
que a fermentao alcolica se processa (Lima et al., 2001).
As leveduras S. cerevisiae so microrganismos de alta eficincia fermentativa. Este fato
tem permitido a seleo de cepas industriais com caractersticas adquiridas que as tornam
produtores superiores de etanol, mais tolerantes aos produtos da fermentao. As
constantes mudanas ambientais s quais as leveduras industriais so expostas conduzem
a diferentes composies do meio no processo de produo de etanol. Tais mudanas
incluem a temperatura, acmulo de etanol ao longo do processo, concentrao de solutos,
fora inica do meio e xidos reativos. Alm disso, toxinas no meio de cultivo como furfural e
o hidroximetilfurfural, o cido actico e fenis que aumentam pela hidrlise da hemicelulose
dos resduos, podem tambm limitar a fermentao. Garay-Arroyo e Covarrubias (2004)
comparam as habilidades de diferentes cepas de S. cerevisae, adaptadas a ambientes
industriais ou em laboratrios controlados, em tolerar as vrias condies de estresse
indicadas anteriormente.
Segundo Birck e Walker (2000), os ons magnsio tm um efeito de diminuir a
mortalidade de clulas de Saccharomyces cerevisiae devido ao efeito txico do etanol
quando em altas concentraes. Os ons magnsio atuam no microrganismo protegendo a
superfcie celular e reprimindo o estresse da biossntese de protenas. Assim, torna-se
interessante avaliar o efeito dos ons magnsio frente fermentao alcolica, utilizando-se
altas concentraes de substrato.
O comportamento dinmico da levedura S. cerevisiae CBS8066 foi estudado por
Alfenore et al. (2004) sobre diferentes condies de aerao numa faixa de concentrao de
etanol acima de 147 g/L. Para este propsito, fermentaes em batelada alimentada com ou
sem limitao de oxignio foram comparadas em termos de crescimento, formao de
etanol e subprodutos; e viabilidade celular. As fermentaes foram realizadas num
fermentador de 20 L, com a temperatura regulada em 30 C, e pH igual a 4, alm da adio
de 14% (v/v) da soluo de amnia. Estes autores observaram que a alimentao de
nutrientes e as estratgias de aerao agiram como fatores determinantes na fermentao
com alta concentrao de etanol. Os resultados obtidos se mostraram importantes na
prtica para o desenvolvimento de processos de fermentao com alta produo de etanol e
alta densidade celular, onde crucial o controle da produo de biomassa, viabilidade
celular, produo de etanol e minimizao de subprodutos.
Dentre as outras leveduras, tambm utilizadas na produo de etanol, esto as dos
gneros Kluyveromyces e Candida. Yanase et al. (2004) estudaram microorganismos
recombinantes que podem produzir etanol a partir de pentose pela introduo de enzimas
7

Captulo 2 Fermentao Alcolica em Batelada Alimentada_____________________________________________________

(que metabolizam pentose) em microrganismos que pertencem ao gnero Zymobacter os


quais naturalmente no metabolizam este tipo de substrato. Jamai et al. (2007) estudaram a
viabilidade de produzir etanol a partir de glicose pela espcie de levedura Candida tropicalis
quando as clulas esto livres ou imobilizadas em alginato de clcio, avaliando sua
habilidade em tolerar e decompor fenis e polifenis em concentraes altamente txicas.
Elas no exigem a etapa de sacarificao, sendo indicadas para a produo de
biocombustveis a partir de fontes renovveis. Ozmihci e Kargi (2007) utilizaram uma cultura
pura de Kluyveromices marxianus (DSMZ 7239) em cinco ciclos repetidos de operaes
batelada alimentada para produo de etanol a partir da soluo do p de soro de queijo. O
coeficiente de rendimento em clulas (yxs) diminuiu com o aumento do contedo de acar
alimentado devido a efeitos adversos das altas concentraes de acar. O coeficiente de
rendimento em etanol (yps) foi quase constante para as concentraes de acar alimentado
abaixo de 150 g/L, e diminuiu para concentrao de 200 g/L devido alta presso osmtica
e manuteno a altas concentraes de acar.
Com relao ao emprego de bactrias na produo de etanol, merece destaque a
espcie Zymomonas mobilis. Segundo Bai et al. (2008), a bactria Z. mobilis tem sido
intensamente estudada nos ltimos 30 anos e vrios pesquisadores a colocam como
alternativa para substituio da levedura S. cerevisae, devido s suas caractersticas
superiores como: rendimento de etanol de 97% do rendimento terico a partir da glicose
contra 93% alcanado pela levedura S. cerevisae; menor produo de biomassa e mais
carbono destinado fermentao; fluxo metablico de glicose superior (Lin e Tanaka, 2006;
Bai et al., 2008). Apesar destas vantagens to evidentes, a bactria Z. mobilis no
apropriada para a produo industrial de etanol devido ao espectro de substrato muito
restrito de somente 3 acares (D-glicose, D-frutose e sacarose); seu crescimento em
sacarose acompanhado pela formao extracelular de oligmeros de frutose e sorbitol
provocando a diminuio significativa do rendimento de etanol; ela no apropriada para a
produo de etanol a partir de materiais celulsicos; sua biomassa no aceita para uso
como alimentao animal, gerando problemas para a sua destinao; a fermentao
contnua com a espcie Z. mobilis tende a ser oscilatria, o que pode provocar o aumento
do acar residual mdio. Nos vrios estudos que tm sido publicados recentemente sobre
a fermentao com a bactria Z. mobilis, a nica fonte de carbono utilizada tem sido a
glicose e como ela suporta temperaturas maiores do que a levedura S. cerevisae, o impacto
da temperatura sobre a cintica tem sido avaliado. Nos estudos de otimizao de processos
fermentativos, a literatura demonstra que tem se aplicado mais a cintica da fermentao
com a bactria Z. mobilis do que com a levedura S. cerevisiae, mas esta bactria no
economicamente competitiva com a levedura S. cerevisae e a possibilidade de seu emprego
generalizado nas indstrias, especialmente no Brasil, ainda muito pequena.
8

__________________________________________Captulo 2 Fermentao Alcolica em Batelada Alimentada

2.1.3 Cintica da Fermentao Alcolica


A cintica da fermentao alcolica um assunto de interesse dos centros de pesquisa
especializados, tendo em vista seu potencial industrial e econmico (Lima e Marcondes,
2002). O objetivo bsico do estudo da cintica de processos microbianos quantificar as
taxas de crescimento celular, de consumo de substrato, de formao de produtos e demais
parmetros relacionados (Viegas, 2003). A complexidade da descrio cintica que
requerida e apropriada depende das situaes fsicas e da aplicao pretendida. No
possvel a formulao de um modelo que inclua todas as caractersticas e detalhes celulares
(Stremel, 2001). Os modelos cinticos normalmente usados em fermentaes podem ser
divididos em (Bailey e Ollis, 1986):
- No-estruturados e no segregados, nos quais as clulas de microrganismos so
consideradas como soluto;
- Estruturados e no segregados, onde as clulas so tratadas como seres individuais de
mltiplos componentes, porm com composio mdia semelhante;
- No-estruturados e segregados, onde as clulas so tratadas como seres individuais
distintos, porm descritos por um nico componente; e
- Estruturados e segregados, onde as clulas de microrganismos so consideradas como
indivduos distintos e formados por mltiplos componentes.
O tipo de modelo mais encontrado na literatura para descrever a fermentao alcolica
do tipo no-estruturado e no-segregado. A equao mais simples e popular para descrever
o crescimento microbiano a equao de Monod, que considera a presena de substrato
como limitante para o crescimento (Han e Levenspiel, 1988). A cintica de Monod est
apresentada na Tab 2.1, pela Eq. 2.2 e aplicvel somente quando no ocorre a presena
de produtos metablicos txicos (Luong, 1985).
Entretanto, segundo Thatipamala et al. (1992), na fermentao alcolica o rendimento de
biomassa com a levedura Saccharomyces cerevisiae diminui de 0,156 para 0,026 com o
aumento da concentrao de etanol de 0 a 107 g/L, indicando uma relao entre o
rendimento da biomassa e a inibio pelo produto. Estes autores propuseram um modelo
para representar a diminuio do rendimento da biomassa (yxs) com o aumento das
concentraes iniciais de etanol e de substrato e a diminuio da taxa de crescimento
especfico com o aumento da concentrao inicial de substrato. Foi considerado um modelo
especfico para a fase Lag e observaram experimentalmente que a inibio pelo substrato
afetou mais o rendimento em etanol do que a inibio pelo produto, por provocar a
diminuio da viabilidade celular. Observaram ainda que a fase Lag aumentou com o
aumento da concentrao inicial de substrato.

Captulo 2 Fermentao Alcolica em Batelada Alimentada_____________________________________________________

A inibio do crescimento celular devido concentrao de etanol evidenciada acima


de 15 g/L. A concentrao mxima de etanol permitida, acima da qual as clulas no
crescem, foi predita em 112 g/L. A capacidade de produo de etanol em que as clulas so
completamente inibidas foi de 115 g/L de etanol (Luong, 1985; Ferreira, 1998). Alm da
inibio provocada pela presena de etanol, outro fator a ser avaliado a limitao
relacionada ao crescimento microbiano ao substrato ou mesmo a outras substncias
presentes no meio (Han e Levenspiel, 1988). A inibio pelo substrato desativa importantes
enzimas, alm de modificar o caminho metablico que vital sobrevivncia da levedura. O
efeito inibidor provocado pelo substrato na fermentao alcolica ocorre quando a
concentrao supera 150 g/L (Thatipamala et al., 1992).
A fermentao alcolica tambm afetada pela temperatura do biorreator, onde o
rendimento alcolico maior em temperaturas mais baixas, 15C a 20C, porm apresentam
uma demora para obteno da populao mxima. Quando a temperatura no biorreator de
25C a 30C a taxa inicial de fermentao maior e a temperaturas superiores a 35C
decresce a viabilidade celular (Torija et al., 2003) e podem ocorrer perdas e contaminaes.
O intervalo de temperatura usual em indstrias de 31 a 33 C (Amorim, 2005).
Um modelo para a produo de etanol a partir de uma mistura de glicose e maltose foi
proposto por Lee et al. (1995), que incluiu um termo representando o efeito de represso da
glicose no consumo de maltose. Ferreira et al. (1998) estimaram os parmetros do modelo
cintico de Andrews, citado por Luong (1987), considerando concentraes iniciais de
substrato na faixa de 5 a 190 g/l, por meio de experimentos num reator em batelada usando
Saccharomyces cerevisiae. Barba et al. (2001) estimaram os parmetros do modelo de
crescimento para a fermentao de soro usando K. lactis por meio de experimentos em
batelada e batelada alimentada. Os dados experimentais de dois testes em batelada e os
pontos experimentais da fase batelada do teste em batelada alimentada foram utilizados
para a estimao dos parmetros. O modelo foi validado pelo experimento em batelada
alimentada.
Tosetto (2002) analisou o comportamento cintico da cepa de levedura Y904 em nove
diferentes matrias-primas provenientes de unidades produtoras de acar e lcool. Foram
estudadas as cinticas de produo de etanol, clulas e de consumo de substrato, assim
como o desempenho da cepa em cada matria-prima com relao produtividade e
rendimento em etanol. Para a avaliao cintica, foram utilizados seis modelos do tipo no
estruturado. Os que mais se adequaram aos dados experimentais, com a utilizao de um
nico substrato e concentraes iniciais de sacarose entre 150 e 190 g/L, foram os modelos
de Ghose e Thyagi (1979), com o parmetro n diferente de um, e o de Jin et al. (apud
Tosetto, 2002). Em todos os ensaios realizados, observou-se que a velocidade especfica de
produo de etanol esteve vinculada velocidade especfica de crescimento microbiano at
10

__________________________________________Captulo 2 Fermentao Alcolica em Batelada Alimentada

determinada fase da fermentao. Aps esta fase, a diminuio da velocidade de


crescimento microbiano no causou a diminuio da velocidade especfica de produo de
etanol, mostrando que as mesmas no esto mais associadas. Vasconcelos et al. (1992)
testaram dez modelos cinticos para o processo de fermentao alcolica industrial em
batelada alimentada, com vazo varivel de alimentao e reciclo do microrganismo agente
da fermentao (S. cerevisiae). Foram realizados vinte e dois ensaios experimentais na
destilaria anexa Usina Seresta AL, utilizando mosto de caldo de cana-de-acar. O
volume de operao dos fermentadores foi de aproximadamente 145.000 litros. Os autores
concluram que o modelo o qual considerou a inibio pelo produto na forma parablica, foi
o que apresentou os melhores ajustes dos resultados experimentais.
Os resultados experimentais do processo simultneo de sacarificao e fermentao de
bagao a etanol usando uma cepa recombinante S. cerevisiae YPB-G foram avaliados por
Kroumov et al. (2006) para desenvolver um modelo no estruturado de nvel bi-hierrquico.
O desenvolvimento do modelo incluiu uma aplicao da metodologia de anlise da
superfcie de resposta para avaliar os parmetros chave dos modelos cinticos e analisar a
taxa de sntese de enzimas amilolticas.
Lakana et al. (2007) utilizaram sorgo suplementado com 0,5% de sulfato de amnia
como substrato para a produo de etanol por S. cerevisiae TISTR 5048 pelo processo em
batelada e em batelada alimentada. Os autores verificaram que na fermentao em batelada
quanto maiores as concentraes de substrato, maiores as concentraes de produto, o
rendimento yps e o tempo de fermentao, e que os parmetros cinticos so dependentes
da concentrao inicial de clulas e de acar. Para a fermentao em batelada alimentada,
foi determinada a estratgia tima de alimentao de substrato, e concluiram que a
quantidade de acares totais consumida no final dos experimentos foi similar para os dois
processos, enquanto a concentrao mxima de etanol e o rendimento de etanol no
processo em batelada foram inferiores com relao ao processo em batelada alimentada.
Entretanto a produtividade foi menor no processo em batelada alimentada.
Embora o efeito de inibio pelo etanol seja considerado nos modelos do tipo Aiba, estes
modelos prevem que a concentrao de etanol pode tender a valores infinitos antes que o
crescimento celular seja completamente inibido, o que parece pouco razovel. Por outro
lado, quando a fermentao contnua de etanol operada a uma baixa taxa de diluio, e
especialmente no caso onde a concentrao de acar do meio baixa, a concentrao de
acar limitante pode no ser detectvel. Nestas condies, as taxas especficas para
crescimento celular e produo de etanol seriam nulas, o que tambm no correto, uma
vez que o meio com clulas e etanol na prtica continuamente produzido. Portanto, apesar
destes modelos serem amplamente citados na literatura desde que foram propostos, pouca
discusso tem sido feita quanto a estas inconsistncias estruturais. Bai et al. (2008)
11

Captulo 2 Fermentao Alcolica em Batelada Alimentada_____________________________________________________

discutem a carncia claramente demonstrada nos estudos publicados sobre o tema: as


equaes cinticas so restritas a faixas de validade muito estreitas e distantes das
encontradas no processo industrial; os parmetros cinticos estimados demonstram forte
correlao e no so estatisticamente tratados e poucos estudos tratam do efeito da
temperatura sobre estes modelos.
A Tab. 2.1 apresenta vrios modelos da cintica da fermentao alcolica formulados
por diversos autores considerando os efeitos inibitrios.
Tabela 2.1 - Modelos matemticos existentes para a fermentao alcolica.
Referncia

N
Eq.

Modelo

= m

Sem inibio (Monod)

s
ks + s

2.2

s
exp ( -k1 p )
ks + s
s
exp ( -k2 p )
= max
ks + s
= m

Aiba et al., 1968

=
Aiba et al., 1969

=
Ghose e Thyagi, 1979
Levenspiel, 1980

Hoppe e Hansford, 1982;


apud Gdia et al., 1988

= m

2.3
2.4

m
s
1+ p k p ks + s
max
s

2.5
2.6

1+ p k p ks + s

s
p
1
2
s + ks + s ki
p m ax

s
p
= m
1
ks + s p max
kp
s
= m
k p + p ks + s

= max

2.8

2.9

k p
s
k p + p ks + s

2.10

Lee et al.,1983
Sevely et al., 1980; apud
Dourado, 1987
Jin et al., 1981; apud
Dourado, 1987
Han e Levenspiel, 1988

s
p
x
= m
1 1
ks + s p max xmax
s kp
p
= m
1

ks + s p+ k p pmax
s
= m exp ( -k1 p - k2 s )

ks + s

s
I
= m
1
m
ks (1 - I/Imax ) + s I max

12

2.7

2.11

2.12

2.13
n

2.14

__________________________________________Captulo 2 Fermentao Alcolica em Batelada Alimentada

Continuao da Tabela 2.1

1
= m

1+ k s /s + s/k i

Andrews e
Noack

s(1+ ks/k s )
k s + s + s 2 k s

2.16

1
1+ ks /s + (s/k i ) j

2.17

= m

Webb

= m

Yano et al.

2.15

= m [exp ( -s/ki ) - exp ( -s/ks ) ]

Teissier-type

= m

Webb

Wayman e
Tseng, 1976

apud Han e
Levenspiel,
1988

Dagley e
Hinshelwood

s
exp(1,17)
s + ks (1+ k i )

2.19*

s
,s < s
ks + s

2.20

s
- ki (s - s),s > s
ks + s

2.21

s
(1 - kp)
ks + s

2.22

= m
= m

= m

Holzberg et
al.

= m - k(p - ki )

Jerusalimsky
e Neronova
Bazua e
Wilke,1977

Aboutboul et al., 1988

2.18

= m

2.23

s
ki
ks + s k i + p

2.24

0,5

p
s
= m 1
pmax k s + s
s
= m
exp(-k p p)
ks + s + s 2 k i

= max

2.25
2.26

s
exp(-k p p)
k s + s + s 2 k i

2.27

p
= m 1
pmax
s -s
= m max

smax - smin

Thatipamala et al., 1992

Andrews, 1968
Stepanova e Romanovskii,
1965
Han e Levenspiel, 1987;
apud Ferreira, 1998
Aiba et al., 1968, acoplado
ao de Edwards, 1987; apud
Ferreira, 1998
* a fora inica.

2.30

kp
s

2
k s + s + s k i k p + s

2.31

s
s
p
= m
1 1
ks + s smax pmax

= m

13

2.29

s
ks + s + s 2 k i

= m
= m

2.28

s
exp - ( k1s + k2 p )
ks + s

2.32

2.33

Captulo 2 Fermentao Alcolica em Batelada Alimentada_____________________________________________________

Continuao da Tabela 2.1

= m
Wang e Sheu , 2000

kp
s
2
k s + s + s k i k p + p + p 2 k1

2.34

k p
s
2
ks + s + s k i k p + p + p 2 k1

2.35

= max

s
p
= m
1
2
s + ks + s k i pmax

Tosetto, 2002

2.36

s
p
x
= m
1 1
2
k s + s + s k i pmax x max

Andrietta et al., 2003

2.37

A multiplicidade de modelos cinticos que descrevem o crescimento microbiano devido


ao fato destes serem construdos para uma levedura especfica, em condies
experimentais pr-definidas (Dourado et al., 1987). Alguns modelos cinticos com
aproximao convencional baseada na cintica de Michaelis-Menten, exibidos na Tab. 2.1,
possuem constantes cinticas com valores especficos apresentados pelos seus autores, de
acordo com os experimentos feitos por eles, apresentados na Tab. 2.2.
Tabela 2.2 - Parmetros cinticos dos modelos apresentados na Tab 2.1.
N
Eq.
2.3
2.4
2.5
2.6
2.7
2.8
2.9**
2.10**
2.11
2.12
2.13
2.14
2.15
2.26
2.27
2.28
2.29
2.30
2.31
2.32
2.33
2.34
2.35
2.36#
2.36#
2.37

m /
max
(1/h)

0,408
1,0
0,408
1,0
0,40
0,42
0,713
1,385
0,24
0,3
0,453
0,448
0,117
0,46
2,3
0,46
0,46
0,3
0,3
0,3052
0,3052
0,9819
2,3507
0,5
0,5
0,45

ks /ks

pmax

xmax

smax

(g/L)

(----)

(----)

0,22
0,44
0,22
0,44
0,48
0,222
0,297
1,925
1,6
5
0,22
0,2355
30
5,6
9,6
2,5
2,5
2,3156
2,3156
2,3349
7,3097
21
21
5

87
87,5
90
100
85
83,57
106,9
Smin = 150
115
85,5
88
93
90

700
330
300
-

1
0,41
1
1
0,304
1,82
1,958
2,954
0,9
0,7
2

1
0
66,8
1,877
1,4

(g/L)

(g/L)

(g/L)

ki /ki

kp /kp

k1 /k1
(L/g)

(L/g)

203,49
620
480
100
100
213,589
5759,10
10,5
15,5
42

16/55*
71,5/12,5*
2,005
7,1425
4,5
0,033
0,024
10
27,9036
252,306
-

0,016/0,028
0,06035
0,0080
41,2979
15,2430
-

0,029/0,015
0,0055
0,0280
-

(g/L)

(g/L)

k2

* Batelada/contnuo
** Mdia de 4 parmetros obtidos a 4 diferentes S0.
# A primeira linha so os parmetros estimados a partir de um meio sinttico, e a segunda linha, a partir do mel da Usina
Alvorada MG.

14

__________________________________________Captulo 2 Fermentao Alcolica em Batelada Alimentada

Diversos fatores como a evaporao e perdas do processo, adio de solues de


cidos e bases para o controle do pH, adio de antiespumante, produo de substncias
que mudam o volume do meio, crescimento celular, entre outros, podem afetar
significativamente as vrias concentraes e, consequentemente, os valores dos
parmetros calculados. O volume de biomassa no meio fermentativo, por exemplo, pode
apresentar efeitos sobre os valores dos rendimentos, eficincias, produtividades, taxas de
consumo e produo, calculados a partir das concentraes de substrato e de produto
medidas em experimentos. Borzani (2003) prope correes que consideram tal efeito nos
processos em batelada.
Apesar dos vrios trabalhos que tratam da cintica de fermentao, pouca influncia
estes tiveram sobre o arranjo das plantas industriais instaladas no Brasil. No entanto, o
projeto rigoroso de uma planta de fermentao tem que passar, obrigatoriamente, por uma
modelagem detalhada do processo, pelo uso de modelos cinticos precisos que possibilitam
a obteno de condies timas de operao. Por outro lado, a manuteno destas
condies depender da escolha de uma estratgia de controle adequada que s possvel
conhecendo-se o comportamento do processo. Isto pode ser adequadamente realizado pelo
estudo prvio de modelagem da planta e simulao em computador (Andrietta, 1994).
Com base na reviso bibliogrfica e informaes industriais, foi levantado que:
9 o processo de fermentao em batelada alimentada apresenta menores riscos de
contaminao, maior flexibilidade de operao, e controle da concentrao de
substrato no fermentador (diminui os efeitos inibitrios desfavorveis produo de
etanol) quando comparado aos processos contnuo e batelada convencional;
9 as leveduras S. cerevisiae so microrganismos de alta eficincia fermentativa, sendo
que algumas cepas industriais, com caractersticas diferenciadas, so

mais

tolerantes aos produtos da fermentao. Apesar de haver outros microrganismos que


apresentam alta eficincia fermentativa, a possibilidade de empreg-los em
indstrias, principalmente no Brasil, ainda muito pequena;
9 considerando os modelos cinticos apresentados, o modelo de Ghose e Thyagi
(1979) modificado por Tosetto (2002), que considera inibies pelo substrato e pelo
produto, descreveu adequadamente as fermentaes conduzidas em algumas
indstrias brasileiras quando comparado a outros modelos apesar dos parmetros
no terem apresentado significado fsico.
Em virtude destes fatores, o processo de fermentao alcolica em batelada alimentada
pela levedura S. cerevisiae foi escolhido como objeto de estudo no presente trabalho. O
desempenho do processo em batelada alimentada devido variao do tempo de
enchimento e da concentrao de sacarose na alimentao foi avaliado por meio da
produo de etanol, do rendimento e da produtividade. No Captulo 3 ser apresentado o
15

Captulo 2 Fermentao Alcolica em Batelada Alimentada_____________________________________________________

desenvolvimento do modelo cintico para as fermentaes em batelada e batelada


alimentada utilizando o modelo de Ghose e Thyagi (1979) considerando a potncia do termo
de inibio pelo produto diferente de 1 (Tosetto, 2002).

2.2 Materiais e Mtodos


2.2.1 Cultura e Meio
As fermentaes foram preparadas de tal forma que as condies das mesmas fossem
prximas s condies industriais.
A cepa da levedura Saccharomyces cerevisiae Y904, cedida pela MAURI (Mauri Brasil
Ind. Com. e Imp. Ltda Pederneiras, SP), foi o microrganismo utilizado neste estudo.
A composio do meio de cultivo consistiu de sacarose (acar cristal Caet Usina
Caet S.A. Conceio das Alagoas, MG) na faixa de 217,0 a 285 g/L; KH2PO4, 5 g/L;
MgSO4.7H2O, 1 g/L; NH4Cl, 5 g/L; KCl, 1 g/L; e extrato de levedura, 6 g/L.
Antes de iniciar os experimentos a quantidade de sacarose no acar comercial, igual a
98%, foi determinada por um teste enzimtico colorimtrico. Dessa forma, a medida do
acar foi corrigida para se obter a quantidade adequada de sacarose. Mesmo
considerando a pureza do acar comercial, perdas na fase de filtrao e na manipulao
da soluo de acar resultaram em alguns experimentos com concentraes de sacarose
um pouco menor.

2.2.2 Procedimento e Configurao Experimental


As fermentaes foram realizadas em um fermentador Bioflo 110 (New Brunswick
Scientific CO., NJ, USA) com volume total de 5,000 0,006 L, com mesmo volume de
trabalho (Fig. 2.1). O volume do inculo foi de 1,500 0,003 L (30% do volume total), o qual
continha aproximadamente 150 g do fermento biolgico (hidratado previamente com 500mL
de gua destilada por 50 minutos), 60,0 0,5 mL de etanol (4% do volume do inculo) e o
restante, gua destilada. Inicialmente no havia substrato no inculo (s0 = 0 g/L). A
temperatura da fermentao foi mantida a 32 0,1 C, e o pH do meio em 4,50 0,01
(corrigido apenas antes do incio das fermentaes, pela adio de uma soluo de H2SO4).
At o volume total do meio atingir 5,000 0,006 L, a agitao foi de 150 1 rpm para evitar
a formao excessiva de espuma. Depois, prosseguiu-se na forma em batelada com
agitao de 200 1 rpm at a concentrao de sacarose estar prxima a 1 g/L. Ao volume
inicial do inculo foram acrescidos 3,500 0,004 L do meio de alimentao com tempos de
16

__________________________________________Captulo 2 Fermentao Alcolica em Batelada Alimentada

enchimento de 3, 4 e 5 horas. Foram realizados nove experimentos em batelada alimentada,


variando as concentraes de substrato do meio alimentado (sF) e os tempos de enchimento
do fermentador (te). O volume do meio aumentou linearmente com o tempo, de acordo com
a Eq. 2.38:
(2.38)

v = v0 + Ft
em que v0 o volume inicial (1,5 L) e F a taxa de alimentao de substrato.

Figura 2.1 Configurao do fermentador para o experimento em batelada alimentada.

2.2.3 Mtodos Analticos


As fermentaes foram acompanhadas ao longo do tempo pelas medidas das
concentraes de substrato, de clulas e de produto, retirando-se de hora em hora uma
amostra de 35 mL, a qual era centrifugada por 6 min a 15.000 rpm. Do sobrenadante foram
analisadas as concentraes de substrato e produto, e do sedimento, a concentrao
celular.

a) Determinao da concentrao de biomassa


Para determinar a concentrao de biomassa, o sedimento celular foi lavado trs vezes
com gua destilada, transferido pela diluio com o mnimo de gua para uma placa
previamente tarada, e depois, seco em estufa a 85 C at peso constante. O valor da massa
seca foi obtido pela diferena de peso da placa (Steckelberg, 2001).

17

Captulo 2 Fermentao Alcolica em Batelada Alimentada_____________________________________________________

b) Determinao da concentrao de sacarose


A sacarose foi determinada indiretamente pela anlise de glicose. Uma alquota de 1 mL
de sobrenadante foi hidrolisada com 1 mL de HCl 2N a 67,5 C, e depois neutralizada com 3
mL de NaOH 1N. A concentrao de glicose foi medida por um teste enzimtico
colorimtrico (Kit Bioclin. Glicose Lquido Estvel. Quibasa Qumica Bsica Belo
Horizonte/MG) no qual a glicose oxidada pela glicose-oxidase produzindo perxido de
hidrognio, que em presena da peroxidase reage com a 4-aminoantipirina e fenol,
formando um cromgeno vermelho cereja cuja intensidade de cor proporcional
concentrao de glicose. Para isso, adicionou-se 20 L da amostra hidrolisada e
corretamente diluda em um tubo de ensaio com 2 mL do reativo de cor, e levou ao banhomaria por 10 min a 37 C. Em seguida, o tubo foi resfriado temperatura ambiente, a
absorbncia foi lida em espectrofotmetro a 500 nm e comparada com uma curva padro
(Apndice B.1).

c) Determinao da concentrao de lcool


O mtodo espectrofotomtrico para a determinao de teores alcolicos se baseia na
oxidao do etanol a cido actico pela reao com dicromato de potssio em meio cido. A
soluo adquire uma tonalidade verde proporcional concentrao de lcool na amostra,
possibilitando a leitura em espectrofotmetro (Steckelberg, 2001). Antes de iniciar os testes
para quantificar o etanol produzido na fermentao, colocou-se 25 mL do sobrenadante em
um balo volumtrico e acrescentou-se 50 mL de gua destilada. Esta nova soluo foi
destilada, para evitar subprodutos interferentes, e recolhido 50 mL de destilado num
erlenmeyer, que foi diludo na proporo de 1:25. Em um tubo de ensaio transferiu-se 5 mL
do destilado diludo, acrescentou-se 2 mL de gua destilada, juntamente com 2 mL do
reagente de cor. O tubo foi colocado em banho-maria na temperatura de 60C por 30
minutos, resfriado temperatura ambiente e a absorbncia lida em espectrofotmetro a 600
nm. Os valores obtidos foram comparados com uma curva padro (Apndice B.2).

2.3 Resultados e Discusses


As estimativas dos erros experimentais para as concentraes de substrato (s) e produto
(p) foram calculadas pelo desvio padro de um conjunto de 3 amostras para o substrato e 2
amostras para o produto.

18

__________________________________________Captulo 2 Fermentao Alcolica em Batelada Alimentada

Como a anlise da concentrao de biomassa ao longo da fermentao foi feita a partir


de amostras sem rplicas, a estimativa do erro experimental foi realizada pelo mtodo
descrito por Kline e McClintock (1953), sendo que o erro (eR) definido por:
2
2
R 2 R
R

eR =
e1 +
e2 + +
en

1 2
n

(2.39)

em que R a funo da concentrao de clulas (R=x=m/v). Assim 1 = m e 2 = v. O termo

en representa o erro em relao medida experimental da massa (e1 = 0,0201 g) e do


volume (e2 = 0,0005 L) da biomassa. O erro e1 foi calculado pela soma dos desvios da
medida da balana (0,0001) e da operao de separao da centrfuga (0,02; considerando
uma preciso de separao igual a 98%), o erro e2, pelo desvio da medida da proveta
utilizada para quantificar o volume (0,0005). J os erros das medidas de volume foram
considerados equivalentes aos erros dos instrumentos de medidas (provetas, bales
volumtricos, etc.). A propagao das incertezas no clculo dos rendimentos seguiu o
mtodo descrito por Lavarda (1997).
As Figs. 2.2-2.4 apresentam as variaes das concentraes de sacarose, clulas e
etanol com o tempo de fermentao para cada experimento em batelada alimentada. Nestas
figuras, observou-se que o aumento da concentrao de sacarose no meio alimentado (sF)
resultou em maior formao de produto no final da fermentao (pf), sem notvel

x (g/L)

s (g/L)

crescimento celular.
sF=218,4 g/L pf=74,3 g/L

150
120
90
60
30
0

sF=245 g/L pf= 81,8 g/L


sF=277 g/L pf= 89,2 g/L

6
t (h)

10

11

100 0

6
t (h)

10

11

6
t (h)

10

11

100
80
60
40
20

p (g/L)

80
60
40
20
0

Figura 2.2 Concentraes de sacarose, clulas e etanol para os


experimentos em batelada alimentada com te = 3 h e diferentes
concentraes de substrato alimentado.

19

Captulo 2 Fermentao Alcolica em Batelada Alimentada_____________________________________________________

sF=218 g/L pf= 77,4 g/L


150
120
90
60
30
0

sF=245 g/L pf= 84,0 g/L

x (g/L)

s (g/L)

sF=285 g/L pf= 89,2 g/L

100
80
60
40
20

p (g/L)

100

6
t (h)

10

11

6
t (h)

10

11

6
t (h)

10

11

80
60
40
20

Figura 2.3 Concentraes de sacarose, clulas e etanol para os


experimentos em batelada alimentada com te = 4 h e diferentes
concentraes de substrato alimentado.

s (g/L)

100
80
60
40
20
0

x (g/L)

sF=217 g/L

100
80
60
40
20

p (g/L)

100

pf= 77,6 g/L

sF=241,4 g/L pf= 81,2 g/L


sF=285 g/L

pf= 91,5 g/L

6
t (h)

10

11

6
t (h)

10

11

6
t (h)

10

11

80
60
40
20

Figura 2.4 Concentraes de sacarose, clulas e etanol para os


experimentos em batelada alimentada com te = 5 h e diferentes
concentraes de substrato alimentado.

20

__________________________________________Captulo 2 Fermentao Alcolica em Batelada Alimentada

Para analisar os dados experimentais, de modo que tais experimentos pudessem ser
comparados, foram consideradas as concentraes residuais de sacarose (sr) iguais a 1 g/L.
O rendimento em etanol (yps), o rendimento em clulas (yxs) e a produtividade (Qp) foram
calculados pelas Eqs. 2.40-2.42:

y ps =

p( t )v ( t ) p0 v 0
[v ( t ) v 0 ]sF + v 0 s0 v ( t )s( t )

(2.40)

y xs =

x( t )v ( t ) x 0 v 0
[v ( t ) v 0 ]sF + v 0 s0 v ( t )s( t )

(2.41)

Qp =

pf p0
tf

(2.42)

Pela anlise dos experimentos com tempo de enchimento (te) igual a 3 h, observou-se
que os rendimentos finais em etanol (yps) foram aproximadamente iguais a 0,41 get/gsac e
praticamente no variaram com o aumento da concentrao de sacarose na alimentao
(sF). Os rendimentos finais em clulas (yxs) aumentaram com o aumento de sF, mas a partir
de sF = 245 g/L, o incremento no valor de yxs foi bem menor, como pode ser visto na Fig. 2.5.
As produtividades do etanol (Qp) quase no variaram com o aumento de sF, ficando
prximas a 4,8 g/Lh.

0,030

0,46
0,45
0,44

0,020

0,43
0,015

0,42

0,010

yps (g/g)

yxs (g/g )

0,025

0,41

0,005
0,40
210 220 230 240 250 260 270 280 290
sf(g/L)

Figura 2.5 Variaes dos rendimentos em clulas () e em produto ()


com a concentrao de sacarose na alimentao para te = 3 h.

21

Captulo 2 Fermentao Alcolica em Batelada Alimentada_____________________________________________________

0,46

0,030

0,45
0,44

0,020

0,43
0,015

0,42

0,010

yps (g/g)

yxs (g/g )

0,025

0,41

0,40
0,005
210 220 230 240 250 260 270 280 290
sF(g/L)

Figura 2.6 Variaes dos rendimentos em clulas () e em produto ()


com a concentrao de sacarose na alimentao para te = 4 h.
0,030

0,46
0,45
0,44

0,020

0,43
0,015

0,42

0,010

yps (g/g)

yxs (g/g )

0,025

0,41

0,005
0,40
210 220 230 240 250 260 270 280 290
sF(g/L)

Figura 2.7 Variaes dos rendimentos em clulas () e em produto ()


com a concentrao de sacarose na alimentao para te = 5 h.

Tabela 2.3 - Resultados experimentais da fermentao em batelada alimentada para te = 3h.


s0 (g/L)
x0 (g/L)
p0 (g/L)
v0 (L)
vT (L)
F (L/h)
tf (h)
sr (g/L)
yps (g/g) final
yps (g/g) para sr = 1 g/L
yxs (g/g) final
yxs (g/g) para sr = 1 g/L
Qp (g/L h) final
Qp (g/L h) para sr = 1 g/L

sF=218,4 0,1g/L
0
96,0 2
37,42 0,01
1,500 0,003
4,966 0,006
1,155 0,004
8
0,57 0,09
0,415 0,005
0,415
0,007 0,006
0,007
4,6 0,7
4,8
22

sF=245 4 g/L
0
84,0 1
37,2 0,3
1,500 0,003
4,995 0,006
1,110 0,004
9
1,37 0,03
0,415 0,008
0,415
0,018 0,005
0,018
5,0 0,4
4,9

sF=277 3 g/L
0
86,0 1
36,39 0,01
1,500 0,003
4,998 0,006
1,166 0,004
11
2,4 0,2
0,408 0,007
0,408
0,019 0,004
0,020
4,8 0,4
4,6

__________________________________________Captulo 2 Fermentao Alcolica em Batelada Alimentada

Para os experimentos com te = 4 h, os rendimentos yps e as produtividades Qp


diminuram com o aumento de sF. Os rendimentos yxs foram prximos a 0,026 gcel/gsac para
sF = 218 e 245 g/L, diminuindo consideravelmente para sF = 285 g/L (Fig. 2.6).
Tabela 2.4 - Resultados experimentais da fermentao em batelada alimentada para te = 4h.
s0 (g/L)
x0 (g/L)
p0 (g/L)
v0 (L)
vT (L)
F (L/h)
tf (h)
sr (g/L)
yps (g/g) final
yps (g/g) para sr = 1 g/L
yxs (g/g) final
yxs (g/g) para sr = 1 g/L
Qp (g/L h) final
Qp (g/L h) para sr = 1 g/L

sF=218 2g/L
0
84,0 2
34,2 0,1
1,500 0,003
4,983 0,006
0,871 0,004
7
2,6 0,1
0,448 0,005
0,450
0,025 0,006
0,026
6,2 0,2
6,2

sF=245 4 g/L
0
84,0 1
36,7 0,1
1,500 0,003
4,988 0,006
0,872 0,004
9
1,8 0,2
0,431 0,008
0,431
0,026 0,005
0,027
5,2 0,2
5,1

sF=285 4 g/L
0
85,0 1
35,81 0,01
1,500 0,003
4,988 0,006
0,872 0,004
11
5,1 0,2
0,404 0,006
0,404
0,016 0,004
0,018
4,85 0,01
4,38

Nos experimentos com te = 5 h, os rendimentos yps e yxs diminuram com o aumento de


sF, e quando sF foi aumentada de 241,4 para 285 g/L, yps e yxs diminuram em menor
proporo (Fig. 2.7). A produtividade Qp diminuiu at sF = 241,4 g/L, e teve um aumento
para sF = 285 g/L.
Tabela 2.5 - Resultados experimentais da fermentao em batelada alimentada para te = 5h.
s0 (g/L)
x0 (g/L)
p0 (g/L)
v0 (L)
vT (L)
F (L/h)
tf (h)
sr (g/L)
yps (g/g) final
yps (g/g) para sr = 1 g/L
yxs (g/g) final
yxs (g/g) para sr = 1 g/L
Qp (g/L h) final
Qp (g/L h) para sr = 1 g/L

sF=217 1 g/L
0
88,0 2
35,17 0,01
1,500 0,003
4,986 0,006
0,660 0,004
8
0,894 0,001
0,445 0,004
0,445
0,024 0,006
0,024
5,3 0,5
5,3

sF=241,4 0,1g/L
0
83,0 1
36,71 0,01
1,500 0,003
4,987 0,006
0,668 0,004
10
0,899 0,001
0,418 0,002
0,418
0,021 0,005
0,021
4,4 0,3
4,5

sF=285 4 g/L
0
83,0 1
36,78 0,01
1,500 0,003
4,985 0,006
0,670 0,004
11
4,57 0,04
0,413 0,007
0,413
0,017 0,004
0,018
5,0 0,4
4,8

As variaes da utilizao de acar e concentrao percentual de etanol em funo da


concentrao de sacarose alimentada, para cada tempo de enchimento (te) do fermentador,
so apresentadas nas Figs. 2.8-2.10. Considerando uma concentrao residual de sacarose
23

Captulo 2 Fermentao Alcolica em Batelada Alimentada_____________________________________________________

igual a 1 g/L, quando a concentrao de sacarose na alimentao aumentou de 218 para


285 g/L, para todos os tempos de enchimento 3, 4 e 5 h, a percentagem de utilizao de
acar ficou acima de 99,5% e a concentrao percentual de etanol aumentou de 9,4% a
11,4% (v/v) para te = 3 h, de 9,9% a 11,5% (v/v) para te = 4 h, e de 9,8% a 11,8% (v/v) para
te = 5 h. Logo, a concentrao de sacarose tima na alimentao foi igual a 285 g/L para te =
5h, a qual produziu a maior concentrao percentual de etanol (11,8%, v/v).
As Figs. 2.11-2.13 apresentam as variaes da produtividade do etanol (Qe=F(pf-p0), g/h)
com a taxa inicial de adio do acar ao fermentador (Qs=FsF, g/h). A produtividade do
etanol aumentou com o aumento da taxa inicial de adio do acar para todos os tempos
de enchimento do fermentador, devido efetiva utilizao do acar com a produo
simultnea de etanol. Isto quer dizer que os efeitos de inibio do crescimento celular devido
s condies iniciais usadas na fermentao (sF e p0), no afetaram a produo de etanol de
maneira que provocasse a diminuio da produtividade. Os valores das produtividades em
etanol em g/h, como esperado (devido equao usada no clculo: Qe=F(pf-p0)), diminuram
com o aumento do tempo de enchimento, j que as vazes de alimentao so definidas
como a razo do volume do meio alimentado pelo tempo de enchimento. As taxas iniciais de
adio do acar timas foram iguais a 323,4 g/h (sF = 277 g/L), 248,4 g/h (sF = 285 g/L) e
191,1 g/h (sF = 285 g/L) para os tempos de enchimento de 3, 4 e 5 horas, nas quais foram
obtidas as maiores produtividades de etanol iguais a 62,2, 48,02 e 37,68 g/h,
respectivamente.

12

11
p (v/v)

Utilizao de sacarose (%)

100,0

99,5
10

99,0
9
210 220 230 240 250 260 270 280 290
sF(g/L)

Figura 2.8 Variaes da percentagem de utilizao do acar () e


concentrao percentual de etanol () com a concentrao de sacarose
na alimentao para te = 3 h.

24

__________________________________________Captulo 2 Fermentao Alcolica em Batelada Alimentada

12

11
p (v/v)

Utilizao de sacarose (%)

100,0

99,5
10

9
99,0
210 220 230 240 250 260 270 280 290
sF(g/L)

Figura 2.9 Variaes da percentagem de utilizao do acar () e


concentrao percentual de etanol () com a concentrao de sacarose
na alimentao para te = 4 h.
12

11
p (v/v)

Utilizao de sacarose (%)

100,0

99,5
10

99,0
9
210 220 230 240 250 260 270 280 290
sF(g/L)

Figura 2.10 Variaes da percentagem de utilizao do acar () e


concentrao percentual de etanol () com a concentrao de sacarose
na alimentao para te = 5 h.

65
60

Qe (g/h)

55
50
45
40
35
250 260 270 280 290 300 310 320 330
Qs (g/h)

Figura 2.11 Variao da produtividade de etanol com a taxa inicial de


adio do acar ao fermentador para te = 3 h.

25

Captulo 2 Fermentao Alcolica em Batelada Alimentada_____________________________________________________

50

Qp (g/h)

45

40

35

30
180

190

200

210

220

230

240

250

Qs (g/h)

Figura 2.12 Variao da produtividade de etanol com a taxa inicial de


adio do acar ao fermentador para te = 4 h.

40

Qe (g/h)

35

30

25

20
140

150

160

170

180

190

200

Qs (g/h)

Figura 2.13 Variao da produtividade de etanol com a taxa inicial de


adio do acar ao fermentador para te = 5 h.

A partir deste ponto, a apresentao dos resultados foi realizada considerando as


concentraes de sacarose na alimentao constantes e tempos de enchimento do
fermentador variveis.
As variaes dos rendimentos em clulas (yxs) e em etanol (yps) com o tempo de
enchimento so exibidas nas Figs. 2.14, 2.17 e 2.20, considerando a concentrao de
sacarose residual igual a 1 g/L. As Figs. 2.16, 2.19 e 2.22 apresentam a variao dos
rendimentos com o tempo de fermentao e com a concentrao de etanol. Observa-se
uma maior disperso dos resultados no incio da fermentao, principalmente para o
rendimento em clulas, provavelmente devido ao efeito da diluio do meio fermentativo. Na
Tab. 2.6, os rendimentos mdios so exibidos para melhor compreender as Figs. 2.16, 2.19
e 2.22.
26

__________________________________________Captulo 2 Fermentao Alcolica em Batelada Alimentada

Os rendimentos finais em clulas e em etanol, para concentraes de sacarose na


alimentao (sF) de 218 g/L, aumentaram respectivamente de 0,006 a 0,026 g/g e de 0,415
a 0,45 g/g, quando o tempo de enchimento foi aumentado de 3 para 4 horas, e em seguida
diminuram para 0,024 g/g e 0,445 g/g com te = 5h (Fig. 2.14). A produtividade do etanol
(Qp=(pf-p0)/tf, g/Lh) tambm aumentou de 4,8 a 6,2 g/Lh com o aumento do tempo de
enchimento de 3 para 4 h, e em seguida diminuiu para 5,3 g/Lh com te = 5 h (Fig. 2.15).
Pela anlise dos rendimentos em clulas e em etanol com o tempo de fermentao e com a
concentrao de etanol (Fig. 2.16), os primeiros tiveram valores maiores no tempo de
enchimento de 3 horas (yxsmdio = 0,0217), e os rendimentos em etanol tiveram valores
maiores com te igual a 5 horas (ypsmdio = 0,431). Logo, para as concentraes de sacarose
no meio alimentado prximas a 218 g/L, os tempos de enchimento favorveis foram os de 4
e 5 horas, os quais forneceram maiores resultados de produtividade e rendimentos em
etanol (em todo o tempo de fermentao), respectivamente.
Tabela 2.6 - Rendimentos mdios em etanol para cada experimento em batelada
alimentada.
sF 245 g/L
sF 285 g/L
sF 218 g/L
te (h)

ypsmdio

yxsmdio

ypsmdio

yxsmdio

ypsmdio

yxsmdio

0,405

0,0217

0,410

0,0152

0,393

0,0153

0,414

0,0178

0,413

0,0190

0,392

0,0122

0,431

0,0138

0,415

0,0154

0,405

0,0134

0,030
0,025

6,5

0,45

6,0

0,42

5,5
5,0
4,5

0,010
0,005

Qp (g/Lh)

0,43
0,015

yps (g/g)

0,44

0,020
yxs (g/g)

0,46

0,41

4,0

0,40

te (h)

te (h)

Figura 2.14 Variaes dos rendimentos em clulas ()


e em produto () com o tempo de enchimento do
fermentador (te) para os experimentos com sF 218 g/L.

27

Figura 2.15 Variao da produtividade de


etanol com o tempo de enchimento do
fermentador (te) para os experimentos com sF
218 g/L.

0,5

0,5

0,4

0,4

0,3

yxs e yps (g/g)

yxs e yps (g/g)

Captulo 2 Fermentao Alcolica em Batelada Alimentada_____________________________________________________

te = 3h
te = 4h
te = 5h
sF 218 g/L

0,2
0,1
0,0

0,3

te = 3h
te = 4h
te = 5h

0,2

sF 218 g/L

0,1

0,0
30

10

t (h)

40

50

60

70

80

90

100

p (g/L)

(a)
(b)
Figura 2.16 - Variaes dos rendimentos em clulas yxs (smbolos cheios) e em produto yps (smbolos
vazios) com o tempo de fermentao (a) e concentrao de etanol (b) para os experimentos com sF 218
g/L.

Os resultados relativos aos rendimentos e produtividade para sF prxima a 245 g/L foram
semelhantes aos resultados para sF prxima a 218 g/L. Os rendimentos em clulas e em
etanol aumentaram de 0,018 a 0,027 g/g e 0,415 a 0,431 g/g respectivamente, quando o
tempo de enchimento foi aumentado de 3 para 4 horas, e em seguida diminuram para 0,021
g/g e 0,418 g/g com te = 5h. A produtividade do etanol aumentou de 4,9 a 5,1 g/Lh com o
aumento do tempo de enchimento de 3 para 4 h, e em seguida diminuiu para 4,5 g/Lh com
te = 5 h. Pela Fig. 2.19, notou-se que os rendimentos em clulas foram realmente maiores
no tempo de enchimento igual a 4 horas em todo o tempo de fermentao (yxsmdio = 0,0190),
mas os rendimentos em etanol foram maiores em te igual a 5 horas (ypsmdio = 0,415). Assim,
os tempos de enchimento de 4 e 5 horas apresentaram resultados viveis para as
concentraes de sacarose no meio alimentado prximas a 245 g/L, a partir dos quais foram
obtidos os maiores valores de produtividade e rendimento em etanol (em todo o tempo de
fermentao), respectivamente.

28

__________________________________________Captulo 2 Fermentao Alcolica em Batelada Alimentada

0,46

0,030

0,45

0,025

0,015

0,42

0,010

Qp (g/Lh)

0,43

yps (g/g)

yxs (g/g)

6,0

0,44

0,020

0,005

6,5

5,5
5,0

0,41

4,5

0,40

4,0

te (h)

Figura 2.18 Variao da produtividade de


etanol com o tempo de enchimento do
fermentador (te) para os experimentos com sF
245 g/L.

0,5

0,5

0,4

0,4

0,3

yxs e yps (g/g)

yxs e yps (g/g)

Figura 2.17 Variaes dos rendimentos em clulas ()


e em produto () com o tempo de enchimento do
fermentador (te) para os experimentos com sF 245 g/L.

te = 3h
te = 4h
te = 5h
sF ~ 245 g/L

0,2
0,1
0,0

te (h)

0,3

te = 3h
te = 4h
te = 5h
sF ~ 245 g/L

0,2
0,1

0,0
30

10 11

t (h)

40

50

60

70

80

90

100

p (g/L)

(a)
(b)
Figura 2.19 - Variaes dos rendimentos em clulas yxs (smbolos cheios) e em produto yps (smbolos vazios)
com o tempo de fermentao (a) e concentrao de etanol (b) para os experimentos com sF 245 g/L.

Os rendimentos e a produtividade em etanol obtidos para as concentraes de sacarose


na alimentao prximas a 285 g/L diferiram dos resultados obtidos para as concentraes
prximas a 218 e 245 g/L com relao aos tempos de enchimento. Os rendimentos em
clulas e em etanol mantiveram-se prximos a 0,019 g/g e 0,406 g/g respectivamente,
quando o tempo de enchimento aumentou de 3 para 4 horas. Posteriormente, o rendimento
em etanol aumentou para 0,413 g/g e o rendimento em clulas se manteve em 0,018 g/g
com o aumento de te para 5 horas. A produtividade do etanol tambm diminuiu de 4,6 a 4,38
g/Lh com o aumento de te para 4 h, e em seguida aumentou para 4,8 g/Lh em te = 5 h. Pela
anlise dos rendimentos em clulas e em etanol com o tempo de fermentao e com a
concentrao de etanol (Fig. 2.22), os primeiros tiveram valores maiores no tempo de
29

Captulo 2 Fermentao Alcolica em Batelada Alimentada_____________________________________________________

enchimento de 3 horas (yxsmdio = 0,0153), e os segundos, no tempo de enchimento de 5


horas (ypsmdio = 0,405), como visto na anlise anterior. Logo, o tempo de enchimento timo,
para as concentraes de sacarose na alimentao prximas a 285 g/L, foi igual a 5 horas,
no qual obteve-se os maiores valores de produtividade e rendimento em etanol.

0,46

0,030

0,45

0,025

0,44

0,42

0,010

Qp (g/Lh)

0,43
0,015

5,0
yps (g/g)

yxs (g/g)

0,020

0,005

5,5

4,5

0,41

0,40

4,0

te (h)

Figura 2.21 Variao da produtividade de


etanol com o tempo de enchimento do
fermentador (te) para os experimentos com sF
285 g/L.

0,5

0,5

0,4

0,4

0,3

yxs e yps (g/g)

yxs e yps (g/g)

te (h)

Figura 2.20 Variaes dos rendimentos em clulas


() e em produto () com o tempo de enchimento do
fermentador (te) para os experimentos com sF 285
g/L.

te = 3h
te = 4h
te = 5h
sF ~ 285 g/L

0,2
0,1
0,0

0,3

te = 3h
te = 4h
te = 5h
sF ~ 285 g/L

0,2
0,1

0,0
30

9 10 11 12

t (h)

40

50

60

70

80

90

100

p (g/L)

(a)
(b)
Figura 2.22 - Variaes dos rendimentos em clulas yxs (smbolos cheios) e em produto yps (smbolos vazios)
com o tempo de fermentao (a) e concentrao de etanol (b) para os experimentos com sF 285 g/L.

Andrietta et al. (2003) estudaram a influncia da vazo de alimentao nos rendimentos


em clulas e em etanol adotando tempos de enchimento iguais a 1, 2 e 3 horas para
concentraes de sacarose na alimentao iguais a 239,4, 230,14 e 254,82 g/L
respectivamente. Tambm consideraram a concentrao de etanol no inculo prxima a 32
g/L e utilizaram o microrganismo S. cerevisiae na fermentao alcolica. Observaram que os
rendimentos em etanol diminuram de 0,378 a 0,32 g/g com o aumento do tempo de
30

__________________________________________Captulo 2 Fermentao Alcolica em Batelada Alimentada

enchimento de um fermentador de 5L, e os rendimentos em clulas variaram


significativamente (0,0257, 0,006 e 0,02 g/g). Tambm notaram que, quanto mais rpido se
alimentou o fermentador, maior foi o tempo de fermentao, e que a produtividade (Qp=(pf-

p0)/tf, 5,62, 4,77 e 4,96 g/Lh para concentrao de substrato residual igual a 1 g/L) foi pouco
afetada pela velocidade de enchimento do fermentador. Estas observaes foram diferentes
das verificadas no presente trabalho para concentraes de sacarose no meio alimentado
prximas a 245 g/L, pois os rendimentos em etanol no diminuram linearmente com o
tempo de enchimento e quanto mais rpido se alimentou o fermentador, menor foi o tempo
de fermentao. Alm disso, os rendimentos finais para tempos de enchimento entre 3 a 5
horas alcanaram valores superiores (0,413, 0,431 e 0,418 g/g) aos apresentados por
Andrietta et al. (2003) para tempos de enchimento entre 1 a 3 horas. Ambos os trabalhos
concordaram relativamente em relao produtividade ser pouco afetada pela variao dos
tempos de enchimentos. A comparao destes dois trabalhos destacou a importncia de se
estudar a influncia da variao dos tempos de enchimento para condies operacionais
especficas na fermentao, pois se notou que dependendo do tempo de enchimento, foram
obtidos melhores rendimentos em etanol.

2.4 Concluses
No presente trabalho, a partir dos experimentos em batelada alimentada, foi observado
que com o aumento da concentrao de sacarose no meio alimentado houve maior
formao de produto no final da fermentao, sem notvel crescimento celular.
Considerando a variao da concentrao de sacarose na alimentao, o tempo de
enchimento igual a 3 horas favoreceu o crescimento celular. A concentrao de sacarose
tima na alimentao foi igual a 285 g/L para te = 5h, a qual produziu a maior concentrao
de etanol (11,8%, v/v). As produtividades em g/h foram crescentes com o aumento de sF,
indicando que os efeitos de inibio do crescimento celular devido s condies iniciais
usadas na fermentao (sF e p0), no afetaram a produo de etanol de maneira que
provocasse a diminuio da produtividade. As taxas iniciais de adio do acar timas
foram iguais a 323,4 g/h (sF = 277 g/L), 248,4 g/h (sF = 285 g/L) e 191,1 g/h (sF = 285 g/L)
para os tempos de enchimento de 3, 4 e 5 horas, nas quais foram obtidas as maiores
produtividades de etanol em g/h iguais a 62,2, 48,02 e 37,68, respectivamente.
Pela anlise dos resultados, considerando a variao dos tempos de enchimento, para
as concentraes de sacarose no meio alimentado prximas a 218 e 245 g/L, os tempos de
enchimento favorveis foram os de 4 e 5 horas, os quais forneceram maiores valores de
produtividade e rendimentos em etanol (em todo o tempo de fermentao), respectivamente.
O tempo de enchimento timo, para as concentraes de sacarose na alimentao prximas
31

Captulo 2 Fermentao Alcolica em Batelada Alimentada_____________________________________________________

a 285 g/L, foi igual a 5 horas, no qual obteve-se os maiores valores de produtividade e
rendimento em etanol.
Os rendimentos em etanol no diminuram linearmente com o tempo de enchimento e
quanto mais rpido se alimentou o fermentador, menor foi o tempo de fermentao.
Verificou-se a importncia do estudo da influncia da variao dos tempos de
enchimento para condies operacionais especficas na fermentao, pois, dependendo do
tempo de enchimento, obtm-se maiores rendimentos em etanol.

32

____________________________________________________Captulo 3 Desenvolvimento do Modelo Cintico

CAPTULO 3
DESENVOLVIMENTO DO MODELO CINTICO

3.1 Reviso Bibliogrfica


O Problema de Identificao de Parmetros, ou tambm conhecido como Problema Inverso,
surge da necessidade de obteno de parmetros de modelos tericos que possam ser
utilizados para simular o comportamento do sistema para diferentes condies de operao,
evitando assim, a necessidade da realizao de experimentos (Lobato et al., 2007a).
Os Mtodos de Otimizao Clssicos ou Determinsticos se baseiam em informaes de
derivadas de primeira ou de segunda ordem para a determinao da direo de busca. A
principal vantagem desses mtodos rpida taxa de convergncia prxima ao ponto de timo
(Vanderplaats, 1999; Edgar et al., 2001). Entretanto, tais tcnicas podem apresentar algumas
dificuldades numricas e problemas de robustez relacionados com a falta de continuidade das
funes a serem otimizadas ou de suas restries, funes no convexas, multimodalidade,
necessidade de se trabalhar com valores discretos para as variveis, existncia de mnimos ou
mximos locais, alm da dificuldade de obteno de aproximaes numricas das matrizes
Jacobiana e Hessiana para problemas de alta dimenso (Vanderplaats, 1999; Edgar et al.,
2001).
Os Mtodos de Otimizao No-Determinsticos, Estocsticos ou tambm conhecidos como
Randmicos, so baseados nos processos de seleo natural da luta pela vida e da gentica
de populaes, em analogia com processos fsicos ou em abordagens puramente estruturais
(Coelho, 2003). O desenvolvimento dessa metodologia pseudo-aleatria se deu por volta de
1950 com o surgimento dos algoritmos genticos, quando bilogos utilizavam tcnicas
computacionais para a simulao de sistemas biolgicos. Mas foi somente entre 1960 e 1970,
na Universidade de Michigan sob a direo de John Holland em 1975, que iniciou o estudo de
algoritmos genticos como os conhecidos atualmente. As principais caractersticas desses
mtodos so (Vanderplaats, 1999; Edgar et al., 2001):
9 dispensam o uso de derivadas da funo para a determinao da direo de busca;
9 no investem todo o esforo computacional num nico ponto, mas sim operam sobre
uma populao de pontos, com exceo do algoritmo de Recozimento Simulado
33

Captulo 3 Desenvolvimento do Modelo Cintico_________________________________________________________________

(Metropolis et al., 1953), que trabalha com uma configurao inicial de projeto
(Coelho, 2003);
9 so mtodos reconhecidos como mtodos de busca global, isto , atravs dos
mecanismos em que esses so fundamentados, so capazes de escapar de timos
locais, o que no ocorre quando mtodos clssicos so utilizados.
Tm-se como principais desvantagens (Vanderplaats, 1999; Edgar et al., 2001, Coelho,
2003):
9 seus desempenhos variam de execuo para execuo (a menos que o mesmo
gerador de nmeros aleatrios com a mesma semente seja utilizado) pelo fato de
esses mtodos serem estocsticos;
9 so muito mais dispendiosos que os mtodos clssicos do ponto de vista do nmero
de avaliaes da funo objetivo.
As vrias tcnicas de otimizao so descritas na Fig. 3.1.
Mtodos de Otimizao

Mtodos de Otimizao Determinsticos

Mtodos de Otimizao No-Determinsticos

Mtodos Inspirados na Natureza


Mtodo Nelder-Mead
Mtodo de Powell

Busca Tabu
Baseados em
Populao

Baseados em
Ponto

Busca em malha
Colnia de Formigas

Recozimento

Evoluo Diferencial
Algoritmos Genticos
Programao Evolutiva
Enxame de Partculas
Modelo de Ciclo de Vida

Mtodo de Zero Ordem

Mtodo da Mxima Descida (Steepest Descent Method)


Mtodo da Direo Conjugada
Mtodo da Varivel Mtrica

Mtodo de Primeira Ordem

Mtodo de Newton

Mtodo de Segunda Ordem

Figura 3.1 - Classificao dos Mtodos de Otimizao (Adaptado de Vanderplaats, 1999;


Castro, 2001; Deb, 2001).
Tradicionalmente, o problema de Identificao de Parmetros tem sido tratado por tcnicas
de otimizao clssicas ou determinsticas, como nos trabalhos apresentados a seguir.
Thatipamala et al. (1992) a partir de dados experimentais obtidos pela fermentao em batelada
34

____________________________________________________Captulo 3 Desenvolvimento do Modelo Cintico

por S. cerevisiae com diferentes concentraes iniciais de substrato e produto, estimaram os


parmetros dos modelos sugeridos utilizando o algoritmo dos mnimos quadrados de
Levenberg-Marquardt. Os parmetros do modelo proposto por Lee et al. (1995) foram
estimados a partir de dados experimentais em batelada. Os coeficientes de rendimento foram
calculados diretamente pelos dados experimentais. As taxas de crescimento mximas (Gmax e
Mmax) foram determinadas por uma aproximao spline cbica suave com um esquema de
validao cruzada. As constantes de represso (ki) e Monod (kG e kM) foram determinadas por
um mtodo estatstico. Os valores das concentraes mximas de clula e etanol foram
determinados por dados experimentais prvios de culturas contnuas. Pertev et al. (1997)
reestimaram os parmetros do modelo, j anteriormente estimados por Sonnleitner and Kappeli
(1986) e Besli et al. (1995), a partir de uma tcnica de estimao de parmetros multiresposta.
O modelo foi validado com experimentos em batelada e em batelada alimentada e os
parmetros diferiram com relao ao tipo de processo e condies iniciais. Os parmetros do
modelo de Andrews (apud Luong,1987) foram ajustados no trabalho de Ferreira et al. (1998) por
uma estimao no linear pelo software STATISTICA e por mtodos grficos. Os valores dos
rendimentos yxs e yps foram considerados constantes e iguais aos mximos valores obtidos
experimentalmente.
Goswami e Srivastava (2000), a partir de dados cinticos pelo processo em batelada,
estimaram os parmetros cinticos de um modelo matemtico no estruturado, utilizando um
programa de otimizao com tcnica de regresso no linear (Bard, 1974). Tosetto (2002)
calculou os parmetros cinticos dos modelos propostos a partir de uma rotina de ajuste
desenvolvida em DELPHI 5.0 por pesquisadores da Diviso de Biotecnologia e Processos do
CPQBA/UNICAMP. Apesar do bom ajuste dos modelos de Ghose e Thyagi (1979) modificado e
de Jin et al. (apud Tosetto, 2002) com a utilizao de um nico substrato, foram observados
valores para o parmetro ks superiores ao valor do parmetro ki.
Um procedimento de identificao sistemtica dos parmetros do modelo sugerido por
Grosfils et al. (2007) combinou vrios ingredientes incluindo inicializao, uma estimativa no
linear passo a passo e reduo do modelo baseado na anlise da varincia/covarincia dos
parmetros do modelo. Popova e Boyadjiev (2007) propuseram um mtodo para resolver um
problema de identificao de parmetros para modelos multiparamtricos quando a funo dos
mnimos quadrados fosse multimodal. O uso de aproximaes polinomiais para os dados
experimentais permitiu obter valores de parmetros em equaes separadas do modelo. Assim,
propuseram uma aproximao hierrquica para identificao de parmetros usando trs nveis
hierrquicos para a obteno dos valores dos parmetros iniciais e inicializao do
35

Captulo 3 Desenvolvimento do Modelo Cintico_________________________________________________________________

procedimento de minimizao da funo dos mnimos quadrados. O melhoramento dos valores


dos parmetros iniciais nos nveis hierrquicos consecutivos conduziu ao decrscimo da
varincia do erro do modelo. Em comparao com outras investigaes, a aproximao
polinomial dos dados experimentais foi usada no apenas para a soluo das equaes
diferenciais, mas para a obteno de bons valores iniciais dos parmetros (na rea de mnimo
global) para a minimizao da funo dos mnimos quadrados. O mtodo foi testado na
modelagem do processo de fermentao para produo de cido glucnico. Os resultados
obtidos foram coerentes com os dados experimentais.
O procedimento de estimativa de parmetros para equaes diferenciais ordinrias
denominado chutes mltiplos foi revisado e descrito em detalhe por Peifer e Timmer (2007). Ao
contrrio de outras formas de estimao de parmetros em equaes diferenciais, este
procedimento no sofre muito com a atrao ao mnimo local, e a velocidade de convergncia
consideravelmente maior que os mtodos de otimizao global alcanam. Um procedimento de
regularizao para evitar a obteno de parmetros no identificveis foi includo na discusso
do chute mltiplo. Dois exemplos foram apresentados para demonstrar o desempenho deste
mtodo, um exemplo com dados simulados por um modelo que representa as oscilaes de
ons clcio no citoplasma, e outro, com dados medidos online (Swameye et al., 2003 apud
Peifer e Timmer, 2007). Destacaram tambm, a possibilidade de estender o mtodo de chute
mltiplo para a resoluo de equaes diferenciais parciais.
Drakunov e Law (2007) utilizaram uma tcnica da moderna teoria de controle, chamada
sliding mode observers para estimao de parmetros de modelos no lineares. Na teoria de
controle um observador um algoritmo usado para estimar o estado de um sistema dinmico
quando apenas algumas sadas do sistema podem ser medidas. Observadores foram
desenvolvidos e demonstrados para o modelo de Monod. O problema de clculo de um
observador no linear , em grande parte, um problema de clculo de um controle no linear,
desde que termos adicionais no modelo do sistema sejam, de fato, controles que conduzem o
estado do modelo sada medida do sistema atual. Tal controle deve ser muito robusto j que a
falta de conhecimento de alguns dos estados do sistema introduz incertezas.
Nos ltimos anos, entretanto, o uso de tcnicas no determinsticas ou o acoplamento
destas com tcnicas clssicas por um mtodo hbrido vem ganhando importncia devido
simplicidade oriunda destas metodologias evolutivas. A seguir so exibidos alguns trabalhos
que aplicam estas metodologias.
Wang e Sheu (2000) usaram simultaneamente dados experimentais de fermentaes em
batelada e batelada alimentada com a levedura S. diastaticus (LORRE 316), altamente tolerante
36

____________________________________________________Captulo 3 Desenvolvimento do Modelo Cintico

ao etanol, para estimar os parmetros do modelo cintico. O problema de estimao de


parmetros foi formulado como um problema de otimizao multi-objetivo, que por sua vez foi
convertido em um problema de mnimo-mximo. A Evoluo Diferencial Hbrida (HDE), um
algoritmo evolutivo, foi introduzido para resolver o problema de mnimo-mximo, com a
finalidade de se obter a soluo global. Como resultado, o modelo estimado pde ajustar
satisfatoriamente as duas observaes experimentais: batelada e batelada alimentada.
Wang et al. (2001) tambm aplicaram o algoritmo evolutivo HDE para estimar parmetros
cinticos de uma fermentao em batelada por S. diastaticus LORRE 316. No estudo de
Kroumov et al. (2006) o procedimento de identificao dos parmetros do modelo no linear
baseou-se na aplicao do algoritmo gentico (GA) hbrido e uma abordagem de
decomposio. A soluo tima global foi alcanada a partir do GA para 100 geraes.
Quatorze constantes cinticas e estequiomtricas foram avaliadas com sucesso para predizer
os perfis experimentais de bagao, glicose, biomassa e etanol.
Outros trabalhos como os de Silva-Neto e Soeiro (2002), Silva-Neto e Silva-Neto (2003),
Chalhoub et al. (2007), Lobato et al. (2007a) e Arruda (2008), tambm utilizaram tcnicas no
determinsticas para identificao dos parmetros de modelos.
Neste trabalho, devido s vantagens dos mtodos estocsticos mencionadas anteriormente,
ser utilizada uma tcnica no-determinstica para a estimao de parmetros cinticos dos
modelos batelada e batelada alimentada, pois como foi visto na Reviso Bibliogrfica do
Captulo 2, a depender do processo utilizado, obtm-se diferentes parmetros para o modelo
cintico. Esta estimao empregada para que estes modelos possam ser utilizados, dentro
da sua faixa de validade, para a predio de concentraes sem a necessidade da realizao
de prticas experimentais especficas para uma dada condio de operao.

3.2 Materiais e Mtodos


A Cultura e o meio, o procedimento e a configurao experimental apresentados nesta
Seo se referem aos experimentos em batelada realizados para serem utilizados na estimao
dos parmetros deste modelo.

3.2.1 Cultura e Meio


O microrganismo e a composio do meio de cultivo para a fermentao em batelada foram
os mesmos adotados nos experimentos em batelada alimentada, com exceo das
37

Captulo 3 Desenvolvimento do Modelo Cintico_________________________________________________________________

concentraes de sacarose que foram 154 2, 180,1 0,9 e 195,6 0,1 g/L para cada um dos
trs experimentos realizados.

3.2.2 Procedimento e Configurao Experimental


O procedimento e a configurao experimental tambm foram os mesmos adotados nas
fermentaes em batelada alimentada (Seo 2.2.2). Neste caso, todo o volume do meio, igual
a 3,500 0,004 L, foi adicionado ao fermentador, junto com o inculo, no incio da fermentao.
A agitao foi mantida a 200 1 rpm em todo o tempo de fermentao.

Figura 3.2 Configurao do fermentador para o experimento em batelada.

3.2.3 Mtodos Analticos


Os mtodos analticos e as estimativas dos erros experimentais so apresentados nas
Sees 2.2.3 e 2.3, respectivamente.

3.2.4 Modelos Matemticos


Os valores das variveis nas equaes que descrevem o crescimento de microrganismos, o
consumo de substrato, a formao de produto e a variao do volume do fermentador (apenas
no modelo que representa a fermentao em batelada alimentada), ao longo do tempo de
fermentao, se apresentam na forma adimensional, baseados nos trabalhos de Popova e
38

____________________________________________________Captulo 3 Desenvolvimento do Modelo Cintico

Boyadjiev (2007) e Dutta et al. (2001), onde as escalas caractersticas foram os mximos
valores experimentais das variveis de estado e do tempo (Tab. 3.1). A adimensionalizao foi
realizada com a finalidade de obter um modelo genrico que pudesse ser aplicado em
simulaes de fermentaes a partir de sua dimensionalizao pelos valores de condies
operacionais especficas, e tambm, para diminuir o esforo computacional. O modelo cintico
no estruturado apresentado nas Eqs. 3.3 e 3.22, foi desenvolvido por Ghose e Thyagi (1979) e
modificado por Tosetto (2002) e considera a inibio pelo substrato e produto. A seguir, estas
equaes so apresentadas para as fermentaes nos processos em batelada e em batelada
alimentada.
Tabela 3.1 Escalas caractersticas para a obteno dos valores adimensionais das variveis
dos modelos para as fermentaes nos processos em batelada e batelada alimentada.
Modelo para a Fermentao no Processo em Batelada
Fermentaes

xmax (g/L)

smax (g/L)

pmax (g/L)

tmax (h)

s0 = 154 g/L

29,9

154,4

74,44

s0 = 180,1 g/L

31,3

180,1

80,77

11

s0 = 195,6 g/L

29,4

195,6

82,10

11

Modelo para a Fermentao no Processo em Batelada Alimentada


Fermentaes

xmax (g/L)

smax (g/L)

pmax (g/L)

tmax (h)

vmax (L)

sF = 218 g/L e te = 3 h

96,5

218,4

74,29

4,966

sF = 218 g/L e te = 4 h

84,3

218,4

77,44

4,983

sF = 217 g/L e te = 5 h

87,5

216,6

77,57

4,986

sF = 245 g/L e te = 3 h

84,0

245,2

81,78

4,995

sF = 245 g/L e te = 4 h

83,5

244,6

84,0

4,988

sF = 241,4 g/L e te = 5 h

82,6

241,4

81,21

10

4,987

sF = 277 g/L e te = 3 h

85,9

277,4

89,16

11

4,998

sF = 285 g/L e te = 4 h

84,9

284,9

89,20

11

4,988

sF = 285 g/L e te = 5 h

82,6

285,1

91,5

11

4,985

a) Modelo para a Fermentao no Processo em Batelada

dX
= a X
d

(3.1)

S
a = max
S2
K S + S +
Ki

39

P
max

(3.2)

Captulo 3 Desenvolvimento do Modelo Cintico_________________________________________________________________

dS
1 dX
=
MS X
d
Y XS d
dP YPS dX
=
d Y XS d
x
X=
x max
s
S=
s max
p
P=
pmax

t
t max

M S = ms t max

s max
x max
s max
pmax

(3.3)

Y XS = y xs

(3.4)

YPS = y ps

(3.5)

max = m t max

(3.6)

KS =

(3.7)
(3.8)

(3.10)
(3.11)
(3.12)

ks
s max
k
Ki = i
s max
p
Pmax = m
p max

(3.13)
(3.14)
(3.15)

(3.9)

em que X a concentrao de clulas, S a concentrao de sacarose, P a concentrao de


etanol, yps o rendimento em etanol, yxs o rendimento em clulas, max a taxa especfica
mxima de crescimento celular, KS a constante de saturao para o crescimento celular, Ki a
constante de inibio do crescimento celular pelo substrato, Pmax a concentrao de produto
onde cessa o crescimento microbiano, n a potncia do termo de inibio pelo produto e MS a
constante de manuteno celular.

b) Modelo para a Fermentao no Processo em Batelada Alimentada

F
dX
= a X + a X
d
V

(3.16)

dS Fa
(SF S ) a X
=
d V

(3.17)

F
dP
= a P +aX
d
V
dV
= Fa
d
x
X=
x max

(3.18)
(3.19)
(3.20)

S
a = max
S2
K S + S +
Ki

1
a =
a + M S

Y XS
YPS
a
Y XS
s
SF = F
s max
v
V =
v max

a =

40

1 P
max

(3.21)

(3.22)
(3.23)
(3.24)
(3.25)

____________________________________________________Captulo 3 Desenvolvimento do Modelo Cintico

S=

s max
p
P=
pmax
t

t max
t max
v max
s
= y xs max
x max
s
= y ps max
pmax

(3.26)
(3.27)
(3.28)

Fa = F

(3.29)

Y XS

(3.30)

YPS

max = m t max
ks
s max
k
Ki = i
s max
p
Pmax = m
p max
KS =

M S = ms t max

(3.32)
(3.33)
(3.34)
(3.35)
(3.36)

(3.31)

em que Fa a taxa de alimentao de substrato, V o volume de trabalho do fermentador, SF, a


concentrao de substrato na alimentao.

3.2.5 Metodologia Aplicada na Estimao dos Parmetros


Para a estimao dos parmetros cinticos a partir dos experimentos em batelada e
batelada alimentada foi escolhida a Tcnica de Evoluo Diferencial (ED) proposta por Storn e
Price (1995) apresentada no Anexo, utilizada na otimizao de problemas algbricos sem
restries.
Na literatura podem ser destacadas vrias aplicaes, dentre as quais, a estimao de
parmetros cinticos no processo de fermentao (Chiou e Wang, 1999, Wang et al., 2001) e
de transferncia de calor por radiao (Lobato et al., 2007a), otimizao dinmica de um
fermentador em batelada alimentada (Kapadi e Gudi, 2004), o projeto de sistemas mecnicos
(Oliveira, 2006) e a otimizao de estruturas veiculares (Oliveira et al., 2007). No contexto da
otimizao multi-objetivo, podem-se citar: otimizao de um reator adiabtico industrial (Babu et
al., 2005), aplicao em um problema de controle timo com restrio de desigualdade e
flutuao de ndice diferencial (Lobato et al., 2007b), projeto de sistemas mecnicos (Lobato e
Steffen, 2007), estimao de parmetros cinticos e dos coeficientes de perda de calor em um
secador rotatrio (Arruda, 2008), entre outras aplicaes (Storn et al., 2005).
Neste trabalho, foi utilizada a verso implementada em ambiente Matlab por Storn e Price
(1996). O programa foi executado dez vezes para cada estimao dos parmetros com a
finalidade de obter o resultado adequado. Os limites considerados dos valores dos parmetros

41

Captulo 3 Desenvolvimento do Modelo Cintico_________________________________________________________________

foram os menores e os maiores valores dos respectivos parmetros encontrados na literatura


(Tab. 2.2), sendo que estes valores foram adimensionalizados.

3.3 Resultados e Discusses


3.3.1 Estimao dos Parmetros do Modelo para as Fermentaes em Batelada
A estimativa dos parmetros do modelo para as fermentaes em batelada foi realizada a
partir dos dados dos trs experimentos em batelada no considerando a fase Lag de 1 hora. Os
rendimentos experimentais finais em clula e em etanol foram utilizados na estimao.

a) Resultados obtidos considerando a estimao dos parmetros para cada


experimento em batelada.
Na Tab. 3.2 so apresentados as condies iniciais e os parmetros adimensionais
estimados pelo mtodo de Evoluo Diferencial com o tamanho da populao (NP) igual a 20,
estratgia sete (Anexo, Tab. 1), 200 iteraes, taxa de perturbao (TP) igual a 0,8 e
probabilidade de cruzamento (CR) igual a 0,8. E na Tab. 3.3, os mesmos dados so
apresentados na forma dimensional.
Tabela 3.2 Valores dos parmetros cinticos do modelo adimensional e condies iniciais
para a estimao dos parmetros.
Batelada 1
Batelada 2
Batelada 3
t1
0,11
0,09
0,09
S1
0,9556
0,9813
0,9326
0,8117
0,7941
0,8229
X1
P1
0,2023
0,1624
0,1848
0,8624
0,8860
0,8970
YPS
YXS
0,1698
0,1952
0,1427
Parmetros estimados
(200 iteraes)
Populao
20
20
20
Funo objetivo
0,009815
0,01477
0,02677
max
[0,001; 20]*
0,7593
1,035
0,6374
KS
[6x10-5; 0,13]
0,1
0,1013
0,1283
[0,001; 4,0]
0,9091
0,7839
0,6433
Ki
Pmax [0,8;1,62]
1,205
1,257
1,556
n
[0,1; 4,0]
0,6484
0,8103
0,7960
Ms
[1x10-6; 7,0]
0,06493
0,08304
0,02999
* Limites de pesquisa

42

____________________________________________________Captulo 3 Desenvolvimento do Modelo Cintico

Tabela 3.3 Valores dos parmetros cinticos na forma dimensional e dados experimentais.
Batelada 1
Batelada 2
Batelada 3
s0 (g/L)
154 2
180,1 0,9
195,6 0,1
x0 (g/L)
24,8 0,7
24,9 0,7
25,3 0,7
p0 (g/L)
10,56 0,01
9,506 0,001
9,506 0,001
yps (g/g)
0,416 0,005
0,397 0,006
0,376 0,004
yxs (g/g)
0,033 0,006
0,034 0,006
0,021 0,005
sr (g/L)
0,763 0,001
0,75 0,04
2,80 0,05
9
11
11
tf (h)
Parmetros estimados
m (1/h)
0,08437
0,09414
0,05794
kS (g/L)
15,44
18,25
25,10
ki (g/L)
140,4
141,2
125,86
89,65
101,5
127,8
pm (g/L)
n
0,6484
0,8103
0,7960
ms (1/h)
0,007214
0,007549
0,002726
em que yps e yxs foram calculados da seguinte forma:

y ps =

p(t) - p0
s(t) - s0

(3.37)

y xs =

x(t) - x0
s(t) - s0

(3.38)

Com o aumento da concentrao inicial de sacarose no fermentador, houve uma pequena


diminuio no rendimento em etanol. O rendimento em clula foi menor para a maior
concentrao de sacarose no incio da fermentao.
Foram obtidos diferentes conjuntos de parmetros para cada fermentao, evidenciando a
importncia das condies iniciais na identificao destes parmetros.
Pela comparao dos parmetros estimados neste trabalho (s0 = 154 e 180,1 g/L) com os
estimados no trabalho de Tosetto (2002) (s0 = 166,49 e 168,17 g/L; Tab. 2.2 - Eq. 2.36),
observou-se que os primeiros apresentaram valores de ks e ki mais coerentes com os obtidos
na literatura, isto , valores menores para ks e maiores para ki. Na expresso de Monod (Tab.
2.2 - Eq. 2.2), o valor de ks corresponde concentrao de substrato limitante quando a taxa de
crescimento especfica igual metade do seu valor. J o parmetro ki corresponde
concentrao de substrato em que se inicia a inibio pelo mesmo. Neste caso, ki no poderia
ser menor que ks.

43

Captulo 3 Desenvolvimento do Modelo Cintico_________________________________________________________________

Ferreira (1998) determinou por meio de experimentos, a mxima concentrao de etanol


acima da qual no h crescimento celular, que foi estabelecida em 115 g/L. Logo, os valores
estimados neste estudo, para a concentrao mxima de etanol (pm), foram prximos do valor
obtido experimentalmente.
Dos resultados de concentrao celular em funo do tempo (Figs. 3.8, 3.11 e 3.14), foram
determinadas as taxas especficas mximas de crescimento celular para cada experimento em
batelada, construindo-se uma curva do logaritmo neperiano da concentrao de clulas em
funo da diferena entre o tempo decorrido e o tempo da fase Lag (Tab. 3.4 e Figs. 3.4-3.6),
expressa pela Eq. 3.39. O coeficiente angular m representa a taxa especfica mxima de
crescimento e x0, a concentrao de clulas no inculo.

ln( x ) = m ( t t Lag ) + ln( x 0 )

(3.39)

Pelas Figs. 3.4-3.6, nota-se que as taxas especficas mximas de crescimento estimadas pelo
mtodo de Evoluo Diferencial so to baixas quanto s obtidas pelos resultados
experimentais. Estes resultados foram muito menores que os apresentados na Tabela 2.2 para
este parmetro. Isto ocorreu devido utilizao de altas concentraes de clulas no inculo.
Deve-se destacar que o modelo usado no trabalho de Tosetto (2002) no considerou a
constante de manuteno celular (ms), e nos experimentos utilizados para o ajuste dos
parmetros no foi considerada a presena de lcool no inculo. Estes fatores, talvez possam
explicar em parte a diferena entre os resultados obtidos.
Tabela 3.4 - Taxas especficas mximas de crescimento obtidas pelos resultados
experimentais.
Fermentaes
m (1/h)
s0 = 154 g/L

0,0273

s0 = 180,1 g/L

0,0230

s0 = 195,6 g/L

0,0206

44

____________________________________________________Captulo 3 Desenvolvimento do Modelo Cintico

3,45

ln(x) = 0,0273(t-tlag) + 3,203


R2 = 0,9373

3,4

ln(x)

3,35
3,3
3,25
3,2
3,15
0

t-tlag (h)

Figura 3.4 - Taxa especfica mxima de crescimento celular experimental


para a fermentao em batelada com s0 = 154 g/L.

3,5

ln(x)= 0,023(t-tlag) + 3,2405


2
R = 0,927

3,45

ln(x)

3,4
3,35
3,3
3,25
3,2
3,15
0

10

11

t-tlag (h)

Figura 3.5 - Taxa especfica mxima de crescimento celular experimental


para a fermentao em batelada com s0 = 180,1 g/L.

3,45
ln(x) = 0,0206(t-tlag) + 3,2058
R2 = 0,9262

3,4

ln(x)

3,35
3,3
3,25
3,2
3,15
0

10

11

t-tlag (h)
Figura 3.6 - Taxa especfica mxima de crescimento celular experimental
para a fermentao em batelada com s0 = 195,6 g/L.

45

Captulo 3 Desenvolvimento do Modelo Cintico_________________________________________________________________

As Figs. 3.7-3.15 apresentam os resultados preditos pelo modelo em batelada e os dados


experimentais, para as concentraes iniciais de sacarose iguais a 154, 180,1 e 195,6 g/L.
Considerando os erros dos resultados experimentais, o modelo proposto descreveu estes
resultados de forma satisfatria. Maiores desvios do ajuste do modelo foram observados para o
perfil de concentrao de sacarose para a fermentao em batelada com s0 = 180,1 g/L (Fig.
3.10), e perfil de concentrao de clulas para a fermentao em batelada com s0 = 195,6 g/L
(Fig. 3.14). Tais desvios explicam a diferena dos valores das funes objetivo obtidos em cada
conjunto de parmetros estimados (Tab. 3.2), j que a funo objetivo definida como a soma
dos quadrados das diferenas entre o valor estimado e o experimental de cada varivel de
estado s, x e p.

160
140
120

s (g/L)

100
80
60
40
20
0
0

10

t (h)

Figura 3.7 - Perfil da concentrao de sacarose para s0 = 154 g/L ()


Dados experimentais. () Simulado com parmetros estimados por
ED. (---) Perturbao de 5% no perfil simulado.

46

____________________________________________________Captulo 3 Desenvolvimento do Modelo Cintico

34
32

x (g/L)

30
28
26
24
22
20
0

10

t (h)

Figura 3.8 - Perfil da concentrao de clulas para s0 = 154 g/L ()


Dados experimentais. () Simulado com parmetros estimados por
ED. (---) Perturbao de 5% no perfil simulado.

100
90
80
70
p (g/L)

60
50
40
30
20
10
0
0

10

t (h)

Figura 3.9 - Perfil da concentrao de etanol para s0 = 154 g/L ()


Dados experimentais. () Simulado com parmetros estimados por
ED. (---) Perturbao de 5% no perfil simulado.

47

Captulo 3 Desenvolvimento do Modelo Cintico_________________________________________________________________

200
180
160
140
s (g/L)

120
100
80
60
40
20
0
0

10 11 12

t (h)

Figura 3.10 - Perfil da concentrao de sacarose para s0 = 180,1 g/L


() Dados experimentais. () Simulado com parmetros estimados
por ED. (---) Perturbao de 5% no perfil simulado.

34
32

x (g/L)

30
28
26
24
22
20
0

10 11 12

t (h)

Figura 3.11 - Perfil da concentrao de clulas para s0 = 180,1 g/L


() Dados experimentais. () Simulado com parmetros estimados
por ED. (---) Perturbao de 5% no perfil simulado.

48

____________________________________________________Captulo 3 Desenvolvimento do Modelo Cintico

100
90
80
70
p (g/L)

60
50
40
30
20
10
0
0

10 11 12

t (h)

Figura 3.12 - Perfil da concentrao de etanol para s0 = 180,1 g/L ()


Dados experimentais. () Simulado com parmetros estimados por
ED. (---) Perturbao de 5% no perfil simulado.

200
180
160
140
s (g/L)

120
100
80
60
40
20
0
0

10 11 12

t (h)

Figura 3.13 - Perfil da concentrao de sacarose para s0 = 195,6 g/L


() Dados experimentais. () Simulado com parmetros estimados
por ED. (---) Perturbao de 5% no perfil simulado.

49

Captulo 3 Desenvolvimento do Modelo Cintico_________________________________________________________________

34
32

x (g/L)

30
28
26
24
22
20
0

10 11 12

t (h)

Figura 3.14 - Perfil da concentrao de clulas para s0 = 195,6 g/L


() Dados experimentais. () Simulado com parmetros estimados
por ED. (---) Perturbao de 5% no perfil simulado.

100
90
80
70
p (g/L)

60
50
40
30
20
10
0
0

10 11 12

t (h)

Figura 3.15 - Perfil da concentrao de etanol para s0 = 195,6 g/L ()


Dados experimentais. () Simulado com parmetros estimados por
ED. (---) Perturbao de 5% no perfil simulado.

50

____________________________________________________Captulo 3 Desenvolvimento do Modelo Cintico

b) Resultados obtidos considerando a estimao dos parmetros para o conjunto dos


experimentos em batelada.
Como os trs conjuntos de parmetros estimados para cada batelada tiveram valores
relativamente prximos, foi feita uma estimao dos parmetros a partir de todos os trs
experimentos em batelada simultaneamente, cujos resultados no foram satisfatrios,
observados pelos grandes desvios dos perfis simulados em relao aos pontos experimentais.
Contudo, a estimativa dos parmetros a partir dos dois experimentos com as respectivas
concentraes de sacarose iniciais, 154 e 180,1 g/L, apresentou bons resultados.
Provavelmente, porque estes dois conjuntos de parmetros, obtidos anteriormente, tiveram
valores mais prximos que o conjunto de parmetros estimados pelo experimento com s0 =
195,6 g/L.
Na Tab. 3.5 esto os resultados na forma adimensional, obtidos pelo mtodo de Evoluo
Diferencial, e na forma dimensional para cada batelada.
Tabela 3.5 Parmetros estimados pelos 2 experimentos em batelada com s0 = 154 e 180,1
g/L.
Parmetros estimados na forma adimensional (250 iteraes)
Populao
20
Funo objetivo
6,0096
max
[0,0011; 22]*
1,651
KS
[3x10-5; 0,12]
0,06656
Ki
[0,0006; 4,0]
0,4425
Pmax
[0,7;1,62]
1,575
n
[0,1; 4,0]
1,952
Ms
[1x10-7; 8,0]
0,08263
Parmetros estimados na forma dimensional
s0 = 154 2 g/L
s0 = 180,1 0,9 g/L
m (1/h)
0,1835
0,1501
ks (g/L)
10,28
11,99
ki (g/L)
68,33
79,72
pm (g/L)
117,2
127,2
n
1,951
1,951
ms (1/h)
0,009181
0,007511
* Limites de pesquisa

As Figs. 3.16-3.21 apresentam os resultados simulados pelo modelo e os dados


experimentais, para as concentraes iniciais de sacarose iguais a 154 e 180,1 g/L. Pode ser
verificado por estas figuras, que o modelo proposto, considerando estes novos conjuntos de
parmetros, representou de forma satisfatria os resultados experimentais. Houve um maior
51

Captulo 3 Desenvolvimento do Modelo Cintico_________________________________________________________________

desvio do ajuste do modelo apenas para os perfis de concentrao de sacarose (Figs. 3.16 e
3.19), fato que justificou o alto valor obtido da funo objetivo (Tab.3.5).
160
140
120

s (g/L)

100
80
60
40
20
0
0

10

t (h)

Figura 3.16 Perfil da concentrao de sacarose para s0 = 154 g/L


() Dados experimentais. () Simulado com parmetros estimados
por ED a partir dos 2 experimentos em batelada com s0 = 154 e
180,1 g/L. (---) Perturbao de 5% no perfil simulado.

34
32

x (g/L)

30
28
26
24
22
20
0

10

t (h)

Figura 3.17 - Perfil da concentrao de clulas para s0 = 154 g/L ()


Dados experimentais. () Simulado com parmetros estimados por
ED a partir dos 2 experimentos em batelada com s0 = 154 e 180,1
g/L. (---) Perturbao de 5% no perfil simulado.

52

____________________________________________________Captulo 3 Desenvolvimento do Modelo Cintico

100
90
80
70
p (g/L)

60
50
40
30
20
10
0
0

10

t (h)

Figura 3.18 - Perfil da concentrao de etanol para s0 = 154 g/L ()


Dados experimentais. () Simulado com parmetros estimados por
ED a partir dos 2 experimentos em batelada com s0 = 154 e 180,1
g/L. (---) Perturbao de 5% no perfil simulado.

200
180
160
140
s (g/L)

120
100
80
60
40
20
0
0

10 11 12

t (h)

Figura 3.19 - Perfil da concentrao de sacarose para s0 = 180,1 g/L


() Dados experimentais. () Simulado com parmetros estimados
por ED a partir dos 2 experimentos em batelada com s0 = 154 e
180,1 g/L. (---) Perturbao de 5% no perfil simulado.

53

Captulo 3 Desenvolvimento do Modelo Cintico_________________________________________________________________

34
32

x (g/L)

30
28
26
24
22
20
0

10 11 12

t (h)

Figura 3.20 - Perfil da concentrao de clulas para s0 = 180,1 g/L


() Dados experimentais. () Simulado com parmetros estimados
por ED a partir dos 2 experimentos em batelada com s0 = 154 e
180,1 g/L. (---) Perturbao de 5% no perfil simulado.

100
90
80
70
p (g/L)

60
50
40
30
20
10
0
0

10 11 12

t (h)

Figura 3.21 - Perfil da concentrao de etanol para s0 = 180,1 g/L ()


Dados experimentais. () Simulado com parmetros estimados por
ED a partir dos 2 experimentos em batelada com s0 = 154 e 180,1
g/L. (---) Perturbao de 5% no perfil simulado.

54

____________________________________________________Captulo 3 Desenvolvimento do Modelo Cintico

Tanto os conjuntos de parmetros obtidos para cada experimento em batelada, quanto o


conjunto de parmetros obtidos para os dois experimentos em batelada com s0 = 154 e 180,1
g/L, foram utilizados para ajustar o modelo para o processo em batelada alimentada. Todas
essas tentativas foram sem sucesso, o que evidenciou a especificidade de cada modelo com
relao aos processos em batelada e em batelada alimentada, principalmente porque neste
ltimo houve o efeito da diluio do meio fermentativo pela alimentao de substrato, que
provocou alteraes com relao ao crescimento das clulas. Por esta razo, a estimativa dos
parmetros a partir dos experimentos em batelada alimentada foi realizada e apresentada na
Seo seguinte.

3.3.2 Estimao dos Parmetros do Modelo para as Fermentaes em Batelada


Alimentada
Os parmetros do modelo para o processo em Batelada Alimentada foram estimados a
partir dos experimentos em batelada alimentada para tempos de enchimento prximos a 5
horas, pelo fato de este ser o mais usado industrialmente (Amorim, 2005) e por ter sido o que
forneceu melhores resultados neste estudo. Os rendimentos experimentais finais em clula e
em etanol foram utilizados na estimao.

a) Resultados obtidos considerando a estimao dos parmetros para cada


experimento em batelada alimentada com te = 5h.
Na Tab. 3.6 so apresentados as condies iniciais e os parmetros adimensionais
estimados pelo mtodo de Evoluo Diferencial com NP igual a 20, estratgia sete, 200
iteraes, TP igual a 0,8 e CR igual a 0,8. E na Tab. 3.7, os mesmos dados so apresentados
na forma dimensional.

55

Captulo 3 Desenvolvimento do Modelo Cintico_________________________________________________________________

Tabela 3.6 - Condies iniciais e parmetros estimados para os experimentos em batelada


alimentada na forma adimensional.
SF = 1
SF = 1
SF = 1
S0
0
0
0
X0
1
1
1
P0
0,4534
0,4520
0,4020
V0
0,3008
0,3008
0,3009
YPS
1,242
1,242
1,287
0,05948
0,06236
0,05846
YXS
Fa
1,059
1,340
1,479
e
0,6604
0,5217
0,4727
Parmetros estimados
(200 iteraes)
Populao
20
20
20
Funo objetivo
0,003767
0,003791
0,005913
max
[0,0011; 22]*
0,2148
0,2293
0,2971
KS
[3x10-5; 0,12]
0,04802
0,04272
0,1123
Ki
[0,0006; 4,0]
3,756
2,872
1,298
Pmax [0,7;1,62]
1,62
1,6
1,575
n
[0,1; 4,0]
0,1
0,1
0,2861
Ms [1x10-7; 8,0]
0,04036
0,02724
0,02964
* Limites de pesquisa

Tabela 3.7 Condies iniciais e parmetros estimados para os experimentos em batelada


alimentada na forma dimensional.
sF=217 1 g/L
sF=241,4 0,1g/L sF=285 4 g/L
s0 (g/L)
0
0
0
x0 (g/L)
88,0 2
83,0 1
83,0 1
p0 (g/L)
35,17 0,01
36,71 0,01
36,78 0,01
v0 (L)
1,500 0,003
1,500 0,003
1,500 0,003
0,445 0,004
0,418 0,002
0,413 0,007
yps (g/g)
yxs (g/g)
0,024 0,006
0,021 0,005
0,017 0,004
F (L/h)
0,660 0,004
0,668 0,004
0,670 0,004
te (h)
5,283
5,217
5,200
Parmetros estimados
m (1/h)
0,02686
0,02293
0,02701
ks (g/L)
10,40
10,31
32,02
ki (g/L)
813,8
693,4
370,0
pm (g/L)
125,7
129,9
144,1
n
0,1
0,1
0,2861
ms (1/h)
0,005045
0,002724
0,002694
Os

conjuntos

de

parmetros

obtidos

foram

diferentes

para

cada

fermentao,

principalmente para a fermentao com sF igual a 285 g/L. Da mesma forma que os conjuntos
de parmetros estimados para o processo em batelada, os valores obtidos de ks e ki foram
fisicamente significativos. Os valores de ki foram maiores que os determinados no modelo para
o processo em batelada, e os valores de n, menores. Isto est de acordo com o processo em
56

____________________________________________________Captulo 3 Desenvolvimento do Modelo Cintico

batelada alimentada, que diminui os efeitos de inibio pelo substrato e produto. Os valores
estimados para a concentrao mxima de etanol (pm), estiveram relativamente prximos do
valor experimental obtido por Ferreira (1998).
As taxas especficas mximas de crescimento celular foram determinadas para os trs
experimentos em batelada alimentada pela inclinao da reta do logaritmo neperiano da
concentrao de clulas em funo da diferena entre o tempo da fermentao e o tempo de
enchimento (Figs. 3.22-3.24) expressa pela Eq. 3.40. O coeficiente angular m representa a
taxa especfica mxima de crescimento e x0, a concentrao de clulas no inculo.

ln( x ) = m ( t t e ) + ln( x 0 )

(3.40)

As taxas especficas mximas de crescimento celular estimadas pelo mtodo ED foram


semelhantes s determinadas pelos resultados experimentais (Figs. 3.22-3.24).

3,42

ln(x) = 0,0288(t-te) + 3,3304


2
R = 0,9099

3,4
ln(x)

3,38
3,36
3,34
3,32
3,3
0

0,5

1,5

2,5

t - te (h)

Figura 3.22 - Taxa especfica mxima de crescimento celular


experimental aps o tempo de enchimento de 5 horas para a
fermentao em batelada alimentada com sF = 217 g/L.

57

Captulo 3 Desenvolvimento do Modelo Cintico_________________________________________________________________

3,36

ln(x) = 0,0153(t-te) + 3,2781


2
R = 0,9589

ln(x)

3,33

3,3

3,27
0

t - te (h)

Figura 3.23 - Taxa especfica mxima de crescimento celular experimental


aps o tempo de enchimento de 5 horas para a fermentao em batelada
alimentada com sF = 241,4 g/L.

3,36
ln(x) = 0,0111(t-te) + 3,2739
R2 = 0,9735

ln(x)

3,34
3,32
3,3
3,28
3,26
0

t - te (h)
Figura 3.24 - Taxa especfica mxima de crescimento celular experimental
aps o tempo de enchimento de 5 horas para a fermentao em batelada
alimentada com sF = 285 g/L.

Os resultados preditos pelo modelo em batelada alimentada e os resultados experimentais


com te igual a 5 h, para as concentraes de sacarose no meio alimentado iguais a 217, 241,4 e
285 g/L, so apresentados nas Figs. 3.25-3.27. Considerando os erros dos resultados
experimentais, o modelo proposto representou satisfatoriamente estes resultados, verificado
tambm, pelos baixos valores das funes objetivo (Tab. 3.6).

58

____________________________________________________Captulo 3 Desenvolvimento do Modelo Cintico

45

100

(a)

40
35

80
70

25

x (g/L)

s (g/L)

30

20
15

60
50

10

40

30

(b)

90

85

t (h)

20

(c)

80

75

t (h)

(d)

70
4

60

v (L)

p (g/L)

65
55
50

45
2

40
35
30

t (h)

t (h)

Figura 3.25 Perfis das variveis de estado para sF = 217 g/L e te = 5 h. () Dados experimentais.
() Simulado com parmetros estimados por ED. (---) Perturbao de 5% no perfil simulado. (a)
Sacarose (b) Clulas (c) Etanol (d) Volume.

59

Captulo 3 Desenvolvimento do Modelo Cintico_________________________________________________________________

70

100

(a)

80

50

70
x (g/L)

s (g/L)

40
30
20

t (h)

10 11

20

(c)

t (h)

10 11

(d)

5
4
v (L)

p (g/L)

50

30

90
85
80
75
70
65
60
55
50
45
40
35
30

60

40

10
0

(b)

90

60

3
2

10 11

t (h)

10 11

t (h)

Figura 3.26 Perfis das variveis de estado para sF = 241,4 g/L e te = 5 h. () Dados experimentais. ()
Simulado com parmetros estimados por ED. (---) Perturbao de 5% no perfil simulado. (a) Sacarose
(b) Clulas (c) Etanol (d) Volume.

60

____________________________________________________Captulo 3 Desenvolvimento do Modelo Cintico

100

100

(a)

90
80

80

70

70
x (g/L)

s (g/L)

60
50
40
30

60
50
40

20

30

10
0

(b)

90

100

t (h)

10 11 12

20

(c)

90

t (h)

10 11 12

(d)

5
4

70
v (L)

p (g/L)

80

60

50
2

40
30

10 11 12

t (h)

10 11 12

t (h)

Figura 3.27 Perfis das variveis de estado para sF = 285 g/L e te = 5 h. () Dados experimentais. ()
Simulado com parmetros estimados por ED. (---) Perturbao de 5% no perfil simulado. (a) Sacarose
(b) Clulas (c) Etanol (d) Volume.

Para ilustrar o efeito da inibio pelo produto no crescimento celular, as variaes das taxas
especficas de crescimento e as concentraes de sacarose em funo das concentraes de
etanol foram plotadas nas Figs. 3.28-3.30. Para isso, utilizou-se a Eq. 3.21 com os parmetros
estimados da Tab. 3.7 para cada fermentao com tempo de enchimento igual a 5 horas. Foi
observado que medida que a concentrao de etanol aumentou at o tempo de enchimento
ser alcanado, a taxa especfica de crescimento celular aumentou. Aps o tempo de
enchimento, com o aumento da concentrao de lcool, a taxa especfica de crescimento
diminuiu. Ou seja, o perfil da taxa especfica de crescimento celular foi semelhante ao da
concentrao de sacarose em funo do produto formado. Tambm observou-se que com o
aumento da concentrao de sacarose na alimentao, o valor da taxa especfica de
crescimento diminuiu, evidenciando a presena da inibio pelo substrato.
61

Captulo 3 Desenvolvimento do Modelo Cintico_________________________________________________________________

0,0225

40

0,0200

35

0,0175

30
25

0,0125

20

0,0100

15

0,0075

s (g/L)

(1/h)

0,0150

10

0,0050

0,0025
0,0000
30

35

40

45

50

55

60

65

70

75

0
80

p (g/L)

Figura 3.28 - () Taxa de crescimento especfico e () concentrao de


sacarose em funo da concentrao de etanol para a fermentao em
batelada alimentada com te = 5 h e sF = 217 g/L.

0,020

70

0,018

60

0,016

(1/h)

0,012

40

0,010
30

0,008
0,006

20

0,004

10

0,002
0,000

s (g/L)

50

0,014

0
30 35 40 45 50 55 60 65 70 75 80 85 90

p (g/L)

Figura 3.29 - () Taxa de crescimento especfico e () concentrao de


sacarose em funo da concentrao de etanol para a fermentao em
batelada alimentada com te = 5 h e sF = 241,4 g/L.

62

____________________________________________________Captulo 3 Desenvolvimento do Modelo Cintico

0,016

100

0,014

90
80
70

0,010

60

0,008

50

0,006

40

s (g/L)

(1/h)

0,012

30

0,004

20

0,002

10

0,000
30

40

50

60

70

80

90

0
100

p (g/L)

Figura 3.30 - () Taxa de crescimento especfico e () concentrao de


sacarose em funo da concentrao de etanol para a fermentao em
batelada alimentada com te = 5 h e sF = 285 g/L.

b) Resultados obtidos considerando a estimao dos parmetros para cada


experimento em batelada alimentada com sF 245 g/L.
Com base nos experimentos em batelada alimentada com concentraes de substrato na
alimentao prximas a 245 g/L, os parmetros cinticos foram determinados para cada
fermentao com tempos de enchimento de 3, 4 e 5 horas. As condies iniciais e os
parmetros estimados por ED na forma adimensional so apresentados na Tab. 3.8. E na Tab.
3.9, os mesmos dados so exibidos na forma dimensional.
Pelos dados exibidos na Tab. 3.9, observou-se que os valores dos parmetros estimados
para cada fermentao foram muito semelhantes, com exceo da constante de saturao para
o crescimento celular (ks). Este fato revela que a variao do tempo de enchimento no tem
tanta influncia na estimativa dos parmetros, como a variao da concentrao de sacarose
na alimentao.
No trabalho de Andrietta et al. (2003) foi realizada a estimativa dos parmetros para cada
experimento em batelada alimentada com tempos de enchimento iguais a 1, 2 e 3, horas para
concentraes de sacarose na alimentao prximas a 245 g/L. Utilizaram o modelo cintico
representado na Eq. 2.37 da Tab. 2.1. Tambm observaram que a variao do tempo de
enchimento tem pouca influncia na estimativa dos parmetros cinticos. O conjunto de
parmetros obtidos para cada experimento foi idntico, com exceo da mxima concentrao
63

Captulo 3 Desenvolvimento do Modelo Cintico_________________________________________________________________

de produto (Pmax). O modelo proposto se ajustou adequadamente aos dados experimentais,


exceto para o perfil de concentrao celular, que exibiu um desvio razovel.
Tabela 3.8 Condies iniciais e parmetros estimados para os experimentos em batelada
alimentada para sF 245 g/L na forma adimensional.
te = 0,4
te = 0,5217
te = 0,350
S0
0
0
0
X0
1
1
1
P0
0,4546
0,4372
0,4520
V0
0,3003
0,3007
0,3008
YPS
1,244
1,256
1,242
YXS
0,05336
0,07495
0,06236
1,999
1,573
1,340
Fa
Parmetros estimados
Populao
20
20
20
Funo objetivo
0,01373
0,006555
0,003791
max
[0,0011; 22]*
0,2037
0,2780
0,2293
KS
[3x10-5; 0,12]
0,07
0,07
0,04272
Ki
[0,0006; 4,0]
3,0
3,0
2,872
Pmax [0,7;1,62]
1,6
1,55
1,6
n
[0,1; 4,0]
0,1
0,1
0,1
Ms
[1x10-7; 8,0]
0,02872
0,04431
0,02724
* Limites de pesquisa

Tabela 3.9 Condies iniciais e parmetros estimados para os experimentos em batelada


alimentada para sF 245 g/L na forma dimensional.
te = 4 (h)
te = 5,217 (h)
te = 3,15 (h)
s0 (g/L)
0
0
0
x0 (g/L)
84,0 1
84,0 1
83,0 1
37,2 0,3
36,7 0,1
36,71 0,01
p0 (g/L)
v0 (L)
1,500 0,003
1,500 0,003
1,500 0,003
yps (g/g)
0,415 0,008
0,431 0,008
0,418 0,002
0,018 0,005
0,026 0,005
0,021 0,005
yxs (g/g)
F (L/h)
1,110 0,004
0,872 0,004
0,668 0,004
Parmetros estimados
m (1/h)
0,02263
0,03088
0,02293
ks (g/L)
17,16
17,12
10,31
ki (g/L)
735,6
733,8
693,4
pm (g/L)
130,8
130,2
129,9
n
0,1
0,1
0,1
ms (1/h)
0,003191
0,004923
0,002724
As Figs. 3.31, 3.32 e 3.26 apresentam os resultados simulados pelo modelo e os resultados
experimentais, para cada tempo de enchimento com sF prxima a 245 g/L. Destas figuras
observou-se que o modelo utilizado representou de forma satisfatria os resultados
experimentais. O perfil de concentrao de sacarose mostrou um maior desvio do ajuste do
64

____________________________________________________Captulo 3 Desenvolvimento do Modelo Cintico

modelo para os tempos de enchimento de 3 e 4 horas (Figs. 3.31-a e 3.32-a), observado


tambm pelos maiores valores das funes objetivo relativas a essas estimativas (Tab. 3.8).

110

100

(a)

100
80

80

70

70

60

x (g/L)

s (g/L)

90

50
40

60
50

30

40

20

30

10

90
85
80
75
70
65
60
55
50
45
40
35
30

t (h)

20

10

(c)

t (h)

10

(d)

5
4
v (L)

p (g/L)

(b)

90

3
2

10

10

t (h)

t (h)

Figura 3.31 Perfis das variveis de estado para sF = 245 g/L e te = 3 h. () Dados experimentais. ()
Simulado com parmetros estimados por ED. (---) Perturbao de 5% no perfil simulado. (a) Sacarose (b)
Clulas (c) Etanol (d) Volume.

65

Captulo 3 Desenvolvimento do Modelo Cintico_________________________________________________________________

90

100

(a)

80
70

80
70

50

x (g/L)

s (g/L)

60

40
30

t (h)

10

20

(c)

t (h)

10

(d)

5
4
v (L)

p (g/L)

50

30

10

90
85
80
75
70
65
60
55
50
45
40
35
30

60

40

20

(b)

90

3
2

10

t (h)

10

t (h)

Figura 3.32 Perfis das variveis de estado para sF = 245 g/L e te = 4 h. () Dados experimentais. ()
Simulado com parmetros estimados por ED. (---) Perturbao de 5% no perfil simulado. (a) Sacarose (b)
Clulas (c) Etanol (d) Volume.

c) Resultados obtidos considerando a estimao dos parmetros para o conjunto de


experimentos em batelada alimentada com te = 5h.
Com a finalidade de obter um conjunto de parmetros adimensionais que representasse as
fermentaes em batelada alimentada para toda a faixa de sF em te igual a 5 horas, a estimativa
dos parmetros foi realizada a partir de todos os trs experimentos em batelada alimentada. Na
Tab. 3.10 esto os resultados na forma adimensional, obtidos por ED, e na forma dimensional
para cada experimento.

66

____________________________________________________Captulo 3 Desenvolvimento do Modelo Cintico

Tabela 3.10 Parmetros estimados considerando os trs experimentos em batelada


alimentada para te = 5h.
Parmetros estimados na forma adimensional (200 iteraes)
Populao
20
Funo objetivo
0,03298
max
[0,0011; 22]*
0,3085
[3x10-5; 0,12]
0,1059
KS
Ki
[0,0006; 4,0]
0,6918
Pmax [0,7;1,62]
1,612
n
[0,1; 4,0]
0,1
Ms [1x10-7; 8,0]
0,04258
Parmetros estimados na forma dimensional
sF=217 1 g/L sF=241,4 0,1g/L sF=285 4 g/L
m (1/h)
0,03856
0,03085
0,02805
ks (g/L)
22,94
25,56
30,19
ki (g/L)
149,9
167,0
197,2
pm (g/L)
125,0
130,9
147,5
n
0,1
0,1
0,1
ms (1/h)
0,005322
0,004258
0,003871
* Limites de pesquisa

As Figs. 3.33-3.35 mostram o ajuste do modelo aos resultados experimentais para as


concentraes de sacarose na alimentao iguais a 217, 241,4 e 285 g/L com tempo de
enchimento de 5 horas. Por meio destas figuras verificou-se que o novo modelo proposto
representou adequadamente os resultados experimentais. Maiores desvios do ajuste do modelo
foram observados nos perfis de concentraes de sacarose e de etanol, para sF iguais a 241,4
e 285 g/L (Figs. 3.34-a e 3.35-a), que resultou em uma funo objetivo maior que as respectivas
estimativas dos parmetros para cada experimento (Tab. 3.6).

67

Captulo 3 Desenvolvimento do Modelo Cintico_________________________________________________________________

45

100

(a)

40
35

80
70

25

x (g/L)

s (g/L)

30

20
15

60
50

10

40

30

(b)

90

85

t (h)

20

(c)

80

75

t (h)

(d)

70
4

60

v (L)

p (g/L)

65
55
50

45
2

40
35
30

t (h)

t (h)

Figura 3.33 Perfis das variveis de estado para sF = 217 g/L e te = 5 h. () Dados experimentais. ()
Simulado com parmetros estimados por ED pelos trs experimentos em batelada alimentada com te =
5h. (---) Perturbao de 5% no perfil simulado. (a) Sacarose (b) Clulas (c) Etanol (d) Volume.

68

____________________________________________________Captulo 3 Desenvolvimento do Modelo Cintico

70

100

(a)

80

50

70
x (g/L)

s (g/L)

40
30
20

50

30
0

t (h)

10 11

20

(c)

t (h)

10 11

(d)

5
4
v (L)

p (g/L)

90
85
80
75
70
65
60
55
50
45
40
35
30

60

40

10
0

(b)

90

60

3
2

10 11

t (h)

10 11

t (h)

Figura 3.34 Perfis das variveis de estado para sF = 241,4 g/L e te = 5 h. () Dados experimentais. ()
Simulado com parmetros estimados por ED pelos trs experimentos em batelada alimentada com te =
5h. (---) Perturbao de 5% no perfil simulado. (a) Sacarose (b) Clulas (c) Etanol (d) Volume.

69

Captulo 3 Desenvolvimento do Modelo Cintico_________________________________________________________________

100

100

(a)

90
80

80

70

70
x (g/L)

s (g/L)

60
50
40
30

60
50
40

20

30

10
0

(b)

90

100

t (h)

10 11 12

20

(c)

90

t (h)

10 11 12

(d)

5
4

70
v (L)

p (g/L)

80

60

50
2

40
30

10 11 12

t (h)

10 11 12

t (h)

Figura 3.35 Perfis das variveis de estado para sF = 285 g/L e te = 5 h. () Dados experimentais. ()
Simulado com parmetros estimados por ED pelos trs experimentos em batelada alimentada com te =
5h. (---) Perturbao de 5% no perfil simulado. (a) Sacarose (b) Clulas (c) Etanol (d) Volume.

3.4 Concluses
Na estimao dos parmetros do modelo para a fermentao em batelada utilizando os
resultados de cada experimento, foram obtidos diferentes conjuntos de parmetros para cada
fermentao, evidenciando a importncia das condies iniciais na identificao destes
parmetros. Os valores dos parmetros ks e ki foram coerentes com os seus significados
fsicos. Os valores estimados para a concentrao mxima de etanol foram relativamente
prximos do valor obtido experimentalmente. As taxas especficas mximas de crescimento
estimadas foram to baixas quanto s obtidas pelos resultados experimentais. Considerando os
erros dos resultados experimentais, o modelo proposto descreveu de forma satisfatria estes
resultados.
A estimativa dos parmetros do modelo para a fermentao em batelada a partir dos dados
dos trs experimentos em batelada no apresentou bons resultados, ao contrrio da estimativa
70

____________________________________________________Captulo 3 Desenvolvimento do Modelo Cintico

dos parmetros a partir dos dois experimentos, com s0 = 154 e 180,1 g/L. Verificou-se que o
modelo proposto com estes novos conjuntos de parmetros representou de forma satisfatria
aos dados experimentais. Os conjuntos de parmetros obtidos para cada batelada e obtidos
para as duas bateladas com s0 = 154 e 180,1 g/L, foram utilizados para ajustar o modelo para a
fermentao em batelada alimentada, mas houve um desvio muito grande em relao aos
valores experimentais. Isto pode ter ocorrido pelo fato de no modelo para o processo em
batelada alimentada haver o efeito da diluio do meio que provoca alteraes no crescimento
das clulas. Por esta razo, foi realizada a estimativa dos parmetros a partir dos experimentos
em batelada alimentada.
Os conjuntos de parmetros do modelo para a fermentao em batelada alimentada
estimados a partir de cada experimento com tempo de enchimento de 5 horas, foram diferentes
para cada fermentao, principalmente para a fermentao com sF igual a 285 g/L. Do mesmo
modo que os conjuntos de parmetros estimados no modelo para o processo em batelada, os
valores obtidos de ks e ki foram fisicamente significativos. Os valores de ki foram maiores que os
determinados para o modelo da fermentao em batelada, e os valores de n, menores, fato que
est de acordo com o processo em batelada alimentada, que diminui os efeitos de inibio pelo
substrato e produto. A partir desta observao, seria interessante empregar outro tipo de
modelo que no considere os efeitos de inibio pelo substrato e pelo produto, e verificar se ele
representa de forma adequada tais experimentos em batelada alimentada. Os valores
estimados para a concentrao mxima de etanol estiveram relativamente prximos do valor
experimental. As taxas especficas mximas de crescimento celular estimadas foram
semelhantes s obtidas pelos resultados experimentais. Considerando os erros dos resultados
experimentais, o modelo proposto descreveu adequadamente estes resultados, verificado
tambm, pelos baixos valores das funes objetivo.
Os valores dos parmetros estimados para cada fermentao do processo em batelada
alimentada com concentraes de substrato na alimentao prximas a 245 g/L e te igual a 3, 4
e 5 horas foram muito semelhantes, com exceo da constante de saturao para o
crescimento celular, indicando que a variao do tempo de enchimento no influencia tanto na
estimativa dos parmetros, como a variao da concentrao de sacarose na alimentao.
Foi realizada a estimativa dos parmetros a partir de todos os trs experimentos em
batelada alimentada, com a finalidade de obter um conjunto de parmetros adimensionais que
representasse as fermentaes para toda a faixa de sF (217-285 g/L) em te igual a 5 horas. O
novo modelo proposto representou adequadamente os resultados experimentais.

71

____________________________________________________Captulo 4 Anlise de Sensibilidade Paramtrica

CAPTULO 4
ANLISE DE SENSIBILIDADE PARAMTRICA
4.1 Reviso Bibliogrfica
A anlise de sensibilidade paramtrica associada avaliao da correlao entre os
parmetros fornece um procedimento sistemtico para estimar a preciso e robustez de um
modelo matemtico. As matrizes de sensibilidade, que so derivadas parciais das variveis do
processo com relao aos parmetros do modelo, so de grande importncia na anlise da
incerteza, estimao de parmetros e otimizao, anlise de dados experimentais e
discriminao de modelos (Wang e Sheu, 2000; Sanz e Voss, 2006). Segundo Shen (2006),
para usar um mtodo de otimizao com a finalidade de estimar parmetros de um modelo no
linear, importante saber se os parmetros do modelo podem ser estimados baseados nas
observaes disponveis, a unicidade dos parmetros, e o quanto o erro est associado com o
parmetro estimado. Estas questes esto relacionadas identificao paramtrica, a qual
pode ser inferida pela anlise de sensibilidade paramtrica.
Lee et al. (1995), por meio de perturbaes nas constantes de Monod para glicose (kG) e
maltose (kM), e na constante de represso (ki) do modelo proposto, observaram que uma
mudana da ordem de 10% nestes trs parmetros no causa efeitos significantes no ajuste
dos dados. Pelo mtodo de anlise de sensibilidade paramtrica, Pertev et al. (1997) avaliaram
a influncia dos parmetros do modelo com os respectivos valores obtidos da literatura, e
apenas os que mais influenciaram na produo de biomassa, foram novamente estimados. A
taxa de alimentao tima para a fermentao em batelada alimentada e a anlise de
sensibilidade paramtrica foram aplicadas para avaliar o ajuste do modelo estimado por Wang e
Sheu (2000). Um mtodo de colocao modificado (Shiue et al., 1995) foi aplicado para resolver
as equaes da matriz de sensibilidade. As sensibilidades da massa celular, glicose e etanol
em relao ao coeficiente da taxa especfica de crescimento (max) e coeficiente da taxa
especfica de formao de produto (max) foram mais significativas que os outros parmetros.
Alm disto, as sensibilidades em relao a max para os processos em batelada alimentada
foram mais significativas se comparadas aos dos processos em batelada.

A anlise de

sensibilidade paramtrica do modelo utilizado por Goswami e Srivastava (2000) baseada no


mtodo de Votruba (1982) apresentou que a taxa de consumo de substrato especfica mxima
73

Captulo 4 Anlise de Sensibilidade Paramtrica_________________________________________________________________

e a constante de manuteno de energia foram os parmetros mais sensveis. Dutta et al.


(2001) analisaram a sensibilidade dos parmetros de um sistema bioqumico para determinar a
priori, um regime parametricamente sensvel. Tal anlise de sensibilidade, feita durante a fase
exponencial do crescimento microbiolgico, seguiu o mtodo de Morbidelli e Varma (1989),
Chemburkar et al. (1986) e Tambe et al. (1991). Um reator aerbico para degradao de fenol
sem controle de pH utilizando uma populao mista, foi escolhido como o sistema
representativo. Sensibilidades normalizadas do pH mnimo foram determinadas com relao a
diversas variveis de entrada. Tambm determinaram pontos crticos nos quais o sistema se
mostrou simultaneamente sensvel a todos os parmetros de entrada.
O trabalho de Stigter e Keesman (2004) incluiu a sensibilidade paramtrica no lao de
controle para estimativa de um conjunto de parmetros em um experimento. O mtodo foi
demonstrado para um caso de estudo de um biorreator batelada alimentada para estimativa
tima da constante de saturao kS e do parmetro combinado maxx/y em que y o coeficiente
de rendimento e x a concentrao celular. O controlador de sensibilidade paramtrica resultante
para o parmetro kS foi utilizado em dois experimentos seqenciais usando uma estratgia de
controle bang-bang-singular. As somas dos pesos das sensibilidades ao quadrado para ambos
os parmetros foram comparadas com os casos individuais onde somente uma sensibilidade de
sada paramtrica especfica foi controlada. A incerteza paramtrica foi abordada de uma forma
completamente determinstica como a obteno de uma lei de controle que maximiza a
sensibilidade paramtrica de sada.
Sanz e Voss (2006) avaliaram a habilidade que a modelagem inversa tem de determinar os
verdadeiros parmetros do modelo de Henry para a intruso da gua do mar, pela seleo dos
parmetros independentes a partir da anlise de covarincia obtida pela matriz de sensibilidade.
Para estudar o valor de vrios tipos e locais de dados de campo em situaes de intruso da
gua do mar, foi empregado o clculo de redes para a estimao dos parmetros, reduzindo a
varincia e a correlao dos parmetros estimados, dependendo da forma de distribuio do
erro considerada. Segundo estes autores, problemas inversos podem apresentar pobre
convergncia de estimao e soluo no nica, especialmente quando h a tentativa de
estimar muitos parmetros ou parmetros correlacionados. A reduo do nmero de
parmetros a serem estimados parece ser uma estratgia efetiva desde que fornea clculos
mais prticos, reduzindo o tempo computacional requerido.
Nenhuma aproximao para a seleo de um conjunto de parmetros a serem estimados
rigorosa. Na verdade, qualquer aproximao arbitrria. Todas as aproximaes podem ser
discutidas e discordadas com quem as realiza, do mesmo modo que o conjunto de parmetros
74

____________________________________________________Captulo 4 Anlise de Sensibilidade Paramtrica

selecionados para estimao depende das introspeces e das preferncias de quem pratica. O
uso da lgica baseada na fsica e das anlises de covarincia e correlao recomendado. A
anlise de covarincia e correlao para um conjunto de parmetros a serem estimados deve
ser sempre realizada, independente do processo de estimao, usando os melhores valores
dos parmetros estimados. Esta anlise indica quais os parmetros so independentes e quais
so co-dependentes no controle da fsica do sistema (parmetros co-dependentes no podem
ser calculados simultaneamente). O processo de reduo dos parmetros pode ser aplicado
num procedimento passo a passo. Primeiro elimina-se diversos parmetros, ento a re-anlise
de covarincia e correlao realizada, e possivelmente o conjunto de parmetros reduzido
novamente. Mesmo quando um modelo inverso converge, a estimativa dos parmetros pode
estar incorreta. Correlaes muito altas (prximas a 1) podem indicar que isto ocorreu (Sanz e
Voss, 2006).
Ateno especial deve ser dada na seleo dos pesos por terem forte influncia na
estimativa dos parmetros e suas estatsticas. Os pesos no so apenas selecionados para
reduzir a influncia das observaes com o maior erro da medida, como usualmente feito para
dados de campo, mas para equilibrar a contribuio de diferentes tipos de dados (tal como
presso e concentrao) na regresso e ao menos em parte, um processo subjetivo (Sanz e
Voss, 2006).
Com base no que foi apresentado, foram realizadas a anlise de sensibilidade e a
correlao dos parmetros estimados para ambos os modelos das fermentaes, em batelada
e em batelada alimentada, por meio das metodologias apresentadas a seguir.

4.2 Anlise de Sensibilidade Paramtrica


Segundo Maly e Petzold (1996), considere o sistema geral de Equaes AlgbricoDiferenciais (EADs) dado por F(t, y, y, pa) = 0, y(0) = y0, onde y \ ny e pa \ np . Aqui, ny e
npa so a dimenso e o nmero de parmetros do sistema de EADs original, respectivamente. A
anlise de sensibilidade implica encontrar a derivada do sistema acima com relao a cada
parmetro. Isto produz um nmero adicional de equaes de sensibilidade ns=npany que, junto
com o sistema original resultam em:

F (t , y , y , pa ) = 0
F
F
F
sei +
sei +
= 0 , i = 1,..., n pa ,
pa i
y
y

(4.1)

75

Captulo 4 Anlise de Sensibilidade Paramtrica_________________________________________________________________

em que sei = dy/dpai. Definindo Y = [y, se1, ..., senpa ]T e

F = F(t,y,pa), F se1 + F se1 + F ,..., F sen + F sen + F


pa
pa
y
y
pa1
y
y
panpa

(4.2)

o sistema combinado pode ser reescrito como

F ( t,Y,Y ,pa ) = 0,Y(0) = y 0 , dy 0 ,..., dy 0


dpanpa
dpa1

(4.3)

As condies iniciais para este sistema de EADs devem ser consistentes.


Aproximando a soluo do sistema combinado por um mtodo numrico, por exemplo, o
mtodo de Euler implcito com passo h, tem-se o sistema no linear:

Yn +1 Yn

, pa = 0
G(Yn +1 ) = F t n +1 ,Yn +1 ,
h

(4.4)

O mtodo de Newton para o sistema no linear produz a iterao:

-1
(k )
Yn(+k1+1 ) = Yn(+k1) - J G Yn+1 ,

(4.5)

J1
J = J2

#
J
np

(4.6)

em que

J=

J
0
#
0

% %

" 0 J

J
J
1 F F
+
,J i =
se i +
.
y
pa i
h y y

(4.7)

Um nmero de cdigos de Equaes Diferenciais Ordinrias (EDOs) e EADs resolvem o


sistema de sensibilidade (Eq. 4.1). Se as matrizes de derivadas parciais no esto disponveis
analiticamente, elas so aproximadas por diferenas finitas. O sistema no linear usualmente
resolvido por um esquema escalonado, onde o primeiro bloco resolvido para as variveis de

76

____________________________________________________Captulo 4 Anlise de Sensibilidade Paramtrica

estado y pelo mtodo de Newton, e assim o sistema linear do bloco diagonal para as
sensibilidades se resolvido em cada passo de tempo.
O cdigo DDASPK (Petzold et al., 2000) calcula a sensibilidade da soluo y com relao a
perturbaes nos parmetros pa, pela resoluo de um sistema de EADs da forma F(t, y, y, pa)
= 0, usando uma combinao de mtodos de frmula de diferenciao a r (BDF) e uma
escolha de dois mtodos de soluo de sistema linear: direto (denso ou bandado) ou Krylov
(iterativo). A classe de problemas que DDASPK pode resolver inclui EADs de ndice 0, 1 e
ndice 2 de Hessenberg. Este cdigo, utilizado para resolver as equaes das matrizes de
sensibilidade dos parmetros estimados por Evoluo Diferencial, foi executado pelo programa
Compaq Visual Fortran 6.6.0.

4.3 Estimativa da Correlao entre os Parmetros


O mtodo apresentado nesta seo, baseado no trabalho de Sanz e Voss (2006), associa a
anlise de sensibilidade paramtrica com a anlise estatstica pela varincia e correlao.
A correlao entre os parmetros uma medida que indica quanto um parmetro, da
mesma forma (ou de forma oposta) que outro, afeta o valor de uma varivel observada. Mesmo
parmetros que so aparentemente independentes em um modelo, podem mudar as variveis
observadas de uma forma similar, e assim, exibir alguma correlao, a qual nunca pode ser
maior do que +1 ou menor do que -1.
A correlao entre dois parmetros bi e bJ, pode ser definida como:

cor ( bi , bJ ) =

cov( b )iJ
[cov( b )ii cov( b )JJ ]

(4.8)

em que cov(b) uma matriz de covarincia NxN originada da matriz de sensibilidade (se), e N
o nmero total de parmetros estimados.

cov( b ) = 2 ( seT se ) 1

(4.9)

Nesta relao, b o vetor que contm os valores dos parmetros cujas sensibilidades so
avaliadas, 2 a varincia dos erros nas observaes e a matriz de pesos. A covarincia
pode ser calculada a partir da Eq. 4.9, fornecidas as sensibilidades. As varincias dos
parmetros estimados so os termos ao longo da diagonal, cov(b)ii.

77

Captulo 4 Anlise de Sensibilidade Paramtrica_________________________________________________________________

A sensibilidade (seiJ) do valor simulado (yi) associado com a i-sima observao e em


relao a um determinado parmetro (bJ), expressa como:

seiJ =

y i
bJ

(4.10)

O par de parmetros max e KS foi usado como exemplo na matriz de sensibilidade


apresentada abaixo.

X 1

max
X 2
max
se = X 3

max
#
X n

max

X 1
K S

X 2
K S
X 3

K S
#
X n

K S

(4.11)

Neste caso, X o valor simulado. O ndice n o nmero de observaes.


Convm destacar aqui que as sensibilidades de um determinado parmetro dependem dos
valores dos outros parmetros. Assim, se a correlao de pares de parmetros for analisada a
partir do resultado da matriz de sensibilidade para cada varivel observada, quando cor(bi,bJ)
for:
9 igual a zero os parmetros no esto correlacionados;
9 positiva os parmetros esto correlacionados de forma semelhante (se ocorre
um aumento no valor de um parmetro, o outro tambm ir aumentar), e afetam o
valor das variveis observadas de forma contrria;
9 negativa os parmetros esto correlacionados de forma contrria (se ocorre um
aumento no valor de um parmetro, o outro ir diminuir), e afetam de forma
semelhante o valor das variveis observadas;
9 igual a +1 os parmetros tm o mesmo efeito um sobre o outro de forma
proporcional (se ocorre um aumento no valor de um parmetro, o outro tambm ir
aumentar na mesma proporo);
9 igual a -1 os parmetros tm efeitos diferentes um sobre o outro de forma
proporcional (se ocorre um aumento no valor de um parmetro, o outro ir diminuir
na mesma proporo);
78

____________________________________________________Captulo 4 Anlise de Sensibilidade Paramtrica

Segundo Sanz e Voss (2006), o par de parmetros altamente correlacionados devem ser
combinados em um mesmo parmetro, o qual posteriormente ser estimado.

4.4. Resultados e Discusses


4.4.1. Anlise de Sensibilidade Paramtrica
Nesta seo, as matrizes de sensibilidade paramtrica foram avaliadas, baseadas nos
parmetros adimensionais max, KS, Ki, Pmax, n e MS estimados anteriormente para os
experimentos em batelada e batelada alimentada (te = 5 h), com a finalidade de comparar o
efeito da variao destes parmetros sobre os diferentes modelos. No programa principal do
cdigo DDASPK foram definidas:
as dimenses:
ny = 3 nmero de variveis de estado no modelo para a fermentao em
batelada dadas por concentraes de clulas (y1), sacarose (y2) e etanol (y3);
ny = 4 nmero de variveis de estado no modelo para a fermentao em
batelada alimentada, dadas por concentraes de clulas (y1), sacarose (y2) e
etanol (y3) e do volume (y4);
npa = 6 (nmero de parmetros).
o nmero de equaes do sistema:
(NEQ = ny * (npa+1)) = 21 (modelo para a fermentao em batelada);
(NEQ = ny * (npa+1)) = 28 (modelo para a fermentao em batelada alimentada);
as tolerncias ao erro:
absoluta (ATOL) = 10-6
relativa (RTOL) = 10-6, as quais definem a preciso da soluo.
Tambm foram definidos as equaes adimensionais dos modelos, o valor estimado de seus
parmetros, as condies iniciais das variveis de estado e o intervalo de tempo.
Os perfis de sensibilidade das concentraes de clulas, sacarose e etanol, relacionados
aos parmetros dos modelos, so apresentados nas Figs. 4.1-4.9. As sensibilidades das
concentraes de clulas, sacarose e etanol com relao constante de saturao para o
crescimento celular (KS) e a taxa especfica mxima de crescimento celular (max) foram mais
significantes que os demais parmetros, principalmente no modelo para o processo em
batelada alimentada para os perfis de sacarose (Figs. 4.1, 4.4 e 4.7) e etanol (Figs. 4.3, 4.6 e

79

Captulo 4 Anlise de Sensibilidade Paramtrica_________________________________________________________________

4.9). Isto quer dizer que uma mnima perturbao no valor destes parmetros causa uma
grande alterao no valor destas variveis de estado.
A influncia de KS aumentou medida que o substrato foi consumido. Pela equao de
Monod ( = ms/(ks+s), dimensional) para altas concentraes de substrato, tem-se s ks + s e,
portanto, esta relao se aproxima de = m. O fato de KS ter tido maior influncia no modelo
com a diminuio da concentrao de substrato, mostrou que este parmetro pode ser
interpretado como uma limitao taxa de crescimento celular pela baixa concentrao de
substrato disponvel s clulas.
O efeito da taxa especfica mxima de crescimento celular (max) foi acentuado porque este
parmetro estabelece um limite para a velocidade do processo fermentativo. Logo, quando este
parmetro foi variado, ocorreram alteraes significativas nos perfis de concentraes ao longo
do tempo de fermentao. Nos trabalhos de Aboutboul (1988), Ferreira (1998), Wang e Sheu
(2000) e Goswami e Srivastava (2000), a taxa especfica mxima de crescimento celular (max)
foi o parmetro que teve mais influncia nos perfis das variveis de estado dos modelos
propostos.
A constante de manuteno celular (MS) teve maior significncia, principalmente quando a
concentrao de sacarose diminuiu, para os perfis das concentraes de clulas e etanol no
modelo batelada, o que refletiu a necessidade de mais nutrientes pelas clulas. Goswami e
Srivastava (2000) apresentaram que MS tambm foi um dos parmetros mais sensveis do
modelo estudado por eles.
A potncia do termo de inibio pelo produto (n) teve maior influncia no tempo final, onde a
concentrao de produto foi mais acentuada. O efeito deste parmetro nas variveis de estado
foi semelhante nos dois modelos para as fermentaes em batelada e batelada alimentada,
com exceo do perfil de concentrao celular, que apresentou ser mais sensvel no modelo
para a fermentao em batelada.
A sensibilidade da soluo y com relao a perturbaes na concentrao de produto onde
cessa o crescimento microbiano (Pmax) foi relativamente pequena ao longo do tempo. Alm
disso, Pmax teve maior influncia no final, quando a concentrao de etanol foi mais acentuada.
A constante de inibio do crescimento celular por substrato Ki influiu mais acentuadamente
quando a concentrao de substrato esteve alta, ou seja, no incio da fermentao e para
maiores valores de concentrao inicial de substrato (S0) no modelo batelada, como pode ser
visto na Figs. 4.7-4.9. Aboutboul (1988) sups que a sensibilidade do modelo frente a este
parmetro fosse maior, num momento em que nenhum outro efeito de inibio ou saturao
estivesse atuando.
80

____________________________________________________Captulo 4 Anlise de Sensibilidade Paramtrica

Os parmetros Pmax e Ki praticamente no tiveram efeito sobre os perfis de concentraes


de sacarose, clulas e etanol no modelo para o processo em batelada alimentada.
A sensibilidade para a concentrao de clulas para todos os casos, com relao s
perturbaes nos parmetros foi bem menor se comparada s concentraes de sacarose e
etanol. O perfil de sacarose foi mais influenciado pelas alteraes nos parmetros do modelo
para o processo em batelada. Por outro lado, o perfil de etanol apresentou ser mais sensvel
aos parmetros do modelo para o processo em batelada alimentada.
Outra observao a ser feita a partir das figuras de sensibilidade, so as descontinuidades
apresentadas nos perfis de sensibilidade para o modelo da fermentao em batelada
alimentada, principalmente para max e KS, no momento em que cessa a alimentao do meio
ao fermentador (processo passa a ser em batelada).

dS/dmax
dS/dKs
dS/dKi
dS/dPmax
dS/dn
dS/dMs

2,5

Sensibilidade de dS/dpa

2,0
1,5
1,0
0,5
0,0
-0,5
-1,0
-1,5
-2,0
-2,5
0,0

0,2

0,4

0,6

0,8

1,0

Figura 4.1 - Perfil de sensibilidade da concentrao de sacarose em relao aos


parmetros do modelo para as fermentaes () em batelada com s0 = 154 g/L e
(---) em batelada alimentada com sF = 217 g/L e te = 5h.

81

Captulo 4 Anlise de Sensibilidade Paramtrica_________________________________________________________________

dX/dmax
dX/dKs
dX/dKi
dX/dPmax
dX/dn
dX/dMs

0,15

Sensibilidade de dX/dpa

0,10
0,05
0,00
-0,05
-0,10
-0,15
-0,20
0,0

0,2

0,4

0,6

0,8

1,0

t (h)

Figura 4.2 - Perfil de sensibilidade da concentrao de clulas em relao aos


parmetros do modelo para as fermentaes () em batelada com s0 = 154 g/L
e (---) em batelada alimentada com sF = 217 g/L e te = 5h.

dP/dmax
dP/dKs
dP/dKi
dP/dPmax
dP/dn
dP/dMs

2,5

Sensibilidade de dP/dpa

2,0
1,5
1,0
0,5
0,0
-0,5
-1,0
-1,5
-2,0
-2,5
0,0

0,2

0,4

0,6

0,8

1,0

Figura 4.3 - Perfil de sensibilidade da concentrao de etanol em relao aos


parmetros do modelo para as fermentaes () em batelada com s0 = 154 g/L
e (---) em batelada alimentada com sF = 217 g/L e te = 5h.

82

____________________________________________________Captulo 4 Anlise de Sensibilidade Paramtrica

dS/dmax
dS/dKs
dS/dKi
dS/dPmax
dS/dn
dS/dMs

2,5

Sensibilidade de dS/dpa

2,0
1,5
1,0
0,5
0,0
-0,5
-1,0
-1,5
-2,0
-2,5
0,0

0,2

0,4

0,6

0,8

1,0

Figura 4.4 - Perfil de sensibilidade da concentrao de sacarose em relao aos


parmetros do modelo para as fermentaes () em batelada com s0 = 180,1
g/L e (---) em batelada alimentada com sF = 241,4 g/L e te = 5h.

0,20

dX/dmax
dX/dKs
dX/dKi
dX/dPmax
dX/dn
dX/dMs

Sensibilidade de dX/dpa

0,15
0,10
0,05
0,00
-0,05
-0,10
-0,15
-0,20
0,0

0,2

0,4

0,6

0,8

1,0

Figura 4.5 - Perfil de sensibilidade da concentrao de clulas em relao aos


parmetros do modelo para as fermentaes () em batelada com s0 = 180,1
g/L e (---) em batelada alimentada com sF = 241,4 g/L e te = 5h.

83

Captulo 4 Anlise de Sensibilidade Paramtrica_________________________________________________________________

dP/dmax
dP/dKs
dP/dKi
dP/dPmax
dP/dn
dP/dMs

Sensibilidade de dP/dpa

2
1
0
-1
-2
-3
0,0

0,2

0,4

0,6

0,8

1,0

Figura 4.6 - Perfil de sensibilidade da concentrao de etanol em relao aos


parmetros do modelo para as fermentaes () em batelada com s0 = 180,1
g/L e (---) em batelada alimentada com sF = 241,4 g/L e te = 5h.

dS/dmax
dS/dKs
dS/dKi
dS/dPmax
dS/dn
dS/dMs

1,5

Sensibilidade de dS/dpi

1,0
0,5
0,0
-0,5
-1,0
-1,5
0,0

0,2

0,4

0,6

0,8

1,0

Figura 4.7 - Perfil de sensibilidade da concentrao de sacarose em relao


aos parmetros do modelo para as fermentaes () em batelada com s0 =
195,6 g/L e (---) em batelada alimentada com sF = 285 g/L e te = 5h.

84

____________________________________________________Captulo 4 Anlise de Sensibilidade Paramtrica

dX/dmax
dX/dKs
dX/dKi
dX/dPmax
dX/dn
dX/dMs

0,15

Sensibilidade de dX/dpa

0,10
0,05
0,00
-0,05
-0,10
-0,15
0,0

0,2

0,4

0,6

0,8

1,0

Figura 4.8 - Perfil de sensibilidade da concentrao de clulas em relao aos


parmetros do modelo para as fermentaes () em batelada com s0 = 195,6
g/L e (---) em batelada alimentada com sF = 285 g/L e te = 5h.

dP/dmax
dP/dKs
dP/dKi
dP/dPmax
dP/dn
dP/dMs

2,0

Sensibilidade de dP/dpa

1,5
1,0
0,5
0,0
-0,5
-1,0
-1,5
-2,0
0,0

0,2

0,4

0,6

0,8

1,0

Figura 4.9 - Perfil de sensibilidade da concentrao de etanol em relao aos


parmetros do modelo para as fermentaes () em batelada com s0 = 195,6
g/L e (---) em batelada alimentada com sF = 285 g/L e te = 5h.

85

Captulo 4 Anlise de Sensibilidade Paramtrica_________________________________________________________________

Como pode ser observado a partir das Figs. 4.1-4.9, o sinal de sensibilidade pode ser
positivo ou negativo. Quando um coeficiente de sensibilidade positivo um aumento no
parmetro do modelo conduz a um aumento na varivel de estado correspondente, e quando
negativo, ocorre o contrrio (Zanfir e Gavriilidis, 2002). Por exemplo, considerando a
sensibilidade da concentrao de clulas (Figs. 4.2, 4.5 e 4.8), um aumento apenas nos valores
dos parmetros KS e n, provoca uma diminuio na concentrao de clulas, pois um alto valor
de KS indica que h pouco substrato disponvel s clulas, e um alto valor de n indica que h
maior inibio do crescimento pela formao de produto. Ao contrrio, um aumento nos valores
dos parmetros max, Ki e Pmax causa um aumento na concentrao de clulas, pois valores
altos destes parmetros indicam respectivamente, maior crescimento celular, menor inibio
pelo substrato e, menor inibio pelo produto.

4.4.2 Correlao dos Parmetros


Pela anlise de todos os casos estudados no item anterior, observou-se que a sensibilidade
paramtrica teve comportamento semelhante para cada modelo, para as fermentaes em
batelada e em batelada alimentada. Por esta razo, os modelos para as fermentaes em
batelada com s0 = 154 g/L e em batelada alimentada com sF = 217 g/L foram selecionados para
estudar as correlaes entre seus parmetros e compar-las.
As correlaes dos parmetros foram obtidas diretamente das matrizes de covarincia de
acordo com a Eq. 4.8, considerando a varincia (2) igual a um, pois este dado no interfere no
clculo da correlao especificamente. Os pesos () tambm foram considerados iguais a um.
Os resultados so apresentados nas Tabs. 4.1 e 4.2 considerando a combinao dos pares
de parmetros dos modelos para os processos em batelada e em batelada alimentada para
cada varivel observada (concentraes de sacarose, clulas e etanol). As correlaes obtidas
foram consistentes, no valor e sinal, com a posio dos parmetros nas Eqs. 3.2, 3.9 e 3.17 dos
modelos. As Figuras de sensibilidade 4.1-4.3 explicam as correlaes entre os parmetros.
A maioria dos pares de parmetros, tanto os do modelo para o processo em batelada
quanto os do modelo para o processo em batelada alimentada, exibiram altas correlaes. Os
pares de parmetros do modelo para o processo em batelada alimentada exibiram correlaes
ainda maiores, com exceo apenas para KS e Pmax, KS e n, e Pmax e MS (para a varivel
observada S), que tiveram correlaes um pouco menores.
Os parmetros max e KS nas Figs. 4.1-4.3, por exemplo, apresentaram perfis semelhantes
e sinais opostos para todas as variveis S, X e P e tipos de modelo (indicando uma correlao

86

____________________________________________________Captulo 4 Anlise de Sensibilidade Paramtrica

positiva), e Ki e Pmax apresentaram perfis semelhantes e sinais iguais (indicando uma correlao
negativa).
Os pares de parmetros max, KS, Ki, Pmax e n com MS exibiram menores correlaes para as
concentraes de clulas e etanol (Tabs. 4.1 e 4.2). Para a concentrao de sacarose, as
correlaes foram muito maiores. Este fato foi consistente com as Figs. 4.2 e 4.3 em relao
X e P, nas quais o par max e MS por exemplo, exibiram perfis diferentes, indicando baixa
correlao. J na Fig. 4.1, em relao concentrao de sacarose, estes parmetros
apresentaram perfis muito semelhantes, indicando alta correlao. Isto tambm pde ser
explicado pela localizao destes parmetros nas equaes do modelo. A constante de
manuteno celular (MS) esteve presente apenas na equao relacionada ao consumo de
substrato (Eqs. 3.3 e 3.17), por isso os parmetros da expresso da taxa especfica de
crescimento celular (Eq. 3.2 e 3.21) apresentam maior correlao com Ms para a varivel S.

Tabela 4.1 Correlaes dos pares de parmetros do modelo batelada com s0 = 154 g/L.
S
max
KS
Ki
Pmax
n
Ms

max
1,0

KS
0,94
1,0

Ki
-0,99
0,88
1,0

Pmax
-0,93
1,0
-0,88
1,0

n
0,97
-0,99
0,92
0,99
1,0

Ms
-0,97
0,98
-0,93
-0,99
0,99
1,0

X
max
KS
Ki
Pmax
n
Ms

max
1,0

KS
0,94
1,0

Ki
-0,99
0,88
1,0

P
max
KS
Ki
Pmax
n
Ms

max
1,0

KS
0,94
1,0

Ki
-0,99
0,88
1,0

Pmax
-0,93
1,0
-0,88
1,0

n
0,96
-0,99
0,92
0,99
1,0

Ms
0,15
-0,24
0,097
0,31
-0,25
1,0

87

Pmax
-0,93
1,0
-0,88
1,0

n
0,96
-0,99
0,92
0,99
1,0

Ms
0,15
-0,24
0,097
0,31
-0,25
1,0

Captulo 4 Anlise de Sensibilidade Paramtrica_________________________________________________________________

Tabela 4.2 Correlaes dos pares de parmetros do modelo batelada alimentada com sF =
217 g/L.
S
max
KS
Ki
Pmax
n
Ms

max
1,0

KS
0,99
1,0

Ki
-0,99
0,98
1,0

Pmax
-0,99
0,98
-0,99
1,0

n
0,99
-0,98
0,99
1,0
1,0

Ms
-1,0
1,0
-0,99
-0,98
0,99
1,0

X
max
KS
Ki
Pmax
n
Ms

max
1,0

KS
0,99
1,0

Ki
-0,99
0,98
1,0

P
max
KS
Ki
Pmax
n
Ms

max
1,0

KS
0,99
1,0

Ki
-0,99
0,98
1,0

Pmax
-0,99
0,98
-0,99
1,0

n
0,99
-0,98
0,99
1,0
1,0

Ms
0,55
-0,58
0,53
0,59
-0,58
1,0

Pmax
-0,99
0,98
-0,99
1,0

n
0,99
-0,98
0,99
1,0
1,0

Ms
0,55
-0,58
0,53
0,59
-0,58
1,0

A partir do que foi discutido no incio do Captulo, observa-se que os parmetros estimados
dos modelos para as fermentaes em batelada e em batelada alimentada, precisam ser
reavaliados devido s altas correlaes e sensibilidades apresentadas. Esta reavaliao pode
ser feita primeiro, considerando pesos adequados nos dados observados, e posteriormente
fazendo uma nova anlise de sensibilidade e correlao. Caso os novos resultados no tenham
apresentado menores correlaes e menores sensibilidades com relao s variveis de
estado, deve-se estudar uma forma de reduzir os parmetros do modelo, ou at mesmo,
substituir o modelo cintico. Uma outra alternativa seria considerar = max, j que os valores
obtidos para as taxas de crescimento especficas experimentais foram muito baixos,
provavelmente devido s condies iniciais empregadas: altas concentraes de clulas.

4.5 Concluses
As sensibilidades das concentraes de clulas, sacarose e etanol com relao constante
de saturao para o crescimento e a taxa especfica mxima de crescimento celular foram mais
significantes que os demais parmetros, principalmente no modelo para o processo em
batelada alimentada para os perfis de sacarose e etanol. Ou seja, uma mnima perturbao no
valor destes parmetros causa uma grande alterao no valor destas variveis de estado. A
ordem decrescente de influncia dos parmetros nos modelos considerados a seguinte: KS,
max, MS, n, Pmax e Ki. O parmetro Ms teve maior influncia nos perfis das concentraes de
clulas e etanol do modelo para o processo em batelada e, n afetou mais o perfil de
88

____________________________________________________Captulo 4 Anlise de Sensibilidade Paramtrica

concentrao celular, tambm, do modelo para o processo em batelada. Os parmetros Pmax e


Ki quase no afetaram os perfis de concentraes de sacarose, clulas e etanol no modelo
batelada alimentada. A sensibilidade da concentrao de clulas para os dois modelos, foi bem
menor comparada s concentraes de sacarose e etanol. O perfil de sacarose foi mais afetado
pelas alteraes nos parmetros do modelo para as fermentaes em batelada, e o de etanol,
pelas alteraes nos parmetros do modelo para as fermentaes em batelada alimentada.
As correlaes obtidas entre os pares de parmetros foram consistentes, no valor e sinal,
com a suas posies nas equaes dos modelos. Estes pares de parmetros exibiram altas
correlaes nos dois modelos considerados, sendo que para o modelo do processo em
batelada alimentada as correlaes foram ainda maiores, com exceo apenas para KS e Pmax,
KS e n, e Pmax e MS com relao concentrao de sacarose, que tiveram correlaes um
pouco menores. Os pares de parmetros max, KS, Ki, Pmax e n com MS exibiram menores
correlaes para as concentraes de clulas e etanol, e maiores correlaes para a
concentrao de sacarose.
Deve-se atentar para uma reavaliao dos modelos para as fermentaes em batelada e
em batelada alimentada devido s altas correlaes e sensibilidades dos parmetros obtidas.
Entretanto, a aproximao para a seleo de um conjunto de parmetros a serem estimados,
como qualquer outra aproximao, arbitrria. E considerando que o modelo matemtico
proposto para a fermentao em batelada alimentada descreveu adequadamente os resultados
experimentais, este modelo ser utilizado na otimizao dinmica do processo, tendo como
varivel de controle a vazo de alimentao do substrato.

89

________________________________Captulo 5 Otimizao Dinmica da Fermentao em Batelada Alimentada

CAPTULO 5
OTIMIZAO DINMICA DA FERMENTAO EM BATELADA
ALIMENTADA
5.1 Reviso Bibliogrfica
A otimizao matemtica busca responder pergunta O que melhor? para problemas
em que a qualidade de uma resposta pode ser medida por um nmero. Estes problemas
aparecem em praticamente todas as reas do conhecimento: negcios, cincias fsicas,
qumicas e biolgicas, engenharia, arquitetura, economia e administrao. A quantidade de
ferramentas disponveis para auxiliar nesta tarefa quase to grande quanto o nmero de
aplicaes (Biscaia Jr., 2007).
O Problema de Otimizao Dinmica (POD) consiste na determinao dos perfis de
variveis de controle que maximizam ou minimizam uma funo objetivo ou funo custo,
sujeita ou no a restries algbricas de igualdade e desigualdade, equaes diferenciais
ordinrias e parciais e a restries laterais (domnio ou espao de busca das variveis de
projeto). O aumento significativo de sua aplicao nas indstrias, ocorrido na ltima dcada,
foi devido popularidade das ferramentas de simulao dinmica e dos mercados
competitivos associados a especificaes de desempenho do processo cada vez mais
exigentes e sujeitas a mais restries. medida que a otimizao dinmica automatiza a
tomada de decises, ela se estabelece como uma tecnologia til e confivel para a anlise
de processos e fomenta novas aplicaes: o tratamento de problemas com restrio e no
suaves, a sntese de redes de reatores qumicos, o tratamento de incertezas em problemas
em perodos mltiplos e a avaliao de ferramentas como a diferenciao automtica. Estas
aplicaes estabelecem novos desafios que, uma vez ultrapassados, tornam as estratgias
de deciso mais refinadas (Biegler, 1984; Pfeifer, 2007).
As estimaes de estratgias de alimentao timas tm sido realizadas de vrias
formas para melhorar os bioprocessos em batelada alimentada. Algumas destas estratgias
resolvem o problema de otimizao por meio da Teoria do Controle timo, por Programao
Dinmica Iterativa (IDP), por Mtodos do Tipo Gradiente Conjugado de Primeira Ordem,
Seleo de Malha Adaptativa, Redes Neuronais, Aproximaes No Singulares e
Estratgias Evolutivas baseadas nos Algoritmos Genticos. Com exceo do mtodo que
utiliza Redes Neuronais, todos os outros mtodos fazem uso de modelos matemticos
detalhados para as cinticas e balanos de massa do sistema sob considerao.
91

Captulo 5 Otimizao Dinmica da Fermentao em Batelada Alimentada_________________________________________

Teoricamente, todos estes biossistemas podem ser otimizados com o mtodo de


Pontryagin. Entretanto, deve ser destacado que, mesmo quando o mtodo gera uma
soluo analtica, sua utilizao restringida pela complexidade do modelo e restries
impostas por ele. Portanto, quando biossistemas com cinticas altamente no lineares so
considerados, sua aplicao especialmente complicada (Franco-Lara e Weuster-Botz,
2005). A seguir, alguns trabalhos que utilizaram das metodologias citadas anteriormente,
so apresentados.
Modak et al. (1986) desenvolveram perfis timos da taxa de alimentao volumtrica
para processos fermentativos em batelada alimentada utilizando o princpio de Pontryagin e
a Teoria do Controle Singular. Eles propuseram que a taxa de alimentao deveria ser
manipulada primeiro para favorecer o crescimento das clulas e s ento para propiciar a
formao de produto. Assim, os autores classificaram os processos fermentativos segundo a
forma, por apresentar ou no um ponto de mximo, das taxas especficas de crescimento de
clulas e de formao de produto. A seqncia tima dos perodos de taxa de alimentao
mnima, mxima e singular foi determinada em funo das taxas especficas de crescimento
e formao do produto e das condies iniciais do processo. Conforme as seqncias
timas citadas no trabalho anterior, Lim et al. (1986) desenvolveram algoritmos
computacionais para determinao dos perfis timos e dos tempos de troca entre os
diferentes valores da taxa de alimentao. Modak e Lim (1987) desenvolveram um esquema
de otimizao feedback no qual a taxa de alimentao foi definida como uma funo no
linear das variveis de estado (concentraes de substrato, produto, massa celular e o
volume do fermentador). Kurtanjek (1991) descreveu um mtodo para otimizao
multidimensional de fermentaes em batelada alimentada baseado na tcnica de
colocao ortogonal. As variveis de controle e de estado foram reformuladas para obter
uma forma no singular do problema de otimizao e a concentrao de substrato no
fermentador foi usada como uma varivel de deciso auxiliar.
Uma outra alternativa proposta pela literatura para lidar com dificuldades computacionais
foi a transformao do problema singular original em um problema no singular. Isso pde
ser feito por uma transformao proposta por Kelley (1965). Esta transformao, alm de
evitar o problema singular, reduziu a dimenso do problema original por meio de uma
transformao de variveis de estado (Costa, 1996). No trabalho de Chen e Hwang (1990) o
problema de controle liga-desliga timo de um processo geral foi descrito por equaes
algbrico-diferenciais. Este problema com parametrizao nas variveis de controle se
caracterizou como um problema de seleo de parmetros de dimenso finita. Um algoritmo
unificado, no qual se utilizaram a transformao de Kelley foi proposto para calcular os
gradientes da funo custo e as restries.

92

________________________________Captulo 5 Otimizao Dinmica da Fermentao em Batelada Alimentada

Fu e Barford (1993) descreveram os processos de fermentao por uma modelagem


algbrico-diferencial e utilizaram a transformao de Kelley para transformar o problema da
determinao da taxa volumtrica de alimentao do substrato em um problema no
singular, derivado da aplicao do princpio mximo de Pontryagin.
Wang e Shyu (1997) propuseram um algoritmo modificado de programao dinmica
iterativa (PDI) para resolver um problema de otimizao dinmica com restries e
empregaram a programao quadrtica seqencial para comparar os resultados. O mesmo
algoritmo foi utilizado por Chiou e Wang (1999) para resolver um PCO simplificado do
processo de fermentao em batelada alimentada. Neste caso, a vazo de alimentao foi
primeiro discretizada em um conjunto de 20 parties de aes de controle constantes. O
mtodo de Evoluo Diferencial Hbrida (HDE) aliado ao mtodo de atualizao dos
multiplicadores foi usado para resolver o problema aproximado.
Costa et al. (1998) desenvolveram um esquema de controle timo adaptativo no qual o
perfil pr-otimizado da varivel de controle foi corrigido online em cada tempo de
amostragem. Para lidar com a estimao dos parmetros cinticos, um modelo neuronal
hbrido foi proposto.
Um problema de otimizao dinmica da fermentao em batelada alimentada foi
resolvido por Wang et al. (2001) utilizando o modelo cintico de Monod, a fim de determinar
os perfis de taxas de alimentao timos. Consideraram uma estratgia de controle bangbang para cada modelo, alm de um perfil de taxa de alimentao constante. Eles
introduziram um mtodo do tipo lagrangeano para o HDE lidar com o problema de
otimizao com restries de desigualdade. As solues timas foram ento comparadas
com os experimentos em batelada alimentada para validar o modelo cintico. Nestes
experimentos, alm de utilizarem os perfis de taxa de alimentao tima e o de taxa de
alimentao constante, tambm variaram as concentraes de glicose alimentada. Pela
comparao dos resultados experimentais, concluram que o perfil de taxa de alimentao
timo, considerando o modelo cintico proposto, mais adequado que os outros dois perfis,
o de taxa de alimentao constante e o de Monod. Diversos mtodos tambm foram
empregados para resolver tanto o problema da estimativa dos parmetros quanto o
problema de otimizao para comparao.
Franco-Lara e Weuster-Botz (2005) apresentaram um mtodo que gerou perfis de
alimentao timos para fermentaes em batelada alimentada. Tal mtodo se baseou em
redes neuronais artificiais e criao de trajetrias contnuas no lineares suaves da taxa de
alimentao. Os perfis calculados no se restringiram a um dado padro, devido
principalmente capacidade dos sistemas de redes neuronais reproduzirem qualquer
funo no linear aps um procedimento de treinamento prprio.

93

Captulo 5 Otimizao Dinmica da Fermentao em Batelada Alimentada_________________________________________

Tcnicas de controle timo foram utilizadas no trabalho de Ribeiro e Giordano (2005)


para otimizar a alimentao de reagentes na sntese enzimtica de ampicilina em reator
operando em batelada alimentada. Os resultados simulados mostraram que em reator
integrado operado em batelada alimentada, pode-se alcanar maiores converses,
rendimentos e produtividades do produto de interesse considerado.
Lobato et al. (2006) introduziram uma metodologia sistemtica para a eliminao da
dependncia das variveis adjuntas do sistema de equaes algbrico-diferenciais
resultante do Princpio de Pontryagin, com a transformao do problema original em um
problema de identificao de fases com ndice diferencial flutuante e dos respectivos tempos
de troca. Esta estratgia consistiu da transformao do problema de valor no contorno
original em uma seqncia de problemas de valor inicial definidos por fases, cujas
caractersticas foram definidas pelos respectivos ndices e pela seqncia de eventos. A
metodologia proposta foi baseada nas condies de operao do processo, metas de
otimizao para definir a seqncia de eventos e caractersticas das equaes do modelo,
que em sua formulao final deveria ser necessariamente bem posta. A metodologia
desenvolvida apresentou bons resultados quando comparados aos da literatura.
No presente trabalho, o POD aplicado no estudo da fermentao alcolica em modo
de operao batelada alimentada, para determinar o perfil timo de alimentao de
substrato que maximiza a produo de etanol. Este POD naturalmente um problema de
difcil resoluo devido flutuao do ndice diferencial que ocorre ao longo da integrao
do sistema. Dessa forma, a resoluo deste problema consiste na determinao da
seqncia de arcos no singulares e singulares e os tempos nos quais ocorre a transio
entre eles (eventos ou switching times). Para resolver esse tipo de POD, existe a
necessidade da obteno da Funo Identificadora de Fases (FIF), cujo monitoramento
permitir a identificao dos eventos e do controle singular que ser aplicado ao sistema
(Lobato, 2006).
Alguns conceitos fundamentais so descritos a seguir, para melhor compreenso da
metodologia empregada na otimizao dinmica da fermentao em batelada alimentada
utilizando a estratgia de Lobato et al. (2006), que utiliza a abordagem algbrico-diferencial.
Sistemas de Equaes Algbrico-Diferenciais (EADs) um sistema de equaes que
pode ser escrito como:

f ( z , z ,u , t ) = 0

(5.1)

Nas EADs existem restries algbricas na varivel de estado z, que podem aparecer
explicitamente como em
94

________________________________Captulo 5 Otimizao Dinmica da Fermentao em Batelada Alimentada

g ( z , z , y , t ) = 0
h( w , y , t ) = 0

(5.2)
(5.3)

em que z = (w,y), ou podem aparecer implicitamente devido singularidade de

df
quando
dz

existem linhas no nulas.


ndice Diferencial de EADs o nmero mnimo de vezes que o sistema de EADs ou parte
dele deve ser diferenciado em relao a t para determinar z como uma funo contnua de
z (Pantelides, 1988).
EADs de ndice Superior e Reduo de ndice EADs de ndice superior so as equaes
com ndice maior do que 1. Do ponto de vista da soluo numrica desejvel que o ndice
das EADs seja o menor possvel devido dificuldade associada soluo dessas EADs,
que pode ser comparada soluo de EDOs com rigidez numrica (Pfeifer, 2007).
Princpio do Mnimo de Pontryagin (PMP) decorrente da imposio de que o
Hamiltoniano de um sistema contnuo sujeito a restries de desigualdade nas variveis de
controle deve ser minimizado para qualquer conjunto possvel destas variveis de controle.
aplicvel a problemas com variaes fortes e restries de fim e foi estabelecido por
Pontryagin em 1962 (Bryson e Ho, 1975).
Arcos Singulares arcos onde a matriz de derivadas segundas do Hamiltoniano com
relao s variveis de controle singular. Os problemas de otimizao lineares podem
apresentar impulsos nas variveis de controle se elas no forem submetidas a limites.
Quando estes limites so impostos, a soluo apresenta perodos com a varivel de controle
nos limites de restrio e arcos singulares. As variveis de controle freqentemente
apresentam descontinuidades quando passam do arco restrito para o arco singular ou viceversa (Bryson e Ho, 1975). Devido a estes arcos singulares, o perfil de controle no tem
influncia direta sobre as condies de otimalidade do Hamiltoniano e, portanto, a
determinao da varivel de controle exige condies adicionais que podem ser de difcil
manuseio (Cuthrel e Biegler, 1989). Os problemas de reatores batelada alimentada, a
manipulao de vazes em reatores qumicos, colunas de destilao, extratores e
trocadores de calor so casos tpicos de problemas com controle singular (Modak et al.,
1986).
Eventos so pontos isolados no tempo onde os comportamentos contnuos e discretos
interagem entre si. Nesses pontos podem ocorrer mudanas na forma funcional das EADs e
nas trajetrias das variveis de controle em cada fase decorrentes de descontinuidades nas
95

Captulo 5 Otimizao Dinmica da Fermentao em Batelada Alimentada_________________________________________

trajetrias de estado e das variveis adjuntas. Do ponto de vista algbrico-diferencial, estas


mudanas causam a flutuao do ndice Diferencial ao longo das fases (Lobato, 2004;
Pfeifer, 2007).
Funo Identificadora de Fases (FIF) so funes que indicam quando uma restrio que
est ativa torna-se inativa e vice-versa. Um caso particular de grande interesse quando a
varivel de controle aparece linearmente na funo Hamiltoniano. Em geral, nenhum mnimo
existir para tais problemas a menos que restries de desigualdade nas variveis de
estado e de controle sejam especificadas. Se as restries de desigualdade so lineares na
varivel de controle, razovel esperar que a soluo mnima, se existir, sempre exigir que
a varivel de controle esteja localizada em um ponto ou outro do limite da regio vivel de
controle (Bryson e Ho, 1975). Seja o seguinte sistema de equaes:

z = f ( z ) + g ( z )u
z( 0 ) = z0

(5.4)
(5.5)

com a varivel de controle escalar dada por

u min u u max

(5.6)

A funo Hamiltoniano definida como

H = T ( f ( z ) + g ( z )u )

(5.7)

Para essa classe de controle tem-se

u max

u( t ) = FIF
u
min

se T g < 0
se T g = 0

(5.8)

se g > 0
T

No trabalho de Seywald et al. (apud Pfeifer, 2007), obtiveram trajetrias timas de um


foguete em um plano vertical aplicando o Princpio do Mnimo de Pontryagin. Para obter
estes resultados, formularam FIFs associadas a doze possveis lgicas de controle
baseadas na ativao/desativao de restries e nos sinais das variveis adjuntas que
necessariamente tivessem significado do ponto de vista da engenharia e no somente
significado matemtico.
Santos et al. (2005) determinaram a FIF para um PCO da fermentao alcolica em
reator batelada alimentada para maximizao do produto com restries no rendimento em
etanol, na varivel de controle e no volume do fermentador, considerando operao com
96

________________________________Captulo 5 Otimizao Dinmica da Fermentao em Batelada Alimentada

tempo final livre e que apresentou arcos singulares. A estratgia de controle foi definida em
5 fases (2 com controle singular e 3 com controle bang-bang) baseada em aspectos fsicos
do problema. O ndice diferencial flutuou entre 1 e 3 ao longo destas fases e o PCO foi
resolvido por fase como um sistema de EDOs de valor inicial.
Na prxima Seo apresentada uma definio geral do Problema de Controle timo
ou Otimizao Dinmica.

5.1.1 O Problema Geral de Otimizao


A Funo Objetivo uma funo que associa cada ponto no espao de solues a um
nmero real. Este nmero permite medir a qualidade de uma resposta: no problema de
minimizao, quanto menor este valor, melhor a resposta. No problema de maximizao, o
inverso ocorre. O tratamento matemtico de problemas de maximizao e minimizao
anlogo (Biscaia Jr., 2007).
Segundo Logsdon e Biegler (1989), o Problema de Controle timo Algbrico-Diferencial
(PCOAD) definido de modo geral pela Funo Objetivo definida pela Eq. (5.9):
tf

min ( z( t f ), t f ) + L( z( t ),u( t ), t )dt

u ( t ),z ( t )

(5.9)

t0

sujeito s restries:

g ( z( t ), z( t ), u( t ), t ) 0
h( z( t ), z( t ), u( t ), t ) = 0

z min z( t ) z max
u min u( t ) u max

(5.10)
(5.11)

(5.12)
(5.13)

definidas nos domnios

: \ n \1

g : \ nz + nu +1 \ g
h : \ nz + nu +1 \ nh

L : \ nz + nu +1 \1

em que z(t) e u(t) so, respectivamente, os vetores das variveis de estado e de controle,

(z(tf),tf) o primeiro termo da Funo Objetivo avaliado em t=tf , L(z(t), u(t), t) um funcional
dos vetores de controle e estado e o segundo termo da Funo Objetivo, g(z(t), u(t), t) e
h(z(t), u(t), t) so os vetores de restries de desigualdade e igualdade, respectivamente. Os
subscritos min e max identificam os limites inferior e superior das variveis.
Na formulao de um POD do processo de fermentao em batelada alimentada, tem-se
como exemplo de variveis de controle, Funes Objetivo e restries de igualdade e
desigualdade:
Variveis de controle: as variveis de controle principais so a taxa de alimentao de
substrato, a velocidade de agitao, a taxa de adio de cido e base e a taxa de fluxo de
97

Captulo 5 Otimizao Dinmica da Fermentao em Batelada Alimentada_________________________________________

gua num reator com camisa de aquecimento, por ser a temperatura, a concentrao de
substrato e o pH, as variveis que mais se relacionam com o estado da fermentao
(Kurtanjek, 1991).
Funes Objetivo: na Tab. 5.1 so exibidas algumas Funes Objetivo e seus
respectivos autores.
Tabela 5.1 Funes Objetivo empregadas no POD envolvendo o processo de fermentao
em batelada alimentada.
N da
Autores
Funo Objetivo
Equao
Modak et al. (1986)
Modak et al. (1986)
Chen e Hwang (1990)
e Fu e Barford (1993)

p( t f
J = min
tf

J = min( t f )

5.14
5.15
5.16*

min J = - [exp(y2(tf))]

Wang e Shyu (1997)

J = min(-p(tf )v(tf )) = max(p(tf )v(tf ))

5.17

Wang et al. (2001)

max J = [p(tf )v(tf ) - p0v 0 ]/tf

5.18

u(t)

u(t)

u(t),tf

* y2 = ln(pv).

Restries de igualdade e desigualdade: Dependendo da varivel de controle


escolhida para o problema de otimizao, algumas restries devem ser impostas para
evitar resultados no realsticos. Algumas restries esto apresentadas na Tab. 5.2.
Tabela 5.2 Restries impostas no POD envolvendo o processo de fermentao em
batelada alimentada.
N da
Autores
Funo Objetivo
Equao
Fu e Barford (1993)
Costa (1996)

Wang e Shyu (1997)

Wang et al. (2001)

* a produtividade especfica

y p s ds y p s s
=
x dt
x t
u
0 D(t) max
v(t)

5.19*
5.20

0 u(t) umax
g1 = v(t) vf 0
g2 = - s(t) 0

5.21
5.22
5.23

g3 =

5.24

p(t)v(t) - p0v 0
-y 0
[v(t) - v 0 ] sF + v 0 s0 - v(t)s(t) p s

g4 = p(tf) pf = 0
g5 = s(t) sr 0

98

5.25
5.26

________________________________Captulo 5 Otimizao Dinmica da Fermentao em Batelada Alimentada

- Condies Necessrias para a Otimizao Dinmica de Equaes Agbrico-Diferenciais


As condies necessrias para o timo para problemas nos quais o sistema dinmico
descrito somente atravs de equaes diferenciais ordinrias so bem estabelecidos na
literatura (Bryson,1975; Ray, 1981; Renfro, 1986; Feehery, 1998).
Para o problema de otimizao dinmica considerado nesta Seo, o vetor inicial das
variveis de estado conhecido (isto , o vetor inicial no determinado pela otimizao),
as trajetrias de controle no esto sujeitas a restries e as trajetrias de estado so
restritas por EADs. Este problema pode ser expresso matematicamente como:
tf

min ( z( t f ), t f ) + L( z( t ),u( t ), t )dt

u ( t ),z ( t )

(5.27)

t0

sujeito ao sistema de EADs:

f ( z( t ), z( t ),u( t ), t ) = 0

(5.28)

com condies iniciais dadas por:

( z( t 0 ), z( t 0 ),t 0 ) = 0

(5.29)

Admitindo que o tempo inicial (to) e a condio z(to) so fixos, a funo objetivo pode ser
reescrita como:
tf

J = L ( z( t ), z( t ),u( t ), t )dt

(5.30)

t0

em que:
T

d

z + L
L ( z( t ), z( t ),u( t ), t ) =
+
+L =
dt
t z

(5.31)

A funo objetivo aumentada obtida pela juno das restries Funo Objetivo por
meio do uso de variveis adjuntas (t):
t

f
J = ( L ( z( t ), z( t ),u( t ), t ) + T ( t )f ( z( t ), z( t ),u( t ), t ))dt

t0

Por convenincia o Hamiltoniano definido como:


99

(5.32)

Captulo 5 Otimizao Dinmica da Fermentao em Batelada Alimentada_________________________________________

H = L ( z( t ), z( t ),u( t ),t ) + T ( t )f ( z( t ), z( t ),u( t ),t )

(5.33)

As condies necessrias de primeira ordem para o timo podem ser determinadas fixando
a variao de J igual a zero. As condies ento so:

H d H
z dt z = 0

H
=0
u
H
=0

H
H


=0
z + H z z

t =t f
t t f

(5.34)
(5.35)
(5.36)
(5.37)

Admitindo que as derivadas parciais de segunda ordem so contnuas, a ordem de


diferenciao pode ser mudada obtendo-se as seguintes expresses:

f T f
d f
L
T

=0
+ T
z
z
dt z
z
L
f
+ T
=0
z
u
f ( z , z ,u , t ) = 0

(5.38)
(5.39)
(5.40)


T f
T
T f

z + z zf + t + L + f z z t f = 0

t t f

(5.41)

Estas condies so uma generalizao das condies necessrias, tambm chamadas


de equaes de Euler-Lagrange, para a otimizao dinmica de sistemas de EADs. Casos
particulares que envolvem problemas com tempos fixos finais ou livres so mostrados na
sequncia.
- Problemas com o Tempo Final Fixo
Se tf fixo ento tf igual a zero na Eq.(5.41). Se a varivel de estado no for
especificada no tempo final, as condies no ponto final tm que satisfazer a:

T f
z + z zf = 0

t t f

(5.42)

100

________________________________Captulo 5 Otimizao Dinmica da Fermentao em Batelada Alimentada

Como zf arbitrrio, isso implica que zf 0, portanto tem-se neste caso:

T f
=0
z + z

t t f

(5.43)

- Problemas com o Tempo Final Livre


Como tf livre, a suposio de que tf =0 no pode ser feita. Neste caso alm das
condies j discutidas, para o caso em que se tm as variveis de estado fixas no tempo
final ou variveis de estado livres, o sistema dever atender a seguinte condio:


T
T f
=0
z + L + f z z
t =t f

(5.44)

As equaes de Euler-Lagrange foram demonstradas para um problema de otimizao


simples e sem restries na trajetria. Alguns casos especiais de problemas de controle
timo e as variaes que ocorrem na obteno dessas equaes, para sistemas com
restries de igualdade e desigualdade, so encontrados em Bryson e Ho (1975).
Os mtodos de resoluo de PODs so apresentados a seguir.

5.1.2 Mtodos Numricos de Soluo de Problemas de Otimizao Dinmica


a) Mtodos Indiretos:
Os Mtodos Indiretos surgiram com o desenvolvimento do clculo variacional, permitindo
a deduo das condies necessrias e suficientes para a soluo de problemas de
otimizao dinmica (Bryson e Ho, 1975). Trabalhos como os de Bryson e Ho (1975), Lynn
et al. (1970), Lynn e Zahradnik (1987), aplicaram o princpio de Pontryagin com a gerao
das equaes diferenciais adjuntas e da condio necessria para a minimizao da funo
Hamiltoniano, transformando o problema original em um problema de valor no contorno
algbrico-diferencial (PVCAD). Estes problemas podem ser resolvidos por mtodos de
discretizao como colocao em elementos finitos e diferenas finitas, chute simples e
mltiplo.
Segundo Chudej e Gnther (1999) os mtodos indiretos podem ser utilizados de modo
eficiente devido ao desenvolvimento de programas de lgebra computacional, que permite a
obteno automtica das equaes diferenciais adjuntas e demais condies de
101

Captulo 5 Otimizao Dinmica da Fermentao em Batelada Alimentada_________________________________________

otimalidade. Desta forma, podem ser obtidas solues altamente precisas e testes feitos a
posteriori podem excluir as solues subtimas.
Estes mtodos tm como vantagem a gerao das condies timas (conjunto de EADs)
para a otimizao dinmica de problemas de controle pela aplicao do princpio de
Pontryagin. E como desvantagem tem-se a gerao das equaes adjuntas que tediosa e
complicada para sistemas de grande dimenso, a dificuldade na convergncia dos
problemas de valor no contorno e a falta de garantia da unicidade da soluo.

b) Mtodos Diretos:
Os Mtodos Diretos transformam o problema de controle timo num problema de
Programao No Linear (NLP). Eles podem utilizar as abordagens seqencial e
simultnea. A seqencial consiste na parametrizao da varivel de controle. Neste caso as
condies iniciais e o conjunto de parmetros de controle so conhecidos e os sistema de
EADs discretizado por uma aproximao polinomial e em seguida resolvido por um NLP.
Esse procedimento determina o valor da funo objetivo e das restries encontrando
valores timos de coeficientes na parametrizao do controle. A abordagem simultnea
consiste na parametrizao tanto da varivel de controle quanto da varivel de estado.
Como resultado dessa parametrizao as EADs so resolvidas somente uma vez, no ponto
timo, o que evita solues intermedirias que no existem ou esforo computacional
excessivo. Tem como vantagem a soluo rpida, e como desvantagem a dificuldade na
determinao da otimalidade.

b) Mtodos Mistos:
Os Mtodos Mistos ou Hbridos so uma combinao dos mtodos diretos e indiretos.
Nesse mtodo, os mtodos diretos so aplicados a problemas mais simplificados e os
resultados servem de estimativas para os mtodos indiretos, com refinamento da soluo.
Lobato (2004) resolveu PODs inicialmente pelo mtodo direto utilizando o cdigo Dircol Mtodo de Colocao Direta (Stryk, 1999), buscando a melhor soluo possvel fornecida
pelo cdigo, que forneceu tambm a estimativa dos eventos e do perfil das variveis
adjuntas. Com a estimativa dos eventos e anlise dos resultados obtidos, foram construdas
as FIFs. Os problemas de valor no contorno de ndice 1 de cada fase, foram resolvidos
seqencialmente pelo cdigo Coldae - Mtodo de Colocao da Equao AlgbricoDiferencial (Ascher e Spiteri, 1994). O autor demonstrou que este mtodo possui

102

________________________________Captulo 5 Otimizao Dinmica da Fermentao em Batelada Alimentada

aplicabilidade a problemas com restries nas variveis de estado e com controle linear nas
restries, que provocam flutuaes no ndice dos PODADs.

5.2 Metodologia da Otimizao Dinmica da Fermentao em Batelada Alimentada


A seguir ser descrito o procedimento utilizado neste trabalho para a determinao da
FIF (Costa, 1996; Santos et al., 2005; Lobato et al., 2006) o qual foi implementado no
Maple 9.5. O POD foi resolvido no programa Matlab.
A estratgia de controle aplicada na maximizao da produo de etanol (Eq. 5.45),
sujeita s Eqs. (5.46-5.50), com tempo final livre, volume final (vf) do fermentador igual a
4,985 L, com a varivel de controle limitada por umin = 0 L/h e umax = 2 L/h (Santos et al.,
2005).

J = min - ( p(t)v(t) - p0v 0 ) = max ( p(t)v(t) - p0v 0 )


u(t)

u(t)

(5.45)

Admite-se que as densidades do meio de alimentao e do meio em fermentao so


iguais e constantes e que a operao isotrmica.

x =

u
x + x
v

u
s = (s F s ) x
v
u
p = p + x
v

v = u

x(0) = x0

(5.46)

s(0) = s0

(5.47)

p(0) = p0

(5.48)

v(0) = v0

(5.49)

v(tf) = vmax

(5.50)

As variveis x, s e p so respectivamente, as concentraes de clulas, sacarose e etanol, v


o volume do fermentador, u a vazo de alimentao de substrato (varivel de controle),
sF a concentrao de sacarose no meio de alimentao, , e so as taxas especficas
de crescimento de clulas, consumo de substrato e formao de produto, respectivamente.
Os modelos cinticos no-estruturados utilizados considerando os efeitos de inibio
(Eqs. 5.51-5.53) so os seguintes:

s
= m
s2
k s + s +
ki

n
p

1 p
m

(5.51)

103

Captulo 5 Otimizao Dinmica da Fermentao em Batelada Alimentada_________________________________________

=
+ ms

y xs
=

y ps
y xs

(5.52)

(5.53)

A taxa de diluio (D u/v) foi definida como varivel de controle do sistema formado
pelas Eqs. (5.46-5.50), que ficaram da seguinte forma:

x = Dx + x

s = D(s F s ) x

f1 x
f = f2 = s
f3 p

p = Dp + x

(5.54)
(5.55)
(5.56)

Assim, o nmero de variveis de estado reduzido estrategicamente levando reduo do


nmero de variveis adjuntas desse novo sistema.
A implementao da estratgia de controle feita da seguinte forma:
9 Primeira fase (to < t ts1): no incio do processo s(0) = 0, assim, u deve ser igual a
umax para propiciar o crescimento das clulas com o aumento da concentrao de
substrato no meio de fermentao (segundo Modak et al. (1986), uma vez que a
concentrao inicial de substrato baixa, a vazo de alimentao deve comear com
o valor mximo at que o arco singular seja alcanado, onde o controle singular
assume. Desde que , da mesma forma que , seja no monotnica, este controle
singular muda a concentrao de substrato de forma a favorecer maiores taxas
especficas de crescimento celular no incio da fase singular e maiores taxas de
formao de produto mais adiante);
9 Segunda fase (ts1< t t s2): inicia-se to logo que a primeira fase encerrada quando
a FIF nula, ento o controle singular obtido a partir da diferenciao da FIF com
relao ao tempo (tem-se u = usingular);
9 Terceira fase (t s2 < t tf): quando a restrio no volume do fermentador satisfeita (v
= vf), o controle singular chega ao fim e u passa a ser igual a umin (umin = 0). O
processo continua at que a concentrao de substrato seja bem pequena (na
ordem de 10-7), o que determina o tempo final da fermentao.

104

________________________________Captulo 5 Otimizao Dinmica da Fermentao em Batelada Alimentada

Esta estratgia de controle resumida na Tab. 5.3, com o ndice diferencial associado a
cada fase.
Tabela 5.3 - Estratgia de controle e ndice diferencial definido por fase.
t s2 < t tf
to < t ts1
ts1< t t s2
Controle timo
umin
umax
usingular
ndice Diferencial 1
1
3
A seguir, apresentado o desenvolvimento para a obteno do perfil da varivel de
controle no arco singular (usingular).
Para este caso estudado L=0 e a funo Hamiltoniano expressa pela Eq. 5.57 (Bryson
e Ho, 1975).

H T f

(5.57)

A funo Hamiltoniano redefinida como:

H = ( x1 + ( s f s )2 p3 )D + x1 x2 + x3

(5.58)

A Eq. 5.59 define as variveis adjuntas i,

i =

H
;
zi

sendo z = {x, s, p}

1 = ( 1 D + 1 2 + 3 )

2 = ( 2 D + x1
x 2
+ x 3
s
s

x2
3 = ( 3 D + x1
+ x3
p
p

(5.59)
(5.60)

)
s

)
p

(5.61)
(5.62)

sendo que as condies terminais especficas so dadas pela Eq. 5.63.

i (tf ) =

zi

t=tf

com

= -(pv - p0v 0 )

(5.63)

1 ( t f ) = 0

2 ( t f ) = 0
( t ) = v
3 f

(5.64)

A Eq. 5.65 define a condio estacionria.

H
=0
D

(5.65)

ou

( x1 + ( s f s )2 p3 ) = 0

(5.66)
105

Captulo 5 Otimizao Dinmica da Fermentao em Batelada Alimentada_________________________________________

Para problemas em que o tempo final livre, onde H = 0 (Bryson, 1975; Costa, 1996):

x1 x2 + x3 = 0

(5.67)

As duas equaes algbricas (Eq. 5.66 e Eq. 5.67) so usadas para determinar as duas
variveis adjuntas 1 e 2, em funo de 3, por exemplo.
Resolvendo as Eqs. 5.66 e 5.67 para 1 e 2, tem-se:

1 = a3
2 = b3

(5.68)

onde a e b so funes apenas das variveis de estado x, s e p.


Para determinar a varivel adjunta 3, mais uma equao necessria. Pela
diferenciao da Eq. 5.66 com relao ao tempo tem-se:

-x 1 - 1 x + (sf - s)2 - s2 - p 3 - 3 p = 0

(5.69)

Substituindo x , s e p por f1, f2 e f3, e 1 , 2 e 3 pelas Eqs. 5.60, 5.61 e 5.62


respectivamente, uma expresso simplificada obtida:

A1 + B2 + C3 = 0

(5.70)

onde A, B e C so funes apenas das variveis de estado. Pela substituio da Eq. 5.68 na
Eq. 5.70 e posterior rearranjo, obtm-se a Eq. 5.71. Isto possvel devido linearidade das
variveis adjuntas.

c3 = 0

(5.71)

Como 3 no necessariamente nulo,

c =0

(5.72)

onde c funo apenas das variveis de estado. A Eq. 5.72 conhecida como Funo
Identificadora de Fases (Lobato, 2006).
Por fim, possvel obter a expresso para o controle D a partir da diferenciao da Eq.
5.72 com relao ao tempo, e posteriormente, obter a varivel de controle original u durante
o arco singular, onde o ndice diferencial igual a 3.

u
; logo, u sin gular = Dsin gular v
v

(5.73)

106

________________________________Captulo 5 Otimizao Dinmica da Fermentao em Batelada Alimentada

Assim, a varivel de controle tambm obtida em funo apenas das variveis de


estado, resultando agora no mais em um problema de controle singular, e sim em um
problema de valor inicial de identificao de eventos.

5.3 Resultados e Discusses


Neste estudo, o modelo estimado a partir de todos os experimentos em batelada
alimentada com tempo de enchimento de 5 horas (Tab. 3.10), foi utilizado para calcular a
vazo de alimentao tima para o processo em batelada alimentada com concentrao de
substrato na alimentao igual a 285 g/L, pela determinao da seqncia de arcos no
singulares e singulares e os tempos nos quais ocorre a transio entre eles. Este processo
especfico foi escolhido por ter fornecido uma produo maior de etanol no final das
fermentaes realizadas e discutidas no Captulo 2, alm de estar prximo das condies
industriais.
So apresentados a seguir a identificao dos eventos e os resultados obtidos devido ao
novo perfil da varivel de controle u, com a utilizao das condies operacionais exibidas
na Tab. 5.4.
Tabela 5.4 Dados operacionais do processo em batelada alimentada utilizados no
experimento, simulao e otimizao.
sF (g/L) v0 (L) vf (L) s0 (g/L) x0 (g/L) p0 (g/L) yxs (g/g) yps (g/g)
285
1,5
4,985 0
83
36,78
0,017
0,413
A Tab. 5.5 apresenta os eventos calculados na otimizao, alm dos dados
experimentais e simulados para comparao. Estes eventos podem ser conferidos a partir
das Figs. 5.1-5.5 pelas divises destacadas em azul.
O perfil experimental e o simulado iniciam com a vazo mxima de alimentao de
substrato (umax = 0,6702 L/h) at o volume total do meio fermentativo ser alcanado (vmax =
4,985 L) num tempo de fermentao prximo a 5 horas. Posteriormente, a vazo de
alimentao mnima (umin = 0), at a parada da fermentao no tempo de 11 horas, onde
ainda h uma razovel concentrao residual de sacarose (sr). Isto diferente do que
ocorre no perfil otimizado, que inicia com uma vazo mxima de alimentao de substrato
(umax = 2,0 L/h) at alcanar o arco singular, onde o volume do meio fermentativo igual a
2,25 L, num tempo de fermentao igual a 0,376 horas (22,5 min). O perfil ento definido
pelo controle singular at o volume mximo do meio ser alcanado (vmax = 5,0 L) tambm
num tempo de fermentao prximo a 5 horas. A partir desse instante a vazo de
alimentao mnima (umin = 0) at alcanar uma concentrao residual de sacarose na
ordem de 10-7 g/L, num tempo final de fermentao igual a 12,38 horas. Esta estratgia de
107

Captulo 5 Otimizao Dinmica da Fermentao em Batelada Alimentada_________________________________________

alimentao tima de substrato foi determinada pela Funo Identificadora de Fases (Fig.
5.6). No incio a FIF teve valor negativo (-511,6 em t = 0 h) indicando que o processo deveria
operar com vazo mxima. Quando a FIF foi nula (em t = 0,376 h), o processo foi regido
pelo controle singular, e a partir de t = 5,12 horas a FIF assumiu valores maiores que zero
indicando que o processo deveria operar com vazo mnima. No final da fermentao, a FIF
teve altos valores (143 em t = 12,38 h). Apesar do valor mximo da vazo do meio
alimentado ser igual a 2 L/h, o tempo de fermentao gasto utilizando esta vazo foi bem
pequeno, cerca de 22,5 minutos. Os perfis da varivel de controle otimizado, experimental e
simulado podem ser vistos na Fig. 5.5. Nesta figura, apesar de parecer que a vazo de
alimentao tem valor constante na fase referente ao controle singular, existe uma variao
que no evidenciada pela escala utilizada na gerao do grfico.
Tabela 5.5 Resultados da fermentao, eventos e funo objetivo dos perfis estudados.
ts2 (h) tf (h)
pf (g/L) sr (g/L)
pv (g)
Perfil
umax (L/h) ts1 (h)
Experimental 0,6702
5,2
---11
91,49
4,574
400,92
Simulado
0,6702
5,2
---11
91,80
3,038
402,44
*10,99 *92,79
*0,4634 *408,78
Otimizado
2,000
0,376
5,117
12,38 92,92
10-7
409,42
*Resultados da Otimizao truncado no tempo de fermentao prximo a 11 horas.
Nos resultados apresentados na Tab. 5.5 e na Fig. 5.9, observa-se que o perfil timo
obtido da varivel de controle realmente fornece maior produo em etanol em todo o tempo
do processo fermentativo. O fato de o tempo final da fermentao obtido na otimizao ser
maior que o tempo final no experimento e na simulao, no quer dizer que os resultados
timos estejam duvidosos, pois como pode ser visto na Tab. 5.5, mesmo truncando o tempo
de fermentao em 10,99 horas, a produo de etanol obtida com o perfil timo maior (pv
= 408, 78 g). Por outro lado, o critrio de parada usado na otimizao foi a concentrao
residual de substrato igual a 10-7 g/L, que muito menor que as concentraes residuais de
substrato obtidas no experimento e simulao. Por isso, o tempo final obtido na otimizao
foi maior.
A derivada do produto com relao ao tempo igual a zero tambm foi considerada
como uma forma de parar o processo na otimizao, o que implica que no produzido
mais produto. Mas essa condio tambm alcanada quando a concentrao de substrato
residual prxima de zero, portanto o resultado final independe da condio de parada
adotada (sr= 10-7 g/L ou dp dt = 0 ).
Nas Figs. 5.1-5.4 considerando o perfil otimizado, no incio do processo (to < t ts1), notase um ligeiro decrscimo da concentrao de etanol com o aumento da concentrao de
sacarose no meio fermentativo. Ou seja, a diluio do meio afetou mais o valor da
concentrao de etanol que a converso do substrato em produto. Na fase singular (ts1< t
108

________________________________Captulo 5 Otimizao Dinmica da Fermentao em Batelada Alimentada

ts2), a concentrao de etanol aumenta exponencialmente com o aumento da concentrao


de sacarose, diferente da concentrao de clulas que continua a diminuir devido ao efeito
da diluio do meio. Na fase final (t s2 < t tf), como a vazo de alimentao mnima, a
concentrao de substrato diminui exponencialmente e uma formao de produto ainda
maior observada. J a concentrao de clulas praticamente constante nesta fase.
Pelas Figs. 5.1 e 5.3, observa-se que o consumo de substrato foi maior no perfil timo
havendo maior converso em etanol, se comparado ao menor consumo de substrato no
experimento e na simulao havendo menor converso em produto.
O rendimento timo foi prximo ao experimental e simulado aps a fase inicial (u = umax),
no ultrapassando o valor estequiomtrico igual a 0,538 g/g (Fig. 5.7). A taxa especfica
tima de crescimento celular atingiu o seu valor mximo logo no incio da fermentao,
ficando quase constante ao longo da fase singular, e apresentando uma queda expressiva
no final da fermentao, onde evidente a limitao do crescimento pela baixa quantidade
de substrato no meio. Esta queda foi maior que a ocorrida no experimento e na simulao.
Ou seja, no processo otimizado o substrato foi mais utilizado para produo de etanol que
para o crescimento celular.

100
90
80

s (g/L)

70
60
50
40
30
20
10
0

10

12

14

t (h)

Figura 5.1 () Perfil timo da concentrao de sacarose. (---) Perfil


simulado a partir do modelo estimado. () Dados experimentais para
batelada alimentada com sF = 285 g/L e te = 5 h. As linhas em azul
representam os eventos ts1 e ts2.

109

Captulo 5 Otimizao Dinmica da Fermentao em Batelada Alimentada_________________________________________

90
80

x (g/L)

70
60
50
40
30
20

10

12

14

t (h)

Figura 5.2 - () Perfil timo da concentrao de clulas. (---) Perfil


simulado a partir do modelo estimado. () Dados experimentais para
batelada alimentada com sF = 285 g/L e te = 5 h. As linhas em azul
representam os eventos ts1 e ts2.

100
90
80
p (g/L)

70
60
50
40
30
20

10

12

14

t (h)

Figura 5.3 - () Perfil timo da concentrao de etanol. (---) Perfil simulado


a partir do modelo estimado. () Dados experimentais para batelada
alimentada com sF = 285 g/L e te = 5 h. As linhas em azul representam os
eventos ts1 e ts2.

110

________________________________Captulo 5 Otimizao Dinmica da Fermentao em Batelada Alimentada

v (L)

10

12

14

t (h)
Figura 5.4 - () Perfil timo do volume do fermentador. (---) Perfil simulado.
() Dados experimentais para batelada alimentada com sF = 285 g/L e te = 5
h. As linhas em azul representam os eventos ts1 e ts2.

2,5
2,0

u (L/h)

1,5
1,0
0,5
0,0
-0,5

10

12

14

t (h)
Figura 5.5 - () Perfil timo da vazo de alimentao de substrato
varivel de controle. (---) e () Vazo de alimentao utilizada no
experimento e na simulao em batelada alimentada com sF = 285 g/L e te =
5 h. As linhas em azul representam os eventos ts1 e ts2.

111

Captulo 5 Otimizao Dinmica da Fermentao em Batelada Alimentada_________________________________________

200
100
0

FIF

-100
-200
-300
-400
-500
-600

-2

10

12

14

t (h)
Figura 5.6 Funo Identificadora de Fase.

0,6
0,5

yps (g/g)

0,4
0,3
0,2
0,1
0,0

-2

10

12

14

t (h)

Figura 5.7 - () Rendimento timo em etanol. (---) e () Rendimento final


em etanol obtido experimentalmente.

112

________________________________Captulo 5 Otimizao Dinmica da Fermentao em Batelada Alimentada

0,020

(1/h)

0,015

0,010

0,005

0,000

-2

10

12

14

t (h)
Figura 5.8 - () Taxa tima de crescimento celular especfica. (---) Taxa de
crescimento celular especfica a partir do modelo estimado. () Taxa de
crescimento celular especfica obtida pelos dados experimentais.

500

pv-p0v0 (g)

400

300

200

100

10

12

14

t (h)
Figura 5.9 () Perfil da produo de etanol (Funo Objetivo) alcanada
pela otimizao. (---) Produo de etanol obtida pelo modelo estimado. ()
Produo de etanol obtida dos dados experimentais.

113

Captulo 5 Otimizao Dinmica da Fermentao em Batelada Alimentada_________________________________________

Os resultados obtidos pela estratgia tima da varivel de controle foram muito bons,
visto que a produo de etanol aumentou ao longo do processo fermentativo. Estes
resultados no foram comparados com os da literatura pelo fato de no haver tantos
trabalhos que estudam a otimizao de processos fermentativos em condies reais de
operao, como as utilizadas neste estudo. Hong (1986), por exemplo, obteve um
rendimento em produto igual a 0,73 g/g, superior ao rendimento terico da formao de
etanol a partir de glicose por S. cerevisae que igual a 0,51g/g. Isto ocorreu porque no foi
considerada a restrio no rendimento. Chen e Hwang (1990), Fu e Barford (1993), Xiong e
Zhang (2004) e Santos et al. (2005) tambm utilizaram as mesmas condies de operao
do trabalho citado anteriormente. Mesmo considerando restries na produtividade
especfica (Fu e Barford, 1993) e no rendimento (Santos et al. 2005) para estar de acordo
com a estequiometria da reao, todos estes trabalhos apresentaram um tempo de
fermentao excessivo. Na Tab. 5.6 so exibidos os resultados obtidos nos respectivos
trabalhos, com tempos fixos ou livres.
Tabela 5.6 Comparao entre solues timas obtidas com e sem restrio na
produtividade
Referncia
Tempo (h) x (g/L)
p (g/L)
pv (g)
Hong (1986)
59,05
14,8
105,00
21000,0
Chen e Hwang (1990)
50,00*
15,0
99,98
19996,2
Fu e Barford (1993)
50,67
15,0
75,68
15132,0
Xiong e Zhang (2004)
63,00*
---101,7767
20355,0
Santos et al. (2005)
54,71
---76,14
15229,0
* Tempo fixo

5.4 Concluses
A Funo Identificadora de Fases foi determinada para o Problema de Otimizao
Dinmica da fermentao em batelada alimentada para maximizar a produo de etanol
com a ativao/desativao de restries na varivel de controle, no volume do fermentador,
e na concentrao residual de substrato, considerando operao com tempo final livre e que
apresentou arcos singulares. A estratgia de controle foi definida em 3 fases (1 com controle
singular e 2 com controle bang-bang) baseada na literatura e no valor da FIF. O ndice
diferencial flutuou entre 1 e 3 ao longo destas fases e o PCO foi resolvido por fase como um
sistema de EDOs de valor inicial.
O modelo estimado a partir de todos os experimentos em batelada alimentada com
tempo de enchimento de 5 horas foi utilizado para o PCO do processo especfico com
concentrao de substrato na alimentao igual a 285 g/L pelo fato de ter fornecido uma

114

________________________________Captulo 5 Otimizao Dinmica da Fermentao em Batelada Alimentada

produo maior de etanol nas fermentaes realizadas e estar prximo das condies
industriais.
O perfil de vazo de alimentao timo, considerando o modelo cintico proposto, foi
mais adequado que os outros dois perfis, o experimental e o simulado. O perfil timo
forneceu a maior produo de etanol em todo o tempo do processo fermentativo, mesmo
obtendo um tempo de fermentao maior, devido ao critrio de parada que foi a
concentrao residual de substrato igual a 10-7 g/L, muito menor que a experimental e
simulada. Por outro lado, o resultado final no dependeu do critrio de parada usado: a
concentrao residual de substrato ou a derivada do produto com relao ao tempo iguais a
zero.
No processo otimizado o consumo de substrato foi maior e mais utilizado para produo
de etanol que para o crescimento celular se comparado ao experimento e simulao.
A metodologia desenvolvida apresentou bons resultados considerando os da literatura,
pois a otimizao apresentada neste trabalho foi aplicada em um processo com condies
prximas das operadas industrialmente.

115

_________________________________________________________Captulo 6 Concluso Geral e Sugestes

CAPTULO 6

CONCLUSO GERAL E SUGESTES

O processo de fermentao alcolica em batelada alimentada utilizando a levedura S.


cerevisiae foi estudado com o objetivo de otimiz-lo ao final deste trabalho.
Pela anlise dos resultados dos experimentos em batelada alimentada observou-se que as
fermentaes realizadas considerando o tempo de enchimento igual a 5 horas, foram as que
forneceram os maiores rendimentos em etanol ao longo do tempo de fermentao. Sendo que a
fermentao com concentrao de sacarose na alimentao igual a 285 g/L forneceu a maior
produo em etanol (11,8%, v/v). Observou-se tambm, a influncia dos tempos de enchimento
sobre os rendimentos em etanol, dependendo da concentrao de substrato no meio
alimentado.
As fermentaes em batelada alimentada com tempos de enchimento iguais a 5 horas,
foram ento utilizadas na estimativa dos parmetros do modelo no estruturado, que considera
a inibio pelo substrato e pelo produto. Os valores dos parmetros obtidos tiveram significados
fsicos, sendo que o valor de ki elevado indica pouca inibio pelo substrato e o baixo valor de n
indica pouca inibio pelo produto. O modelo cintico obtido com os experimentos em batelada
no representou os experimentos em batelada alimentada. Os parmetros que mais
influenciaram as concentraes de clulas, de sacarose e de etanol foram a constante de
saturao para o crescimento e a taxa especfica mxima de crescimento celular. A ordem
decrescente de influncia dos parmetros nos modelos foi a seguinte: KS, max, MS, n, Pmax e Ki.
A concentrao de clulas apresentou menor sensibilidade aos parmetros se comparada s
concentraes de sacarose e de etanol. As correlaes obtidas entre os pares de parmetros
dos modelos para as fermentaes em batelada e em batelada alimentada foram consistentes,
no valor e sinal, com as suas posies nas equaes dos modelos e exibiram altas correlaes.
Entretanto, se for considerado que qualquer aproximao arbitrria, e que o modelo
cintico obtido a partir do conjunto de experimentos em batelada alimentada representou
satisfatoriamente os resultados da fermentao em batelada alimentada com concentrao de
sacarose no meio alimentado igual a 285 g/L e tempo de enchimento igual a 5 horas, este
modelo foi utilizado na otimizao dinmica da fermentao.

117

Captulo 6 Concluso Geral e Sugestes_______________________________________________________________________

A estratgia de controle simulada, definida em 3 fases (vazo mxima vazo singular


vazo mnima), forneceu uma maior produo de etanol, em condies de concentraes de
substrato, clulas e etanol, temperatura e pH, prximas s utilizadas nos processos industriais.

A partir das concluses obtidas e de observaes feitas ao longo do desenvolvimento deste


trabalho, so apresentadas as seguintes sugestes para trabalhos futuros:
Considerar como escalas caractersticas para a adimensionalizao dos modelos, os
valores iniciais das variveis de estado, ou valores mximos destas variveis encontrados na
literatura, para que a dimensionalizao dos modelos a serem aplicados em simulaes de
processos fermentativos no seja dependente de dados que ainda no so conhecidos, como
os valores mximos das concentraes de etanol e clulas numa fermentao em batelada, por
exemplo;
Propor e avaliar modelos cinticos mais simplificados, que no considerem os efeitos de
inibio pelo substrato e pelo produto para o ajuste dos resultados das fermentaes em
batelada alimentada, j que a constante de inibio pelo substrato foi elevada e a potncia do
termo de inibio pelo produto foi pequena, alm da taxa especfica de crescimento celular
experimental ter sido muito baixa, e cujos parmetros no apresentem correlaes
significativas;
Validar experimentalmente os resultados obtidos pela otimizao dinmica;
Determinar experimentalmente as mximas concentraes de sacarose, de clulas e de
produto em que ocorre a completa inibio do crescimento celular, j que os dados encontrados
na literatura referentes a essas medidas podem no estar de acordo com as cepas de
leveduras atuais, mais resistentes s condies de estresse;
Estudar a viabilidade celular ao longo do tempo de fermentao, para considerar no modelo
matemtico a variao das concentraes de clulas viveis e de clulas no viveis;
Estudar o processo de fermentao em batelada alimentada com maiores faixas de
concentrao de substrato na alimentao e tempos de enchimento;
Estudar o efeito da temperatura na produo de etanol nos processos em batelada
alimentada;
Otimizar e realizar o scale-up de fermentadores em batelada alimentada para a produo de
etanol a partir de cana-de-acar.

118

__________________________________________________________________________Apndices

APNDICE A

DADOS DOS EXPERIMENTOS

Apndice A.1 - Resultados dos Experimentos em Batelada

Tabela A.1 - Resultados do experimento em Batelada com s0 = 154 g/L.


Tempo (h)

s (g/l)

x (g/l)

p (g/l)

154 2

24,8 0,7

10,56 0,01

148 2

24,3 0,7

15,06 0,01

117,6 0,3

25,1 0,7

23,38 0,01

90,5 0,6

25,5 0,7

34,8 0,2

63,7 0,8

27,4 0,7

44,3 0,2

39,48 0,01

28,0 0,7

55,2 0,1

20,3 0,2

28,8 0,7

65,2 0,1

8,7 0,2

29,1 0,7

71,1 0,6

4,1 0,1

29,5 0,7

73,0 0,2

0,763 0,001

29,9 0,7

74,4 0,2

Tabela A.2 - Resultados do experimento em Batelada com s0 = 180,1 g/L.


Tempo (h)

s (g/l)

x (g/l)

p (g/l)

180,1 0,9

24,9 0,7

9,506 0,001

176,8 0,4

24,8 0,7

13,1 0,3

148,6 0,4

25,8 0,7

23,1 0,1

123 3

26,6 0,7

32,2 0,1

89,46 0,01

27,8 0,7

41,4 0,3

61,8 1

28,9 0,7

53,3 0,1

38,4 0,2

29,4 0,7

58,8 0,4

19,42 0,09

29,5 0,7

67,7 0,2

8,59 0,09

30,0 0,7

76,7 0,3

4,23 0,06

31,2 0,7

79,4 0,1

10

1,57 0,05

31,3 0,7

80,4 0,6

11

0,75 0,04

30,9 0,7

80,8 1,0

119

Apndices_____________________________________________________________________________________________

Tabela A.3 - Resultados do experimento em Batelada com s0 = 195,6 g/L.


Tempo (h)

s (g/l)

x (g/l)

p (g/l)

195,6 0,1

25,3 0,7

9,506 0,001

182 5

24,2 0,7

15,2 0,2

165,9 0,4

24,6 0,7

21,7 0,3

150,0 0,4

25,9 0,7

30,8 0,6

110 2

26,3 0,7

39,78 0,01

79,5 1,0

27,1 0,7

51,6 0,2

58 0,9

28,3 0,7

60,4 0,3

35,7 0,6

28,4 0,7

67,90 0,01

21,40 0,09

28,6 0,7

75,64 0,01

11,96 0,09

29,4 0,7

77,5 0,3

10

7,2 0,1

29,3 0,7

80,4 0,1

11

2,80 0,05

29,4 0,7

82,1 0,7

Apndice A.2 - Resultados dos Experimentos em Batelada Alimentada

Tabela A.4 - Resultados do experimento em Batelada Alimentada com sF = 218,4 0,1 g/L,
te = 3 h.
Tempo (h)

s (g/L)

x (g/L)

p (g/L)

v (L)

96,0 2

37,42 0,01

1,500 0,003

66,0 2

45,8 0,9

34,15 0,01

2,655 0,006

82,0 1

33,6 0,7

37,53 0,01

3,811 0,006

77,0 1

26,5 0,7

38,87 0,01

4,966 0,006

49,0 1

27,8 0,7

51,6 0,2

4,966 0,006

23,0 1

28,7 0,7

61,4 0,2

4,966 0,006

7,38 0,09

29,1 0,7

71,4 0,3

4,966 0,006

1,74 0,02

30,2 0,7

73,8 0,1

4,966 0,006

0,57 0,09

30,2 0,7

74,3 0,7

4,966 0,006

120

__________________________________________________________________________Apndices

Tabela A.5 - Resultados do experimento em Batelada Alimentada com sF = 218,0 2 g/L,


te = 4 h.
Tempo (h)

s (g/L)

x (g/L)

p (g/L)

v (L)

84,0 2

34,2 0,1

1,500 0,003

47,0 2

53,0 1

38,02 0,01

2,371 0,006

57,4 0,6

38,2 0,8

39,92 0,01

3,242 0,006

62,0 2

31,3 0,7

43,2 0,1

4,112 0,006

62,0 2

27,4 0,7

46,4 0,2

4,983 0,006

34,3 0,5

27,6 0,7

57,95 0,01

4,983 0,006

11,6 0,4

28,1 0,7

70,9 0,4

4,983 0,006

2,6 0,1

29,2 0,7

77,4 0,2

4,983 0,006

Tabela A.6 - Resultados do experimento em Batelada Alimentada com sF = 217 1 g/L,


te = 5 h.
Tempo (h)

s (g/L)

x (g/L)

p (g/L)

88,0 2

35,17 0,01 1,500 0,003

29,0 1

59,0 1

42,6 0,1

2,116 0,006

34,0 0,6

46,6 0,9

47,8 0,1

2,820 0,006

36,0 1

38,2 0,8

52,6 0,2

3,479 0,006

36,0 1

33,1 0,7

55,0 0,4

4,139 0,006

5,283

35,8 0,4

27,7 0,7

58,89 0,01 4,986 0,006

19,85 0,08

28,7 0,7

68,0 0,2

4,986 0,006

5,2 0,1

29,7 0,7

74,7 0,2

4,986 0,006

0,894 0,001 29,9 0,7

77,6 0,5

4,986 0,006

121

v (L)

Apndices_____________________________________________________________________________________________

Tabela A.7 - Resultados do experimento em Batelada Alimentada com sF = 245,0 4 g/L,


te = 3 h.
Tempo (h)

s (g/L)

x (g/L)

p (g/L)

v (L)

84,0 1

37,2 0,3

1,500 0,003

79,0 1

46,5 0,9

33,8 0,2

2,610 0,006

101,0 2

33,5 0,7

36,30 0,01

3,719 0,006

3,15

106,0 3

25,5 0,7

37,84 0,01

4,995 0,006

76,0 3

26,6 0,7

48,0 0,1

4,995 0,006

48,2 0,7

27,7 0,7

60,2 0,2

4,995 0,006

26,0 0,3

27,9 0,7

67,2 0,3

4,995 0,006

10,31 0,01

27,9 0,7

75,77 0,01

4,995 0,006

3,79 0,09

28,6 0,7

80,8 0,3

4,995 0,006

1,37 0,03

28,3 0,7

81,8 0,3

4,995 0,006

Tabela A.8 - Resultados do experimento em Batelada Alimentada com sF = 245,0 3 g/L,


te = 4 h.
Tempo (h)

s (g/L)

x (g/L)

p (g/L)

v (L)

84,0 1

36,7 0,1

1,500 0,003

57,81 0,01

51,7 0,9

38,2 0,2

2,372 0,006

74,1 0,8

39,8 0,8

40,8 0,1

3,244 0,006

76,0 2

31,0 0,7

43,93 0,01 4,116 0,006

81,0 1

26,7 0,7

48,6 0,2

4,988 0,006

54,6 0,9

27,3 0,7

56,8 0,2

4,988 0,006

31,4 0,2

27,7 0,7

70,0 0,2

4,988 0,006

7,233

12,1 0,3

28,8 0,7

76,5 0,2

4,988 0,006

4,3 0,3

28,6 0,7

82,9 0,1

4,988 0,006

1,8 0,2

29,4 0,7

84,0 0,1

4,988 0,006

122

__________________________________________________________________________Apndices

Tabela A.9 - Resultados do experimento em Batelada Alimentada com sF = 241,4 0,1 g/L,
te = 5 h.
Tempo (h)

s (g/L)

x (g/L)

p (g/L)

v (L)

83,0 1

36,71 0,01 1,500 0,003

40,0 1

56,0 1

41,8 0,3

2,168 0,006

53,0 3

44,1 0,9

47,8 0,3

2,837 0,006

58,11 0,01

36,3 0,8

49,6 0,1

3,505 0,006

56,0 2

31,0 0,7

51,7 0,3

4,174 0,006

5,217

64,1 0,8

26,5 0,7

55,3 0,3

4,987 0,006

40,0 1

26,8 0,7

60,4 0,2

4,987 0,006

21,2 0,7

27,4 0,7

69,94 0,01 4,987 0,006

8,0 0,4

27,5 0,7

78,2 0,1

4,987 0,006

2,8 0,2

28,3 0,7

80,4 0,1

4,987 0,006

10

0,899 0,001

28,4 0,7

81,2 0,3

4,987 0,006

Tabela A.10 - Resultados do experimento em Batelada Alimentada com sF = 277,0 3 g/L,


te = 3 h.
Tempo (h)

s (g/L)

x (g/L)

p (g/L)

v (L)

86,0 1

36,39 0,01

1,500 0,003

97,0 1

47,3 0,9

33,1 0,2

2,666 0,006

117,0 2

33,8 0,8

35,4 0,1

3,832 0,006

127,0 4

26,0 0,7

37,8 0,2

4,998 0,006

101,0 4

26,8 0,7

46,9 0,3

4,998 0,006

72,0 4

28,3 0,7

58,1 0,5

4,998 0,006

46,0 2

28,7 0,7

61,31 0,01

4,998 0,006

28,0 1

28,6 0,7

75,8 0,1

4,998 0,006

15,7 0,2

29,0 0,7

81,0 0,6

4,998 0,006

7,6 0,4

30,0 0,7

87,0 0,1

4,998 0,006

10

4,8 0,2

29,1 0,7

88,2 0,3

4,998 0,006

11

2,4 0,2

29,4 0,7

89,2 0,4

4,998 0,006

123

Apndices_____________________________________________________________________________________________

Tabela A.11 - Resultados do experimento em Batelada Alimentada com sF = 285,0 4 g/L,


te = 4 h.
Tempo (h)

s (g/L)

x (g/L)

p (g/L)

v (L)

85,0 1

35,81 0,01

1,500 0,003

76,0 2

51,6 0,9

38,67 0,01

2,372 0,006

98,0 3

38,2 0,8

39,6 0,3

3,244 0,006

109,0 1

31,0 0,7

44,0 0,3

4,116 0,006

108,0 0,8

25,7 0,7

46,7 0,3

4,988 0,006

84,0 2

26,8 0,7

52,1 0,5

4,988 0,006

60,0 1

27,5 0,7

62,06 0,01

4,988 0,006

42,0 3

28,1 0,7

68,8 0,2

4,988 0,006

24,7 0,8

28,1 0,7

77,5 0,8

4,988 0,006

16,6 0,3

27,9 0,7

82,49 0,01

4,988 0,006

10

7,7 0,3

28,5 0,7

88,1 0,1

4,988 0,006

11

5,1 0,2

28,7 0,7

89,20 0,01

4,988 0,006

Tabela A.12 - Resultados do experimento em Batelada Alimentada com sF = 285,0 4 g/L,


te = 5 h.
Tempo (h)

s (g/L)

x (g/L)

p (g/L)

v (L)

83,0 1

36,78 0,01

1,500 0,003

51,8 0,7

54,0 1

43,3 0,1

2,170 0,006

66,7 0,6

44,0 0,8

47,3 0,3

2,840 0,006

80,0 1

36,6 0,8

49,3 0,1

3,510 0,006

82,0 2

30,6 0,7

53,8 0,2

4,181 0,006

5,2

88,0 3

26,3 0,7

53,82 0,01

4,985 0,006

66,0 3

26,8 0,7

65,70 0,01

4,985 0,006

44,0 3

27,0 0,7

70,77 0,01

4,985 0,006

28,3 0,8

27,1 0,7

82,1 0,6

4,985 0,006

18,4 0,5

27,7 0,7

85,8 0,1

4,985 0,006

10

9,8 0,6

27,8 0,7

89,3 0,2

4,985 0,006

11

4,57 0,04

28,1 0,7

91,5 0,4

4,985 0,006

124

__________________________________________________________________________Apndices

APNDICE B

CURVAS DE CALIBRAO

Apndice B.1 Curvas de Calibrao para a Determinao da Concentrao de


Sacarose.

A concentrao de sacarose foi calculada da seguinte forma, considerando a Fig. B.1:

s (g/L) = 3,0905 Abs 1,9 diluio

em que Abs a mdia das absorbncias lidas para cada ponto experimental, e 1,9 o fator

s (g/L)

estequiomtrico.

4,5
4
3,5
3
2,5
2
1,5
1
0,5
0

s = 3,0905Abs
R2 = 0,9977

0,2

0,4

0,6

0,8

1,2

1,4

Abs (nm)
Figura B.1 Curva de calibrao utilizada nos experimentos em batelada com
s0 = 154 g/L, e batelada alimentada com sF = 218 g/L e te = 3h.

125

s (g/L)

Apndices_____________________________________________________________________________________________

4,5
4 s = 3,2253Abs
2
3,5 R = 0,9983
3
2,5
2
1,5
1
0,5
0
0
0,2
0,4

0,6

0,8

1,2

1,4

Abs (nm)

s (g/L)

Figura B.2 Curva de calibrao utilizada no experimento em batelada com s0


= 180,1 g/L.

4,5
4
3,5
3
2,5
2
1,5
1
0,5
0

s = 3,2284Abs
R2 = 0,9973

0,2

0,4

0,6

0,8

1,2

Abs (nm)
Figura B.3 Curva de calibrao utilizada no experimento em batelada com s0
= 195,6 g/L.

126

s (g/L)

__________________________________________________________________________Apndices

4,5
4
3,5
3
2,5
2
1,5
1
0,5
0

s = 3,1367Abs
2
R = 0,9946

0,2

0,4

0,6

0,8

1,2

1,4

Abs (nm)

s (g/L)

Figura B.4 Curva de calibrao utilizada nos experimentos em batelada


alimentada com sF = 218 g/L e te = 4 e 5 h; sF = 245 g/L e te = 3 h.

4,5
4
3,5
3
2,5
2
1,5
1
0,5
0

s = 3,1532Abs
R2 = 0,9989

0,2

0,4

0,6

0,8

1,2

1,4

Abs (nm)
Figura B.5 Curva de calibrao utilizada nos experimentos em batelada
alimentada com sF = 245 g/L e te = 4 e 5 h; sF = 285 g/L e te = 3 h.

127

s (g/L)

Apndices_____________________________________________________________________________________________

4,5
4
3,5
3
2,5
2
1,5
1
0,5
0

s = 3,1767Abs
R2 = 0,9963

0,2

0,4

0,6

0,8

1,2

1,4

Abs (nm)
Figura B.6 Curva de calibrao utilizada no experimento em batelada
alimentada com sF = 285 g/L e te = 4 e 5 h.

Apndice B.2 Curvas de Calibrao para a Determinao da Concentrao de


Etanol.

A concentrao de etanol foi calculada da seguinte forma, considerando a Fig. B.7:

p (g/L) = 13,367 Abs densidade diluio

em que Abs a mdia das absorbncias lidas para cada ponto experimental.

128

p (GL)

__________________________________________________________________________Apndices

9
8
7
6
5
4
3
2
1
0

p = 13,367Abs
2
R = 0,9973

0,1

0,2

0,3

0,4

0,5

0,6

0,7

Abs (nm)

p (GL)

Figura B.7 Curva de calibrao utilizada em todos os experimentos em


batelada e nos experimentos em batelada alimentada com sF = 218 g/L e te = 3,
4 e 5 h; sF = 245 g/L e te = 3h.

10
9
8
7
6
5
4
3
2
1
0

p = 13,473Abs
R2 = 0,9985

0,1

0,2

0,3

0,4

0,5

0,6

0,7

Abs (nm)
Figura B.8 Curva de calibrao utilizada nos experimentos em batelada
alimentada com sF = 245 g/L e te = 4 e 5 h; sF = 285 g/L e te = 3, 4 e 5h.

129

___________________________________________________________________________________________________________Anexo

ANEXO

MTODO DE ESTIMAO DOS PARMETROS DO MODELO


CINTICO:
EVOLUO DIFERENCIAL

O procedimento geral do mtodo de Evoluo Diferencial dado pelas seguintes etapas


(Storn & Price, 1995) (Fig. 1):

G G

9 gera-se uma populao inicial ( x1 , x2 e x3 ) com solues factveis para o problema


em questo, onde garante-se por regras de reparo que os valores atribudos s
variveis esto dentro das fronteiras delimitadas pelo projetista;

9 seleciona-se um indivduo ( x3 ), de forma aleatria, para ser substitudo. Trs

G G

diferentes indivduos so selecionados como genitores ( x1 , x2 e x3 ), sendo que um

destes selecionado como genitor principal ( x3 );


9 modifica-se cada varivel do genitor principal com alguma probabilidade;
9 adiciona-se ao valor atual da varivel (genitor principal) a diferena entre duas outras
variveis (genitores secundrios) ponderada por uma taxa de perturbao TP

( TPx4 = TP ( x1 x2 ) ). Este procedimento representa o operador de cruzamento na


Evoluo Diferencial;

9 se o vetor resultante ( x5 = x3 + TPx4 ) apresenta uma funo de aptido melhor que


o escolhido, ele o substitui; caso contrrio, o vetor escolhido para ser eventualmente
substitudo mantido na populao.

131

Anexo________________________________________________________________________________________________

f1

G
x1

G
G G
x4 = ( x1 x2 )
G
x5

G
x2

G
TPx4

G
x3

f2

Figura 1 Gerao dos indivduos da populao representados


por vetores no mtodo de Evoluo Diferencial.

Atravs da formulao matemtica, uma soluo l na ED, para a gerao w, um vetor

multidimensional x Gl =NP = x1l , x 2l ,..., x nl

. Uma populao PG =k na gerao G = k um vetor

de NP solues, onde NP > 4. A populao inicial PGl =0 = x 0l , x 0l ,..., x 0l

, gerada

inicialmente, com distribuio uniforme, adotando-se:

xGl =0 = Linf (x i ) + rand i (Lsup (x i ) Linf (x i ))

(1)

em que Linf (x i ) e Lsup (x i ) so os limites inferior e superior de valores admissveis para a


varivel xi, respectivamente; NP o tamanho da populao; N a dimenso da soluo e

rand i gera um nmero aleatrio, com distribuio uniforme, no intervalo entre 0 e 1. A


seleo realizada para selecionar quatro diferentes ndices de soluo r1 , r2 , r 3 e j
[1;NP]. Os valores de cada varivel, na soluo descendente (filha), so modificados com
uma mesma probabilidade de cruzamento, CR, para i N :

l
G=k

r3
r1
r2
xi,G=k
-1 +TP ( x i,G=k -1 - x i,G=k -1 ) se rand i CR
=
rj
xi,G=k
-1

sendo TP (0; 2) uma taxa de perturbao a ser adicionada a uma soluo escolhida
aleatoriamente denominada genitor (ancestral) principal. A nova soluo substitui a soluo

132

(2)

___________________________________________________________________________________________________________Anexo

anterior (antiga) caso seja melhor, e pelo menos uma das variveis modificada, esta
soluo representada na evoluo diferencial pela seleo aleatria de uma varivel [1;N].
O algoritmo implementado por Storn e Price (Storn e Price, 1995) possibilita ao usurio a
escolha do tipo de estratgia de cruzamento que ser utilizada durante a sua execuo. A
Tab. 1 mostra as possveis estratgias que podem ser adotadas.

Tabela 1 - Estratgias de cruzamento propostas por Storn e Price (1995).


1 - DE/best/1/exp
6 - DE/best/1/bin
2 - DE/rand/1/exp
7 - DE/rand/1/bin
3 - DE/rand-to-best/1/exp 8 - DE/rand-to-best/1/bin
4 - DE/best/2/exp
9 - DE/best/2/bin
5 - DE/rand/2/exp
10 - DE/rand/2/bin
A conveno geral usada DE/x/y/z. DE representa o mtodo, Evoluo Diferencial
(Differential Evolution), x o vetor que ser perturbado, y o nmero de vetores que so
utilizados para a perturbao de x, e z representa o tipo de cruzamento que ser utilizado
(exp=exponencial; bin=binomial).
A escolha dos valores dos parmetros NP, TP, CR no uma tarefa trivial e depende de
cada problema. Normalmente, NP em torno de 5 a 10 vezes o nmero de variveis do
problema. TP tomado como sendo um valor entre 0,4 a 2,0. Uma boa escolha para CR
0,1, mas em geral, CR pode ser to grande quanto possvel (Storn e Price, 1995).

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