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Gametognese

Gmeta feminino

Gmeta masculino

Oocito secundrio

Espermatozide

Oognese

Espermatognese

Fertilizao em mamferos - Viso geral -

Desenvolvimento
embrionrio
pr-implantao
Em suspenso,
acessvel
manipulao
humano

ratinho

Sinalizao molecular durante a implantao

Contudo por
vezes
implantao
ectpica

Transio da trofo-ectoderme para um fentipo invasivo

As tcnicas de contracepo libertaram o sexo


da associao com a reproduo

As tcnicas da Medicina da Reproduo trouxeram a


autonomizao da reproduo relativamente ao sexo

A vida ocidental (sbt urbana) actual veio


adicionar factores de infertilidade:

Causas de infertilidade

a idade da gestao adiada

Desenvolvimento
embrionrio
pr-implantao
Em suspenso,
acessvel
manipulao
humano

ratinho

O processo da fertilizao e o desenvolvimento pr-implantao


ocorrem em suspenso no interior do aparelho reprodutor feminino

Trompa de Falpio

ratinho
humano

Fertilizao e desenvolvimento pr-implantao em cultura

Estratgias da Reproduo Medicamente Assistida

Tcnicas de Reproduo Medicamente Assistida


Estimulao controlada da ovulao
Inseminao intra-uterina
Fertilizao in vitro (FIV)
Injeco intra-citoplasmtica de espermatozide (ICSI)
Congelamento de gmetas e embries
Transferncia de embries congelados (TEC)
Bipsia testicular para extraco de espermatozides (TESE)
Inseminao intra-uterina com esperma de dador
Doao de oocitos
Doao de embries
Bipsia embrionria e diagnstico gentico pr-implantao (PGD)

As tcnicas hoje disponveis em Medicina da


Reproduo permitem ultrapassar com sucesso a
maioria das situaes de Infertilidade Conjugal.

Tcnicas de Reproduo Medicamente Assistida


Estimulao controlada da ovulao
Inseminao intra-uterina
Fertilizao in vitro (FIV)
Injeco intra-citoplasmtica de espermatozide (ICSI)
Congelamento de gmetas e embries
Transferncia de embries congelados (TEC)
Bipsia testicular para extraco de espermatozides (TESE)
Inseminao intra-uterina com esperma de dador
Doao de oocitos
Doao de embries
Bipsia embrionria e diagnstico gentico pr-implantao (PGD)

As tcnicas hoje disponveis em Medicina da


Reproduo permitem ultrapassar com sucesso a
maioria das situaes de Infertilidade Conjugal.

Tcnicas de Reproduo Medicamente Assistida

Estimulao controlada da ovulao

Inseminao intra-uterina

Aumentam a possibilidade de
ocorrncia de fertilizao in vivo

Tcnicas de Reproduo Medicamente Assistida


Fertilizao in vitro (FIV)

Para ocorrer implantao:


1. Os gmetas tm de
viajar no ap. reprodutor
feminino
2. Tm de interagir no
processo da fertilizao
3. O desenvolvimento
embrionrio primplantatrio ocorre em suspenso ao longo do ap. reprodutor feminino

A FIV surgiu originalmente para fazer face a situaes


de infertilidade de causa feminina por ocluso tubria

A colheita de gmetas femininos realiza-se por


puno e aspirao folicular, com acesso
transvaginal, sob controlo ecogrfico

FIV Fertilizao in vitro

Tcnicas de Reproduo Medicamente Assistida


Fertilizao in vitro (FIV)
Injeco intra-citoplasmtica de espermatozide (ICSI)

Para fertilizarem o oocito,


os espermatozides:
1. Concentrao total
adequada
2. Fraco adequada de
formas mveis
3. Fraco adequada de
formas morfologicamente
normais

A ICSI (Intra-Cytoplasmic Sperm Injection) surgiu para fazer


face a alguns tipos de infertilidade de causa masculina

ICSI
Injeco intra-citoplasmtica de espermatozide

ICSI
Injeco intra-citoplasmtica de espermatozide

ICSI
Injeco intra-citoplasmtica de espermatozide

ICSI
Injeco intra-citoplasmtica de espermatozide

ICSI
Injeco intra-citoplasmtica de espermatozide

Tcnicas de Reproduo Medicamente Assistida


FIV ou ICSI
1-clula

Desenvolvimento pr-implantatrio humano

2-clulas

4-clulas

8-clulas

Blastocisto

In vivo em suspenso... In vitro em cultura...


Estratgias da Reproduo Medicamente Assistida

Resoluo de situaes
de Infertilidade

TESE
TEsticular Sperm Extraction

Congelamento
espermatozides
oocitos
embries (estadios pr-implantatrios)

TEC

Transferncia de embries congelados

Tcnicas de Reproduo Medicamente Assistida


Fertilizao in vitro (FIV)
Injeco intra-citoplasmtica de espermatozide (ICSI)
Bipsia testicular para extraco de espermatozides (TESE)
Congelamento de gmetas e embries
Transferncia de embries congelados (TEC)
Inseminao intra-uterina com esperma de dador
Doao de oocitos
Doao de embries
Bipsia embrionria e diagnstico gentico pr-implantao (PGD)

Tcnicas de Reproduo Medicamente Assistida


Estimulao controlada da ovulao
Inseminao intra-uterina
Fertilizao in vitro (FIV)
Injeco intra-citoplasmtica de espermatozide (ICSI)
Congelamento de gmetas e embries
Transferncia de embries congelados (TEC)
Bipsia testicular para extraco de espermatozides (TESE)
Inseminao intra-uterina com esperma de dador
Doao de oocitos
Doao de embries
Bipsia embrionria e diagnstico gentico pr-implantao (PGD)

Estudos de Biologia fundamental vieram demonstrar a grande


capacidade regulativa do desenvolvimento pr-implantatrio:

1. Podem ser retirados alguns


blastmeros, sem
consequncia para o
desenvolvimento
2. Podem ser produzidos
gmeos idnticos a partir da separao de blastmeros
em fases iniciais do desenvolvimento
Tcnicas
de anlise
molecular
em clula
nica

O diagnstico gentico pr-implantao (PGD)


permite estender as indicaes para Reproduo
Medicamente Assistida a casais frteis

PGD
Bipsia embrionria e
Diagnstico gentico pr-implantao

bipsia
embrionria

A Bipsia embrionria e o diagnstico


gentico pr-implantao (PGD) aproveitam
estes conhecimentos da Biologia Fundamental e
de tcnicas de anlise molecular em clula nica
para estender as indicaes para Reproduo
Medicamente Assistida a casais frteis

PGD
Bipsia embrionria e
Diagnstico gentico pr-implantao

bipsia
embrionria

Definio de Diagnstico Gentico Pr-Implantao (PGD)


Trata-se de um diagnstico pr-natal muito precoce em que embries
pr-implantao (ou oocitos) so biopsados durante a cultura, sendo
depois transferidos para a cavidade uterina os embries livres da
doena gentica em causa

PGD
Bipsia embrionria e
Diagnstico gentico pr-implantao

bipsia
embrionria

PGD
Bipsia embrionria e
Diagnstico gentico pr-implantao
ICSI

bipsia
embrionria

blastmeros

bipsia embrionria

diagnstico
(PCR / FISH)
afectados

Embrio biopsado

no
afectados
transferidos

no transferidos

congelados

Existem hoje tcnicas de Medicina


da Reproduo indicadas para
situaes de Fertilidade

Indicaes para Diagnstico Gentico Pr-Implantao


(PGD)

Semelhantes s para diagnstico pr-natal por BVC ou amniocentese


(se possveis em clula nica, evita-se ITG, mas necessita RMA):

1. Risco aumentado para anomalias cromossmicas


(translocaes e microdeleces)

2. Doenas monognicas
(ligadas ao X, autossmicas recessivas, autossmicas dominantes)

Capacidade regulativa do desenvolvimento pr-implantao:

Quimeras de agregao resultantes da agregao mrulas


de 8-clulas originam apenas 1 blastocisto

Clulas estaminais embrionrias (clulas ES)


O boto embrionrio de blastocistos isolado
e colocado em cultura origina clulas ES.

Para manterem a
pluripotencialidade as
clulas ES devem ser
cultivadas em condies
particulares, ainda mal
caracterizadas.

Clulas estaminais embrionrias


(clulas ES)

Produo de animais Knock-out

Clulas estaminais embrionrias (clulas ES)


Para obterem especificidade
as clulas ES devem ser
cultivadas noutras condies
particulares, ainda menos
caracterizadas.

Exemplo de clulas ES de ratinho

Transferncia
nuclear em zigotos

Transferncia
nuclear em zigotos

Os proncleos masculino e
feminino no so equivalentes

Genomic
imprinting
Os cromossomas
maternos regulam
o desenvolvimento
do embrio.
Os cromossomas
paternos regulam o
desenvolvimento
dos anexos
embrionrios.

Alguma
expresso
gentica precoce
depende do
genomic
imprinting

Mecanismo de formao
de molas hidatiformes
parciais
As molas hidatiformes parciais
contm 69 cromossomas
(triploidia), com dose dupla de
cromossomas paternos,
podendo o cariotipo ser 96XXX, 96-XXY ou 96-XYY.

Mecanismos de formao de molas hidatiformes completas


As molas hidatiformes completas contm 46 cromossomas, sempre de origem
paterna.
Geralmente o cariotipo 46-XX, sendo por vezes 46-XY.

Mecanismos
de formao
de gmeos
verdadeiros

Clonagem

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