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C A P T U LO 1

Hematopoese

Clulas hematopoticas-tronco e clulas progenitoras, 11

Receptores de fatores de crescimento e transduo de


sinais, 16

Estroma da medula ssea, 13

O ciclo celular, 17

Plasticidade das clulas-tronco, 14

Apoptose, 19

Regulao da hematopoese, 15

Fatores de transcrio, 20

Fatores de crescimento hematopoticos, 15

Molculas de adeso, 21

Locais de hematopoese, 11

Referncias, 21

Este primeiro captulo trata de aspectos gerais da


formao de clulas sangneas (hematopoese). So
tambm discutidos os processos que regulam a hematopoese e os estgios iniciais da formao de eritrcitos (eritropoese), de granulcitos e moncitos
(mielopoese) e de plaquetas (trombocitopoese).

Locais de hematopoese
Nas primeiras semanas da gestao, o saco vitelino o principal local de hematopoese. A hematopoese definitiva, entretanto, deriva de uma populao de clulas-tronco observada pela primeira
vez na aorta dorsal, designada regio AGM (aortagnadas-mesonefros). Acredita-se que esses precursores comuns s clulas endoteliais e hematopoticas (hemangioblastos) aninhem-se no fgado,
no bao e na medula ssea; de seis semanas at 6
a 7 meses de vida fetal, o fgado e o bao so os
principais rgos hematopoticos e continuam a
produzir clulas sangneas at cerca de duas seTabela 1.1
Feto

Lactentes
Adultos

Locais de hematopoese
0-2 meses (saco vitelino)
2-7 meses (fgado, bao)
5-9 meses (medula ssea)
Medula ssea (praticamente todos os ossos)
Vrtebras, costelas, crnio, esterno, sacro e
pelve, extremidades proximais dos fmures

manas aps o nascimento (Tabela 1.1) (ver Figura 6.1b). A medula ssea o stio hematopotico
mais importante a partir de 6 a 7 meses de vida
fetal e, durante a infncia e a vida adulta, a nica
fonte de novas clulas sangneas. As clulas em
desenvolvimento situam-se fora dos seios da medula ssea, enquanto as maduras so liberadas nos
espaos sinusais e na microcirculao medular e,
a partir da, na circulao geral.
Nos dois primeiros anos, toda a medula ssea
hematopotica, mas durante o resto da infncia
h substituio progressiva da medula dos ossos
longos por gordura, de modo que a medula hemopotica no adulto confinada ao esqueleto central
e s extremidades proximais do fmur e do mero
(Tabela 1.1). Mesmo nessas regies hematopoticas, cerca de 50% da medula composta de gordura (Figura 1.1). A medula ssea gordurosa remanescente capaz de reverter para hematopoese e,
em muitas doenas, tambm pode haver expanso
da hematopoese aos ossos longos. Alm disso, o
fgado e o bao podem retomar seu papel hematopotico fetal (hematopoese extramedular).

Clulas-tronco hematopoticas e
clulas progenitoras
A hematopoese inicia-se com uma clula-tronco
multipotente, que pode dar origem s distintas li-

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Figura 1.1 Bipsia de medula ssea normal (crista ilaca


posterior). Colorao por hematoxilina-eosina; aproximadamente 50% do tecido intertrabecular so hematopoticos, e 50%, gordura.

nhagens celulares. Essas clulas-tronco hematopoticas so escassas, talvez uma em 20 milhes


de clulas nucleadas da medula ssea. Embora o
fentipo exato seja desconhecido, ao exame imu-

nolgico, CD34 , CD38 e tem a aparncia de


um linfcito de tamanho pequeno ou mdio (ver
Figura 21.3). A diferenciao celular a partir da
clula-tronco hematopotica passa por uma etapa
de clulas progenitoras comprometidas, isto ,
com potencial de desenvolvimento restrito (Figura
1.2). A existncia de clulas progenitoras separadas para cada linhagem pode ser demostrada por
tcnicas de cultura in vitro. Clulas progenitoras
muito prematuras devem ser cultivadas a longo
prazo em estroma de medula ssea, ao passo que
clulas progenitoras tardias costumam ser cultivadas em meios semi-slidos. Um exemplo
o primeiro precursor mielide misto detectvel,
que origina granulcitos, eritrcitos, moncitos e
megaca-ricitos, chamado de CFU (unidade formadora de colnias)-GEMM (Figura 1.2). A medula ssea tambm o local primrio de origem
de linfcitos (Captulo 8) que se diferenciam de
um precursor linfoctico comum.

Clula-tronco
multipotente

CFUGEMM
Clula progenitora
mielide mista
Clula-tronco
linfide
CFUbaso
BFUE

CFUGMEo

Progenitor
de eritrides

CFUE

CFUMeg
Progenitor de
megacaricito

CFU-M

CFUGM
Progenitor
de granulcito
e moncito

CFUEo
Progenitor
de eosinfilo
Timo

CFU-G

B
Eritrcitos Plaquetas

Moncitos Neutrfilos

Eosinfilos Basfilos

Linfcitos

NK
Clulas NK

Figura 1.2 Diagrama mostrando a clula-tronco multipotente da medula ssea e as linhagens celulares que dela se originam. Vrias clulas progenitoras podem ser identificadas por cultura em meio semi-slido pelo tipo de colnia que formam. Baso = basfilo; BFU = exploso de unidade formadora; CFU = unidade formadora de colnia; E = eritride; Eo =
eosinfilo; GEMM = granulcito, eritride, moncito e megacaricito; GM = granulcito, moncito; Meg = megacaricito;
NK = clulas naturalmente citotxicas.

FUNDAMENTOS EM HEMATOLOGIA 13

Auto-renovao
Diferenciao e
desenvolvimento
(a)

Clulas
maduras
Clulas-tronco

Clulas progenitoras
reconhecidas por
tcnicas de cultura

Proliferao reconhecvel
de precursores
de medula ssea

(b)

Figura 1.3 (a) Com a diferenciao crescente, as clulas da medula ssea perdem a capacidade de auto-renovao medida que amadurecem. (b) Uma nica clula-tronco produz, depois de mltiplas divises (mostradas pelas linhas verticais),
< 106 clulas maduras.

A clula-tronco tem capacidade de autorenovao (Figura 1.3), de modo que a celularidade geral da medula permanece constante em
condies normais de sade. H considervel
ampliao no sistema; assim, uma clula-tronco,
depois de 20 divises celulares, capaz de pro6
duzir cerca de 10 clulas sangneas maduras
(Figura 1.3). As clulas precursoras, no entanto,
so capazes de responder a fatores de crescimento hematopotico com aumento de produo seletiva de uma ou outra linhagem celular de acordo com as necessidades. O desenvolvimento de

clulas maduras (eritrcitos, granulcitos, moncitos, megacaricitos e linfcitos) ser abordado em outras sees deste livro.

Estroma da medula ssea


A medula ssea forma um meio adequado para
crescimento e desenvolvimento de clulas-tronco,
o qual composto por clulas do estroma e de
uma rede microvascular (Figura 1.4). As clulas
do estroma incluem adipcitos, fibroblastos, clulas endoteliais e macrfagos e secretam molculas

Clula-tronco

Matriz
extracelular

Macrfago

Figura 1.4 A hematopoese ocorre em


microambiente adequado fornecido
pela matriz do estroma na qual as clulas-tronco crescem e se dividem. Provavelmente h reconhecimento especfico
e locais de adeso (p. 21); glicoprotenas extracelulares e outros componentes esto envolvidos na ligao.

Clula adiposa

Clula endotelial

Fibroblasto

Molcula de adeso

Ligante

Fator de crescimento

Receptor de fator de crescimento

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extracelulares, como colgeno, glicoprotenas (fibronectina e trombospondina) e glicosaminoglicanos (cido hialurnico e derivados condroitnicos)
para formar uma matriz extracelular, alm de secretarem vrios fatores de crescimento necessrios
sobrevivncia da clula-tronco. Clulas-tronco
mesenquimais so consideradas crticas na formao do estroma.
As clulas-tronco so capazes de circular no
organismo e so encontradas em pequeno nmero
no sangue perifrico. Para deixar a medula ssea,
as clulas devem atravessar o endotlio vascular,
e esse processo de mobilizao aumentado pela
administrao de citoquinas, como o fator estimulante de colnias granulocticas (G-CSF) ou o fator estimulante de colnias granuloctico-macrofgicas (GM-CSF) (p. 107). O processo reverso,
de volta ao lar (homing), parece depender de um
gradiente quimiocintico, no qual o fator derivado do estroma (SDF-1) crtico. Vrias interaes
crticas mantm a viabilidade das clulas-tronco e
a produo no estroma de fator de clulas-tronco

(SCF) e protenas Jagged expressas no estroma, e


seus respectivos receptores c-Kit e Notch, expressos em clulas-tronco.

Plasticidade das clulas-tronco


H evidncias crescentes de que as clulas-tronco
do adulto, em diferentes rgos, so multipotentes
e podem gerar vrios tipos de tecidos (Figura 1.5).
Estudos sobre pacientes e animais que receberam
transplante de clulas-tronco hematopoticas (Captulo 21) sugeriram que essas clulas podem contribuir para tecidos, tais como nervoso, heptico
e muscular. A contribuio de clulas da medula
ssea de doadores adultos a tecidos no-hematopoticos, se houver, pequena. A persistncia
de clulas pluripotentes na vida ps-natal, clulas-tronco rgo-especficas e fuso das clulas
transplantadas com clulas do hospedeiro foram
propostas, entretanto, como explicao alternativa
de muitos resultados sugestivos de plasticidade da
clulas-tronco.

Clula totipotente

(a) Clulas-tronco embrionrias

Clulas mielides
e linfides
Fgado, etc.

Clula-tronco
epitelial
Clula-tronco
hemopotica

Msculo,
tendo,
cartilagem,
etc.
Clula-tronco
mesenquimal
(b) Clulas-tronco adultas

Tecido
nervoso

Clula-tronco
nervosa

Figura 1.5 (a) Clulas no embrio


recm-formado so capazes de gerar todos os tecidos do organismo
e so designadas totipotentes. (b)
Clulas-tronco especializadas do
adulto, da medula ssea, dos tecidos
nervoso, epitelial e outros, originam
clulas diferenciadas do mesmo tecido e, possivelmente, outros tecidos (ver texto).

FUNDAMENTOS EM HEMATOLOGIA 15

Regulao da hematopoese
A hematopoese comea com a diviso de uma
clula-tronco: uma das clulas-filhas substitui a
clula-me, como clula-tronco (auto-renovao), e a outra compromete-se em uma linha de
diferenciao. Essas clulas progenitoras comprometidas precocemente expressam baixos nveis de
fatores de transcrio, que podem comprometlas a linhagens especficas. A seleo da linhagem
de diferenciao pode depender tanto de alocao
aleatria como de sinais externos recebidos pela
clula progenitora. Foram isolados vrios fatores de transcrio que regulam a diferenciao
ao longo das principais linhagens celulares. Por
exemplo, PU.1 compromete clulas para a linhagem mielide, enquanto GATA-1 tem um papel
essencial na diferenciao eritropotica e megacarioctica.

Fatores de crescimento
hematopoticos
Os fatores de crescimento hematopoticos so hormnios glicoproticos que regulam a proliferao
e a diferenciao das clulas progenitoras hematopoticas e a funo das clulas sangneas maduras. Podem agir no local em que so produzidos por
contato clula a clula ou circular no plasma. Tambm podem ligar-se matriz extracelular, formando
nichos aos quais aderem as clulas-tronco e as progenitoras. Os fatores de crescimento podem causar
no s proliferao celular, mas tambm podem estimular diferenciao, maturao, prevenir apoptose
e afetar as funes de clulas maduras (Figura 1.6).
Os fatores de crescimento compartilham
um certo nmero de propriedades (Tabela 1.2) e
agem em diferentes etapas da hematopoese (Tabela 1.3 e Figura 1.7).

Clula inicial

Proliferao

G-CSF

Moncito

Diferenciao
G-CSF

Neutrfilo

Supresso
da apoptose

Figura 1.6 Os fatores de crescimento podem estimular a proliferao de


clulas primitivas da medula ssea, dirigir a diferenciao para um ou outro
tipo de clula, estimular a maturao
celular, suprimir a apoptose e afetar a
funo de clulas maduras que no se
dividem, como ilustrado nesta figura
para G-CSF, no caso de um progenitor
primitivo mielide e de um neutrfilo.

G-CSF

G-CSF

Maturao

Clula final
Ativao
funcional

G-CSF

Ativao de
fagocitose,
destruio,
secreo

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Tabela 1.2 Caractersticas gerais dos fatores de


crescimento mielides e linfides
Glicoprotenas que agem em concentraes muito baixas
Atuam hierarquicamente
Em geral, produzidos por muitos tipos de clulas
Em geral, afetam mais que uma linhagem
Em geral, ativos nas clulas-tronco/progenitoras e nas
clulas funcionais finais
Em geral, tm interaes sinrgicas ou aditivas com outros
fatores de crescimento
Quase sempre agem no equivalente neoplsico da clula
normal
Aes mltiplas: proliferao, diferenciao, maturao,
ativao funcional, preveno de apoptose de clulas
progenitoras
Tabela 1.3

Fatores de crescimento hematopotico

Agem nas clulas do estroma


IL-1
TNF
Agem nas clulas-tronco pluripotentes
SCF
Flt-L
Agem nas clulas progenitoras multipotentes
IL-3
GM-CSF
IL-6
G-CSF
Trombopoetina
Agem em clulas progenitoras comprometidas
G-CSF*
M-CSF
IL-5 (CSF-eosinfilo)
Eritropoetina
Trombopoetina*
Flt-L = Flt ligante; G e GM-CSF = granulcito e fatores
estimulantes de colnias granuloctico-macrofgicas;
IL = interleucina; M-CSF = fator estimulante de colnias
macrofgicas; SCF = fator de clula-tronco; TNF = fator de
necrose tumoral.
*Trombo = estes tambm agem sinergicamente com fatores anteriormente ativos em progenitores pluripotentes.

Clulas do estroma so as principais fontes de


fatores de crescimento, com exceo da eritropoetina, 90% da qual so sintetizados no rim, e da
trombopoetina, sintetizada principalmente no fgado. Um aspecto importante da ao dos fatores de
crescimento que podem agir sinergicamente no
estmulo a proliferao ou diferenciao de uma
clula em particular; alm disso, a ao de um fa-

tor de crescimento em uma clula pode estimular a


produo de outro fator de crescimento ou de um
receptor de fator. O fator de clulas-tronco (SCF) e
o ligante Flt (Flt-L) agem localmente nas clulastronco multipotentes e nos progenitores precoces
mielides e linfides (Figura 1.7). A interleuquina
3 (IL-3) e o GM-CSF so fatores de crescimento
multipotenciais com atividades superpostas. GCSF e trombopoetina aumentam os efeitos de SCF,
Flt-L, IL-3 e GM-CSF na sobrevida e na diferenciao das clulas hematopoticas primitivas.
Esses fatores mantm um pool de clulastronco e clulas progenitoras hematopoticas, sobre o qual agem fatores de ao tardia (eritropoetina, G-CSF, M-CSF, IL-5 e trombopoetina) para
aumentar a produo de uma ou outra linhagem,
em resposta s necessidades do organismo. A formao de granulcitos e moncitos, por exemplo,
pode ser estimulada por infeco ou inflamao
por meio da liberao de IL-1 e fator de necrose
tumoral (TNF), os quais, por sua vez, estimulam
clulas do estroma produo de fatores de crescimento em uma rede interativa (ver Figura 7.4).
Contrariamente, citoquinas como o fator de crescimento transformador (TGF-) e o interferon-
(IFN-) podem exercer um efeito negativo na hematopoese e podem ter um papel no desenvolvimento de anemia aplstica (p. 253-254).

Receptores de fatores de
crescimento e transduo de sinal
Os efeitos biolgicos dos fatores de crescimento
so mediados por receptores especficos nas clulas-alvo. Muitos receptores (p. ex., receptor de
eritropoetina [epo-R], GM-CSF-R) pertencem
superfamlia dos receptores hematopoticos, que
dimerizam aps conectarem-se a seus ligantes.
A dimerizao do receptor leva ativao
de uma complexa srie de vias de transduo de
sinais intracelulares: as trs principais so a via
JAK/STAT, a via proteinoquinase ativada por mitognio (MAP) e a via fosfatidilinositol 3 (PI3)
quinase (Figura 1.8; ver tambm Figura 19.2). As
proteinoquinases Janus-associadas (JAK) so uma
famlia de quatro proteinoquinases tirosina-especficas que se associam aos domnios intracelulares
dos receptores de fatores de crescimento (Figura
1.8). Uma molcula de fator de crescimento liga-

FUNDAMENTOS EM HEMATOLOGIA 17

SCF
PSC
IL-3

IL-3
TPO
CFUGEMM

GM-CSF

GM-CSF

BFUEMeg
CFUGMEo
BFUE

EPO

CFUMeg

CFUGM
M-CSF

CFUEo
G-CSF
IL-5

CFUE

Eritrcitos

Plaquetas

CFUM

CFUG

Moncitos

Neutrfilos

Eosinfilos

Figura 1.7 Diagrama do papel dos fatores de crescimento na hematopoese normal. Fatores mltiplos de crescimento
agem nas clulas-tronco primitivas e progenitoras da medula ssea. EPO = eritropoetina; PSC = clula-tronco multipotente; SCF = fator de clula-tronco; TPO = trombopoetina. Para outras abreviaes, veja a Figura 1.2.

se simultaneamente ao domnio extracelular de


duas ou trs molculas receptoras, causando sua
agregao. A agregao dos receptores induz a ativao dos JAKs, que, ento, fosforilam membros
do transdutor de sinal e do ativador de transcrio da famlia dos fatores de transcrio. A conseqncia a dimerizao e translocao destes,
do citoplasma para o ncleo, atravs da membrana
nuclear. Dentro do ncleo, dmeros STAT ativam a
transcrio de genes especficos. Um modelo para
o controle da expresso gnica por um fator de
transcrio mostrado na Figura 1.9. A importncia clnica dessa via comprovou-se pelo achado de
uma mutao ativando o gene JAK2 como causa
da policitemia vera (p. 240).
JAK tambm pode ativar a via MAPK, que
regulada por Ras e controla a proliferao. Quinases PI3 fosforilam lipdeos do inositol, os quais
tm um amplo espectro de efeitos em seqncia
incluindo ativao de AKT (proteinoquinase B)
, causando bloqueio da apoptose e outras aes
(Figura 1.8; ver tambm Figura 19.2). Domnios
diferentes da protena receptora intracelular po-

dem sinalizar para diferentes processos, como


proliferao ou supresso da apoptose, mediados
por fatores de crescimento.
Um segundo grupo, menor, de fatores de crescimento, incluindo SCF, Flt-3L e fatores estimulantes de colnias macrofgicas (M-CSF) (Tabela
1.3), liga-se a receptores que tm um domnio extracelular semelhante ao das imunoglobulinas, ligado por uma ponte transmembrana a um domnio
tirosinoquinase citoplsmico. A ligao de fatores
de crescimento resulta na dimerizao desses receptores e na conseqente ativao do domnio
de tirosinoquinase. A fosforilao de resduos de
tirosina no prprio receptor gera stios de ligao
para protenas sinalizadoras, que iniciam complexas cascatas de eventos bioqumicos, resultando
em alteraes na expresso gnica, na proliferao celular e na preveno da apoptose.

O ciclo celular
O ciclo de diviso celular, em geral designado
simplesmente como ciclo celular, um processo

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Fator de crescimento

Membrana plasmtica
Quinase Pl3
JAK
AKT
JAK
STATs

Apoptose
bloqueada

RAS
RAF

MAP-quinase

Dmeros ativos de STAT

Ncleo

Figura 1.8 Controle da hematopoese por fatores de crescimento. Os


fatores agem em clulas que expressam o receptor correspondente. A ligao de um fator de crescimento a
seu receptor ativa as vias JAK/STAT,
MAPK e PI3K (ver Figura 19.2), o
que provoca ativao transcripcional de genes especficos. E2F um
fator de transcrio necessrio para
a transio celular da fase G1 para a
S. E2F inibido pelo gene supressor tumoral Rb (retinoblastoma), o
qual pode ser ativado indiretamente
por p53. A sntese e a degradao de
certas ciclinas (Figura 1.10) estimula a clula a passar pelas diferentes
fases do ciclo celular. Os fatores
de crescimento tambm podem suprimir a apoptose pela ativao de
AKT (proteinoquinase B).

MYC, FOS
M

Expresso
gnica

Ativao da
expresso gnica

G2

G1

E2F

Rb

p53
Dano no DNA

Domnio de
transativao
Domnio de
ligao com DNA

Amplificador de
seqncia de DNA

RNA-polimerase
+
fatores acessrios

Transcrio

Caixa de seqncia
TATA (promotor)

Gene
estrutural

Figura 1.9 Modelo para controle


de expresso gnica por fator de
transcrio. O domnio de ligao
com DNA de um fator de transcrio liga uma seqncia amplificadora especfica adjacente a um gene
estrutural. O domnio de transativao ento liga uma molcula de
RNA-polimerase, aumentando sua
ligao com a caixa TATA. A RNApolimerase inicia a transcrio do
gene estrutural para formar RNA
mensageiro. A translao do mRNA
pelo ribossomo gera a protena codificada pelo gene.

FUNDAMENTOS EM HEMATOLOGIA 19

complexo que se situa no core da hematopoese.


Disfuno da proliferao celular tambm a chave do desenvolvimento de neoplasias malignas. A
durao do ciclo celular varia de tecido a tecido,
mas os princpios bsicos so comuns a todos. O
ciclo dividido em uma fase mittica (fase M),
durante a qual a clula divide-se fisicamente, e
uma interfase, durante a qual os cromossomos
duplicam-se e a clula cresce antes da diviso
(Figura 1.10). A fase M subdividida em mitose,
na qual divide-se o ncleo, e citoquinese, em que
ocorre a fisso celular.

Fase M

M
Cdk2

G0
G1

G2
Ciclina
B

Cdk2
Ciclina
E

S
Cdk2

Ciclina
A

A interfase dividida em trs estgios principais: uma fase G1, na qual a clula comea a
orientar-se no sentido da replicao, uma fase
S durante a qual duplica-se o contedo de DNA
(Figura 1.10b) e os cromossomas replicam-se,
e a fase G2, na qual as organelas so copiadas e
aumenta o volume citoplasmtico. Se as clulas
repousarem antes da diviso, elas entram em um
estgio G0 , em que podem permanecer por longos
perodos. O nmero de clulas em cada estgio do
ciclo pode ser avaliado pela exposio da clula a
um agente qumico ou marcador radioativo que se
incorpore ao DNA recm-formado ou por citometria em fluxo.
O ciclo celular controlado em dois checkpoints, que agem como freios para coordenar
o processo de diviso no fim das fases G1 e G2.
Duas classes principais de molculas controlam
esses checkpoints, proteinoquinases ciclina-dependentes (Cdk) que fosforilam alvos proticos
em seqncia e ciclinas, que se ligam s Cdks e
regulam sua atividade. Um exemplo da importncia desses sistemas demonstrado pelo linfoma
de clulas do manto, que resulta da ativao constitucional da ciclina D1, como resultado de uma
translocao cromossmica (p. 222).

Interfase

(a)

Contedo de DNA

Apoptose
4c

2c

(b)

G1

G2 M

Fase do ciclo celular

Figura 1.10 (a) Estgios do ciclo celular. A progresso


atravs do ciclo celular regulada por combinaes especficas de proteinoquinases ciclina-dependentes (Cdk)
e proteinociclinas. A sntese e degradao de diferentes
ciclinas estimula a clula a passar atravs das diferentes
fases do ciclo, embora o papel exato de cada heterodmer
ainda no esteja estabelecido. (b) Relao entre o contedo de DNA da clula, expresso em unidades arbitrrias
como 2c aumentando para 4c, e sua posio no ciclo celular. (Adaptada de Wickramasinghe S.N. [1975] Human
Bone Marrow, Blackwell Scientific, Oxford, p. 13)

A apoptose um processo regulado de morte celular fisiolgica no qual as clulas so estimuladas


a ativar protenas intracelulares que levam sua
morte. Morfologicamente, caracterizada por encolhimento celular, condensao da cromatina nuclear, fragmentao do ncleo e quebra do DNA
em stios internucleossmicos. um processo importante de manuteno da homeostasia tecidual na
hematopoese e no desenvolvimento de linfcitos.
A apoptose resulta da ao de proteases de cistena intracelulares, chamadas de caspases, que so
ativadas depois da clivagem e levam digesto de
DNA por endonuclease e desintegrao do esqueleto celular (Figura1.11). H duas vias principais
pelas quais as caspases so ativadas. A primeira
a sinalizao por meio de protenas da membrana
como Fas ou receptor de TNF via seu domnio de
morte intracelular. Um exemplo desse mecanismo
mostrado por clulas T citotxicas ativadas que
expressam ligante Fas que induz apoptose em c-

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Fator de morte,
p. ex., ligante Fas

APOPTOSE

Caspases
Liberao de
citocromo c

Domnio
de morte

Procaspases
Protena
BAX aumentada

Inibe

BCL-2
BCL-2
aumentada

p53

Expresso
do gene BAX
Dano
ao DNA

Drogas citotxicas
Radiao
Fator de sobrevivncia,
p. ex., fator de crescimento

lulas-alvo. A segunda via faz-se pela liberao de


citocromo c das mitocndrias. O citocromo c ligase Apaf-1 que, ento, ativa as caspases. O dano
ao DNA induzido por irradiao ou por quimioterapia pode agir por essa via. A protena p53 tem
um papel importante em sentir quando h dano
ao DNA. Ela ativa a apoptose, aumentando o nvel
celular de BAX, que aumenta a liberao de citocromo c (Figura 1.11) e bloqueia o ciclo celular,
impedindo que a clula lesada se divida (Figura
1.8). O nvel celular de p53 rigidamente controlado por uma segunda protena, MDM2. Depois da
morte, as clulas apoptticas expem molculas
que levam sua digesto pelos macrfagos.
Tal como as molculas que medeiam apoptose, h vrias protenas intracelulares que protegem as clulas contra a apoptose. O exemplo
mais bem-caracterizado a BLC-2, que o prottipo de uma famlia de protenas relacionadas,
algumas das quais so antiapoptticas, e outras,
como a BAX, so pr-apoptticas. A relao intracelular de BAX e BCL-2 determina a suscetibilidade relativa das clulas apoptose e pode
agir pela regulao da liberao de citocromo c
pelas mitocndrias.

Figura 1.11 Representao da apoptose. A apoptose iniciada via dois estmulos principais: (i) sinal atravs de
receptores da membrana celular como
receptor de Fas ou fator de necrose
tumoral (TNF) ou (ii) liberao de citocromo c da mitocndria. Os receptores de membrana sinalizam apoptose
por um domnio intracelular de morte
levando ativao de caspases que
digerem DNA. O citocromo c ligase protena citoplasmtica Apaf-1,
levando ativao de caspases. A relao intracelular de pr-apoptticos
(p. ex., BAX) e antiapoptticos (p.
ex., BCL-2) da famlia BCL-2 pode
influenciar a liberao de citocromo c.
Os fatores de crescimento aumentam o
nvel de BCL-2, que inibe a liberao
de citocromo c, enquanto o dano de
DNA, ativando a p53, aumenta o nvel
de BAX, que, por sua vez, aumenta a
liberao de citocromo c.

Muitas alteraes genticas associadas a doenas malignas diminuem o ndice de apoptose e prolongam a sobrevida celular. O exemplo mais claro
a translocao do gene da BCL-2 para o locus da
cadeia pesada de imunoglobulina na translocao
t(14;18) no linfoma centro-folicular. A superexpresso da protena BCL-2 torna as clulas B malignas menos suscetveis apoptose. Apoptose o
destino normal da maioria das clulas B que so
selecionadas nos centros germinativos linfides.
Vrias translocaes que levam fuso de
protenas como t(9;22), t(1;14) e t(15;17) tambm
resultam em inibio da apoptose (Captulo 10).
Alm disso, genes que codificam protenas envolvidas na mediao da apoptose quando h dano
ao DNA, como a p53 e a ATM, tambm sofrem
mutaes freqentes e podem ficar inativos em
doenas hematopoticas malignas.

Fatores de transcrio
Fatores de transcrio regulam a expresso gnica
pelo controle da transcrio de genes especficos
ou de famlias de genes. Tipicamente contm ao

FUNDAMENTOS EM HEMATOLOGIA 21

menos dois domnios: um domnio de ligao ao


DNA, como um zper de leucina ou hlice-alahlice que se liga a uma seqncia especfica do
DNA, e um domnio de ativao, que contribui
para a montagem do complexo de transcrio em
um gene promotor.

Molculas de adeso
Uma grande famlia de molculas de glicoprotenas, chamadas molculas de adeso, medeia a
ligao de clulas precursoras da medula, leuccitos e plaquetas a vrios componentes da matriz
extracelular, ao endotlio, a outras superfcies e
umas s outras. As molculas de adeso na superfcie de leuccitos so denominadas receptores e
interagem com molculas (chamadas ligantes) na
superfcie de clulas-alvo potenciais. H trs famlias principais:
1. Superfamlia de imunoglobulinas. Inclui
receptores que reagem com antgenos (receptores de clulas T e imunoglobulinas) e molculas superficiais de adeso independentes de
antgenos.
2. Selectinas. So principalmente envolvidas na
adeso de leuccitos e plaquetas ao endotlio
na inflamao e na coagulao.
3. Integrinas. So envolvidas na adeso celular
matriz extracelular, por exemplo, ao colgeno na cicatrizao de feridas e na adeso de
leuccitos e de plaquetas.
As molculas de adeso so importantes no
desenvolvimento e na manuteno da resposta
inflamatria e imunolgica e nas interaes de
plaquetas e leuccitos com a parede dos vasos. A
expresso de molculas de adeso pode ser modificada por fatores extra e intracelulares, e essa
alterao pode ser quantitativa ou funcional. A
expresso dessas molculas pode ser aumentada
por IL-1, TNF, interferon-, ativao de clula T,
adeso a protenas extracelulares e infeco viral.
O padro de expresso das molculas de
adeso em clulas tumorais pode determinar seu

modo de disseminao e a localizao tecidual,


por exemplo, o padro de metstases de clulas
carcinomatosas e de clulas de linfomas em padro folicular ou difuso. As molculas de adeso tambm podem determinar que as clulas
circulem na corrente sangnea ou permaneam
fixas no tecido. H, tambm, a possibilidade de
determinarem parcialmente a suscetibilidade de
clulas tumorais s defesas imunolgicas do organismo.

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