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I. Medicina Transfusional:
La Medicina transfusional es la ciencia que tiene por objeto la conservacin y el
restablecimiento de la salud apoyada en la teraputica transfusional, una parte de la
medicina que ensea el modo de tratar las enfermedades proporcionando los
elementos sanguneos celulares y/o plasmticos que el enfermo requiera. La
teraputica transfusional puede ser de gran valor para mantener o salvar una vida.
Como tratamiento definitivo, su uso puede condicionar efectos adversos, por lo que
su indicacin debe considerarse muy cuidadosamente en funcin de la relacin
riesgo-beneficio. En la medicina transfusional, la sangre puede ser considerada un
medicamento, ya que para su obtencin y procesamiento deben seguirse las normas
de buenas prcticas de manufactura. Se obtiene a travs de donaciones voluntarias
de sangre realizadas en los bancos de sangre luego de la seleccin del donante. Esta
sangre debe ser colectada por personal entrenado y bajo la supervisin de un mdico
hematlogo.
El concepto actual de medicina transfusional no hace mencin solo de la transfusin
de componentes sanguinios sino que abraza tambin otras actividades como el
trasplantamiento de precursores hematopoticos, la terapia celular y tisular, y la
inmunoterapia. Adems, la medicina transfusional se apoya en laboratorios cada vez
ms sofisticados para minimizar los riesgos de transmisin de enfermedades,
maximizar la compatibilidad de celulas y tejidos y averiguar las causas de las
reacciones adversas inmunolgicas o no.
III.
Banco de Sangre
Es el establecimiento autorizado para
obtener, recolectar, conservar, aplicar
y proveer sangre humana, as como
para analizar y conservar, aplicar y
proveer componentes de la misma.
La funcin del banco de sangre es
determinar quin es el donador ideal
y detectar las unidades infectantes.
Tambin es el encargado de recibir a
los donantes, procesar, almacenar y
distribuir
la
sangre
y
sus
componentes.
IV. Hematologa:
La hematologa es la rama de la ciencia mdica que se encarga del estudio de los
elementos formes de la sangre y sus precursores, as como de los trastornos
estructurales y bioqumicos de estos elementos, que puedan conducir a una
enfermedad.
En esta rama de la ciencia mdica se apoyan todas las especialidades y no hay quien
no haya solicitado alguna vez un examen hematolgico para determinar el estado de
salud o enfermedad de una persona. Por ello es importante que el mdico y quienes
apoyan su labor conozcan a fondo el tejido hemtico y las sustancias que contiene,
pues de su composicin depende la funcin de todos los dems tejidos. Con los
avances de la tecnologa biomdica, es posible tratar la mayora de las enfermedades
ya sea para curarlas o atenuar los efectos que ellas ocasionan en el organismo.
II. Hemoterapia
La Hemoterapia es la parte de la medicina que
se ocupa del tratamiento de diferentes cuadros
clnicos mediante el empleo de sangre o sus
derivados como medio teraputico.
Su objetivo principal es la obtencin de
productos sanguneos para transfundirlos de
manera segura, eficaz y eficiente. Hasta hace
relativamente poco tiempo la transfusin de
sangre se refera casi exclusivamente al
empleo de la sangre total. Actualmente el
concepto de transfusin es ms especfico,
tendiendo en la hemoterapia moderna a
transfundir solo y exclusivamente aquella
fraccin o componente sanguneo que se
precise.
V. Inmunohematologa:
Es la parte de la hematologa que estudia a los sistemas sanguneos as como a las
complicaciones inmunolgicas que estn implicados.
La Inmunohematologa es la parte de la hematologa que estudia los procesos
inmunitarios que tienen lugar en el organismo en relacin con los elementos
sanguneos.
VI.Recoleccin de Sangre:
La recoleccin de sangre debe practicarse mediante mtodos aspticos, utilizando un
sistema cerrado de bolsas plsticas, estril y desechable, haciendo una puncin
venosa. Hasta hace algunos aos, los bancos de sangre slo contaban con sangre
completa; con el avance tecnolgico ha sido posible obtener la separacin de sus
componentes, de manera que en la actualidad se puede transfundir,
independientemente, cada uno de ellos. El desarrollo de bolsas plsticas para la
recoleccin de sangre y de sistemas de refrigeracin y aparatos de centrifugacin de
alta velocidad, ha permitido que la sangre pueda ser separada en sus diferentes
componentes, segn la temperatura de mantenimiento, y la velocidad, temperatura y
tiempo de centrifugacin seleccionados. Estos componentes difieren no solamente
en su mtodo de obtencin, sino tambin en sus usos, que dependen de los factores
de coagulacin que contienen y otras actividades que poseen.
VII. La sangre y sus componentes:
La sangre es un tejido formado por clulas o elementos formes como glbulos rojos,
glbulos blancos y plaquetas (45% del volumen total) y una parte lquida llamada
plasma (55% del volumen total), de color mbar, constituido por agua (90%),
electrolitos, protenas, anticuerpos, hormonas, nutrientes y productos del
metabolismo de los diferentes tejidos corporales. Cada uno de los elementos de la
sangre cumple una funcin crucial para mantener el buen estado de salud. Sus
deficiencias o excesos ocasionan trastornos en el equilibrio homeosttico que
determinan el estado de enfermedad de diverso grado de severidad.
FACTORES DE
COAGULACION QUE
CONTIENE
Todos( I al XIII )
Plasma congelado
Plasma sobrenadante de
crioprecipitado
Crioprecipitado
OTRAS
ACTIVIDADES
Plasmingeno,
Antitrombina III,
Inhibidores, Fibronectina.
Igual
Igual, fibronectina
descendida
Antitrombina
I. Antecedentes histricos:
Si bien la conciencia ritual del significado tan valioso de la sangre en otras culturas
data desde tiempos muy remotos, la concientizacin como transfusin tiene sus
orgenes a partir del siglo XV con el Papa Inocencio VIII, a quien se le transfundi
sangre. Este hecho fue muy importante para impulsar las transfusiones. La intencin
de transfundir sangre para determinado fin fue un hecho, ms la confirmacin de
como se transfundi la misma jams se pudo conocer. Lo cierto es que hubo una
concientizacin de la necesidad de donar sangre de un individuo a otro para
preservar la vida. As empez la donacin de sangre y todo lo que esto conlleva.
La administracin intravenosa de medicamentos se hizo por vez primera en 1656
con Christopher Wren.
Los franceses, durante el siglo XVII, en tiempos de Luis XIV, lo practicaban. Jean
Baptiste Dennis se atrevi a transfundir, en humanos, sangre de cordero, pero en
algunos casos fracas y entonces fue demandado, hasta que los tribunales
decidieron, despus de tantas demandas, la prohibicin de estas prcticas, atrasando
el avance de la Medicina Transfusional durante varios siglos.
Sin embargo, aos ms tarde, en 1835, James Blundell obtuvo logros al transfundir
en pacientes del rea ginecolgica sangre de paciente a paciente.
III.
IV. Crioprecipitados:
En 1965, Judith Pool inform que si el plasma fresco congelado se descongelaba en
el refrigerador, el crioprecipitado que se formaba contena ms concentracin del
factor VIII de la coagulacin, que el plasma fresco original. Esto hizo posible
administrar a los hemoflicos grandes dosis del factor VIII en un concentrado y
abri una gran posibilidad teraputica para estos pacientes.
V. Hemovigilancia:
Actualmente se tiene mucha vigilancia en los bancos de sangre sobre el control de
donadores ya conocidos. Esto se realiza por personal especializado, con amplia
experiencia en el control de calidad. Se han impuesto mecanismos de proteccin
para evitar la transmisin de sfilis, hepatitis, paludismo y otras infecciones
transmisibles. La clnica, la aplicacin de pruebas serolgicas, los descubrimientos
en inmunohematologa, los diversos estudios de tamizaje, la aplicacin de rayos
gamma, los estudios inmunolgicos de injerto contra husped as como mltiples
innovaciones y descubrimientos biotecnolgicos han facilitado enormemente la
seguridad en los bancos de sangre.
I. Concepto:
La transfusin sangunea es un procedimiento mdico teraputico que tiene como
objetivo corregir la deficiencia de un componente especfico de la sangre, en lo que
respecta a la capacidad de transporte de oxgeno (componente eritrocitario) o con
relacin a la funcin hemosttica (plaquetas y/o factores de coagulacin).
II. Principios generales para la administracin de hemocomponentes:
La transfusin sangunea, por ser un procedimiento mdico de gran responsabilidad,
se basa en una serie de principios y pautas generales debidamente ordenadas, con la
finalidad de estandarizar su aplicacin, los mismos que se describen a continuacin:
1. Etapa pre-transfusional:
El mdico tratante deber hacer una evaluacin racional y responsable de la
necesidad de administrar un hemocomponente, teniendo como parmetro
principal el estado clnico del paciente y no solo un simple valor de
laboratorio.
Comunicar al paciente o apoderado la necesidad teraputica de la transfusin
as como solicitarle la firma del consentimiento informado.
Emisin de la solicitud transfusional, la que debe ser llenada adecuadamente,
con letra legible, sello y firma del mdico tratante, la misma que ser
entregada al Banco de Sangre, requisito obligatorio y previo a la transfusin.
Realizacin en el Banco de Sangre de la Prueba de Compatibilidad (prueba
cruzada mayor), procedimiento tcnico que tiene por finalidad detectar
anticuerpos en el suero del paciente receptor contra algn antgeno en los
hemates de la unidad a transfundir; ste procedimiento dura 01 hora
aproximadamente, y solo est indicado cuando el hemocomponente
solicitado es paquete glogular (PG), para los dems hemocomponentes se
administran directamente unidades ABO compatibles. En caso de emergencia
se podr solicitar el hemocomponente sin prueba cruzada, lo que deber
constar en la solicitud transfusional.
En pacientes neonatos, para la prueba de compatibilidad es preferible usar el
suero de la madre, debido al pasaje pasivo de anticuerpos de la madre al feto
a travs de la placenta durante la gestacin y, adems, porque el neonato no
produce anticuerpos hasta los 04 meses de edad aproximadamente y por la
facilidad e inocuidad de obtener la muestra.
Preparacin (atemperamiento, alcuota, etc) del hemocomponente
compatible.
Entrega del mismo, con su respectiva ficha de Registro de transfusin
sangunea, para su inclusin en la historia clnica del paciente.
I. Concepto:
Se pueden definir los grupos sanguneos como caractersticas inmunoqumicas
presentes en la membrana de los eritrocitos de algunos de los miembros de la
especie y ausentes en otros. Estas estructuras estn bajo estricto control gentico y
se heredan de acuerdo con las leyes de Mendel. Todos los mamferos poseen este
tipo de estructuras, por lo que son diferentes entre s y especialmente con animales
de otras especies. Los grupos sanguneos son caractersticas permanentes de los
individuos: se nace y se muere con ellos.
Estructura y funcin de los componentes de la membrana que representan a los sistemas de
grupos sanguneos eritrocitarios.
No.
001
002
003
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016
Sistemas
ABO
MNS
P
Rh
Lutheran
Kell
Lewis
Duffy
Kidd
Diego
Cartwirg
Xg
Scianna
Dombrock
Colton
LW
Estructuras
Carbohidratos
Glicoforina A y B
Carbohidratos
Polipptidos Rh
Super familia de las Ig
Glicoprotena
Carbohidratos
DARC
Glicoprotena
Banda 3
Acetilcolinesterasa
Glicoprotena (CD99)
Glicoprotena
Glicoprotena
Acuaporina-1
Superfamilia de las Ig (ICAM-4)
017
018
019
020
021
022
023
024
025
Chido/Rodger
H
Kx
Gerbich
Cromer
Knops
Indian
Ok
RAPH
Complemento C4A/C4B
Carbohidratos
Polipptido
Glicoforina C/D
DAF
CR1
CD44
Superfamilia de las Ig (CD147)
Desconocida
Funcin
Desconocida
Desconocida
Desconocida
Transportadores ?
Receptor de lamininas
Endopeptidasa ?
Ligando (s-Lex)
Receptor de citocinas
Transporte de urea
Intercambio de aniones
Desconocida en los hemates
Receptor
Desconocida
Desconocida
Canales de agua
Ligando
de
integrinas
CD11/CD18
Componentes del complemento
Desconocida
Transporte ?
Esquelticas de membrana
Regulador del complemento
Receptor del complemento
Receptor del hialuronato
Receptor
Desconocida
Interpretacin
Grupo ABO
0
A
B
AB
1. Fenotipos del sistema ABO: Los fenotipos dentro del sistema ABO destacan los
grupos sanguneos A, B, O y AB, que presentan una distribucin variable entre
los diferentes grupos raciales. Las determinaciones de este grupo incluyen el
empleo de reactivos hemoclasificadores anti-A, anti-B y anti-AB para la
deteccin de los antgenos especficos en los eritrocitos, as como la
determinacin de los anticuerpos sricos con el empleo de eritrocitos de fenotipo
ABO conocido.
Tipaje celular
Antgeno B adquirido asociado con
cncer gstrico y de colon
Presencia de gelatina de Wharton en
la sangre del cordn
Autoaglutinacin por autoanticuerpos
fros
Eritrocitos con PAD positiva
Reaccin
negativa
inesperada
Fenmeno de poliaglutinacin
Anticuerpos contra la acriflavina
usada como colorante del anti-B
Trasplante de mdula sea
Reaccin transfusional
ABO incompatible
Subgrupos de A y B
Depresin de los antgenos ABO
en la leucemia y otras enfermedades
Aumento de sustancia ABO soluble
en el plasma asociada con quiste de
ovario seudomucinoso
Grupo reverso
Aumento de protenas en el
plasma
Presencia de aloanticuerpos,
por ejemplo: anti-M, anti-N,
anti-P1
Autoanticuerpos fros, por
ejemplo:
anti-I, anti-IH
Anticuerpos ABO adquiridos
pasivamente
Subgrupo de A con anti-A1
6. Fenotipos del sistema Hh: Aunque muchas de las caractersticas del sistema Hh
han sido tratadas en el acpite acerca del sistema ABO, es importante precisar
los hallazgos no comentados anteriormente. El sistema H tiene dos genes, H y h
y un antgeno, H. La concentracin de antgeno H en los eritrocitos de los
diferentes fenotipos, sigue un orden decreciente como sigue: O > A2 > B >A2B >
A1 > A1B. Los individuos que son homocigticos para el gen h no presentan
antgeno H en los eritrocitos y se conocen como fenotipo Bombay u Oh. Los
eritrocitos de este raro fenotipo no son aglutinados por anti-A, anti-B, anti-AB o
Alelo
madre
A
A
A
B
B
B
Alelo
padre
A
B
O
A
B
O
OO
ENZIMA
1,3 N-acetil galactosaminiltransferasa
1,3 Galactosiltransferasa
1,2 Fucosiltransferasa
AZUCAR
N-acetilgalactosamina
Galactosa
Fucosa
Por lo tanto cada antgeno, puede existir de dos maneras dependiendo si posee la
sustancia precursora tipo I o tipo II.
Genotipos
IAIA o IAi
IBIB o IBi
IAIB
ii
Genotipo
descendiente
AA
AB
AO
AB
BB
BO
Grupo sanguneo
descendiente
A
AB
A
AB
B
B
VII.
10
5. Nomenclatura:
FISHER -RACE
D
C
WIENER
Rho
rh
ROSENFIELD
1
2
E
rh
3
c
hr
4
e
hr
5
6. Variante del antgeno D (D dbil- Du): Anteriormente denominada Du,
corresponden a individuos con pocos determinantes antignicos D en sus
glbulos rojos o que por causas genticas este Ag se manifiesta dbilmente.
- Deteccin: prueba de la antiglobulina indirecta.
- Rh positivo (D dbil).
- Puede causar respuesta inmunolgica.
7. Normas a seguir en individuos con la variante D dbil:
Toda sangre Rh negativo debe de realizarse la prueba de antiglobulina
indirecta (D dbil).
Donante D dbil debe ser considerado Rh positivo y su sangre debe de ser
transfundida a un receptor Rh positivo.
Receptor D dbil debe ser considerado Rh positivo y puede ser transfundido
con sangre Rh positiva.
8. Efecto de dosis: Algunos anticuerpos de diferentes grupos sanguneos se
caracterizan por reaccionar dbilmente o no hacerlo con clulas rojas en forma
heterocigtica, requieren para ello de clulas en forma homocigtica (doble
dosis). En el sistema Rh algunos de sus anticuerpos presentan esta caracterstica
(anti c, anti e y anti C).
9. Genotipo del sistema: slo se requiere en situaciones especiales; para lo cual se
utilizan antisueros especficos de cada antgeno: Anti D - anti C - anti c - anti E anti e.
10. Determinacin ABO-Rh:
- Principios de aglutinacin y hemlisis (anticuerpos con capacidad de fijar
complemento).
- Clasificacin srica y globular.
- Mtodo manual (lamina o tubo), microtcnica, automatizados.
VIII. Otros grupos sanguneos
Adems de los antgenos del sistema ABO y Rh, existen cerca de 400 antgenos en
la membrana del glbulo rojo. Algunos son denominados antgenos pblicos (alta
incidencia) y otros antgenos privados (baja frecuencia). Todos ellos reconocidos
por el descubrimiento de un anticuerpo producido por exposicin.
1. Grupo sanguneo Kell: Fue el primero detectado por la prueba de Coombs
directa, presenta 21 antgenos, de los cuales son los principales K, k, Kpa, Kpb,
Jsa y Jsb. El fenotipo ms frecuente es el k (90%). Despus de los anticuerpos
ABO y Rh, los anti-K son los ms comunes y estn relacionados con accidentes
transfusionales.
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4.
5.
6.
7.
8.
Sistema Duffy: Presenta dos antgenos: Fya y Fyb. El fenotipo Fy(a+b+) est
presente en 49% de la poblacin blanca, el fenotipo Fy(a+b-) en el 90.8% de la
poblacin china y Fy(a-b-) en el 68% de la poblacin negra.
Sistema Kidd: Presenta principalmente dos antgenos: Jka y Jkb. Son
moderadamente inmunognicos . El fenotipo Jk(a+b-) esta presente en 57% de la
poblacin blanca, Jk(a+b+) en 50% de la poblacin asitica. Se usa la prueba
indirecta de Coombs para identificarlo.
Sistema Lutheran: Este sistema est compuesto por 17 antgenos, pricipalmente
se expresan Lua y Lub. El fenotipo ms frecuente en las razas blanca y negra es
Lu(a-b+) >90%. Se producen anticuerpos IgG, estn asociados a pacientes
politransfundidos.
Sistema Diego: Formado por nueve antgenos principalmente: Dia y Dib.
Ayudan a mantener la integridad estructural de la membrana del eritrocito,
estabilizan la membrana lipdica. La prevalencia de Di a es del 54% en
latinoamericanos, 5% en Mongolia, 8% China y 8-12% Japn. Di b se presenta
en el 99% de caucsicos. Se usa Coombs indirecto para identificarlo.
Sistema MSN: Presenta los antgenos M y N. El fenotipo ms comn en raza
blanca y negra es M+N+ (50 y 44%). Se producen anticuerpos IgM, los cuales
pocas veces provocan accidentes trasfusionales, que pueden ser graves. El
antgeno S es una glicoprotena de 20 KD y 72 aa, producto de un gen amorfo,
relacionado ms con M que con N. Los fenotipos ms frecuentes son Ss 44% y
ss 45%.
Sistema P: En eritrocitos se encuentran los antigenos P1, P, y Pk, en plasma P y
Pk. Los antgenos estn bioqumicamente relacionados a los grupos ABO e I.
Son antgenos dbilmente inmunognicos y se heredan de forma mendeliana.
Sistema I: Se presentan los antgenos I e i. Estn bioqumicamente relacionados
a los grupos ABO, Lewis y P. Aparte de las clulas rojas se presenta en otros
tejidos y clulas. Los infantes recin nacidos presentan el antgeno i. El antgeno
I se desarrolla despus de los 18 meses de vida.
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MUESTRA
Glbulos rojos o sangre entera
a) Recoleccin: la sangre debe ser obtenida aspticamente, con o sin anticoagulante.
Puede analizarse sangre obtenida por puncin digital para la tcnica en placa. Para evitar
la coagulacin de la sangre al utilizar esta tcnica, se la debe mezclar rpidamente con el
reactivo a ensayar.
Para los ensayos con sangre de cordn, los glbulos rojos debern lavarse previamente
con solucin fisiolgica.
b) Aditivos: pueden emplearse como anticoagulantes: EDTA, heparina, ACD (cido ctrico,
citrato, dextrosa), CPD (citrato, fosfato, dextrosa) o CPDA-1 (citrato, fosfato, dextrosa,
adenina). Puede utilizarse Anticoagulante W de Wiener lab.
MATERIAL REQUERIDO
- Centrfuga
- Tubos de hemlisis
- Placas
- Palillos mezcladores descartables
PROCEDIMIENTO
Estos reactivos han sido estandarizados segn los procedimientos detallados a continuacin;
su desempeo en el uso mediante otras tcnicas no puede ser garantizado.
La suspensin de glbulos rojos a ensayar debe ser preparada con solucin fisiolgica, PBS
o LISS.
I. TCNICA EN PLACA
Preparar una suspensin de glbulos rojos al 10%. Como alternativa puede emplearse
una suspensin al 35-45% en plasma del mismo paciente o sangre entera.
1) Colocar en una placa limpia y rotulada, una gota de Reactivo Anti-A, Anti-B o AntiAB monoclonal y agregar al lado 1 gota de suspensin de glbulos rojos.
El gotero provisto dispensa un volumen de 50 5 ul. Es importante que se mantenga
la relacin reactivo:clulas en todos los sistemas de ensayo.
2) Mezclar el Reactivo y los glbulos con un palillo descartable cubriendo un rea
circular de 2 cm de dimetro y balancear la placa continuamente durante 2 minutos.
Observar aglutinacin visible macroscpicamente hasta los 2 minutos. La
observacin puede facilitarse si se emplea una fuente de luz difusa. No debe
emplearse microscopio.
La prueba debe ser interpretada dentro de los 2 minutos para evitar que el reactivo se
seque por evaporacin.
Cuando se observa aglutinacin dbil debe repetirse la prueba utilizando la tcnica
en tubo (por centrifugacin). Pueden agregarse 2 volmenes de reactivo a 1 volumen
de muestra para resaltar la aglutinacin, sin riesgos de falsos positivos.
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MUESTRA
Glbulos rojos o sangre entera
a) Recoleccin: obtener la sangre en forma asptica con o sin anticoagulante. Puede
analizarse sangre obtenida por puncin digital para la tcnica en placa. Para evitar la
coagulacin de la sangre al utilizar esta tcnica, se la debe mezclar rpidamente con el
reactivo.
b) Aditivos: pueden emplearse como anticoagulantes: heparina, EDTA, ACD (cido ctrico,
citrato, dextrosa), CPD (citrato, fosfato, dextrosa) o CPDA-1 (citrato, fosfato, dextrosa,
adenina). Puede utilizarse Anticoagulante W de Wiener lab.
SIGNIFICACION CLINICA
Las observaciones de Levine y Stetson en 1939 y de Landsteiner y Wiener en 1940
establecieron las bases para el conocimiento actual de la importancia clnica en la deteccin
de los anticuerpos anti-D.
Aproximadamente el 15% de los individuos de raza blanca y el 8% de los individuos de raza
negra carecen del antgeno D y son fcilmente estimulados cuando reciben este antgeno, ya
sea por transfusin o durante el parto, produciendo anti-D. Algunos individuos presentan una
disminucin cuantitativa en la expresin de su antgeno D, llamados D dbiles (antiguamente
Du). Otros, en cambio, presentan una variacin cualitativa en la expresin de dicho antgeno,
denominados como D parcial. Dentro de este grupo se encuentra la categora D VI,
caracterizada por poseer una mnima cantidad de epitopes.
El antgeno D es altamente inmunognico siendo responsable de severas reacciones posttransfusionales y de la enfermedad hemoltica del recin nacido.
Existen ms de 40 antgenos diferentes identificados dentro del sistema Rh. Sin embargo, es
el antgeno D el que posee mayor importancia en la clnica despus del sistema ABO.
MATERIAL REQUERIDO
Dependiendo de la tcnica a utilizar, podrn ser necesarios:
- Centrfuga
- Tubos de hemlisis
- Placa de vidrio
- Palillos mezcladores descartables
PROCEDIMIENTO
Este reactivo ha sido estandarizado segn los procedimientos detallados a continuacin; su
desempeo en el uso mediante otras tcnicas no puede ser garantizado.
I. TECNICA EN PLACA
Preparar una suspensin de glbulos rojos al 40-50% en plasma/suero autlogos, PBS
pH 7,0 0,2 o solucin fisiolgica. Tambin puede emplearse sangre entera.
1) Colocar una gota de Anti-D (Rho) sobre una placa de vidrio limpia y rotulada.
2) Agregar al lado una gota de la suspensin de glbulos rojos a probar. Debe
mantenerse la relacin antisuero:clulas en todos los ensayos.
3) Mezclar el antisuero y los glbulos rojos con un palillo descartable en un rea de 2
cm de dimetro y balancear constantemente la placa durante 2 minutos.
Observar macroscpicamente la presencia o ausencia de aglutinacin. La observacin
puede facilitarse si se emplea una fuente de luz difusa.
Si el perodo de observacin es mayor a 2 minutos, efectos de la evaporacin del
reactivo pueden conducir a resultados equivocados (dbilmente positivos).
Algunas muestras D dbiles o D parcial pueden no aglutinar cuando se utiliza la tcnica
en placa. Ante resultados indeterminados o negativos deben confirmarse utilizando la
tcnica en tubo.
Las tcnicas en placa no estn aconsejadas para la deteccin de muestras D dbil o D
parcial.
II. TCNICA EN TUBO
Preparar una suspensin de glbulos rojos al 3-5% en plasma o suero autlogos, PBS pH
7,0 0,2, LISS 1,5-2% o en solucin fisiolgica.
1) Colocar una gota de Anti-D (Rho) en un tubo de hemlisis rotulado.
2) Agregar una gota de la suspensin de glbulos rojos a probar.
3) Mezclar y centrifugar 20 segundos a 1.000 g.
4) Agitar el tubo para despegar las clulas y examinar macroscpicamente la presencia o
ausencia de aglutinacin. La observacin puede facilitarse si se emplea una fuente
de luz difusa.
15
Las reacciones aparentemente negativas deben incubarse a 37C durante 15-30 minutos,
luego centrifugar y volver a leer como se describi en 4). Las muestras que an en estas
condiciones resulten negativas deben ser investigadas respecto al antgeno D dbil.
Efectuando la tcnica en tubo, en caso de resultado indeterminado o negativo, se puede
continuar con el paso 4 de la prueba antiglobulina indirecta para D dbil.
III. PRUEBA ANTIGLOBULINA INDIRECTA PARA D DEBIL
Preparar una suspensin al 3-5% de glbulos rojos en plasma o suero autlogos, o
solucin fisiolgica.
1) Colocar una gota de Anti-D (Rho) en un tubo de hemlisis rotulado.
2) Agregar una gota de la suspensin de glbulos rojos.
3) Mezclar e incubar a 37C durante 15-30 minutos.
4) Lavar las clulas 3-4 veces con solucin fisiolgica o PBS pH 7,0 0,2 descartando
perfectamente la solucin salina residual o sobrenadante y resuspender las clulas
luego de cada lavado.
5) Agregar 2 gotas de Suero Anti-humano (poliespecfico), mezclar y centrifugar 20
segundos a 1000 g.
6) Agitar ligeramente el tubo para despegar las clulas y examinar macroscpicamente
presencia o ausencia de aglutinacin. La observacin puede facilitarse si se emplea
una fuente de luz difusa.
Nota: las muestras que dan positivo el test de Coombs directo no pueden ser analizadas
por la prueba antiglobulina indirecta.
I. Concepto:
La donacin de sangre es un acto voluntario, no remunerado, cuyo destino es cubrir
una necesidad teraputica. Se rige por una serie de principios mdicos y ticos,
plasmados en disposiciones legales, con el nico fin de garantizar un producto
sanguneo seguro; por ello toda persona candidata a donante, antes de ser
considerada como APTA para donar, es evaluada previamente, identificndola
plenamente, con una evaluacin fsica completa y la entrevista personal, dirigidas a
captar factores de riesgo tanto para el donante como para el receptor. Hay varios
tipos de donacin:
Donacin por reposicin: El paciente devuelve, por medio de sus familiares y/o
amistades, las unidades de sangre que le fueron transfundidas durante su
hospitalizacin. Es la donacin ms frecuente en nuestro medio.
Donacin por pre-depsito: El paciente hace el depsito anticipado de las
unidades de sangre que pudiera necesitar durante o despus de su operacin; Un
tipo especial de pre-depsito es la donacin Autloga.
Donacin voluntaria o altruista: Como su nombre lo dice, la persona dona
sangre de manera desinteresada, para quien la pudiera necesitar sin condicin
alguna. Es la menos frecuente en nuestro medio, pero es la mejor, siendo
considerada la donacin ideal.
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Nombre y apellidos.
Direccin: domicilio privado y/o profesional.
Telfono: privado y profesional.
Sexo.
Fecha y hora de la donacin.
Edad y fecha de nacimiento: Los donantes de sangre deben tener por lo menos
18 aos de edad y no ms de 65. El incumplimiento de este requisito solo
procede en situaciones excepcionales y debe contar con la aprobacin legal y del
mdico jefe del banco de sangre.
B) Registro de aplazamientos previos: En las personas que en donaciones previas
han sido aplazadas, se debe determinar las causas de este hecho, por
interrogatorio y en los datos del archivo, para definir si esta situacin se
mantiene en la actualidad.
Otros datos que pueden ser tiles:
C) Raza: Esta informacin puede tener particular utilidad cuando se precisa sangre
de un fenotipo especfico para pacientes que presentan anticuerpos inesperados.
D) Caractersticas singulares del donante. Determinada informacin acerca del
donante puede permitir al banco de sangre un uso ptimo de la donacin, por
ejemplo: donantes que son seronegativos para citomegalovirus o pertenecen al
grupo Rh negativo se destinan a menudo para pacientes recin nacidos. Los
individuos que tienen anticuerpos clnicamente inesperados significativos
pueden ser identificados para que su sangre sea procesada en componentes que
contengan mnimas cantidades de plasma.
Si la donacin se dirige a un paciente especfico, se debe obtener la informacin
acerca de cundo y dnde ser hospitalizado el receptor destinatario. Si el
donante es consanguneo en primera lnea del receptor, debe registrarse para que
sus componentes celulares sean irradiados.
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EXTRACCIN DE LA SANGRE
Identificacin:
La identificacin del donante es esencial en cada paso de su registro. Se debe usar
un sistema numrico o alfanumrico que identifique el donante y el centro de
extraccin. Esta identificacin debe aparecer en las bolsas de sangre, los tubos de
muestras y la historia clnica (HCL) del donante. Es necesario un cuidado extremo
para evitar cualquier confusin o duplicacin de nmeros. El mtodo ideal de
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sistema tubular, con tela adhesiva, al brazo del donante, para mantener la aguja
en el lugar y cubrir el sitio con gasa estril.
Abrir el cierre transitorio entre el interior de la bolsa y el sistema tubular.
Hacer que el donante abra y cierre la mano lentamente cada 10 o 12 segundos
durante la coleccin. Mantener al donante en observacin durante todo el
proceso de donacin.
Mezclar suave y peridicamente la sangre y el anticoagulante durante la
coleccin, de forma manual o con agitador mecnico. Asegurarse de que el flujo
sanguneo se mantiene bastante vivo, de modo que no se desencadene la
actividad de la coagulacin. La extraccin no debe durar ms de 15 minutos.
Controlar el volumen de sangre que se est extrayendo. Si se utiliza una balanza,
interrumpir el flujo sanguneo despus de haber recolectado la cantidad
apropiada. Un mililitro de sangre pesa 1,053 g, indicados por la densidad
mnima permisible para los donantes. Una cifra conveniente es 1,06 g/mL, una
bolsa que contiene entre 405 y 495 mL debe pesar de 429 a 525 g ms el peso
del recipiente con su anticoagulante.
Pinzar el sistema tubular cerca del sitio de venopuntura, con un hemostato, una
pinza de metal u otra pinza transitoria. Liberar el manguito de la presin hasta 20
mmHg y llenar los tubos para las muestras de procesamiento sanguneo sin que
ocurra contaminacin del contenido de la bolsa.
Desinflar el manguito y retirar el torniquete. Extraer la aguja del brazo, si no ha
sido extrada antes. Aplicar presin sobre la gasa y hacer que el donante eleve el
brazo y sostenga la gasa firmemente sobre el sitio de flebotoma con la otra
mano.
Arrojar la aguja en un recipiente de biopeligros diseado para evitar lesiones
accidentales y contaminacin del personal.
Luego de la extraccin, escurrir el sistema tubular tanto como sea posible dentro
de la bolsa, comenzando por el sellado. Evitar que la sangre se coagule. Invertir
la bolsa varias veces para mezclarla bien, luego dejar que el sistema tubular se
vuelva a llenar con sangre anticoagulada de la bolsa. Repetir este procedimiento
una segunda vez.
Sellar el sistema tubular en segmentos, numerar uno de ellos de forma clara y
legible. Adosar a otro sistema un nmero de identificacin de la unidad para
almacenarlo con el fin de realizar eventuales pruebas de compatibilidad. Es
necesario separar los segmentos de la unidad sin afectar la esterilidad de la bolsa.
Inspeccionar el recipiente para detectar defectos.
Controlar los nmeros en el recipiente, tubos procesadores, registro de donacin
y segmento de retencin.
Colocar la sangre a temperatura apropiada. A menos que se vayan a extraer
plaquetas, se debe almacenar la sangre total de 2 a 6 C inmediatamente despus
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II. Especficas:
1. Donacin autloga: Es el depsito de sangre realizado por el mismo paciente
receptor de la unidad sangunea. Los requisitos para donacin antloga son:
El mdico del paciente enviar una consulta al servicio indicando motivo,
nmero de unidades y fecha de intervencin quirrgica o transfusin.
La solicitud de transfusin debe indicar que se trata de una transfusin autloga.
Edad: No existe lmite.
Peso: No existe requerimiento de peso.
No retirar ms del 12 % de volumen sanguneo estimado.
Hemoglobina: No menor de 11 g/dL.
Hematocrito: No inferior a 34 %.
No enfermedades coronarias, hipertensas, convulsivas, cerebro vascular o
antecedente de lipotimias.
2. Donacin designada: Es el depsito de sangre dirigido, que hace un donante para un
receptor predeterminado. Los requisitos para esta donacin son:
Alta posibilidad de transfusin de la sangre y fecha de transfusin.
Estudio del donante para aptitud de donacin, compatibilidad de grupo sanguneo
con el receptor y pruebas con el tamizaje de enfermedades infecciosas; la unidad
de sangre slo se extraer si los resultados son favorables.
La solicitud de transfusin debe indicar que se trata de una transfusin designada.
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EQUIPO:
Rotador.
PROCEDIMIENTO:
Indicar al donante que debe estar en ayunas.
Seleccionar la vena (media ceflica, baslica)
Coger la bolsa y proceder a hacer un nudo suelto en su accesorio.
Colocar la bolsa en el rotador que esta ubicado debajo del donante.
Limpiar escrupulosamente la zona del brazo y proceder a la puncin.
Si la zona de extraccin es de difcil palpacin, preferible no extraer sangre.
Mezclar la sangre con el anticoagulante contenido en la bolsa de recoleccin.
Cuando la bolsa se ha llenado con la capacidad requerida, proceder a retirar la ligadura y
se le indicar al paciente que abra la mano, y luego extraer la aguja.
Ajustar un nudo mas o menos a unos 40 cm de la aguja.
Proceder a corta una parte del accesorio (manguera) de la bolsa a unos 30 cm de la aguja.
Rotular la bolsa (fecha de extraccin, grupo sanguneo, nmero de bolsa, etc.).
Llevar a conservacin a unos 4 C.
Indicar al donante un descanso de 15 minutos como mnimo; inmediatamente despus de
la donacin de sangre, de los cules 10 lo har en decbito dorsal y los ltimos 5 en
posicin sentada.
Hacer al donante las siguientes recomendaciones:
- No fumar por 7 horas.
- No comer y tomar lquidos despus de la donacin; continuar tomando lquidos e las
prximas 4 horas.
- Evitar conducir 4 horas despus de la donacin.
- No ingerir alcohol, el da de la donacin.
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