Ao de la Diversificacin Productiva y del Fortalecimiento

de la Educacin

TITULO DEL CURSO GENERAL.

TTULO DE LA
PRCTICA
Docente:
Alumnos:
Apellidos y Nombres..................... cdigos

Semestre:

HUANCAYO 2015-11

NDICE GENERAL

Contenido
INTRODUCCIN.......................................................................................................................................................3
OBJETIVOS..............................................................................................................................................................4
GENERAL.............................................................................................................................................................4
ESPECFICO.........................................................................................................................................................4
I.

MARCO TERICO.........................................................................................................................................5

II.

MATERIALES Y REACTIVOS.....................................................................................................................10

III.

METODOLOGA...........................................................................................................................................11
3.1

LUGAR DE EJECUCIN.......................................................................................................................11

IV.

PROCEDIMIENTOS.....................................................................................................................................12

V.

RESULTADOS.............................................................................................................................................15

VI.

DISCUSIN..................................................................................................................................................18

VII.

CONCLUSIONES.........................................................................................................................................31

VII.BIBLIOGRAFA..................................................................................................................................................34
PGINAS DE LIBROS........................................................................................................................................34
PGINAS WEB...................................................................................................................................................34
ANEXOS..................................................................................................................................................................35
ESQUEMAS............................................................................................................................................................39
CUESTIONARIO.....................................................................................................................................................52

INTRODUCCIN

OBJETIVOS

GENERAL

ESPECFICO

1.
2.
3.

I.

MARCO TERICO
COLORACIN DE ESPORAS: MTODO DE WIRTZ-CONKLIN:

Los microorganismos que las forman deben encontrarse en condiciones adversas.

Se evidencian en la etapa de vida latente. Caracterizan a los gneros 1Bacillus y
Clostridium y su localizacin y forma ayudan en cierto modo a la identificacin
presuntiva especfica.
Por la naturaleza y grosor de la membrana y bajo contenido en agua, las esporas son
muy difciles de teir; se hace actuar el tinte en caliente en idntico procedimiento al
efectuado para 2CIDO-RESISTENTES. La coloracin de contraste para el cuerpo
bacteriano se consigue con Safranina.
Si el cultivo es joven no hay esporas y los microorganismos se teirn
uniformemente. Es necesario que ste permanezca por 3-4 das a temperatura
ambiente, despus de una incubacin ptima de 24 horas o sembrar el cultivo en un
medio especfico de esporulacin.
De esta manera el material resulta ideal para ensayos de cualquiera de las tcnicas
especficas de tincin. Al finalizar el proceso de esporogenesis , la clula vegetativa
se lisa y libera la espora al exterior. Cuando el ambiente es favorable, la espora
germina generando una nueva forma vegetativa. La capacidad de germinar perdura
durante aos. Algunas de las bacterias productoras de 3endosporas son patgenas
para el hombre, por lo que el estudio y observacin son de enorme inters.

1 Bacilos: Clulas bacterianas en forma de bastn, compuesto por bacilos gram positivos
con una capacidad para producir endosporas.FUENTE:
http://www.monografias.com/trabajos/bacilosgram/bacilosgram.shtml
2cidos resistentes: Procedimiento en ciertos microorganismos que no son teidos por
una mezcla de alcohol y cido denominados acido alcohol resistente.FUENTE:MANUAL
DE PRACTICAS DE LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA-Mara de los ngeles Equihuatl
Ramos-Pag.29-34
3Endosporas: Son elementos especficos de las bacterias que consisten en clulas
deshidratadas con una supervivencia prolongada.FUENTE: Tortora-Fanke-Case
MICROBIOLOGIA GENERAL9 ava edicin Buenos Aires Mexico Editorial Panamericana
2007.

II.

MATERIALES Y REACTIVOS

CULTIVOS

Cultivo de 5 das de Bacillus subtilis.

Cultivo de Klebsiellapneumoniae.

Cultivo de Staphylococcusepidermidis.

Cultivo joven Proteusvulgaris.

Cultivo Escherichiacoli.
Cultivo de Saccharomycescerevisiae.
Cultivo Escherichiacoli.

MUESTRA

Muestra de saliva de los alumnos.

REACTIVOS:

Safranina o Fucsina Bsica al 0.5%

Verde de malaquita al 5%.

Azul de metileno Loeffler.

Acido tnico (5-10%).

Acido tnico (5-10%).

Aceite de cedro.

Cristal violeta (0.02%).

Fijador de Bouin.
Lugol fuerte.
Etanol al 70%.
HCL 1N.
Buffer fosfato 0.01 %

 Colorante Giemsa.
Cultivo de Saccharomycescerevisiae.
Solucin de etanol (40%).
Solucin de hidrxido de potasio (0.1 M).

Solucin de toluidina 0.1% en etanol 10%.

Solucin de etanol (10%).

Solucin de yodo de Gram.

MATERIALES

Agua destilada

Gradilla

Lpiz graso

Asa de siembra.

Tinta china

Portaobjetos

Agua corriente.

Lminas limpias

III.

METODOLOGA

3.1 LUGAR DE EJECUCIN

Laboratorio de Biologa Qumica, campus de la Universidad
Continental de Ciencias e Ingenieras.

IV. PROCEDIMIENTOS

V.

RESULTADOS

VI.

DISCUSIN

VII.

CONCLUSIONES

VIII.

BIBLIOGRAFA

PGINAS DE LIBROS
West DJ, Snavely DB, Zajac BA, Brown GW, Babb CJ (1990). Development
and persistence of antibody in a high-risk institutionalized population given
plasma-derived hepatitis B vaccine. Vaccine 8:111-114.
PGINAS WEB

http://www.ecologia.unam.mx/adriana/GalerasRevRLM04.pdf
http://www.guia.reviberoammicol.com/Capitulo14.pdf
http://es.scribd.com/doc/49115405/Practica-15-Tincion-de-Giemsa

http://www.telefonica.net/web2/carlosmartinezanton/pdf/7.%20Hongos%20y
%20levaduras.pdf

http://www.e-histologia.unileon.es/1inicio/home/tecnicas.htm

http://academic.uprm.edu/~jvelezg/lab8.pdf
http://imb.usal.es/Practicas2/P2/Practicas2.pdf

http://www.danival.org/600%20microbio/5000micro_dvf/micro_dvf_222b.html

ANEXOS

Esporas de Bacillus
Subtillis.

ANEXO N01: Resultados de tincin de esporas en B.subtillis, observado al 100

X.

Forma de las capsulas

de Klepsiella sp que se
encuentran de color
transparente.

ANEXO N02: Cultivo de klebsiella sp a 100X resultado de coloracin de capsulas

Mtodo de Tincin negativa.

ESQUEMAS
EXPERIMENTO: COLORACIN
MTODO DE WIRTZ CONKLIN.

DE

ESPORAS:

Fijar la muestra al calor.

Observar en microscopio

Agregar verde malaquita

Lavar con agua corriente

Tincin de esporas en B.subtillis en
aumento 100 X.

Contrastar con safranina y

lavar en agua corriente

CUESTIONARIO