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a p lica d o s a o

m e lh o r a m e n t o d e
p la n t a s
E veline T eix eira
C a ix eta

Melhoramento Gentico
Combinao adequada de
alelos nos locos que controlam
caractersticas de interesse o
objetivo da seleo artificial.
Variabilidade

Marcadores
Genticos

Marcadores Gentico
p

Qualquer elementos capazes de diferenciar, prever e


caracterizar um indivduo e que sejam reproduzidos na
descendncia.

Marcadores
morfolgicos

???

Marcadores Gentico
w Marcadores

morfolgicos (at meados de 60; limitao de


nmero, falta de ligao, influncia do meio, efeito deletrio
de mutaes)

w Marcadores moleculares
w Isoenzimticos

w Marcadores de DNA
N virtualmente ilimitado de marcadores polimrficos,
independente do estdio de desenvolvimento da planta e
de variaes ambientais

Marcadores Moleculares
w

Marcadores genticos que exploram a variabilidade do


DNA

So caractersticas polimrficas herdveis que refletem


diferenas na seqncia de DNA diretamente ao nvel de
nucleotdeo ou indiretamente ao nvel de expresso
gnica

consistem em qualquer fentipo molecular oriundo de um


gene expresso ou de um segmento especfico de DNA

podem ser de DNA, RNA ou protenas (isoenzimas)

Marcadores de DNA
Vantagens
w

Ampla cobertura do genoma

Neutros fenotipicamente (no afetado pelo ambiente)

No afetado pelo background gentico - livres de efeitos


epistticos ou pleiotrpicos, permitindo que diferentes
marcadores sejam monitorados em uma nica populao

A anlise de MM pode ser feita em qq estdio e tecido


(grande vantagem de seleo antes do florescimento)

Podem
ser
utilizados
em
geraes
altamente
segregantes, permitindo a eliminao dos gentipos
indesejveis nas primeiras geraes de seleo

Marcadores de DNA
w

Diferena na sequncia de DNA


M C. arabica

Planta
1
Marcadores
de DNA

Planta
2

C. canephora

Hbridos de Timor

Marcadores baseados em PCR


w PCR = Polymerase Chain Reaction
w Multiplicao in vitro de DNA = replicao in vitro do
DNA em grande escala

w RAPD, AFLP, SSR, ISSR, primer especfico

Marcadores baseados em PCR

Mg2+
dGTP

DNA Polimerase
DNA template

dCTP
dTTP
dATP

Primers

Marcadores baseados em PCR


Ta
Ta
Ta q
qTa
qTa
q
q

PCR

Marcadores baseados em PCR

Marcadores baseados em PCR


Planta 1

Planta 2

Marcadores baseados em PCR


pl1

pl2

pl3

pl4

Marcadores baseados em PCR

Marcadores baseados em PCR


M

M C. arabica

Primer especfico

C. canephora

Hbridos de Timor

Microssatlites

RAPD

AFLP

Marcadores SNP
w

Single Nucleotide Polymorphism polimorfismo de


um nico nucleotdeo

w Deteco

de polimorfismo
resultante da alterao de
uma base

Variao = SNP se ocorrem


em 1% da populo

Marcadores SNP
w

Substituio ou insero/deleo de base (Indel)

SNP

SNP (Indel)

Marcadores SNP

90% do polimorfismo
encontrado = SNPs

Marcadores SNP
w

Alta densidade no genoma + tecnologias de


genotipagem = potencial dos SNPs

w Deteco

obtida pela comparao entre regies


especficas do DNA obtidas de vrios indivduos

w Genotipagem
fragmentos

no se baseia em tamanho de

Sofisticao

M C. arabica C. canephora

1975

Hbridos de Timor

??

1980

1985

1990

1995

2000

2005

Marcadores de DNA
w

Variam quanto:

w
w
w
w
w

Forma de detectar a diferena no DNA;


Habilidade de detectar diferenas entre indivduos;
Custo;
Facilidade de uso;
Consistncia e repetibilidade

Todos tem vantagens/desvantagens

Marcadores de DNA
w

Conhecer bem os vrios tipos de marcadores


moleculares;

w Verificar marcadores disponveis para a espcie que


vai trabalhar;

w Conhecer bem a espcie;


w Verificar disponibilidade de estrutura fsica, recursos
humanos, recursos financeiros, equipamentos.

w Analisar

o trabalho que ser realizado - para que


ser utilizado o marcador molecular.

Marcadores de DNA
Funcional

RFLP
SSR
SNP
Especfic
os

Aleatrio
RFLP
RAPD
AFLP
SSR
ISSR
SNP...

Marcadores de DNA
Projetos Genoma
Funcional

RFLP
SSR
SNP
Especfic
os

Projetos Genoma
Sequenciamento

Projetos Genoma
Genmica Funcional

Projetos Genoma
Genmica Funcional

p
p

G
E
N
E

p
p
p

Genmica
Transcriptmica
Protemica
Metabolmica
micas

Conhecer os genes que controlam a


caracterstica de interesse

Projetos Genoma
Aplicao da genmica

Gene conhecido

Marcadores
Moleculares Funcionais

EST-SSRs
COS e Especficos
SNPs

Marcadores de DNA
Funcional

RFLP
SSR
SNP
Especfic
os

Aleatrio
RFLP
RAPD
AFLP
SSR
ISSR
SNP...

Melhoramento objetivo do uso do marcador molecular

Marcadores no
Melhoramento
Caracteriza
o de
Estudo de
germoplasm
evoluo
a
Escolha
mtodo
Teste de
melhoramen
cruzamentos
to
Seleo
assistida
Solues
especficas

Fingerprintin
g de
Monitorame
cultivares
nto pureza
Proteo
genticade
variedades

Anlise de
pedigree
Clonagem
de genes
Filogenia
Conhecimen
to carter
Deteco
estudadode
OGMs
Diagnose de
doenas

Marcadores no
Melhoramento
w Fingerprint
w Marcadores

associados a genes
ou caracterstica de interesse

G
E
N
E

Fingerprint
Indivduo = seqncia caracterstica de nucleotdeos
Identificao das diferenas MM
Padro nico = impresso digital gentica
Fingerprint

Todo o Genoma

Fingerprint
Mapa gentico de ligao

Refletem a ordem e a localizao relativa de marcadores


genticos dentro de determinado intervalo do DNA

Fingerprint
Fingerprint eficiente

Escolher marcadores que amostrem bem o genoma da


espcie - se possvel espaados a menos de 20cM

Marcadores no
Melhoramento
w Marcadores
interesse

associados a genes ou caracterstica de

G
E
N
E

Seleo indireta

Gene marcado
Aleatrio
RFLP
RAPD
AFLP
SSR
ISSR
SNP...

Funcional

RFLP
SSR
SNP
Especfic
os
G
E
N
E
Marcador
com a
sequncia

Marcador
com o
fentipo

Gene marcado ex
BAT 332

Rud

F1

F2

Aleatrio

Gene marcado ex
Final

OPAA07

OPAO12

OPC03

Rud

Bat 332

F1

F2 - 1

F2 - 2

F2 - 3

F2 - 4

F2 - 5

F2 - 6

F2 - 7

F2 - 8

F2 - 9

F2 - 11

...

F2 - 200

Aleatrio

cM
OPAO12
1,60

OPAA07

5,10

Resistncia

Gene marcado- ex

P1 P2

BR BS

10 11 12 13 14 15

16
Resistentes

OPAO12

Suscetveis

GENE

OPAA07

1,60cM

5,10cM

Aleatrio

Caracterstica/gene
marcado
w

Caracterstica qualitativa = controlada por um ou poucos


genes.
Marca o(s) gene(s)

Caracterstica quantitativa = causada pela expresso de


alelos em vrios locos, com efeitos menores; caracterstica
controlada pela ao cumulativa de um conjunto de gene

Marca o(s) QTL(s)

QTL
w

QTL (Quantitative Trait Loci)

w So locos que controlam a caracterstica quantitativa


w Se baseia no princpio de existncia de locos de
maior importncia relacionados com a expresso da
caracterstica quantitativa.

Mapeamento de QTL permite mensurar nmero de


locos; localizar; determinar modo de ao; determinar o
quanto da variao explicada.

QTL1
B2

QTL2
B1

QTL3

Marcadores no
Melhoramento

Mapa gentico
Marcadores ligados
Desenvolvimento marcadores
Protocolos...

Marcadores de DNA
Funcional

RFLP
SSR
SNP
Especfic
os
G
E
N
E

Aleatrio
RFLP
RAPD
AFLP
SSR
ISSR
SNP...

Marcadores no
Melhoramento
Caracteriza
o de
Estudo de
germoplasm
evoluo
a
Escolha
mtodo
Teste de
melhoramen
cruzamentos
to
Seleo
assistida
Solues
especficas

Fingerprintin
g de
Monitorame
cultivares
nto pureza
Proteo
genticade
variedades

Anlise de
pedigree
Clonagem
de genes
Filogenia
Conhecimen
to carter
Deteco
estudadode
OGMs
Diagnose de
doenas

Marcadores no
Pr-melhoramento

Marcadores no Prmelhoramento
Caracteriza
o de
Estudo de
germoplasm
evoluo
a

Pr-melhoramento

Atividades realizadas visando conhecer o material


gentico antes de introduzi-lo em um programa de
melhoramento

w Diversidade
w Como os genes so herdados
w Como genes se relacionam ...

Caracterizao molecular de
germoplasma

Conservao de
germoplasma

Fingerp
rint
GENE

Escolha de genitores

Caracterizao molecular de
germoplasma
Avaliar
redundncia
Conservao
de
germoplasma

Caracterizao molecular de
germoplasma
Avaliar
redundncia
Conservao
de
germoplasma

Avaliar
deficincias

Caracterizao molecular de
germoplasma
Avaliar
redundncia

Conservao
de
germoplasma

Avaliar
deficincias
Avaliar coleta,
manuteno e
ampliao
Problemas
especficos

Permitir e
facilitar o
acesso dos
melhoristas

Caracterizao molecular de
germoplasma
Seleo de
Genitores

Identificao
de genes
Dificuldade de
identificao
fenotpica

Ausncia do
patgeno

Distncia entre
genitores

Seleo de genitores

Diversidade gentica

G = h2 p i/
L

Mxima diversidade

Material elite

Seleo de genitores
Diversidade gentica
p

Marcadores moleculares aumentam a habilidade de


caracterizar a diversidade do germoplasma
n

Permite estimativa de ganho de seleo

Entendimento da estrutura da populao

Contribui para identificar e manter reservatrio de variabilidade


gentica

Seleo de genitores
Melhoramento visando obteno de Hbridos (milho)

Auxlio na alocao das linhagens em grupos heterticos


(estimativa de capacidade de combinao x diversidade
usando marcadores);

Distncia Gentica
-0.01

Gentipos

C. congensis
C. racemosa

CIFC 4106

CIFC 2234

Tpica da China

Tpica de Portugal

M.Novo IAC 464-18

M.Novo IAC 515-3

M.Novo IAC 388-17-16


M.Novo IAC 376-4-32

M.Novo IAC 376-4-22

Bourbon

Catimor UFV 1310

Purpuracens UFV 4072


San Ramon UFV 3094

Caturra CIFC 19/1


Catua IAC 113

Catua IAC 99

Bourbon Amarelo

Catua IAC 15

Catua IAC 44

Catua IAC 81

Catua IAC 30

Catua IAC 47
Catua IAC 86

Airi UFV 3095

Bourbon da China 1

Bourbon da China 2

Catimor UFV 395-141


Mundindu UFV 315-76

Catimor UFV 386-19


H 415-3

Cavimor UFV 357-4

Cachimor UFV 351-13

Catimor UFV 1359

Catimor UFV 2983

H 843

H 484-2

C. canephora
Triplide

0.99

0.79

0.59

0.39

0.19

C. arabica C. canephora

C. arabica

C. canephora

Hbridos de Timor

Marcadores no Prmelhoramento

w Estudo da evoluo das espcies do gnero


Estudo de
Evoluo
Cruzamento
interespecfi
co
Germoplasma contm
outras espcies do
gnero

Genes no
encontrados na
espcie
cultivada

Marcadores no
Melhoramento

Marcadores no
Melhoramento
Estratgia
de
Teste de
melhoramen
cruzamentos
to
Seleo
assistida
Solues
especficas

Melhoramento

Estratgia de Melhoramento
Mapas permitem entender a base
da correlao entre caractersticas.

B1

QT
L1

QT
L2

w
B
2

QT
L3

Ex: 5 QTLs responsveis por 90%


da caracterstica; QTLs em
GL
distintos e em indivduos distintos =
seleo recorrente;

Ex: 2 QTL/genes controlam


caracterstica e esto localizados
prximo em um indivduo RC

Estratgia de Melhoramento
Mapa = Localizao
dos genes

Escolha
estratgia de
melhoramento

Melhor estratgia
de ao
Planejamento
mtodos de
seleo
Tamanho ideal
das populaes

Teste de Cruzamento
H M P H M P H M P H M P

Teste de
cruzamentos

Autgama

Algama

Seleo Assistida por


Marcadores - SAM
w

Se baseia na seleo indireta para presena ou ausncia de


um fentipo desejado por meio da sequncia ou padro de bandas
do marcador molecular localizado no ou prximo do gene.

O polimorfismo do marcador molecular um indicativo da


presena ou ausncia de um gene especfico ou segmento
cromossomal que carrega um alelo desejvel.

SAM
Aumentar a eficincia de seleo

wSelecionar em estgio juvenil

Distinguir homozigotos de heterozigotos de vrios locos em


uma nica gerao sem a necessidade de teste de prognie;

Seleo de vrios caracteres ao mesmo tempo

Reduzem o tamanho da populao em cada gerao

Minimizam esforos e recursos nas avaliaes

SAM
Justificativa de uso

Avaliao fenotpica complexa, demanda tempo e/ou


apresenta custo elevado; s pode ser mensurada tardiamente

Morfologia
de raiz

Tolerncia a
salinidade

Estresse hdrico

w Seleo requer destruio da planta

Deficincia e
toxidez mineral

SAM
Justificativa de uso

w Introduo de resistncia a doenas


w Seleo na ausncia do patgeno
w Seleo na ausncia da raa
w Detectar combinaes de genes - piramidao

SAM
w Mtodo dos retrocruzamentos
w Quando se deseja introduzir uma ou poucas caractersticas
em gentipo-elite;

Introduo de caracterstica de herana simples ou


oligognica nos cultivares comerciais de plantas autgamas
ou nas linhagens-elite de plantas algamas (inclusive
transgene);

Consiste em cruzar genitor doador com genitor recorrente,


as prognies so selecionadas e cruzadas sequencialmente
com o genitor recorrente, at recuperar o recorrente,
mantendo a caracterstica do doador. No final as plantas so
autofecundadas uma ou duas vezes para fixar a
caracterstica.

Recorrente
Gera
oF
1
R
C

R
C

R
C
R

Doad
or

.
x
x
x
x
x

SAM
w Mtodo dos retrocruzamentos
w

At 6 7 ciclos de retrocruzamento para recuperao


do genitor recorrente + 2 autofecundao + multiplicao
de sementes + VCU

Limitao = tempo gasto recorrente???

importncia do genitor

SAM
w Retrocruzamento assistido por marcadores
Monitorar a presena
do gene de interesse

Recuperar o genitor
recorrente
Fingerp
rint

GENE

Recorrente
aa
x

Doador
AA

GENE

Gerao
F1
RC1

Aa

aa* : Aa

aa
x aa

RC2

aa* : Aa x aa

RC3

aa* : Aa

1 AA : 2 Aa* : 1aa*

Recorrente
AA x

Doador
aa

GENE

Gerao
F1
RC1

Aa x AA

*AA
AA : Aa

AA* 1AA*:2Aa*:1aa x AA

RC2

Aa x AA

RC3

AA : Aa ( )

Recorrente
Gerao (%Rec.)
F1
50,0
RC1

75,0

RC2

87,5

RC3

93,75

RC4

96,875

Doador
Fingerp
rint

x
x
x
x
x

Porcentagem de Recuperao do Genitor Recorrente

14

Nmero de Indivduos

12
10
8
6
4
2
0

50-55

56-60

61-65

66-70

71-75

76-80

81-85

Porcentagem do Catua

86-90

91-95

Sem seleo
Seleo (10%)

50

% Genoma do Doador

45

Seleo (2%)

40
35
30
25
20
15
10
5
0
F1

RC 1

RC 2

RC3

RC4

Gerao de Retrocruzamento

RC 5

SAM
w Retrocruzamento assistido por marcadores
w

Se gene no for marcado - seleo


fenotpica e seleo do genoma
recorrente com marcadores;

Mapa aumenta eficincia da seleo


do recorrente;

Marcadores flanqueando o gene


alvo podem reduzir a contribuio do
genoma doador nessa regio;

SAM
w Retrocruzamento assistido por marcadores
Multilinha

Piramidao
Piramidao

Transgene

Piramidao
w Introgresso/acmulo de vrios genes (para uma
mesma caracterstica) em uma nica variedade

w Resistncia (Pedersen e Leath 1988)

w genes maiores e menores


w genes anulados
w genes efetivos (patgeno avirulento) ou no (patgeno
virulento)
w genes raa-especfico ou raa-no-especfico
w qualquer outro gene que confere resistncia ao
patgeno

Piramidao
Aumentar a durabilidade da
resistncia

Baixa probabilidade
de um patgeno
conter todos os
genes de virulncia

Muitos genes de
virulncia = reduo
da adaptao do
patgeno

Piramidao
Importncia comprovada e proposta antiga (Nelson, 1978 )

Problema
Trabalhoso = combinar
vrios genes e manter
outras caractersticas

Inoculaes mltiplas na
mesma planta

Vrios genes de resistncia


a mesmo patgeno
= 1 gene mascara efeito
dos demais

Piramidao
Problema
Marcadores
Moleculares
Trabalhoso = combinar
vrios genes e manter
outras caractersticas

Inoculaes mltiplas na
mesma planta

Vrios genes de resistncia


a mesmo patgeno
= 1 gene mascara efeito
dos demais

SAM
w Seleo recorrente
C2
C1
C0

Recombinao
de prognies

Obteno de
prognies

Avaliao
de
prognies

Monitoramento de QTLs
Fingerprint das prognies
superiores

Exemplo - Feijo
Piramidao

Feijoeiro comum (Rud)


Genes de resistncia ferrugem,
antracnose e mancha-angular

Rud

Exemplo - Feijo
Piramidao

w Identificar as fontes de resistncia e raas

do patgeno de maior importncia para a


regio

w Estudar a herana das fontes


w Identificar

cada gene

marcadores moleculares para

w Obter

as isolinhas com os genes de


resistncia

w Cruzar as linhagens

Exemplo - Feijo
Identificar as fontes de resistncia

FERRUGEM
Ouro Negro
ANTRACNOSE
w Ouro Negro
w AB 136
w TO

MANCHA ANGULAR
w AND 277
w MAR 2
w Mxico 54
w Cornell 49-242
w Bat 332

Exemplo - Feijo
Estudo da herana das fontes de resistncia
Populao N de plantas
R
S
Rud
BAT 332
F1
F2
RCs
RCr

0
27
27
128
33
56

27
0
0
47
29
0

Proporo
2
esperada
0:1
1:0
1:0
3:1
1:1
1:0

Um gene dominante

0,322
0,258

P(%)

57,046
61,145

Exemplo - Feijo
w AND 277
w MAR 2
w Mxico 54
w Cornell 49-242
w Bat 332

Um gene
dominante

w Ouro Negro

w Ouro Negro
w AB 136
w TO

Exemplo - Feijo
Marcadores moleculares para cada gene

P1 P2

BR BS

Resistentes

OPAO12

Suscetveis

GENE

OPAA07

1,60cM

10 11 12 13 14 15 16

5,10cM

Exemplo - Feijo
w AND 277
w MAR 2
w Mxico 54
w Cornell 49-242
w Bat 332
OPAO12

Um gene
dominante
MARCADO

GENE

OPAA07

1,60cM

5,10cM
GENE

OPH13
5,5cM

Exemplo - Feijo
Obter as linhagens com os genes de
resistncia
Mtodo de Retrocruzamento

w Rud x AND 277


w Rud x Ouro Negro
w Rud x TO
w Rud x AB 136
w Rud x Bat 332

Recorrente
Rud
Gerao (%Rec.)
F1
50,0
RC1

75,0

RC2

87,5

RC3

99%
93,75

RC4

99%
96,875

ANDNegro
277
x Ouro
Doador
Fingerp
rint

GENE

x
x
x
x Rud Phg-AND
277
Ur-ON

Exemplo - Feijo
Obter as linhagens com os genes de
resistncia
Mtodo de Retrocruzamento

w Rud x AND 277


w Rud x Ouro Negro
w Rud x TO
w Rud x AB 136
w Rud x Bat 332

Rud Phg-1
Rud Ur-ON/Co-10
Rud Co-4
Rud Co-3
Rud Phg-Bat 332

Exemplo - Feijo
Cruzar as linhagens
Rud Ur-ON/Co-10

Rud Co-6

Rud Co-4

Rud Phg-1

Rud Ur-ON/Co-10, Co-4

Rud Co-6, Phg-1

Rud Ur-ON/Co-10, Co-4, Co-6, Phg-1

SAM
Rud Ur-ON/Co-10, Co-4, Co-6, Phg-1

Exemplo - Feijo
Rud Ur-ON/Co-10, Co-4, Co-6, Phg-1
F4 contendo todos os marcadores

Rud Ur-ON/Co-10, Co-4, Co-6, Phg-1

F4:5

Teste de prognie

Rud Ur-ON/Co-10, Co-4, Co-6, Phg-1


Rud Ur-ON/Co-10, Co-4, Co-6, Phg-1
Ensaio de campo
Inoculao e outras caractersticas

F4:5 homozigotas

F4:6
F4:7

Exemplo - Feijo
Rud Ur-ON, Co-4, Co-6, Co-10, Phg-AND
Rud Ur-ON, Co-44, Co-5, Co-6, Co-10, Phg-AND
Rud Ur-ON, Ur-5, Ur-11

Rud ?

??

Prola
Talism
Diamante Negro

(crestamento bacteriano e
mosaico comum)

Gro tipo vermelho

Exemplo - Milho
Setor privado

w SAM

largamente utilizada: uso mais efetivo e direto


retrocruzamento de transgene em linhagens elite, utilizadas
para obteno de hbridos
Demanda de
mercado

NIL de transgnico e no transgnico de


linhagens elite

w Retrocruzamento
selvagens

tambm para genes/QTLs de gentipos

Exemplo - Milho
Setor privado

w SAM para seleo recorrente

Reduo do tempo de 3 a 6 vezes resultado da seleo


precoce, antes da florao e obteno de 3 a 4 geraes por
ano

Informaes fenotpicas e de marcadores podem ser usado


conjuntamente simultaneamente; em sequncia; em
diferentes etapas...

Antes da liberao da cultivar seleo fenotpica

Desenvolvimento de metodologias mais rpidas e que


demanda menos recurso financeiro e pessoal.

Exemplo - Eucalyptus
x
F1

F1

Prognie F2 com mais de 1000 indivduos

F2

SAM precoce
Mapa + QTLs
(propriedade de madeira)

Grattapaglia, 2007

Seleo outras caracterstica

Exemplo - Algodo
x
G. hirsutum

G. barbadence

Piramidao
Retrocruzamento
Qualidade de fibra

Gh x F1
Gh x RC1

Mapa = RFLP,
AFLP, SSR
80 QTLs (comprimento,

RC2
RC2S1

Lacape et al., 2007

uniformidade,
elasticidade, maciez, cor)

19 regies ricas em
QTLs

Exemplo - Algodo
Piramidao
Retrocruzamento
RC4S
RC4

SAM

Gh x RC3

x
G. hirsutum

10%
Lacape et al., 2007

G. barbadence

Gh x F1
Gh x RC1

Gh x RC2

SAM

Qualidade de
fibra

RC2S1

Exemplo - Trigo
n

SAM = +50 genes de resistncia a fungos, virus e


insetos e genes relacionados a qualidade de po,
macarro e massa em 75 parentais recorrentes

Uso de 4 laboratrios high-throughput genotyping

80 projetos completos e 350 retrocruzamentos em


andamento (duas geraes por ano) em julho de 2004

Futuro: caracterstica quantitativa (genmica = mapas


saturados)

Exemplo - Trigo
n

Clonagem baseada em mapa do QTL GpcB1 (trigo selvagem)

Gpc-B1 acelera a maturidade e aumenta


protena, zinco e ferro do gro (10-15%)

Variedades de trigo apresentam cpia no


funcional

SAM sendo usada para incorporar o gene


em linhagens elite prximas de serem
lanadas como variedades

Exemplo - Trigo
n

Clonagem do Yr36 (trigo selvagem)

Yr36 confere resistncia parcial a ferrugem


(stripe rust)

Yr36 apresenta arquitetura diferente ainda


no encontrado em outro organismo

SAM sendo usada trs variedades j esto


comercialmente disponveis

Marcadores no
Ps-melhoramento

Marcadores no Psmelhoramento
Proteo de
cultivares
Monitorame
nto pureza
Fingerprintin
gentica
g de
cultivares

Ps-melhoramento

Proteo de Cultivares
w Registro Nacional de Cultivares
Cadastro de informaes
precisas sobre as caractersticas
das cultivares
Assegurar a identidade gentica
e comportamento das cultivares

Proteo de Cultivares

Identidade
Gentica
Registrada

Distinguibilidade
Homogeneidade
Estabilidade

Diferenas claras de
qualquer outra
cultivar registrada na
data do pedido

Proteo de Cultivares
Descritores
Estabelecido para
a espcie

Morfolgica
Fisiolgica
Identidade Gentica

Bioqumica
Molecular

Herdveis

Proteo de Cultivares
Limitaes de descritores
morfolgicos e fisiolgicos

w Tempo para as avaliaes


w Subjetividade
w Efeito do ambiente
w Estreitamento da base gentica das
cultivares

Morfologia planta adulta

Marcadores
Moleculares

Proteo de Cultivares
Apesar de ainda no ser reconhecido como metodologia
oficial, MM tm sido utilizados como descritores adicionais
para caracterizar e identificar cultivares com fins de
proteo de direitos.

Fingerprinting de Cultivares
w Demanda Judicial pirataria de sementes
w Necessidades:
-

Padronizao dos procedimentos de genotipagem


molecular;
Eleger conjunto nico de locos para a
caracterizao.

Monitoramento da Pureza
Gentica
Mistura de sementes
Material segregante
remanescente
Linhagens nos
Hbridos

Marcadores
Outras Aplicaes

Outras Aplicaes
Anlise de
pedigree
Clonagem de
genes
Filogenia
Conhecimento
carter
estudadode
Deteco
OGMs
Diagnose de
doenas

Outras Aplicaes
w Diagnose de doenas - Xylella fastidiosa
M 1

3 4

1) DNA X. fastidiosa Fundecitrus


2) X. fastidiosa Ervlia
3) X. fastidiosa So Gotardo
4) X. fastidiosa Araguari
5) DNA cafeeiro sadio

Consideraes
q

Critrios a serem considerados na integrao de


marcadores
moleculares
no
programa
de
melhoramento:
Natureza gentica da caracterstica (quantitativa x qualitativa);
Modo de ao gnica (aditiva, dominante, recessiva);
Efeito do gene na expresso do fentipo;
Complexidade da avaliao fenotpica;
Eficincia com que o marcador seleciona a caracterstica;
Relao custo/benefcio;
Disponibilidade de recursos tcnico-finaceiros.

Situaes onde integrar marcadores moleculares


vantajosa:
Necessidade de identificao de vrios genes para uma mesma
caracterstica (ex. piramidao resistncia);
Quando o fentipo s pode ser analisado tardiamente
(principalmente espcies perenes);
Quando necessria a deteco de alelos recessivos;
Necessidade de pocas ou regies especficas para seleo (ex:
tolerncia a seca, resistncia a doena...);
Seleo de mltiplas caractersticas (convencional conduo e
diferentes ensaios, um para cada caracterstica);
Segurana biolgica resistncia a pragas e doenas que ainda
no ocorrem na regio ou pas)

Uso eficiente de marcadores conhecer bem as


metodologias dos diferentes tipos de marcadores e o
seu potencial; a cultura que est trabalhando e o
programa de melhoramento;
Seleo assistida por marcadores e seleo fenotpica
tradicional no so estratgias excludentes - maior
eficincia obtida mediante combinao das duas
estratgias;
A medida que os mtodos de genotipagem e
estatsticos vo sendo desenvolvido a tecnologia vai se
tornando mais rpida e demandando menos recurso
financeiro e pessoal - aumenta acesso para os mais
variados programas de melhoramento.

a p lica d o s a o
m e lh o r a m e n t o d e
p la n t a s
eveline.c a ix eta @em bra pa .
br

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