COCOS GRAM POSITIVOS

Ana Y. Daz Montes*, Wendy Y. Herazo Madera*

Universidad de sucre, Facultad Ciencias de la salud, Programa de Medicina.

OBJETIVOS:

Estudiar las caractersticas de los cocos Gram (+) con importancia mdica
(Staphylococcus, Streptococcus. Enterococcus).
Conocer la utilidad de la prueba catalasa (+) al momento de diferenciar el
tipo de coco Gram (+) presente en un cultivo.
Aprender a clasificar Streptococcus en un medio agar sangre segn su tipo
de hemolisis.

MATERIALES:

Caja de agar con cultivos de Staphylococcus de diferentes especies

Caja con medio DNA
Plasma citratado de conejo
Cajas con medio Mueller Hinton
Sensidiscos de Novobiocina
Frasco gotero con agua oxigenada
Lamina portaobjetos y asas

PROCEDIMIENTO
La prctica se llev a cabo en dos das:

El primer da se realiz la toma de muestras; una procedente de un cultivo

previamente preparado y la segunda de tipo farngea, luego se llevaron a
incubar las respectivas siembras.
El segundo da se examin el crecimiento de bacterias en el cultivo y la
presencia de colonias aisladas; Se analiz si el medio agar sangre haba
tomado alguna coloracin, para determinar el tipo de hemolisis. Luego se

procedi a realizar la prueba de la catalasa, para ello se adicion perxido de

hidrogeno a una pequea porcin de muestra en una lmina.
Por ltimo se realiz un frotis que fue coloreado con la tcnica de tincin de
Gram; le adicionamos cristal violeta y dejamos actuar por un minuto; luego lo
enjuagamos con agua y dejamos escurrir. El siguiente paso fue adicionar lugol
y dejar actuar por un minuto al igual que en la adicin de cristal violeta, tambin
se enjuag y se escurri. Despus de esto, se agreg alcohol-acetona para
decolorar por 30 segundos, finalizado este tiempo se enjuag la placa, y se le
sum safranina por 5 segundos; y al finalizar se enjuag, escurri y se dej
secar, como paso final se procedi a observar ante el microscopio.

RESULTADOS
En la primera muestra se observaron colonias aisladas con las siguientes
caractersticas: Forma (circular), Borde (Entero), Elevacin (elevada), Superficie
(Cremosa), (ver figura 1). Las colonias no tomaron coloracin, se observaron
burbujas al adicionarle perxido de hidrogeno a la colonia tomada (ver figura 2).
En la segunda siembra, Las colonias aisladas tenan: Forma (puntiforme), Borde
(Entero), Elevacin (Plana), Superficie (lisa), (ver figura 3). Las colonias tomaron
una coloracin verde y no realizaron burbujas ante la presencia de agua
oxigenada (ver figura 4).
Ante el microscopio se observaron: En una lmina Cocos Gram (+) solitarios y
dispuestos en cadenas (ver figura 5) y en otra lamina cocos Gram (+) organizados
a manera de racimo (ver figura 6).

Figura 1: Imagen que muestra primer cultivo realizado con colonias aisladas en
medio agar sangre.

Figura 2: Se pudo apreciar la presencia de burbujas al realizar la prueba de la

catalasa en una colonia.

Figura 3: Imagen que present colonias aisladas en el segundo cultivo

correspondiente a una muestra farngea.

Figura 4: No se observan burbujas en la lmina cuando se le adiciona perxido de

hidrogeno.

Figura 5: Imagen en la se puede apreciar cocos y estreptococo Gram (+) a un

objetivo de 40X visto desde el microscopio.

Figura 6: A un objetivo de 40X se observan estafilococos Gram (+)