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Resumo de Biosseparao

Aula 1 Introduo:
-Propiciar o conhecimento de diferentes operaes unitrias e tcnicas de
separao utilizadas, em escala laboratorial e industrial, para purificao de
produtos obtidos por processos biotecnolgicos de diferentes fontes
biolgicas
-Upstream: Processos relacionados etapa de fermentao
(Microrganismo, Meio de fermentao e Fermentao)
-Downstream: Tecnologia utilizada para recuperao e purificao de
bioprodutos (Clulas microbianas, Clulas animais e Clulas vegetais)
-Influncia de Upstream para Downstream: Seleo microrganismo,
Adaptao microrganismo, Preparao de inculo, Estgios de prfermentao e Processo fermentativo
-A produo de bioprodutos pode no envolver reaes biolgicas:
extrao de produtos de valor acrescentado (alcaloides a partir de resduos
de biomassa), produo de protenas a partir de sangue e extrao de
enzimas a partir de tecidos animais

-Assim o termo de Bioprocessamento pode ser dividido em duas


grandes categorias:
1. Bioprocessamento Reativos
2. Bioprocessamento Extrativos

-Upstream processing No processo reativo envolve etapas como:

Screening de biocatalizador; enriquecimento, isolamento e propagao;


manipulao gentica (tecnologia de DNA recombinante ou hibridoma);
formulao e otimizao de meios de cultura; etc. J no processo
extrativo envolve apenas etapas de aquisio e recolha da matria prima e
seu pr-tratamento.
-Reao biolgica etapas como fermentao (cultivo de leveduras,
fungos, bactrias), cultura de clulas (animais ou vegetais), ou simples
reaes enzimticas
-ALGUNS ATRIBUTOS QUE DISTINGUEM A BIOSSEPARAO DA
SEPARAO QUMICA: 1. Os produtos biolgicos esto presente em
concentraes muito baixas nas fontes iniciais da qual tm de ser extrados

e purificados, 2. Presena de vrias outras substncias na fonte inicial de


bioproduto, normalmente impurezas ou sub produtos, que apresentam
frequentemente propriedades fsico-qumicas semelhantes ao nosso
bioproduto-alvo, 3. Altos requisitos de qualidade e pureza necessrios do
bioproduto, 4. Susceptveis desnaturao e outras formas de degradao,
5. So termo lbeis e 6. Separao multitcnica.
-Fatores que controlam a Separao: Tamanho, Densidade,
Difusividade, Forma, Polaridade, Solubilidade, Carga Eletrosttica e
Volatilidade.
-FORMAS:
1. Separao partcula-liquido: passagem por meio poroso ou suspenso
natural ou induzida
2. Separao partcula-partcula em meio liquido: meios porosos

por diferena de tamanho e centrifugao com partculas mais


pesadas que as outras
3. Separao partcula-soluto em meio lquido: similares ao utilizados
em separao slido-lquido
4. Separao soluto-solvente: Remoo do solvente, remoo de
impurezas ou substituio do solvente por outro
5. Separao soluto-soluto em meio lquido: Absoro seletiva, extrao
liquido-liquido, membranas e precipitao
6. Separao Liquido-liquido: miscveis ou imiscveis (destilao ou
decantao)
-TCNICAS DE BIOSSEPARAES:
Baixa Resoluo (seletividade) + alto rendimento(produtividade):
Rompimento Celular, Precipitao, Centrifugao, Extrao Lquido-Lquido,
Extrao com fludos supercrticos, Filtrao, Microfiltrao, Ultrafiltrao e
Adsoro
Alta Resoluo (seletividade) + baixo rendimento (produtividade) :
Ultracentrifugao, Cromatografia, Processos de Separao por Afinidade
Eletroforese.
-ESQUEMA PROCESSUAL DE BIOSSEPARAO: RIPP - Recuperao,
Isolamento, Purificao e Polimento.
Recuperao + Isolamento: Tcnicas de Baixa Resoluo.
Purificao + Polimento: Tcnicas de Alta Resoluo.
Desvantagens do RIPP: Alto custo capital e operacional e baixa recuperao
do bioproduto.
- n de etapas = menor %R = custo do produto final

Aula 2 Rompimento Celular


-Critrios para seleo da tcnica de rompimento: Tamanho da
clula, Tolerncia a tenses de cisalhamento, Necessidade de controle de
temperatura, Tempo de operao, Rendimento de processo, Gasto de
energia e Custo e capital de investimento
-Tipos de Clulas que necessitam rompimento: Clulas de Bactrias
Gram (+), Clulas de Bactrias Gram (), Clulas de Leveduras,

Clulas de Fungos, Clulas de culturas animais, Clulas de culturas


vegetais e Clulas de tecidos.

1)

ROMPIMENTO MECNICO: Os produtos intracelulares


so libertados por um rompimento fsico das clulas, Porcentagens
de ruptura superiores a 90% so alcanados, Requer elevado
consumo de energia e H grande gerao do calor durante o
processo.

- Homogeneizador a Alta Presso: Laticinios, aumenta


temperatura, para leveduras e bactrias, Constitudo de pistes projetados
para aplicar altas presses.

-Moinho de Bolas:

Fora de Cisalhamento, Fungos filamentosos e


leveduras, influenciada por: tamanho da cmara, tamanho e composio
das esferas, velocidade de entrada e de agitao, tipo do agitador,
concentrao e temperatura.

-Prensa Francesa:

Recuperao em pequena escala

-Ultrassom (Sonicao):
colapso com a superfcie a ser rompida;

Deformao de uma bolha simples em

2)

ROMPIMENTO NO-MECNICO: Evita

desnaturao, rompimento integral pode contaminar.

-Choque Osmtico:

Mtodo simples o qual consiste em variar o


equilbrio osmtico entre o interior da clula e o meio. No h rompimento
integral, Promove permeabilizao seletiva, para bactrias Gramnegativo com parede celular mais sensvel.

-Congelamento/Descongelamento:

repetidos choques
de temperatura forma cristais de gelo que furam a clula. Influencia: tipo e
idade da clula, temperatura e velocidade de choque.

-Termlise:

elevao da temperatura, A temperatura e o tempo de


incubao depende da clula e gerar fragmentos celulares com maiores
dimenses

-lcalis (qumico): QUANDO A BIOMOLCULA ESTVEL A pH


maior que 11, simples, barato mas gerampoluentes.

-Detergentes (qumico):

lisar ou permeabilizar as clulas


para a liberao dos componentes solveis atravs de perturbaes na

interaes protena-lipdeos e tem desvantagem de formar espuma e


desnaturao.

-Solventes (qumico):

desidratante qumico das clulas.

-Lise Enzimticas (qumico):

a presso osmtica interna


rompe a membrana citoplasmtica aps a parede celular, ou parte dela, ser
removida por ao das enzimas