Desarrollo del artculo: the origins of enzime kinetics.

Estudiantes:
-Juan Pablo Naranjo Romero.
-Daniela Diaz Palacio.
-Ivon Natalia Castillo Barrera.

1.
ATHEL CORNISH-BOWDEN
Britnico nacido el 3 de abril de 1943 en Ashburton, Devon, Gan Bretaa. Ha
realizados varios estudios en la universidad de oxfor entre los cuales se denota:
Pregrado y Posgrado en la escuela mayor, universidad de oxfor de 1961
1965.
Posdoctorado: fue realizado en el laboratorio de qumica orgnica de la
universidad e oxfor, desarrollo estudios sobre la catlisis por la pepsina,
acompaado y dirigido por el doctor daniel e. koshland en 1965 hasta 1967.
En la actualidad trabaja en la CNRS en marsella como diretor de 3
laboratorios y desde 2009 hasta la actualidad es director de EMIRATE. A
pesar de comenzar su carrera en un departamento de la qumica orgnica,
que ha hecho prcticamente toda su investigacin en bioqumica, con
especial referencia a las enzimas, incluyendo la pepsina, hexoquinasas
mamferos, y las enzimas que intervienen en el transporte de electrones en
las bacterias. [Ref 1]
2.
ORIGENES DE LAS ENZIMAS CINTICAS
Podremos iniciar con una breve definicin de lo que son las enzimas cinticas,
entonces, estas son las que estudian la velocidad de las reacciones qumicas que
son catalizadas por las enzimas. Ahora bien entrando en materia el articulo
llamado "The origins of enzyme kinetics" (el origen de las enzimas cinticas),
describe, como lo dice su ttulo el origen o ms que eso una breve historia para
lograr entender cmo se lleg a este termino de enzimas cinticas, desde su
primer planteamiento ms importante, sus inicios, su finalidad, algunos de los
personajes que intervinieron en esta y, las huellas que dejo para la ciencia del
presente. Como resultado el objetivo del mismo es dar informacin sobre todo lo

que abarca este tema, desde la importancia en el tiempo presente hasta el nmero
de veces que se ha tomado esa informacin para algn otro artculo o experimento
hecho a lo largo del tiempo; al igual que, cada una de las personas que intervino
en el descubrimiento y el mejoramiento de este trmino, de donde lo sacaron, de
donde se basaron, los problemas que tuvieron para llegar al descubrimiento de la
ecuacin final; donde se puede entender que cada uno de estos personajes fue
complementando al otro para poder llegar al gran descubrimiento exacto del
mismo, donde se mezclaran o desecharan las ecuaciones brindadas por cada uno
de ellos llegando a la ltima y ms completa. Adems se dejara claro el trmino de
enzima cintica como tal y su funcionamiento. Entonces Quines fueron los
famosos Michael y Menten,, que enfoque experimental desarrollaron para llegar a
ser considerados unos de los mejores cientficos cuando hablamos de cintica o
por que tuvieron tanto impacto con su escrito?

Michael y Menten fueron conocidos como uno de los mejores cientficos en torno
al tema planteado por ellos mismos; las enzimas cinticas, aunque antes ms
autores dieron una nueva visin para la realizacin de un anlisis a partir de las
tasas iniciales; esto ayudo en gran parte a Michael y Menten a eliminar las
complicaciones que aparecan en el transcurso de su investigacin. Entonces, su
contribucin bsica apareci del estudio de la inversin de la sacarosa catalizada
por la enzima invertasa1, la cual invertira dicha molcula nuevamente a sus
molculas iniciales (glucosa y fructosa), ellos expresaron la velocidad de reaccin
de la siguiente forma:
v =C . .

ISI
ISI + k

Donde es la concentracin molar total de la enzima invertasa, lSl es la

concentracin de la sacarosa, k es la constante de disociacin del complejo de la
enzima sustrato (no de velocidad) y C es la constante de proporcionalidad. Ahora
bien, como habamos dicho anteriormente Michael y Menten tuvieron antecesores,
donde uno de ellos planteo un trmino que ser importante en el artculo el cual
llamaremos como mecanismo de estado estable el cual en cuanto a la velocidad
de produccin del EA complejo de la enzima-sustrato, es balanceada con la
velocidad de su conversin a productos. 2 Luego de esto entraran Michael y
Menten donde plantearan otra constante Km(constante de Michaelis) la cual sera
igual a el equilibrio constante de disociacin de EA.3 Adems empiezan a tomar en
cuenta de la importancia del pH y empiezan a reconocer que las velocidades
iniciales son fciles de determinar con los cursos de tiempo y adems est toma
lugar en los efectos de mutarrotacin 4 espontanea en la cintica por mtodos
polarmetricos5 (importante para la invertasa).

Con respecto a los avances hechos por autores atrs hallamos otro nuevo
trmino, el complejo enzima sustrato 6. Entonces hablaremos de Brown y Henri,
probablemente los primeros en realizar un mecanismo que requiere el paso a
travs de un complejo de sustrato enzima; este implica un lmite superior en la
velocidad de una reaccin con enzimas catalizadoras, planteando el primer
modelo de saturacin de la enzima7. Ahora bien, Van Slyke y Cullen plantearon un
sistema que estudia la ureasa 8 y nuevamente estudiaran el complejo enzima
sustrato, pensaban que la enzima seria tomada en una reaccin irreversible y se
rompera en una segunda para regenerar la enzima libre (1), para esto recurre a
un tiempo requerido simple9, el cual es un proceso ocurrido en series, y
presentando adems el estado estable 10 (determina constante de velocidad), y,
analizado en trminos de tiempos aditivos, generando procesos metablicos
asignando dos constantes de velocidad. As que reevaluaremos la contribucin de
Henri y la que tuvo con su ecuacin 11, Henri fue ms all y vio los efectos del
producto en la reaccin junto con la enzima invertasa, donde apareci un una
nueva constante Kp la cual llamara la constante de inhibicin por producto. Ahora,
despus de saber un poco ms de donde sali el trmino de enzimas
catalizadoras veamos el enfoque experimental de Michaelis y Menten. Uno de
ellos trabaj con iones de hidrogeno en la invertasa, para un control del pH, donde
aparecieron dos nuevos nombres: Sullivan y Thompson quienes con sus
experimentos buscaron determinar cunto cido era necesario para ser
adicionado; deduciendo que la acides estaba en la ms favorable proporcin.
Luego de esto Michaelis propuso algo ms, la cual llamara el Michaels function;
esta era la interpretacin de pH, en donde vemos reflejado lo nombrado
anteriormente; la importancia del ion hidrogeno 12.
A partir del termino de ion hidrogeno, se denominaron bastantes trminos, como el
electrodo de hidrogeno el cual mide la concentracin del ion hidrogeno, adems la
enzima depende de la concentracin de este ion y no de la valoracin de la
acidez. Hay que mencionar, adems, un trmino que luego aparecer, llamado
inhibidor13 donde desde Henri se tom en cuenta el producto de la inhibicin, de
donde se deduce que los productos de una reaccin pueden tener un efecto
inhibidor en su velocidad y adems, se dividir en dos: competitivo (v/km) 14 y no
competitivo (v)15 . En conclusin, para comprender mejor la cintica de reacciones
catalizadoras por enzimas, llegaremos al complejo enzima-sustrato; la cual
participa como un intermedio en el mecanismo de reaccin, esta esta es una
muestra completa y donde se mantiene el estado de equilibrio entre la enzima libre
y el sustrato. En conclusin podemos decir que tuvo que pasar mucho tiempo y
adems de eso mucha informacin de diferentes autores, donde cada uno de sus
aportes fue integrado, utilizado o desechado por otros, para llegar a definir y llegar
a la ecuacin inicial para describir las enzimas cinticas y su funcionamiento; de
ah obtendremos la ecuacin utilizada hoy en da:
v=

Va
Km+ a

16

As mismo podremos responder la pregunta que nos hicimos al inicio de este

texto, en la que nos preguntbamos por qu estos dos hombres, Michaelis y
Menten, lograron tener tanto impacto a lo que corresponde al tema de cintica y
ms aun lo que llamamos enzimas cinticas.
1. Enzima invertasa: Se encarga de devolver de productos a reactivos, cataliza la
reaccin de la sacarosa.
2. E + A (K1) EA(K2 )E + D
3-16. V= Va/Km.a donde V: la velocidad inicial de a, Va limitante de la velocidad y
Km: la constante de Michaelis.
4. Mutarotacin: Es la interconversin entre anmeros a travs de la forma abierta.
5. Mtodos polarimtricos: es una tcnica que se basa en la medicin de la
rotacin ptica producida sobre un haz de luz polarizada al pasar por una
sustancia pticamente activa.
6. Complejo enzima sustrato: sustancia que se forma de la unin de una enzima
con un sustrato.
7. dx/dt= (k3 (a-x))/ (1+m (a-x) +nx)
8. Ureasa: enzima que cataliza la hidrlisis de urea a CO 2 y NH3.
9. Tiempo requerido cido cataltico simple = tiempos requeridos en dos pasos.
10. Estado estable: para determinar la velocidad.
11. v= Va/ (k2 /k1) Fa
12. Control del pH.
13. Inhibidor: son molculas que se unen a enzimas y disminuyen su actividad.
14. Aumentan el valor aparente de Km sin efecto de la velocidad.
15. Disminuye el valor aparente de la velocidad sin efecto en la Km.

3.
Catlisis qumicas:
Es la agrupacin de conocimientos que nos permite comprender y llevar a
cabo el proceso de aceleracin de una reaccin qumica, por medio de alguna
sustancia conocida, que no se consume, ni transforma la reaccin. A esta
sustancia se le denomina catalizador. [Ref2]
Catalizador:
- Sulfuros de molibdeno: Los catalizadores a base de molibdeno han sido
extensamente utilizados en procesos de hidrodesulfuracin (elimina el azufre
que se encuentra en las fracciones de Petrleo) en la reaccin del
petrleo.Recientemente se ha desarrollado un novedoso sistema cataltico
basado en el uso de emulsiones w/o (agua/aceite), con el fin de propiciar la
ultradispersion de los catalizadores de sulfuros metlicos. Este mtodo
permite introducir de manera controlada en la carga a convertir cantidades
relativamente altas del elemento activo, y los altos niveles de dispersin
alcanzados por las partculas generadas in-situ en condiciones de proceso

permiten obtener una considerable actividad cataltica al maximizar la relacin

de superficie activa expuesta por volumen de fase activa empleada.
-Catalizador de cobalto: Las formas industriales de realizar hidroformilacin de
olefinas se basan actualmente, en condiciones de cobalto como catalizadores sin
de fosfinas o fosfitos
El Cobalto se introduce en el reactor de alta presin de acero inoxidable, como
polvo metlico, hidrxido o sal. Es aqu donde reacciona en fase liquida, formada
por el propeno y productos de la oxorreacin, en las condiciones de
hidroformilacin, producindose rpidamente el hidruro de cobaltocarbonilo.
Generalmente el producto de reaccin de la olefina sirve como disolvente, pero
tambin se puede emplear como una mezcla de alcanos.[Ref 2.1]

Modelo de Michaelis - Menten:

En ausencia de una enzima la velocidad de la reaccin (v) es proporcional a
la sustancia(A). La constante k es la constante de velocidad no catalizada.
Como todos los catalizadores al enzima E genera un va de reaccin donde
se une la sustancia A con la enzima E entonces la concentracin del complejo
AE se expresara en trminos de A. Por lo tanto la constante michaelis (K)
describe la situacin de equilibrio de la reaccin.[Ref 3]
Enzima:
Las enzimas son protenas que catalizan reacciones qumicas generalmente
en los seres vivos. Las enzimas son catalizadores especficos hechos para
determinado sustrato. Se clasifican en 6 segn la especifidad de su funcin en
la reaccin y estas son:
-oxido-reductoras.
-transferasas.
-hidrolasas.
-Lasas.
-isomerasas.
-ligasas.[ref4]
Inhibicin:
Los inhibidores son sustancias que haces reducir la actividad de las enzimas.
La inhibicin puede ser reversible o irreversible.[Ref 5]
Los antibiticos betalactmicos (el grupode la penicilina), y las cefalosporinas
son inhibidores de la sntesis de peptidoglicano. Especficamente interfieren

con la sntesis de las cadenas peptdicas laterales que se entrelazan para

mantener unidas las unidades de carbohidratos del peptidoglicano
Energa de activacin:
Esta es la energa que se necesita para elevar a una molcula de poca
reactividad a un estado activo. La energa de activacin funciona con la
temperatura al aumentar la temperatura de una molcula esta aumenta su
k =e1
xi
velocidad cintica lo que la permite ser una molcula activa. Por es
[Ref6]
Para una reaccin simple:
[x ]
G= G+0.616 ln
[ y]
Dos reactantes un nico producto:
K= [ AB ] /[ A ][B ] [Ref7]

ADN polimerasa:
El ADN polimerasa es la enzima principal encargada del proceso de
replicacin, mediante ella se sintetiza una nueva cadena emparejando los
nucletidos presentes en la replicacin (A-T) (G-C).El ADN polimerasa copia
nucletidos complementario a la cadena por un enlace fosfodiester. El ADN
polimerasa tambin es el encargado de la reparacin del ADN en el proceso
de replicacin con los llamados puentes de okazaki, aunque solo lo lee en el
orden de 5 a 3.
Existen 5 enzimas de ADN polimerasa, cada una diferente por su ubicacin o
funcin estn son: alfa, beta, gamma y psilon.
-La ADN polimerasa alfa participa en el proceso de replicacin del ADN
dirigiendo la replicacin de la cadena retardada que es la cadena que crece de
3' a 5' que es el sentido contrario al del crecimiento de la nueva cadena de
ADN.
- La ADN polimerasa beta se encarga de los procesos de reparacin del ADN.
- La ADN polimerasa gamma realiza la replicacin del ADN mitocondrial.

4.

Clancy, S. Chemical structure of RNA. Nature Education. Vol 7. Pp 60. 2014

Neitzel, J. J. Enzyme Catalysis: The Serine Proteases. Nature
Education. Vol 3. Pp 21

REFERENCIAS
-Athel Cornish-Bowden recuperado el 19 de agosto de 2015 . http://bip.cnrsmrs.fr/bip10/cvspan.htm
http://www.icbbe.org/epph2012/ShowOrganizerDetails.aspx?personID=1752
En lnea[Referencia 1]
- Aspectos fundamentales de la catlisis y los catalizadores. Recuperado el 19
de
agosto
del
2015
(http://cesiq.univalle.edu.co/html/modules.php?
name=News&file=article&sid=169;
http://bibliotecadigital.ilce.edu.mx/sites/ciencia/volumen2/ciencia3/059/htm/sec
_5.htm) en lnea [Referencia 2].
-Weissermel K., Arpe, H. Quimica Organica industrial. Editorial Reverte S.A.
Espaa (1981).pp 123[Referencia[2.1]
-Bradley Frank. Bennet thomas pg 131 bioqumica [Referencia 3].
-Teijon Maria Jose. Bioqumica estructural. Edicin editorial tebar pg 280
[Referencia 4]
-petro juli, sendra ramn,pamblanco merce,bao Carmen. Fundamentos de
bioqumica primera edicin en cataln pg 109 [Referencia 5]
-klages.f. Tratado de qumica orgnica primera edicion editorial reverte S.A pg
43[Referencia6]
-albert bray,hopking jhonson,Lewis raff, Robert walter. Introducion a la biologa
celular. Segunda edicin editorial metica panamericana pg 93[Referencia7.]