UTFPR UNIVERSIDADENTECNOLGICA FEDERAL DO PARAN

CAMPUS CAMPO MOURO

Nome:
Biomdica

Michel Fiuza
Disciplina: Princpios de Eng.
Prof.: Paulo Da Luz

1 Apresentao de Artigo.

BOM DIA PESSOAL!!

Bom, MEU NOME MICHEL e o tema deste artigo : Os Efeitos
do Laser de Baixa Intensidade em Feridas Cutneas Induzidas em
Ratos Diabticos.
Este artigo, foi produzido por trs autores: Carvalho, Mazzer, Corazza,

Raduam.
E pelo que eu entendi, cada autor de uma Universidade diferente:
Departamento

de Bioengenharia EESC/FMRP/IQSC-USP/SP
Fisioterapia UNIDERP/MS e Faculdades Salesianas de Lins/SP.

Departamento

de

INTRODUO
Os princpios fsicos amplificao da luz pela emisso estimulada da
radiao foram demonstrados e comprovados em 1917 por Albert Einstein,
e somente na dcada de sessenta o primeiro feixe de luz laser foi produzido
por Maiman. Entretanto, sua utilizao tornou-se mais difundida nos
ltimos dez anos.
So vrios os autores que se reportam ao tema, entretanto ao nvel
nacional as pesquisas caminham lentamente.
Mester no incio dos anos setenta foi o primeiro a utilizar o laser de
baixa intensidade na cicatrizao e reparo de feridas em humanos, com
base nestes estudos principalmente pela velocidade aumentada da
cicatrizao, esta modalidade tornou-se popular, contudo, diante do fato de
que em muitos estudos publicados at agora os resultados no so
exclusivamente positivos, justifica-se a realizao de novos estudos
referentes a cicatrizao de feridas.
O tema cicatrizao de feridas, se torna mais agravante quando nos
referimos a diabticos, devido as alteraes neurotrficas e na morfologia
dos vasos sanguneos que dificultam o reparo tecidual.
Considerando estas premissas, este trabalho tem como objetivo
verificar a correlao entre a regenerao tecidual de feridas cutneas
induzidas em ratos diabticos e no diabticos, submetidos radiao do
laser de baixa intensidade.
METODOLOGIA
O animal escolhido foi o rato da raa Wistar pelas seguintes razes:
sua ampla utilizao em pesquisas biomdicas, facilidade de manuteno,

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manuseio e padro estabelecido das caractersticas que o animal apresenta
ao diabetes induzido pelo Aloxana.
Os pesos corpreos variaram de 200 a 300 gramas, mantidos em foto
perodo de 12 horas, ficando sob observao por um perodo de dois dias,
antes da utilizao dos mesmos no experimento. Os animais foram
alimentados antes e durante todo o experimento com rao slida e gua
vontade. Os nveis de glicemia e variaes de peso corpreo foram
monitorados ao longo de todas as etapas do experimento.
O diabetes foi induzido em oito animais, mediante a injeo de
Aloxana. Dos animais induzidos somente 4 atingiram o nvel ideal de
glicemia para a diabetes. Em uma etapa posterior, foi realizada ulcerao
do tero mdio do quadrceps.
24h aps a cirurgia iniciou-se a aplicao do laser Hlio Nenio
com dosagem de 4 joules por centmetros quadrados por 7 dias
consecutivos. Ao final do tratamento convencionado, os animais foram
sacrificados com inalao de ter etlico e colhidas amostras de tecido
epitelial ulcerado e normal em cunha, respeitando a extenso e
profundidade das feridas e colocado em recipiente contendo soluo de
Formal a 10%, sendo enviado para anlise histolgica. Para o estudo
antomo-patolgico, os fragmentos foram, emblocados em parafina, e
corados com H.E. e Tricrmico de Masson.
Tricromo de Masson: uma combinao de corantes usados em
um protocolo de colorao em histologia. As formulaes desta colorao
tem como finalidade distinguir clulas do tecido conjuntivo circundante.
Muitas da formulaes produzem cor verde na queratina e fibras
musculares, azul ou verde em colgeno e tecido sseo, vermelho brilhante
ou rosa no citoplasma, e castanho escuro a preto nos ncleos das clulas.

EQUIPAMENTO LASER UTILIZADO: O aparelho foi o Laser HeNe

(Hlio-Nenio) plasmax IV, LHN 9709 da marca KLD Biossistemas com
potncia contnua mxima de 5 mW comprimento de onda de 632,8nm
visvel, emisso direta feixe com 0,81 mm de dimetro.
INTRODUO DO DIABETES ALOXNICO
Os animais ficaram em jejum prvio por 24h, pois nestas condies
tornavam-se mais susceptveis ao diabetes. Aps anestesia por inalao de
ter etlico, eram contidos para receber uma injeo intravenosa veia
dorsal do pnis de Aloxana.
De uma soluo estoque de 50mg de Aloxana e 0,8 ml de soro
fisiolgico preparada no momento da sua utilizao, aplicava-se 0,1 ml de
soluo a cada 100 gramas de peso corporal, resultando em dose final de
62,5 mg de Aloxana/kg de peso.
Decorrida 6h aps a injeo, os animais foram tratados com glicose
adicionada gua, para evitar convulses e morte comuns na fase
hipoglicmica.

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Aps 24h foi retirada a glicose da gua. Para constatar o diabetes
utilizou-se o seguinte padro de monitoramento glicmico: Verificao da
glicemia antes da induo ao diabetes, verificao da glicemia 72h aps a
induo ao diabetes, sendo que os animais que no apresentaram valores
iguais ou superior a 250 miligramas por decilitro de sangue foram
descartados, verificao da glicemia no quinto dia do tratamento para
confirmao da permanncia do diabetes e finalmente verificao do
diabetes no dia do sacrifcio para avaliar qualquer processo de reverso do
diabetes.
As verificaes foram feitas retirando-se sangue da veia da cauda
sendo colocada uma gota sobre fitas reagentes da marca ADVANTAGE e a
leitura feita em um GLUCOMETER.

INDUO DAS FERIDAS CUTNEAS

Foi utilizado anestsico Quetamina. O tempo de anestesia
proporcionado pelo anestsico foi de 55 minutos sem alterao nos
parmetros fisiolgicos e demais funes gerais.
Assim foi realizado um procedimento cirrgico com bisturi n 20
promovendo uma leso com dimetro de 2 cm e 0,5 de profundidade no
tero mdio do quadrceps.
TRATAMENTO
Os animais foram divididos em trs grupos distintos A, B, C contendo
dois animais em cada grupo, sendo que cada animal recebeu uma
designao como:
Grupo A Cobaias I e II diabticas Tratadas;
Grupo B Cobaias III e IV no diabticas tratadas;
Grupo C Cobaias V e VI no diabticas, no tratadas.
controle!)

(Grupo

de

Cada animal do grupo A e B foi tratado com aplicaes dirias de

Laser HeNe com dosagem de 4j/cm em uma rea de 3 cm, durante 36
segundos. O grupo C foi adotado como grupo controle comparativo para o
resultado da anlise macroscpica e microscpica na remodelao epitelial
das leses.
Os animais I e III receberam trs aplicaes de laser, assim aps 72h
estes animais mais a cobaia V foram sacrificados por inalao de ter etlico
e foram retiradas as amostras e conservadas em Formol a 10%. Este
procedimento foi adotado para analisar quais os benefcios da laser terapia
na fase inflamatria e na fase inicial da proliferao.
Os animais II e IV receberam sete aplicaes de laser e no trmino do
tratamento foram sacrificados, mais a cobaia VI, sendo adotado o mesmo
procedimento j descrito anteriormente.

RESULTADOS

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Todos os dados colhidos so descritos na Fig.1 em escala
semiquantitativa e plotados na Fig.2, onde o eixo das ordenadas representa
o os valores de zero a quatro de intensidade das ocorrncias na escala
semiquantitativa, o eixo das abscissas representa os achados da
microscopia. Os valores amostrais dividiram-se basicamente em trs grupos,
constando o perodo da retirada da amostra, se foi tratada ou no e ainda se
eram diabticas.

Dados Microscpicos:
L = Neutrfilos;
V = Nmeros de Vasos;
F= Fibrose;
B= Nmero de Fibroblastos