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Aerbios
Obrigatrios
Anaerbios
Facultativos
Estritos
Propriamente
Estritos
Aerotolerantes
Metabolismo na presena de O2
Exigem O2 como aceitador final de electres
Metabolismo na ausncia de O2
Crescem aerobicamente, usando O2 como aceitador final de electres e
anaerobicamente, obtendo energia pela fermentao de compostos orgnicos
Incapazes de usar O2 e inibidas por ele
No tolera [O2] maior que 0,5%
So membros da flora normal
Toleram [O2] at 2-8%
Responsveis pela maioria das infs.
Intra-abdominais
Tracto genital feminino
Tecidos moles
Abcessos cerebrais
Abcesso periodontal
Outras infs. orais
Pneumonia por aspirao
Abcessos pulmonares
Pneumonia necrosante
Peritonites e abcessos
Abcessos tubo-ovarianos
Abcessos vulvo-vaginais
Aborto sptico
Gangrena gasosa (mionecrose)
Celulite crepitante
Fasceite necrosante
Colheita de amostras
Por aspirao com agulha e seringa
Amostra de tecido por bipsia
Zaragatoas se possvel, devem ser rejeitadas!
Mais susceptveis de contaminao
Mais expostas ao O2 e dessecao
No permitem a preparao de um bom esfregao
Colheita de pequeno volume de produto para amostra
Local
Sangue
Dentes
Espcimen aceitvel
Sangue
Aspirados endodentarios
Aspirados de coleco purulenta
Faringe
Seios
Espcimen inaceitvel
Raspados das superfcies
gengivais, dos dentes ou mucosa
vizinha
Zaragatoa
Irrigao ou aspirados
2
perinasais
rea pulmonar
SNC
rea
abdominal
Tracto genital
feminino
Tracto urinrio
Tecidos moles
Aspirao transtraquel
Aspirados de coleces purulentas
Colheira por operao
Aspirao percutnea pulmonar
Liquido pleural
Aspirado por broncoscpio com proteco
terminal
LCR
Aspirados por paracentese
Bile
Colheitas por interveno cirrgica
Culdocentese
Colheita cirrgica
Colheita por laparoscopia
Espcimen da cavidade endometrial com curette
de suco
Aspirado de urina supra-pbico
Aspirados de feridas profundas
Aspirados com agulha atravs de zonas intactas
Colheira cirrgica
Expectorao espectorada
Aspirados nasofarngeos
Broncoscopia vulgar
Aspirado de traqueostomia
Transporte da amostra
Amostras mantidas a 37C
Evitar refrigerao das amostras leva diminuio do n microrganismos viveis
Em caso de atraso de 15-20 mins entre colheita e processamento
Velocidade de transporte tanto maior quanto menor a amostra colhida
Usados para pequenas amostras de tecido, fluidos aspirados ou especimens colhidos com zaragatoas
Tubos fechados ou frascos com uma atmosfera anaerbica e base de agar isotonica que mantm
ambiente hmido Port-A-Cul system, Anaerobic Transport Mdium, Anaport e Anatube
Tubos de vidro ou plstico, com sistemas catalticos para gerar um ambiente anaerbico depois da
zaragatoa ser inserida Vacutainer anaerobic specimen collector, Anaerobic Culturette system
Tubos com ambiente anaerbico e meio de transporte reduzido PRAS, anaerobic transport system,
anaerobic transport medium
Exame macroscpico
Inspeco visual sugerem a presena de bactrias anaerbias:
Purulncia
Odor ptrido
Tecidos necrosados
Pus com gros de enxofre
Exame com luz U.V. (360 nm) pesquisa de fluorescncia vermelho tijolo: anaerbios pigmentados
Porphyromonas e Prevotella
3
Exame microscpico
Esfregao corado pelo Gram observao de morfologia tpica de mts bacts
Bacteroides bacilo Gram- pouco corado, pleomrfico
Fusobacterium bacilo Gram- fusiforme e fino
Veillonella coco Gram- pequeno
Actinomyces bacilo Gram+ ramificado
Clostridium perfringens bacilo Gram+ largo e rectangular
Mtodo de Gram - funciona como um controlo de qualidade
Se espcimen transportada correctamente
Se meio de isolamento foi apropriado
Se sistema de incubao anaerbico foi apropriado
Se subcultura anaerbica foi feita correctamente
Se crescimento foi inibido pela presena de outras bactrias ou antibiticos
Microscopia de campo escuro e contraste de fase demonstrao de espiroquetas
Imunoflourescncia com anticorpos monoclonais rpida identificao de mts espcies anaerbias,
caro, mts falsos + e , no substitiu cultura
Outros procedimentos
Cromatografia gs-liquida (GLC) analise directa dos AG de cadeia curta
Culturas de sangue com algum valor
Analise directa de material purulento pouco sensvel e especifico
Testes serolgicos uso limitado, teste de antigenio do ltex para Clostridium difficile
BBE agar (Bacteroides bile esculin agar) crescimento selectivo de B. fragilis, ocasionalmente
outras bactrias crescem: Fusobacterium, Klebsiella, Enterococcus
KVLB agar (agar sangue lisado com vancomicina e kanamicina) crescimento selectivo de
Bacteroides e aumenta a produo de pigmento nos Bacteroides pigmentados (Prevotella e
Porphyromonas); bacilos Gram- resistentes kanamicina podem crescer neste meio
Agar sangue de carneiro com lcool fenietil crescimento da maioria dos anaerbios Gram- e +;
inibe bacilos anaerbios facultativos Gram Agar sangue com colistina e acido nalidixico crescimento dos anaerbios estritos e facultativos
Gram +; maioria das bactrias Gram- so inibidas
Caldos se sistema de incubao anaerbico falhar, a espcimen em cultura no ser perdida
Meio de tioglicolato enriquecido com hemina e vit K1 isolamento de anaerbios de crescimento
lento, como Actinomyces
Chopped meat broth (caldo de carne) para isolamento de anaerbios
Incubao em anaerobiose
Composio habitual 5% H2, 5% CO2, 90% N2
Sistemas produo de anaerobiose:
Jarra de anaerobiose
Saco de
anaerobiose
Baixo
Alto
Cmara de
anaerobiose
Alto
Moderado
Moderado
Moderado-grande
Sistema em
anaerobiose por
catalisador
palladium, reactivo
pelo calor a
160C/2h, ambiente
mantido seco por
gel de slica (pode
empobrecer
crescimento bact)
Placas
inspeccionadas a
Custo inicial
Custo de
manuteno
Tempo
Espao
Outras
caractersticas
Moderado
Moderado
Baixo
Moderado
Sistemas de vlvulas
Sistema de evacuaosubstituio
Sistema gerador de gs
Sistema Gs-Pak
catalisador palladium e
indicador de
anaerobiose
Baixo
Pequeno
1 ou 2 placas,
crescimento pode
ser detectado
examinando as
placas pelo saco
transparente
Vantagens
Simples, conveniente,
permite uso de tcnicas
Placas
inspeccionadas a
Roll tube
Moderado
Moderado
Moderado
Moderado
ptimo p/ espcies
extremamente
sensveis ao O2,
no conveniente
para isolamento de
anaerbios
obrigatrios
moderados
associados s infs.
humanas
Tubos
inspeccionados a
5
convencionais
Desvantagens
qq momento sem
perturbar as
condies de
anaerobiose;
simples,
conveniente,
permite uso de
tcnicas
convencionais
Uso de apenas 2
placas,
possibilidade de
exposio
prolongada das
placas ao O2
durante
subculturas
Possibilidade de
exposio prolongada
das placas ao O2
durante
inspeco/subculturas
qq momento sob
condies de
anaerobiose,
isolamento
segundo tcnicas
tradicionais
qq momento sem
perturbar as
condies de
anaerobiose
Ocupa mt espao,
custo inicial
elevado, consumo
de tempo elevado
Tecnicamente
difcil, difcil
isolamento de
estirpes em cultura
pura, no permite
obs da morfologia
celular tpica
Anaerbios
Morfologia
Esporos
Dupla zona de
-hemolise
kanamicina
colistina
vancomicina
Crescimento
em 20% bile
catalase
Alanina
peptidase
Produo de
indol
Reduo de
nitratos
urease
lipase
lecitinase
Mobilidade
B. fragilis
B. pigmentados
B. ureolyticus
Fusobacterium
Veillonella
Peptostreptococcus
C. perfringens
C. difficile
Propionibacterium
Eubacterium
B
CB/B
B
B
C
C
B
B
B
CB/B
+
+
-
+
-
R
R
S
S
S
V
S
S
S
S
R
V
S
S
S
R
R
R
R
R
R
V
R
R
R
S
S
S
S
S
+
V
+
+
-
V
V
V
+
-
+
+
V
+/V
V
V
V
V
+/-
+
+
V
+
+
V
-
V
V
-
+
-
V
+
-
Bactrias
anaerbias
Bacilos anaerbios,
Gram +,
formadores de
esporos
Bacilos anaerbias,
Gram +, no
formadores de
esporos
Actinomyces
Mobiluncus
Bifidocterium
Eubacterium
Propionibacterium
Lactobacillus
Cocos anaerbios
Gram +
Bactrias
anaerbias
Gram
Actinomyces
Mobiluncus
Lactobacillus
Bacilos anaerbios facultativos ou obrigatrios
Boca, estmago e TGU (o + comum na uretra)
Frequentemente isolado na urina e sangue
Resistente vancomicina
Bacteremia, endocardite, septicemia
oportunista
Tratamento penicilina + aminoglicosdeo
Bifidobacterium e Eubacterium
Orofaringe, clon e vagina
Baixa virulncia raramente causam infs.
Bactrias
anaerbias
Bacilos anaerbios,
Gram +,
formadores de
esporos
Bacilos anaerbias,
Gram +, no
formadores de
esporos
Cocos anaerbios
Gram +
Bactrias
anaerbias
Gram
Bactrias
anaerbias
Bacilos anaerbios,
Gram +,
formadores de
esporos
Clostridium
Bacilos anaerbios,
Gram +, no
formadores de
esporos
Cocos anaerbios
Gram +
Bactrias
anaerbias
Gram
Anaerbios estritos
Ubiquitrios solo, gua, TGI de humanos e animais
Maioria comensais
Capacidade de patogenicidade
Sobrevivncia em condies adversas pela esporulao
Crescimento rpido em meios sem O2, enriquecidos nutricionalmente
Produo
Toxinas histoliticas
Enterotoxinas
Neurotoxinas
Clostridium perfringens
Bacilos grandes, rectangulares, Gram +
Esporos raramente obs (in vivo/in vitro)
Imveis, crescimento tpico de bacts. mveis
Hemolticos zona dupla de hemolise pelas
toxinas e em agar-sangue
Produo de toxinas letais: , , ,
5 tipos (A-E): A infs. + freq
C enterite necrosante
Produo de lecitinase (PLC) = -toxina (lise)
Da por exposio exgena ou endgena
Infs. tecidos moles, celulite, miosite
supurativa, mionecrose ou gangrenas gasosas,
gastroenterite, intoxicao alimentar (autolimitada), enterite necrosante
Tratamento penicilina
Clostridium tetani
Bacilo mvel, com esporos nas extremidades
Difcil crescimento anaerbios estritos
Proteoliticos, no fermentam carbohidratos
2 toxinas:
Tetanolisina hemolisina, oxignio-labil
Tetanospasmina neurotoxina termo-labil
provoca Ttano por desregulao da actividade
excitatria neuronial paralisia espstica
Vacinao com toxoide tetnico
Testes de neutralizao antitoxina tetnica
Ttano:sistmico, localizado, ceflico,neonatal
Clostridium difficile
Anaerbios estritos
Infs. endgenas
Diarreia ps-antibioterapia
Colite pseudomembranosa
Produo:
Toxina A = enterotoxina
Toxina B = citotoxina
Hialuronidase
Factores de adeso
Diagnstico deteco de enterotoxina ou
citotoxina nas fezes
Tratamento vancomicina e metanizadole
Clostridium botulinum
Anaerbios estritos
Crescimento lento
Produo de 1 de 7 toxinas (A-G) toxinas
botulinicas (termo-labeis)
Estirpes que causam da produzem lipase,
protenas digerem leite, gelatinases, fermentam glicose
Da humana toxinas A, B, E e F
Botulismo bloqueio da libertao de Ach
paralisia flcida
Isolar bacts 10 mins a 80C
Toxinas inactivadas se 10 mins a 60-100C