Barquisimeto 07 de Abril del 2012

PREGUNTAS DE BIOQUMICA MDICA

SEALIZACION CELULAR
Rafael Bonfante-Cabarcas MD PhD
PREGUNTA 1
En dos clulas diferentes (A y B), en un compartimiento celular
bien definido con condiciones inicas fisiolgicas, coexisten dos sistemas
de sealizacin celular mediados por receptores acoplados a protena G;
el primero acoplado a Gs y el segundo acoplado a Gi, ambas al momento
del ensayo exhiben un Vm = - 40 mV.
Al aplicar a la clula A un agonista (10 M) de los RAPGi, se induce
una corriente en sentido extracelular de 1200 pA, la cual hiperpolariza la
clula.
A la clula B interacciona primero con un agonista de los RAPGs, y
posteriormente es estimulada por agonista de los RAPGi (10 M); en este
caso la corriente en sentido extracelular que se genera es de 600 pA y la
hiperpolarizacin que se causa es menor.
En base al enunciado de la pregunta conteste las siguientes
preguntas.
1)
Identifique el canal responsable del fenmeno elctrico
hiperpolarizante (razone su respuesta) e indique
esquemticamente mediante un dibujo la ruta
metabotrpica que lo activa.
2)
Exponga razonadamente mediante un dibujo los
mecanismos que expliquen que en la clula B exista una
disminucin de la corriente en sentido extracelular.
PREGUNTA 2
En un ratn transgnico se induce la sobreexpresin de una
Protena GAP en el hepatocito. En condiciones de ayuno el ratn
presenta una hipoglicemia temprana transitoria. En el ratn normal no
se observa hipoglicemia en el ayuno.
En base al enunciado de la pregunta conteste las siguientes
preguntas:
1)
Mediante un dibujo explique esquemticamente la ruta de
sealizacin celular y la ruta metablica que permite
mantener los niveles normales de glucosa sanguinea en el
ayuno temprano.
2)
Explique razonadamente porque el ratn transgnico
presenta hipoglicemia en el ayuno temprano.

PREGUNTA 3
La aspirina (inhibidor de la COX I) puede precipitar crisis de
broncoconstriccin en el 20% de los pacientes asmticos. Hoy en da se
conoce que este fenmeno no es alrgico, una de las teoras plantea que
se debe a un trastorno de la sealizacin mediada por PLA2, con un
incremento de la sealizacin por Leucotrienos y una expresin
disminuida de la COX.
1) Indique como se activa la Fosfolipasa A2.
2) Indique las vas de sealizacin que se activan por la activacin de
la Fosfolipasa A2.
3) Indique esquematicamente las rutas metablicas involucradas en
la broncocontriccin inducida por Aspirina e identifique los puntos
clave asociados con la enfermedad.
4) Razonadamente indique que mecanismos podran estar
involucradas en el incremento de la sealizacin por Leucotrienos.
PREGUNTA 4
En msculo cardiaco la sealizacin mediada por receptores 1
adrenrgicos (RAPGs) incrementan la fuerza de contractibilidad de la
fibra miocardica y aumenta la generacin y velocidad de conduccin de
los seales cardiacas, sin embargo, la aplicacin continua de Agonistas
1 adrenrgicos conlleva a que la respuesta observada sea cada vez
menor.
1) Indique la ruta de sealizacin involucrada en el efecto 1
adrenrgico sobre la contractibilidad cardaca.
2) Por qu se incrementa la velocidad de conduccin elctrica del
corazn?.
3) Defina como se denomina la disminucin de la respuesta
observada e indique esquemticamente mediante un dibujo el
mecanismo que la soporta.

Pregunta 5.
El automatismo cardaco es regido
primariamente por el nodo sinusal y se basa
en la capacidad que tienen las clulas del
nodo sinusal de despolarizarse
espontneamente hasta alcanzar el
potencial umbral y disparar los potenciales
de accin que determinan la frecuencia
cardaca.
A continuacin en el dibujo a la
derecha describimos las fases de un
potencial cardiaco autoregenerativo.
La fase 4 se inicia con la apertura (Potencial de Apertura -60 mV;
lnea gris continua) de canales que generan corrientes If. La duracin de
la fase 4 determina la Frecuencia Cardiaca. La Fase 0 o fase de ascenso
del potencial de accin se inicia en el potencial umbral indicado con
lnea punteada. La fase 3 o de descenso del potencial de accin es
indicada.
A continuacin se muestran potenciales de accin sinusal en
condiciones normales, bajo estmulo simptico mediado por RAPGs y
bajo estmulos parasimpticos mediados por RAPGi.

En base a los datos conteste las siguientes preguntas:

1) Qu tipo de canal genera las corrientes If?
2) Que tipo de canales podran estar involucrados en la Fase 4,
adems de los canales que generan las corrientes If?
3) Cules canales predominante abren durante la fase 0?
4) Cules canales predominante abren durante la fase 3?
5) Cul es el mecanismo de apertura de los canales involucrados en
el potencial de accin?
6) Qu diferencia existe en cuanto al mecanismo de apertura de los
canales de la fase 0 y los canales que generan las corrientes If?
7) Indique el efecto de la estimulacin simptica (Bradicardia o
Taquicardia) y mediante un dibujo esquemtico indique la ruta de
sealizacin que explica el efecto.

8) Indique el efecto de la estimulacin parasimptica (Bradicardia o

Taquicardia) y mediante un dibujo esquemtico indique la ruta de
sealizacin que explica el efecto.

PREGUNTA 6
Datos
1) Los ratones transgnicos que sobreexpresan un receptor 1Adrenergico (RAPGs) mutante incapaz de reclutar las -Arrestinas
muestran una marcada apoptosis de los cardiomiocitos e
insuficiencia cardaca ante una estimulacin adrenrgica
sostenida.
2) En los ratones normales se observa una hipertrofia de los
cardiomiocitos, seguido de una apoptosis disminuida y
evolucionan ms lentamente hacia la insuficiencia cardiaca, sin
embargo, sin son tratados con un inhibidor de RAF kinasa se
comportan similar a los transgenicos.
3) Los antagonistas 1-Adrenergicos con discreta actividad agonista
son capaces de mejorar a los ratones sometidos a una
estimulacin adrenrgica sostenida, sin embargo, la mejora es
menor en los ratones transgnicos al ser comparados con los
normales.
4) Asimismo, ratones tratados con ligandos agonistas de los
receptores 2 (RAPGi) disminuyen la apoptosis y aumentan la
sobrevida de los ratones transgnicos y los normales.
En base a los datos conteste las siguientes preguntas:
1) Indique la ruta de sealizacin que induce apoptosis de los
cardiomiocitos causada por una sobreactivacin del sistema
adrenrgico.
2) Explique razonadamente mediante una ruta de sealizacin
porque en los ratones normales hay una disminucin de la
apoptosis.
3) Explique razonadamente porque los antagonistas de los receptores
-Adrenrgicos mejoran y retardan la enfermedad causada por la
sobreactivacin adrenrgica.
4) Explique razonadamente porque los ratones transgenicos
responden con menos eficiencia al bloqueo de los receptores Adrenergicos con antagonistas con discreta actividad agonista.
5) Indique la ruta de sealizacin mediada por agonistas 2 que
disminuyen la apoptosis.
Pregunta 7
La administracin de insulina induce la entrada de glucosa a las clulas
dependientes de insulina, sin embargo, anticuerpos monoclonales contra
PIP2 bloquean el transporte de glucosa, mientras que la nitrosilacin de
la Fosfatasa especfica para PIP3 incrementa la utilizacin de la glucosa.
1) Indique la ruta de sealizacin celular involucrada en el transporte
de glucosa dentro de la clula.

2) Indique la ruta de sealizacin celular involucrada y el mecanismo

de nitrosilacin de PIP3 Fosfatasa.
3) Explique el efecto de los anticuerpos monoclonales anti-PIP2.
4) Explique porque la nitrosilacin de PIP3 Fosfatasa incrementa la
utilizacin de la glucosa.
Pregunta 8.
Las protenas v-SRC y ABL1 son oncognicas. En la primera se observa
frecuentemente una mutacin en el residuo Tir 527 y en la segunda el
dominio SH3 no es transcrito.
En base a los datos conteste las siguientes preguntas:
1) Explique el mecanismo de regulacin de la actividad de la protena
kinasa SRC.
2) Explique el mecanismo que explica la oncogenicidad de v-SRC.
3) Explique el mecanismo de regulacin de la actividad de la protena
kinasa ABL.
4) Explique el mecanismo que explica la oncogenicidad de ABL-1
5) Disee una ruta de sealizacin que explique el incremento de la
proliferacin celular inducida por las kinasas SRC y/o ABL.
Pregunta 9.
Las mutaciones en los residuos de Gly 61 y/o Tre en RAS, de Arg 789 en
GAP son oncognicas.
En base a los datos conteste las siguientes preguntas:
1) Explique el mecanismo de regulacin de la actividad de RAS.
2) Explique el mecanismo que explica la oncogenicidad de las
mutaciones indicadas para RAS.
3) Explique el mecanismo que explica la oncogenicidad de la
mutacin indicada para GAP.
4) Disee una ruta de sealizacin que explique el incremento de la
proliferacin celular inducida por las RAS.
Pregunta 10.
Una de las caractersticas de los cardiomiocitos de los pacientes con
Insuficiencia Cardiaca es que presentan desensibilizacin de los
receptores 1-Adrenrgicos (RAPGs) y el Inhibidor I se encuentra
hipofosforilado.
En base al enunciado conteste las siguientes preguntas:
1) Describa la ruta de sealizacin involucrada en la
desensibilizacin de los receptores 1-Adrenrgicos.
2) Indique en que punto de la ruta acta el Inhibidor I e indique
porque se encuentra hipofosforilado.
3) Mediante un esquema con eventos regulatorios argumente como
se encuentra el metabolismo del glucgeno en estos
cardiomiocitos.

Pregunta 11
Uno de los aspectos fundamentales en la hipertrofia cardaca es la
expresin disminuida de SERCA (Ca2+ ATPasa del Retculo
Sarcoplsmico).
1) Explique y seale los mecanismos y rutas sealizadoras
involucradas en la hipertrofia de los cardiomiocitos.
2) Explique porque durante la distole la relajacin del msculo
cardiaco est disminuida.

Pregunta 12.
Los antgenos de microorganismos patgenos generan una
respuesta inflamatoria causada por mediadores lipdicos.
Indique las rutas de sealizacin y las rutas metablicas
implicadas en este fenmeno.
Pregunta 13.
Los agonistas de los receptores colinrgicos muscarnicos M3
(RAPGq) activan la contraccin del musculo liso.
Indique las rutas de sealizacin y las rutas metablicas
implicadas en este fenmeno.
Pregunta 14
Los nitratos son medicamentos utilizados en tratamiento de la
isquemia miocardica. Su mecanismo de accin se basa en que liberan
Monxido de Nitrgeno y causan vasodilatacin coronaria.
Indique la ruta de sealizacin celular que provoca la relajacin del
msculo liso de las arterias coronarias.
Pregunta 15
Ciclosporina es un frmaco inmuno-supresor que inhibe la
proliferacin linfocitaria inducida por antgenos.
1) Disee la ruta de sealizacin que induce la proliferacin celular.
2) Indique en que punto de la ruta acta la ciclosporina.
Pregunta 16.
El cncer pulmonar de clulas claras se asocia a mutaciones y al
aumento de la expresin de los receptores para EGF en las clulas
neoplsicas, esto ltimo se relaciona con la capacidad del tumor de dar
metstasis y con un peor pronstico. Actualmente existen frmacos
(Gefitnib y Erlotinib) que se unen al Receptor de EGF en su dominio
intracelular y bloquean competitivamente los sitios de unin de ATP, sin
embargo, la respuesta al tratamiento es ms favorable en los pacientes
con mutaciones en el dominio intracelular del receptor.
1) Indique la ruta de sealizacin involucrada en la proliferacin de
las clulas neoplsicas.
2) Argumente porque una mutacin del dominio intracelular induce la
transformacin neoplsica del tejido pulmonar.
3) Argumente porque un aumento de la expresin del Receptor para
EGF puede inducir la transformacin neoplsica del tejido
pulmonar.
4) Explique como el bloqueo de los sitios de unin del ATP bloquen
la actividad de los Receptores para EGF.
5) Argumente porque los receptores con mutaciones en el dominio
intracelular son ms sensibles al bloqueo por Gefitnib y Erlotinib.

Pregunta 17
Un paciente con cncer de mama sufre de enfermedad
broncopulmonar obtructiva crnica que le hace padecer hipoxia crnica.
La hipoxia induce la expresin de Eritropoietina, quien actuando sobre
sus receptores induce la diferenciacin y proliferacin de las clulas
precursoras en la medula osea e inhibe la apoptosis; como resultado se
incrementa la produccin de glbulos rojos.
1) Indique las rutas de sealizacin implicadas en estimulacin de
la proliferacin y diferenciacin celular.
2) Argumente los posibles mecanismos de sealizacin celular
implicadas en la inhibicin de la apoptosis.
3) Por qu el pronstico de este paciente depende en parte, de
que las clulas neoplsicas expresen o no Receptores para
Eritropoietina en su membrana celular?
Pregunta 18
Los pacientes asmticos tienen hiper-reactividad bronquial ante el
estrs psicolgico, lo cual es mediado por las fibras Colinrgicas que
inervan los msculos bronquiales, liberan acetilcolina, la cual
interacciona con receptores Muscarnicos (RAPGq), inducen una cascada
de sealizacin y provocan bronco-constriccin. El tratamiento de
entrada se basa en el uso de agonistas de receptores 2-adrenrgico
(RAPGs) los cuales causan broncodilatacin al inducir al final de la
cascada de sealizacin apertura de canales de K+, fosforilacin de la
kinasa de la cadena ligera de miosina y disminucin de las
concentraciones intracelulares Ca2+ e IP3.
En base a los datos disee un esquema de sealizacin donde se
observen claramente las rutas de sealizacin activadas por acetilcolina
y por agonistas de receptores 2-adrenrgico interrelacionadas y que
explique porque los Agonistas 2-adrenrgicos contrarrestan los efectos
de acetilcolina en las clulas del msculo liso.

Pregunta 19
A continuacin se presenta el resumen de un trabajo de investigacin
realizado por MDICOS INVESTIGADORES del DEPARTAMENTO DE
GINECOLOGA Y OBSTETRICIA DEL HOSPITAL UNIVERSITARIO de
Tianjin (China), que fue publicado publicado en la revista de Oncologia
Ginecolgica (Gynecology Oncology) en Marzo del 2012.
OBJETIVO DEL TRABAJO: Determinar los niveles sricos de insulina, la
expresin y la fosforilacin de INSR (Receptor de Insulina), el IRS-1
( y Akt en los tejidos con cncer de endometrio (CE), y explorar la
correlacin entre ellos. Para investigar si los efectos mitognicos y antiapoptticos de la insulina son dependiente de PI3K en las clulas de la
CE.
METODOLOGA: Se midieron los niveles insulina en suero por
radioinmunoensayo, se realiz RT-PCR e inmunoblot
secante para evaluar la expresin y la activacin de las protenas clave
de la va PI3K/Akt en 63 muestras de tejidos con CE. Las tasas de
proliferacin y la apoptosis se determinaron por tcnicas especializadas
(MTT, BrdU y ensayos V / PI para anexinas).
RESULTADOS: Los niveles sricos de insulina y los niveles de expresin
y fosforilacin de INSR, IRS-1 y Akt expresin fueron significativamente
elevados en pacientes con EC en comparacin con aquellos
sin EC. Adems, los niveles de P-INSR, P-IRS-1 y P-Akt fueron
significativamente mayores en pacientes en etapa avanzada,
con invasin profunda del miomtrio y metstasis en los ganglios
linfticos. La expresin y activacin de INSR, IRS-1 y P-Akt se
relacionaron positivamente con los niveles de insulina en suero. La
respuesta mitognica y anti-apopttica de la insulina en las clulas de la
CE fueron bloqueadas cuando las clulas fueron pre-incubadas
con LY294002 (Inhibidor de PI 3-Kinasa). Clulas Ishikawa 3-H-12 (clulas
cancergenas endometriales) cultivadas in vitro, mostraron un
incremento en los niveles de p-Akt despus del tratamiento con
insulina, la activacin de insulina inducida por Akt fue inhibida por
LY294002 de una manera dosis-dependiente.
En base al resumen de investigacin:
1) Establezca unas conclusiones derivadas de la investigacin
2) Construya una ruta de sealizacin que explique la respuesta
mitognica y anti-apopttica de la insulina.
3) Por otra parte la terapia a largo plazo con insulina en los pacientes
con Diabetes Mellitus tipo I y la resistencia a insulina en los
pacientes con Diabetes tipo II se asocian a un incremento de la
incidencia y severidad del Cancer Endometrial. Argumente una
explicacin a este hecho.
4) Explique de forma racional como se podra disminuir los riesgos en
los pacientes del tem 2.

Pregunta 20
Los digitlicos son frmacos que actan inhibiendo la Ca2+ ATPasa
de la Membrana Plasmtica. Estos medicamentos han sido utilizados
clsicamente en el tratamiento de la Insuficiencia Cardiaca, sin
embargo, su uso es cada vez menor porque a pesar de mejorar la
contractibilidad del corazn, la sobrevida a largo plazo es menor en los
pacientes que reciben estos frmacos. Por el contrario, el uso de
frmacos antagonistas de los receptores -Adrenergicos (RAPGs) es de
primera eleccin en el tratamiento de la Insuficiencia Cardiaca, aun
cuando estos medicamentos tericamente disminuiran la fuerza de
contractibilidad cardaca, sin embargo, la sobrevida de los pacientes que
reciben -Bloqueantes es mayor.
En base a los datos proporcionados y centrando su respuesta en el
Cardiomiocito, y mediante la utilizacin de rutas de sealizacin
conteste las siguientes preguntas:
1) Por qu los digitlicos aumentan la fuerza de contraccin del
miocardio?
2) Por qu los -Bloqueantes tericamente disminuiran la fuerza de
contractibilidad cardaca?
3) Por qu la sobrevida del cardiomiocito es menor en los
pacientes tratados con digitlicos?
4) Por qu la sobrevida del cardiomiocito es mayor en los
pacientes tratados con -Bloqueantes?

Pregunta 21
La aplicacin de Thapsigargin a una clula muscular lisa induce una
despolarizacin de la clula (ver figura B) que se asocia con un
incremento de la concentracin de Ca2+ intracelular (ver figura A),
ambos fenmenos bloqueados por 2-APB (2aminoethoxydiphenylborate). Por otra parte, thapsigargin promueve un
incremento en la expresin de MAP-Kinasa Fosfatasa I, promueve la
activacin y expresin de caspasa 3 y induce la activacin de la
Glucogeno Sintetasa Kinasa (GSK).

En base a los datos conteste las siguientes preguntas:

1) Indique el mecanismo y la ruta de sealizacin involucrado en el
fenmeno elctrico inducido por Thapsigargin.
2) Con cul protena interactua 2-APB y que efecto causa?
3) La supervivencia de la clula tratada con Thapsigargin ser mayor
o menor que una clula no tratada. Razone su respuesta mediante
el uso de rutas de sealizacin.
4) La activacin de GSK tendr un efecto favorable o desfavorable en
la supervivencia celular. Razone su respuesta.

Pregunta 22
A continuacin presentamos un trabajo realizado en un HOSPITAL
UNIVERSITARIO.
Prevencin de la resistencia a Insulina y de la prdida de clulas
beta-pancreticas mediante la inhibicin de la enzima PKC
epsiln
Mack E, Ziv E, Reuveni H, Kalman R, Niv MY, Jrns A, Lenzen S, Shafrir E.
Diabetes Center, Hadassah University Hospital, Jerusalem, Israel.
OBJETIVO: Una dieta hipercalorica en el jerbillo Psammomys obesus
causa una sobre-expresin de PKCepsilon. Estos roedores desarrollan
obesidad y resistencia a la insulina (Diabetes tipo II). En presente trabajo
se plantea como hiptesis que la inhibicin de PKCepsilon previene los
cambios inducidos por la dieta hipercalrica.
DISEO DE LA INVESTIGACIN: Se construyeron pptidos con una
secuencia similar al dominio cataltico de la PKCepsilon. Los jerbillos
fueron alimentados con una dieta diabetognica.; a un grupo
experimental se les administr via intraperitoneal los pptidos 12 y KCEKCE-16 (18 mg / kg) los das 0, 7 y 14.
RESULTADOS: El consumo de alimentos y el peso de los animales se
mantuvieron sin cambios. En el da 16 los niveles de glucosa en la
sangre volvieron a la normalidad (90 5 en el grupo tratado frente a 347
16 mg / dl en los controles no tratados). La hiperinsulinemia se redujo
de 584 55 a 180 22 mU / L. Los ensayos de immunoblot mostraron
que el aumento en el contenido de fosfoserina (636, 639)
en la protena IRS-1 en el msculo gastrocnemio de los animales
diabticos se redujo tres veces, la actividad PKB (Akt) aument dos
veces y el GLUT4 expresado en la membrana muscular aument, en
comparacin con los controles. Asimismo, la administracin de KCE-12
antes de colocar la dieta hipercalrica impidi la aparicin de la
diabetes. El tratamiento con KCE-12 no redujo los niveles de PKCepsilon
en los msculos de los roedores diabticos. Asimismo, el dao y la
prdida de la insulina en las clulas beta pancreticas fueron prevenidas
por KCE-12.
En base a los datos proporcionados por el resumen conteste mediante
un esquema de rutas de sealizacin celular:
1) Porque los jerbillos desarrollan resistencia a la insulina.
2) Porque si los pptidos tienen una secuencia similar al dominio
cataltico de la PKC, inhiben la accin de la enzima.