Informe de laboratorio Anlisis instrumental Ingeniera Ambiental

Informe N 2: Determinacin de Cobre (II) con la

formacin de un complejo amoniacal. Cuantificacin
por adicin patrn.
Ignacio Carrasco1, Javier Leiva1, Nicols Vsquez1
Anlisis Instrumental, Ingeniera Ambiental, IMA 102
Universidad de Valparaso. Avenida Gran Bretaa 1111, Playa Ancha, Valparaso.
Fecha de sesin de Laboratorio: 30 de abril 2015, Fecha de entrega de informe: 15 de mayo 2015.
Palabras clave: Espectroscopia molecular, curva de calibrado, absorbancia, longitud de onda, adicin patrn,
intervalo de confianza.

RESUMEN
Se prepara el complejo cobre amoniacal para
obtener el espectro de absorcin, se realiz un
barrido entre 300 y 800 [nm] registrando una
absorbancia mxima de 1,691 [UA] a 629 [nm]. A
continuacin se determina la concentracin de la
muestra problema por mtodo de adicin patrn.
Posteriormente se determina la cantidad de
volumen de muestra problema que se debe
agregar para registrar una absorbancia de 0,568
[UA] y en base a la absorbancia mxima
calculamos los [ml] necesarios de patrn que se
deben adicionar a la muestra problema.
Finalmente mediante una regresin lineal
obtenemos la concentracin de la muestra
problema, siendo este 0,105 [M].

1. Introduccin
El mtodo de adicin patrn o de estndar
consiste en la adicin a una muestra o matriz
cantidades crecientes de patrn y posterior
clculo de la concentracin del analito por
extrapolacin [1].
Los distintos volmenes de patrn que se
deben adicionar al analito se calculan de la
siguiente manera:
Mediante una proporcionalidad determinada
en relacin a la ley de Lambert - Beer.
A = bC

(1)

Con los resultados obtenidos se realiza la

curva de calibrado y por medio de esta se
encontrara el valor de la concentracin de
muestra problema.
Las muestras con diferentes cantidades de
analito se analizan junto al blanco que
contiene todos los componentes de la
muestra problema menos el analito. Como
resultado arrojan distintas seales analticas
de acuerdo a los distintos volmenes
agregados
de
solucin
patrn
v/s
concentraciones para cada una de estas
seales [2].
Como resultado se obtienen valores para
formar la recta de calibrado y posteriormente
se extrapola para obtener la concentracin
del analito en la muestra problema.
El problema de este laboratorio es la
determinacin de la concentracin del analito
(Cu2+) en la muestra problema utilizando el
mtodo de adicin patrn para la
construccin de la recta de calibrado,
obteniendo dicha concentracin aplicando
una regresin lineal a los valores obtenidos.
Hiptesis:
Para la determinacin del valor de
concentracin de muestra problema se
deber hacer una curva de calibrado, para
ello se tomara una cantidad conocida de
solucin de cobre 0,678 [M] diluida en 25
[mL] y de esta intuitivamente se tomara 1

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[mL] de solucin y se llevara al espectro en
donde nos arrojara una absorbancia. A este
valor se le incrementaran 0,15 [UA] en
distintos volmenes de patrn y como
tendremos
distintas
absorbancias,
extrapolando los resultados se obtendr el
valor de la concentracin de la muestra
problema. Para ello se har una regresin
lineal por medio de la calculadora, y
podremos plantear una ecuacin que
determinara la concentracin de la muestra
problema. La ecuacin es:

y=mx +b

(2)

Siendo y la absorbancia, x la concentracin,

m pendiente y b coeficiente de posicin.
Para realizar la curva de calibrado se deber
tomar un valor de muestra problema como
estndar y a este se le adicionaran distintos
volmenes de patrn. Ahora para obtener
dichos volmenes ocupamos la siguiente
ecuacin:

C1V 1=C 2V 2

(3)

El mtodo de adicin patrn se caracteriza

por ser mucho ms preciso que patrn
externo, por lo que el valor experimental de la
concentracin de muestra problema debe ser
muy cercano al valor terico o real.
Objetivos:
1) Determinar el espectro de absorcin
y la longitud de mxima absorcin y
la longitud de mxima absorcin del
complejo cobre amoniacal.
2) Determinar la concentracin muestra
problema utilizando el mtodo de
adicin patrn o estndar.
3) Determinar el intervalo de confianza
al 95% de la muestra problema.

2. Parte Experimental
Materiales
Pizeta
7
Matraces
aforados
25mL
Pipeta
2 mL
0,05 mL

Reactivos
Tipo de
Nombre,
sustancia.
Frmula,
Manipulaci
Marca.
n.

Solucin de
Cu 0,678 [M]

Metal pesado
en agua.
Mantener en
lugar fresco y
seguro

Amoniaco,
NH3

Toxico.
Almacenar en
lugar fresco.
Conservar el
envase
hermticame
nte cerrado,
Manipular
bajo
campana.

2 Pipetas
5 mL
0,05 mL
Pipeta
10 mL
0,05 mL
Propipeta
2 Vasos
precipitado
50 mL
Espectrofo
t
metro
Gotario
Celdas
Plsticas

Muestra
Porblema
(concentraci
n
desconocida
)

Metal pesado
en agua.
Mantener en
un lugar
fresco y seco.

1 Vaso
precipitado
100 mL
Tabla n1: Materiales y reactivos qumicos
utilizados junto a su clasificacin de seguridad.

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2.1 Espectro de absorcin del cobre
amoniacal.

hay un menor error el cual es entre 0,2 y 0,8

[UA].

En un matraz de 25 [mL] se agreg 1 [mL] de

cobre 0,678 [M], ms una cantidad de 6 [mL]
de amoniaco y se aforo con agua destilada.

Se tomaron todas estas consideraciones y

proporciones para determinar las cantidades
de muestra problema y cobre 0,678 [M] a
utilizar en la curva de calibrado. Se
prepararon 4 matraces de 25 [mL] con la
misma cantidad de muestra problema en
cada uno y distintas cantidades de cobre
0,8678 [M] en solo 3 matraces (en el primer
matraz no se agreg cobre), a cada matraz
se le agreg una cantidad de 6 [mL] de
amoniaco y se afor con agua destilada.

Luego se prepar un blanco con la misma

cantidad de amoniaco en un matraz de 25
[mL], pero sin el cobre antes agregado y se
aforo con agua destilada hasta el aforo.
Ambas preparaciones fueron introducidas al
espectrofotmetro en celdas distintas, en un
rango entre 300 y 800 [nm].
Con el fin de determinar la absorbancia del
cobre 0,678 [M] y la longitud de onda
analtica, ambas sirvieron para el resto del
experimento y posteriores clculos.
2.2 Determinacin de la concentracin de
muestra problema mediante la utilizacin
de la adicin patrn.
Se prepar en un matraz de 25 [mL] una
solucin de 2 [mL] de muestra problema que
se desconoce su concentracin, ms 6 [mL]
de amoniaco, para luego aforar con agua
destilada. Esta solucin fue utilizada para
determinar la absorbancia de la muestra
problema a la longitud de onda analtica
calculada en el espectro anterior y el blanco
utilizado
tambin
fue
el
preparado
anteriormente.
Para determinar qu cantidad de muestra
problema y cobre a 0,678 [M] se debi utilizar
para hacer la adicin patrn, se hizo una
proporcionalidad con la ley de Lambert
Beer como se muestra en la ecuacin (1), en
la que podemos asociar la absorbancia con
la concentracin, de modo paralelo
asociamos la proporcionalidad de la
concentracin con el volumen, ya que no
conocemos la concentracin de la muestra
problema.
Se tom en cuenta para la utilizacin de la
adicin patrn el error fotomtrico que pudo
haber, por lo que se tom un rango donde

Se tom una cantidad de cada matraz y se

llevaron al espectrofotmetro para determinar
su absorbancia. Con estos valores se hizo
una curva de calibrado y se extrapolo sus
datos para determinar la concentracin de la
muestra problema
2.3 Determinacin
confianza al 95%.

del

intervalo

de

Aplicamos una regresin lineal con los datos

de la absorbancia obtenidos de la curva de
calibrado y las concentraciones agregadas a
la muestra problema.
Esta regresin lineal se someti a la prueba
t-student,
en
donde
mediante
la
determinacin del valor de t se pudo calcular
el intervalo de confianza al 95% de la
concentracin de
la muestra problema.
Dicho clculo se efectu con la ecuacin del
95% de confianza, como se muestra en la
ecuacin (4)
Confianza al 95% = x + t*sx

(4), [3]

3. Resultados
3.1 Resultados del espectro de absorcin
del cobre amoniacal.
El barrido realizado entre 300 y 800 [nm]
registr una absorbancia mxima de 1,691
[UA] a una longitud de onda de 629 [nm], la

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cual fue nuestra longitud de onda en la
calibracin del espectrofotmetro.
3.2 Resultados de la concentracin de
muestra problema mediante la utilizacin
de la adicin patrn.
Luego de introducir la muestra problema al
espectrofotmetro,
este
entreg
una
absorbancia de 0,568 [UA]

3 mL de Cu 8,136 [ mM ]
Posteriormente, se grafic la curva de
calibrado con las absorbancias entregadas
por el espectrofotmetro y la concentracin
agregada en la muestra problema:
0.9
0.8
f(x) = 0.07x + 0.21
0.7
R = 0.99
0.6

Se determin el volumen a utilizar en la curva

de calibrado
por medio de esta
proporcionalidad:

2 mL de MP 0,568 [ UA ]

0.5
Absorbancia [u.a] 0.4
0.3

XmL de MP 0,2 [ UA ]

0.2
0.1

X =0,7 mL de MP

0
0123456789

Esta cantidad fue utilizada constante en la

curva de calibrado. Luego, para no salir del
rango de menor error se determinaron los
siguientes volmenes de cobre 0,678 [M]:

[MP] agregado [mM]

1 mL de Cu 1,691 [ u . a ]

Grafico n1 Curva de calibrado adicin patrn,

Absorbancia vs Concentracin agregada de la
muestra problema.

XmL de Cu+2 0,150 [ u . a ]

El grafico n1 se extrapol matemticamente

segn la siguiente ecuacin:

+2

X =0,09 mL de Cu

+2

Si se aproximan, pudimos decir que se

agreg 1 [mL] ms a cada matraz para la
realizacin de la curva. Se determin la
concentracin de cobre 0,678 [M] en cada
matraz utilizando la ecuacin (3):

Y = Xm+b

|bm|

X=

|0.2106
0.0716 |

X=

0 mL de Cu 0 [ mM ]

X =2,954[mM ]
1 mL de Cu 2,712 [ mM ]
2 mL de Cu 5,424 [ mM ]

Esta concentracin fue de la muestra

problema, pero de la solucin preparada en
el laboratorio, por lo tanto, se ocup la

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ecuacin (3) para determinar el valor total de
la muestra problema:

2,954 [ mM ] MP solucion 0,105 [ M ] MP total

3.2 Resultados del intervalo de confianza

al 95%.
Al aplicar la regresin lineal a los datos del
grafico (1) se someti a la prueba estadstica
t-Student y se calcul el valor de t.
Entonces la ecuacin (5) para obtener los
grados de libertad:
n 2 = grado de libertad

(5)

Donde n es el nmero de datos.

Mediante la ecuacin (5) obtuvimos:
4 2 = 2, entonces tenemos 2
grados de libertad. Luego nos situamos en la
tabla de valores de t-Student adjunta en el
anexo, y se determin el valor de t.
Con los valores de la desviacin
estndar (error tpico) descritos en la tabla
anlisis de varianza en el anexo, se calcul
utilizando la ecuacin (4) el intervalo de
confianza al 95% .
Confianza al 95% = 0,105 [M] + 2*0,028
Confianza al 95% = {0,049 - 0,161} [M].

4. Discusiones
El espectro de absorcin del complejo de
Cobre amoniacal fue fundamental para el
desarrollo del prctico. Este arroj una
determinada longitud de onda analtica, la
cual fue utilizada durante todo el laboratorio.
La muestra problema analizada fue
preparada con una concentracin molar
conocida, a la cual el espectro le asigno una
absorbancia mxima de 1,691 [UA], relacin

la cual se consider bastante certera para

utilizarla como base.
Las cuatro muestras utilizadas para realizar
la
regresin
lineal
a
travs
del
espectrofotmetro fueron preparadas con
pipetas distintas para cada compuesto, y se
utiliz un gotario para aforar el matraz con
agua destilada, intentando que solo una
persona se encargara del aforo, teniendo en
cuenta las distintas capacidades de cada
alumno en cuanto a precisin.
Sin embargo, la regresin lineal arroj una
correlacin de R = 0,9881, la que al no ser
muy cercana a 1, nos evidenci una pequea
imprecisin al momento de preparacin de
muestras, ya sea en la utilizacin de la
muestra patrn agregada en los matraces, o
en el aforo de estos.
A pesar de dicha imprecisin, luego de haber
realizado
los
clculos
necesarios,
efectivamente los procedimientos seguidos
expuestos en la hiptesis planteada
permitieron
conocer
la
concentracin
desconocida del complejo analizado, a travs
de
distintas
leyes
cientficas.
La
concentracin determinada por este mtodo
dio un valor bastante cercano al valor
indicado por el profesor al finalizar el
prctico, confirmando la hiptesis y dejando
en evidencia la alta precisin del mtodo de
adicin patrn. Sin embargo, de haber sido
utilizado otro mtodo de menor precisin, los
resultados probablemente no hubieran
coincidido de la misma forma.
En muchas ocasiones, con un pequeo error
en la preparacin de muestras, los resultados
finales pueden ser bastante equvocos
cuando hablamos de otros tipos de anlisis
qumicos, por lo tanto, es necesaria una
mayor dedicacin en la preparacin de
muestras, y un desarrollo de la capacidad
para utilizar los instrumentos de laboratorio
con el fin de evitar posibles futuros errores en
nuestra profesin.

5. Conclusiones
El espectro de absorcin del complejo de
Cobre amoniacal de concentracin de 0,678
[M] arroj una longitud de onda analtica de

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629 [nm] y una absorbancia mxima de 1,691
[UA] a dicha concentracin.
Las cuatro muestras a utilizar se prepararon
agregando 0, 1, 2 y 3 [mL] de muestra
patrn, arrojando absorbancias de 0,185,
0,435, 0,615 y 0,772 [UA], ambos datos
respectivamente. Cada una de estas
muestras arrojaron una concentracin de
muestra patrn de 0, 2,712 , 5,424 , y 8,136
[mM] respectivamente.
Posteriormente, el valor de la concentracin
de la muestra preparada, representado por X
en la ecuacin de la recta, tuvo un valor de
2,954 [mM], por lo que la concentracin total
de la muestra problema fue de 0,105 [M],
mientras que el valor terico dado fue de
0,142 [M].
Sin embargo, el intervalo de confianza del
95%, dio un rango de {0,049; 0,161}, en
donde el valor terico, 0,142 [M], est dentro
de este, dando como aceptado el
procedimiento ya realizado.
Finalmente, fue posible concluir que, a pesar
de pequeos detalles en la precisin de la

realizacin del prctico, se logr determinar

la concentracin desconocida del complejo
evaluado, con un valor experimental bastante
aceptado comparando con el valor terico.

6 .Referencias
[1] Universidad autnoma del estado de Hidalgo,
Instituto de ciencias bsicas e ingeniera.
[2] Lozano Lucena, J. J.; Rodrguez Rigual, C.
(1992). Qumica 3: estequiometra. Pearson
Alhambra. p. 64.
[3] Daniel C.
cuantitativo, p. 96.

Harris;

Anlisis

qumico

Anexos

Estadsticas de la regresin
Coeficiente de correlacin mltiple
Coeficiente de determinacin R^2
R^2 ajustado
Error tpico

0,99402
1629
0,98807
9
0,98211
8499
0,03370
9791

Observaciones

ANLISIS DE
VARIANZA
Grados de
libertad

Suma de
cuadrados

Promedio de
los cuadrados F

Regresin

0,18837405 0,18837405

Residuos

0,0022727

Total

0,19064675

Coeficientes

165,7711
533

Valor
crtico de
F
0,005978
371

0,00113635

Error tpico

Estadstico t

Probabilida
d

Intercepcin

0,2106

0,028203635

7,467122717

0,01746617
6

Variable X 1

0,071570796

0,005558804

12,87521469

0,00597837
1

Inferior
Inferior 95%
Superior 95%
95,0%
0,08924955
0,089249555 0,331950445
5
0,04765319
0,047653193
0,0954884
3

Tabla valores de t-Student

Superior
95,0%
0,33195044
5
0,0954884