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PREFIXO SMBOLO POTNCIA

DECIMAL
T
Tera
1012
1.000.000.000.000,0
G
Giga
109
1.000.000.000,0
M
Mega
106
1.000.000,0
3
k
Kilo
10
1.000,0
h
Hecto
102
100,0
da
Deca
101
10,0
100
0
d
Deci
10-1
0,1
c
Centi
10-2
0,01
m
Mili
10-3
0,001

Micro
10-6
0,000001
n
Nano
10-9
0,000000001
p
Pico
10-12
0,000000000001
f
Femto
10-15
0,000000000000001
a
Atto
10-18
0,000000000000000001

Voc identificou problemas com


algumas metodologias, os quais que
foram associados a utilizao do novo
lote de soluo salina (NaCl) 0,9%.
1) O que poderia ter acontecido no
preparo do reagente de modo a
torn-lo inadequado ao uso?
2) Proponha procedimento(s) para
que o fato no se repita

NaCl
0,9%

Proponha um rtulo para a soluo preparada.

1 Mol ........ PM (gramas) ....... 1 Litro

1 Mol ........ PM (gramas) ....... 1 Litro

reagentes
CuSO4 anidro

Sol. 1 mol/L
g/L
160

1 Mol ........ 58,5 g ....... 1000 mL (1L)

CuSO4 .H2O

178

9,4

X Mol ........

CuSO4 .5 H2O

250

6,4

NaCl PM = 23 (Na) + 35,5 (Cl) = 58,5


Soluo 0,9 g% = 0,9 g/dL = 9g/L

9 g ....... 1000 mL (1L)

Soluo 10% p/v


em CuSO4
10

X = 0,1538 Mol/L ~ 0,154 mol/L

NaCl 0,154 mol/L ou 154 mmol/L

1 Mol ........ PM (gramas) ....... 1 Litro

reagentes
Na2HPO4 anidro
Na2HPO4 .7H2O

Sol. 1 mol/L
g/L
142
268,1

Soluo 10% p/v


em Na2HPO4
10
5,3

Cuidado com os nomes dos compostos qumicos:


Qual o nome do fosfato acima?
Qual a relao de custo entre os sas de fosfato acima?

Solues concentradas
ou
Solues stock
Porque manter solues
concentradas e dilu-las para uso ?
Vantagens:
1. Maior estabilidade da soluo;
2. Tempo de preparo da soluo diluda menor;
3. Facilidade no preparo

Dispondo de uma soluo de NaOH 10 M,


preparar 250 mL de uma soluo 0,02 M
TEM

QUER

C1.V1 = C2.V2
C1 = NaOH 10 M
V1 = ?

V2 = volume final
250 mL
C2 = 0,02 M

10 M x V1 = 0,02 M x 250 mL
V1 = 0,5 mL

Custo e
pureza

GRAU DE PUREZA NOME USUAL


SUPERIOR
SUPRAPUR,
Ultrapuro
ANALTICO
p.a., AR, RA
FARMACUTICO DAB, USP, NF,
Farm.Bras.
QUIMICAMENTE Puro, Purssimo
PURO
COMERCIAL
Industrial,
Purificado,
Prtico, Tcnico
Reagentes para aplicao especfica:
ex: for molecular biology, for HPLC

Resistncia especfica
(inverso da Condutividade)

PR-FILTROS
Processo

Slidos
ionizados
dissolvidos

Orgnicos
dissolvidos

Gases
ionizados
dissolvidos

Destilao
Deionizao

G-E
E

G
P

P
E

E
P

E
P

E
P

Adsoro-Carbono

G
P

G
G-E

P
P

E
P

E
P

E
P

Filtrao

P
G-E
P
P
G
Legenda: E = excelente; G = Bom (good) e P = Pobre

Osmose Reversa

Ultrafiltrao
Oxidao UV

Particulados Bactrias

FILTRO
TIPO III

Pirognios
Endotoxinas

FILTROS
OSMOSE REVERSA
ULTRA-PURIFICAO
(Mili-Q, ELGA, Bernsted)

(> 0,1 M/cm)

TIPO II

DESTILAO

(> 2 M/cm)

TIPO I

DEIONIZAO

(> 10 M/cm)

RETIRADO DE:Americam Public Health Association Standard methods for the examinati on of water and wast water., 18ed, Wa shington,

ULTRA-PURA

Filtrao
OSMOSE
gua
pura

Soluo
salina

OSMOSE REVERSA
gua
pura

gua
de alimentao

Presso
Osmtica

Membrana
semi-permevel

Membrana
semi-permevel

Osmose reversa

Especificaes para gua Grau Reagente

TIPOS
I
II
Contedo microbiolgico
10
103
pH
N.A.
N.A.
resistncia especfica
10
2
silicatos
0,05
0,1
partculas
filtro 0,25 m N.A.
matria orgnica
carvo ativo N.A.
5
4

2
1

11
10

4
8

III
N.A.
5-8
0,1
1,0
N.A.
N.A.

6
7
8
9

10

Usos e Estocagem da gua Grau Reagente

Tipo III:

- Lavagem de vidraria
- Preparo de meios de cultura
- Histologia

Tipo II:

- Ensaios laboratoriais gerais

Tipo I:

- Determinao de traos de metais


- Dosagem de enzimas
- Dosagem de eletrlitos

gua ultra-pura

Estocagem: no estvel, preparar o


necessrio para uso

=
Fluxo de eltrons

1
Condutividade

o recproco da Condutividade
Forma mais conveniente de medio da
gua pura
+
1 cm

+
+

1 cm
Condutividade = microsiemens por centmetro = S/cm

A 25C uma gua totalmente pura apresenta:

Resistividade = 18,2 M -cm


Condutividade = 0,055 S/cm

Resistividade = megohm-centmetro = M-cm

F-1

D-E

A = fonte luminosa
B = seletor espectral
C = cubeta
D = detector - E = amplificador
F = registro 1 = analgico,
2 = digital,
3 = grfico (informatizado)

F-2

F-3

b
Lei de Lambert: a proporo de energia radiante
absorvida por uma substncia independente da
intensidade da radiao incidente

I0

It

Lei de Beer: a absoro de energia radiante


proporcional ao nmero total de molculas que
absorvem no caminho da luz

-log T = log

Io
It

= A = abc

concentrao

Transmitncia (T) =

It
I0

reagente

I0

It = I0 . 10-abc
It
I0

10-abc

log

It
I0

= -abc

log

I0
It

It

Reagente + cromgeno

c
= abc

BRANCO
Ajuste do equipamento
I0

It

log I0 = ABSORBNCIA (A)


It

It
= T = 100% ou A = 0.000
I0

AMOSTRA
I0 = 100% T

Resumo:
Absorbncia diretamente proporcional concentrao.

It

Leitura
It
= %T ou A da amostra
I0

A luz incidente (I0) efetiva aquela transmitida por


um branco ou referncia

Portanto:

Intensidade absorvida = branco - It

0.5
ABSORBNCIA

O branco deve ser idntico amostra em medio


exceto pela ausncia da substncia a ser medida.
Leitura do branco = I0 - outras perdas

0.6

0.4
0.3
0.2
0.1

Eliminar a absorbncia de fundo ou


seja, aquela que no esta relacionada
ao que se deseja medir.
Ajustar o equipamento em:
ZERO de ABSORBNCIA (ou 100% T)

CONCENTRAO

SPECTROQUEST UV SPECTROPHOTOMETER

Biochrom WPA S800 Visible Spectrophotometer

DU 800 UV/Visible Spectrophotometer

LINEARIDADE
Soluo de Sulfato de nquel hexahidratado a 4 ou 5% p/v
em cido clordrico 1% v/v. Esta soluo muito estvel (anos) em frasco mbar bem
fechada.

Branco: HCL 1% v/v .


mL NiSO4.6H2O
mL HCl
4% p/v
1% v/v

1. CARACTERSTICA PRPRIA DO MTODO


2. QUALIDADE DO EQUIPAMENTO
3. MANUTENO DO EQUIPAMENTO

Absorbncia (nm)
400
700

0,5
1,5
25
1
1
50
1,5
0,5
75
2
0
100
Interpretao:
1. Com linearidade: lmpada e sistema de
deteco
esto bons.
usar os resultados para controle ao longo do
tempo do equipamento.
2. Sem Linearidade:
a. trocar a lmpada e testar novamente:
se linear OK
b. se no for linear pode ser o detetor
chamar assistncia tcnica.

Curva com NiSO4.6H2O 5g/dL em HCl 1% v/v

LINEARIDADE

CALIBRAO ISOSBSTICA

Vermelho de Fenol aquoso 7 mg/L: 514

5 nm

0.65

400 nm

0.8

Ponto
isosbstico

0.55
C ID O

0.45

700 nm

0.4

Absorbncia

Absorbncia

0.6

BSIC O

0.35
0.25

0.2

518 nm
0
0

25

50

75

0.15
505 510 515 520 525 530

100

Comprimento de onda (nm

Concentrao (%)

ESPECTRO DE ABSORO DO NADH e NAD


1.2

O
C

NH2

NADH reduzido
NAD oxidado

NH2

Nicotinamida

O
C

Adenina
N

O O
N
O-P-O-P-O
O

O OH
HO OH Pirofosfato HO OH
D-Ribose
D-Ribose
O

Nicotinamida Adenina Dinucleotdeo

NH2
N
N

Absorbncia

forma reduzida
(NADH)

NADH 0,05 mmol/L


cubeta = 1 cm

0.8

340 =

0.6

0,315 = 6,3 L.mmol-1.cm-1


0,05 . 1

0.4

0,315

0.2

-PO3H2
(NADP+)

(NAD+)

0
240

260

280

300

320

340

360

380

400

comprimento de onda (nm)

10

TURBIDIMETRIA

I0

It

Efeito do tamanho das partculas na disperso da


luz incidente em uma soluo homognea
Tamanho da Partcula
A) Pequena
Rayleigh
0
d < 0.1
KAPLAN, Lawrence A. e PESCE, Amadeo J. Clinical chemistry. Theory,
analysis, correlation. 3 ed. Mosby: St. Louis, 1996.

0
B) Grande
45
90

Disperso da
luz para frente

NEFELOMETRIA

90

Rayleigh-Debye

45

C) Muito Grande
d>

Deteco de pequeno sinal


(amplificvel) em um
background escuro = alta
sensibilidade
equipamento: nefelmetro,
aplicao dedicada esta
tcnica.
Deteco de uma pequena
reduo em um grande sinal
= sensibilidade limitada
equipamento:
espectrofotmetro comum
(os atuais permitem boa
sensibilidade)

Mie

Fim da apresentao

11

FOTOMETRIA DE EMISSO DE CHAMA:


+
K+ = K sinal
Cs sinal

Princpio da Fotometria de Emisso de Chama

+
Na+ = Na sinal
Cs sinal

K+

Emisso de luz

eltrons

Cs
Na+

Na+ = 589 nm (3p - 3s)


K+ = 767 nm (4p - 4s)
Li+ = 671 nm (2p - 2s)
Cs

Chama
fonte de luz

ar

combustvel
Capilar de aspirao
da amostra

Chama

= fotodetector

= monocromador

ESPECTROFOTOMETRIA DE ABSORO ATMICA

Evaporao
+

Na+

Aproximadamente apenas
1 - 5% dos tomos presentes
na chama so excitados

dreno

Princpio

Na+

Soluo

monocromador

Vapor
Dissociao
lmpada

Na0

fenda
nebulizador
Oxidao
Na+

Na2O

detector

chama

Sistema de
leitura

Na+
+
ELTRON

C2H2

amostra

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ELETRODOS ON-SELETIVOS [ISE]


Valinomicina

pH/mV
eletrodo de
referncia
interno

eletrodo on
seletivo

membrana
amostra

eletrodo de
referncia
externo

Eletrodos de membrana on seletivo


- Vidro
Na+ Silicone/xido de sdio/xido de alumnio:
71:11:18
Silicatos de alumnio e ltio
K+ Dissoluo de valinomicina em um solvente
adequado

13