Escolar Documentos
Profissional Documentos
Cultura Documentos
Reacciones
Antgeno
anticuerpo
Aplicadas al Diagnostico clnico de
enfermedades
Elabora
Sandra Luz Gonzlez
Anlisis Clnicos
Grupo 603/ Saln 2
MESA A5
ndice
Introduccin
Antgenos
Clasificacin
Anticuerpos
Composicin qumica de los anticuerpos
5
6
Reaccin antgeno-anticuerpo
Serologa
Relacin antgeno-anticuerpo
Pruebas serolgicas que emplean las reacciones Ag-Ac
7
7
7
Tcnica de precipitacin
Tcnicas de aglutinacin
Hemaglutinacin directa
Hemaglutinacin indirecta
Tcnicas de Inmunofluoresencia
Tcnica de radioinmunoensayo
Tecnica de enzimoinmunoensayo
Enfermedades que pueden ser diagnosticadas por reacciones Ag-Ac
10
11
Fiebre Tifoidea
11
Principales antgenos
11
11
Sfilis
12
Principales antgenos
12
13
Herpes
13
Principales Antgenos
13
14
Obtencin de muestras
14
15
ELISA
16
Western blot
16
VDRL
16
RPR
17
Perfil TORCH
17
17
Casos clnicos
17
Caso clnico 1
17
Caso clnico 2
18
Conclusin
19
Bibliografa
21
Introduccin
Las respuestas inmunitarias contra la mayora de los antgenos inducen las
producciones especficas de anticuerpos y linfocitos T efectores. Este
reconocimiento entre el antgeno anticuerpo o linfocito sienta las bases del
diagnostico inmunolgico. Por eso la reaccin antgeno-anticuerpo (Ag-Ac) es una de
las piedras angulares en la respuesta inmunitaria del cuerpo humano. El concepto
se refiere a la unin especfica de un anticuerpo con un antgeno para inhibir o
ralentizar su toxicidad.
La serologa es la rama de la inmunologa que aplica las interacciones
antgeno anticuerpo en el diagnostico clnico. El termino serologa proviene de la
palabra suero (componente liquido de la sangre libre de clulas) debido a que
muchas pruebas serolgicas se utilizan para la deteccin de los anticuerpos en el
suero.
Generalmente, las pruebas serolgicas (ensayos) identifican aquellos agentes
desconocidos presentes en las muestras clnicas mediante la puesta en contacto de
la muestra (la sangre o un tejido) con un reactivo que contiene concentraciones
conocidas de antgenos o anticuerpos. Las pruebas serolgicas detectan un tipo en
particular de antgenos o anticuerpos, permitiendo al clnico el diagnostico de una
infeccin, en curso o pasada, o de una enfermedad auto inmunitaria. Las pruebas
serolgicas cualitativas sirven para poner de manifiesto la presencia o ausencia de
un antgeno o un anticuerpo determinado; las pruebas cuantitativas miden la
concentracin de un determinado antgeno o anticuerpo. Las pruebas cuantitativas
permiten al clnico el seguimiento de la evolucin de una enfermedad. Hay seis
tipos de pruebas serolgicas: precipitacin, aglutinacin, fijacin de complemento,
inmunofluoresencia, redioinmunoensayo y enzimounmunoanlisis (ELISA).
Por todas estas cuestiones es que resulta tan importante el conocimiento de
todo lo relacionado con estas reacciones por lo que en este trabajo desarrollaremos
desde los conceptos bsicos previos, las definiciones, clasificaciones y aplicaciones
esperando lograr la comprensin de estas reacciones y su importancia.
Antgenos
Un antgeno ("anti" que significa 'opuesto' o 'con propiedades contrarias' y
"geno", que genera o crea oposicin) Sustancia que induce la formacin de
anticuerpos, debido a que el sistema inmune la reconoce como amenaza. Pueden
ser del ambiente o formada dentro del cuerpo .
Clasificacin
Los antgenos se clasifican segn su origen, que pueden ser:
Anticuerpos
Los anticuerpos (Ac) son glucoprotenas que se forman en el organismo como
respuesta al contacto con un antgeno (Ag) y que reacciona especficamente contra
l, tambin se puede definir como una sustancia producida por el organismo, de
naturaleza proteica, inducida por otras sustancias con las que puede reaccionar de
forma especfica.
Debido al papel desempeado en el sistema inmunitario y a que, en la
electroforesis, migran junto a otras globulinas, tambin se les llama
inmunoglobulinas (Ig), estas en la electroforesis tienen la capacidad de separarse
en la fraccin gamma y por ello tambin son las inmunoglobulinas conocidas con el
nombre de gammaglobulinas.
Las inmunoglobulinas son sintetizadas a partir de clulas plasmticas que
proceden de la diferenciacin de los linfocitos B.
Las inmunoglobulinas constituyen un grupo heterogneo de protenas que
constituyen el 10% de las protenas del plasma.
Estos anticuerpos, las inmunoglobulinas se encuentran: en plasma, lquidos
extravasculares, secreciones orgnicas y tambin en la superficie de la membrana
de los linfocitos B, incluso en el interior del citoplasma de dichas clulas.
Reaccin antgeno-anticuerpo
La reaccin Antgeno-Anticuerpo (Ag-Ac) es una de las piedras angulares en
la respuesta inmunolgica del cuerpo humano. El concepto se refiere al momento
cuando un anticuerpo se une a un antgeno para inhibir o ralentizar su toxicidad
dentro del cuerpo.
El acoplamiento estructural entre las macromolculas est dado por varias
fuerzas dbiles que disminuyen con la distancia, como los puentes de hidrgeno, las
fuerzas de Van Der Waals, las interacciones electrostticas y las hidrofbicas. El
reconocimiento Ag-Ac es una reaccin de complementariedad, por lo que se efecta
a travs de mltiples enlaces no covalentes entre una parte del antgeno y los
aminocidos del sitio de unin del anticuerpo. La reaccin se caracteriza por su
especificidad, rapidez, espontaneidad y reversibilidad.
Serologa
La serologa es el estudio que permite comprobar la presencia de anticuerpos
en sangre. Es una prueba fundamental a la hora de realizar donaciones de sangre y
transfusiones. Este se basa en un examen serolgico, que tiene como fin el conocer
la exposicin o presencia previa de un microorganismo patgeno en particular y a
partir de ella la capacidad de respuesta del individuo a tal infeccin. Para ello se
debe tomar una muestra de sangre en volumen apropiado segn la tcnica que se
emplee (ELISA, IFI, Western blot, IHA, etc). Se puede usar la sangre total o tomar
solo el suero, el cual se obtiene luego de centrifugar la sangre previamente
coagulada, para eliminar las clulas sanguneas de la reaccin.
Relacin antgeno-anticuerpo
Los antgenos son microorganismos que tienen el potencial de causar
infecciones en el cuerpo. Cuando el cuerpo est expuesto a un antgeno, produce
anticuerpos que son capaces de luchar contra el invasor antgeno especfico. A
veces, los antgenos estn presentes en la sangre, pero no hay ninguna infeccin.
En este caso, las pruebas serolgicas se pueden realizar para comprobar los niveles
de anticuerpos en la sangre, y si aumentan los niveles, el cuerpo est luchando
contra una infeccin.
Tcnicas de aglutinacin
En estas tcnicas se hacen visibles los complejos Ag-Ac por la aglutinacin
que producen los anticuerpos cuando el Ag forma parte o se ha unido
artificialmente a la superficie de glbulos rojos, plaquetas, leucocitos, partculas de
ltex, etc. Normalmente se utilizan glbulos rojos (hemaglutinacin) o partculas de
ltex.
Hemaglutinacin directa
La presencia de antgenos en la superficie de los glbulos rojos se puede
detectar por la hemaglutinacin producida cuando se aade un antisuero con
anticuerpos frente a dichos antgenos.
Esta tcnica se emplea habitualmente para la identificacin de los grupos
sanguneos y Rh, para lo cual a la sangre heparinizada se le aaden los antisueros
correspondientes: anti- A, anti-B o anti-AB (todos ellos anti-Rh negativos). Habr
aglutinacin cuando los glbulos rojos posean la especificidad del antisuero
aadido. De igual manera se procede con antisueros anti-Rh para la determinacin
de los distintos grupos Rh.
Hemaglutinacin indirecta
Se basa en el principio de la inhibicin de la hemaglutinacin. Para su
realizacin se precisan glbulos rojos a los cuales se les ha unido la misma
sustancia que se desea detectar o cuantificar. Si estos glbulos rojos son puestos en
presencia de anticuerpos preparados frente a dicha sustancia se producir su
Tcnicas de Inmunofluoresencia
La fluorescencia es una propiedad de ciertas molculas que, al ser irradiadas
con energa electromagntica de longitud de onda adecuada, emiten radiacin de
longitud de onda caracterstica permitiendo su cuantificacin.
Las molculas de un colorante fluorescente absorben luz en una longitud de
onda y convierten la luz absorbida de alta energa (longitud de onda ms corta) en
luz de menor energa (longitud de onda ms larga). Cada fluorocromo tiene un
espectro de emisin y excitacin caractersticas; si se utilizan dos con el mismo
espectro de excitacin pero distinto espectro de emisin, se pueden medir dos
caractersticas al mismo tiempo (fluorescencia de dos colores).
La inmunofluorescencia se utiliza esencialmente en la deteccin de
autoanticuerpos y anticuerpos contra antgenos de superficie de clulas y tejidos.
Para ello se emplean anticuerpos preparados frente a la protena que se desea
detectar marcados con molculas fluorescentes. Se aprecia si hubo unin del
anticuerpo con el antgeno por la fluorescencia emitida, que se observa bajo
microscopio de luz ultravioleta. Este procedimiento (Inmunofluorescencia directa)
tiene la limitacin del marcaje con un fluorocromo de cada uno de los anticuerpos
necesarios para cada una de las sustancias a investigar. Para evitar esto, lo que se
hace es tratar el tejido o clulas con antisueros anti-antgeno producidos, por
ejemplo, en conejo y secundariamente anti-inmunoglobulinas marcadas con un
fluorocromo (Inmunofluorescencia indirecta).
Tcnica de radioinmunoensayo
El radioinmunoensayo (RIA) se basa en la competencia que se establece,
para unirse a anticuerpos especficos, entre la sustancia a cuantificar y cantidades
conocidas de la misma sustancia marcada con un istopo. Al establecerse esta
competicin resulta que a mayor cantidad de sustancia a cuantificar, menor ser la
cantidad de sustancia radiactiva que se une al anticuerpo y viceversa.
Este tipo de reaccin se encuentra esquematizado en la. Los resultados se
obtienen al medir la radiactividad de la hormona marcada unida al anticuerpo y la
de la hormona marcada libre mediante un contador de centelleo. Al centrifugar, la
hormona libre queda en solucin y la hormona unida al anticuerpo forma agregados
10
Tecnica de enzimoinmunoensayo
Esta tcnica, tambin se conoce como test de ELISA (Enzyme-Linked
Immunosorbent Assay). La identificacin de los complejos Ag-Ac, se hace mediante
el empleo de enzimas, bien unidas al antgeno, o bien unidas al anticuerpo. El test
de ELISA puede ser directo o no competitivo, constando de los siguientes pasos:
11
12
Fiebre Tifoidea
La fiebre tifoidea o fiebre entrica es una enfermedad infecciosa producida
por Salmonella typhi (bacilo de Eberth), o Salmonella paratyphi A, B o C, bacterias
del gnero Salmonella. Su reservorio es el humano, y el mecanismo de contagio es
fecal-oral, a travs de agua y de alimentos contaminados con deyecciones.
Principales antgenos
(Ag) somticos O, flagelares H de la salmonella y Antgeno capsular o de envoltura
(Vi) o (K) (especfico para Salmonella typhi, dublin, y paratyphi C)
13
Sfilis
La sfilis es una enfermedad infecciosa de transmisin sexual causada por la
espiroqueta Treponema pallidum. Esta bacteria causa la infeccin al penetrar en la
piel o en las membranas mucosas rotas, por lo general de los genitales. Esta
enfermedad casi siempre se transmite por contacto sexual, aunque tambin se
puede transmitir de otras formas.
Principales antgenos
Se conocen cuatro grupos de antgenos:
1. El hapteno lipdico de Wasserman o cardiolipina: componente importante de los
antgenos treponmicos es un fosfatidil-glicerol presente en los Treponemas y en
otras bacterias, plantas y otros tejidos animales, sobre todo en el msculo cardiaco.
Las llamadas reaginas son verdaderos anticuerpos que se forman contra este
hapteno por lo que este nombre tiende al desuso con el fin de evitar confusiones
con la IgE de la alergia atpica.
2. Antgeno proteico especfico de grupo: se localiza en los endoflagelos (filamento
axial) de los treponemas comensales y patgenos. Se demuestra con suspensiones
de Treponema de Reiter por reaccin de fijacin del complemento, actualmente es
de poco valor en el diagnstico.
3. Antgenos proteicos especficos: intervienen en la respuesta de base celular con
fenmenos de hipersensibilidad retardada que ocurren en el desarrollo de la sfilis,
parecen ser idnticos en las tres especies de treponemas.
4. Antgenos polisacridos especficos: intervienen en las reacciones serolgicas
especficas para Treponema pallidum (inmunofluorescencia, hemoaglutinacin) y
son iguales en las tres especies. Se ha determinado adems, la presencia de otros
antgenos de la vaina que actan inhibiendo la muerte de los microorganismos
mediada por anticuerpos y complemento.
14
Herpes
Es una enfermedad inflamatoria de la piel, causada por un virus, que se caracteriza
por la formacin de pequeas vesculas o ampollas transparentes que al secarse
forman una costra.
Herpes Simple: Enfermedad aguda de la piel, causada por un virus, que se
caracteriza por la formacin de vesculas o ampollas agrupadas en cualquier lugar
del cuerpo, principalmente alrededor de la boca, de la nariz o en la zona genital.
Herpes Zster: Enfermedad infecciosa aguda que afecta a los ganglios nerviosos
sensoriales y a sus reas de inervacin y que se caracteriza por un dolor intenso a
lo largo del recorrido del nervio y la posterior aparicin de vesculas o ampollas
arracimadas en la zona de la piel correspondiente al trayecto del nervio.
Principales Antgenos
HERPES SIMPLEX 1+2 ELISA IgG/IgM (ref. G/M1016) es una prueba
inmunoenzimtica indirecta para determinar anticuerpos IgG y/o IgM frente a
herpes simplex tipo 1+2 en suero o plasma humano. El kit contiene 96 tests. La
presentacin G/M incluye todos los reactivos necesarios para llevar a cabo todas las
combinaciones posibles de determinaciones IgG e IgM con una sola referencia.
El mtodo de ELISA est basado en la reaccin de los anticuerpos de la muestra con
el antgeno unido a la superficie de poliestireno. Las inmunoglobulinas no unidas por
reaccin con el antgeno son eliminadas en el proceso de lavado. En un paso
posterior la globulina anti-humana reacciona con el complejo antgeno-anticuerpo, y
la que no se une es eliminada por los lavados, la unida reacciona con el sustrato
(TMB), para dar una reaccin coloreada azul, que cambia a amarillo tras la adicin
de la solucin de parada.
15
Obtencin de muestras
Para la microscopia en campo oscuro, la muestra debe ser fluido seroso libre
de eritrocitos y residuos de tejidos o puede ser material obtenido por aspiracin de
ganglio; se limpia la lesin con solucin salina, slo si estuviera contaminada. Puede
ser necesario realizar una abrasin leve de la lesin, para obtener fluido seroso, el
cual se coloca directamente en una lmina, la que debe examinarse antes de
transcurridos 20 minutos, ya que el Treponema pallidum es muy sensible al oxgeno,
calor, cambios de pH y desecacin. Nunca se debe tomar para campo oscuro
muestras de cavidad oral, o anal debido a la contaminacin con espiroquetas no
patgenas.
16
% especificidad
Primar
Secundaria
ia
Laten
Tarda
te
No sfilis
No treponmica
VDRL
RPR
USR
TRUS
T
78(74-87)
86(77-100)
80(72-88)
85(77-86)
100
100
100
100
95(88-100)
98(95-100)
95(88-100)
98(95-100)
71(37-94)
73
98(96-99)
98(93-99)
99
99(98-99)
Treponmicas
FTA- 84(70
100
ABS -100)
100
96
97(94-100)
17
ELISA
La tcnica de ELISA es un mtodo de cuantificacin inmunolgica que evala
la reaccin antgeno-anticuerpo mediante una reaccin enzimtica, de acuerdo al
diseo de la prueba se puede detectar una o ms inmunoglobulinas o se puede
detectar antgenos especficos- para lo cual se utiliza un conjugado, formado por un
anti anticuerpo o un antgeno, el cual se ha marcado con una enzima (peroxidasa de
rbano, fosfatasa alcalina, glucosa oxidasa, etc.). El antgeno o anticuerpo que se
utiliza, es inmovilizado sobre un soporte slido, que es generalmente una placa de
poliestireno, por lo que la reaccin antgeno-anticuerpo que se produce tambin
queda inmovilizada en el soporte slido. A esto se le adiciona un sustrato (enzima)
marcado con un cromgeno que produce una reaccin de color, que es
directamente proporcional al analito (antgeno o anticuerpo a ser detectado) y que
es cuantificado con un lector de ELISA que es un espectrofotmetro modificado.
Western blot
El Western Blot, tambin denominado inmunoblot, es una tcnica que detecta
anticuerpos para eptopes especficos en antgenos, previamente separados por
electroforesis de alta resolucin. La electroforesis separa los componentes
antignicos por sus diferentes pesos moleculares. Luego estos son transferidos a
una membrana de nitrocelulosa reteniendo su posicin electrofortica y reaccionan
con el suero del paciente, si los anticuerpos especficos estuviesen presentes, estos
son revelados usando un anti anticuerpo conjugado con una enzima a la que se le
agrega un sustrato cromognico, dando como resultado bandas coloreadas en la
tira de nitrocelulosa. Esta tcnica se utiliza para confirmar los anticuerpos
detectados previamente por alguna otra prueba serolgica de despistaje.
VDRL
En la prueba de VDRL, el suero del paciente es inactivado a 56 C por 30
minutos, si se usa liquido cefalorraqudeo (LCR) slo se debe centrifugar Luego la
muestra se mezcla con un antgeno, que es una solucin buffer salina de
cardiolipina y lecitina adosadas a partculas de colesterol. Esta prueba se puede
realizar en lmina y ser observada al microscopio como un precipitado de partculas
finas (floculacin), o se puede realizar en un tubo de ensayo y ser leda
macroscpicamente. Los resultados de VDRL en lmina son comunicados como no
reactivos (no hay floculacin, dbilmente reactivos (ligera floculacin, y reactivos
floculacin definitiva. Todos los sueros reactivos se diluyen seriadamente, a cada
dilucin se le realiza la prueba de VDRL y se registra el titulo mximo obtenido. Rara
vez se tiene un paciente con ttulo elevado en las diluciones y con VDRL no reactivo
en la muestra sin diluir (fenmeno de prozona), si ocurriera es ms frecuente en la
sfilis secundaria. Se obtiene falsos negativos en ciertas condiciones, tales como
fenmeno de prozona, bajo ttulo de anticuerpos, presencia de sustancias
inhibidoras en el suero del paciente, VIH, la temperatura ambiental fuera del rango
de 23-29 C o error tcnico. Los falsos positivos pueden llegar a 10 a 30%, y han
sido reportados en casos de sndrome de anticuerpos antifosfolpidos, lupus
18
RPR
El RPR es una prueba diseada para detectar reagina en el suero de manera
rpida, no requiere inactivacin por calor La muestra se mezcla con una suspensin
que posee cardiolipina, lecitina y colesterol en partculas de carbn. Si la muestra es
positiva se observa pequeos grumos negros (floculacin). El resultado se reporta
como reactivo o no reactivo; todos aquellos reactivos deben ser diluidos
seriadamente para realizar la titulacin, y se reporta la dilucin ms alta que exhibe
reaccin. Los falsos negativos se pueden producir por errores tcnicos y los falsos
positivos son los mismos que para la prueba de VDRL. Se ha desarrollado variantes
de esta prueba en las que la muestra puede ser plasma sin que se pierda su
sensibilidad y especificidad.
Perfil TORCH
Es un grupo de exmenes de sangre para evaluar algunas infecciones
diferentes en un recin nacido. TORCH corresponde a las iniciales en ingls
de toxoplasmosis, rubola, citomegalovirus, herpes simple y VIH, pero tambin
puede incluir otras infecciones en los recin nacidos. Algunas veces, el examen se
deletrea TORCHeS; la "S" adicional representa la sfilis.
Incluye: Ac Anti-Citomegalovirus IgG, Ac Anti-Citomegalovirus IgM, Ac Anti-Rubeola
IgG, Ac Anti-Rubeola IgM, Ac Anti-Toxoplasma IgG, Ac Anti-Toxoplasma IgM, Ac AntiHerpes IgG, Ac Anti-Herpes IgM
19
Casos clnicos
Caso clnico 1
Hombre de 53 aos, casado, jardinero, padre con cirrosis heptica.
Alcoholismo 1 L de cerveza al da durante 20 aos. En 1994 se le realiz ciruga de
mano derecha por lesin traumtica. En el 2004 acude al banco de sangre para
realizar donacin. En la prueba de escrutinio se reporta anticuerpo a hepatitis C
(AntiHCV) positivo con densidad ptica del ensayo inmunoenzimtico (EIAOD) de
32.5 y 32.3 (tcnica de quimioluminiscencia). Prueba de RNA HCV (RTPCR)
cualitativa positiva. PHFs: ALT 70 y 64 (dos determinaciones). Bilirrubina total 1.10,
bilirrubina directa 1, bilirrubina indirecta 0.1, protenas totales 6.9, albmina 4,
globulina 3, relacin A/G 1.10. Prueba de RNA HCV cuantitativa > 500,000 UI//mL,
genotipo Ib. Biopsia heptica con hepatitis crnica con actividad moderada y
fibrosis moderada (Metavir A2 F2). Diagnstico de hepatitis C. TSH 1.99, T4 libre
1.20, Hb 13.2, leucocitos 6,800, plaquetas 203,000 y colesterol total 153. Inici
tratamiento con peginterfern alfa 2a 180 mcg se cada semana y ribavirina 1,000
mg/da (peso < 75 kg). La prueba de RNA HCV cualitativa negativa a las 12
semanas de tratamiento. Present prurito generalizado de predominio en zonas
expuestas y lceras orales al 4to. mes de tratamiento. Se consult al Departamento
de Dermatologa. A la exploracin fsica con lesiones eritematosas pruriginosas en
sitios expuestos al sol (cara, regin extensora de extremidades superiores y labios)
y ppulas eritematosas en piernas. Se establece el diagnstico de dermatosis
fotosensible, probable fotoalergia secundaria a uso de peginterfern. Recibi
tratamiento con cloroquina, hidrocortisona y clioquinol. Se disminuy un nivel la
dosis de peginterfern alfa 2a (135 megs/semana). Las lesiones cutneas remitieron
por completo en 15 das y se reinici la dosis completa del peginterfern alfa 2a.
Recibi tratamiento antiviral combinado con peginterfern alfa 2a y ribavirina
durante 48 semanas. La prueba de RNA HCV cualitativa al final del tratamiento fue
negativa.
Caso clnico 2
Hombre de 33 aos, chofer, escolaridad secundaria. En 1977 transfusin de
sangre. En 1997 laparotoma exploradora con apendicectoma y timpanoplastia.
Acudi a donar sangre. AntiHCV positivo. EIAOD: 4.05 y 4.07 (tcnica de
quimioluminiscencia). Prueba de RNA HCV cualitativa negativa. Prueba de
inraunoensayo recombinante (RIBA) negativa. Se concluye antiHCV falso positivo.
20
Conclusin
21
22
Bibliografa
Guzman U. Miguel A. Las pruebas serolgicas en el diagnostico de una
enfermedad infecciosa. Universidad Nacional de Colombia 1999. Recuperado
de: file:///C:/Users/Barrera/Downloads/19446-64006-1-PB.pdf
L. Ingraham John, A. Ingraham Catherine. Introduccin a la Microbiologa.
Recuperado de:
http://books.google.com.mx/books?id=dUEZSXaz2UC&pg=PA459&lpg=PA459&dq=pruebas+clinicas+con+antigeno
s+y+anticuerpos&source=bl&ots=TYCiN3IBh8&sig=fEOYGo7eE4X6R99XfQYqECJHu8&hl=en&sa=X&ei=c95AU7X2KsXX2AXUmYDQBA&ved=0C
CUQ6AEwAA#v=onepage&q&f=false
Me3ncontradores. Reaccion antgeno-anticuerpo (Martes 26 de Mayo del
2009). Recuperado de:
http://encuentratodo-m3.blogspot.mx/2009/05/reaccion-antigenoanticuerpo.html
http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/spanish/ency/article/001332.htm
http://www.biblioweb.tic.unam.mx/libros/microbios/Cap4/
http://es.scribd.com/doc/44555009/Antigeno-H-Flagelar-Salmonella
http://www.uco.es/grupos/inmunologiamolecular/inmunologia/tema17/etexto17.htm#2_Tcnicas_de_precipitacin
http://sisbib.unmsm.edu.pe/bvrevistas/dermatologia/v10_sup1/pruebas_lab.h
tm
http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/spanish/ency/article/000861.htm
23