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NOTA CIENTFICA

Germinao e Induo de Brotaes in vitro


Utilizando Diferentes Reguladores Vegetais em
Mangabeira (Hancornia speciosa)
Cssia da Silva Sousa1, Maria Josirene Souza Moreira2, Lucimrio Pereira Bastos3, Maria Anglica
Pereira de Carvalho Costa4, Moema Anglica Chaves da Rocha5, Daniela de Souza Hansen6
Introduo
A diversidade vegetal brasileira, abrange cerca de 60
mil espcies, incluindo entre elas 500 espcies de
frutferas nativas, na maioria pouco estudada [1]. Dentre
estas a mangabeira (Hancornia speciosa Gmez) surge
como mais uma alternativa para a diversificao da
produo de frutas bem como seus produtos, tendo a
vantagem de ser uma espcie endmica do Brasil.
A propagao da maioria das espcies nativas tem sido
dificultada devido recalcitrncia de suas sementes e,
diante deste fato, tcnicas de propagao in vitro tm
sido bastante utilizadas. A capacidade dos tecidos
vegetais cultivados in vitro em formar gemas, razes ou
embries somticos tm despertado a ateno de
pesquisadores, pela sua grande aplicao prtica e
importncia para o avano dos conhecimentos das reas
de Fisiologia, Bioqumica e Gentica de planta [2].
Vrias pesquisas utilizando meristemas, gemas ou
segmentos do caule vm sendo realizadas visando
propagao de fruteira [3], entretanto trabalhos
objetivando induzir a regenerao in vitro de brotaes
em espcies lenhosas, como a mangabeira, ainda so
poucos.
Objetivou-se verificar a germinao e induo in vitro
de brotaes adventcias em mangabeira utilizando
diferentes meios de cultivo.

Material e mtodos
O ensaio foi conduzido no Laboratrio de Cultura de
Tecidos do Centro de Cincias Agrrias, Biolgicas e
Ambientais da Universidade Federal do Recncavo da
Bahia - UFRB.
Sementes de mangabeira, aps desinfestao em
soluo de hipoclorito de sdio (2,5%) e gua (2:1),
durante 15 minutos, foram colocadas para germinarem
em meios: a) MS (Murashige & Skoog) [4] bsico com
adio de 1 mgL-1 de carvo ativado; b) MS sem a adio

de carvo ativado e c) Vermiculita umedecida com o


meio MS lquido, sem carvo ativado. Para todos os
meios o pH foi ajustado para 5,7+ 0,1.
O cultivo foi realizado em cmara de crescimento
temperatura de 27 2C, com fotoperodo de 16 horas e
intensidade luminosa de 1500 lux.
O delineamento experimental foi inteiramente
casualizado, com trs tratamentos e quatro repeties
com 25 sementes por parcela. Avaliou-se a percentagem
de germinao 90 dias aps o incio da germinao,
ndice de velocidade de germinao, comprimento das
plantas, matria seca da parte area e raiz.
Para a organognese, foram utilizados como explantes
segmentos internodais obtidos a partir de sementes
germinadas in vitro, introduzidos nos seguintes meios de
cultura: meio MS bsico, suplementado com 30 gL-1 de
sacarose, 8 gL-1 de gar, benilaminopurina-BAP nas
concentraes 0,0; 1,0; e 2,0 mg.L-1 e cido indolacticoAIA nas concentraes 0,0; 0,25; 0,50 mgL-1, onde
estudou-se os efeitos isolados e combinados, e pH
ajustado para 5,7+ 0,1. Estes segmentos foram
numerados de acordo com a proximidade em relao ao
pice, para que posteriormente se possa discriminar a
existncia de zonas com maior potencial organognico e
encubados sob as mesmas condies mencionadas
anteriormente.
Os dados obtidos foram analisados estatisticamente,
quanto a capacidade de regenerao de plantas do
material vegetal, com base no delineamento inteiramente
casualizado em esquema fatorial 3x3 com dez repeties
distribudas em dez frascos com 20 mL do meio de
cultura, contendo quatro explantes cada, totalizando 40
explantes.

Resultados e discusso
Analisando os diferentes meios de germinao in vitro,
verifica-se que no houve diferena significativa (Fig.1).
Resultados semelhantes foram encontrados por Pinheiro

________________
1. Graduanda do Curso de Engenharia Agronmica do Centro de Cincias Agrrias, Biolgicas e Ambientais da Universidade Federal do
Recncavo da Bahia, C. P. 082, CEP: 44380- 000. Cruz das Almas BA. E-mail: agroca2004@yahoo.com.br.
2. Mestranda do Centro de Cincias Agrrias, Biolgicas e Ambientais da Universidade Federal do Recncavo da Bahia, C.P. 082. CEP: 44380000. Cruz das Almas BA. jmoreira28@yahoo.com.br.
3. Graduando do Curso de Engenharia Agronmica do Centro de Cincias Agrrias, Biolgicas e Ambientais da Universidade Federal do
Recncavo da Bahia, C. P. 082, CEP: 44380- 000. Cruz das Almas BA. E-mail: agronero@yahoo.com.br.
4. Professora Adjunta do Centro de Cincias Agrrias, Biolgicas e Ambientais da Universidade Federal do Recncavo da Bahia, C. P. 082, CEP:
44380- 000. Cruz das Almas BA. mapcosta@ufba.br.
5. Doutoranda do Centro de Cincias Agrrias, Biolgicas e Ambientais da Universidade Federal do Recncavo da Bahia, C.P. 082. CEP: 44380000. Cruz das Almas BA. moemachaves@yahoo.com.br.
6. Engenheira Agrnoma, Mestre em Cincias Agrrias. Pesquisadora do Centro de Cincias Agrrias, Biolgicas e Ambientais da Universidade
Federal do Recncavo da Bahia, C. P. 082, CEP: 44380- 000. Cruz das Almas BA. hansen@ufba.br.
Apoio financeiro: CAPES, CNPq e FAPESB.

Revista Brasileira de Biocincias, Porto Alegre, v. 5, supl. 2, p. 276-278, jul. 2007

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et al. [5], que comparou a germinao in vitro de


sementes de mangabeira em meios MS liquido MS
slido, gua de coco e gua destilada.
Normalmente a porcentagem de germinao de
sementes de mangaba baixa, devido no apenas a
presena de inibidores na polpa com tambm as mesmas
serem recalcitrantes [6].
As taxas obtidas nos meios de cultura estudadas so
justificadas,
provavelmente
devido
a
maior
disponibilidade de macro e micronutrientes, bem como o
cultivo in vitro proporcionar a manuteno do teor de
umidade das sementes.
Quanto velocidade de germinao tambm no foi
verificada diferenas significativas, apesar das sementes
incubadas no meio MS lquido com vermiculita iniciarem
a germinao aos 15 dias do incio do experimento (Tab.
1), enquanto nos meios slidos o incio da germinao
ocorreu aos 30 dias. As plntulas oriundas do meio com
vermiculita apresentaram maior comprimento (15 cm)
quando comparado ao meio MS slido (10 cm)
independente do carvo ativado, e maior peso seco da
raiz (Fig. 2), aspecto este devido a grande porosidade
proporcionada pela vermiculita.
Para a organognese a combinao de 1 mgL-1 e 0,5
mgL-1 de AIA a que proporciona melhor resposta
organognica dos explantes de mangabeira, independente
da posio do segmento internodal. Um aspecto
interessante observado, que apesar de muitos explantes
formarem gemas, necessariamente nem todas as gemas
so convertidas em plantas (Tab. 2). Possivelmente as
clulas apresentam baixa competncia para responder a
ao dos hormnios, comprometendo a determinao das
mesmas. Contudo, pouco se conhece em relao aos
fatores envolvidos na aquisio da competncia para
organognese [7].
A falha de competncia de um tecido poderia refletir,
portanto, a falta de receptores para a classe hormonal que
ir induzir o processo organogentico. Outro fator
associado resposta organognica seria o prprio
metabolismo hormonal dos explantes, pois ele que ir
determinar, em ltima anlise, o balano hormonal
endgeno para induo da organognese [8]. Tanto a
aquisio de competncia quanto determinao so

reflexos da expresso diferencial de genes envolvidos


nos processos de desenvolvimento [9].

Agradecimentos
Ao Centro de Cincias Agrrias, Biolgicas e
Ambientais da UFRB;
Ao Centro Nacional de Desenvolvimento e Pesquisa
Cientfica - CNPq;
A Coordenao de Aperfeioamento de Pessoal de
Nvel Superior - CAPES;
A Fundao de Amparo Pesquisa do Estado da Bahia
FAPESB.

Referncias
[1]

[2]

[3]

[4]

[5]

[6]

[7]

[8]

[9]

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Revista Brasileira de Biocincias, Porto Alegre, v. 5, supl. 2, p. 276-278, jul. 2007

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Percentagem de germinao de mangabeira em diferentes
condis de cultivo

7,00

33%

M a t r ia s e c a ( m g )

6,00

34%
Vermiculita + MSL
MS slido

5,00
4,00
3,00

Matria seca da raiz

2,00

Matria seca parte area

1,00

MS slido + carvo ativado

0,00
Vermiculita +
MSL
33%

MS slido

MS slido +
carvo ativado

Meio de cultivo

Figura 1. Porcentagem de germinao em mangabeira sob


diferentes condies de cultivo.

Figura 2. Matria seca de parte area de plntulas de


mangabeira.

Tabela 1. Perodo de germinao das sementes de mangabeira em diferentes condies de cultivo.


Meios de cultivo
Vermiculita + MS lquido
MS slido
MS slido + carvo ativado

Incio da germinao (dias)


15 2
30 2
30 2

Trmino da germinao (dias)


30 2
68 2
68 2

Tabela 2: Influncia da posio dos segmentos internodais na resposta in vitro de mangabeira em relao ao nmero de calo formado,
desenvolvimento de plantas, desenvolvimento de necrose, intumescimento do explante e formao de gemas, incubados em
diferentes combinaes de Benzilaminopurina (BAP) e cido indolactico (AIA).
Variveis
Meio MS

Calo

Planta

Necrose

Intumescido

Gema

Interndio 1
Interndio 2
Interndio 3
Interndio 4

0 (10)
0 (10)
0 (10)
0 (10)

0 (10)
0 (10)
0 (10)
0 (10)

6 (10)
6 (10)
7 (10)
8(10)

4 (10)
4 (10)
3 (10)
3 (10)

4 (10)
3 (10)
3 (10)
2 (10)

MS + 1,0 mgL-1 BAP + 0,5 mgL-1 AIA

Calo

Planta

Necrose

Intumescido

Gema

Interndio 1
Interndio 2
Interndio 3
Interndio 4

0 (10)
0 (10)
0 (10)
0 (10)

0 (10)
1 (10)
0 (10)
0 (10)

9 (10)
7 (10)
10 (10)
9(10)

1 (10)
3 (10)
0 (10)
1 (10)

1 (10)
3 (10)
0 (10)
1 (10)

MS + 1,0 mgL-1 BAP + 0,25 mgL-1 AIA

Calo

Planta

Necrose

Intumescido

Gema

Interndio 1
Interndio 2
Interndio 3
Interndio 4

1 (10)
1 (10)
0 (10)
1 (10)

2 (10)
1 (10)
2 (10)
1 (10)

2 (10)
3 (10)
3 (10)
2(10)

6 (10)
5 (10)
5 (10)
6 (10)

3 (10)
1 (10)
3 (10)
3 (10)

MS + 2,0 mgL-1 BAP + 0,5 mgL-1 AIA

Calo

Planta

Necrose

Intumescido

Gema

Interndio 1
Interndio 2
Interndio 3
Interndio 4

1 (10)
1 (10)
1 (10)
1 (10)

0 (10)
1 (10)
0 (10)
0 (10)

5 (10)
6 (10)
6 (10)
6(10)

4 (10)
3 (10)
3 (10)
3 (10)

3 (10)
2 (10)
2 (10)
2 (10)

MS + 20 mgL-1 BAP + 0,25 mgL-1 AIA

Calo

Planta

Necrose

Intumescido

Gema

Interndio 1
Interndio 2
Interndio 3
Interndio 4

0 (10)
0 (10)
0 (10)
0 (10)

2 (10)
0 (10)
0 (10)
0 (10)

4 (10)
7 (10)
7 (10)
7(10)

4 (10)
1 (10)
1 (10)
1 (10)

1 (10)
0 (10)
0 (10)
0 (10)

Revista Brasileira de Biocincias, Porto Alegre, v. 5, supl. 2, p. 276-278, jul. 2007