UNIVERSIDAD POLITCNICA DEL CENTRO

Materia:
MICROBIOLOGIA APLICADA

Profesor:
DR. LUCIO AGUILAR GARCA

Producto:
REPORTE DE TRATAMIENTO DE MICROORGANISMO

Alumnos:
Cristell Alejandra Tapia Gmez/001096
Gabriela del Carmen Oliva Garcia/001331
Allan Gabriel Vargas Rivas/001343
Julin Andrs Priego Daz/001097

Programa Acadmico:
INGENERIA EN BIOTECNOLOGA
5 CUATRIMESTRE
ENERO- ABRIL

ndice
INTRODUCCIN...................................................................................3
OBJETIVO.............................................................................................4
JUSTIFICACIN....................................................................................4
METODO...............................................................................................5
RESULTADOS.......................................................................................7
CONCLUSIN.......................................................................................9
ANEXOS..............................................................................................10
REFERENCIAS...................................................................................13

INTRODUCCIN
Los microorganismos tienen una tendencia inherente a mutar en cultivos de
laboratorio, por lo que es muy importante el estudio de procedimientos para
mantenerlos viables y estables genticamente durante su almacenamiento. Se
han establecido varios mtodos de preservacin de cepas con este fin, la mayora
de los cuales llevan el metabolismo a niveles basales por retencin de nutrientes,
agua y oxgeno; por reduccin de la temperatura de conservacin, o por
combinacin de ambos. (Grzywacz, 2003)
La conservacin de hongos consiste en retardar, mediante alguna tcnica, el
proceso metablico del hongo pero conservando su patogenicidad. Mantener y
conservar un hongo es una tarea que demanda constante dedicacin as como de
vigilancia. Requiere conocer las caractersticas morfolgicas, fisiolgicas y
morfolgicas, as como sus requerimientos en cuanto a los mtodos de
preservacin.
La investigacin sobre microorganismos requiere conservar y almacenar el
material microbiano de inters puro y debidamente identificado, para garantizar la
idoneidad y reproducibilidad en la experimentacin, por esto es necesario contar
con mtodos de conservacin.
El fin de preservar un hongo es poder conservar su estructura sin modificacin
alguna. Con la capacidad de poder mantenerlo durante periodos prolongados,
adecuando distintos medios para proveerlo de sus ambiente necesario sin afectar
su aparato reproductor, con la capacidad de crecer al resembrarlo tiempo
despus.

OBJETIVO
Aplicar mtodos de conservacin para el microorganismo problema.

JUSTIFICACIN
Aprender tcnicas de conservacin en microorganismos.

METODO
Posterior a contar con el cultivo puro del hongo, identificado como perteneciente a
la familia de los Aspergillus, se procedi a realizar el siguiente tratamiento para su
conservacin.
El hongo fue sometido a una revisin de sus caractersticas morfolgicas
macroscpicas, considerndose color, textura y tamao de las colonias. Las
caractersticas microscpicas fueron evaluadas por microscopa de luz, utilizando
examen directo con azul de metileno, utilizando la tcnica de la cinta, y extraccin
directa del medio con un asa de platino. Se tomaron en consideracin todas las
caractersticas taxonmicas descritas en la literatura

de (Membrillera, 2000),

Clave determinativa de las especies del genero Aspergillus. (Anexos figura1.1)

Las siguientes tcnicas fueron las consideradas pertinentes despus de un previo
anlisis literario y en el cual se ha previsto como considerable la bibliografa de
(Howard F. Schwartz, 1981) , en la cual describe una serie de tcnicas efectivas y
de preservacin para no daar el aparato reproductor de los hongos.
1. Preservacin en Agua destilada estril
En un tubo de ensaye de 50ml se coloca 1 ml de agua destilada previamente
estril a una temperatura de 28, posteriormente, se extrae una muestra de cultivo
del hongo y se deja suspender en el agua. Posteriormente se le agregan 7ml y se
dej en observacin hasta resembrar en una caja de Petri. (Anexos figura 1.2)
2. Preservacin con aceite mineral
A una colonia cultivada en agar PDA, se le aade 1ml de aceite mineral, y se deja
reposar a una temperatura de 25, durante los tres das siguiente se observa el
cambio de coloracin del hongo, para proceder a resembrar en una caja de Petri.

3. Preservacin en medio con aceite mineral y agua destilada

Se preparar agar PDA en tubos de ensaye de 50ml en los cuales se siembra el
microorganismo, se deja crecer el hongo y se le aade 2ml de aceite mineral. Se
deja en espera de cambios para proceder a su resiembra.
Se aplica el mismo tratamiento con el agua destilada.

RESULTADOS
Posterior a realizar las tcnicas de preservacin, se tom una muestra para su
siembra en cajas de Petri con agar PDA.
2.1 Tabla de documentacin de pruebas de reactivacin 1, resultados.
PRESERVACION

REACTIVACIN

PERIODO DE
CRECIMIENTO

1.Agua destilada estril

Agar PDA
Sembrado

+48 hrs
por

desplazamiento
directo del lquido
2.Aceite mineral directo
a caja Petri

sobre el medio.
24 48 hrs
Agar PDA
Sembrado
por
desplazamiento
directo del aceite

3.Medio con Agua

destilada estril
4.Medio con Aceite
mineral

sobre el medio.
24 48 hrs
Agar PDA
Sembrado
por

estriado
Agar PDA
Sembrado
estriado

24 48 hrs
por

El resultado de la reactivacin en el agua destilada con el hongo suspendido no

fue satisfactorio, debido a que no creci el organismo del mismo modo que en las
dems tcnicas. Se descarta para prevenir retraso, sin dejar de considerar la
posibilidad de contaminacin por el mal tratamiento, o una cantidad indebida de
suspensin. En la repeticin, el hongo creci favorablemente (Anexos figura 1.3)
En las tcnicas 2,3 y 4, el crecimiento se concluye como satisfactorio. Al llevar al
microscopio las tres cuentan con el buen desarrollo del microorganismo, Hongo,
denominado Aspergillus. (Anexos figura 1.4 y figura 1.5)

CONCLUSIN
El mtodo de conservacin en agua destilada estril sigue acaparando un lugar de
preferencia, por ser este un mtodo simple, econmico y seguro, capaz de
garantizar la supervivencia de los cultivos fngicos por periodos prolongados, a la
vez que evita la contaminacin. Es un mtodo viable para mantener nuestro
hongo, sin embargo, la forma en que lo realizamos no permiti tomar las
estructuras del hongo que necesarias para su reproduccin posterior, por lo que
los resultados no fueron los esperados, pero repitiendo el mtodo con un
procedimiento diferente obtuvimos el resultado esperado. Los factores que
consideramos pudieron influir en los resultados negativos, al intentarlo por primera
vez, son: la temperatura del agua al momento de verter el agua destilada estril en
el medio y la forma en la que se conserv el agua.
Al comparar dos mtodos (agua destilada y aceite mineral) llegamos a la
conclusin que el mtodo de conservacin por aceite mineral pareci ser ms
viable a la hora de reactivar el hongo. Ya que creci de forma que pudimos
observar brotes de colonias en toda la caja, indicando contenido de esporas en el
aceite.
Podemos decir que si bien, cada uno tiene diferente tiempo de viabilidad, ventajas
y desventajas, los dos son efectivos para cumplir su objetivo de conservar el
hongo.

ANEXOS

Figura 1.1 Gnero Aspergillus a conservar

Figura1.2
Agua destilada con
estructuras reproductivas
del hongo.

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Figura1.3 Intento de reactivacin del hongo mediante agua destilada.

Figura 1.4 Segundo intento de reactivacin mediante agua

destilada.

11

Figura 1.5 Reactivacin del hongo con aceite

mineral extrado de una caja Petri.

Figura1.6 Reactivacin del hongo en aceite

mineral extrado de un tubo de ensaye.

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REFERENCIAS
Grzywacz, J. y. (2003). CONTROL MICROBIOLOGICO. INISAV.
Howard F. Schwartz, B. V. (1981). Tcnicas para el aislamiento, identificacin y
conservacin de hongos patgenos. CLAT series .
Membrillera, D. J. (2000). Clave determinativa de las especies del genero Aspergillus.
Espaa: Universidad de Murcia.

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