UNIVERSIDAD ANDRES BELLO

FACULTAD DE CIENCIAS BIOLGICAS

DEPARTAMENTO DE CIENCIAS BIOLGICAS

LABORATORIO DE BIOLOGA CELULAR BIO-131

GUA N 1:
INSTRUMENTACIN Y PREPARACIN DE SOLUCIONES

INTRODUCCIN AL TRABAJO DE LABORATORIO

El laboratorio no es un lugar peligroso, siempre y cuando se acte en l de manera
responsable y cuidadosa. Para esto, es importante tener en cuenta ciertas medidas de orden
que se aplican en todos los laboratorios y por sobre todo un buen uso del sentido comn. De
esta forma, es necesario recordar algunos principios bsicos generales:
1.

El mesn de trabajo debe estar siempre libre de objetos personales tales como
abrigos, carteras y libros, entre otros, que entorpezcan el trabajo y que, adems,
puedan daarse por el contacto con reactivos qumicos, agua o calor;

2. Los reactivos qumicos a utilizar deben ser manipulados con precaucin, de acuerdo
a sus caractersticas. Est estrictamente prohibido pipetear directamente con la boca
soluciones altamente alcalinas, cidos concentrados o material biolgico de riesgo.
Si la va de desecho de estas soluciones es el desage del laboratorio (previa
indicacin del profesor responsable del trabajo prctico), hacer correr abundante
agua de manera simultnea para reducir el dao que estas soluciones fuertes
pudieran ocasionar a las tuberas. Tener en cuenta que hay soluciones tales como el
H2SO4 que reaccionan violentamente con el agua, por lo tanto se debe proceder con
sumo cuidado;
3.

Si usted est manipulando sustancias inflamables, asegrese antes de destapar el

frasco que no existan llamas abiertas ni material incandescente en las proximidades
de su lugar de trabajo;

4. Si usted calienta una sustancia en un tubo de ensayo, no apunte la boca del tubo en
direccin de alguna persona. Una ebullicin violenta de la solucin podra quemar a
dicha persona;
5.

Cuando trabaje con sustancias txicas voltiles debe hacerlo bajo una campana de
extraccin. Recuerde que un gas o vapor nocivo no siempre es perceptible por el
olor;

6. Los materiales de desecho no solubles (papel filtro usado, fsforos, corchos

deteriorados, etc.) deben tirarse al basurero o recipiente destinado para esta funcin,
jams dentro del desage del laboratorio; y
7.

Al trmino de cada sesin experimental, el mesn de trabajo y sus alrededores

deben quedar limpios y secos. Todos los reactivos e implementos utilizados deben
ser guardados en sus sitios respectivos. Asegrese siempre que las llaves de gas y
agua estn correctamente cerradas.

Objetivo del trabajo Prctico:

El objetivo de este trabajo es el reconocimiento del material de laboratorio y la preparacin
de soluciones lquidas utilizando el material de vidrio y equipos.

MATERIAL DE LABORATORIO
I. Material volumtrico
Durante el trabajo de laboratorio, en muchas oportunidades es necesario medir con
exactitud volmenes de lquidos para la correcta ejecucin del paso experimental. Para ello,
existen diversos tipos de materiales volumtricos. Por lo tanto, es necesario conocer los
diferentes tipos de materiales y tener claro cul utilizar en cada ocasin.
Cabe sealar que la precisin de la medida con estos materiales puede verse alterada.
Considerando que la mayora de los materiales volumtricos que se usan en el laboratorio
estn hechos de vidrio, y teniendo en cuenta que este material puede dilatarse o contraerse
segn la temperatura a la que est expuesto, se ha establecido un estndar convencional de
20 C para material de laboratorio destinado a medir volmenes.
La graduacin de los utensilios considera dos tipos de posibilidades: un aforo para contener
y un aforo para entregar volmenes determinados.
El nivel de los lquidos se estima por el aforo, que se define como la tangente horizontal al
menisco inferior del lquido. Para realizar la medida, el nivel del lquido debe encontrarse
frente al ojo del observador en posicin vertical. Mientras ms estrecho sea el dimetro
donde se realiza el aforo, ste ser ms exacto.

FIGURA N1: Diagrama representativo de la estimacin de un aforo.

A continuacin se describen los elementos ms usados en la medicin de volmenes en el
laboratorio:
1.

Probetas: son cilindros verticales graduados, provistos de una base

hexagonal. Sus capacidades normalmente son de 25, 50, 100, 250, 1000 y
2000 ml. El aforo est previsto para entregar volmenes. Debido a que su
dimetro interior es amplio, las probetas sirven slo para mediciones
aproximadas de volmenes. La graduacin de una probeta est en relacin a
su capacidad, as la ms grande tiene una graduacin de 5 a 10 ml por cada
divisin, en cambio las ms pequeas pueden tener hasta 1/10 de ml.
Probeta de 100 ml

2. Matraces aforados: son botellas redondas de fondo plano, con cuello largo
y estrecho y estn confeccionados en vidrio no apto para resistir cambios de
temperatura. Los matraces aforados estn previstos para contener
volmenes con bastante exactitud, por lo que son usados para preparar
soluciones en que es importante conocer la concentracin exacta de ellas.
Estas soluciones pueden ser preparadas por dilucin de una cantidad
conocida o medida de lquido, agregando agua (u otro solvente) hasta
completar el volumen. Tambin los matraces aforados se emplean para
preparar soluciones de una concentracin muy exacta por disolucin de una
cantidad precisa de sustancia previamente pesada, completando finalmente
el volumen hasta el aforo con agua u otro solvente segn sea el caso. Hay
matraces aforados con capacidad para contener a 20C y con bastante
Matraz Aforado 500 ml
exactitud desde 25 a 2000 ml de lquido o solucin.
3. Pipetas: se emplean para medir y entregar con precisin volmenes
menores de lquidos y soluciones. Dado que las pipetas son tubos de
seccin estrecha, se logra una buena exactitud en la entrega de volmenes
por este tipo de material. La abertura del tubo en el extremo superior
(bucal) de la pipeta, es de borde muy parejo, ya que habitualmente se hace
succin con la boca y se obstruye hermticamente la salida del lquido con
ayuda de la yema del dedo ndice. El lquido succionado se mantiene
dentro de la pipeta, en tanto no se permita la entrada de aire. Quitando
parcialmente o totalmente el dedo de la abertura superior, se consigue el
vaciado paulatino o rpido del contenido de la pipeta. La succin de
lquidos corrosivos, txicos o de riesgo biolgico debe siempre realizarse
con la ayuda de peras de goma o jeringas adaptables a la boca de la pipeta
(llamadas propipetas) para evitar la posibilidad que estos materiales
lleguen a la boca del usuario. El extremo aguzado permite la entrega del
lquido gota a gota. Sin embargo, el orificio estrecho del extremo inferior
est pensado de manera que no entre aire con facilidad mientras se
transporta el lquido de un recipiente a otro. Existen pipetas de diferentes
capacidades: 0,1; 0,2; 0,5; 1, 2, 5, 10 y 25ml. Generalmente, estn
diferenciadas por un color en la graduacin. Ellas son capaces de entregar
volmenes totales o parciales.

Pipeta Graduada

Las pipetas aforadas se reconocen por presentar su parte central ms

dilatada. Estas pipetas estn diseadas para entregar un volumen bien
determinado, el cual est indicado en el cuerpo de ella. Este volumen
puede estar delimitado por uno o dos aforos. Si son dos las marcas, el
volumen indicado escurre cuando el menisco del lquido se mueve desde la
marca superior a la marca inferior. Si es una sola marca (en el tubo
superior), el volumen queda comprendido entre aquella marca y el extremo
inferior de la pipeta (pipeta aforada). Al trmino del vaciamiento deben
esperarse 15 segundos para que escurra todo el lquido que queda mojando
las paredes de la pipeta.
Pipeta Aforada

4. Buretas: pueden ser definidas como una pipeta graduada, permite la entrega
de volumenes y est dotada de un mecanismo regulable para vaciarla. En el
extremo inferior llevan intercaladas una llave de vidrio o plstico inerte
(tefln). Las graduaciones ms comunes de una bureta son 25 y 50 ml,
existiendo tambin microburetas de 1, 5 y 10 ml.

Bureta

5. Matraces Erlenmeyer: son usados comnmente para efectuar titulaciones,

reacciones y para calentar soluciones, ya que su forma cnica evita en gran
parte la evaporacin. Tambin poseen graduaciones, pero las medidas que
se realizan con ellas son slo aproximadas. Existen matraces Erlenmeyer de
10, 25, 50, 100, 250, 500, 1000 y 2000ml.

Matraz Erlenmeyer

6. Vasos de precipitados: se usan comnmente para preparar soluciones o

efectuar reacciones. Estos vasos poseen graduaciones de 5, 10, 50, 125, 250
y hasta 2000 ml; sin embargo, hay que tener en cuenta que esta
graduacin es slo aproximada y permite estimar volmenes, por lo tanto,
no son aptos para preparar soluciones en las cuales se desee un cierto grado
de exactitud.
Vaso de precipitados

II. Equipamiento bsico de laboratorio:

En la actualidad, el equipamiento de los laboratorios se ha ampliado de manera
considerable con la invencin de nuevas tecnologas. No obstante, a continuacin se
describirn instrumentos de uso general y bsico de un laboratorio comn:
Balanza de laboratorio: la unidad internacionalmente reconocida como
patrn de peso es el kilogramo (kg). Sin embargo, comnmente en el
laboratorio la unidad de peso ms usada es el gramo (g), as como el
miligramo (mg) y el microgramo (g) que son submltiplos del gramo. La
balanza es un instrumento que sirve para medir la masa de los cuerpos por el
peso, es decir, para determinar las veces que ellos contienen la unidad de
masa llamada gramo.
a) Balanza de precisin: se caracteriza por un sistema oscilante de
una barra o cruz apoyada sobre una columna. Actualmente, a este
tipo de balanza se le ha adicionado un sistema electrnico que
registra la pesada. La capacidad de carga de las balanzas de
precisin es generalmente hasta 500g y ms comnmente hasta
200g, con una exactitud de pesada al centsimo de gramo.
b) Balanza analtica: es un instrumento de alta precisin empleada
en la pesada de reactivos livianos (del orden de los miligramos).
A pesar de que las balanzas analticas pueden presentar un
variado tipo de diseos y aspectos exteriores, todas ellas se
construyen basadas en los mismos principios. La base es de gran
solidez y confiere estabilidad al instrumento evitando al mximo
la posibilidad de vibraciones. La columna es un tubo por el cual
se conduce el mando de arresto o bloqueo del sistema oscilante.
La cruz est hecha de una aleacin especial de aluminio u otro
metal estable que no permita deformaciones por el peso variable
que debe soportar.

Balanza de precisin

Balanza analtica

APLICACIN DE CALOR
Un recurso habitualmente usado en el laboratorio es la aplicacin de calor sobre muestras en
orden a acelerar reacciones qumicas, esterilizar, secar, calcinar, etc. Con este fin se
emplean materiales resistentes al calor tales como tubos de ensayo, matraces Erlenmeyer,
crisoles, vasos de precipitados, balones o matraces de fondo redondo. A menudo, la
principal fuente de calor utilizada en el laboratorio es el mechero Bunsen.
No obstante, tambin se pueden utilizar baos termorregulados para cuando la temperatura
de calentamiento que se desea aplicar no sobrepasa los 90 C. Los baos termorregulados
adems poseen la ventaja de aplicar el calor de forma pareja a toda la solucin. Los baos
en general funcionan con agua pero existen otros que emplean sustancias oleosas para
alcanzar temperaturas superiores al punto de ebullicin del agua.
El uso de resistencias elctricas en la generacin de calor es otro de los procedimientos
comnmente usados en el laboratorio. stos estn presentes en instrumentos tales como
hornos, autoclaves, mantas, baos secos, etc. La principal ventaja que presentan los baos
termorregulados y aquellos instrumentos que utilizan como fuente de calor resistencias
elctricas es que son cmodos de trabajar, poseen exactitud en la regulacin trmica y son
seguros en su manejo.

Mechero Bunsen

Bao termorregulado
APLICACIN DE FRO

En ciertas ocasiones durante el trabajo de laboratorio, es necesaria la aplicacin de fro

sobre ciertas muestras. Ello ayuda, por ejemplo, en la caracterizacin de sustancias puras
por su punto de fusin, en la regulacin de reacciones qumicas y procesos enzimticos,
solubilizacin o licuefaccin de gases, condensacin o retencin de vapores, cristalizacin y
precipitacin, estabilizacin de material biolgico y liofilizacin, entre otros.
Probablemente, en algunas sesiones de este curso prctico usted trabajar con material
biolgico (tejidos, estructuras celulares, etc.), los cuales debern ser mantenidos en hielo.
Esto tiene como objetivo la preservacin funcional de dichos materiales biolgicos. Hay que
tener en cuenta que a temperaturas ms elevadas (temperatura ambiente o mayor) una gran
variedad
de
funciones
biolgicas
se
deterioran
irreversiblemente.

PREPARACIN DE SOLUCIONES:
CLCULO DE CONCENTRACIONES
Soluciones acuosas
En una solucin acuosa se pueden distinguir dos componentes: el soluto y el solvente. El
solvente es el componente que se encuentra en mayor proporcin y el soluto en menor
proporcin. Para identificar una solucin no basta con indicar sus componentes, sino
tambin es fundamental conocer la proporcin de stos en la solucin:
SOLUTO + SOLVENTE = SOLUCIN
Expresiones de concentracin
Concentraciones basadas en el volumen o concentraciones basadas en la cantidad de soluto
disuelto por unidad de volumen, son las ms ampliamente utilizadas en el trabajo de
laboratorio. Las expresiones ms usadas son:
a) Molaridad (M): Se define como el nmero de moles de soluto por litro de solucin.
Para calcular M (molaridad) se necesita conocer el peso del soluto y su peso molecular
(PM):
Moles de soluto
Molaridad (M) =
Volumen en Litro de solucin
Una solucin 1M: contiene 1 mol de soluto por litro de solucin; contiene el nmero de
Avogadro* de molculas de soluto por litro de solucin.
*Nmero de Avogadro: nmero de molculas por gramo-mol; nmero de tomos por
gramo- tomo; nmero de iones por gramo-in; 6,023 x 1023.
Peso del soluto (gramos)
n moles =
Peso molecular (gramos/mol)
Si se reemplaza el nmero de moles en la ecuacin inicial, la Molaridad queda expresada
como:
Peso del soluto (gramos)
Molaridad (M) =
Peso molecular (gramos/mol) x Volumen (L)

Una vez preparada una solucin, sta se puede mantener como solucin stock y a partir de
ella se pueden preparar diluciones necesarias, debido a que el nmero de moles no se altera
al diluir una muestra, por lo tanto se establece que:
Ci

Vi = Cf Vf

Donde la concentracin inicial (Ci) debe tener la misma unidad que la concentracin final
(Cf) y el volumen inicial (Vi) debe tener la misma unidad que el volumen final (Vf).

Soluciones ms diluidas en general se expresan en trminos de milimolaridad (mM),

micromolaridad (M) u otras, donde:
1 mmol = 10-3 moles
1 mol = 10-6 moles
1 nmol = 0,001 mol = 10-9 moles
1 pmol = 0,001 nmol = 10-12 moles
De esta manera:
1 mM =10-3 M = 1 mmol / litro = 1 mol / ml
1 M = 10-6 M= 1 mol / litro = 1 nmol / ml
1 nM = 10-9 M = 1 nmol / litro = 1 pmol / ml

Tabla 1: Tabla de conversiones de masa.

Tm

Equivalente en
kilogramos
1000 kg

Equivalente en
gramos
1000000 g

kilogramo

kg

1 kg

1000 g

hectogramo

hg

0.1 kg

100 g

decagramo

dag

0.01 kg

10 g

gramo

0.001 kg

1g

decigramo

dg

0.0001 kg

0.1 g

centigramo

cg

0.00001 kg

0.01 g

miligramo

mg

0.000001 kg

0.001 g

Nombre

Abreviatura

Tonelada

b) Molalidad: Se define como el nmero de moles de soluto por 1000 gramos de solvente.
Esta expresin de concentracin es usada en ciertos clculos fsico-qumicos,
principalmente. La concentracin expresada de esta manera se hace independiente de la
temperatura. Dado que la temperatura afecta el volumen de una solucin, la
concentracin de sta se ver afectada cuando la expresin de concentracin usada est
basada en el volumen. Para soluciones diluidas, la situacin es similar a lo descrito
anteriormente en el caso de la expresin de molaridad.
Moles de soluto
Molalidad (m) =
Kilogramo de solvente

c) Normalidad (N): Se define como el nmero de equivalente de soluto por litro de

solucin. Para calcular N se necesita conocer el peso del soluto disuelto y su peso
equivalente (PE).
Peso soluto (gramos)
Neq =
PE
PM
n*
Por lo tanto N = M * n*
Donde n*es:
Nmero de H+ o OH- reemplazables por la molcula para cidos o bases
respectivamente; o
Nmero de electrones perdidos o ganados por molcula para agentes oxidantes y
reductores.

d) % peso/volumen (% p/v): Se refiere al peso en gramos de un soluto disuelto en 100

mililitros de solucin. Depende slo del peso de la sustancia y del volumen en que est
disuelta. Para soluciones diluidas se puede expresar como:
% p/v =

Peso del soluto (gramos)

Volumen de la solucin (ml)

100

e) % peso/peso (% p/p): Se refiere al peso en gramos de un soluto disuelto en 100 gramos

de solucin. La concentracin de la mayora de los cidos comerciales vienen dadas en
%p/p.
% p/p =

Peso del soluto (gramos)

Peso de la solucin (gramos)

100

PROBLEMAS
1. Cuntos gramos de NaOH slido se requieren para preparar 500ml de una solucin
0,04M?
2. Exprese la concentracin de la solucin preparada anteriormente en: N y % p/v.
3. Cuntos mililitros (ml) de H2SO4 5M se requieren para preparar 1500ml de una
solucin de H2SO4 0,002M y otra de 0,002N?
4.

Cuntos gramos de Na2CO3 se requieren para preparar 400ml de una disolucin

0,8M?

5.

Determine la Molaridad de 500 ml de una disolucin que contiene 24g de CuSO4.

6. Determine la molalidad de una disolucin formada disolviendo 3,5g de NaCl en 120 ml

de agua.
7. Usted dispone de varias soluciones concentradas: NaCl 3M, KCl 1M, MgCl2 1M,
CaCl2 0,1M. A partir de stas, indique cuntos ml de cada una de ellas son necesarios
para preparar 1 litro de soluciones a las siguientes concentraciones: NaCl 0,137mM,
KCl 2,68mM, MgCl2 0,5mM, y CaCl2 0,9mM.
8. Calcule la cantidad de soluto
indican:
a) NaOH
2M,
b) LiCl
0,5M,
c) CH3-COOH 0,07M,
d) NaCl
25mM,
e) CaCl2
0,2M,

que se necesita para preparar las soluciones que se

1000ml
500ml
10 litros
100ml
10ml

9. Qu cantidad de moles de glucosa existen en los siguientes volmenes de una

solucin 0,012M?
a) 150 ml
b) 1 ml
c) 104 ml
d) 100 ml
10. Si usted disuelve 170mg de sacarosa en cada uno de los siguientes volmenes, calcule
la molaridad que obtendra en cada caso:
a) 700 l
b) 104 l
c) 2 x 103 l
d) 3 x 105 l
e) 17 ml
(Para determinar los pesos moleculares utilice la tabla peridica que se encuentra al final)

PARTE PRCTICA

Actividad N 1: Reconocimiento de material

Usted dispondr de material de vidrio (pipetas, tubos de ensayo, matraces, etc.) que usar
durante su trabajo prctico. Cudelo y evite golpearlo. Su profesor le mostrar cada
material y le describir sus caractersticas. Adems, usted recibir instrucciones de
cmo trabajar con dicho material.
Actividad N 2: Preparacin de soluciones
a) Preparacin de una solucin de NaCl 0,5M. Pese la cantidad necesaria y transfirala a un
vaso de precipitados y agregue agua destilada. Con la ayuda de una bagueta (barra de
vidrio) acelere la disolucin del NaCl en el agua. Enrase la solucin a su volumen final en
un matraz aforado de 100 ml.
b) A partir de la solucin antes preparada usted deber confeccionar tres diluciones de tal
manera que queden a 1,5% p/v, 1% p/v y 0,15M, respectivamente. Vace la solucin
concentrada en un vaso de precipitados limpio y seco. Tome las alcuotas respectivas con
una pipeta volumtrica y vace en matraces aforados de 100 ml cada uno. Complete el
volumen con agua hasta el aforo.

BIBLIOGRAFA
Qumica. 9a. ed. Chang, Raymond; 2007.
Qumica general. 8a. ed. Petrucci, Ralph H; 2003.

Materiales de laboratorio. Instrumentacin y preparacin de soluciones

Materiales por grupo (~3 alumnos por grupo)
4 Matraces de aforo 100 ml.
1 esptula metlica.
1 embudo.
1 matraz Erlenmeyer 250 ml.
2 vasos de precipitados de 100 ml.
1 vaso de precipitados de 50 ml.
1 piceta.
1 pipeta graduada de 1, 5 y 10 ml.
1 pipeta aforada d2 2 ml.
1 probeta de 100 ml.
1 propipeta de 2ml y 10 ml.
1 marcador.
1 bagueta de vidrio.

Material para el grupo curso.

2 balanzas.
NaCl.

Tabla 2: Tabla de conversiones universal para medidas.

Tabla 3: Tabla Peridica de los Elementos.