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ANTIBIOGRAMA

Ana Lvia Reis Albino, Fabrcia Aguiar e Kamila de Souza (G2)


Centro Federal de Educao Tecnolgica de Minas Gerais
Av. Amazonas 5253 - Nova Sua Belo Horizonte MG Brasil CEP:
30.421-169

1. Introduo
A penicilina, descoberta pelo ingls Alexander Fleming em 1927, no foi totalmente reconhecida como
substancia til at a Segunda Guerra Mundial. A guerra criou a necessidade urgente de grande quantidade
de uma droga que pudesse ser usada para tratar ou prevenir infeces em soldados feridos e os
pesquisadores trabalharam para desenvolver a penicilina em uma droga economicamente vivel. A
transformao das observaes laboratoriais de Fleming em um processo para produo em larga escala
ocorreu quando os pesquisadores descobriram como aumentar a produo de penicilina por milmetro de
meio de cultura para 1000 vezes. Assim, em 1941 no tinha antibiticos, mas 10 anos mais tarde, a venda
liquida desse medicamento no mundo todo era de 344 milhes de dlares por ano. Eles tinham
revolucionado a prtica da medicina.
Existem muitas penicilinas diferentes, mas todas tem uma estrutura central denominada cido 6aminopenicilanico. As diferenas entre as vrias penicilinas devem-se as diferenas nas cadeias laterais.
As penicilinas que so produzidas por microrganismos so chamadas penicilinas naturais. Esses
antibiticos so produzidos por certas espcies de fungos do gnero Penicillium.
Ainda outros antibiticos so produzidos por fungos, particularmente espcies de Aspergillus e
Cephalosporium Alguns antibiticos so produzidos por bactrias, como os membros do gnero
Streptomyces, que produzem um grande nmero de antibiticos teis. Especies de Bacillus,
Micromonospora, Nocardia e Micropolyspora tambm podem produzir antibiticos uteis. Os cientistas
esto pesquisando novos antibiticos produzidos por microrganismos aquticos, com por exemplo
cianobactrias.
Os antibiticos atuam sobre os microrganismos de diversas maneiras. Os principais pontos de ao
incluem:
-Inibio da sntese do peptideoglicano da parede celular bacteriana. (penicilina)
-Leso da membrana citoplasmtica.
-Interferncia na sntese de cido nucleico e protenas.
A toxidade seletiva dos agentes quimioterpicos baseia-se nas diferenas entre a estrutura e a composio
qumica das clulas procariticas e eucariticas. Algumas espcies de bactrias que no apresentam
parede celular no podem ser inibidas pela penicilina. Por exemplo, a pneumonia atpica primria.
Algumas bactrias normalmente so resistentes a determinados antibiticos enquanto outras so sensveis.
Entretanto, mesmo nas sensveis, podem surgir clulas mutantes que no so mais exibidas pelo
antibitico. Existem vrias mecanismos que podem explicar essa resistncia:
-A bactria pode ser capaz de produzir quantidades suficientes de uma enzima que destri ou modifica a
estrutura do antibitico. Como por exemplo, a penicilinase para a penicilina.
- Antibiticos podem ser incapazes de penetrar na superfcie das clulas bacterianas. Dessa forma o
antibitico no pode atuar no stio susceptvel dentro da clula, como os ribossomos.
- A bactria pode possuir uma via bioqumica alternativa que desvia a reao inibida pelo antibitico.
- A bactria pode possuir tipos de enzimas, ribossomos ou componentes que no so afetados pelo
medicamento.
Como os antibiticos tornaram-se amplamente utilizados, a resistncia tornou-se um problema, j que os
microrganismos susceptveis foram eliminados e os nmeros de resistentes aumentaram.
O aparecimento de uma bactria resistente muitas vezes causado pela mutao de um nico gene. Mas
esse gene de resistncia pode ser transmitido por meio da conjugao.

2. Objetivo

Avaliar o perfil de suscetibilidade de E. coli e S. aureus a drogas antimicrobianas e detectar a


presena de mutantes resistentes aos antimicrobianos utilizados.

3. Materiais Necessrios;
3.1 Reagentes
Placas de gar Mueller-Hinton.
3.2 Materiais
Culturas de E. coli e S. aureus em caldo nutriente, previamente incubadas a 37C
por 24 horas, disco de antimicrobianos, swabs estreis, pina.

4. Ficha Informativa de Reagentes


Preenchimento da Ficha Informativa de Reagentes
(Tabela 1)

4.1

Tabela 1 Ficha Informativa de Reagentes


Nome do
meio de
cultura/
reagentes
Agar MuellerHinton

Constituintes

Frmula
Qumica /
Natureza

Descrio
Fsicoqumica

. Infuso de Bife:
300g/L

Carboidrato,
Fibras, sais,
minerais,
celulose;
Protena e
fonte de N.

pH:7.3 0.2

Casena Acida
Hidrolisada:
17,50g/L

25C

Riscos
sade /
Impacto
Ambiental
O gar no gera
nenhum risco a
sade.

Manuseio

Estocagem

Referncias
bibliogrficas

Deve-se
retirar o p
com uma
esptula
esterilizada
.

Armazenar o p
a temperatura
ambiente
(abaixo de
30C) e o meio
preparado de 28C.

Rtulo do gar
MuellerHinton

Amido: 1,50g/L
Agar: 17,00g/L

4.2 Planejamento dos gastos de solues e meios de


cultura e clculos para o preparo dos mesmos (Tabela
2)
Tabela 2 Planejamento de gasto e de preparo de solues
Meios de
cultura e
solues
gar
MuellerHinton

Quantidade /
grupo*

Quantidade /
Sub-turma

Total / Turma*

1,9g

3,8g

2,85g

Massa ou
Vol. Final
de
reagente
preparado
1,9g e
25mL

Massa ou Vol.
Final de reagente
gasto

Custo do reagente
(Fornecedor )

Custo da
prtica

1,9g e 25mL

R$ 182,00 / 500g

R$1,38

CLCULOS:
38 g de Mueller-Hintona ------ 1000 mL de H2O
182,00
X ---------- 25 mL

500 g de Mueller-Hinton ---- R$


3,8g --------- Y

X = 0,95g

Y = R$ 1,38

5. Execuo da atividade principal


5.1 Procedimento
(ANEXO)
5.2 Resultados e Discusso
Foi testada a eficincia dos antibiticos Penicilina G e Clorafeniacol para bactrias da espcie
Staphylococcus aureus. Os resultados medidos para os dimetros dos halos de inibio foram organizados
na tabela abaixo:
Antibacterianos
Penicilina G 10 UI (PEN)
Clorafenicol 30 g
Tabela de resultados

Dimetro observado
30 mm
25mm

Esses resultados foram comparados com os dados da tabela padro de suscetibilidade do Staphylococcus
aos antibiticos.
Antibacterianos
Penicilina G 10 UI (PEN)
Clorafenicol 30 g

Resistente
28
12

Intermedirio
13-17

Sensvel
29
18

A partir desses dados, foi possvel concluir que a bactria sensvel aos dois agentes. O Staphylococcus
aureus est includo no espectro til do Cloranfenicol e da Penicilina G, esta ltima desde que no seja
produtor de penicilinase. [1,2,3]
O clorafenicol age inibindo a sntese proteica em bactrias. Ele se liga reversivelmente subunidade 50S
dos ribossomas 70S bacterianos, na cavidade da peptidiltransferase, graas interao dos tomos de
oxignio do grupo p-nitro com os nucletidos da cavidade, impedindo a reunio dos aminocidos na
cadeia de protenas. de destacar que s o ismero D (-) treo tem poder antimicrobiano. Assim, o
cloranfenicol na forma levgira o composto ativo. [4,5]
J os antibiticos -lactmicos, como a penicilina, afetam a sntese dos componentes do peptideoclicano
de parede celular bacteriana. Sem um cinturo de peptideoglicano rgido em volta, a clula geralmente
morrer por absoro de gua, aumento e consequente rompimento. [5]
Outro mecanismo de ao das penicilinas baseia-se no fato de que a parede celular das bactrias contm
enzimas que podem quebrar o peptideoglicano (para permitir o crescimento). Essas enzimas degradadoras
so controladas por alguns inibidores naturais. Em algumas bactrias, a presena de penicilina promove a
perda desses inibidores, permitindo a quebra do peptideoglicano. Clulas susceptveis a penicilina podem
ser protegidas da destruio se seus meios de cultura tiverem uma alta presso osmtica que as impea de
absorver gua e estourar. [5]

5.3 Caracterizaes dos resduos e apresentaes de propostas para


minimizar, reutilizar e/ou tratar o descarte dos resduos gerados.
Ao final da prtica, os resduos resultantes foram os meios de cultura com colnias de
bactrias nas placas de Petri e os resduos descartados dos tubos de ensaio. preciso
proporcionar a cada resduo um encaminhamento seguro, visando preservao da sade
pblica e do meio ambiente. Assim, cada uma dessas vidrarias precisam ser autoclavadas para
eliminar as colnias antes de serem lavadas com gua e sabo.

5.4 Concluso.

6. Referncias
1- PELCZAR, M. Jr.; CHAN, E. C. S., KRIEG, N. R.; Microbiologia: conceitos e
aplicaes, v.1, 2ed./ Michael J. Pelczar Jr. E. C. S. Chan, Noel R. Krieg; traduo Sueli
Fumie Yamada, Tania Ueda Nakamura, Benedito Prado Dias Filho; reviso tcnica
Celso Vataru Nakamura. So Paulo: Pearson Makron Books, 1997.

2- http://pt.wikipedia.org/
3- http://www.bibliomed.com.br/book/showdoc.cfm?
bookid=68&bookcatid=32&bookchptrid=2092
4 -http://www4.anvisa.gov.br/base/visadoc/BM/BM%5B25510-1-0%5D.PDF
5- http://www.ff.up.pt/toxicologia/monografias/ano0708/g7_cloranfenicol/index.html

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