CRECIMIENTO DE MICROORGANISMOS EN UN CULTIVO BATCH

Alejandra Pedraza1, Santiago Tafur2, Alejandro Silva3

Facultad Ingeniera qumica/ Universidad de Amrica/ Bogot-Colombia
Aleja_01.16@hotmail.com1 /Santa_log@hotmail.com2/ davlesius@gmail.com3

La fermentacin de etanol se hace a partir de levadura liofilizada en un medio anaerbico; en el laboratorio se

utilizaron tres probetas con la misma cantidad de sustrato (harina y glucosa) y diferente cantidad de agua e inculo
(levadura y solucin fermentadora). Las condiciones para el proceso fueron: temperatura de 30C, pH de 4.5 y
presin atmosfrica; evidenciando un mayor crecimiento respecto al tiempo en las probetas con menor cantidad de
agua y mayor cantidad de inculo, observando un mayor crecimiento de nutrientes en soluciones menos diluidas.
PALABRAS CLAVES: Crecimiento, fermentacin, inculo, levadura, sustrato.
The ethanol fermentation is made from lyophilized yeast in an anaerobic environment; in the laboratory were used
three tests tubes with the same amount of substratum (flour and glucose) and different amount of water and
inoculum (yeast and fermenter solution). The conditions for the process were: 30C, pH 4.5 and atmospheric
pressure; showing a bigger growing rate in the tests tubes with less water and more inoculum, noticing higher
growth of nutrients in less diluted solution.
KEY WORDS: Fermentation, Growth, Inoculum, Substratum, Yeast.

1. INTRODUCCIN
En general, la fermentacin puede describirse como
cualquier proceso metablico que libere energa a
partir de un azcar u otra molcula orgnica, no
necesite la presencia de oxigeno ni una cadena
transportadora de electrones y utilice una molcula
orgnica como aceptor final de electrones. 1
Industrialmente, se considera importante el estudio de
la fermentacin alcohlica para la obtencin de
alcohol etlico y su posterior uso en cerveceras,
destileras, panadera y vinatera entre otros.
Dicha fermentacin se produce por la transformacin
de los azucares del mosto en etanol con dixido de
carbono (CO2) utilizando levaduras como fuente de
microorganismos,
comnmente
usando
la
Saccharomyces Cerevisiae la cual crece en hbitats
ricos en azucares como fruta, flores y corteza de
rbol.

1 Tortora, Funke, Case. (2007). Introduccin a la

microbiologa. Buenos Aires, Argentina: Panamericana.

Experimentalmente se estudia las condiciones

ptimas para el crecimiento de microorganismos
comparando el aumento de la biomasa al variar los
niveles de agua y cantidad de inculo en tres
diferentes probetas a una temperatura y fuente de
carbono constante.
2. MATERIALES Y MTODOS
Equipos: bao termostatado, balanza analtica,
agitador orbital; Materiales: termostato, 4 vasos
precipitados de 250 mL, 1 probeta de 250 mL, 1
Erlenmeyer de 250 mL, 1 pipeta graduada de 10 mL,
1 esptula, 1 agitador de vidrio; Reactivos: 25g de
Levadura liofilizada Saccharomyces Cerevisiae, 20g
de azcar, sulfato de amonio, fosfato de potasio,
harina de trigo y solucin HCl.
En un Erlenmeyer se mezcl la solucin
fermentadora con la levadura y se us un agitador
Shaker.
En tres vasos precipitados se adicionaron iguales de
cantidades de harina y glucosa (25g y 3g

respectivamente) y diferente cantidad de agua (22,5

mL en el vaso 1, 15 mL en el vaso 2, y sin agua en el
vaso 3).
Pasados 40 minutos en el agitador, se agreg 7,5mL
al vaso 1, 15mL al vaso 2 y 30mL al vaso 3, de
inculo.
Se transvas a tres probetas y se pesan cada una.
Posteriormente se ponen a bao Mara a 30C y se
midi el crecimiento de la biomasa en intervalos de 2
minutos.

2) clculos
Probeta 2:

Peso finalPeso inicial=

155,61 g155,54 g=0,07 g
Probeta 3:

Peso finalPeso inicial=

3. RESULTADOS

133,2 g132,88 g=0,32 g

1) Datos
Tabla 1. Cantidades iniciales
PROBETA 1
PROBETA 2
PROBETA 3

------155,54g
132,88g

Tabla 2. Variacin del volumen de la biomasa en

funcin del tiempo
TIEMPO
(min)
0
2
4
6
8
10
12
14
16
18
20

PROBETA
1(ml)
40
45
49
49
49
49
49
50
50
52
56

Tabla 3. Cantidades finales

PROBETA 1
PROBETA 2
PROBETA 3

PROBETA
2 (ml)
43,9
44,5
45,1
46,5
48,0
50,0
52,5
54,5
58,5
63
67

PROBETA
3 (ml)
43,2
45,0
48,5
55,0
62,0
68,0
76,0
84,0
91,0
98,0
110,0

Figura1. Variacin de la biomasa en funcin del

tiempo.

4. DISCUSIN

El crecimiento de la biomasa pasa por cuatro fases

principalmente, una primera fase de adaptacin
donde los microorganismos adaptan su metabolismo
a las nuevas condiciones, es decir, un ambiente rico
en nutrientes y unas condiciones predeterminadas
------- para su ptimo desarrollo que en nuestro caso fue un
155,61g pH cido, presin atmosfrica y una temperatura de
133,2g 30 C, por tal motivo en los primeros minutos se
demora en crecer la biomasa en comparacin del
resto del tiempo vase el caso de la probeta 3.
Superada esta etapa, pasan a una fase exponencial
donde los microorganismos consumen los nutrientes
al mximo por lo tanto la velocidad de crecimiento

de la biomasa incrementa y el tiempo de generacin

de esta disminuye hasta llegar a una tapa estacionaria
donde se agotan lo nutrientes de los microorganismo
y una fase posterior de muerte. En el desarrollo del
laboratorio se evidenciaron las dos primeras fases
pues no alcanzaron a llegar a una fase estacionaria y
mucho menos de muerte puesto que el cultivo segua
creciendo a medida que pasaba el tiempo. En la
probeta 1 se produjo una etapa de adaptacin ms
lenta que en las otras dos probetas (observndose una
considerable diferencia en la probeta 3), por eso hubo
un cambi de volumen ms significativo
comparndolo con los otros cambios puesto que
haba menos cantidad de inculo y unos nutrientes
ms diluidos e hizo ms difcil la adaptacin de los
microorganismo en el medio. Durante la fase
exponencial, la probeta 3 desarrollo ms cantidad de
biomasa principalmente por lo mismo, al no haber
diluido la concentracin de los nutrientes y haber
agregado
ms
cantidad
de
inculo,
los
microorganismo se demoraron menos tiempo en la
adaptacin y tenan un ambiente rico en nutrientes y
ms an, haba ms de ellos para el desarrollo de la
biomasa.
A nivel industrial es conveniente reducir la fase de
adaptacin tanto como sea posible, no solo para
evitar la prdida de tiempo sino tambin porque se
consumen nutrientes para mantener el cultivo viable
en dicho perodo previo al crecimiento o desarrollo
de la biomasa
5. CONCLUSIONES

Se realiz el montaje para la preparacin de

una fermentacin de etanol a partir de la
Saccharomyces cerevisiae mejor conocida

como levadura comercial, iniciando el

inculo de fermentacin urea, fosfato de
sodio y glucosa como activacin de la
levadura y harina con glucosa como
nutrientes durante el desarrollo de la
biomasa. En ste, se determin que es
importante el conocimiento y control de las
condiciones de crecimiento de los
microorganismos (Temperatura, presin y
pH del medio) para que el proceso se lleve a
cabo con el mximo rendimiento posible,
comprobando que los 30c, presin
atmosfrica y un pH de 4.5 son los
adecuados para el desarrollo de esta
fermentacin con dicha levadura.
Se observ el desarrollo de un
microorganismo a travs del incremento de
la biomasa. La cantidad de nutrientes es
proporcional al crecimiento de los
microorganismos ya que tanto en la etapa
exponencial de desarrollo se consumen al
mximo; as mismo la dilucin de stos en el
medio es inverso a dicha evolucin.
Se determin el comportamiento de la
concentracin de la biomasa en funcin del
tiempo dando una curva exponencial durante
la fermentacin para la produccin de
etanol.

6. BIBLIOGRAFIA.
Tortora, Funke, Case. (2007). Introduccin a la
microbiologa. Buenos Aires, Argentina:
Panamericana.
Gua de prctica de laboratorio. Crecimiento de
microorganismo en un cultivo Batch.